CN110501201A - 一种用于免疫细胞p16染色的封闭液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin300 1份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。本发明通过增加Proclin300，可以增强封闭液的稳定性，防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质，从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用，使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定，还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用，保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外，通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用，则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用，从而使得特异性结合增强。
Description
技术领域
本发明涉及液基细胞学免疫细胞化学领域，具体涉及一种用于免疫细胞p16染色的封闭液。
背景技术
宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳腺癌并呈年轻化趋势，严重危害妇女身体健康。然而，宫颈癌又是唯一明确病因，有望成为第一个被人类攻克的肿瘤。因此，预防及早期筛查对降低宫颈癌的发病及死亡率具有重要意义。
目前，宫颈癌诊断的主要方法有：宫颈脱落细胞学检查、人乳头瘤病毒(HPV)检测、阴道镜检查、病理活检等。细胞学检测主要是通过病理医生对宫颈脱落细胞进行病理染色后再于显微镜下进行观察诊断。该方法操作较为简便，患者无痛苦，适合进行常规筛查。
现有的用于免疫细胞p16染色的蛋白类封闭液普遍存在易变质、不稳定、保存时间短的缺陷，从而严重影响免疫细胞p16染色效果。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明旨在提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，有助于延长封闭液的保存时间，增强其稳定性，从而保证免疫细胞p16染色效果。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin3001份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。
进一步地，所述动物非免疫血清为质量浓度5－15％的山羊血清。
进一步地，所述吐温－20的质量浓度为0.2％。
进一步地，PBS缓冲液的浓度为0.01～0.2mol/L。
进一步地，所述Proclin300的质量浓度为0.1％。
上述封闭液可以应用在免疫细胞p16染色中。
本发明的有益效果在于：
本发明的用于免疫细胞p16染色的封闭液中，通过增加Proclin300，可以增强封闭液的稳定性，防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质，从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用，使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定，还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用，保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外，通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用，则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用，从而使得特异性结合增强。
具体实施方式
以下将对本发明作进一步的描述，需要说明的是，本实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围并不限于本实施例。
实施例1
本实施例提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin300 1份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。
在本实施例中，所述动物非免疫血清为质量浓度5－15％的山羊血清。
在本实施例中，所述吐温－20的质量浓度为0.2％。
在本实施例中，PBS缓冲液的浓度为0.01～0.2mol/L。
在本实施例中，所述Proclin300的质量浓度为0.1％。
在上述用于免疫细胞p16染色的封闭液中，通过在封闭液中增加Proclin300，可以增强封闭液的稳定性，防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质，从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用，使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定，还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用，保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外，通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用，则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用，从而使得特异性结合增强。
上述封闭液可以特别适用于免疫细胞p16染色。
实施例2
本实施例提供一种制备上述封闭液的方法，包括如下步骤：
S1、先用1/3的蒸馏水溶解脱脂奶粉；
S2、再用1/3的蒸馏水溶解蔗糖；
S3、将PBS缓冲液、动物非免疫血清、溶解后的蔗糖、吐温－20、Proclin300、溶解后的脱脂奶粉和剩余的蒸馏水混合搅拌，并调节pH至7.2－7.8，得到所述用于免疫细胞p16染色的封闭液。
对于本领域的技术人员来说，可以根据以上的技术方案和构思，给出各种相应的改变和变形，而所有的这些改变和变形，都应该包括在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin300 1份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。
2.根据权利要求1所述的用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，所述动物非免疫血清为质量浓度5－15％的山羊血清。
3.根据权利要求1所述的用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，所述吐温－20的质量浓度为0.2％。
4.根据权利要求1所述的用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，PBS缓冲液的浓度为0.01～0.2mol/L。
5.根据权利要求1所述的用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，所述Proclin300的质量浓度为0.1％。
6.上述任一权利要求所述的封闭液在免疫细胞p16染色中的应用。
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|---|---|---|---|---|
| CN112034158A (zh) * | 2020-10-09 | 2020-12-04 | 深圳市森盈生物科技有限公司 | 一种用于免疫细胞p16染色的封闭液 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108535076A (zh) * | 2018-03-19 | 2018-09-14 | 广州江元医疗科技有限公司 | 一种应用于免疫细胞化学p16蛋白染色的封闭液及其制备方法 |
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2019
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