CN110495310A - 一种文冠果绿枝扦插生根的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种文冠果绿枝扦插生根的方法，包括以下步骤：(1)在5月下旬，选择生长良好、无病虫害的文冠果优良单株，采集健壮当年生新梢，制备插穗；(2)将步骤(1)获得的插穗用500mg/L的ABT1浸泡1h，再用75％的酒精消毒30s；然后将插穗扦插至苗床的基质内，插入深度为3‑4cm；(3)扦插完成后立即喷水，使叶片表面存留一层水膜，然后进行插后管理。利用本发明的方法进行文冠果扦插繁殖，可显著提高文冠果绿枝扦插生根率，为文冠果良种苗木繁育工厂化、规模化生产提供了技术支持，保障了文冠果产业发展对优良种苗的需求。

Description

一种文冠果绿枝扦插生根的方法

技术领域

本发明涉及林木生长发育及繁殖技术领域，具体涉及一种文冠果绿枝扦插生根的方法。

背景技术

文冠果(Xanthoceras sorbifolium Bunge)为无患子科文冠果属植物，抗寒、抗旱、耐盐碱，是广泛分布于中国北方的木本油料植物(Venegascaleron M et al.,2018；YuHY et al.，2017)。文冠果种仁含油率达50-68％，不饱和脂肪酸含量达85-93％，并且含有神经酸，常用于生产食用油和神经酸胶囊。不同的文冠果组织含有多种生物活性物质，具有抗肿瘤、抗炎以及抗阿尔茨海默病的潜力(Yang CY et al.，2016)。文冠果具有重要的生态、经济和药用价值，但文冠果易产生根蘖，嫁接繁殖除萌等管理费工费时效果不佳，采用扦插繁殖对文冠果优良品种的推广具有重要意义。

为推广文冠果优良种质，提高文冠果栽培产量和效益，对文冠果无性繁殖方法诸如组织培养、硬枝扦插、嫩枝扦插、根扦插等已有报道。在文冠果组织培养方面，以叶片(张凌等，2017；张娜等，2011)、茎段(纪楠楠等，2019；萨人，2015)、腋芽(张娜等，2014)、茎尖(徐占平等，2010)、种子诱导体胚(柳金凤等，2009)、子叶(臧国忠等，2008)作为外殖体，已成功诱导不定芽生根，获得了再生植株。专利“一种根为外植体的文冠果组织培养快繁方法及其培养的文冠果不定芽(专利号：201510917773.0)”利用文冠果根为外植体可在短期内获得文冠果不定芽，其优化的WPM培养基为：1L WPM培养基中添加0.5mL-2mL的植物组培抗菌剂，0.5mg-2.0mg的6-BA，0.5mg-2.0mg的NAA混合均匀。专利“一种文冠果的无性快繁方法(专利号：201410355211.7)”经合子胚的诱导接种，体细胞胚的继代与扩繁，不定芽的继代及生根培养，炼苗可快速获得文冠果苗。但迄今，尚未见组培苗的推广种植。在扦插方面，插穗长15cm，硬枝插穗带2-3个芽，嫩枝插穗带2-3片叶，根插穗粗度0.4cm以上，插前用浓度为250mg/L ABT溶液处理，硬质扦插成活率为29.8％，嫩枝扦插成活率为41.2％，根扦插成活率为82.9％(赵国锦和戴双，2006)；以200mg/L的IBA、200mg/L的IAA、100mg/L的ATB-6的处理文冠果嫩枝插穗，嫩枝扦插成活率为50.30％(王均喜，2017)；使用1年生文冠果实生苗硬枝，以浓度为500mg/L IBA溶液处理插穗，硬枝扦插生根率为65.4％(宗建伟等，2012)。专利“一种促进文冠果嫩枝扦插生根和成苗方法(专利号：201810251393.1)”利用黄化后80d的文冠果嫩枝，经5000mg/L高浓度IBA处理，在全光照喷雾条件培养管理，可促进文冠果嫩枝插穗生根及成苗。尽管以上研究在一定程度上为文冠果扦插提供了基础，但是，文冠果扦插操作过程复杂、生根率低、育苗周期长仍是亟待解决的问题。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种文冠果绿枝扦插生根的方法，利用本发明的方法进行文冠果扦插繁殖，可显著提高文冠果绿枝扦插生根率，为文冠果良种苗木繁育工厂化、规模化生产提供了技术支持，保障了文冠果产业发展对优良种苗的需求。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种文冠果绿枝扦插生根的方法，包括以下步骤：

(1)在5月下旬，选择生长良好、无病虫害的文冠果优良单株，采集健壮当年生新梢，制备插穗；

(2)将步骤(1)获得的插穗用500mg/L的ABT1浸泡1h，再用75％的酒精消毒30s；然后将插穗扦插至苗床的基质内，插入深度为3-4cm；

(3)扦插完成后立即喷水，使叶片表面存留一层水膜，然后进行插后管理。

优选的，步骤(1)中，制备插穗时，上切口为平口，距芽1-2cm，下切口为斜口，距芽0.5-1cm。

优选的，步骤(1)中，所述插穗的长度为7-10cm，腋芽发育良好，带有2-3片复叶。

由于长度7cm以下的插穗储存的营养物质较少，扦插后难以保证营养供给，插穗生长缓慢；长度10cm以上的插穗裸露于地上部分过多，相对蒸发面积大，易导致水分流失，插穗的成活率降低，所以本发明将修剪的插穗长度控制在7-10cm。修剪接穗时，上切距芽1-2cm，保证了叶芽拱出来后，不会阻碍嫩枝的生长，下切口距芽0.5-1cm，方便扦插入土且不伤芽头，可保证扦插的高成活率。

优选的，步骤(2)中，所述基质由椰壳、蛭石和珍珠岩按体积比为6:3:1制成。

扦插基质是影响文冠果扦插生根的关键因素，文冠果根系肉质，基质积水或通透性不良时容易造成烂根，影响成苗。针对文冠果的根系特点，本发明选用的扦插基质材料为椰壳、蛭石和珍珠岩，其配制比例为椰壳6：蛭石3：珍珠岩1。其中，椰壳为扦插基质的主要成分，具有持水性和通透性好、重量轻的特点；再配以蛭石和珍珠岩以增加营养基质的透气性、吸水性和稳定性，是最适合文冠果扦插的基质。

优选的，步骤(2)中，将基质填充在穴盘内，将穴盘置于带有间歇喷雾系统的塑料大棚中。

优选的，步骤(2)中，扦插时先用比插穗稍粗的竹签在穴盘内插孔，再将插穗下端沿孔插入基质内。

优选的，步骤(3)中，所述插后管理包括：在塑料大棚上盖一层遮阳网，保持塑料大棚内的空气湿度为80％，温度控制在30-35℃。

进一步的，所述插后管理还包括：在扦插后1-8d，每5min迷雾一次，每次迷雾时长40s；扦插后9-14d，每10min迷雾1次，每次迷雾时长40s；扦插后15-60d，每20min迷雾1次，每次迷雾时长60s。

进一步的，所述插后管理还包括：扦插后每隔7d喷施0.5％的多菌灵溶液。

本发明的有益效果：

(1)本发明直接采集文冠果优良种质的绿枝修剪后作为插穗，在带有自动间歇喷雾系统的塑料大棚中培养管理，操作简单，易于推广。

(2)使用本发明提供的生根方法，筛选出最佳ABT1生根粉浓度500mg/L，最佳处理时间为1h，绿枝插穗生根率达91.25％，显著提高了文冠果绿枝扦插的生根率。

(3)本发明提供的文冠果绿枝扦插生根的方法，为通过扦插繁育文冠果优良种苗提供了技术基础。

附图说明

图1为绿枝扦插的图片；

图2为茎段形成愈伤的图片；

图3为扦插14d生根情况；

图4为扦插60d硬枝扦插苗生长情况。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

正如背景技术部分所介绍的，文冠果以种子繁殖为主，但其后代分化严重，无法保持亲本优良的生物学特性；扦插技术相对容易操作，并且短期内产苗量较大，但文冠果生根比较困难，属于扦插极难生根植物。目前关于文冠果扦插繁殖育苗的报道虽然有很多，但仍存在生根率和成苗率低、育苗周期长等问题，难以实现在短时间内对优良单株进行大量繁殖。

绿枝扦插和硬枝扦插为两种不同的扦插方式，其中，绿枝扦插是用当年生半木质化的未成熟带叶新梢进行扦插，扦插时间一般在夏季。绿枝扦插可以和硬枝扦插以及根插在时间上互补，有利于实现不同时间段对优良单株进行繁殖。

基于此，本发明的目的是提供一种文冠果绿枝扦插生根的方法，通过对扦插繁殖条件的优化，有效解决了文冠果扦插育苗难生根、育苗周期长的问题，提高了文冠果良种的繁殖及推广效率。

在本发明的一种实施方案中，给出了文冠果绿枝扦插生根的方法，包括以下步骤：

(1)插穗选择与制备：

在5月下旬，选择生长良好、无病虫害的文冠果优良单株，采集健壮当年生新稍，制备长度为7～10cm，腋芽发育良好，带有2～3片复叶的扦插穗条。

(2)苗床建立与扦插基质配制：

扦插苗床为5×10穴盘，深度5cm，扦插基质为椰壳、蛭石、珍珠岩(体积比例6：3：1)，将基质用1000倍的多菌灵进行消毒后装入穴盘，穴盘排列整齐，平稳放置在带有自动间歇喷雾系统的塑料大棚中，自动间歇喷雾系统的迷雾喷头离地高度为80cm，喷头间距1.2m；大棚顶部覆盖遮阳网。

(3)插穗预处理：

插穗经500mg/L的ABT1浸泡1h，再用75％的酒精消毒30s。

(4)扦插：

扦插时先用比插穗稍粗的竹签在穴盘内插孔，再将插穗下端沿孔插入基质内，扦插深度为3-4cm，穴盘每穴插入1个插穗，然后将基质轻轻压实；扦插后应立即喷水，使叶片表面存留一层水膜。

(5)插后管理：

培养期间保证棚内空气湿度保持在80％，温度控制在30～35℃；在扦插后1-8d，每5min迷雾一次，每次迷雾时长40s；扦插后9-14d，每10min迷雾1次，每次迷雾时长40s；扦插后15-60d，每20min迷雾1次，每次迷雾时长60s；扦插后每隔7d喷施0.5％(质量浓度)的多菌灵溶液。

影响文冠果绿枝扦插生根的因素有很多，例如树龄、枝条的部位及发育情况、外源激素、扦插方式、扦插基质、温湿度条件等。其中：

植物绿枝扦插过程中进行黄化处理是提高生根率的常用手段，在苹果、非洲山龙眼、大齿槭和文冠果绿枝扦插中已有应用，专利CN108575488A对文冠果嫩枝进行了80天的黄化处理，并用5000mg/L的IBA处理15s，生根率为86.7％；本发明扦插前未对文冠果嫩枝进行黄化，以浓度为500mg/L的ABT1生根粉，处理1h，生根率达91.25％。相比之下，本发明不仅生根率有所提高，而且省去了黄化处理环节，节省了时间及人工成本。本发明步骤简洁易操作，有利于推广使用。

采集后作为插穗的枝条的修剪也十分关键，由于长度7cm以下的插穗储存的营养物质较少，扦插后难以保证营养供给，插穗生长缓慢；长度10cm以上的插穗裸露于地上部分过多，相对蒸发面积大，易导致水分流失，插穗的成活率降低，所以本发明将修剪的插穗长度控制在7-10cm。修剪接穗时，上切距芽1-2cm，保证了叶芽拱出来后，不会阻碍嫩枝的生长，下切口距芽0.5-1cm，方便扦插入土且不伤芽头，可保证扦插的高成活率。

对于修剪后的插穗一般需要进行激素处理以促进生根，但激素不同种类、不同浓度、不同处理时间都会影响插穗的生根情况，经多次试验优化，本发明选择用浓度为500mg/L的ABT1生根粉，处理1h，其生根率最高，生根时间最短。

文冠果根系肉质，基质积水或通透性不良时容易造成烂根，影响成苗。针对文冠果的根系特点，本发明选用的扦插基质材料为椰壳、蛭石和珍珠岩，其配制体积比例为椰壳6：蛭石3：珍珠岩1。其中，椰壳为扦插基质的主要成分，具有持水性和通透性好，重量轻的特点；再配以蛭石和珍珠岩以增加营养基质的透气性、吸水性和稳定性，是最适合文冠果硬枝扦插的基质。

针对文冠果扦插生根难的问题，本发明从插穗选择、苗床准备和扦插基质的优选、插穗预处理和扦插方法等进行了优化考察，通过各扦插步骤的协同促进作用，有效提高了文冠果绿枝扦插的生根率，并且能够使文冠果提前形成愈伤组合并生根，缩短了育苗的周期，这样可以在短时间内对优良的单株进行大量的繁殖。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。

本发明实施例中所用的未进行具体说明试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。

实施例1：

选择山东农业大学林学站内种植的8个文冠果优良单株‘46321’、‘WF12’、‘WF17’、‘WF18’、‘WF19’、‘LY1’、‘W6-7’、‘W6-9’为研究对象，每个种质提供40个插穗，进行文冠果绿枝扦插生根研究，具体如下：

(1)5月下旬，采集8个文冠果优良单株的绿枝，每个单株采集健壮当年生新稍60个，采集的绿枝进入半木质化状态。

(2)以采集的绿枝为材料，修剪成带2-3片复叶，长度为7-10cm的插穗，插穗上切口为平口，距芽1-2cm，下切口为斜口，距芽0.5-1cm，每个单株获得40个插穗。

(3)分别用不同浓度的ABT1生根粉，以不同时长处理已制备的插穗：

100mg/L的ABT1处理2h、300mg/L的ABT1处理0.5h、500mg/L的ABT1处理1h、1000mg/L的ABT1处理30s。处理时下切口应完全浸没在处理液中，每个浓度处理完毕后，用75％的酒精消毒30s后备用。每个浓度ABT1生根粉处理10根插穗。

(4)苗床的准备：扦插苗床为5×10穴盘，深度5cm，扦插基质为椰壳、蛭石、珍珠岩(体积比例6：3：1)，将基质用1000倍的多菌灵进行消毒后装入穴盘，穴盘整齐排列，平稳放置在带有自动间歇喷雾系统的塑料大棚中，大棚顶部覆盖遮阳网。

(5)扦插时先用比插穗稍粗的竹签在穴盘内插孔，再将插穗下端沿孔插入基质内，扦插深度为3-4cm，穴盘每穴插入1个插穗，然后将基质轻轻压实；扦插后应立即喷水，使叶片表面存留一层水膜。

(6)管理生根：在扦插后1-8d，每5min迷雾一次，每次迷雾时长40s；扦插后9-14d，每10min迷雾1次，每次迷雾时长40s；扦插后15-60d，每20min迷雾1次，每次迷雾时长60s；扦插后每隔7d喷施0.5％的多菌灵溶液。

(7)扦插一周后每隔1d观察愈伤组织发生及生根情况，开始生根后不再取出观察。扦插后60天统计生根情况，包括每个种质的生根率，然后计算出8个种质的平均生根率。

不同浓度ABT1生根粉，以不同时长处理的生根率见表1。结果表明：以浓度为500mg/L的ABT1生根粉，处理1h为最佳，平均生根率为91.25％，生根时间为14.50d，生根数为28条，根长2.71cm；其次是以浓度为300mg/L的ABT1生根粉，处理0.5h，平均生根率为67.5％，生根时间为26.88d，生根数为20条，根长1.96cm；以浓度为100mg/L的ABT1生根粉，处理2h，平均生根率为61.25％，生根时间为27.75d，生根数为18.63条，根长1.57cm；以浓度为1000mg/L的ABT1生根粉，处理30s秒，平均生根率为46.25％，生根时间为30d，生根数为14.88条，根长1.07cm。

表1文冠果绿枝扦插生根率

以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种文冠果绿枝扦插生根的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在5月下旬，选择生长良好、无病虫害的文冠果优良单株，采集健壮当年生新梢，制备插穗；

(2)将步骤(1)获得的插穗用500mg/L的ABT1浸泡1h，再用75％的酒精消毒30s；然后将插穗扦插至苗床的基质内，插入深度为3-4cm；

(3)扦插完成后立即喷水，使叶片表面存留一层水膜，然后进行插后管理。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，制备插穗时，上切口为平口，距芽1-2cm，下切口为斜口，距芽0.5-1cm。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述插穗的长度为7-10cm，腋芽发育良好，带有2-3片复叶。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述基质由椰壳、蛭石和珍珠岩按体积比为6:3:1制成。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，将基质填充在穴盘内，将穴盘置于带有间歇喷雾系统的塑料大棚中。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，扦插时先用比插穗稍粗的竹签在穴盘内插孔，再将插穗下端沿孔插入基质内。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述插后管理包括：在塑料大棚上盖一层遮阳网，保持塑料大棚内的空气湿度为80％，温度控制在30-35℃。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述插后管理还包括：在扦插后1-8d，每5min迷雾一次，每次迷雾时长40s；扦插后9-14d，每10min迷雾1次，每次迷雾时长40s；扦插后15-60d，每20min迷雾1次，每次迷雾时长60s。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述插后管理还包括：扦插后每隔7d喷施0.5％的多菌灵溶液。