CN110352985B - 含有枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含有枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物及其应用，该组合物有效成分由枯草芽孢杆菌和速克灵组成，所述芽孢杆菌和速克灵质量比为4:1~1:4。本发明还公开了含有芽孢杆菌Pc3和速克灵的组合物在防治油菜菌核病方面的应用。本发明的杀菌组合物与单剂相比对油菜菌核病的防治具有明显的增效作用，可显著提高防治效果；降低了油菜菌核病病原菌对速克灵的潜在耐药风险；减少了化学农药使用量，有效降低了农产品的农药残留和环境污染，对人畜、有益生物及环境安全。
Description
技术领域
本发明属于农药领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌（Bacillus sp.）Pc3和速克灵的组合物及其在防治油菜菌核病中的应用。
背景技术
由核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起的油菜菌核病是油菜生产中的重要病害之一，常年病株率为10%～30%，严重的可达80%以上，病株一般减产10%～70%。油菜是产油效率最高的油料作物之一，目前油菜菌核病的主要防治措施是化学防治、农业防治和生物防治。但至今为止，未发现高效的抗菌核病品种，因此目前对该病害防治主要还是采用化学防治方法，使用最多的是苯并咪唑类杀菌剂。随着化学药剂的常年使用，油菜菌核病菌对杀菌剂产生了明显的耐药性，从而使化学药剂的防治效果下降，甚至防治失败。近年来，随着人们对食品安全、生态环境安全的高度重视，开拓以安全、高效、无公害微生物复配农药为主的综合防治油菜菌核病的技术体系迫在眉睫。
芽孢杆菌属细菌，为生物杀菌剂类，是内生芽孢的革兰氏阳性细菌，通过定殖至植物根际、体表或体内，同病原菌竞争植物周围的营养，分泌抗菌活性物质抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。芽孢杆菌杀菌剂克服了传统化学农药污染环境、危害人畜、易产生耐药性等缺点，具有选择性强、安全、原料简单等优点, 在微生物杀菌剂市场中崭露头角。
芽孢杆菌(Bacillus sp.) Pc3(Wenbin Guo, Pengfei Cui, Xinhua Chen.Complete genome of Bacillus sp. Pc3 isolated from the Antarctic seawater withantimicrobial activity. Marine Genomics, 2015, 20: 1–2.)，从南极海域深海环境样品中分离得到，抑菌谱较广，对多种病原真菌尤其是油菜菌核病菌有很强的抑制作用；生长速度快，适应环境能力强，易于在植物表面定殖，并形成优势种群；可分泌多种抗菌活性物质，对油菜菌核病的防治效果较好,经鉴定命名为枯草芽孢杆菌。该菌株于2013 年10月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2013470，中国典型培养物保藏中心的地址为中国，武汉，武汉大学。
速克灵，又称腐霉利，是日本住友化学株式会社发明的二甲酰亚胺类低毒类杀菌剂，具有保护、治疗双重作用，使用安全，持效期较长。该药既可保护作物不受病菌侵染，又能杀灭已经侵入到植物体内部的病菌，并能有效阻止病斑扩展。因此，在发病前进行保护性使用或在发病初期进行治疗性使用均可获得满意防治效果。
发明内容
本发明的目的在于针对目前生产上大量使用化学农药防治油菜菌核病所致农药残留超标、病原菌耐药性增强、环境污染严重、油菜品质下降等严重问题，提供一种对油菜菌核病具有较好防治和增效作用的以芽孢杆菌Pc3和速克灵为主要活性物质的组合物。芽胞杆菌与速克灵组合具有明显的协同增效作用；降低了现有病原菌对速克灵的潜在耐药风险；弥补了芽孢杆菌Pc3控制油菜菌核病作用缓慢的不足；减少了化学农药的使用量，从而使该组合物可以安全有效地应用于防治油菜菌核病。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种含枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物，该组合物以芽孢杆菌Pc3和速克灵为活性成分，其质量比为1000:1~1：1000；芽孢杆菌Pc3和速克灵的质量比优选为500:1~1：500，进一步优化为100：1~1:100，更优选为50:1~1:50，最优选为4:1~1：4。本发明所采用的芽孢杆菌Pc3中活孢子数为0.1亿/克~1000亿/克，优选为0.5亿/克~500亿/克，进一步优选为1亿/克~250亿/克，最优选为10亿/克~100亿/克。
向活性成分芽孢杆菌Pc3和速克灵中加入农药助剂后即配得可湿性粉剂、悬浮剂、悬乳剂或水乳剂等制剂。其中组合物占制剂总重量的20%~60%，助剂占制剂总重量的10%~30%，其余为填料。速克灵可以采用原药，芽孢杆菌采用原粉，助剂可以选用湿润剂、分散剂、消泡剂、渗透剂、防冻剂、增稠剂、增效剂等各类助剂中的一种或几种；填料可选轻质碳酸钙、白炭黑、高岭土等中的一种或几种。如向活性成分芽孢杆菌Pc3和速克灵中加入助剂和载体，调节pH值为5~7后，经气流粉碎后，在锥形混合机内搅拌30分钟即可配成可湿性粉剂。
本发明的优点在于：
本发明的组合物降低了油菜菌核病病原菌对速克灵的潜在耐药风险，将芽孢杆菌Pc3与速克灵组合后，二者之间具有明显的增效作用，同时大大减少了化学农药使用量，从而使该组合物可以有效地应用于油菜菌核病的防治。
具体实施方式
实施例1：25% 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 5
速克灵 20
十二烷基硫酸钠 2
木质素磺酸钠 4
渗透剂JFC 4
白炭黑 30
高岭土 补足至100
（调pH值6）。
实施例2：30% 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 15
速克灵 15
十二烷基硫酸钠 2
木质素磺酸钠 4
渗透剂JFC 4
白炭黑 30
高岭土 补足至100
（调pH值5）。
实施例3: 35% 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 28
速克灵 7
十二烷基苯磺酸纳 2
木质素磺酸钠 4
白炭黑 7
高岭土 余量/2
凹凸棒土 余量/2。
（调pH值6）
实施例4: 40% 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 30
速克灵 10
十二烷基苯磺酸纳 2
木质素磺酸钠 4
白炭黑 7
高岭土 余量/2
凹凸棒土 余量/2
（调pH值7）。
实施例5: 45 % 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 30
速克灵 15
十二烷基苯磺酸纳 2
木质素磺酸钠 4
白炭黑 7
高岭土 余量/2
凹凸棒土 余量/2
（调pH值5）。
实施例6：60 % 可湿性粉剂的配制（各组分为质量份）
芽孢杆菌Pc3（100亿活孢子/克） 20
速克灵 40
净洗剂LS 2
扩散剂N 4
十二烷基硫酸钠 2
轻质碳酸钠 32
（调pH值6）。
实施例7：实施例1-实施例6所配置的芽孢杆菌与速克灵的杀菌组合物对盆栽油菜菌核病的防效(％)。
将实施例1-实施例6所配置的芽孢杆菌与速克灵的杀菌组合物、100亿活孢子/克芽孢杆菌Pc3母粉、50%速克灵可湿性粉剂和空白对照共9个处理，每个处理3次重复，喷雾，于24小时后将新鲜的油菜菌核病菌打成直径为0.5 cm的菌碟接种油菜叶片的中部，每个处理接10株油菜，每株接4张叶片，菌丝块上加脱脂棉保湿，接种5天后调查发病指数，统计防治效果，每个处理对盆栽油菜菌核病的防效结果见表1。
表1
注：a: 理论防效%=（实施例中芽孢杆菌单剂防效×所占比例＋速克灵防效×所占比例）×100
b: 增效效果%=（实施例防治效果—理论防效）/理论防效×100
从表1可以看出在油菜开花期至盛花期这个关键时期喷药后，本发明的6个制剂实施例在防治盆栽油菜菌核病时均有明显的增效作用。实施例对油菜菌核病的防治效果基本都在80%以上，特别是实施例2和实施例6防治效果达到85%左右，分别为84.19%、85.52%；实施例3和实施例5的增效作用明显，对油菜菌核病的防治增效效果在30%左右，分别为30.73%和29.17%，防治效果极显著，明显高于对照药剂且对油菜生长安全。
实施例8 实施例1-实施例6所配置的芽孢杆菌与速克灵的杀菌组合物防治油菜菌核病的田间效果
本发明试验共设置实施例1-实施例6所配置的芽孢杆菌与速克灵的杀菌组合物、100亿活孢子/克芽孢杆菌Pc3母粉、50%速克灵可湿性粉剂和空白对照共9个处理，每个处理3次重复，小区面积40㎡，于油菜开花期至盛花期喷洒2次，每亩兑水50公斤均匀喷雾，第二次药后10天调查各处理油菜菌核病病情指数，并以对照区的病情指数计算相对防治效果，调查结果如表2。
表2
注：a: 理论防效%=（实施例中芽孢杆菌单剂防效×所占比例＋速克灵防效×所占比例）×100
b: 增效效果%=（实施例防治效果—理论防效）/理论防效×100
从表2可以看出在油菜开花期至盛花期这个关键时期喷药后，本发明的6个制剂实施例均表现出对抑制油菜菌核病病原菌的生长具有明显的增效作用，与盆栽结果基本一致。实施例1、2、5、6对油菜菌核病的防治效果均在80%以上，特别是实施例2和实施例6防治效果达到85%以上，分别为85.10%、85.91%；实施例3和实施例5的增效作用明显，对油菜菌核病的防治增效效果分别为32.76%和31.46%，明显高于对照药剂且对油菜生长安全，田间没有发现药害。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (2)
1. 一种含枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物在油菜开花期至盛花期时防治油菜菌核病中的应用，其特征在于：所述组合物以枯草芽孢杆菌Pc3和速克灵为活性成分，枯草芽孢杆菌Pc3和速克灵质量比为1:2，枯草芽孢杆菌Pc3中活孢子数为100亿/克；所述芽孢杆菌Pc3保藏号为CCTCC M 2013470。
2.如权利要求1所述一种含枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物在油菜开花期至盛花期时防治油菜菌核病中的应用，其特征在于：所述组合物用于制备可湿性粉剂、悬浮剂、悬乳剂或水乳剂。
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| CN201910599933.XA CN110352985B (zh) | 2019-07-04 | 2019-07-04 | 含有枯草芽孢杆菌和速克灵的组合物及其应用 |
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| CN103589674B (zh) * | 2013-12-02 | 2015-07-01 | 国家海洋局第三海洋研究所 | 枯草芽孢杆菌Pc3及其在制备防治植物致病真菌发酵上清液中的应用 |
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