CN110279753A - 一种茶树酵素及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种茶树酵素及其制备方法和应用，属于酵素加工技术领域，所述茶树酵素由包括以下质量份的原料制备得到：澳洲茶树饼粕35～45份、蔗糖0.6～1份、复合菌剂1～1.4份和水80～120份；所述复合菌剂包括植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159；所述复合菌剂的有效活菌数大于1×107cfu/g。本发明的茶树酵素以澳洲茶树饼粕为原料，使得澳洲茶树饼粕得到了合理利用；并且本发明的茶树酵素能够清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基，具有良好的抗氧化功效。

Description

一种茶树酵素及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及酵素加工技术领域，尤其涉及一种茶树酵素及其制备方法和应用。
背景技术
澳洲茶树学名为互叶白千层为桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(Melaleuca)互叶白千层(Melaleucaalternifolia)，原产于澳大利亚的新南威尔士州和新西兰的部分地区。在前一个国家，这种植物被称为茶树，并已被用于从土著人民那里学到的民间医学。其树高可达6m，树干突瘤状弯曲，树皮多层、柔软、具弹性，似海绵；叶互生，呈披针形，酷似相思树叶；夏季到秋季开花，圆柱形穗状花序顶生于枝梢，小瓶刷状，乳黄色，是非常美丽的庭院树、行道树和防风树。白千层属植物我国有3种，分别为白千层(MelaleucaleucadendronLinn.)、互叶白千层(MelaleucaalternifoliaLinn.)、细花白千层(MelaleucaparvifloraLindl.)，分布于海南、广西、广东、四川等地。互叶白千层具有非常高的经济价值，其枝叶提取的精油“茶树油”，市场上天然保健医药品材料。互叶白千层油具有比较明显的杀菌、抗菌和抗病毒作用，能增加人体自身的保护能力和免疫力，防止各种疾病感染。其性温和、渗透性强，能有效治疗表面创伤。其气味芳香，可用于香料、香水的生产，有清醒头脑的功效。
目前对澳洲茶树的开发利用主要是作为精油的制备原料，对于除精油外澳洲茶树饼粕的研究较少。在生产中，澳洲茶树枝叶经过提取精油后的饼粕作为废料处理，造成大规模的浪费。
发明内容
本发明的目的在于提供一种茶树酵素及其制备方法和应用，该茶树酵素具有抗氧化功效。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种茶树酵素，由包括以下质量份的原料制备得到：澳洲茶树饼粕35～45份、蔗糖0.6～1份、复合菌剂1～1.4份和水80～120份；所述复合菌剂包括植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159；所述复合菌剂的有效活菌数为大于1×107cfu/g。
优选的，所述茶树酵素包括第一组分和/或第二组分；所述第一组分包括以下质量份的成分：多糖0.1～0.3份、黄酮0.10～0.15份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质0.2～0.4份和多酚0.6～1份；所述第二组分包括以下质量份的成分：多糖1.5～1.8份、黄酮0.12～0.18份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质2.5～3份、粗纤维50～55份、灰分5～5.5份和多酚1.4～1.8份。
优选的，所述第一组分包括以下质量份的成分：多糖0.2份、黄酮0.12份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质0.3份和多酚0.8份；所述第二组分包括以下质量份的成分：多糖1.65份、黄酮0.15份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质2.71份、粗纤维53.8份、灰分5.31份和多酚1.59份。
优选的，所述复合菌剂中植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159的有效活菌数的比例为(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5)。
本发明还提供了上述方案所述茶树酵素的制备方法，包括以下步骤：
1)将所述澳洲茶树饼粕粉碎得到澳洲茶树饼粕粉，将所述澳洲茶树饼粕粉、蔗糖和水混合，得到发酵料；
2)将所述复合菌剂接种于步骤1)所述发酵料，在25～40℃条件下发酵30～40d，得到茶树酵素。
优选的，步骤1)中所述澳洲茶树饼粕粉的粒径≤0.85mm。
优选的，在步骤2)得到茶树酵素后，还包括对所述茶树酵素进行固液分离，收集液体成分得到第一组分，收集固体成分得到第二组分。
本发明还提供了上述方案所述茶树酵素在制备具有抗氧化功效的食品、保健品或药品中的应用。
本发明的有益效果：本发明提供了一种茶树酵素，由包括以下质量份的原料制备得到：澳洲茶树饼粕35～45份、蔗糖0.6～1份、复合菌剂1～1.4份和水80～120份；所述复合菌剂包括植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159；所述复合菌剂的有效活菌数大于1×107cfu/g。本发明的茶树酵素以澳洲茶树饼粕为原料，使得澳洲茶树饼粕得到了合理利用；并且本发明的茶树酵素能够清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基，具有良好的抗氧化功效。
附图说明
图1为茶树酵素生产工艺流程图。
具体实施方式
本发明提供了一种茶树酵素，由包括以下质量份的原料制备得到：澳洲茶树饼粕35～45份、蔗糖0.6～1份、复合菌剂1～1.4份和水80～120份；所述复合菌剂包括植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159；所述复合菌剂的有效活菌数大于1×107cfu/g。
本发明中，所述茶树酵素优选的包括第一组分和/或第二组分。
本发明中，所述第一组分优选的包括以下质量份的成分：多糖0.1～0.3份、黄酮0.10～0.15份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质0.2～0.4份和多酚0.6～1份；更优选的，所述第一组分包括以下质量份的成分：多糖0.2份、黄酮0.12份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质0.3份和多酚0.8份；所述第一组分为液体。
本发明中，所述第二组分优选的包括以下质量份的成分：多糖1.5～1.8份、黄酮0.12～0.18份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质2.5～3份、粗纤维50～55份、灰分5～5.5份和多酚1.4～1.8份；更优选的，所述第二组分包括以下质量份的成分：多糖1.65份、黄酮0.15份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质2.71份、粗纤维53.8份、灰分5.31份和多酚1.59份；所述第二组分为固体。
本发明中，所述澳洲茶树饼粕优选购自于天津中澳嘉喜诺生物科技有限公司；所述澳洲茶树饼粕含有以下质量百分含量的成分：多糖1.65％、黄酮0.12％、蛋白2.71％、粗纤维53.8％、粗脂肪4.2％和多酚1.59％。
本发明中，所述复合菌剂中植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159的有效活菌数的比例优选为(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5)；更优选为1:1:1:1:1。
本发明还提供了上述方案所述茶树酵素的制备方法，包括以下步骤：
1)将所述澳洲茶树饼粕粉碎得到澳洲茶树饼粕粉，将所述澳洲茶树饼粕粉、蔗糖和水混合，得到发酵料；
2)将所述复合菌剂接种于步骤1)所述发酵料，在25～40℃条件下发酵30～40d，得到茶树酵素。
本发明所述茶树酵素的制备方法的流程图参见图1。
本发明在将所述澳洲茶树饼粕粉碎前，优选的还包括对所述澳洲茶树饼粕进行干燥；所述干燥的温度优选为40～50℃，更优选为45℃；所述干燥的时间优选为1～3h，更优选为2h；所述干燥的方式优选为烘干。
对澳洲茶树饼粕干燥后，将所述干燥后的澳洲茶树饼粕粉碎得到澳洲茶树饼粕粉，将所述澳洲茶树饼粕粉、蔗糖和水混合，得到发酵料；所述粉碎的设备优选为木材粉碎机(品牌:恒丰，型号:1000)；本发明对所述粉碎的时间没有特殊限制，以所述澳洲茶树饼粕粉的粒径≤0.85mm为准；本发明对所述混合的时间、温度和方式没有特殊限制，以混合均匀为准。
得到发酵料后，本发明将复合菌剂接种于所述发酵料，在25～40℃条件下发酵30～40d，得到茶树酵素；所述发酵的温度优选为30～35℃；所述发酵的时间优选为35d。
在得到茶树酵素后，本发明还包括对所述茶树酵素进行固液分离，收集液体成分得到第一组分，收集固体成分得到第二组分；所述固液分离的方式优选为离心或膜过滤；所述离心的转速优选为1500～2500rpm，更优选为2000rpm；所述离心的时间优选为15～20min；所述膜过滤采用的滤膜的孔径优选为0.45um。
本发明还提供了上述方案所述茶树酵素在制备具有抗氧化功效的食品、保健品或药品中的应用；所述抗氧化功效包括清除DPPH自由基和/或清除超氧阴离子自由基。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)原料处理：将烘干的澳洲茶树饼粕用粉碎机粉碎后过20目的筛子，收集备用；
(2)混合：将40g澳洲茶树饼粕加80mL的蒸馏水于三角锥形瓶中，再加入0.8g蔗糖混合均匀，得到发酵料；
(3)接菌：将(2)中的发酵料中加入1g复合菌剂(其中植物乳杆菌6326(Lactobacillusplantarum)、干酪乳杆菌10674(Lactobacilluscasei)、拜尔酵母16183(ZygosaccharomycesBailii)，嗜热链球菌15160(Streptococcus thermophilus)，保加利亚乳杆菌15159(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)，菌种比例为1：1：1：1：1)，复合菌剂的有效活菌数为1×107cfu/g；
(4)发酵：在25℃条件下发酵40d，得到茶树酵素；
(5)分离：将发酵的混合酵素于离心机中2000rpm离心分离15min，取上清，既得茶树酵素第一组分。
实施例2
(1)原料处理：将烘干的澳洲茶树饼粕用粉碎机粉碎后过20目的筛子，收集备用；
(2)灭菌：将40g澳洲茶树饼粕加100mL的蒸馏水于三角锥形瓶中，再加入0.8g蔗糖混合均匀，得到发酵料；
(3)接种：将(2)中的发酵料中加入1.2g复合菌剂(其中植物乳杆菌6326(Lactobacillusplantarum)、干酪乳杆菌10674(Lactobacilluscasei)、拜尔酵母16183(ZygosaccharomycesBailii)，嗜热链球菌15160(Streptococcus thermophilus)，保加利亚乳杆菌15159(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)，菌种比例为1：1：1：1：1)，复合菌剂的有效活菌数为1×108cfu/g；
(4)发酵：在30℃条件下发酵35d，得到茶树酵素；
(5)分离：将发酵的混合酵素于离心机中2000rpm离心分离20min，去上清，得沉淀部分既得茶树酵素第二组分。
实施例3DPPH·清除力测定
1.待测定样品：实施例1制备的茶树酵素第一组分(酵素1)、实施例2制备的茶树酵素第二组分(酵素2)；
2.测定方法
不同浓度的样品分别加入1mL0.2mmol/LDPPH，置于室温下遮光反应30min，离心(6000r/min，10min)，上清液在517nm处测A517，空白组样品以等体积无水乙醇代替DPPH无水乙醇溶液，对照组样品以等体积蒸馏水代替样品溶液，并以等体积蒸馏水和无水乙醇混合液空白调零。清除率按以下公式计算：
清除率(％)＝[(Acontrol-Asample)/Acontrol]×100
3.测定结果
通过DPPH·清除力测定，得到结果如表1所示，酵素1在浓度500μg/mL时，DPPH·清除力达到40％；酵素2DPPH·清除力随着浓度的增加而增加，浓度为900μg/mL时，达到27％以上。试验中发现低剂量时其DPPH·清除力能力与VC相近，但是大于600μg/mLVC的DPPH·清除力显著高于酵素对DPPH·清除力。
表1澳洲茶树酵素对DPPH的清除效果
实施例4超氧阴离子自由基清除力的测定
1.待测定样品：实施例1制备的茶树酵素第一组分(酵素1)、实施例2制备的茶树酵素第二组分(酵素2)；
2.测定方法
不同浓度的样品分别加入到3mL的Tris-HCl缓冲液(pH8.2)中，混匀后25℃水浴20min。然后加入0.4mL的邻苯三酚溶液(25mM)，准确反应4min，最后用0.5mL的浓HCl终止反应，在325nm下测吸光度值，对照组样品用等体积去离子水代替样品溶液。
清除率(％)＝[1-(A0-A1)/AS]×100％
A0:样品组的吸光度
AI:样品底色吸光度
AS:对照组吸光度
4.测定结果
通过对超氧阴离子自由基清除能力测定，发现酵素1和酵素2对超氧阴离子有一定的清除效果，分别达到20％和16％以上。
表2澳洲茶树酵素对超氧阴离子自由基清除能力
样品浓度(μg/mL) 酵素1的清除率％ 酵素2清除率％ VC清除率
200 16.3％ 13.8％ 15.8％
400 16.9％ 15.2％ 30.3％
600 18.5％ 16.8％ 52.5％
800 20.1％ 16.5％ 80.4％
1000 20.4％ 16.6％ 88.5％
由上述实施例可以看出，通过对不同的体外抗氧化体系下评价茶树酵素的体外抗氧化活性。结果显示茶树酵素在不同的抗氧化体系中，表现出不同的抗氧化活性。试验中发现低剂量时其超氧阴离子自由基清除能力与VC相近，但是浓度大于400μg/mL的VC的抗氧化能力显著高于酵素对超氧阴离子自由基清除能力。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种茶树酵素，由包括以下质量份的原料制备得到：澳洲茶树饼粕35～45份、蔗糖0.6～1份、复合菌剂1～1.4份和水80～120份；所述复合菌剂包括植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159；所述复合菌剂的有效活菌数大于1×107cfu/g。
2.根据权利要求1所述的茶树酵素，其特征在于，所述茶树酵素包括第一组分和/或第二组分；所述第一组分包括以下质量份的成分：多糖0.1～0.3份、黄酮0.10～0.15份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质0.2～0.4份和多酚0.6～1份；所述第二组分包括以下质量份的成分：多糖1.5～1.8份、黄酮0.12～0.18份、松油烯-4-醇1～5份、蛋白质2.5～3份、粗纤维50～55份、灰分5～5.5份和多酚1.4～1.8份。
3.根据权利要求2所述的茶树酵素，其特征在于，所述第一组分包括以下质量份的成分：多糖0.2份、黄酮0.12份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质0.3份和多酚0.8份；所述第二组分包括以下质量份的成分：多糖1.65份、黄酮0.15份、松油烯-4-醇2～4份、蛋白质2.71份、粗纤维53.8份、灰分5.31份和多酚1.59份。
4.根据权利要求1所述的茶树酵素，其特征在于，所述复合菌剂中植物乳杆菌6326、干酪乳杆菌10674、拜尔酵母16183，嗜热链球菌15160和保加利亚乳杆菌15159的有效活菌数的比例为(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5)。
5.权利要求1～4任意一项所述茶树酵素的制备方法，包括以下步骤：
1)将所述澳洲茶树饼粕粉碎得到澳洲茶树饼粕粉，将所述澳洲茶树饼粕粉、蔗糖和水混合，得到发酵料；
2)将所述复合菌剂接种于步骤1)所述发酵料，在25～40℃条件下发酵30～40d，得到茶树酵素。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述澳洲茶树饼粕粉的粒径≤0.85mm。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，在步骤2)得到茶树酵素后，还包括对所述茶树酵素进行固液分离，收集液体成分得到第一组分，收集固体成分得到第二组分。
8.权利要求1～4任意一项所述茶树酵素在制备具有抗氧化功效的食品、保健品、饲料、肥料、动物药品中的应用。
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