CN110151820A - 一种防治羔羊腹泻蒙药组方的筛选及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治羔羊腹泻蒙药组方的筛选及其制备方法，将石榴皮、黄芩、小白蒿磨粉过筛，分别加入不同浓度和体积的乙醇溶液，反复煎煮两次，过滤药渣，提取上清液，提取的上清液按一定比例混合后，挥发溶剂，将浓缩物混合，同时加入30倍蒸馏水，反复煎煮混匀后，过滤分装即得。该蒙药组方不仅对腹泻小鼠模型有明显的治疗作用，同时能显著降低发病羊腹泻指数和腹泻复发率。本发明还提供该蒙药组方的醇提工艺优化方法，其工艺设计合理，优化目标明确，工艺条件预测精准，保证提取物中间产品产量、质量稳定一致，为该蒙兽药组方口服液的制备奠定理论基础。

Description

一种防治羔羊腹泻蒙药组方的筛选及其制备方法

技术领域：

本发明涉及蒙兽药制备技术领域领域，具体为一种防治羔羊腹泻的蒙药及其制备方法。

背景技术：

动物腹泻是国内外养殖业种常见的疾病之一，其病理现象主要表现为胃肠道炎症、水肿、肠道运动频繁等。因其表现形式多样化，原因复杂，病程长，发病率高，对动物的自身健康有较严重的危害，同时给养殖业也带来了巨大的经济损失。我国治疗动物腹泻的传统方法是大量的使用抗生素，但是抗生素长期不规范使用，极易产生耐药性，且毒副作用较大，往往得不到理想的治疗效果，更有甚者，导致动物肠道内有益自身肠道菌群的平衡也被打破，更进一步导致动物腹泻病程加重。

以蒙古族的医疗实践经验为基础，吸收了藏医和中医的理论精华而形成了蒙兽医药学，它是蒙古族特有的传统兽医科学，也是祖国医学的重要组成部分。蒙兽药具有个体和群体防治的双效功用，既能进行疫病的群体防治，又可促进个体生长发育，具有双向调节作用。使用蒙兽药不易产生抗药性，且用量小、疗效高、抗病力强、药源广、成本低、无公害、易储存、安全可靠和使用方便，还能提高饲料的转化率和动物体的产品质量，增强动物体的免疫力和竞争力。

内蒙古是我国重要的畜牧业生产基地和畜产品产出地区，草原畜牧是内蒙古的优势产业和基础产业，尤其是内蒙古牛羊业发展迅速，已跨入全国牛羊业生产大区。随着疾病的频发以及人们对绿色养殖的要求，蒙兽药具有来源广泛、治疗效果显著、毒副作用小、不易产生耐药性等优点。因此，选用蒙兽药来防治动物腹泻已成为当前养殖业亟待研究的问题。目前公布的防治羔羊腹泻药物大部分为散剂，使用较为不便；复方类煎剂因组方复杂，质量控制较为困难，有的仅作为腹泻预防用。

发明内容：

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种防治羔羊腹泻的蒙药及其制备方法，以解决上述背景技术提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种防治羔羊腹泻蒙药，包括石榴皮、黄芩和小白蒿，所述石榴皮5-20份、所述黄芩1-15份和所述小白蒿1-10份。

一种防治羔羊腹泻蒙药的制备方法，具体步骤如下；

步骤一：取石榴皮9份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入90％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，60℃水浴煮沸3h，分别重复两次，过滤药渣，得到石榴皮提取液；

步骤二：取黄芩5份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸5h，分别重复两次，过滤药渣，得到黄芩提取液；

步骤三：取小白蒿1份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸4h，分别重复两次，过滤药渣，得到小白蒿提取液；

步骤四：合并混匀三组提取液，50℃浓缩挥发得干浸膏，浸膏测定相对密度为1.20-1.25，混合干浸膏再加入30倍体积的水，50℃加热溶解，制成防治羔羊腹泻的蒙药。

本发明的有益效果是：本发明首次将石榴皮、黄芩、小白蒿三味蒙药进行配伍，组成了蒙药组方，用于治疗羔羊腹泻。结果发现，作为饲料添加剂使用2 次后，羔羊腹泻基本痊愈，且连续观察一周未见复发；诺氟沙星阳性对照组用药4天后痊愈；本蒙药组方的工艺流程较为简单，且使用比较方便，而且成本低廉，可用于临床羔羊腹泻的防治手段之一。该蒙药组方工艺简单，使用方便，无特定环境要求，质量监控较为简便。

具体实施方式：

下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易被本领域人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。

本发明提供一种技术方案：一种防治羔羊腹泻蒙药，包括石榴皮、黄芩和小白蒿，石榴皮5-20份、黄芩1-15份和小白蒿1-10份。

一种防治羔羊腹泻蒙药的制备方法，具体步骤如下；

步骤一：取石榴皮9份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入90％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，60℃水浴煮沸3h，分别重复两次，过滤药渣，得到石榴皮提取液；

步骤二：取黄芩5份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸5h，分别重复两次，过滤药渣，得到黄芩提取液；

步骤三：取小白蒿1份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸4h，分别重复两次，过滤药渣，得到小白蒿提取液；

步骤四：合并混匀三组提取液，50℃浓缩挥发得干浸膏，浸膏测定相对密度为1.20-1.25，混合干浸膏再加入30倍体积的水，50℃加热溶解，制成防治羔羊腹泻的蒙药。

实施例1：

三组蒙药不同配伍制剂对主总黄酮的影响

本发明的主要成分含量测定试验中，按照表1中的不同组方进行蒙药配伍，分组为A-C如表1。每组都按照同样方法进行提取，然后使用分光光度计对提取物的主要成分总黄酮的含量进行测定。

表1

提取方法按上述表1中的不同组方进行配比。取石榴皮9份、黄芩5份、小白蒿1份，分别粉碎过筛(100目)，各粉末中加入50-100％的乙醇溶液中，料液比为1∶5-1∶30，浸泡12h后，30-80℃水浴煮沸0.5-5h，分别重复两次，过滤药渣，得到三组蒙药的提取液。合并混匀三组提取液，50℃浓缩挥发得干浸膏，浸膏测定相对密度为1.20-1.25，混合干浸膏再加入30倍体积的水，50℃加热溶解，制成白石黄蒙药组方。

实施例2：提取溶剂及其浓度的选择

溶剂乙醇浓度依次选择50％、60％、70％、80％、90％、100％，每组都按照同样方法进行提取，然后使用分光光度计对提取物的主要成分总黄酮的含量进行测定。所述蒙药组方由上述兽用蒙药组合物制备而成，所述蒙药组方的制备方法同实施例1。

实施例3：与溶剂料液比的选择

与溶剂料液比分别为1∶5，1∶10，1∶15，1∶20，1∶25，1∶30，每组都按照同样方法进行提取，然后使用分光光度计对提取物的主要成分总黄酮的含量进行测定。所述蒙药组方由上述兽用蒙药组合物制备而成，所述蒙药组方的制备方法同实施例1。

实施例4：提取温度的选择

水浴煮沸温度的选择有30℃，40℃，50℃，60℃，70℃，80℃，每组都按照同样方法进行提取，然后使用分光光度计对提取物的主要成分总黄酮的含量进行测定。所述蒙药组方由上述兽用蒙药组合物制备而成，所述蒙药组方的制备方法同实施例1。

实施例5：提取时间的选择

水浴煮沸时间的选择有0.5h，1h，2h，3h，4h，5h，每组都按照同样方法进行提取，然后使用分光光度计对提取物的主要成分总黄酮的含量进行测定。所述蒙药组方由上述兽用蒙药组合物制备而成，所述蒙药组方的制备方法同实施例1。

防治羔羊腹泻蒙药的制备方法如下：

(1)取石榴皮9份，粉碎过筛(100目)，粉末中加入90％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，60℃水浴煮沸3h，分别重复两次，过滤药渣，得到石榴皮提取液。

(2)取黄芩5份，粉碎过筛(100目)，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸5h，分别重复两次，过滤药渣，得到黄芩提取液。

(3)取小白蒿1份，粉碎过筛(100目)，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸4h，分别重复两次，过滤药渣，得到小白蒿提取液。

(4)合并混匀三组提取液，50℃浓缩挥发得干浸膏，浸膏测定相对密度为 1.20-1.25，混合干浸膏再加入30倍体积的水，50℃加热溶解，制成白石黄蒙药组方。

实施例6：不同浓度的蒙药组方对腹泻型模型小鼠的应用。

通过番泻叶所致的小鼠腹泻模型，研究本发明蒙药组方治疗腹泻的有效性。

(1)番泻叶水煎液的制备：称取番泻叶30g，粉碎过筛(100目)，加1000mL 的蒸馏水煮沸10分钟，过滤药渣，水浴浓缩至0.3g/mL，浓缩液置于灭菌玻璃瓶中4℃保存备用。

(2)取体重约为20-22g左右，雌雄各半的实验室清洁级小鼠，按体重随机分为4组，分别作为空白对照组(生理盐水灌胃)、模型对照组(番泻叶水煎液灌胃)、蒙药组方低剂量组、蒙药组方高剂量组，每组20只。各组小鼠分笼饲养，禁食12小时后，各组分别按各自的给药方法及剂量给小鼠用药。第1， 2周空白对照组用生理盐水灌胃(0.4mL/只)，其余小鼠均用番泻叶水煎液灌胃 (0.4mL/只)，2周后空白对照组小鼠粪便正常，肛门周毛发干净，无腹泻症状出现，其余小鼠粪便均为水样粪便，肛门周毛发污染，出现腹泻现象，表明试验性腹泻小鼠模型造模成功。造模成功后，蒙药组方低、高剂量组的小鼠，每只分别灌服药液0.4mL，生药含量分别为0.5g/mL和1.0g/mL，空白对照组和模型对照组灌服等量生理盐水，每天2次，连续灌胃。将每只小鼠单独置于笼中，在笼子下面铺上吸收纸垫，观察小鼠的粪便情况，共观察6h，沾满粪便后即时更换滤纸。小鼠粪便正常、肛门周围毛发干净，虽然外形正常，但是出现软便、水便均属于腹泻症状。根据滤纸上的腹泻滩数即为稀便的次数，同时计算各组小鼠的腹泻率、稀便率和腹泻抑制率。

表1蒙药组方对小鼠腹泻的影响

由表1可知，蒙兽药组方高剂量组的排便次数和稀便率均显著低于模型对照组，与低剂量组相比，蒙兽药组方高剂量组的腹泻抑制率明显增加，差异极显著(P＜0.05)，结果表明，蒙兽药组方高剂量组对小鼠的腹泻有极显著的控制作用(P＜0.05)。

(3)蒙药组方对腹泻小鼠小肠运动的影响：每组剩下的10只小鼠用于碳墨推进率的测定，末次给药后30min各组小鼠给于墨汁灌胃，0.4mL/只。半个小时后，将小鼠脱颈椎脱臼致死，后打开小鼠腹腔将其腹腔内肠系膜分离出来。从幽门的上端至回盲部的下端剪取，将肠管拉成直线，测量其总长度，计算其碳墨推进率。

表2蒙药组方对小鼠小肠运动的影响

由表2可知，模型对照组与空白对照组相比，极显著(P＜0.01)，表明番泻叶致小鼠小肠运动亢进模型建立成功，与模型对照组比较，蒙药组方低、高剂量组对小鼠的小肠蠕动均有显著性差异(P＜0.01)，表明蒙药组方对腹泻小鼠小肠蠕动有明显的抑制作用，且作用的大小与剂量浓度高低相关。

实施例7：蒙药组方作为羔羊的饲料添加剂，添加量为饲料的0.1wt％-0.5wt％。

10-22日龄腹泻羔羊(粪便稀薄、色黄白，有的似糊状，有的水样，大部分肛门周围及后躯见大量粪便污染，确定为腹泻症状)60头，按栏位随机分为3 组：空白对照组(不添加)、抗生素组和蒙药组方组，添加量为饲料的 0.1wt％-0.5wt％，每天1次，连续饲喂1周，观察各组羔羊腹泻情况，并统计腹泻指数。

表3羔羊腹泻指数评分标准

表4各组羔羊腹泻指数评分结果

各组羔羊腹泻指数评分情况见表4，抗生素组和蒙药组方组明显低于空白对照组，差异显著，蒙药组方组略高于抗生素组腹泻指数，但基本接近，无明显差异。到第5天，蒙药组方组与抗生素组羔羊均基本治愈，治愈率达到72％以上，观察一周，蒙药组方组和抗生素组均未见复发，与空白对照组之间差异显著，证明该蒙药组方在羔羊腹泻方面有很得防治效果，防治效果与抗生素类药物相近。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护。

Claims (2)

1.一种防治羔羊腹泻的蒙药，包括石榴皮、黄芩和小白蒿，其特征在于，所述石榴皮5-20份、所述黄芩1-15份和所述小白蒿1-10份。

2.一种如权利要求1所述的防治羔羊腹泻蒙药的制备方法，其特征在于：具体步骤如下；

步骤一：取石榴皮9份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入90％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，60℃水浴煮沸3h，分别重复两次，过滤药渣，得到石榴皮提取液；

步骤二：取黄芩5份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸5h，分别重复两次，过滤药渣，得到黄芩提取液；

步骤三：取小白蒿1份，粉碎过筛，颗粒大小为100目，粉末中加入70％的乙醇溶液，料液比为1∶30，浸泡12h后，80℃水浴煮沸4h，分别重复两次，过滤药渣，得到小白蒿提取液；

步骤四：合并混匀三组提取液，50℃浓缩挥发得干浸膏，浸膏测定相对密度为1.20-1.25，混合干浸膏再加入30倍体积的水，50℃加热溶解，制成防治羔羊腹泻的蒙药。