CN110506469A - 一种烟草种子的活力测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种烟草种子的活力测定方法，所述的烟草种子的活力测定方法包括置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计和结果记录步骤。本发明采用置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计的步骤进行烟草种子活力测定，相对于标准发芽理想条件，该先法首先利用我国烟草种子漂浮育苗过程中，最常遭遇的低温、快速吸涨逆境处理种子，再进行标准发芽，其活力结果比标准发芽条件下发芽率与出苗率相关性更高，更能代表种子田间实际出苗情况，可指导烟草种子生产单位选择高活力种子进行加工销售，提高产品质量，降低种子在烟区育苗过程遭遇逆境后出苗率不达标风险，同时降低烟草育苗单位的管理、间苗成本等。该法标准发芽时间156 h~180 h，相对于标准发芽规定的14 d，大大节省了检测时间。总之，该法详细规定了成本低廉，操作简单，效果显著，已具实际规模应用可能。
Description
技术领域
本发明属于烟草技术领域，具体涉及一种烟草种子的活力测定方法。
背景技术
伴随烟草行业进入高质量发展新阶段，利用科技创新提升烟草产品质量，更好满足消费者要求成为必然之路。烟草种子作为烟叶生产中最基础性的生产资料，提高其质量和科技含量是烟草种子公司奋力走在高质量发展前列重要手段。目前，烟草种子质量主要通过标准发芽试验的发芽率来检测，而发芽率仅代表种子是否具有生活力，理想环境下是否能够萌发，不能准确反映种子在复杂田间环境中实际出苗表现。而种子活力是种子科学工作者提出来的衡量种子质量的新指标，国际种子检验协会（ISTA）也对种子活力概念作了规定，是指可衡量高发芽率的种子批在广泛的环境下出苗时不同方面的综合特性，可准确反映种子田间实际表现，以其为检测标准可进一步提升烟草种子质量。种子活力是衡量种子质量的重要指标，高活力种子，具有明显的生长优势和生产潜力，对农业生产具有十分重要的意义。国内外关于烟草种子活力检测方法虽有报道，但大多耗时、费钱、费力，真正适于企业实际应用的方法却没有。
发明内容
本发明的目的在于提供一种烟草种子的活力测定方法。
本发明的目的是这样实现的，所述的烟草种子的活力测定方法包括置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计和结果记录步骤，具体包括：
A、置种：取置种容器，在置种容器底部垫置储水层，储水层上面垫置吸水层，储水层储满水至吸水层表面为湿润状态，然后在吸水层表面均匀放置待测烟草种子；
B、低温吸涨：将放置待测烟草种子的置种容器置于温度3~8℃环境下让烟草种子低温吸涨90h~100h；
C、标准发芽：将B步骤得到的放置待测烟草种子的置种容器置于温度20~30℃条件下，按每天光照12h，黑暗12h至烟草种子发芽，期间保持吸水层表面为湿润状态；
D、正常幼苗统计：在烟草种子标准发芽后156h~180h记录种子发芽数量，进行发芽统计；
E、结果记录：依照下列公式记录烟草种子活力，统计3~4次重复平均值，公式如下：
。
本发明所述的烟草种子的活力测定方法具体操作方法如下：
（1）置种：取100 mm培养皿，在培养皿中垫置一层海绵，然后垫两层滤纸，海绵中加入20ml自来水至滤纸全部湿润为止，在滤纸上均匀放置100粒烟草种子，横10×竖10，种粒横竖间隔5 mm以上，掀开滤纸但保证种子位置不变，再次加入10 ml自来水至海绵上，盖上培养皿盖子，每个检测批号种子设置3~4次重复；
（2）低温吸涨：；将（1）中装有烟草种子的培养皿放置如人工气候箱内，调整培养箱温度为3℃~8℃，让烟草种子低温吸涨90h~100 h，吸涨期间保持培养箱温度不变，且水分充足；
（3）标准发芽：取（2）中吸涨后培养皿，置于25℃培养箱内，每天光照12 h，黑暗12 h，光照强度1000 lx以上，发芽期间保持滤纸湿润，温差±2℃以内；
（4）正常幼苗统计：在种子标准发芽后156 h~180 h记录种子发芽数量，统计正常发芽种子数量。发芽统计时，幼苗胚根正常，可正常生长伸长，具有2片绿色子叶，子叶形状完整且为椭圆形，幼苗整体大小不明显弱于周围幼苗计为正常发芽种子，而未见胚根突出种皮、胚根萎缩、仅见胚根未见子叶、2片子叶子未完全脱离种皮、子叶黄化、单子叶、3子叶、子叶畸形、幼苗极弱等均计数为异常种子；
（5）结果记录：依照下列公式记录烟草种子活力，统计3~4次重复平均值，公式如下：
。
本发明针对现有烟草种子质量检测方法---标准发芽检测的无法准确预测种子田间出苗结果的缺点，给出更能精确反映烟草种子质量且可实际操作应用的活力检测方法，进一步提升烟草种子质量。
本发明采用置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计的步骤进行烟草种子活力测定，相对于标准发芽理想条件，该先法首先利用我国烟草种子漂浮育苗过程中，最常遭遇的低温、快速吸涨逆境处理种子，再进行标准发芽，其活力结果比标准发芽条件下发芽率与出苗率相关性更高，更能代表种子田间实际出苗情况，可指导烟草种子生产单位选择高活力种子进行加工销售，提高产品质量，降低种子在烟区育苗过程遭遇逆境后出苗率不达标风险，同时降低烟草育苗单位的管理、间苗成本等。另外，该法置种过程在逆境处理前，种子未吸水水份，可采用真空置种仪或其他播种装置进行规模化播种，提高播种效率，有利于该法规模化应用；该逆境条件为我国烟区最常遭遇逆境，其结果必然具有较高代表性，且该逆境条件在实验室内极易实现。该法标准发芽时间156 h~180 h，相对于标准发芽规定的14 d，大大节省了检测时间。总之，该法详细规定了成本低廉，操作简单，效果显著，已具实际规模应用可能。
附图说明
图1为利用标准发芽条件下不同批号云烟97种子第7d发芽表现示意图；
图2为利用本发明方法不同批号云烟97种子活力表现示意图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的烟草种子的活力测定方法包括置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计和结果记录步骤，具体包括：
A、置种：取置种容器，在置种容器底部垫置储水层，储水层上面垫置吸水层，储水层储满水至吸水层表面为湿润状态，然后在吸水层表面均匀放置待测烟草种子；
B、低温吸涨：将放置待测烟草种子的置种容器置于温度3℃~8℃环境下让烟草种子低温吸涨90h~100h；
C、标准发芽：将B步骤得到的放置待测烟草种子的置种容器置于温度20℃~30℃条件下，按每天光照12h，黑暗12h至烟草种子发芽，期间保持吸水层表面为湿润状态；
D、正常幼苗统计：在烟草种子标准发芽后156h~180h记录种子发芽数量，进行发芽统计；
E、结果记录：依照下列公式记录烟草种子活力，统计3~4次重复平均值，公式如下：
。
所述的置种容器为培养皿。
所述的储水层为海绵。
所述的吸水层为滤纸。
所述的置种是取100 mm培养皿，在培养皿中垫置一层海绵，然后垫两层滤纸，海绵中加入20 ml自来水至滤纸全部湿润为止，在滤纸上均匀放置100粒烟草种子，横10×竖10，种粒横竖间隔5 mm以上，掀开滤纸但保证种子位置不变，再次加入10 ml自来水至海绵上，盖上培养皿盖子，每个检测批号种子设置3~4次重复。
发芽统计时，幼苗胚根正常，可正常生长伸长，具有2片绿色子叶，子叶形状完整且为椭圆形，幼苗整体大小不明显弱于周围幼苗计为正常发芽种子，而未见胚根突出种皮、胚根萎缩、仅见胚根未见子叶、2片子叶子未完全脱离种皮、子叶黄化、单子叶、3子叶、子叶畸形、幼苗极弱等均计数为异常种子。
下面以具体实施例对本发明做进一步说明，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体需要的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
实施例中烟草品种云烟85、云烟97、云烟87的种子来自玉溪中烟种子有限责任公司。
实施例1
取不同年份生产云烟85烟草良种，云烟85-2001-0164、云烟85-2003-0144、MS云烟85-2008-0927，分别进行标准发芽试验、活力检测试验、漂浮育苗试验。
在100 mm培养皿中垫置一层海绵，然后垫两层滤纸，海绵中加入20 ml自来水至滤纸全部湿润为止，取上述烟草种子，在滤纸上均匀放置100粒烟草种子，横10×竖10，种粒横竖间隔5 mm以上，掀开滤纸但保证种子位置不变，再次加入10 ml自来水至海绵上，盖上培养皿盖子，每个检测批号种子设置3~4次重复，将装有烟草种子的培养皿放置如人工气候箱内，调整培养箱温度为3℃~8℃，让烟草种子低温吸涨90h~100 h，吸涨期间保持培养箱温度不变，且水分充足；然后将上述种子转入25℃下进行标准发芽试验，在种子标准发芽后156h~180 h记录种子发芽数量，统计正常发芽种子数量。发芽统计时，幼苗胚根正常，可正常生长伸长，具有2片绿色子叶，子叶形状完整且为椭圆形，幼苗整体大小不明显弱于周围幼苗计为正常发芽种子，计算正常发芽种子百分率，取3次重复平均值作为种子活力值。
标准发芽试验：在培养皿中垫置两层滤纸，湿润，滤纸上均匀放置100粒烟草种子，每个批号3次重复，然后培养皿置于25℃培养箱内，每天光照12 h，发芽期间保持滤纸湿润。记录种子发芽数目，以胚根正常、胚轴顶端（子叶）见绿为种子发芽计数标准，第7 d记录种子发芽势GP，第14 d记录种子发芽率GR。
漂浮育苗试验：统计了全国烟区近4年来共计180份苗期育苗温度，根据统计分析结果将育苗温度划分为4个时间阶段，00:00~06：00为8℃、06:00~12:00为20℃、12:00~18:00为25℃、18:00~24:00为12℃。育苗用基质采购于玉溪果木林场，采用595孔漂盘，1粒/孔播种，育苗过程严格依照《烤烟漂浮育苗技术规程》进行，第22 d以2片子叶展开，幼苗正常为判断依据，统计出苗率，出苗率结果作为对应批号种子活力的最终依据。
采用SPSS17.0软件利进行同一品种不同年份（批号）种子间标准发芽结果、出苗率、复合逆境发芽结果的差异显著性分析。
表1 不同批号云烟85发芽指标与活力指标及出苗率比较
注：每列每个品种中不同小写字母者表示处理间差异有统计学意义（P≤0.05，Bonferroni）。
由表1可以看出，3个不同生产年份种子，发芽势、发芽率、活力值均由低到高排列，生产年份最早的种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力值最低，生产年份中间的种子各指标居中，生产年份较晚的种子则最高，这些指标与出苗率变化趋势都一致，说明它们与出苗率均成正相关。
通过差异显著性分析发现，3个不同年份种子中生产年份最早种子与其他2个批号种子存在显著性差异，发芽质量明显更低，而后2个生产年份种子发芽势、发芽率、发芽指数则均无显著性差异，如2008年的MS云烟85-0927与2003年的云烟85-0144在14 d发芽率较高，均在92%以上，在0.05水平无显著性差异，这与种子实际出苗表现不一致，即发芽势、发芽率、发芽指数等指标未能将后2个生产年份种子间显著差异表现出来，对于2001年的MS云烟85-0164虽发芽率较低，仅为83.33%，但仍比实际出苗率56.37%高出许多，说明发芽势、发芽率无法准确代表种子真实质量。而分析活力值发现，3个年份种子活力值均呈显著性差异，且各年份活力值均与出苗率极为接近，即活力值比发芽指标更能有效反应种子真实质量，更能反映种子遭遇逆境后实际表现，具有更高的指导意义。
实施例2
重复实施例1，有以下不同点：烟草种子为云烟87-2001-0064、云烟87-2002-0138、MS云烟87-2014-2882。
表2 不同批号云烟87发芽指标与活力指标及出苗率比较
注：每列每个品种中不同小写字母者表示处理间差异有统计学意义（P≤0.05，Bonferroni）。
由表2可以看出，不同年份（批号）云烟87种子活力值相比于发芽势、发芽率，与出苗率明显更加接近，尤其是活力较低的2个批号种子，而差异显著性分析结果也与出苗率一致，说明云烟87种子活力值更能代表其田间实际出苗情况。
实施例3
重复实施例1，有以下不同点：烟草种子为云烟97-2005-0228、云烟97-2005-0178、云烟97-2012-0971。
表3 不同批号云烟97发芽指标与活力指标及出苗率比较
注：每列每个品种中不同小写字母者表示处理间差异有统计学意义（P≤0.05，Bonferroni）。
由表3可以看出，不同批号云烟97种子活力值，尤其是活力较低的2个批号种子的活力值，相比于发芽势、发芽率，与出苗率明显更加接近，且差异显著性分析结果与出苗率一致，说明云烟97种子活力值更能代表其田间实际出苗情况。
Claims (6)
1.一种烟草种子的活力测定方法，其特征在于所述的烟草种子的活力测定方法包括置种、低温吸涨、标准发芽、正常幼苗统计和结果记录步骤，具体包括：
A、置种：取置种容器，在置种容器底部垫置储水层，储水层上面垫置吸水层，储水层储满水至吸水层表面为湿润状态，然后在吸水层表面均匀放置待测烟草种子；
B、低温吸涨：将放置待测烟草种子的置种容器置于温度3~8℃环境下让烟草种子低温吸涨90h~100h；
C、标准发芽：将B步骤得到的放置待测烟草种子的置种容器置于温度20℃~30℃条件下，按每天光照12h，黑暗12h至烟草种子发芽，期间保持吸水层表面为湿润状态；
D、正常幼苗统计：在烟草种子标准发芽后156h~180h记录种子发芽数量，进行发芽统计；
E、结果记录：依照下列公式记录烟草种子活力，统计3~4次重复平均值，公式如下：
。
2.根据权利要求1所述的烟草种子的活力测定方法，其特征在于所述的置种容器为培养皿。
3.根据权利要求1所述的烟草种子的活力测定方法，其特征在于所述的储水层为海绵。
4.根据权利要求1所述的烟草种子的活力测定方法，其特征在于所述的吸水层为滤纸。
5.根据权利要求1所述的烟草种子的活力测定方法，其特征在于所述的置种是取100mm培养皿，在培养皿中垫置一层海绵，然后垫两层滤纸，海绵中加入20 ml自来水至滤纸全部湿润为止，在滤纸上均匀放置100粒烟草种子，横10×竖10，种粒横竖间隔5 mm以上，掀开滤纸但保证种子位置不变，再次加入10 ml自来水至海绵上，盖上培养皿盖子，每个检测批号种子设置3~4次重复。
6.根据权利要求1所述的烟草种子的活力测定方法，其特征在于发芽统计时，幼苗胚根正常，可正常生长伸长，具有2片绿色子叶，子叶形状完整且为椭圆形，幼苗整体大小不明显弱于周围幼苗计为正常发芽种子，而未见胚根突出种皮、胚根萎缩、仅见胚根未见子叶、2片子叶子未完全脱离种皮、子叶黄化、单子叶、3子叶、子叶畸形、幼苗极弱等均计数为异常种子。
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