CN110151592A - 一种组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种组合物及其制备方法和用途。所述组合物含有盐酸吡哆醇、硫酸锌、铜肽、生物素三肽‑1、乙酰四肽‑3、十肽‑18和透明质酸钠。本发明提供的组合物可防止脱发、促进生发和/或养护头皮头发。

Description

一种组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及皮肤医学领域，尤其涉及一种用于防止脱发、促进头发生长及保护发丝的凝胶及其制备方法。

背景技术

脱发是世界性的皮肤问题，大约有50％的成年男子受到脱发的困扰。据最新一次公布的“中国脱发人群调查”数据表明，我国脱发人群约达2亿，其中男性脱发人数约1.3亿，男性脱发的发病率达到19.9％。

最常见的脱发类型是“男性典型脱发”，或称为“雄性脱发”或“脂溢型脱发”，约占脱发人群的95％。雄性脱发主要原因是由于DHT对毛囊的刺激。除了雄性脱发，脱发类型还包括斑秃、精神性脱发、内分泌失调性脱发、营养代谢性脱发、化学性脱发等。此外，洗发剂、烫发剂、染发剂等美发化妆品若选择和使用不当也会引起脱发。

目前FDA认证的对男性脂溢型脱发有效的治疗方法只有外用的米诺地尔和内服的保法止。然而这些产品多对头皮有刺激性或存在副作用，且价格较高。因此，本领域迫切需要提供一种安全、有效、简便、低廉的防脱生发护发产品。

发明内容

本发明旨在提供一种防止脱发、促进头发生长及保护发丝的凝胶及其制备方法。

在本发明的第一方面，提供一种组合物，所述组合物包括以下有效成分：

a.盐酸吡哆醇；和

b.硫酸锌；

所述盐酸吡哆醇与硫酸锌的重量比为1:10-10:1；

以组合物的总重量计，盐酸吡哆醇的含量为0.01-5.0wt％，硫酸锌的含量为0.01-5.0wt％。

在另一优选例中，所述盐酸吡哆醇与硫酸锌的重量比为1:3-3:1。

在另一优选例中，以组合物的总重量计，盐酸吡哆醇的含量为0.1-1.0wt％；硫酸锌的含量为0.1-1.0wt％。

在另一优选例中，所述组合物还含有选自下述的有效成分：铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3、十肽-18和透明质酸钠；

以组合物的总重量计，铜肽的含量为1-500ppm；生物素三肽-1的含量为1-500ppm，乙酰四肽-3的含量为1-500ppm，十肽-18的含量为1-500ppm，透明质酸钠的含量为0.01％-5.0wt％。

在本发明的第二方面，提供一种如上所述的本发明提供的组合物的制备方法，所述方法包括步骤：将硫酸锌和盐酸吡哆醇混合，得到如上所述的本发明提供的组合物。

在另一优选例中，将硫酸锌和盐酸吡哆醇在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中混合。

在本发明的第三方面，提供一种如上所述的本发明提供的组合物制备方法，所述方法包括步骤：

(1)将硫酸锌和盐酸吡哆醇在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中混合，得到溶液1；

(2)将透明质酸钠与溶液1混合，得到溶液2；和

(3)将溶液2与溶液3混合，得到如上所述的本发明提供的组合物；所述溶液3通过将铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3、十肽-18与水混合而得。

在另一优选例中，所述水为注射用水。

在另一优选例中，步骤(3)中所述的混合是将溶液3加入到溶液2中，温度不超过40℃。

在另一优选例中，步骤(3)所述混合后都经过灭菌或除菌处理。

在本发明的第四方面，提供一种如上所述的本发明提供的组合物在防止脱发、促进生发和/或养护头皮头发中的应用。

在本发明的第五方面，提供一种如上所述的本发明提供的组合物的使用方法，所述方法包括外部涂抹、滚针导入和皮下注射。

据此，本发明提供了一种安全、有效、简便、低廉的防脱生发护发产品。

附图说明

图1显示实验例1中控制组和实验组对5-α-还原酶活性抑制作用的对比结果。

图2显示实验例2中控制组和实验组促进毛干生长的作用的对比结果。

图3显示实施例4、对比例1和2获得的产品对头发脱落及新发生长状况的影响。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，发现将盐酸吡哆醇与硫酸锌合用可以对防止脱发，尤其是脂溢性脱发产生良好的协同作用；进一步地，与一组多肽复合物形成的凝胶，更能在防止脱发的基础上产生促进新发生长等作用。

如本发明所用，“铜肽”是指分子式为分子式是C14H24N6O4的化学物质，CAS登录号为49557-75-7。

如本发明所用，“生物素三肽-1”是指将维生素H和马曲金汰(Matrikine)系列GHK相结合的三肽，CAS登录号为299157-54-3。

如本发明所用，“乙酰四肽-3”是指多肽序列：Ac-KGHK-OH，CAS登录号为827306-88-7。

如本发明所用，“十肽-18”的多肽序列为CHCRQTRVER。

如本发明所用，“盐酸吡哆醇”又名维生素B6。

如本发明所用，“透明质酸钠”是指一种葡聚糖醛酸，CAS登录号为9067-32-7。在本发明的一种实施方式中，所述透明质酸钠的分子量为30万-130万。

组合物

本发明提供一种防脱发活性物，其中包括盐酸吡哆醇和硫酸锌；以组合物的总重量计，其中含有0.01-5.0wt％盐酸吡哆醇和0.01-5.0wt％硫酸锌。

在本发明的一种实施方式中，所述组合物中盐酸吡哆醇和硫酸锌的重量比为1:10-10:1；优选为1:3-3:1。

本发明提供一种组合物，其中含有多肽复合物、上述本发明提供的防脱发活性物以及具有保湿作用的物质，所述具有保湿作用的物质包括但不限于，透明质酸钠、甘油；优选透明质酸钠。

以本发明所提供的组合物的总重量计，其中多肽复合物的含量为1-2000ppm，防脱发活性物的含量为0.02-10.0wt％，透明质酸钠的含量为0.01-5.0wt％。

本发明提供的组合物中，可用使用的多肽复合物选自下述的一种或两种以上：铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3和十肽-18。

在本发明的一种实施方式中，提供的组合物包括1-500ppm铜肽、1-500ppm生物素三肽-1、1-500ppm乙酰四肽-3、1-500ppm十肽-18、0.01-5.0wt％盐酸吡哆醇、0.01-5.0wt％硫酸锌和0.01-5.0wt％透明质酸钠。

在本发明的一种优选例中，以质量浓度计，提供的组合物包括20-200ppm铜肽、20-200ppm生物素三肽-1、20-200ppm乙酰四肽-3、20-200ppm十肽-18、0.1-1.0wt％盐酸吡哆醇、0.1-1.0wt％硫酸锌及0.1-2.0wt％透明质酸钠。

本发明提供的组合物可以多种形态存在，包括固体和液体，也可以是凝胶。所述固体可以是块状、棒状、颗粒状、粉末状等多种形状；所述液体可以是溶液、悬浮液等。

在本发明的一种优选例中，提供的组合物是透明、无菌、无毒、无热源、等渗透压、中性的粘弹性凝胶。

制备方法

本发明提供的防脱发活性物可以通过将盐酸吡哆醇和硫酸锌混合而得到。

在本发明的一种实施方式中，可以将盐酸吡哆醇和硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中；所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液的成分为柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钠及水；优选使用注射用水。

进一步地，将盐酸吡哆醇和硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中后进行除菌，得到本发明提供的防脱发活性物。

本发明提供的组合物的制备方法包括步骤：

第一步，将硫酸锌和盐酸吡哆醇在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中混合，得到溶液1；

第二步，将透明质酸钠与溶液1混合，得到溶液2；

第三步，将溶液2与溶液3混合，得到本发明提供的组合物；所述溶液3通过将多肽复合物和水混合而得。

在本发明的一种实施方式中，上述第一步是将配方量的硫酸锌和盐酸吡哆醇溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中；柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液的成分为柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钠及注射用水。

在本发明的一种优选例中，上述第一步中使用的缓冲液pH要在8.0左右，例如但不限于，8.0±0.5。

进一步地，上述第一步将得到的溶液1要除菌。

在本发明的一种实施方式中，上述第二步是将透明质酸钠加入到溶液1中，搅拌8-36小时，充分溶解。优选地，采用摇床摇匀或机械搅拌。

上述第三步中溶液2与溶液3的混合不可超声。

在本发明的一种实施方式中，上述第三步中溶液2与溶液3的混合温度不超过40℃。

在本发明的一种实施方式中，上述第三步在层流罩底下将本发明的多肽复合物溶解于注射用水得到溶液3，灭菌后将溶液3加入到溶液2中，缓慢摇匀。

本发明提供的组合物的上述制备方法中，可以采用本领域常用的方法进行灭菌或除菌，例如但不限于，湿热灭菌或0.22μm水性滤膜过滤除菌。

在本发明的一种实施方式中，上述制备防脱发活性物方法中盐酸吡哆醇和硫酸锌在缓冲溶液中混合后无菌灌装入容器中得到含有本发明提供的防脱发活性物的市场产品。

在本发明的一种实施方式中，上述制备组合物方法中溶液2与溶液3混合后无菌灌装入容器中得到含有本发明提供的组合物的市场产品。

可以使用本领域常用的无菌灌装容器，例如但不限于，西林瓶、预灌装注射器、安瓿瓶、带滴管的玻璃瓶等。

在本发明的一种实施方式中，选用无色或棕色的西林瓶、安瓿瓶、带滴管的玻璃瓶。

应用

本发明提供的含有盐酸吡哆醇和硫酸锌或由盐酸吡哆醇和硫酸锌构成的组合物具有抑制5-α-还原酶活性的作用。

本发明提供的防脱发活性物可防止脱发，尤其适于脂溢性脱发的人。

本发明提供的组合物不但可以防止脱发，还可促进新发生长，同时还能营养头皮、保护发丝；适用于希望解决脱发困扰的人群，也适用于希望美发、多发的人群。

本发明提供的防脱发活性物或组合物可以通过外部涂抹、滚针导入、皮下注射等方式进行使用。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、本发明提供的防脱发活性物可抑制5-α-还原酶活性，达到减少DHT合成的目的，从而有效治疗因DHT含量过高导致的脂溢性脱发症状。

2、本发明提供的组合物安全无毒，含有的多肽复合物能有效刺激头皮毛细血管再生，加强头皮血液循环，促进毛囊的生长，减少毛囊萎缩，加强头发在毛囊内的固定，在防止脱发的同时促进新发生长，营养头皮，保护发丝。

3、本发明提供的防脱发活性物或组合物无皮肤刺激性，安全可靠，可长期使用。

4、本发明提供的防脱发活性物或组合物成本低廉，适合大众。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1

防止脱发、促进头发生长及保护发丝的凝胶

其配方以质量浓度计包含以下组分：500ppm铜肽、500ppm生物素三肽-1、500ppm乙酰四肽-3、500ppm十肽-18、5.0wt％盐酸吡哆醇、5.0wt％硫酸锌及5.0wt％透明质酸钠。

其制备方法如下所述：

步骤一：5.0wt％盐酸吡哆醇、5.0wt％硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，0.22μm水性滤膜过滤除菌。

步骤二：将5.0wt％透明质酸钠加入到步骤一灭菌后的溶液中，机械搅拌36小时，充分溶解。

步骤三：层流罩底下将500ppm铜肽、500ppm生物素三肽-1、500ppm乙酰四肽-3、500ppm十肽-18分别溶解于注射用水中，用0.22μm水性滤膜过滤除菌，30℃下将多肽溶液缓缓加入到步骤二的透明质酸钠溶液中，缓慢摇匀。

步骤四：最后将产品无菌灌装到预灌装注射器中。

实施例2

防止脱发、促进头发生长及保护发丝的凝胶

其配方以质量浓度计包含以下组分：

1ppm铜肽、1ppm生物素三肽-1、1ppm乙酰四肽-3、1ppm十肽-18、0.01wt％盐酸吡哆醇、0.01wt％硫酸锌及0.01wt％透明质酸钠。

其制备方法如下所述：

步骤一：0.01wt％盐酸吡哆醇、0.01wt％硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，湿热灭菌。

步骤二：将0.01wt％透明质酸钠加入到步骤一灭菌后的溶液中，摇床摇匀12小时，充分溶解。

步骤三：层流罩底下将1ppm铜肽、1ppm生物素三肽-1、1ppm乙酰四肽-3、1ppm十肽-18分别溶解于注射用水中，用0.22μm水性滤膜过滤除菌，25℃下将多肽溶液缓缓加入到步骤二的透明质酸钠溶液中，缓慢摇匀。

步骤四：最后将产品无菌灌装到西林瓶中。

实施例3

防止脱发、促进头发生长及保护发丝的凝胶

其配方以质量浓度计包含以下组分：

250ppm铜肽、250ppm生物素三肽-1、250ppm乙酰四肽-3、250ppm十肽-18、2.5wt％盐酸吡哆醇、2.5wt％硫酸锌及2.5wt％透明质酸钠。

其制备方法如下所述：

步骤一：2.5wt％盐酸吡哆醇、2.5wt％硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，0.22μm水性滤膜过滤除菌。

步骤二：将2.5wt％透明质酸钠加入到步骤一灭菌后的溶液中，机械搅拌30小时，充分溶解。

步骤三：层流罩底下将250ppm铜肽、250ppm生物素三肽-1、250ppm乙酰四肽-3、250ppm十肽-18分别溶解于注射用水中，用0.22μm水性滤膜过滤除菌，25℃下将多肽溶液缓缓加入到步骤二的透明质酸钠溶液中，缓慢摇匀。

步骤四：最后将产品无菌灌装到预灌装注射器中。

实施例4

防止脱法、促进头发生长及保护发丝的凝胶

其配方以质量浓度计包含以下组分：

50ppm铜肽、50ppm生物素三肽-1、50ppm乙酰四肽-3、50ppm十肽-18、0.25wt％盐酸吡哆醇，0.8wt％硫酸锌及0.3wt％透明质酸钠。

其制备方法如下所述：

步骤一：0.25wt％盐酸吡哆醇、0.8wt％硫酸锌溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，0.22μm水性滤膜过滤除菌。

步骤二：将0.3wt％透明质酸钠加入到步骤一灭菌后的溶液中，摇床搅拌24小时，充分溶解。

步骤三：层流罩底下将50ppm铜肽、50ppm生物素三肽-1、50ppm乙酰四肽-3、50ppm十肽-18分别溶解于注射用水中，充分溶解后用0.22μm水性滤膜过滤除菌，20℃下将多肽溶液缓缓加入到步骤二的透明质酸钠溶液中，缓慢摇匀。

步骤四：最后将产品无菌灌装到西林瓶中。

对比例1

与实施例4相比，对比例1未添加多肽复合物(铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3和十肽-18)

对比例2

与实施例4相比，对比例2未添加防脱发活性成分盐酸吡哆醇和硫酸锌

实验例1

本实验例为体外测试硫酸锌与盐酸吡哆醇协同抑制5-α-还原酶活性的效果。配置100mmol/l的³H-睾丸酮(购自Amersham)培养液，向培养液中加入一定量含5-α-还原酶的组织均浆(使其在最终培养液中的浓度为10mg/ml)模拟体内酶的代谢过程并作为控制组。实验组溶液有以下五种：

实验组(1)向控制组溶液中加入0.1wt％硫酸锌；

实验组(2)向控制组溶液中加入0.1wt％盐酸吡哆醇；

实验组(3)向控制组溶液中加入重量比为1:1的硫酸锌与盐酸吡哆醇；

实验组(4)向控制组溶液中加入重量比为1:20的硫酸锌与盐酸吡哆醇；

实验组(5)向控制组溶液中加入重量比为20:1的硫酸锌与盐酸吡哆醇。

经过一段时间培养后，对比六组溶液5-α-还原酶活性，其对比效果如图1所示，与控制组相比，单纯加入盐酸吡哆醇无法抑制5-α-还原酶活性，硫酸锌具有一定抑制5-α-还原酶活性的作用，在两者的优化比例内(1:3-3:1),硫酸锌与盐酸吡哆醇发挥协同作用，显著地抑制了5-α-还原酶活性，其5-α-还原酶活性降低了约97％。在优化比例外(1:20和20:1),硫酸锌与盐酸吡哆醇协同抑制5-α-还原酶的作用不明显。

实验例2

本实验例为体外测试各种多肽刺激头发生长的效果，将毛囊置于不同培养液中在37℃培养14天，对比第一天和第十四天毛干的长度。其中培养液有以下三类：

1.普通培养基作为控制组；

2.米诺地尔(50ppm)作为阳性控制组；

3.多肽溶液作为实验组，且每种多肽的浓度均为50ppm，如表1所示。

14天后毛囊培养结果(毛干生长率)见图2。从图中可以看出，毛干在多肽溶液中生长状况要好于控制组的生长状况，而且多肽组合的生发效果比单一多肽效果明显。

表1多肽溶液实验组多肽组合

实验组	铜肽	生物素三肽-1	乙酰四肽-3	十肽-18
					1		√
2			√
					3				√
4		√	√
					5			√	√
6		√		√
					7		√	√	√
8	√	√	√	√

实验例3

对实施例4的各项性能指标进行了测试，其中包括外观、pH、渗透压、无菌、细菌内毒素、重金属含量。测试结果如表2所示：

表2实施例四性能指标测试结果

实验例4

采用实施例4及对比例1和对比例2获得的产品来验证本防脱生发护发凝胶的临床效果，选择了90名雄性脱发患者，年龄25-62岁，平均年龄35岁，分为3组，每组各30人，分别使用实施例4、对比例一和对比例二的产品。每个患者在脱发处涂抹20滴防脱生发护发凝胶，早晚各一次，持续时间3个月，对比三组患者试验前后头发脱落状况和新发生长状况。

临床试验结果如图3所示，本发明的防脱生发护发凝胶具有缓解脱发，刺激毛发再生的显著疗效。

对比例1与实施例4对比可见，多肽复合物具有明显的刺激新发生长的功效，对比例2与实施例4对比可见，防脱发活性物具有缓解脱发的良好疗效，只有将两者复合才能充分发挥止脱生发的协同作用。

实验例5

根据《GBT_16886.5-2003-医疗器械生物学评价_第5部分：体外细胞毒性试验》的方法对实施例4产品进行体外细胞毒性试验；

根据《GBT_16886.10-2005-医疗器械生物学评价_第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验》的方法对实施例4产品进行新西兰大白兔皮肤刺激性试验。

细胞毒性试验结果：细胞毒性为0级，无细胞毒性。

新西兰大白兔皮肤刺激性试验结果：原发性刺激分为0，无红斑、无水肿。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims (10)

1.一种组合物，其特征在于，它包括以下有效成分：

a.盐酸吡哆醇；和

b.硫酸锌；

所述盐酸吡哆醇与硫酸锌的重量比为1:10-10:1；

以组合物的总重量计，盐酸吡哆醇的含量为0.01-5.0wt％，硫酸锌的含量为0.01-5.0wt％。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述盐酸吡哆醇与硫酸锌的重量比为1:3-3:1。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，以组合物的总重量计，盐酸吡哆醇的含量为0.1-1.0wt％；硫酸锌的含量为0.1-1.0wt％。

4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还含有选自下述的有效成分：铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3、十肽-18和透明质酸钠；

以组合物的总重量计，铜肽的含量为1-500ppm；生物素三肽-1的含量为1-500ppm，乙酰四肽-3的含量为1-500ppm，十肽-18的含量为1-500ppm，透明质酸钠的含量为0.01％-5.0wt％。

5.一种如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：将硫酸锌和盐酸吡哆醇混合，得到如权利要求1所述的组合物。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，将硫酸锌和盐酸吡哆醇在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中混合。

7.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(1)将硫酸锌和盐酸吡哆醇在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中混合，得到溶液1；

(2)将透明质酸钠与溶液1混合，得到溶液2；

(3)将溶液2与溶液3混合，得到如权利要求1-4任一项所述的组合物；所述溶液3通过将铜肽、生物素三肽-1、乙酰四肽-3、十肽-18与水混合而得。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的混合是将溶液3加入到溶液2中，温度不超过40℃。

9.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物在防止脱发、促进生发和/或养护头皮头发中的应用。

10.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物的使用方法，其特征在于，所述方法包括外部涂抹、滚针导入和皮下注射。