CN110476898B - 一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种烟蚜茧蜂生长发育的调控方法，属于生物技术领域。该方法以浓度为8~5000ng/μl的ZR‑512或者8~1000ng/μl的ZR‑777液浸处理烟蚜茧蜂僵蚜，使烟蚜茧蜂的出蜂时间延长8‑56小时，同时又不影响烟蚜茧蜂的成蜂寿命和寄生率。本发明的方法简便易行，成本低廉，效果显著，能够直接用于烟蚜茧蜂人工繁殖，暂时保存烟蚜茧蜂僵蚜，供大田防治烟蚜时使用，提供足量、整齐一致的烟蚜茧蜂僵蚜防控烟蚜，减少蚜虫及其传播的病害，减少烟叶损失；能有效减少化学农药的使用，减少环境污染和提高烟叶及其它植物的安全性。
Description
技术领域
本发明属于植物害虫防治技术领域，具体涉及一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法。
背景技术
烟蚜[Myzus persicae (Sulzer)]又称桃蚜，属同翅目、蚜科。该虫的寄主植物十分广泛，主要有十字花科、茄科、蔷薇科、豆科、藜科等植物，以其口针刺吸取食植物汁液，危害十分严重。
在烟蚜防治中，广泛、大量和长期使用化学农药造成烟叶生产中的“3R（Residue，Resistance，Resurgence）”问题日益严重，使得烟叶生产中烟蚜及蚜传病毒病的防治越来越困难。烟蚜茧蜂（Aphidius gifuensis Ashmaed）是一种寄生蚜虫的专性寄生蜂。近年来，在大田烟蚜茧蜂防治烟蚜的实际过程中，出现了僵蚜出蜂不一致、不整齐，生产上急需烟蚜茧蜂防治烟蚜时，所需的烟蚜茧蜂数量不足而影响防蚜效果等问题。
保幼激素（juvenile hormone，JH）是由咽侧体分泌的一类倍半萜类化合物，是昆虫体内最重要的激素之一，许多研究证明保幼激素可有效调控昆虫的生长发育、变态及生殖。目前，已经从多种昆虫体内中分离提取了不同种类的自然存在的保幼激素，同时可通过化学合成的途径人工合成了一些与保幼激素有相同功能的保幼激素类似物。烯虫炔酯、烯虫酯、烯虫乙酯等都是人工合成的重要保幼激素类似物，利用保幼激素类似物代替保幼激素应用到防治害虫中不仅生产成本更加低廉，而且是高效、可行。但是不同种类和浓度的保幼激素，在不同的昆虫中是否行使相同的生理作用，有待阐明。
繁殖天敌昆虫最为有效的方法之一就是低温冷藏，既可以提供稳定的虫源又能提高昆虫利用率。寄生蜂低温冷藏效果受到很多因素的影响，主要因素来自于虫体本身与体外环境间的关系。体外因素主要有：温度强度及冷藏时间。适宜冷藏温度及冷藏时间对延长寄生蜂的冷藏期且保持其较高的羽化率具有重要影响。
本研究采用保幼激素类似物与温度相结合的方法对烟蚜茧蜂的生长发育进行调控，为保存害虫天敌提供更有利条件。
发明内容
本发明的目的在于提供一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法。该方法利用保幼激素类似物与温度的双重调控实现对烟蚜茧蜂的生长发育的调控，既有效延迟僵蚜出蜂时间，又提高出蜂率。本发明的方法简便高效，成本低廉，安全可靠。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法为：将烟蚜茧蜂僵蚜浸入一定浓度的保幼激素类似物试剂中，然后取出，用滤纸吸干残留试剂，置于有盖塑料罐中；然后放置于相对湿度70±5%，光周期14L：10D，在不同温度下培养，观察记录僵蚜的出蜂情况。
上述调控方法中所述保幼激素类似物试剂的配置方法为：将10mg的保幼激素类似物原液溶于0.2mL丙酮中，用蒸馏水定容至2mL，配成2mL浓度为5000ng/μl的保幼激素类似物母液；然后将母液稀释至所需的浓度。
上述调控方法中所述保幼激素类似物试剂为ZR-512或者ZR-777。
上述调控方法中所述保幼激素类似物试剂为浓度为1000ng/μl的ZR-512或者浓度为200ng/μl ZR-777。
上述调控方法中烟蚜茧蜂僵蚜浸入一定浓度的保幼激素类似物试剂中5-6秒后取出。
上述调控方法中所述培养温度为10℃-26℃。
上述调控方法中所述保幼激素类似物试剂为浓度为1000ng/μl的ZR-512且培养温度为10℃；或者保幼激素类似物试剂为浓度1000ng/μl的ZR-512且培养温度为26℃；或者保幼激素类似物试剂为浓度200ng/μl 的ZR-777且培养温度为26℃。
上述一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法应用于延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间，其特征在于：应用所述方法延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间44-80h。
上述一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法应用于延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间，其特征在于：应用所述方法延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间80h。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是下述的实例仅仅是本发明其中的例子而已，并不代表本发明所限定的权利保护范围，本发明的权利保护范围以权利要求书为准。
实施例1不同温度及不同保幼激素组合对僵蚜出蜂的影响
烟草品种：烤烟K326。
烟蚜茧蜂虫源：采自于南平市烟草公司邵武市公司烟蚜茧蜂人工繁殖基地，并在室内饲养2-3代后进行试验。
试剂：ZR-512（烯虫乙酯）（纯度97.00%，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司生产）、ZR-777（烯虫炔酯）（纯度96.80%，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司生产）、丙酮（纯度99.5%，西陇科学股份有限公司生产）。
仪器材料：智能人工气候箱（MRC-250B-LED，宁波普朗特仪器有限公司生产）、防虫网罩（120目）、有盖塑料罐（直径×高=9.3cm×8.3cm）、滤纸、吸水棉、蒸馏水、离心管、毛笔刷、锥形瓶、烧杯。
试验溶液配制：将10mg的保幼激素类似物原液溶于0.2mL丙酮中，用蒸馏水定容至2mL，配成2mL浓度为5000ng/μl的保幼激素类似物母液。然后将母液依次稀释至所需的浓度。试验时，现配现用。必要时，将配制好的溶液放于4℃冰箱中备用。
（1）实验方法：
处理组：ZR-777、ZR-512母液用蒸馏水稀释至配置成浓度为5000 ng/μl的ZR-512、1000 ng/μl的ZR-512、200 ng/μl的ZR-777三种保幼激素类似物试剂，用于处理烟蚜茧蜂僵蚜。
对照组：蒸馏水和丙酮按9：1的体积比混合制成对照液，用于处理烟蚜茧蜂僵蚜。
采用液浸法：把具有大小一致、同时形成的30个僵蚜浸入配好的对照液或处理液中浸5-6秒、取出，并用滤纸吸干，置于有盖塑料罐中，每个处理（含对照）均设置1个塑料罐，重复3次；然后在相对湿度为75%，光周期为（12L：12D）的人工气候箱中进行。人工气候箱设置5个温度梯度，分别为：10℃，16℃，22℃，26℃，32℃，38℃。在处理后等观察记载僵蚜的羽化时间和羽化率。
（2）实验结果：
不同温度和不同激素组合对僵蚜出蜂的影响，如表1所示。
从表1可以看出：同一温度下，不同处理与对照对僵蚜出蜂延迟时间显著差异。与对照相比，10℃时，僵蚜出蜂延迟效果最好的是ZR-512（1000ng/μl）可延长约80.00h（约3.33d）。延迟效果次之的是ZR-512（5000ng/μl）可延长36.00h。ZR-777（200ng/μl）的表现为提早出蜂，提早8.00h，差异极显著（F 3，8=11.533，P=0.003）。16℃时，延迟僵蚜出蜂时间的激素为ZR-512（1000ng/μl）和ZR-512（5000ng/μl），分别延迟8.00和4.00h。ZR-777（200ng/μl）的表现为提早，提早12.00h，但差异不显著（F 3，8=1.333，P=0.330）。22℃时，除ZR-512（5000ng/μl）的提早44.00h外，ZR-777（200ng/μl）和ZR-512（1000ng/μl）分别延迟32.00h和40.00h，差异极显著（F 3，8=25.976，P=0.000）。26℃时，僵蚜延迟出蜂时间范围在24.00-56.00h之间，差异极显著（F 3，8=8.843，P=0.010）。其中，ZR-512（1000ng/μl）的延迟时间为56.00h；ZR-512（5000ng/μl）的延迟时间为24.00h；ZR-777（200ng/μl）的延迟时间为44.00h。32℃时，僵蚜延迟出蜂时间范围在12.00-20.00h之间，但差异不显著（F 3，8=0.718，P=0.569）。其中，ZR-512（1000ng/μl）的延迟时间较为20.00h；ZR-512（5000ng/μl）的延迟时间为12.00h；ZR-777（200ng/μl）的延迟时间为16.00h。38℃时，各处理僵蚜均未出蜂。
综上所述，从整体上来看延迟僵蚜出蜂效果好的3种组合为：在10℃时ZR-512（1000ng/μl）>在26℃时ZR-512（1000ng/μl）>在26℃时ZR-777（200ng/μl）。延迟僵蚜出蜂效果差（提早出蜂）的3种组合为：在22℃时ZR-512（5000ng/μl）>在16℃时ZR-777（200ng/μl）>在10℃时ZR-777（200ng/μl）。
从表2可以看出：同一温度下，不同处理与对照僵蚜出蜂率显著差异。与对照相比，10℃时，僵蚜出蜂率最高的是ZR-512（1000ng/μl）为80.00%；出蜂率最低的是ZR-777（200ng/μl）为40.00%，差异显著（F 3，8=4.821，P=0.033）。16℃时，僵蚜出蜂率最高的是ZR-512（5000ng/μl）为76.19%，差异不显著（F 3，8=0.861，P=0.500）。22℃时，僵蚜出蜂率最高的是ZR-777（200ng/μl）为77.78%；出蜂率最低的是ZR-512（5000ng/μl）为60.00%，差异不显著（F 3，8=0.780，P=0.538）。26℃时，僵蚜出蜂率最高的是ZR-512（5000ng/μl）为73.33%；出蜂率低的是ZR-777（200ng/μl）为63.33%，差异不显著（F 3，8=11.533，P=0.300）。32℃时，僵蚜出蜂率高的是ZR-512（5000ng/μl）为66.67%；出蜂率低的是ZR-777（200ng/μl）为40.00%，差异不显著（F 3，8=1.061，P=0.418）。38℃时，各处理僵蚜均未出蜂。
综合表1和表2的结果，以浓度为1000ng/μl的 ZR-512处理蚜茧蜂僵蚜，在温度为10℃，相对湿度为75%，光周期为（12L：12D）的条件下，延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间80h，的同时使僵蚜出蜂率达80.00%。10℃温度与1000ng/μl的 ZR-512保幼激素类似物的组合，既有效延迟烟蚜茧蜂出蜂时间，又提高出蜂率，作用效果显著。这对于烟蚜茧蜂人工繁殖，暂时保存烟蚜茧蜂僵蚜，在大田防治烟蚜时提供足量、整齐一致的烟蚜茧蜂僵具有重要意义。
实施例2
一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法为：将烟蚜茧蜂僵蚜，浸入浓度为1000ng/μl的 ZR-512保幼激素类似物试剂中5秒后取出，用滤纸吸干残留试剂，置于有盖塑料罐中；然后放置于相对湿度75%，光周期14L：10D，26℃温度下培养，观察记录僵蚜的出蜂情况。
实施例3
一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法为：将烟蚜茧蜂僵蚜，浸入浓度为1000ng/μl的 ZR-512保幼激素类似物试剂中6秒后取出，用滤纸吸干残留试剂，置于有盖塑料罐中；然后放置于相对湿度75%，光周期14L：10D，10℃温度下培养，观察记录僵蚜的出蜂情况。
实施例4
一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法为：将烟蚜茧蜂僵蚜，浸入浓度为200ng/μl 的ZR-777保幼激素类似物试剂中5秒后取出，用滤纸吸干残留试剂，置于有盖塑料罐中；然后放置于相对湿度75%，光周期14L：10D，26℃温度下培养，观察记录僵蚜的出蜂情况。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (6)
1.一种激素及温度对烟蚜茧蜂僵蚜出蜂的调控方法，其特征在于：将烟蚜茧蜂僵蚜浸入一定浓度的保幼激素类似物试剂中然后取出，用滤纸吸干残留试剂，置于有盖塑料罐中；然后放置于相对湿度75%，光周期14L：10D，在不同温度下培养，观察记录僵蚜的出蜂情况；
所述保幼激素类似物试剂为浓度为1000ng/μl的ZR-512或者浓度为200ng/μl 的ZR-777。
2.根据权利要求1所述的调控方法，其特征在于：烟蚜茧蜂僵蚜浸入保幼激素类似物试剂中的5-6秒后取出。
3.根据权利要求1所述的调控方法，其特征在于：所述培养温度为10℃-26℃。
4.根据权利要求1所述的调控方法，其特征在于：所述保幼激素类似物试剂为浓度为1000ng/μl的ZR-512且培养温度为10℃；或者保幼激素类似物试剂为浓度1000ng/μl的ZR-512且培养温度为26℃；或者保幼激素类似物试剂为浓度200ng/μl 的ZR-777且培养温度为26℃。
5.如权利要求1所述的调控方法在烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间调控中的应用，其特征在于：应用所述方法延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间44-80h。
6.根据权利要求5所述的调控方法在烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间调控中的应用，其特征在于：应用所述方法延迟烟蚜茧蜂僵蚜出蜂时间80h。
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