CN110150230A - 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 - Google Patents
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110150230A CN110150230A CN201810028573.3A CN201810028573A CN110150230A CN 110150230 A CN110150230 A CN 110150230A CN 201810028573 A CN201810028573 A CN 201810028573A CN 110150230 A CN110150230 A CN 110150230A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- caenorhabditis elegans
- filter screen
- phase
- circular ring
- ring type
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 title claims abstract description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 38
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 claims abstract description 37
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 27
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 13
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 230000002940 repellent Effects 0.000 claims description 7
- 239000005871 repellent Substances 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000007711 solidification Methods 0.000 claims description 7
- 230000008023 solidification Effects 0.000 claims description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 7
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 241000244200 Rhabditida Species 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 238000012549 training Methods 0.000 claims description 3
- 238000005336 cracking Methods 0.000 abstract description 7
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 2
- 241001167795 Escherichia coli OP50 Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B07—SEPARATING SOLIDS FROM SOLIDS; SORTING
- B07B—SEPARATING SOLIDS FROM SOLIDS BY SIEVING, SCREENING, SIFTING OR BY USING GAS CURRENTS; SEPARATING BY OTHER DRY METHODS APPLICABLE TO BULK MATERIAL, e.g. LOOSE ARTICLES FIT TO BE HANDLED LIKE BULK MATERIAL
- B07B1/00—Sieving, screening, sifting, or sorting solid materials using networks, gratings, grids, or the like
- B07B1/04—Stationary flat screens
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法。将900‑1100目尼龙筛网制作成圆环型过滤网；配制固体培养基；将培养的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用缓冲液冲洗到离心管中，离心弃去上清液，将其转移过滤网中；将食盐水滴加至过滤网中使线虫趋避扩散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；然后用缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的秀丽隐杆线虫至离心管中，离心弃去上清液，得L1期秀丽隐杆线虫；将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中培养得L4期线虫。本发明物理分离筛选方法，操作简单，无需裂解，对线虫不会造成伤害，可解决由于线虫裂解不充分导致不能完全同步化的问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，属于生物工程技术领域。
背景技术
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans，C.elegans)是国际公认的在延缓衰老研究领域中具有优势的模型生物，具有实验操作简单、发育周期短、遗传信息明确、易于大规模培养等优点，被广泛应用于抗衰老、神经行为学、环境科学和食品科学等相关方面的科学研究。其次，秀丽隐杆线虫是首次被研究发现全部基因组的真核生物，并且40％以上的基因与人类基因同源，全基因组序列的被发现为基因学提供了丰富的研究资源，为人类通过线虫研究人类衰老的基因机理奠定了基础。
传统的秀丽隐杆线虫线虫的同步化方法有两种：产卵法和裂解法，产卵法是在无菌环境下挑取处于产卵期的雌雄同体线虫成虫放在涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上产卵，再将成虫挑走，20℃培养24h，得同期化秀丽隐杆线虫，此方法缺点是操作复杂费时，较难掌握，当需要制备大量同期化线虫时工作量大；裂解法是将处于产卵期的秀丽隐杆线虫用裂解液裂解，使虫卵保留下来而成虫被裂解死亡，将裂解后的虫卵20℃培养24h，得同期化秀丽隐杆线虫，此方法缺点是裂解不够充分时，秀丽线虫不能够完全同步化。
发明内容
本发明主要采用筛网对秀丽隐杆线虫进行分离，利用秀丽隐杆线虫在不同时期体型不同的特点，使用不同目数的筛网对其进行分离，此方法属于物理分离筛选方法，操作简单，无需裂解，对线虫不会造成伤害，可解决由于线虫裂解不充分导致不能完全同步化的问题。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
1)选取900-1100目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，110-130℃高压灭菌15-25min后制备平板，平板厚度0.4-0.6cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.4-0.6cm，然后冷却凝固；
3)将已培养3-4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.15-0.25mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4-6min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透900-1100目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)8-12min后，用0.15-0.25mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，18-22℃培养45-50h，得L4期线虫。
所述固体培养基为NGM固体培养基。
所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为1500-2500rpm，离心时间均为0.5-1.5min。
NaCl溶液的浓度为180-220mmol/L。
本发明巧妙的采用筛网对秀丽隐杆线虫进行分离，利用秀丽隐杆线虫在不同时期体型不同的特点，使用不同目数的筛网对其进行分离，此方法属于物理分离筛选方法，操作简单，无需裂解，对线虫不会造成伤害，可解决由于线虫裂解不充分导致不能完全同步化的问题。
采用盐水来驱赶秀丽隐杆线虫，然后通过筛网的阻挡，让L1期的秀丽隐杆线虫穿透尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上，实现L1期的秀丽隐杆线虫的分离。
具体实施方式
现在结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
1)选取900-1100目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，110-130℃高压灭菌15-25min后制备平板，平板厚度0.4-0.6cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.4-0.6cm，然后冷却凝固；
3)将已培养3-4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.15-0.25mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4-6min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透900-1100目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)8-12min后，用0.15-0.25mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，18-22℃培养45-50h，得L4期线虫。
所述固体培养基为NGM固体培养基。
所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为1500-2500rpm，离心时间均为0.5-1.5min。
NaCl溶液的浓度为180-220mmol/L。
实施例1
1)选取1000目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制NGM固体培养基，121℃高压灭菌20min后制备平板，平板厚度0.5cm左右，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.5cm左右，冷却凝固；
3)将已培养3-4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.2mLM9缓冲液冲洗至1.5mL离心管中离心，2000rpm，1min，去上清，静置5min后，将其转移至NGM培养基的圆环形过滤网中；
4)配制浓度为200mM的NaCl溶液作为线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在浓盐水的驱避作用下，线虫逃散，L1期的线虫可以穿透1000目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
6)10min后,用0.2mLM9缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至1.5mL离心管中离心，2000rpm，1min，弃上清，重复冲洗3次，得L1期线虫；
7)将L1期线虫接至含大肠杆菌的NGM培养基中，20℃培养48h，得L4期线虫。
实施例2
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
1)选取1050目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，125℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.45cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.45cm，然后冷却凝固；
3)将已培养3天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.17mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4.5min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透1050目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)12min后，用0.21mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养48h，得L4期线虫。
所述固体培养基为NGM固体培养基。
所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2200rpm，离心时间均为1.2min。
NaCl溶液的浓度为210mmol/L。
实施例3
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
1)选取980目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，118℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.45cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.45cm，然后冷却凝固；
3)将已培养3-4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.19mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置5.1min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透980目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)11min后，用0.22mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养48h，得L4期线虫。
所述固体培养基为NGM固体培养基。
所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2100rpm，离心时间均为1.2min。
NaCl溶液的浓度为210mmol/L。
实施例4
一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
1)选取1020目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，123℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.51cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.51cm，然后冷却凝固；
3)将已培养4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.21mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置5min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透1020目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)11min后，用0.21mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养49h，得L4期线虫。
所述固体培养基为NGM固体培养基。
所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2100rpm，离心时间均为1.25min。
NaCl溶液的浓度为195mmol/L。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (4)
1.一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)选取900-1100目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
2)配制固体培养基，110-130℃高压灭菌15-25min后制备平板，平板厚度0.4-0.6cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.4-0.6cm，然后冷却凝固；
3)将已培养3-4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.15-0.25mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4-6min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透900-1100目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
5)8-12min后，用0.15-0.25mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的秀丽隐杆线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，18-22℃培养45-50h，得L4期线虫。
2.如权利要求1所述的一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其特征在于：所述固体培养基为NGM固体培养基。
3.如权利要求1所述的一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其特征在于：所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为1500-2500rpm，离心时间均为0.5-1.5min。
4.如权利要求1所述的一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其特征在于：NaCl溶液的浓度为180-220mmol/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810028573.3A CN110150230B (zh) | 2018-01-12 | 2018-01-12 | 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810028573.3A CN110150230B (zh) | 2018-01-12 | 2018-01-12 | 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110150230A true CN110150230A (zh) | 2019-08-23 |
| CN110150230B CN110150230B (zh) | 2021-08-27 |
Family
ID=67641119
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810028573.3A Expired - Fee Related CN110150230B (zh) | 2018-01-12 | 2018-01-12 | 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110150230B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111378715A (zh) * | 2020-02-29 | 2020-07-07 | 广西壮族自治区兽医研究所 | 一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型 |
| CN114794029A (zh) * | 2022-06-09 | 2022-07-29 | 上海大学 | 一种计数秀丽隐杆线虫子宫内发育胚胎数目的方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN201252774Y (zh) * | 2008-08-07 | 2009-06-10 | 北京市农林科学院 | 一种小型昆虫分离器 |
| CN102607928A (zh) * | 2012-03-20 | 2012-07-25 | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 | 一种利用NaCl溶液分离线虫的方法 |
| CN103913555A (zh) * | 2014-04-15 | 2014-07-09 | 常州纺织服装职业技术学院 | 运用秀丽隐杆线虫对污水处理厂尾水进行毒性分析的方法 |
| CN104285889A (zh) * | 2013-07-15 | 2015-01-21 | 青海省畜牧兽医科学院 | 一种反刍动物线虫寄生阶段幼虫的分离装置及分离方法 |
| CN105833295A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-10 | 天津科技大学 | 一种秀丽隐杆线虫高尿酸模型的构建方法及应用和该构建方法的筛选方法 |
| CN206165508U (zh) * | 2016-09-27 | 2017-05-17 | 大连海洋大学 | 一种对具趋光性的溞类进行活体分级的装置 |
-
2018
- 2018-01-12 CN CN201810028573.3A patent/CN110150230B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN201252774Y (zh) * | 2008-08-07 | 2009-06-10 | 北京市农林科学院 | 一种小型昆虫分离器 |
| CN102607928A (zh) * | 2012-03-20 | 2012-07-25 | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 | 一种利用NaCl溶液分离线虫的方法 |
| CN104285889A (zh) * | 2013-07-15 | 2015-01-21 | 青海省畜牧兽医科学院 | 一种反刍动物线虫寄生阶段幼虫的分离装置及分离方法 |
| CN103913555A (zh) * | 2014-04-15 | 2014-07-09 | 常州纺织服装职业技术学院 | 运用秀丽隐杆线虫对污水处理厂尾水进行毒性分析的方法 |
| CN105833295A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-10 | 天津科技大学 | 一种秀丽隐杆线虫高尿酸模型的构建方法及应用和该构建方法的筛选方法 |
| CN206165508U (zh) * | 2016-09-27 | 2017-05-17 | 大连海洋大学 | 一种对具趋光性的溞类进行活体分级的装置 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111378715A (zh) * | 2020-02-29 | 2020-07-07 | 广西壮族自治区兽医研究所 | 一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型 |
| CN114794029A (zh) * | 2022-06-09 | 2022-07-29 | 上海大学 | 一种计数秀丽隐杆线虫子宫内发育胚胎数目的方法 |
| CN114794029B (zh) * | 2022-06-09 | 2023-02-28 | 上海大学 | 一种计数秀丽隐杆线虫子宫内发育胚胎数目的方法 |
| WO2023236496A1 (zh) * | 2022-06-09 | 2023-12-14 | 上海大学 | 一种计数秀丽隐杆线虫子宫内发育胚胎数目的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110150230B (zh) | 2021-08-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110150230A (zh) | 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法 | |
| JP4328737B2 (ja) | 真珠の養殖方法 | |
| JP6605179B2 (ja) | ラカンカ懸濁細胞中のモグロシドｖ含有量を高める方法 | |
| CN103609533B (zh) | 水蛭水族箱及立体养殖水蛭的方法 | |
| CN104371968A (zh) | 一种分离纯化大鼠肺微血管内皮细胞的方法 | |
| CN201821756U (zh) | 一种曼氏无针乌贼受精卵离水孵化的器具 | |
| CN106376545B (zh) | 一种高效保藏管氏肿腿蜂的方法 | |
| Streett et al. | Replication of Nosema algerae in three insect cell lines | |
| EP1733028B1 (de) | Verfahren zur herstellung einer biologischen materialzusammensetzung tierischen ursprungs | |
| CN103636541A (zh) | 罗氏沼虾受精卵的离体孵化方法 | |
| CN115044532B (zh) | 一种脉红螺胚胎细胞系的构建与鉴定方法 | |
| CN103598125A (zh) | 拟目乌贼流水式人工苗种培育方法 | |
| CN108531423B (zh) | 一种深海盐单胞菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| CN104974949B (zh) | 一种针对海水鱼类盾纤毛虫病原杀虫细菌的筛选方法 | |
| CN206165520U (zh) | 单体牡蛎稚贝循环水培育装置 | |
| KR20020087312A (ko) | 코디셉스 시넨시스균의 분리방법 | |
| CN109880747B (zh) | 一种中国被毛孢人工培养物的制备方法 | |
| Jell | Skeletogenesis of newly settled planulae of the hermatypic coral Porites lutea | |
| CN106538436A (zh) | 一种适用于单体牡蛎苗培育的固着基及其制作方法 | |
| CN102952776A (zh) | 长爪沙鼠原代肝细胞的培养方法 | |
| CN209527557U (zh) | 一种牡蛎稚贝培育的升降流装置 | |
| CN106106277B (zh) | 一种磁性珠核的制作方法 | |
| CN104798711A (zh) | 一种提高中国鲎人工育苗速度的方法 | |
| CN1185926C (zh) | 一种用生物工程技术获得肉苁蓉次生代谢产物的方法 | |
| CN205266629U (zh) | 一种用于浅水区域养殖牡蛎的附着基 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20210827 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |