CN110229767A - 短小芽孢杆菌s1420及其在溶磷上的应用 - Google Patents

短小芽孢杆菌s1420及其在溶磷上的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种短小芽孢杆菌S1420，其特征在于：所述短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)S1420，于2019年5月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，简称为CGMCC，保藏编号为：CGMCC No.17817。本发明开发出一株具有较好应用前景的溶磷短小芽孢杆菌S1420，能将有机磷和无机磷转换成游离态的磷，丰富生防资源。减少无效磷在土壤中的积累，可以减少化学肥料的使用，从而不会破坏土壤结构，使农业可持续发展。

Description

短小芽孢杆菌S1420及其在溶磷上的应用
技术领域
本发明涉及一种短小芽孢杆菌S1420及其在溶磷上的应用。
背景技术
磷是植物(作物)生长发育不可缺少的三大基本元素之一，是植物体内核酸、辅酶、ATP及多种酶等的重要组成成分，对植物(作物)的生长发育起到一定的促进作用，特别在土壤干旱环境下促进根系生长，提高植物(作物)抗旱能力。磷肥也能提高植物(作物)抗寒、抗病虫害、抗倒伏等能力，从而提高植物抵御不良环境的能力。
自然界中，95％以上的磷以无机或有机矿物质形式存在，植物(作物)无法直接吸收利用，需要在溶磷微生物的介导下，转化为游离态的磷才能被植物(作物)吸收利用。所以，我国有74％的耕地土壤缺磷。而且，一般人工施用磷肥在当季作物中利用率只有5％～25％，大部分磷与土壤中的Ca2+、Fe3+、Fe2+、Al3+等离子结合形成难溶性磷酸盐，即无效磷在土壤中积累。农业生产中频繁施用大量化学肥料，导致对土壤结构的破坏，土壤有机质含量下降，影响农业可持续发展，不利于绿色发展。
因此，急需要一种为微生物菌肥开发和绿色发展提供技术支撑的溶磷微生物。
发明内容
本发明提供一种短小芽孢杆菌S1420及其在溶磷上的应用。本发明的短小芽孢杆菌S1420能将无机或有机矿物质形式的磷转化为游离态的磷，从而被植物(作物)吸收。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种短小芽孢杆菌S1420，其特征在于：所述短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)S1420，于2019年5月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，简称为CGMCC，保藏编号为：CGMCC No.17817。
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10-1～10-6g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养4～6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
一种短小芽孢杆菌S1420在溶磷上的应用，将所述的短小芽孢杆菌S1420与无机或有机矿物质形式的磷混合能将无机或有机矿物质形式的磷转化为游离态的磷。
较之前的现有技术，本发明具有以下有益效果：本发明开发出一株具有较好应用前景的溶磷短小芽孢杆菌S1420，能将有机磷和无机磷转换成游离态的磷，丰富生防资源。减少无效磷在土壤中的积累，可以减少化学肥料的使用，从而不会破坏土壤结构，使农业可持续发展。
附图说明
图1扫描电镜下菌株菌落形态与大小
图2菌株溶磷圈
图3菌株的16sDNA序列比对结果
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。
实施方式
一种短小芽孢杆菌S1420，其特征在于：所述短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)S1420，于2019年5月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，简称为CGMCC，保藏编号为：CGMCC No.17817。
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10-1～10-6g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养4～6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
一种短小芽孢杆菌S1420在溶磷上的应用，将所述的短小芽孢杆菌S1420与无机或有机矿物质形式的磷混合能将无机或有机矿物质形式的磷转化为游离态的磷。
实施例1
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 1g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养4天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
实施例2
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 2g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养5天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
实施例3
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 3g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养5天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
实施例4
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 4g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
实施例5
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 5g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
实施例6
一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，称取新鲜的春羽(Philodenron selloumKoch)根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10- 6g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；(溶磷效果最好的菌株为所得溶磷菌株)
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
将上述实施例1-6所得到的菌株分别转接种至斜面无机磷选择培养基和斜面有机磷选择培养基上，30℃恒温培养4～6天，然后于-20℃保藏待用。
菌落形态：将上述待用的实施例1-6中的短小芽孢杆菌S1420划线接种到NB培养基(细菌学蛋白胨10.0g，牛肉浸膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，PH7.2，去离子水1.0L。)上，倒置于30℃恒温培养箱培养3～6d，分别观察其菌落形态。
菌株菌体形态：用扫描电镜和普通光学显微镜观察菌体形态，如图1扫描电镜下实施例1的菌株菌落形态与大小所示，其它实施例所得到的菌株形态一致，菌株在无机磷培养基上生长，呈乳白色、半透明、粘稠且表面湿润、圆形或放射状等不规则形状，菌落边缘较整齐。菌株在有机磷培养基上生长，呈黄色的、不透明的菌落。普通光学显微镜下，菌体呈现弧杆小球状，扫描电镜下观察，菌体呈短杆状，长度约5μm，直径约3μm。
菌株分子生物学鉴定：将溶磷能力的菌株送至铂尚生物技术(上海)有限公司福州测序部进行16sDNA测序，返回序序列在NCBI网站上的Blastn中进行序列比对，与菌体形态和生理生化测试结果结合，进行菌株种属鉴定。所得的溶磷菌株Phosphate-solubilzingbacterium与参比的芽孢杆菌属Bacillus pumilus同源相似度在99％以上。
菌株的生理生化测试：用接种环挑取适量的菌株进行革兰氏染色与镜检。据《常见细菌系统鉴定手册》其余生理生化测试，其余生理生化测试包括：糖发酵试验、甲基红试验、淀粉水解试验、吲哚试验、产硫化氢试验、脲酶试验、过氧化氢酶试验、氧化酶试验等。
菌株生理生化特性测试结果见表1。
表1菌株生理生化试验结果
菌株分子生物学鉴定结果：菌株经16sDNA序列测定，在NCBI网站的Blastn序列比对，菌株与参比的芽孢杆菌属同源相似度在99％以上，结合菌株形态学和生理生化试验结果，该菌株鉴定为短小芽孢杆菌，命名为短小芽孢杆菌S1420。
然后分别将上是实施例1-6中的斜面无机磷选择培养基和斜面有机磷选择培养基上保藏的菌株常温放置30min以上复苏，然后接入已灭菌且冷却的盛有50mLNB培养基的三角瓶中，在30℃，180r/min震荡培养20h，制成种子液。将供试菌株的种子液分别吸取5mL接种到已灭菌且冷却的无机磷、有机磷液体培养基，37℃、180r/min震荡培养5～7d。取出培养液于4000r/min离心20min。取上清液并定容至50mL成待测样品1，用于测定(表征)溶磷菌细胞外物质溶磷能力。
溶磷圈法：挑取实施例1-6中得到的菌株分别接种于无机磷选择培养基或有机选择磷培养基中，每个平板上种植4个点，每个重复两次，点种后，倒置于30℃培养3d，根据溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)的比值R(D/d)大小确定各个菌株的溶磷能力，R越大表示菌株溶溶磷的能力越强。
菌株的溶磷能力：菌株在以无机磷作为唯一磷源的固体培养基平板上可以生长，且形成溶磷圈，说明菌株具有溶磷效果。如图1所示的菌株溶磷圈，经十字交叉法测定菌落和溶磷圈直径，菌株菌落直径与溶磷圈直径比D/d为2.24±0.75(数据表示为：平均值±标准差，n＝8)。无机磷固体培养基有溶磷圈，有机磷固体培养基上没有溶磷圈。说明无机磷的溶磷效果更好。
钼锑抗比色法：
首先绘制标准曲线：分别吸取5.0mg/L磷标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于50mL容量瓶中，加入0.5mol/L的NBHCO3溶液10.0mL，加水使各瓶的总体积达到30mL,摇匀；最后加入钼锑抗试剂5.0mL混匀，定容。在720nm波长下测定吸光度，以OD值为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
样品溶磷含量测定：分别吸取从实施例1-6中得到的菌株样品于15mL于50mL容量瓶中，然后加入10.0mL 0.5mol/L的NBHCO3溶液，之后加2滴2,4-二硝基苯酚作指示剂，再加蒸馏水20mL，最后加入钼锑抗试剂5.0mL，最后定容至50mL、摇匀，放置30min后，在720nm波长下测定吸光度，用蒸馏水的吸收值为0，读出待测液的吸光度，与标准曲线对比，得到可溶性磷含量，如下表所示的是实施例5的相关数据。
菌株溶磷效果：如表1、2所示，采用钼锑抗比色法测定，菌株溶磷效果与空白组进行对照，溶磷率分别达45.53倍(无机磷)和3.762倍(有机磷)。
表1菌株溶磷能力测定结果(无机磷)
数据表示为：平均值±标准差，n＝4，P＜0.001
表2菌株溶磷能力测定结果(有机磷)
数据表示为：平均值±标准差，n＝4，P＜0.001
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
序列表
<110> 福建师范大学福清分校
<120> 短小芽孢杆菌S1420及其在溶磷上的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1420
<212> DNA
<213> 短小芽孢杆菌S1420(Bacillus pumilus)
<400> 1
gcagtcgagc ggacagaagg gagcttgctc ccggatgtta gcggcggacg ggtgagtaac 60
acgtgggtaa cctgcctgta agactgggat aactccggga aaccggagct aataccggat 120
agttccttga accgcatggt tcaaggatga aagacggttt cggctgtcac ttacagatgg 180
acccgcggcg cattagctag ttggtggggt aatggctcac caaggcgacg atgcgtagcc 240
gacctgagag ggtgatcggc cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg 300
cagcagtagg gaatcttccg caatggacga aagtctgacg gagcaacgcc gcgtgagtga 360
tgaaggtttt cggatcgtaa agctctgttg ttagggaaga acaagtgcga gagtaactgc 420
tcgcaccttg acggtaccta accagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt 480
aatacgtagg tggcaagcgt tgtccggaat tattgggcgt aaagggctcg caggcggttt 540
cttaagtctg atgtgaaagc ccccggctca accggggagg gtcattggaa actgggaaac 600
ttgagtgcag aagaggagag tggaattcca cgtgtagcgg tgaaatgcgt agagatgtgg 660
aggaacacca gtggcgaagg cgactctctg gtctgtaact gacgctgagg agcgaaagcg 720
tggggagcga acaggattag ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg agtgctaagt 780
gttagggggt ttccgcccct tagtgctgca gctaacgcat taagcactcc gcctggggag 840
tacggtcgca agactgaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat 900
gtggtttaat tcgaagcaac gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatcct ctgacaaccc 960
tagagatagg gctttccctt cggggacaga gtgacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct 1020
cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgatc ttagttgcca 1080
gcattcagtt gggcactcta aggtgactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga 1140
cgtcaaatca tcatgcccct tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gacagaacaa 1200
agggctgcaa gaccgcaagg tttagccaat cccataaatc tgttctcagt tcggatcgca 1260
gtctgcaact cgactgcgtg aagctggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg 1320
tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac cacgagagtt tgcaacaccc 1380
gaagtcggtg aggtaacctt tatggagcca gccgccgaag 1420

Claims (3)

1.一种短小芽孢杆菌S1420，其特征在于：所述短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)S1420，于2019年5月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.17817。
2.根据权利要求1所述的一种短小芽孢杆菌S1420的制备方法，其特征在于：称取新鲜的春羽根际土壤，溶于蒸馏水中形成春羽根际土壤溶液，充分摇匀振荡，然后配制浓度为10-1～10-6g/mL的土壤溶液，再吸取所述土壤溶液，采用涂布法均匀地接种涂布在有机磷选择培养基或无机磷选择培养基上，然后倒置于30℃恒温培养箱培养4～6天，最后挑取圆形、透明、表面湿润且粘稠的菌落并分离、纯化，得到所述的短小芽孢杆菌S1420；
有机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+5.00g/L CaCO3+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L卵磷脂+20.0g/L琼脂；
无机磷选择培养基由以下组分按照以下质量浓度配制而成：
10.00g/L葡萄糖+0.50g/L(NH4)2SO4+0.30g/L MgSO4+0.30g/L NBCl+0.30g/L KCl+10.0g/L Ca3(PO4)2+0.03g/L MnSO4+0.03g/L FeSO4+20.0g/L琼脂。
3.根据权利要求1所述的一种短小芽孢杆菌S1420在溶磷上的应用，其特征在于：将所述的短小芽孢杆菌S1420与无机或有机矿物质形式的磷混合能将无机或有机矿物质形式的磷转化为游离态的磷。
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