CN110251719B - 外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法 - Google Patents

外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:分别从不同入口用蠕动泵将角蛋白溶液和埃洛石纳米管分散液同时缓慢加至容器中;水浴升温并保温直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白‑埃洛石纳米管微凝胶分散液;⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:将聚乙烯醇水溶液匀速滴至角蛋白‑埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,重复冷冻‑解冻过程多次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶经冷冻干燥,即得。本发明制备方法简单,成本低廉,所得的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶具有廉价、无毒、可生物降解、环境友好等特性。

Description

外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法
技术领域
本发明涉及高分子复合材料领域及医用材料技术领域,尤其涉及外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法。
背景技术
随着大众生活水平的提升,患者和医生对于创伤处理和愈合过程的有效性、适用性、易操作性乃至舒适性的要求也不断提升。因此关于外敷材料的研制也随之成为研究的热点。外敷材料不仅能够覆盖创面、起到暂时的阻隔作用从而避免伤口受到进一步的伤害和感染,同时也能够吸收伤口渗出液,保持创面气体交换,创造出适宜的湿润环境,促进伤口愈合。
羽毛角蛋白是一种来源丰富、廉价的天然高分子,有良好的生物相容性和可生物降解性。采用有效的化学方法从羽毛废弃物中提取角蛋白,将其制备成生物吸附剂或可用于生物医药领域的外伤敷料生物材料,会提高羽毛的附加值,同时也能缓解一定的资源短缺压力。因而将羽毛角蛋白作为基质材料使用成为当今国内外研究的热点。虽然角蛋白具有可生物降解、可再生、价格低廉等优点,但其脆性和韧性差,使得其在众多应用中受到了限制。为了弥补这一缺陷,应该对角蛋白进行改性或复合,从而增强角蛋白基材料的机械性能。如:发明专利CN 104892864 A、CN 104861179 A公开了一种角蛋白-海藻酸钠复合微孔凝胶的制备和一种羽毛角蛋白-海藻酸钠复合高分子双敏感水凝胶的制备方法,并作为药物载体应用在药物控制释放中。发明专利CN 105218835 A公开了一种角蛋白基双敏感高分子凝胶的制备及作为药物载体的应用,是以羽毛角蛋白为生物高分子基体,采用分步聚合的方式,依次将温敏性单体、酸敏性单体原位聚合在羽毛角蛋白基体上,得到角蛋白复合双敏感高分子凝胶并应用于生物医用材料领域。CN 105879101 A、CN 105879102 A采用从羽毛中提取的角蛋白为基材,提供了一种羽毛角蛋白基生物高分子外敷材料的制备方法和一种羽毛角蛋白接枝海藻酸海绵敷料的制备方法,这些材料在制备过程中均加入缩合剂、增塑剂和无机交联剂等对羽毛角蛋白进行改性处理,相对而言,原料涉及较多,制备过程略显复杂。因此,开发方法简单、低成本的角蛋白材料是重要的发展方向。
埃洛石纳米管是一种管状的铝硅酸盐,具有天然来源,不会对环境造成污染,并且具有良好的生物相容性,可作为一种环境友好型无机材料增强基材的机械性能,如:发明专利CN 104971376 A公开了一种含有埃洛石纳米管载药型弹性体创伤敷料及其制备方法,该创伤敷料中用到的埃洛石纳米管是经硅烷偶联剂改性过的,使得该发明生产成本较高,合成过程繁琐。
聚乙烯醇是一种无毒、价格低廉、机械强度高、可生物降解、水溶性的聚合物,具有良好的化学稳定性和成膜性能。已有研究报道将聚乙烯醇用作食品包装、组织工程和药物输送系统材料的原料。如:发明专利CN 108659428 A公开了一种聚乙烯醇水凝胶的制备方法,作为医学领域中的止血材料。
已有专利将角蛋白与聚乙烯醇复合所得到的材料应用于复合膜的包装(CN106883617 A、CN 109096506 A)和缆绳材料(CN 108642931 A)的制备技术领域。这些技术以角蛋白与聚乙烯醇为原料制备材料,但使用原料较多。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种方法简单、成本低廉的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法。
为解决上述问题,本发明所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将浓度为10~30 mg·mL-1的角蛋白溶液和浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在30~60 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温,并保温直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液;所述角蛋白溶液与所述埃洛石纳米管分散液的体积比为20~80mL:5~30 mL;
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将浓度为10~30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵匀速滴至所述角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-50~-30℃下将共混溶液冷冻,冷冻之后在室温条件下解冻,然后重复冷冻-解冻过程多次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶经冷冻干燥,即得;所述聚乙烯醇水溶液与所述角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液的体积比为20~50 mL:80 mL。
所述步骤⑴中匀速搅拌的转速为200~800 rpm。
所述步骤⑴中角蛋白溶液是指从白色或花色羽毛中提取的羽毛角蛋白提取液、羽毛角蛋白的NaOH溶液或羽毛角蛋白的尿素溶液中的一种。
所述步骤⑴中埃洛石纳米管分散液是指将埃洛石纳米管加入到去离子水中,采用超声与匀速搅拌相结合的方法,直至埃洛石纳米管完全分散于水中,即得。
所述步骤⑴中水浴温度为20~60℃,该水浴温度下的保持时间为1~3 h。
所述步骤⑵中浓度为10~30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在0.01~1.50 g聚乙烯醇固体中加入10~50 mL去离子水,于50~100℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。
所述步骤⑵中蠕动泵滴加速度为1~3 d·s-1
所述步骤⑵中冷冻-解冻过程是指冷冻时间为1~3 h,解冻时间为2~12 h,重复冷冻-解冻次数为2~8次。
所述步骤⑵中冷冻干燥是指温度为-50~-30℃,干燥时间为24~48 h。
本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、针对天然高分子基复合水凝胶材料预期的发展前景,本发明以生物相容性的天然高分子羽毛角蛋白和无毒、可生物降解、水溶性的聚乙烯醇为制备海绵状气凝胶的原料,埃洛石纳米管为无机纳米诱导剂,经过冷冻-解冻的方法将其制备成水凝胶,再经过冷冻干燥,成功制备得到具有角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶。
2、本发明将聚乙烯醇与角蛋白结合,再引入无机纳米材料埃洛石纳米管,既改善了角蛋白的机械性能,又提高了聚乙烯醇的化学稳定性,使得复合材料具有良好的生物相容性能。
3、本发明要原料为羽毛角蛋白和聚乙烯醇,其中羽毛角蛋白从废弃羽毛中提取获得,聚乙烯醇是无毒、无害、生物相容性良好的合成高分子材料,因此,原料易得,有效降低了其生产成本。
4、本发明制备方法简单,所得的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶具有廉价、无毒、、可生物降解、环境友好等特性,可作为外敷材料应用于生物医学领域,这不仅拓宽了羽毛角蛋白在医学领域的应用,而且提高了废弃天然高分子材料的再利用价值,减少生物质与可再生资源的浪费。
5、对本发明所得的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶采用扫描电镜、红外图谱、X-射线衍射、热重等进行微观形貌、结构和热稳定性表征发现,角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶为纳米网状结构。同时通过考察该复合气凝胶的吸水性能、吸盐溶液性能、保水性能和水蒸气透过性能及在不同pH缓冲溶液中的药物释放性能,证明该复合气凝胶具有pH敏感性,对模型药物具有缓释效果,其可作为良好的外伤敷料应用于生物医学领域。
【宏观与微观形貌分析】
图1为角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的宏观形貌。以羽毛角蛋白溶液为原料制备的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶,具有良好的柔韧性,是理想的海绵体敷料。
图2为角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的微观形貌及结构。角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶呈现片层网络结构,并且具有纳米孔洞,加入的埃洛石纳米管存在于羽毛角蛋白和聚乙烯醇高分子链之间,在冷冻-解冻形成水凝胶的过程中,埃洛石表面的羟基与高分子链上的羟基形成了氢键,增强了水凝胶的机械强度。另外,加入埃洛石纳米管,其表面所带的电荷可以诱导高分子链均匀分布,抑制了高分子链的过度团聚。
【红外光谱分析】
图3为本发明制备的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的红外吸收光谱图。在气凝胶的图谱中,在3313 cm-1和2935 cm-1处出现了羽毛角蛋白和聚乙烯醇的特征吸收O-H和C-H的伸缩振动峰;在1651 cm-1、1541cm-1和1241 cm-1处出现羽毛角蛋白肽键中酰胺Ⅰ带、酰胺Ⅱ带和酰胺Ⅲ带的特征吸收峰;在1090 cm-1和828 cm-1处分别出现了聚乙烯醇的C-O和氢键的特征吸收峰;3692 cm-1处出现了-OH的伸缩振动峰,533 cm-1和468 cm-1处出现了埃洛石纳米管Al-O-Si和Si-O-Si的弯曲振动特征吸收峰,921 cm-1处出现了-OH的弯曲振动。在海绵状气凝胶中可以找到各种原料的特征吸收峰,并且氢键的特征吸收峰相比羽毛角蛋白更加明显,说明成功制备了角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶。
【X-射线衍射分析】
图4为本发明制备的角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的X-射线衍射图。从图中可以观察到,在2θ=9°和20°处显示纯羽毛角蛋白宽的衍射峰,是部分结晶材料的特征衍射峰;在2θ=20°处出现纯聚乙烯醇的尖锐衍射峰,表明其有较高的结晶度;在2θ=11.73°、19.91°、24.49°处出现纯埃洛石纳米管的尖锐衍射峰。在角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶中,各原料的特征吸收峰均有出现,表明原料已成功复合。
【热重分析】
图5为角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的热稳定性分析。结果表明,复合气凝胶在0~100℃的质量损失主要为结晶水和自由水的损失;在100~290℃的质量损失为复合气凝胶中聚乙烯醇的结晶水和自由水的损失;在290℃~490℃之间的损失主要是聚乙烯醇的降解过程;复合气凝胶在480℃~520℃之间主要表现为埃洛石表面羟基的损失。
【吸水和吸盐溶液性能测试】
角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶在去离子水中的溶胀度和和水分吸收量分别为1386.5%和64.9%,在盐溶液中的溶胀度和盐溶液吸收量分别为1035.0%和59.5%,说明该海绵状气凝胶具有良好的溶胀度,但是对盐溶液的吸收能力受盐离子影响有一定程度的减弱。其良好的溶胀性能主要归因于海绵状气凝胶呈现多层纳米网状结构,有利于溶液扩散进入海绵体内部。海绵状气凝胶对水溶液和盐溶液的吸收量均能达到外敷海绵体材料的使用要求,该海绵状气凝胶可用作外敷材料应用于生物医学领域。
【保水和水蒸气透过性能测试】
通过测试发现角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的保水率为859.0%,表明该气凝胶具有优异的保水性能,可以保证其能为伤口创造适宜的湿润环境,以促进伤口的快速愈合。
测试角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的水蒸气透过性能,敞口空白组的水蒸气透过量为129 g·h-1·m-2,该气凝胶的水蒸气透过量为116 g·h-1·m-2,与空白组接近,其水蒸气透过率为77.4%。人体皮肤的水蒸气透过率一般为9 g·h-1·m-2,当皮肤受损后,其水蒸气透过率从12 g·h-1·m-2到214 g·h-1·m-2不等。所以角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的水蒸气透过性能可满足实际应用条件。
【不同pH缓冲溶液中的药物释放性能】
以角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶为药物载体,选用罗丹明B为模型药物,考察负载模型药物罗丹明B的气凝胶的在不同pH缓冲溶液中的药物释放性能。结果如图6所示:该复合材料具备一定的pH敏感性,在pH为7.40的磷酸缓冲溶液中模型药物的累计释放率接近50.0%,在pH为5.80的磷酸缓冲溶液中的累计释放率接近70.0%,而封闭的伤口环境pH在6.5左右。所以载药海绵状气凝胶在伤口表面至少具有50.0%的药物释放率,可以作为外伤消炎药物的载体。
总之,该角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶具有良好的吸水性能、吸盐溶液性能、保水性能和水蒸气透过性能,具有pH敏感性,对模型药物具有良好的缓释效果。因此,该复合气凝胶不仅可以作为外伤伤口愈合所需的保护层,而且可以负载具有消炎作用的药物在伤口表面进行药物释放,其有望作为良好的外伤敷料应用于生物医学领域。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的宏观形貌图。
图2为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的扫描电镜图。
图3为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的红外光谱图。
图4为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的X-射线衍射图。
图5为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的热重曲线图。
图6为本发明的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶在不同pH下的药物释放曲线。
具体实施方式
实施例1 外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温、200 rpm匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将20 mL浓度为10mg·mL-1的角蛋白溶液和5mL浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在30 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温至20℃,并在该水浴温度下保温1 h,直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液。
其中:角蛋白溶液是指从白色或花色羽毛中提取的羽毛角蛋白提取液、羽毛角蛋白的NaOH溶液或羽毛角蛋白的尿素溶液中的一种。
埃洛石纳米管分散液是指将埃洛石纳米管加入到去离子水中,采用超声与匀速搅拌相结合的方法,直至埃洛石纳米管完全分散于水中,即得。
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将20 mL浓度为10 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵以1 d·s-1的滴加速度匀速滴至80 mL角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-50℃将共混溶液冷冻1 h,冷冻之后在室温条件下解冻2 h,然后重复冷冻-解冻过程2次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶于-50℃冷冻干燥48 h,即得。
其中:浓度为10 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在0.01 g聚乙烯醇固体中加入10mL去离子水,于50℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。
实施例2 外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温、800 rpm匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将80 mL浓度为30mg·mL-1的角蛋白溶液和30 mL浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在60 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温至60℃,并在该水浴温度下保温3h,直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液。
其中:角蛋白溶液、埃洛石纳米管分散液同实施例1。
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将50 mL浓度为30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵以3 d·s-1的滴加速度匀速滴至80 mL角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-30℃将共混溶液冷冻3 h,冷冻之后在室温条件下解冻12 h,然后重复冷冻-解冻过程8次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶于-30℃冷冻干燥24 h,即得。
其中:浓度为30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在1.50 g聚乙烯醇固体中加入50mL去离子水,于100℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。
实施例3 外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温、400 rpm匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将40 mL浓度为15mg·mL-1的角蛋白溶液和10 mL浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在40 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温至30℃,并在该水浴温度下保温2h,直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液。
其中:角蛋白溶液、埃洛石纳米管分散液同实施例1。
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将30 mL浓度为20 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵以2 d·s-1的滴加速度匀速滴至80 mL角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-40℃将共混溶液冷冻2 h,冷冻之后在室温条件下解冻10 h,然后重复冷冻-解冻过程5次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶于-40℃冷冻干燥36 h,即得。
其中:浓度为20 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在0.50 g聚乙烯醇固体中加入30mL去离子水,于70℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。
实施例4 外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温、600 rpm匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将60 mL浓度为25mg·mL-1的角蛋白溶液和20 mL浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在50 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温至50℃,并在该水浴温度下保温1.5h,直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液。
其中:角蛋白溶液、埃洛石纳米管分散液同实施例1。
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将40 mL浓度为15 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵以3 d·s-1的滴加速度匀速滴至80 mL角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-40℃将共混溶液冷冻3 h,冷冻之后在室温条件下解冻8 h,然后重复冷冻-解冻过程6次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶于-40℃冷冻干燥30 h,即得。
其中:浓度为15 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在1.0 g聚乙烯醇固体中加入40mL去离子水,于80℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。

Claims (6)

1.外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,包括以下步骤:
⑴制备角蛋白复合埃洛石纳米管微凝胶:
在室温匀速搅拌条件下,分别从不同入口用蠕动泵将浓度为10~30 mg· mL-1的角蛋白溶液和浓度为1.5 mg·mL-1的埃洛石纳米管分散液在30~60 min内同时缓慢加至容器中;再将混合液在搅拌下逐渐水浴升温,并保温直至混合液呈浅乳白色,即得角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液;所述角蛋白溶液与所述埃洛石纳米管分散液的体积比为20~80 mL:5~30mL;所述角蛋白溶液是指从白色或花色羽毛中提取的羽毛角蛋白提取液、羽毛角蛋白的NaOH溶液或羽毛角蛋白的尿素溶液中的一种;所述埃洛石纳米管分散液是指将埃洛石纳米管加入到去离子水中,采用超声与匀速搅拌相结合的方法,直至埃洛石纳米管完全分散于水中,即得;
⑵制备角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶:
将浓度为10~30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液通过蠕动泵匀速滴至所述角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液中,待滴加完成后将共混溶液转移至玻璃模具中,于-50~-30℃下将共混溶液冷冻,冷冻之后在室温条件下解冻,然后重复冷冻-解冻过程多次,即得角蛋白基复合水凝胶,该角蛋白基复合水凝胶经冷冻干燥,即得;所述聚乙烯醇水溶液与所述角蛋白-埃洛石纳米管微凝胶分散液的体积比为20~50 mL:80 mL;所述浓度为10~30 mg·mL-1的聚乙烯醇水溶液是指在0.01~1.50 g聚乙烯醇固体中加入10~50 mL去离子水,于50~100℃水浴中磁力搅拌溶解,即得。
2.如权利要求1所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤⑴中匀速搅拌的转速为200~800 rpm。
3.如权利要求1所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤⑴中水浴温度为20~60℃,该水浴温度下的保持时间为1~3 h。
4.如权利要求1所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤⑵中蠕动泵滴加速度为1~3 d·s-1
5.如权利要求1所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤⑵中冷冻-解冻过程是指冷冻时间为1~3 h,解冻时间为2~12 h,重复冷冻-解冻次数为2~8次。
6.如权利要求1所述的外敷材料用角蛋白基高分子复合海绵状气凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤⑵中冷冻干燥是指温度为-50~-30℃,干燥时间为24~48 h。
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