CN110226439B - 一种唐古特白刺休眠破除方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种唐古特白刺休眠破除方法，所述方法包括以下步骤：采集唐古特白刺的果实、对采集的果实进行取种处理、精选种子、对种子进行处理、对处理后的种子进行清洗、对清洗后的种子进行低温沉积处理。本发明所提供的方法，操作简单方便，休眠破除效果好，一次性发芽率高，田间出苗速度快，适用范围广。

Description

一种唐古特白刺休眠破除方法

技术领域

本发明属于荒漠植物种子处理加工及栽培领域，具体涉及一种唐古特白刺休眠破除方法。

背景技术

唐古特白刺(Nitraria tanggutorum)是蒺藜科(Zygophyllaceae)白刺属旱生、超旱生灌木，在中国主要分布在西北干旱荒漠、高寒地区及北方沿海盐渍地带。它不仅具有较好的抗旱、抗寒和耐盐碱性，而且固土改沙性能更为突出，是中国干旱区生物治沙的主要造林树种之一，而且是中药“荒漠人参”锁阳(Cynomoriumz songaricum)的寄主。

唐古特白刺为我国西北地区常见的野生盐生植物，具有很高的经济、生态和药用价值，根系发达。在极端干旱的环境下，可通过假死、休眠等暂时停止生长，一遇到降雨，其生命特征又会重新恢复。唐古特白刺的叶片厚而肥大，肉质化，水分储量高达86％，极大地提高了原生质和细胞液的渗透压，促使泌盐，保证了其在盐碱化土壤中能够正常生长发育。白刺被流沙掩埋后，其枝干会发芽生长突破沙层，原来的枝干会再生根系；被埋的枝叶化为有机肥料，又被自身吸收；不断被掩埋又不断再生，久而久之，形成发达绵密的根系，成为白刺沙包。这些白刺沙包所固定的沙子，少则几吨，多则达到上千吨。因此，保护和种植唐古特白刺，是改善盐碱土地、解决“沙进人退”局面的有效途径。

种子是联结亲代与下一代幼苗之间的重要纽带，具有遗传可变性；幼苗期又是植物一生中敏感、脆弱而又非常关键的时期，极易受外界各种环境因子的影响而产生不同的响应。种子休眠是一种优良的生物学特性，是种子植物抵御外界不良条件的一种生态适应性，它可以避免种子在风险环境中萌发，从而使幼苗度过不良环境得以生存，这种适应性是植物长期进化的一种自我保护方式，有利于种族延续。

但是，在发芽实践中，因种子存在深休眠，致使种子发芽速度慢、发芽周期长、发芽不整齐、发芽率过低，导致田间栽培时缺苗和断垄严重。例如：在播种季节如果种子处在休眠状态，未经预先处理就播种，会造成田间出苗参差不齐；在测定种子发芽力时，处于休眠状态的种子很难测得正确的结果。

现有技术中，常用浓硫酸处理唐古特白刺种子来破除种子休眠，但在实践时，种子中的多糖与硫酸发生反应会产生糠醛、羟甲基糠醛和水，水遇到浓硫酸会产生热量，会导致种子失活，对环境和操作人员产生危害；且种子表面发生碳化，会阻碍发芽抑制物质的扩散，因此，此方法对种子休眠的破除率不高。此外，现有技术中还采用赤霉素(GA₃)和低温层积处理的方法以及水旱交替的方法来破除唐古特白刺中的休眠，但破除率均较低，且结果重演性低。

因此，目前亟需解决的问题是提供一种唐古特白刺休眠破除方法，使得种子休眠破除率高、活力和发芽率均较高，且结果重演性高。

发明内容

为了克服上述问题，本发明人进行了锐意研究，结果发现：通过采集果实、发酵取种、精选种子、利用碱液处理种子、清洗种子、低温层积、回干处理及发芽检测处理的操作，能够有效破除唐古特白刺种子的休眠效果，有效提高发芽率和种子活力，对不同种源和休眠程度的种子具有重演性的破除效果，且方法简单，易于操作，从而完成了本发明。

具体来说，本发明的目的在于提供以下方面：

本发明提供了一种唐古特白刺休眠破除方法，其中，所述方法包括以下步骤：

步骤1，采集唐古特白刺的果实；

步骤2，对采集的果实进行取种处理；

步骤3，精选种子；

步骤4，对种子进行处理；

步骤5，对处理后的种子进行清洗；

步骤6，对清洗后的种子进行低温层积处理。

其中，所述方法还包括以下步骤：

步骤7，将步骤6处理后的种子进行回干处理；

步骤8，种子进行发芽检测处理。

其中，步骤2中，采用发酵的方法对果实进行取种，包括以下子步骤：

步骤2-1，在果实中加水，于室温下发酵；

步骤2-2，去除发酵物的果浆；

步骤2-3，去除果皮，得到种子。

其中，步骤4中，所述处理为将种子浸泡在强碱溶液中。

其中，所述强碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氢氧化钡溶液或饱和石灰水中的一种或多种。

其中，所述强碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液或饱和石灰水中的一种或多种；

优选地，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.5～6mol/L，

所述氢氧化钾溶液的浓度为0.5～5.5mol/L。

其中，所述种子在氢氧化钠溶液中的浸泡时间为20～70min，

所述种子在氢氧化钾溶液中的浸泡时间为20～60min，

所述种子在饱和石灰水中的浸泡时间为20～28h。

其中，步骤5中，所述清洗包括水洗和浸泡，所述浸泡时间为3～8天，

优选地，在浸泡的时间段内，每隔3～6h更换一次清水，以使发芽抑制物充分浸出。

其中，所述步骤6包括以下子步骤：

步骤6-1，将河沙清洗、过筛及消毒后，与水混合制备得到层积沙；

步骤6-2，将种子与层积沙混合，进行低温层积处理；

优选地，所述层积沙与种子的体积比为(2～12)：1。

其中，层积时间为20～80天。

本发明所具有的有益效果包括：

(1)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，其果实经过发酵取籽，方法简便，省事省工，易于操作；

(2)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，其种子经过风选、筛选和水选，净度、一致性及健壮度均显著提高；

(3)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，种子经碱液处理后水洗浸泡，可有效去除种子中的发芽抑制物，然后将除去发芽抑制物的种子再进行低温层积处理，可破除种子后熟性休眠，提高种子发芽率和活力；

(4)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，有效提高了田间成苗率和出苗速度，使得种子在第3天开始出苗，第6天达到最大出苗率，田间出苗整齐一致；

(5)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，对不同生境地、不同休眠程度的种子都有重演性的破除效果；

(6)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，将休眠破除的种子陆地播种栽培，田间出苗整齐一致，增加了田间基本苗，促进了幼苗生长，且幼苗分枝少、商品性好，便于采挖、运输和定植；

(7)本发明所提供的唐古特白刺休眠破除方法，操作简单，成本低廉，发芽检测方法能够准确检测唐古特白刺种子的休眠破除效果。

具体实施方式

下面通过优选实施方式和实施例对本发明进一步详细说明。通过这些说明，本发明的特点和优点将变得更为清楚明确。

本发明提供了一种唐古特白刺休眠破除方法，其中，所述方法包括以下步骤：

步骤1，采集唐古特白刺的果实；

步骤2，对采集的果实进行取种处理；

步骤3，精选种子；

步骤4，对种子进行处理；

步骤5，对处理后的种子进行清洗；

步骤6，对清洗后的种子进行低温层积处理；

步骤7，将步骤6处理后的种子进行回干处理；

步骤8，种子进行发芽处理。

以下进一步描述本发明所述的唐古特白刺休眠破除方法：

步骤1，采集唐古特白刺的果实。

在本发明中，所述果实的采集时间为7月下旬到10月初，在采种圃或野生唐古特白刺分布区，采集成熟果实。

其中，选择树势强、健壮、结果稠密、无病虫害的母株为采种株，通过捋取法、摘取法或敲击捡拾的方法，收集均匀、饱满、无病虫害的成熟果实。

在本发明中，优选将采集到的果实晒干，防止果实发霉、腐烂，影响种子活力。

步骤2，对采集的果实进行取种处理。

在本发明中，采用发酵的方法对果实进行取种，所述取种包括以下步骤：

步骤2-1，在果实中加水，于室温下发酵。

根据本发明一种优选的实施方式，在果实中加水前，先剔除果实中的枝叶和杂物，然后将果实放入洗盆、瓷缸、密封塑料袋或水泥池内。

在进一步优选的实施方式中，所述加入水的质量与果实的质量)之比为(5～25)：～100，优选为(8～22)：～100，更优选为(10～20)：100。

在更进一步优选的实施方式中，所述发酵时间为3～5天。

步骤2-2，去除发酵物的果浆。

在本发明中，优选将发酵物装入尼龙网袋，反复搓揉，使得果实破裂，然后用流水冲洗尼龙网袋，使得果浆除去。

步骤2-3，去除果皮，得到种子。

在本发明中，将除去果浆的发酵物剩余物取出置于容器中，利用果皮和种子的比重差异，采用流水将果皮去除，取出种子阴干备用。

步骤3，精选种子。

根据本发明一种优选的实施方式，所述种子的精选包括风选、筛选和水选三个步骤。

本发明人经过研究发现，将唐古特白刺的种子经过风选、筛选和水选三个步骤后，其种子净度、一致性和健壮度能够有效提高。

在进一步优选的实施方式中，所述筛选为用3mm的筛子进行筛理，以剔除种子中的杂质。

在更进一步优选的实施方式中，所述水选为将筛选过的种子加水搅拌，浸种一段时间，以剔除漂浮的空秕、虫蛀种子。

优选地，所述搅拌时间为6～12min，优选为10min，所述浸种时间为3～6h，优选为4～5h。

在本发明中，经过上述精选，选取得到饱满、整齐、健壮及生活力高的种子，然后存储备用。

步骤4，对种子进行处理。

根据本发明一种优选的实施方式，所述对种子进行处理为将种子浸泡在强碱溶液中。

在进一步优选的实施方式中，所述强碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氢氧化钡溶液或饱和石灰水中的一种或多种。

本发明人经过研究发现，现有技术中的浸泡种子的方法，如温水浸种、硫酸浸种、“水旱交替”等方法，对种子休眠的破除不完全。因此，在本发明中，优选采用强碱溶液浸泡种子，能够使种子发芽口的果胶和种皮上的疏水果胶溶解，并使种皮内的发芽抑制物溶解。浸泡清洗后，种皮中的发芽抑制物能够析出，破除种子抑制物休眠。

在更进一步优选的实施方式中，所述强碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液或饱和石灰水中的一种或多种。

优选地，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.5～6mol/L，优选为0.75～5mol/L，更优选为1～4mol/L；

所述氢氧化钾溶液的浓度为0.5～5.5mol/L，优选为0.75～4.5mol/L，更优选为1～3mol/L。

本发明人经过研究发现，当氢氧化钠溶液的浓度为0.5～6mol/L，优选为0.75～5mol/L，更优选为1～4mol/L时，对唐古特白刺种子休眠破除的效果最好。当氢氧化钠溶液的浓度小于0.5mol/L时，种子上的果胶不能去除，种皮上的发芽抑制物不能溶解，影响种子休眠释放；当氢氧化钠溶液的浓度大于6mol/L时，会使部分果皮薄、休眠浅、果胶少的种子在短时间内果胶溶解，发芽口展开，还会使发芽口种皮及细胞膜溶解，导致种子丧失生活力。

当氢氧化钾溶液的浓度为0.5～5.5mol/L，优选为0.75～4.5mol/L，更优选为1～3mol/L时，对唐古特白刺种子休眠破除的效果最好。当氢氧化钾溶液的浓度小于0.5mol/L时，种子上的果胶及发芽抑制物不能清除，影响种子休眠释放；当氢氧化钠溶液的浓度大于5.5mol/L时，会使部分果皮薄、休眠浅、果胶少的种子在短时间内果胶溶解，发芽口展开，发芽口种皮及细胞膜溶解，种子丧失生活力。

根据本发明一种优选的实施方式，所述种子在氢氧化钠溶液中的浸泡时间为20～70min，优选为30～60min；

所述种子在氢氧化钾溶液中的浸泡时间为20～60min，优选为30～50min；

所述种子在饱和石灰水中的浸泡时间为20～28h，优选为22～26h，更优选为24h。

其中，所述强碱溶液将种子浸泡至发芽口透亮但不展开，以使种皮透气、透水，利于发芽抑制物质通过。

本发明人经过研究发现，当种子在氢氧化钠溶液中的浸泡时间小于30min时，浸泡时间过短，使得种子上的果胶不能完全清除，发芽抑制物不能溶解，影响种子休眠释放；当种子在氢氧化钠溶液中的浸泡时间大于70min时，浸泡时间过长，会使部分果皮薄、休眠浅、果胶少的种子的果胶在短时间内溶解，还会使发芽口展开，发芽口种皮及细胞膜溶解，种子丧失生活力。

当种子在氢氧化钾溶液中的浸泡时间小于20min时，种皮及发芽口上的果胶不能完全清除，发芽抑制物不能溶解，影响种子休眠释放；当种子在氢氧化钾溶液中的浸泡时间大于60min时，会使部分果皮薄、休眠浅、果胶少的种子的果胶在短时间内溶解，发芽口展开，发芽口种皮及细胞膜溶解，种子丧失生活力。

当种子在饱和石灰水中的浸泡时间小于20h时，种子上的果胶不能完全清除，发芽抑制物不能溶解，影响种子休眠释放；当种子在饱和石灰水中的浸泡时间大于28h时，会使部分果皮薄、休眠浅、果胶少的种子的果胶在短时间内溶解，发芽口展开，发芽口种皮及细胞膜溶解，种子丧失生活力。

在进一步优选的实施方式中，所述种子在浓度为1mol/L、2mol/L、3mol/L和4mol/L的氢氧化钠溶液中的浸泡时间分别为60min、50min、40min和30min；

所述种子在浓度为1mol/L、2mol/L和3mol/L的氢氧化钾溶液中的浸泡时间分别为50min、40min和30min。

步骤5，对处理后的种子进行清洗。

根据本发明一种优选的实施方式，对强碱溶液浸泡过的种子进行水洗和浸泡，以除去种子表面的碱液和种子中的发芽抑制物。

其中，所述水洗为用流水冲洗。

在进一步优选的实施方式中，所述浸泡时间为3～8天，优选为5～7天，更优选为4～6天。

本发明人经过研究发现，种子经强碱液浸泡后，发芽抑制物溶解，需要用清水进一步浸泡处理，以促使发芽抑制物充分浸出。

在更进一步优选的实施方式中，在浸泡的时间段内，每隔3～6h更换一次清水，优选每隔4～5h更换一次清水，以使发芽抑制物充分浸出。

其中，直至浸泡液不再变色，则说明发芽抑制物已完全浸出，可停止浸泡，沥出种子。

步骤6，对清洗后的种子进行低温层积处理。

其中，所述步骤6包括以下子步骤：

步骤6-1，将河沙清洗、过筛及消毒后，与水混合制备得到层积沙。

其中，清洗和消毒后的层积沙不含可溶性物质，pH在6.0～7.5之间，易于保持种子安全。

根据本发明一种优选的实施方式，所述过筛为过0.05～0.8mm的筛。

本发明人研究发现，将层积沙过0.05～0.8mm的筛，能过保持较好的保水和透气性，使得种子在层积过程中不易发生霉变。

在进一步优选的实施方式中，所述消毒为在140～145℃下消毒1～3h，优选为2h。

根据本发明一种优选的实施方式，所述水的体积与消毒沙的质量的比为1：(10～20)，优选为1：(13～17)。

在进一步优选的实施方式中，在将水与消毒沙混合均匀后，静置0.5～1.5h，优选静置0.75～1.25h，更优选静置1h。

在本发明中，层积处理时，混合后的层积沙的湿度以手握能成团但不滴水，一触即散为准。

步骤6-2，将种子与层积沙混合，进行低温层积处理。

根据本发明一种优选的实施方式，所述层积沙与种子的体积比为(2～12)：1，优选为(3～10)：1。

其中，将混合均匀的层积沙装入麻袋或透气的尼龙袋或木箱中，再进行层积处理。

在进一步优选的实施方式中，所述低温层积处理在低温黑暗条件下进行，优选在1～10℃的黑暗条件下进行，更优选在2～5℃的黑暗条件下进行。

在更进一步优选的实施方式中，所述层积时间为20～80天，优选为25～70天，更优选为30～60天。

本发明人经过研究发现，当层积时间小于20天时，部分生理休眠种子不能释放休眠，种子活力低下，发芽率低，发芽速度慢；当层积时间大于80天时，部分休眠释放早的种子在低温下萌发，播种困难，同时层积过程中种子内含物外渗，易导致种子发霉和丧失生活力。

在本发明中，在上述层积处理条件下，种子能够在通气、湿润、低温条件下完成生理后熟、细胞膜重建和细胞器复制，

有利于种子休眠破除和活力改善，提高种子田间成苗力。

步骤7，将步骤6处理后的种子进行回干处理。

在本发明中，所述唐古特白刺种子在经过低温层积后，在发芽之前，需要进行回干处理，本发明中优选为阴干种子。

其中，将低温层积后的种子在2.0～3.0mm孔径的筛面上进行筛理，然后将种子置于干燥的地方薄摊阴干。

步骤8，种子进行发芽处理。

在本发明中，将经过上述破除休眠处理后的种子进行发芽处理，其中，根据种子的大小选择适宜的发芽床，所述发芽床是指供给种子发芽水分和支撑幼苗生长的基质，其包括纸床、砂床和土壤床，所述纸床是指专用发芽纸、滤纸等；所述砂床筛后，取0.05～0.8mm的砂砾作发芽床；所述土壤床是指土质良好，无细菌、真菌、线虫或有毒物质，高温消毒。

在本发明中，所述种子置床的方式优选包括砂上、砂中或纸卷置床。其中，所述砂上置床，是指将种子压入温润砂的表面；砂中置床是指将种子播在一层平整的湿砂上，再根据种子大小加盖10～20mm厚的松散砂；所述纸卷置床是指将专用发芽纸或棉浆纸用蒸馏水润湿，使含水量饱和，将种子均匀置于芽床上，再将发芽纸卷成纸卷，两端用橡皮筋扎住，放入保湿发芽箱内发芽。

其中，优选分别在20℃恒温、25℃恒温、20/30℃变温和15/25℃变温条件下检测种子的发芽率，所述变温是将将发芽箱低温段设置为16小时，高温段设置为8小时，同时高温段设置4500LX以上光照，将置种的发芽床放入发芽箱进行培养，第6天统计发芽势，第10天统计发芽率。

本发明人经过研究发现，种子萌发期间的各种代谢都是在酶的催化下完成的，而酶促反应与温度相关，在变温条件下，有利于多个酶促反应的进行，进而提高萌发率。

其中，所述发芽势是指在发芽试验初期长成的正常幼苗数占供检验种子数的百分率；所述发芽率是指在发芽试验终期长成的全部正常幼苗数占供检验种子数的百分率。

在本发明中，所述步骤1和步骤2可以连续操作，步骤3～步骤7可连续操作，其中，步骤2和步骤3之间可根据实际需要间断操作；步骤7和步骤8之间也可间断操作。

本发明所述的唐古特白刺休眠破除的方法，种子经过碱液处理、水洗和低温层积处理，有效去除了种子中的发芽抑制物，提高了种子发芽率和出苗速度，且田间出苗整齐一致，对不同种源和休眠程度的种子具有重演性的破除效果，一次发芽率达90％以上。

实施例

以下通过具体实例进一步描述本发明，不过这些实例仅仅是范例性的，并不对本发明的保护范围构成任何限制。

实施例1

本实施例中，按照以下步骤对唐古特白刺种子的休眠进行破除：

(1)采集唐古特白刺的果实：于8月中下旬到9月初，在甘肃省河西走廊的野生唐古特白刺分布区——张掖市甘州区平山湖沙地(N 39°06′E 100°39′)，选择树势强健壮、结果稠密、无病虫害的母株为采种株，通过摘取法，收集均匀、饱满、无病虫害的果实；

(2)对采集的果实进行发酵取种：将收集的果实，剔除枝叶和杂物，放入洗盆内，按照水与果实的质量比为10：100加水，室温下发酵3天，将发酵物装入尼龙网贷，反复搓揉，流水冲洗净果浆，把尼龙网内剩余物倒入盆内，利用果皮和种子比重差异，用流水将果皮清理掉，取出种子阴干备用；

(3)精选种子：将种子用3mm的筛子筛理，剔除种子中的杂质，放入水盆，加水搅拌10min，浸种5h,将漂浮的空秕、虫蛀种子剔除，精选饱满、整齐、健壮、生活力高的种子，健壮度为98％，休眠深度为88％；

(4)对种子进行碱液处理：将精选处理的种子浸泡在1mol.L^-1的NaOH溶液中60min，使发芽口透亮但不展开；

(5)对碱液处理的种子进行清洗：将碱液处理后的种子先用流水冲洗，然后浸泡5d，其间每隔5h更换一次清水，待浸泡液不变色，沥出种子；

(6)对清洗后的种子进行低温层积处理：将河沙清洗后过0.5mm筛，再在142℃条件下消毒2小时，把水与消毒沙按照1:15(V/W)混均匀后静置1小时；将消毒沙与清洗后的种子按6:1(v/v)均匀混合，装入麻袋或透气的尼龙袋或木箱，在4℃黑暗条件下保湿低温层积30天；

(7)将低温层积后的种子进行回干处理：将种子在2.5mm孔径的筛面上筛理，然后在干燥的地方薄摊阴干；

(8)种子进行发芽处理：取400粒种子，采用砂上置床的方式进行发芽处理，并检测种子的发芽情况。

实施例2

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在2mol.L^-1的NaOH溶液中50min。

实施例3

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在3mol.L^-1的NaOH溶液中40min。

实施例4

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在4mol.L^-1的NaOH溶液中30min。

实施例5

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于：步骤(1)中，种源为武威市古浪县沙地(N 37°28′E 102°53′)；步骤(3)中精选后种子健壮度为96％，休眠深度为89％；步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在1mol.L^-1的KOH溶液中50min。

实施例6

本实施例所用方法与实施例5相同，区别仅在于步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在2mol.L^-1的KOH溶液中40min。

实施例7

本实施例所用方法与实施例5相同，区别仅在于步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在3mol.L^-1的KOH溶液中30min。

实施例8

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于：步骤(1)中种源为武威市凉州区沙地(N37°52′E102°32′)；步骤(3)中精选后种子健壮度为94％，休眠深度为92％；步骤(4)为：将精选处理的种子浸泡在饱和石灰水中24h。

实施例9

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于：步骤(1)中种源为内蒙古阿拉善右旗沙地(N40°53′E103°44′)；步骤(3)中精选后种子的健壮度为96％，休眠深度为93％；步骤(6)中的低温层积天数为40天。

实施例10

本实施例所用方法与实施例9相同，区别仅在于步骤(6)中的低温层积天数为50天。

实施例11

本实施例所用方法与实施例9相同，区别仅在于步骤(6)中的低温层积天数为60天。

实施例12

本实施例所用方法与实施例1相同，区别仅在于：步骤步骤(1)中种源为张掖市甘州区肃南县河床(N38°50′E99°37′)，并将采集的果实进行晒干处理；步骤(3)中精选后种子的健壮度为98％，休眠深度为93％。

对比例

对比例1

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于：步骤(4)为对种子进行开水烫种处理，具体操作为：将白刺种子用开水烫种后凉至室温(25℃)，浸种48小时后直接置床进行发芽处理。

对比例2

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，对种子进行碱液处理所用的NaOH溶液浓度为2.78mol/L，处理时间为120min。

对比例3

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)中采用浓度为20％的双氧水处理种子，浸泡时间为60min。

对比例4

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)为采用赤霉素处理种子，用0.02％的GA₃湿润沙床，按照沙的质量：0.02％GA₃的体积为17:1的比例，然后直接置床进行发芽处理。

对比例5

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)中采用浓度为80％的硫酸处理种子，浸泡时间为60min。

对比例6

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)中采用浓度为0.2％的硝酸钾处理种子，浸泡时间为24小时。

对比例7

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)中在对种子进行碱液处理之前，先将干燥的白刺种子放入40℃干燥箱中后熟处理40小时。

对比例8

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，步骤(4)中采用浓度为0.002％的水杨酸处理种子，浸泡时间为24小时。

对比例9

本对比例与实施例1中方法相似，区别在于，对精选后的种子直接进行低温层积处理，而不进行碱液处理。

实验例

实验例1

对实施例1～12和对比例1～9中所述方法处理的得到的种子进行发芽检测处理，在20/30℃变温检测种子的发芽情况。

具体地：取实施例1～12处理回干的种子和对比例1～9处理的种子各400粒，每100粒重复一次，以未经任何处理的种子为对照，砂上置床，将发芽箱的温度设置为20℃，16小时，30℃，8小时，同时高温段设置4500LX以上光照，将置种的发芽床放入发芽箱进行培养，第6天统计发芽势，第10天统计发芽率。统计种子发芽情况得到的结果如表1所示：

表1唐古特白刺种子的萌发情况

其中，表中大写字母表示在0.01水平差异显著；小写字母表示在0.05水平差异显著。同列数据后标有不同大写或不同小写字母者表示差异显著，反之为差异不显著。

其中，所述发芽率(％)＝(发芽种子粒数/供试种子粒数)×100％；

所述发芽指数＝∑(发芽试验终期内每日发芽数/发芽日数)。

由表1可知，本发明实施例1～12中所述休眠破除方法处理的唐古特白刺种子，其发芽速度、发芽率及种子活力均显著高于对比例1～9中所述方法处理的种子，说明本发明所述的休眠破除方法使得唐古特白刺种子的休眠释放完全。

由表1还可知，本发明实施例中分别采自张掖市甘州区平山湖沙地(N 39°06′E100°39′)、武威市古浪县沙地(N 37°28′E 102°53′)、武威市凉州区沙地(N37°52′E102°32′)、内蒙古阿拉善右旗沙地(N40°53′E103°44′)和张掖市甘州区肃南县河床(N38°50′E99°37′)的种子，采用本发明所述的方法进行处理，种子发芽率均高达92％以上，实施例1～实施例12之间的发芽率和发芽指数差异均不显著(p>0.05)，说明本发明所述方法对不同种源、不同休眠程度的种子具有重演性破除效果。

以上结合具体实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本发明的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本发明的范围内。

Claims (3)

1.一种唐古特白刺休眠破除方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1，采集唐古特白刺的果实；

步骤2，对采集的果实进行取种处理；

步骤3，精选种子；

步骤4，对种子进行处理；

步骤5，对处理后的种子进行清洗；

步骤6，对清洗后的种子进行低温层积处理；

步骤2中，采用发酵的方法对果实进行取种，包括以下子步骤：

步骤2-1，在果实中加水，于室温下发酵，加入水的质量与果实的质量之比为（10~20）：100，所述发酵时间为3~5天；

步骤2-2，将发酵物装入尼龙网袋，反复搓揉，使得果实破裂，然后用流水冲洗尼龙网袋，使得果浆除去；

步骤2-3，去除果皮，得到种子；

步骤3中，所述种子的精选为风选、筛选和水选，所述水选为将筛选过的种子加水搅拌，浸种一段时间，所述搅拌时间为6~12min，所述浸种时间为4~5h；

步骤4中，所述处理为将种子浸泡在强碱溶液中；

所述强碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液或饱和石灰水中的一种；

步骤5中，所述清洗包括水洗和浸泡；

所述浸泡时间为4~6天；

所述步骤6包括以下子步骤：

步骤6-1，将河沙清洗、过筛及消毒后，与水混合制备得到层积沙，所述消毒为在140~145℃下消毒1~3h，所述过筛为过0.05~0.8mm的筛；

所述水的体积与消毒沙的质量的比为1：（10~20）；

步骤6-2，将种子与层积沙混合，进行低温层积处理，所述低温层积处理在2~5℃的黑暗条件下进行，层积时间为30~60天；

所述方法还包括以下步骤：

步骤7，将步骤6处理后的种子进行回干处理；

步骤8，种子进行发芽检测处理，根据种子的大小选择发芽床，包括纸床、砂床和土壤床；

所述氢氧化钠溶液的浓度为1~4mol/L，

所述氢氧化钾溶液的浓度为1~3mol/L；

所述种子在氢氧化钠溶液中的浸泡时间为30~60min，

所述种子在氢氧化钾溶液中的浸泡时间为30~50min，

所述种子在饱和石灰水中的浸泡时间为20~28h。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5中，

在浸泡的时间段内，每隔3~6h更换一次清水，以使发芽抑制物充分浸出。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

在步骤6中，所述层积沙与种子的体积比为（2~12）：1。