CN110521637B - 一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，包括以下步骤：(1)亲鱼选择与培育：筛选出卵形鲳鲹亲鱼，利用电子标记对亲鱼进行标记，并进行营养强化；(2)亲鱼催产及外部标记：亲鱼性腺成熟后，使用催产剂对亲鱼进行人工催产，利用外部标记对亲鱼进行个体辨别，记录对应电子标记编号；(3)亲鱼观察与挑选：注射催产剂后观察亲鱼交配行为，根据亲鱼交配行为确定一对配对亲鱼，记录配对亲鱼个体的电子标记编号和对应的外部标记，并将配对亲鱼选出单独培育待产；(4)受精卵获得与育苗：待亲鱼产卵后收集受精卵，进行苗种培育，获得卵形鲳鲹全同胞家系。本发明方法可有效解决卵形鲳鲹亲鱼雌雄难辨，无法有效开展家系选育的不足。
Description
技术领域
本发明涉及卵形鲳鲹育种技术领域，具体地涉及一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法。
背景技术
家系选育是水产动物遗传选育是培育具有优良生长性状的的主要手段之一，国际上运用大规模家系选育技术对水产养殖动物进行遗传改良，取得了显著进展。挪威利用大规模家系选育技术对大西洋鲑进行遗传改良,成功培育出优质大西洋鲑品系，有效避免了在养殖过程中经济性状的衰退现象,经济性状也得到不断改进。此外，运用大规模家系选育技术开展了印度鲤鱼、罗非鱼、虹鳟的选育均取得了较好的选育结果。
卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是我国南方海水池塘养殖和网箱养殖主要品种，具有较高的养殖经济效益。然而，从外形上无法对卵形鲳鲹雌雄进行有效判别，且即使在繁殖期无法进行人工受精，难以有效地开展卵形鲳鲹家系选育。骆剑等发明专利“卵形鲳鲹家系亲子鉴定的方法”(专利号：ZL201510128615.7)公布了采用亲本进行混合繁育后，利用微卫星标记对卵形鲳鲹进行亲子鉴定以确定卵形鲳鲹家系，亲子鉴定准确率能够达到90％以上。尽管利用分子标记方法可确定卵形鲳鲹家系，但因卵形鲳鲹子代苗种量大，开展大量子代的家系鉴定成本较高；再加上利用分子标记方法进行卵形鲳鲹亲子鉴定只能通过获得的子代进行反推亲本，准确性难以有效把握。因此，如何构建卵形鲳鲹全同胞家系成为了卵形鲳鲹家系选育的难点。
发明内容
本发明目的在于提供一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，解决现有技术中卵形鲳鲹雌雄难辩，家系鉴定准确性不足的技术问题。
解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择与培育：筛选出卵形鲳鲹亲鱼，利用电子标记对亲鱼进行标记，并进行营养强化；
(2)亲鱼催产及外部标记：亲鱼性腺成熟后，使用催产剂对亲鱼进行人工催产，利用外部标记对亲鱼进行个体辨别，记录对应电子标记编号；
(3)亲鱼观察与挑选：注射催产剂后观察亲鱼交配行为，根据亲鱼交配行为确定一对配对亲鱼，记录配对亲鱼个体的电子标记编号和对应的外部标记，并将配对亲鱼选出单独培育待产；
(4)受精卵获得与育苗：待亲鱼产卵后收集受精卵，进行苗种培育，获得卵形鲳鲹全同胞家系。
本发明中，筛选卵形鲳鲹亲鱼是选择个体大、体格健壮、体表完整、鱼龄在5龄以上的亲鱼。筛选亲鱼可以保证亲鱼性腺达到成熟。
本发明中，亲鱼营养强化采用的饵料是以鲣鱼、虾和鱿鱼为基础料，加入复合多维、裂壶藻粉、大豆卵磷脂以及富硒酵母制作而成。
优选地，鲣鱼、虾和鱿鱼的混合重量比为1:1:1，以基础料重量计，复合多维添加量为15-20g/kg，裂壶藻粉添加量为15-25g/kg，大豆卵磷脂添加量为5-10g/kg，富硒酵母添加量为5-10g/kg。
进一步地，亲鱼营养强化的时间是2个月，营养强化期间每天投喂饵料3次。
本发明中，亲鱼性腺成熟以亲鱼腹部松软，部分亲鱼生殖孔红胀为标准。
本发明中，所述催产剂由HCG、LHA2和LHA3配制而成。
优选地，所述催产剂中HCG、LHA2和LHA3的用量配比为1000～1500单位/kg、10～20mg/kg、10～20mg/kg。
本发明中，所述外部标记是利用圆形橡皮环套于亲鱼尾部，并在圆形橡皮环上标记彩带。通过该外部标记达到通过肉眼观察实现亲鱼个体标记辨别的目的。
优选地，圆形橡皮环的周长为13～15cm。
本发明中，所述亲鱼交配行为是亲鱼在催产剂作用下处于发情期的雄鱼追逐雌鱼的行为。
进一步地，观察亲鱼交配行为的时间为注射催产剂催产后第20～24h。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明卵形鲳鲹全同胞家系构建方法可有效解决卵形鲳鲹亲鱼雌雄难辨，无法有效地开展家系选育的不足，通过外部标记肉眼识别个体，利用催产后亲鱼交配行为挑选成熟配对的亲鱼，挑选的亲鱼通过自然排卵受精方式达到构建全同胞家系的目的。
(2)本发明可实现卵形鲳鲹一对一全同胞家系构建，构建的家系亲本、子代遗传背景清晰，系谱明确，针对性较强，为卵形鲳鲹遗传育种和后续分析奠定了基础。
具体实施方式
下面结合具体实施例详细说明本发明的技术方案，以便本领域技术人员更好理解和实施本发明的技术方案。实施例中HCG(绒毛膜促性腺激素)、LRH-A2(促排卵素2号)和LRH-A3(促排卵素3号)均为市场上购得产品。
实施例
一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择与培育：按照亲鱼选择标准，选择个体大、体格健壮、体表完整、鱼龄在5龄以上亲鱼40尾，利用电子标记对亲鱼进行标记后，将亲鱼放入网箱中进行营养强化。亲鱼强化饵料以鲣鱼、虾和鱿鱼(比例为1:1:1)为基础料，切碎后加入20g/kg复合多维、25g/kg裂壶藻粉、10g/kg大豆卵磷脂以及10g/kg富硒酵母制作成软颗粒饲料投喂，促进亲鱼成熟，亲鱼成熟是保障催产配对的前提。每天投喂3次，定期换网，加强管理。
(2)亲鱼催产及标记：经过2个月营养强化后，观察亲鱼生殖孔以及腹部变化，待亲鱼腹部松软，部分亲鱼生殖孔红胀时即可进行催产。催产剂为HCG、LHA2和LHA3按比例配置而成，其中HCG 1500单位/kg、LHA2 10mg/kg、LHA3 10mg/kg，以鱼体重计。同时利用周长为13-15cm的圆形橡皮环套于亲鱼尾部，并在圆形橡皮环上标记彩带，达到通过肉眼观察实现亲鱼个体标记辨别的目的。记录亲鱼个体的电子标记编号和对应的外部标记颜色。
(3)亲鱼观察与挑选：注射催产剂后20-24h观察卵形鲳鲹亲鱼行为，发现在催产剂作用下雄鱼追逐雌鱼时，记录追逐的亲鱼外部标记颜色，并挑选出相对应的亲鱼单独放置网箱培育待产。
(4)受精卵获得与育苗：待亲鱼催产后收集受精卵，并按照常规的育苗技术进行苗种培育，获得卵形鲳鲹全同胞家系。
本实施例从40尾卵形鲳鲹亲鱼中挑选了5对亲鱼进行了配对，其中3对亲鱼获得了受精卵，并对受精卵进行了苗种培育，构建了3个卵形鲳鲹全同胞家系，成功率为60％。
以上实施例仅用于阐述本发明，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以上实施例。所属技术领域的普通技术人员依据以上本发明公开的内容均可实现本发明的目的，任何基于本发明构思基础上做出的改进和变形，均落入本发明的保护范围之内，具体保护范围以权利要求书记载的为准。
Claims (9)
1.一种卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)亲鱼选择与培育：筛选出卵形鲳鲹亲鱼，利用电子标记对亲鱼进行标记，并进行营养强化；
(2)亲鱼催产及外部标记：亲鱼性腺成熟后，使用催产剂对亲鱼进行人工催产，利用外部标记对亲鱼进行个体辨别，记录对应电子标记编号；所述外部标记是利用圆形橡皮环套于亲鱼尾部，并在圆形橡皮环上标记彩带；
(3)亲鱼观察与挑选：注射催产剂后观察亲鱼交配行为，根据亲鱼交配行为确定一对配对亲鱼，记录配对亲鱼个体的电子标记编号和对应的外部标记，并将配对亲鱼选出单独培育待产； (4)受精卵获得与育苗：待亲鱼产卵后收集受精卵，进行苗种培育，获得卵形鲳鲹全同胞家系。
2.根据权利要求1所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，亲鱼营养强化采用的饵料是以鲣鱼、虾和鱿鱼为基础料，加入复合多维、裂壶藻粉、大豆卵磷脂以及富硒酵母制作而成。
3.根据权利要求2所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，鲣鱼、虾和鱿鱼的混合重量比为1:1:1，以基础料重量计，复合多维添加量为15-20g/kg，裂壶藻粉添加量为15-25g/kg，大豆卵磷脂添加量为5-10g/kg，富硒酵母添加量为5-10g/kg。
4.根据权利要求2或3所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，亲鱼营养强化的时间是2个月，营养强化期间每天投喂饵料3次。
5.根据权利要求1-3任一项所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，所述催产剂由HCG、LHA2和LHA3配制而成。
6.根据权利要求5所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，所述催产剂中HCG、LHA2和LHA3的用量配比为1000～1500单位/kg、10～20mg/kg、10～20mg/kg。
7.根据权利要求6所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，所述亲鱼交配行为是亲鱼在催产剂作用下处于发情期的雄鱼追逐雌鱼的行为。
8.根据权利要求7所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，观察亲鱼交配行为的时间为注射催产剂催产后第20～24h。
9.根据权利要求1所述卵形鲳鲹全同胞家系构建方法，其特征在于，所述卵形鲳鲹亲鱼是5龄以上的亲鱼。
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