CN110402852A - 利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法 - Google Patents

利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法 Download PDF

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    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
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Abstract

本发明关于虎斑乌贼的养殖技术领域，特别是关于一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，包括1)亲体驯养：成年虎斑乌贼亲体入池驯养，投喂混杂海产藻类的活虾和/或活蟹和/或活鱼；2)生殖调控：依次进行周期性饥饿再投喂、以梯度变温的方式进行变温培养；3)采卵；4)保活保鲜：对规模化培育的受精卵抑制孵化并行C型钠肽联合半胱胺保活保鲜，最后进行孵化并育苗。利于提升虎斑乌贼亲体体质，促使亲体更早更快达到性成熟，增强其交配几率，实现了亲本同步性成熟和提高生殖配子质量，正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比得到显著降低，保活保鲜可加速乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步调高幼苗成活率。

Description

利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法
技术领域
本发明关于虎斑乌贼的养殖技术领域，特别是关于一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法。
背景技术
虎斑乌贼(Sepia pharaonis)，属于软体动物门、头足纲、乌贼目、乌贼科，广泛分布于菲律宾群岛、马来群岛、大洋洲东部、北部和西部以及印度近海、红海和我国南海海域，由于其个体大、蛋白质含量高、味道鲜美且营养丰富而广受消费者喜爱。近年来，其冰鲜市场价格约为30元/kg，活鲜价格更是达到了120元/kg，属于名优高档水产品。长期以来，商品虎斑乌贼主要来源于海洋捕捞。上世纪八十年代开始，由于过度捕捞和海域生态环境恶化，虎斑乌贼的自然资源遭到了极大破坏，导致海捕产量严重下降，促使人们开始研究虎斑乌贼的人工繁殖和养殖技术。
近年来，国内外对虎斑乌贼繁殖生物学的研究主要集中在胚胎发育过程及其影响因素等方面。Gabr等报道了虎斑乌贼各阶段生长发育规格大小以及其产卵孵化随季节变化规律。Minton等成功繁殖了五代虎斑乌贼。也有学者详细报道了虎斑乌贼胚胎孵化的发育过程及生理变化。在国内，已有成功培育虎斑乌贼种苗的报道。但是，由于对虎斑乌贼受精卵发育的环境条件缺乏了解，导致其孵化率不高，得到的幼体数量远远不能满足人工养殖的需求，因此，开发一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法就变得格外重要。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
发明内容
本发明的目的在于提供范文一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，利于提升虎斑乌贼亲体体质，促使亲体更早更快达到性成熟，增强其交配几率，实现了亲本同步性成熟和提高生殖配子质量，正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比得到显著降低，保活保鲜可加速乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步调高幼苗成活率。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案包括下述两个方面。
第一方面，本申请提供一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，包括下述步骤：
1)亲体驯养：驯养池中注入经预处理的海水并内挂附卵器，挑选成年健壮无外伤、胴体丰满的虎斑乌贼亲体入池驯养，投喂混杂海产藻类的活虾和/或活蟹和/或活鱼，日投饵量是其体质量的2～5％，早晚各投饵一次，每日清池并换水；以规则、完备、易控的驯养池对虎斑乌贼亲体进行驯养，有助于降低亲体死亡率，避免其因经受太多刺激而喷墨，导致驯养池污染；海产藻类可为乌贼亲体补充充足的虾青素，进而增强亲体的免疫能力；
2)生殖调控：亲体驯养期间，分别以下述方式进行生殖调控：周期性饥饿再投喂、以梯度变温的方式进行变温培养；以周期性饥饿再投喂和梯度变温进行高温培养的方式进行生殖调控，可在增加虎斑乌贼亲体免疫力的同时显著其产卵量和受精卵质量，生殖调控下，虎斑乌贼的正常受精卵占比得到提高，而且由于其受精卵质量较高，受精卵的刺激耐受性得到增强，具体表现为正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比降低；
3)采卵：驯养3周后亲体自然产卵，每天更换附满受精卵的附卵器消毒后转移至孵化池；以内挂在驯养池中的附卵器作为受精卵收集器，有效避免了卵粒堆叠在池底，采集受精卵时直接连同附卵器整体搬离，以更换附卵器的方式采卵降低了对虎斑乌贼亲体的应激刺激，还可避免附卵器上的受精卵受激喷墨而形成喷墨卵；
4)保活保鲜：孵化池内预先充入预处理的海水，控制温度在21℃以下，在20～30d内对规模化培育的受精卵抑制孵化并行C型钠肽联合半胱胺保活保鲜，最后进行孵化并育苗。
本申请中，首先选取健壮乌贼亲体进行驯养，投喂混杂海产藻类的活虾和/或活蟹和/或活鱼有助于增强乌贼亲体的免疫力，增强其活动能力，然后以周期性饥饿再投喂和高温培养的方式进行生殖调控，最后抑制孵化的同时经C型钠肽联合半胱胺保活保鲜，可在增加虎斑乌贼亲体免疫力的同时显著其产卵量和受精卵质量，虎斑乌贼的正常受精卵占比得到提高，而且由于其受精卵质量的原因导致，受精卵的刺激耐受性得到增强，具体表现为正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比降低，经C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对虎斑乌贼受精卵孵化时的细胞分裂具有积极作用，有助于加速卵细胞发育，降低死卵占比，提高卵裂率，加快乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步提高幼苗成活率，是一种高效益、高收益、低风险的虎斑乌贼前期养殖方法。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的驯养池以面积30～40m2，高度1.5～1.8m，池底和池面光滑为好；清池使用生石灰或漂白粉，生石灰使用量为600～800g/m2，漂白粉使用量为300～400g/m2；驯养池配备增氧、控温、排污、水处理系统，上方设置遮阳系统，驯养期间控制光照强度在200～500Lux范围内。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的海水经过下述方法预处理：海水取自无污染海区，经暗室沉淀、砂滤、臭氧消毒并经300目网袋过滤，并调节温度至18～20℃、盐度至30～33‰、pH至7.0～8.0，溶解氧不低于7mg/L，氨氮不高于0.02mg/L。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的附卵器采用18#铁丝为边框、规格为30×50cm或60×80cm、网目为1～2×1～2cm的尼龙网制成。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的虎斑乌贼亲体要求胴体长25～38cm，胴体宽18～25cm，体质量1.5～3.5kg/尾，入池雌雄比例是1.5～2.0:1。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的活虾可选自脊尾白虾、凡纳滨对虾和中国明对虾的至少一种。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤1)的活虾和/或活蟹和/或活鱼经选自礁膜、石莼、海带、裙带菜、紫菜和石花菜中的至少一种的海产藻类混杂，活虾和/或活蟹和/或活鱼与海产藻类混杂的重量比是30～50:1。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤2)的周期性饥饿再投喂具体指：驯养期每周的第一天以1/3的投食量投喂，每周的第二天以1/2的投食量投喂，每周的第三天以2/3的投食量投喂，其余均按正常量投喂。周期性饥饿再投喂给虎斑乌贼亲体营造一种饥饿胁迫，在该胁迫下，虎斑乌贼通过调节消化酶活性积极利用体内储能物质，从而维持机体生命，饥饿会引起消化器官的实质性变化，如肝胰腺萎缩等，进而降低消化酶的分泌，而在饥饿3d时，虎斑乌贼亲体对饥饿胁迫已具有一定适应性，从而肝脏脂肪酶活性又有一定的升高，消化酶的先降后升利于提升虎斑乌贼亲体的免疫能力、耐受能力、耐应激能力，而且饥饿也利于其活动量的加大，综合提升虎斑乌贼的运动能力，增强其交配几率，提高产卵率。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤2)的以梯度变温的方式进行变温培养具体指：以1～2℃/d，优选1℃/d的速率将温度升至28℃，然后再以1～2℃/d，优选1℃/d的速度将温度降至22℃，再以1～2℃/d，优选1℃/d的速率将温度升至30℃并保温。本申请发明人意外地发现，通过以梯度变温的方式进行变温培养有助于提升受精卵质量，其可能是由于变温环境促使乌贼亲体更早更快的达到性成熟，从而实现了亲本同步性成熟和提高生殖配子质量，生殖调控下，虎斑乌贼的正常受精卵占比得到提高，而且由于其受精卵质量较高，受精卵的刺激耐受性得到增强，具体表现为正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比降低。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤4)中预处理的海水与步骤1)的预处理海水相同。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤4)中预处理的海水用量是8～10L/10000粒卵。
本申请的发明内容及优选实施方案中，步骤4)中C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对受精卵进行保鲜保活时，C型钠肽的添加浓度是38～40nmol/L，半胱胺的添加浓度是6.2～8.0nmol/L，其中C型钠肽与半胱胺的物质的量比保持在5～6:1。本申请中，经C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对虎斑乌贼受精卵孵化时的细胞分裂具有积极作用，有助于加速卵细胞发育，降低死卵占比，提高卵裂率，加快乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步提高幼苗成活率。
本虎斑乌贼的养殖方法，经过更为细致具体化的养殖要点控制，可以大大提高虎斑乌贼受精卵的产卵数量和受精卵质量，单体雌性亲体产卵可达3200粒以上，单卵质量也得到显著提高，其卵长径可达30mm以上，卵短径则可达14mm以上，单卵质量可达3.5g以上，而且产卵中后期虎斑乌贼受精卵的尺寸和质量没有明显降低，直接提高了最终所孵出幼苗的孵化率和成活率，降低死卵率，提升经济收益；另一方面，经C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对虎斑乌贼受精卵孵化时的细胞分裂具有积极作用，有助于加速卵细胞发育，降低死卵占比，提高卵裂率，加快乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步提高幼苗成活率，可将孵出率以及幼苗存活率(4周)提升至99％以上，养殖效益得到较大程度的提升。
进一步地，本申请的发明内容及优选实施方案中还包括具体如下的孵化步骤：控制孵化池条件为：均匀漫射光光照度800～2000Lux、水温25～30℃、盐度25～33‰、pH值7.0～8.0、氨氮在0.02mg/L以下、保持溶解氧7mg/L以上；初孵幼体培育密度控制在15000～20000万只/m3，中后期逐渐降低培育密度，后期培育2～3cm苗密度为3000～5000只/m3。温度对虎斑乌贼受精卵孵化的影响主要表现为参与受精卵中孵化酶活性的影响，是由于在适当的温度范围内，温度升高可以提高孵化酶活性，从而缩短孵化时间，盐度可给予孵化水环境以适宜的渗透压，可与受精卵内渗透压保持平衡，从而保持卵的内环境相对稳定，提高孵化率；中性或弱碱性海水环境利于虎斑乌贼受精卵的孵化，本申请的孵化池条件将会提高孵化率，节约生产成本。
第二方面，本申请还提供第一个方面所述的方法在虎斑乌贼养殖中的应用。
本发明的有益效果为：
1)周期性饥饿再投喂利于提升虎斑乌贼亲体的免疫能力、耐受能力、耐应激能力，而且饥饿也利于其活动量的加大，综合提升虎斑乌贼的运动能力，增强其交配几率，提高产卵率；
2)通过以梯度变温的方式进行变温培养有助于提升受精卵质量，其可能是由于变温环境促使乌贼亲体更早更快的达到性成熟，从而实现了亲本同步性成熟和提高生殖配子质量，生殖调控下，虎斑乌贼的正常受精卵占比得到提高，而且由于其受精卵质量较高，受精卵的刺激耐受性得到增强，具体表现为正常受精卵向喷墨受精卵转变的占比降低；
3)经C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对虎斑乌贼受精卵孵化时的细胞分裂具有积极作用，有助于加速卵细胞发育，降低死卵占比，提高卵裂率，加快乌贼幼体孵出，增进幼体发育，进一步提高幼苗成活率，可将孵出率以及幼苗存活率(4周)提升至99％以上，养殖效益得到较大程度的提升；
4)以内挂在驯养池中的附卵器作为受精卵收集器，有效避免了卵粒堆叠在池底，采集受精卵时直接连同附卵器整体搬离，以更换附卵器的方式采卵降低了对虎斑乌贼亲体的应激刺激，还可避免附卵器上的受精卵受激喷墨而形成喷墨卵；
5)本发明方法可大大提高虎斑乌贼受精卵的产卵数量和受精卵质量，单体雌性亲体产卵可达3200粒以上，单卵质量也得到显著提高，其卵长径可达30mm以上，短径则可达14mm以上，单卵质量可达3.5g以上，而且产卵中后期虎斑乌贼受精卵的尺寸和质量没有明显降低，直接提高了最终所孵出幼苗的孵化率和成活率，降低死卵率，提升经济收益。
本发明采用了上述技术方案提供范文，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
附图说明
为让本发明的上述和其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附附图的说明如下：
图1为本发明的不同实施例的受精卵的尺寸和重量统计示意图。
具体实施方式
除非另有定义，本文所使用的技术和科学术语，具有本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本发明使用本文中所描述的方法和材料；但本领域中已知的其他合适的方法和材料也可以被使用。本文中所描述的材料、方法和实例仅是说明性的，并不是用来作为限制。所有出版物、专利申请案、专利案、临时申请案、数据库条目及本文中提及的其它参考文献等，其整体被并入本文中作为参考。若有冲突，以本说明书包括定义为准。
实施例1：
本实施例提供一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，包括下述步骤：
1)亲体驯养：驯养池中注入经预处理的海水并内挂附卵器，挑选成年健壮无外伤、胴体丰满的虎斑乌贼亲体入池驯养，投喂混杂海产藻类的活虾，日投饵量是其体质量的4％，早晚各投饵一次，每日清池并换水；
2)生殖调控：亲体驯养期间，分别以下述方式进行生殖调控：周期性饥饿再投喂、以梯度变温的方式进行变温培养；
3)采卵：驯养3周后亲体自然产卵，每天更换附满受精卵的附卵器消毒后转移至孵化池；
4)保活保鲜：孵化池内预先充入预处理的海水，控制温度在20℃，在25d内对规模化培育的受精卵抑制孵化并行C型钠肽联合半胱胺保活保鲜，最后进行孵化并育苗。
本优选实施方案中，步骤1)的驯养池面积35m2，高度1.5m，池底和池面光滑；清池使用750g/m2生石灰；驯养池配备增氧、控温、排污、水处理系统，上方设置遮阳系统，驯养期间控制光照强度400Lux。
本优选实施方案中，步骤1)的海水经过下述方法预处理：海水取自无污染海区，经暗室沉淀、砂滤、臭氧消毒并经300目网袋过滤，并调节温度至20℃、盐度至32‰、pH至7.5，溶解氧7mg/L，氨氮不高于0.02mg/L。
本优选实施方案中，步骤1)的附卵器采用18#铁丝为边框、规格为60×80cm、网目为1×1cm的尼龙网制成。
本优选实施方案中，步骤1)的虎斑乌贼亲体要求胴体长30～35cm，胴体宽22～25cm，体质量2.0～3.5kg/尾，入池雌雄比例是2:1。
本优选实施方案中，步骤1)的活虾是脊尾白虾。
本优选实施方案中，步骤1)的活虾经石莼混杂，活虾与海产藻类混杂的重量比是40:1。
本优选实施方案中，步骤2)的周期性饥饿再投喂具体指：驯养期每周的第一天以1/3的投食量投喂，每周的第二天以1/2的投食量投喂，每周的第三天以2/3的投食量投喂，其余均按正常量投喂。
本优选实施方案中，步骤2)的以梯度变温的方式进行变温培养具体指：以1℃/d的速率将温度升至28℃，然后再以1℃/d的速度将温度降至22℃，再以1℃/d的速率将温度升至30℃并保温。
本及优选实施方案中，步骤4)中预处理的海水与步骤1)的预处理海水相同。
本优选实施方案中，步骤4)中预处理的海水用量是10L/10000粒卵。
本优选实施方案中，步骤4)中C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对受精卵进行保鲜保活时，C型钠肽的添加浓度是40nmol/L，半胱胺的添加浓度是7.5nmol/L。
本优选实施方案中还包括具体如下的孵化步骤：控制孵化池条件为：均匀漫射光光照度1000Lux、水温28℃、盐度30‰、pH值7.4、氨氮在0.02mg/L以下、保持溶解氧7mg/L以上；初孵幼体培育密度控制在15000只/m3，中后期逐渐降低培育密度，后期培育2～3cm苗密度为5000只/m3。
实施例2～9：
实施例2～9分别提供另数种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，其分别与实施例1类似，不同之处如表1所述。
表1、实施例2～9中的养殖方法与实施例1的不同之处
注：表1中，“/”意为所述实施例的所述操作与实施例1一致；“未进行”意为所述实施例中未进行该项操作。
实验例1：
分别抽样统计实施例1～6中受精卵的卵长径、卵短径以及卵重，统计结果如图1所示。由图1的图示可以看出，本申请优选实施方案1中的受精卵在尺寸和重量上明显优于实施例2～6，表明实施例1中的受精卵的质量较高，是一种高效率、高效益的虎斑乌贼养殖方法。
实验例2：
分别统计实施例1～9中雌性亲体单体产卵量、喷墨卵发生率、卵孵出率以及乌贼幼体4周存活率，统计结果如表2所示。由表2的数据可知，本申请的优选实施方案1中的雌性单体产卵量最高，卵孵出率以及乌贼幼体4周存活率均接近100％，而且实施例1中的喷墨卵发生率较低。
表2、虎斑乌贼受精卵的统计分析
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
虽然上述具体实施方式已经显示、描述并指出应用于各种实施方案的新颖特征，但应理解，在不脱离本公开内容的精神的前提下，可对所说明的装置或方法的形式和细节进行各种省略、替换和改变。另外，上述各种特征和方法可彼此独立地使用，或可以各种方式组合。所有可能的组合和子组合均旨在落在本公开内容的范围内。上述许多实施方案包括类似的组分，并且因此，这些类似的组分在不同的实施方案中可互换。虽然已经在某些实施方案和实施例的上下文中公开了本发明，但本领域技术人员应理解，本发明可超出具体公开的实施方案延伸至其它的替代实施方案和/或应用以及其明显的修改和等同物。因此，本发明不旨在受本文优选实施方案的具体公开内容限制。

Claims (10)

1.一种利于提高虎斑乌贼产卵数量与质量的养殖方法，其特征在于包括：
1)亲体驯养：驯养池中注入经预处理的海水并内挂附卵器，挑选成年虎斑乌贼亲体入池驯养，投喂混杂海产藻类的活虾和/或活蟹和/或活鱼；
2)生殖调控：亲体驯养期间，分别以下述方式进行生殖调控：周期性饥饿再投喂、以梯度变温的方式进行变温培养；
3)采卵：驯养3周后亲体自然产卵，每天更换附满受精卵的附卵器消毒后转移至孵化池；
4)保活保鲜：孵化池内预先充入预处理的海水，控制温度在21℃以下，在20～30d内对规模化培育的受精卵抑制孵化并行C型钠肽联合半胱胺保活保鲜，最后进行孵化并育苗。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)的海水经过下述方法预处理：海水取自无污染海区，经暗室沉淀、砂滤、臭氧消毒并经300目网袋过滤，并调节温度至18～20℃、盐度至30～33‰、pH至7.0～8.0，溶解氧不低于7mg/L，氨氮不高于0.02mg/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)的活虾和/或活蟹和/或活鱼经海产藻类混杂，活虾和/或活蟹和/或活鱼与海产藻类混杂的重量比是30～50:1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)的周期性饥饿再投喂具体指：驯养期每周的第一天以1/3的投食量投喂，每周的第二天以1/2的投食量投喂，每周的第三天以2/3的投食量投喂，其余均按正常量投喂。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)的以梯度变温的方式进行变温培养具体指：以1～2℃/d，优选1℃/d的速率将温度升至28℃，然后再以1～2℃/d，优选1℃/d的速度将温度降至22℃，再以1～2℃/d，优选1℃/d的速率将温度升至30℃并保温。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤4)中预处理的海水用量是8～10L/10000粒卵。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤4)中C型钠肽联合半胱胺保活保鲜对受精卵进行保鲜保活时，C型钠肽的添加浓度是38～40nmol/L，半胱胺的添加浓度是6.2～8.0nmol/L。
8.根据权利要求1或7所述的方法，其特征在于：所述步骤4)中C型钠肽与半胱胺的物质的量比保持在5～6:1。
9.根据权利要求1～7任一项所述的方法，其特征在于：还包括具体如下的孵化步骤：控制孵化池条件为：均匀漫射光光照度800～2000Lux、水温25～30℃、盐度25～33‰、pH值7.0～8.0、氨氮在0.02mg/L以下、保持溶解氧7mg/L以上；
初孵幼体培育密度控制在15000～20000万只/m3，中后期逐渐降低培育密度，后期培育2～3cm苗密度为3000～5000只/m3。
10.权利要求1～9任一项所述的方法在虎斑乌贼养殖中的应用。
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