CN110143994A - 辽东楤木单体皂苷衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了辽东楤木单体皂苷衍生物及其制备方法和用途，具有通式(Ⅰ)所示的结构。本发明以齐墩果酸或者熊果酸与五种糖，咖啡酸为原料，保留齐墩果酸和熊果酸的结构骨架，对齐墩果酸和熊果酸3位上的羟基基团进行糖苷化修饰，对28位羧基进行修饰，合成了新型的具有治疗心脑血管疾病等作用的辽东楤木单体皂苷衍生物，合成方法简便，产物纯度高。与辽东楤木单体皂苷比较而言，本发明提供的辽东楤木单体皂苷衍生物具有以下优点：1、来源易得，合成简便；2、具有相比于原型较好的生物活性和溶解性；3、结构全新。
Description
技术领域
本发明涉及药物化学和治疗学领域，特别是涉及一种辽东楤木单体皂苷 衍生物及其制备方法和用途。
背景技术
辽东楤木(Aralia elata Seem)又称龙牙楤木，民间常称其为刺老鸦，为五 加科楤木属多年生落叶灌木。世界范围内的五加科楤木属共计约有四十多 种，主要分布于远东地区和美洲大陆。中国大陆内的辽东楤木数量大约有三 十多种，主要分布于东北地区。
辽东楤木本身即为药食同源类植物，民间常将其内芽作为一种食材。早 在宋朝年间，我国就有将辽东楤木的根皮部作为药引的实例，及至唐初贞观 年间，民间常以辽东楤木的根、树皮入药，称为刺老鸦。建国初期，辽东楤 木和龙牙楤木分属于两种不同植物，但其外表特征相差很小，后来研究学者 就习惯将其归为一类。现代研究表明，辽东楤木根茎叶中含有丰富的化学活 性成分，并具有广泛的药理作用，可用于治疗心肌梗死、关节炎、心肌梗 死、胃溃疡、神经衰弱等症。
从辽东楤木的根、茎和叶中分离出的化学成分主要为皂苷和黄酮类化合 物，此外还有脂肪、糖类、芳香油、挥发油、蛋白质、氨基酸和无机元素 等。
楤木皂苷是辽东楤木根茎中含量最多的一类化学成分，其种类多达百余 种。楤木皂苷的苷元多为齐墩果酸、熊果酸、类叶牡丹和常春藤等五环三萜 型类，这些五环三萜类化合物多易与糖类在C-3或C-28位连接成苷，糖类主 要以D-葡萄糖(D-glucose)和D-半乳糖(D-galactose)为主。
辽东楤木总皂苷对异丙上腺素诱发的心肌缺血损伤和结扎冠脉所致大鼠 心梗塞均有保护作用；除此之外，辽东楤木总皂苷还可使蛙心跳速率减慢， 幅度增加，离体蛙心实验出现正性肌力作用。
前期研究发现，辽东楤木中的三萜皂苷类成分具有治疗冠心病心绞痛的 用途，目前以楤木皂苷为主要成分的楤木心脉通胶囊已获得药物临床研究批 件并完成了临床观察。在此基础上，课题组深入研究发现楤木皂苷中的活性 单体化合物齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸，具有较好的心肌保护作用。
虽然齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸是一种具有较好生物活性的天然 产物，但其也存在着一些缺点：作为天然产物，其植物来源有限；且虽然具 有多种生物活性，但其活性水平与化药相比相对较弱，且存在一定的溶解度 问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提出一种辽东楤木单体皂苷衍生物及其制 备方法和用途，解决了天然植物来源有限的问题，同时改善了辽东楤木单体 皂苷作用效果较弱的问题。
基于上述目的，本发明提供的一种辽东楤木单体皂苷衍生物，具有通式 (Ⅰ)所示的结构：
式中：R1、R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自H或OH；
R7选自H或CH2OH；
R8、R9和R11各自独立地选自H或CH3；
R10为CH3。
在本发明的一些实施例中，R1和R2不同，R3和R4不同，R5和R6不 同，R9和R11不同。
在本发明的一些实施例中，所述的辽东楤木单体皂苷衍生物为下述结构 式所示的化合物K1～K10，
在化合物K1中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OH，R6＝H， R7＝CH2OH，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在化合物K2中，R1＝OH，R2＝H，R3＝OH，R4＝H，R5＝H，R6＝OH， R7＝H，R8＝CH3，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在化合物K3中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OH，R6＝H， R7＝H，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在化合物K4中，R1＝H，R2＝OH，R3＝OH，R4＝H，R5＝OH，R6＝H， R7＝H，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在化合物K5中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝H，R6＝OH，R7＝ CH2OH，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在化合物K6中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OH，R6＝H，R7＝ CH2OH，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在化合物K7中，R1＝OH，R2＝H，R3＝OH，R4＝H，R5＝H，R6＝OH，R7＝ H，R8＝CH3，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在化合物K8中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OH，R6＝H，R7＝ H，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在化合物K9中，R1＝H，R2＝OH，R3＝OH，R4＝H，R5＝OH，R6＝H，R7＝ H，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在化合物K10中，R1＝OH，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝H，R6＝OH， R7＝CH2OH，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H。
本发明还提供给了一种上述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，包 括以下步骤：
在有机碱的作用下，齐墩果酸或熊果酸分别与溴苄反应得到中间体S1～ S2；
中间体S1～S2分别与中间体D1～D5反应得到中间体F1～F10；
具体的，中间体S1与中间体D1～D5反应得到中间F1～F5；
中间体S2与中间体D1～D5反应得到中间体F6～F10；
在H2/钯碳的作用下，中间体F1～F10分别还原得到中间体G1～G10；
中间体G1～G10分别与炔丙胺反应得到中间体H1～H10；
中间体H1～H10分别与甲醇钠甲醇溶液反应得到中间体J1～J10；
在中间体F1、中间体G1和中间体H1中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H， R4＝OBz，R5＝OBz，R6＝H，R7＝CH2OBz，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3， R11＝CH3；
在中间体F2、中间体G2和中间体H2中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝OBz， R4＝H，R5＝H，R6＝OBz，R7＝H，R8＝CH3，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在中间体F3、中间体G3和中间体H3中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H， R4＝OBz，R5＝OBz，R6＝H，R7＝H，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在中间体F4、中间体G4和中间体H4中，R1＝H，R2＝OBz，R3＝OBz， R4＝H，R5＝OBz，R6＝H，R7＝H，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3，R11＝CH3；
在中间体F5、中间体G5和中间体H5中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H， R4＝OBz，R5＝H，R6＝OBz，R7＝CH2OBz，R8＝H，R9＝H，R10＝CH3， R11＝CH3；
在中间体F6、中间体G6和中间体H6中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H， R4＝OBz，R5＝OBz，R6＝H，R7＝CH2OBz，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3， R11＝H；
在中间体F7、中间体G7和中间体H7中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝OBz， R4＝H，R5＝H，R6＝OBz，R7＝H，R8＝CH3，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在中间体F8、中间体G8和中间体H8中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H，R4＝OBz，R5＝OBz，R6＝H，R7＝H，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在中间体F9、中间体G9和中间体H9中，R1＝H，R2＝OBz，R3＝OBz， R4＝H，R5＝OBz，R6＝H，R7＝H，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3，R11＝H；
在中间体F10、中间体G10和中间体H10中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H， R4＝OBz，R5＝H，R6＝OBz，R7＝CH2OBz，R8＝H，R9＝CH3，R10＝CH3， R11＝H。
中间体J1～J10中R1～R11取代基与对应的化合物K1～K10中R1～R11取 代基相同。
咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间体P；
中间体P分别与中间体J1～J10反应得到辽东楤木单体皂苷衍生物K1～ K10；
在本发明的一些实施例中，中间体D1～D5采用以下方法制备得到：
单糖与苯甲酰氯反应得到中间体A1～A5；
中间体A1～A5分别与溴化氰醋酸溶液反应得到中间体B1～B5；
中间体B1～B5分别与水和氧化银反应生成中间体C1～C5；
中间体C1～C5分别与三氯乙腈反应生成中间体D1～D5；
D1～D5的通式为：
具体的，在中间体D1中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H，R4＝OBz，R5＝OBz， R6＝H，R7＝CH2OBz，R8＝H；
在中间体D2中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝OBz，R4＝H，R5＝H，R6＝OBz， R7＝H，R8＝CH3；
在中间体D3中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H，R4＝OBz，R5＝OBz，R6＝H， R7＝H，R8＝H；
在中间体D4中，R1＝H，R2＝OBz，R3＝OBz，R4＝H，R5＝OBz，R6＝H， R7＝H，R8＝H；
在中间体D5中，R1＝OBz，R2＝H，R3＝H，R4＝OBz，R5＝H，R6＝OBz， R7＝CH2OBz，R8＝H。
中间体D1的合成路线如下：
中间体D2的合成路线如下：
中间体D3的合成路线如下：
中间体D4的合成路线如下：
中间体D5的合成路线如下：
在本发明的一些实施例中，齐墩果酸或熊果酸分别用二氯甲烷溶解，再 依次加入四丁基溴化铵和K2CO3溶液并搅拌20-40分钟，0℃条件下滴加溴 苄，室温条件下搅拌1-3天，得到中间体S1～S2；
中间体S1-S2和中间体D1～D5分别用二氯甲烷溶解，加入粉末状4A 分子筛，在氮气保护下，室温条件下反应0.5-1.5小时，随后加入催化量的三 氟甲磺酸三甲基硅酯继续反应1.5-2.5h，得到中间体F1-F10；
中间体F1～F10分别用乙酸乙酯溶解，通氮气4-6分钟后，开始通氢 气，并加入钯碳催化剂，40-50℃条件下加热回流1-3h，得到中间体G1～ G10；
中间体G1～G10分别用二氯甲烷溶解，加入1-羟基苯并三唑和碳化二亚 胺，室温条件下搅拌0.5-1.5h后，0℃条件下滴加炔丙胺，室温条件下继续反 应3-5小时，得到中间体H1-H10；
中间体H1～H10分别用干燥甲醇和干燥二氯甲烷的混合溶液溶解，加入 甲醇钠甲醇溶液，室温条件下反应1-3h，得到中间体J1～J10；
咖啡酸用N，N-二甲基甲酰胺溶解，再加三乙胺，得到N，N-二甲基甲 酰胺混合液；将六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(二甲氨基)磷溶解于二氯甲烷 中，0℃条件下滴加3-叠氮基丙胺，得到3-叠氮基丙胺混合液；将3-叠氮基 丙胺混合液滴加到滴加到N，N-二甲基甲酰胺混合液中，先在0℃条件下反 应20-40分钟，然后在室温条件下反应1-3小时，得到中间体P；
中间体P用甲醇溶解，加入催化剂噻吩-2-甲酸铜，再分别加入中间体 J1～J10，室温条件下搅拌过夜，得到辽东楤木单体皂苷衍生物。
在本发明的一些实施例中，中间体D1～D5采用以下方法制备得到：
单糖和苯甲酰氯在室温条件下反应15-20小时，得到中间体A1～A5；
中间体A1～A5和33％(质量分数)溴化氰醋酸溶液在室温条件下反应 1-3小时，得到中间体B1～B5；
中间体B1～B5用丙酮溶解，加入水和氧化银，室温条件下反应3-5小 时，得到中间体C1～C5；
中间体C1～C5用二氧甲烷溶解，加入三氯乙腈和1,8-二氮杂二环十一 碳-7-烯，室温条件下反应3-5小时，得到中间体D1～D5。
在本发明的一些实施例中，所述单糖选自葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉 伯糖或半乳糖中的一种。
本发明还提供了一种药物组合物，包括上述的辽东楤木单体皂苷衍生物 和药用载体。
本发明还提供了上述的辽东楤木单体皂苷衍生物在制备保护心脑血管药 物中的用途。
从上面所述可以看出，本发明以齐墩果酸或者熊果酸与五种糖，咖啡酸 为原料，保留齐墩果酸和熊果酸的结构骨架，对齐墩果酸和熊果酸3位上的 羟基基团进行糖苷化修饰，对28位羧基进行修饰，合成了新型的具有治疗心 脑血管疾病等作用的辽东楤木单体皂苷衍生物，合成方法简便，产物纯度 高。与辽东楤木单体皂苷比较而言，本发明提供的辽东楤木单体皂苷衍生物 具有以下优点：1、来源易得，合成简便；2、具有相比于原型较好的生物活 性和溶解性；3、结构全新。
附图说明
图1a～图1j分别为化合物K1～K10的生物活性图；其中，control指的 是空白组，即不给药且未经缺氧复氧诱导的H9c2细胞；model指的是未给 药，但经缺氧复氧诱导的H9c2细胞；CE指的是楤木单体皂苷预给药，然后 经缺氧复氧诱导的H9c2细胞；0.02μM指的是分别预加入0.02μM的化合 物K1～K10，然后经缺氧复氧诱导的H9c2细胞；0.1μM指的是预加入0.1 μM的化合物K1～K10，然后经缺氧复氧诱导的H9c2细胞；0.5μM指的是 预加入0.5μM的化合物K1～K10，然后经缺氧复氧诱导的H9c2细胞。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施 例，对本发明进一步详细说明。
实施例1化合物K1的制备
(1)制备中间体D1
中间体D1的合成路线如下：
①中间体A1的合成
准确称取葡萄糖(5.0g，27.7mmol)加入到500mL圆底烧瓶中，用 100mL重蒸吡啶溶解，在0℃条件下加入苯甲酰氯(18.0mL，171.2mmol)，反 应液室温条件下搅拌18小时。TLC监测反应，展开剂为石油醚-醋酸乙酯 (3∶1)。后处理：加蒸馏水60mL，500mL分液漏斗萃取有机相，然后依次 用1N盐酸，饱和碳酸氢钠溶液，饱和氯化钠溶液洗涤3遍，有机层用无水硫酸钠干燥2小时。抽滤，有机层减压浓缩，得白色粗品固体A1。A1： 17.3g，产率89.17％。
②中间体B1的合成
准确称取中间体A1(16.1g，23.0mmol)加入500mL圆底烧瓶中，用 200mL干燥二氯甲烷溶解，在0℃条件下滴加33％(质量分数)溴化氢醋酸溶 液30mL，反应液室温条件下搅拌2小时。TLC监测反应，展开剂为石油醚- 乙酸乙酯(4∶1)。后处理：将反应液用饱和碳酸氢钠溶液调pH至中性。萃 取有机层，然后有机层用饱和碳酸钠溶液，饱和氯化钠溶液洗涤3遍，无水 硫酸钠干燥有机层。过滤，减压浓缩有机层，得白色粗品固体B1。B1： 13.4g，产率88.74％。
③中间体C1的合成
准确称取中间体B1(13.2g，20.0mmol)加入到500mL圆底烧瓶中，用 100mL丙酮溶解，加入13.2mL水和6.5g氧化银。反应液室温条件下搅拌 4h，TLC监测反应，展开剂为石油醚-乙酸乙酯(4∶1)。抽滤，滤液减压蒸 干，得到粗品白色固体C1。C1：9.2g，产率77.25％。
④中间体D1的合成
准确称取中间体C1(9.0g，15.0mmol)加入在圆底烧瓶中，用100mL 干燥二氯甲烷溶解，加入三氯乙腈(8.9mL，90mmol)，DBU(1,8-二氮杂二 环十一碳-7-烯，0.93mL，6mmol)。反应液室温条件下4h，TLC监测反应， 展开剂为石油醚-乙酸乙酯(5∶1)。后处理：饱和碳酸氢钠溶液，饱和氯化 钠溶液洗涤3遍，无水硫酸钠干燥过夜。有机层过滤，减压浓缩，残余物通 过硅胶柱色谱纯化，石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脱，得到白色固体D1。 D1：6.8g，产率60.71％。
(2)中间体S1的合成
将齐墩果酸(20g，43.8mmol)加入到500mL圆底烧瓶中，用400mL二 氯甲烷溶解，再向圆底烧瓶中依次加入四丁基溴化铵(1.6g，4.9mmol)和 0.8M的K2CO3溶液并搅拌30分钟。0℃条件下缓慢滴加溴苄(6.44mL， 54.3mmol)。加入完毕后，反应液室温条件下搅拌约2天，反应结束的标志是 溶液中白色固体消失并且分层。TLC检测反应(需磷钼酸显色)，石油醚-乙 酸乙酯(4∶1)。后处理：依次用饱和碳酸氢钠溶液，饱和氯化钠溶液洗涤有 机层3遍，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，减压蒸干。残余物通过硅胶柱色 谱纯化，石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脱，得到白色固体S1。S1：18.5g，产 率77.08％。
(3)中间体F1的合成
准确称取中间体S1(3.3g，6.0mmol)和D1(5.8g，7.9mmol)加入 100mL圆底烧瓶中，50mL无水二氯甲烷溶解，加入5g粉末状4A分子筛。 在氮气保护下，反应液室温条件搅拌1h，随后加入催化量的三氟甲磺酸三甲 基硅酯(60μL，0.3mol)继续反应2h，TLC监测反应，展开剂为石油醚-醋 酸乙酯(8∶1)。反应结束后加入1.0mL三乙胺淬灭反应。过滤除掉分子 筛，滤液减压蒸干，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯(10∶ 1)洗脱，得到白色固体F1。F1：7.1g，收率80.68％。
(4)中间体G1的合成
将F1(3.4g，3.0mmol)加入100mL圆底烧瓶中，100mL乙酸乙酯溶 解，三颈瓶的一侧插入温度计监测反应温度，另一侧开始通氮气。5分钟后 将所通氮气换成氢气，并加入2g的Pd-C催化剂，45C条件下加热回流约 2h。TLC监测反应，反应完全后将反应液趁热抽滤，用热乙酸乙酯洗涤。减 压浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯(3∶1)洗脱，得到白色固体G1。G1：2.5g，收率80.13％。
(5)中间体H1的合成
准确称取中间体G1(1.50g，1.45mmol)加入100mL圆底烧瓶中。 15mL无水二氯甲烷溶解，随后加入HOBT(1-羟基苯并三唑，0.20g， 1.45mmol)和EDCI(碳化二亚胺，0.28g，1.45mmol)，反应液室温条件下搅 拌1h后，0℃条件下滴加炔丙胺(8mmol)，将反应液室温条件下继续反应 4h。TLC监测反应，展开剂为石油醚-醋酸乙酯(5∶1)。后处理：用1N盐 酸调节pH到7以下，二氯甲烷萃取有机层，饱和碳酸氢钠水溶液、饱和氯 化钠水溶液洗三遍，无水硫酸钠干燥过夜。抽滤，滤液减压蒸干，残余物通 过硅胶柱色谱纯化，石油醚-醋酸乙酯(8∶1)洗脱，得到白色固体H1。 H1：1.2g，收率77.42％。
(6)中间体J1的合成
准确称取中间体H1(536mg，0.5mmol)加入到100mL圆底烧瓶中。 5mL干燥甲醇和2.5mL干燥二氯甲烷溶解(两者体积比为2:1)，加入2mL 甲醇钠甲醇溶液(1mol/L)，反应液室温条件下搅拌2h。TLC监测反应，展 开剂为二氯甲烷-甲醇(8∶1)。后处理：用活化后的阳离子交换树脂调节pH 至中性，反应液过滤，减压蒸干。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲 醇(10∶1)洗脱，得到白色粉末J1。J1：261mg，收率76.76％。
(7)中间体P的合成
准确称取咖啡酸(180mg，1mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL DMF(N，N-二甲基甲酰胺)溶解，再加0.14mL三乙胺。准确称取BOP (六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(二甲氨基)磷，442.3mg，1mmol)溶解于2mL 二氯甲烷中。0℃下滴加3-叠氮基丙胺(1mmol)，将该混合液缓慢滴加到 DMF混合液中。混合物在0℃条件下搅拌30min，然后反应液在室温条件下搅拌2h。TLC检测反应。反应结束后，减压浓缩溶剂，并用15mL水稀释。 用乙酸乙酯萃取，再依次用1N HCl、蒸馏水、1M NaHCO3和饱和氯化钠溶 液洗涤。无水硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩有机层，残余物通过硅胶 柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(35∶1)洗脱，得到淡黄色固体P。P： 201mg，收率76.64％。
(8)化合物K1的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J1 (130mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开剂 为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应液 过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K1。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.76(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.26(t,J ＝5.4Hz,1H,N-H),8.17(s,1H,Triazole-H),8.09(d,J＝15.6Hz,1H,H-7′’),7.54 (d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’),7.19-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.79(d,J＝15.7Hz,1H, H-8′’),5.44(t,J＝3.3Hz,1H,H-12),4.95(d,J＝7.8Hz,1H,H-1’),4.84(dd,J＝ 14.9,5.6Hz,2H,H-31),4.62-4.60(m,1H,H-2’),4.51(t,J＝6.9Hz,2H,H-12′’), 4.46-4.43(m,1H,H-5’),4.30-4.25(m,2H,H-6’),4.09-4.02(m,2H,H-3’,4’), 3.58-3.54(m,2H,H-10′’),3.38(dd,J＝11.7,4.2Hz,1H,H-3),3.15(dd,J＝13.1, 3.8Hz,1H,H-18),1.32(s,3H,CH3),1.27(s,3H,CH3),1.01(s,3H,CH3),0.91(s, 6H,2×CH3),0.86(s,3H,CH3),0.80(s,3H,CH3)；13C-NMR(150MHz,pyridine- d5)δ:177.6,166.9,149.4,147.6,145.9,144.6,140.9,127.6,122.8,121.1,118.8, 116.6,115.2,106.8,88.7,78.7,78.2,75.7,71.7,62.9,55.6,49.6,47.8,46.6,46.3, 42.0,41.7,39.6,39.4,38.6,36.8,36.7,35.7,34.2,33.5,33.1,32.8,31.2,30.8,28.1, 27.7,26.4,26.1,23.7,23.6,23.6,18.3,17.0,16.9,15.4；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO10:940.5412,found 940.5471.
实施例2化合物K2的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以鼠李糖为原 料得到中间体D2；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以齐墩果酸为原料得到中间体S1；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S1和中间体D2反应得到中间 体F2；
中间体F2采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J2；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K2的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J2 (107.4mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K2。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.78(t,J＝5.3Hz,1H,N”-H),8.27(t,J ＝5.4Hz,1H,N-H),8.18(s,1H,Triazole-H),8.10(d,J＝15.5Hz,1H,H-7′’),7.55 (d,J＝1.3Hz,1H,H-2′’),7.20-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.6Hz,1H, H-8′’),5.43(t,J＝3.1Hz,1H,H-12),5.31(m,1H,H-1’),4.84(dd,J＝14.8,5.7 Hz,2H,H-31),4.59-4.58(m,1H,H-2’),4.53-4.49(m,3H,H-12′’,H-5’), 4.36-4.30(m,2H,H-3’,4’),3.59-3.56(m,2H,H-10′’),3.15-3.12(m,2H,H-3,H- 18),2.25-2.20(m,2H,H-10′’),1.68(d,J＝5.6Hz,3H,H-6’),1.24(s,3H,CH3), 0.91(s,9H,3×CH3),0.88(s,3H,CH3),0.80(s,6H,2×CH3)；13C-NMR(150MHz, pyridine-d5)δ:177.6,167.0,149.4,147.6,145.9,144.5,140.9,127.6,122.8,121.0, 118.8,116.6,115.2,104.4,88.4,74.0,72.8,72.4,69.7,55.4,47.8,47.8,46.6,46.3, 41.9,41.7,39.6,39.0,38.4,36.8,36.7,35.7,34.2,33.5,33.1,32.8,31.3,30.8,28.1, 27.7,26.0,25.7,23.7,23.6,23.6,18.4,17.0,16.6,15.4；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO9:924.5462,found 924.5529.
实施例3化合物K3的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以木糖为原料 得到中间体D3；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以齐墩果酸为原料得到中间体S1；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S1和中间体D3反应得到中间 体F3；
中间体F3采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J3；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K3的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J3 (104.2mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K3。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.77(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.27(t,J ＝5.3Hz,1H,N-H),8.18(s,1H,Triazole-H),8.09(d,J＝15.7Hz,1H,H-7′’),7.54 (d,J＝1.3Hz,1H,H-2′’),7.20-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.79(d,J＝15.6Hz,1H, H-8′’),5.43(t,J＝3.1Hz,1H,H-12),4.90-4.77(m,3H,H-1’,H-31),4.51(t,J＝ 6.9Hz,2H,H-12′’),4.41-4.38(m,1H,H-2’),4.27-4.17(m,2H,H-5’),4.06-4.02 (m,1H,H-3’),3.81-3.78(m,1H,H-4’),3.57-3.54(m,2H,H-10′’),3.34(dd,J＝ 11.8,4.2Hz,1H,H-3),3.15(dd,J＝13.1,3.7Hz,1H,H-18),1.30(s,3H,CH3), 1.25(s,3H,CH3),0.99(s,3H,CH3),0.91(s,6H,2×CH3),0.87(s,3H,CH3),0.81 (s,3H,CH3)；13C-NMR(150MHz,pyridine-d5)δ:177.6,167.0,149.4,147.6, 145.9,144.5,140.9,127.5,122.8,121.1,118.8,116.6,115.2,107.6,88.5,78.5,75.5,71.1,67.0,55.7,47.9,47.8,46.6,46.3,42.0,41.7,39.6,39.5,38.6,36.8,36.7,35.7,34.2,33.5,33.1,32.8,31.2,30.8,28.0,27.7,26.6,26.0,23.7,23.6,23.6,18.3,17.0,16.8,15.4；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C50H73N5NaO9:910.5306, found 910.5402.
实施例4化合物K4的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以阿拉伯糖为 原料得到中间体D4；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以齐墩果酸为原料得到中间体S1；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S1和中间体D4反应得到中间 体F4；
中间体F4采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J4；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K4的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J4 (104.2mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K4。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.77(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.27(t,J ＝5.4Hz,1H,N-H),8.18(s,1H,Triazole-H),8.08(d,J＝15.5Hz,1H,H-7′’),7.54 (d,J＝1.2Hz,1H,H-2′’),7.19-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.7Hz,1H, H-8′’),5.43(t,J＝3.1Hz,1H,H-12),4.89-4.76(m,3H,H-1’,H-31),4.51(t,J＝ 6.9Hz,2H,H-12′’),4.45-4.42(m,1H,H-2’),4.33-4.31(m,2H,H-5’), 4.18-4.16(m,1H,H-3’),3.85-3.83(m,1H,H-4’),3.57-3.54(m,2H,H-10′’),3.33 (dd,J＝11.4,3.9Hz,1H,H-3),3.14(dd,J＝13.1,3.8Hz,1H,H-18),1.26(s,3H, CH3),1.25(s,3H,CH3),0.95(s,3H,CH3),0.91(s,6H,2×CH3),0.88(s,3H,CH3), 0.80(s,3H,CH3)；13C-NMR(150MHz,pyridine-d5)δ:177.6,167.0,149.4,147.5, 145.8,144.5,140.8,127.5,122.8,121.0,118.7,116.6,115.2,107.4,88.5,74.5,72.8,69.4,66.7,55.6,47.8,47.8,46.6,46.2,41.9,41.7,39.6,39.4,38.6,36.8,36.6,35.6,34.2,33.5,33.1,32.8,31.2,30.7,28.0,27.7,26.5,26.0,23.7,23.6,23.5,18.3,17.0,16.8,15.4；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C50H73N5NaO9:910.5306, found 910.5396.
实施例5化合物K5的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以半乳糖为原 料得到中间体D5；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以齐墩果酸为原料得到中间体S1；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S1和中间体D5反应得到中间 体F5；
中间体F5采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J5；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K5的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J5 (130mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开剂 为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应液 过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K5。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.77(t,J＝5.3Hz,1H,N”-H),8.26(t,J ＝5.2Hz,1H,N-H),8.17(s,1H,Triazole-H),8.08(d,J＝15.4Hz,1H,H-7′’),7.54 (d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’),7.19-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.7Hz,1H, H-8′’),5.44(t,J＝3.3Hz,1H,H-12),4.89-4.77(m,3H,H-1’,H-31),4.61-4.60 (m,1H,H-2’),4.52-4.45(m,5H,H-12′’,H-5’,6’),4.20-4.17(m,1H,H-3’), 4.13-4.12(m,1H,H-4’),3.57-3.54(m,2H,H-10′’),3.37(dd,J＝11.7,4.2Hz,1H, H-3),3.15(dd,J＝13.1,3.8Hz,1H,H-18),1.30(s,3H,CH3),1.27(s,3H,CH3), 0.96(s,3H,CH3),0.91(s,6H,2×CH3),0.86(s,3H,CH3),0.80(s,3H,CH3)；13C- NMR(150MHz,pyridine-d5)δ:177.6,167.0,149.4,147.5,145.9,144.5,140.8, 127.5,122.8,121.0,118.8,116.6,115.2,107.4,88.6,76.7,75.4,73.1,70.2,62.3, 55.6,47.8,46.6,46.3,42.0,41.7,39.6,39.4,38.6,36.8,36.7,35.6,34.2,33.5,33.1, 32.8,31.2,30.8,28.1,27.7,26.5,26.0,23.7,23.6,23.6,18.3,17.0,16.9,15.4；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO10:940.5412,found 940.5515.
实施例6化合物K6的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以葡萄糖为原 料得到中间体D1；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以熊果酸为原料得到中间体S2；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S2和中间体D1反应得到中间 体F6；
中间体F6采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J6；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K6的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J6 (130mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开剂 为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应液 过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K6。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.79(t,J＝5.6Hz,1H,N”-H),8.13(s, 1H,Triazole-H),8.09-8.06(m,1H,H-7′’,N-H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’), 7.20-7.13(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.6Hz,1H,H-8′’),5.46(t,J＝3.2Hz, 1H,H-12),4.95(d,J＝7.8Hz,1H,H-1’),4.81(dd,J＝15.0,5.4Hz,2H,H-31), 4.62-4.60(m,1H,H-2’),4.52(t,J＝6.9Hz,2H,H-12′’),4.44-4.41(m,1H,H-5’), 4.28-4.22(m,2H,H-6’),4.07-4.01(m,2H,H-3’,4’),3.57-3.54(m,2H,H-10′’), 3.40(dd,J＝11.6,4.2Hz,1H,H-3),2.42(d,J＝10.8Hz,1H,H-18),1.31(s,3H, CH3),1.20(s,3H,CH3),1.00(s,3H,CH3),0.94(d,J＝6.4Hz,3H,CH3),0.91(s, 3H,CH3),0.86(s,3H,CH3),0.80(s,3H,CH3)；13C-NMR(150MHz,pyridine-d5) δ:177.5,167.0,149.4,147.5,145.7,140.8,139.1,127.5,125.9,121.0,118.7,116.6, 115.2,106.9,88.8,78.6,78.2,75.7,71.7,62.9,55.6,53.3,47.8,47.8,47.6,42.3, 39.8,39.7,39.3,39.1,38.7,37.8,36.7,36.6,35.5,33.1,31.2,31.0,28.1,28.1,26.5, 24.7,23.7,23.4,21.2,18.3,17.4,16.9,15.5；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO10:940.5412,found 940.5508.
实施例7化合物K7的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以鼠李糖为原 料得到中间体D2；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以熊果酸为原料得到中间体S2；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S2和中间体D2反应得到中间 体F7；
中间体F7采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J7；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K7的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J7 (107.4mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K7。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.80(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.15(s, 1H,Triazole-H),8.11-8.07(m,1H,H-7′’,N-H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’), 7.20-7.14(m,1H,H-5′’,6”),6.81(d,J＝15.6Hz,1H,H-8′’),5.46(t,J＝3.2Hz, 1H,H-12),5.33(m,1H,H-1’),4.83(dd,J＝15.0,5.5Hz,2H,H-31),4.59-4.58(m, 1H,H-2’),4.54-4.49(m,3H,H-12′’,H-5’),4.35-4.30(m,2H,H-3’,4’), 3.59-3.56(m,2H,H-10′’),3.16(dd,J＝11.7,4.4Hz,1H,H-3),2.43(d,J＝11.0 Hz,1H,H-18),1.68(d,J＝5.7Hz,3H,H-6’),1.18(s,3H,CH3),0.93(d,J＝6.4Hz, 3H,CH3),0.91(s,6H,2×CH3),0.89(s,3H,CH3),0.80(s,6H,2×CH3)；13C-NMR (150MHz,pyridine-d5)δ:177.5,167.0,149.4,147.6,145.7,140.9,139.2,127.5, 125.9,121.0,118.8,116.6,115.2,104.3,88.3,74.0,72.8,72.4,69.8,55.4,53.3, 47.8,47.8,47.6,42.3,39.8,39.7,39.2,39.0,38.5,37.9,36.7,35.6,33.1,31.2,31.0, 28.2,28.1,25.7,24.7,23.7,23.5,21.3,18.4,18.4,17.4,16.9,16.6,15.5；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO9:924.5462,found 924.5566.
实施例8化合物K8的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以木糖为原料 得到中间体D3；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以熊果酸为原料得到中间体S2；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S2和中间体D3反应得到中间 体F8；
中间体F8采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J8；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K8的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J8 (104.2mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K8。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.79(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.14(s, 1H,Triazole-H),8.09-8.07(m,1H,H-7′’,N-H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’), 7.20-7.13(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.5Hz,1H,H-8′’),5.45(t,J＝3.2Hz, 1H,H-12),4.86-4.77(m,3H,H-1’,H-31),4.52(t,J＝6.9Hz,2H,H-12′’), 4.40-4.38(m,1H,H-2’),4.26-4.16(m,2H,H-5’),4.04-4.02(m,1H,H-3’), 3.80-3.77(m,1H,H-4’),3.58-3.54(m,2H,H-10′’),3.36(dd,J＝11.8,4.2Hz,1H, H-3),2.42(d,J＝10.8Hz,1H,H-18),1.31(s,3H,CH3),1.20(s,3H,CH3),0.99(s, 3H,CH3),0.92(s,6H,2×CH3),0.90(s,3H,CH3),0.81(s,3H,CH3)；13C-NMR (150MHz,pyridine-d5)δ:177.5,167.0,149.4,147.5,145.7,140.8,139.1,127.5, 125.9,121.0,118.7,116.6,115.2,107.6,88.5,78.5,75.4,71.1,67.0,55.7,53.3, 47.8,47.8,47.6,42.3,39.8,39.7,39.4,39.1,38.7,37.8,36.7,36.7,35.6,33.1,31.2, 31.0,28.2,28.1,26.6,24.7,23.7,23.5,21.3,18.3,17.4,16.9,16.9,15.6；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C50H73N5NaO9:910.5306,found 910.5402.
实施例9化合物K9的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以阿拉伯糖为 原料得到中间体D4；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以熊果酸为原料得到中间体S2；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S2和中间体D4反应得到中间 体F9；
中间体F9采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体J9；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K9的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J9 (104.2mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开 剂为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应 液过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K9。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.79(t,J＝5.4Hz,1H,N”-H),8.14(s, 1H,Triazole-H),8.10-8.07(m,1H,H-7′’,N-H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’), 7.20-7.13(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.6Hz,1H,H-8′’),5.46(t,J＝3.2Hz, 1H,H-12),4.86-4.77(m,3H,H-1’,H-31),4.53(t,J＝6.9Hz,2H,H-12′’), 4.46-4.43(m,1H,H-2’),4.33-4.31(m,2H,H-5’),4.18-4.16(m,1H,H-3’), 3.84-3.82(m,1H,H-4’),3.58-3.55(m,2H,H-10′’),3.35(dd,J＝11.7,4.3Hz,1H, H-3),2.42(d,J＝10.9Hz,1H,H-18),1.28(s,3H,CH3),1.19(s,3H,CH3),0.96(s, 3H,CH3),0.92(s,6H,2×CH3),0.90(s,3H,CH3),0.81(s,3H,CH3)；13C-NMR (150MHz,pyridine-d5)δ:177.5,167.0,149.4,147.5,145.7,140.8,139.1,127.5, 125.9,121.0,118.7,116.6,115.2,107.5,88.6,74.5,72.8,69.5,66.7,55.7,53.3, 47.8,47.8,47.6,42.3,39.8,39.7,39.4,39.1,38.7,37.8,36.7,36.6,35.6,33.1,31.2, 31.0,28.2,28.1,26.5,24.7,23.7,23.4,21.3,18.3,17.4,16.9,16.8,15.6；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C50H73N5NaO9:910.5306,found 910.5366.
实施例10化合物K10的制备
在本实施例中，采用与实施例1中相同的步骤①-步骤④，以半乳糖为原 料得到中间体D5；
采用与实施例1相同的步骤(2)，以熊果酸为原料得到中间体S2；
采用与实施例1相同的步骤(3)，中间体S2和中间体D5反应得到中间 体F10；
中间体F10采用与实施例1相同的步骤(4)-步骤(6)得到中间体 J10；
采用与实施例1相同的步骤(7)，咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间 体P；
(8)化合物K10的合成
准确称取P(50mg，0.19mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，加入2mL甲 醇溶解，再加入噻吩-2-甲酸铜(3.6mg,0.019mmol)催化剂。再加入中间体J10 (130mg，0.19mmol)。反应液室温条件下搅拌过夜，TLC监测反应，展开剂 为二氯甲烷-甲醇-水(50∶10：1)，产物365nm有荧光并且碘显色。反应液 过滤，减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，二氯甲烷-甲醇(6∶1)洗 脱，得到白色粉末K10。
1H-NMR(600MHz,pyridine-d5)δ:8.80(t,J＝5.7Hz,1H,N”-H),8.14(s, 1H,Triazole-H),8.09-8.07(m,1H,H-7′’,N-H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H,H-2′’), 7.20-7.13(m,1H,H-5′’,6”),6.80(d,J＝15.6Hz,1H,H-8′’),5.46(t,J＝3.4Hz, 1H,H-12),4.88-4.77(m,3H,H-1’,H-31),4.60-4.59(m,1H,H-2’),4.53-4.46(m, 5H,H-12′’,H-5’,6’),4.19-4.17(m,1H,H-3’),4.14-4.12(m,1H,H-4’), 3.57-3.54(m,2H,H-10′’),3.39(dd,J＝11.7,4.3Hz,1H,H-3),2.43(d,J＝10.8 Hz,1H,H-18),1.30(s,3H,CH3),1.21(s,3H,CH3),0.96(s,3H,CH3),0.94(d,J＝ 6.4Hz,3H,CH3),0.92(s,3H,CH3),0.88(s,3H,CH3),0.80(s,3H,CH3)；13C- NMR(150MHz,pyridine-d5)δ:177.5,167.0,149.4,147.5,145.7,140.8,139.1,127.5,125.9,121.0,118.7,116.6,115.2,107.5,88.7,76.7,75.3,73.0,70.2,62.3,55.7,53.3,47.8,47.8,47.6,42.3,39.8,39.7,39.4,39.1,38.7,37.8,36.7,36.6,35.5,33.1,31.2,31.0,28.2,28.1,26.6,24.7,23.7,23.5,21.3,18.3,17.4,16.9,16.9,15.5；HRMS(ESI):Calcd for[M+Na]+C51H75N5NaO10:940.5412,found 940.5482.
试验例1楤木皂苷单体衍生物的生物活性测试
对10个楤木皂苷单体衍生物K1～K10进行体外抗心肌缺血再灌注损伤的 保护作用研究。将楤木单体皂苷(0.5μM)，以及和10个衍生物分别配制成 三个浓度(0.02μM、0.1μM、0.5μM)，加入到H9c2心肌细胞中，预孵育 12h，通过缺氧6h复氧12h诱导H9c2心肌细胞损伤，MTT法测定细胞活 力。结果见图1，图1中柱状图中的柱描述了平行试验三次，##p <0.01为相对于空白组差异十分显著；**p<0.01为相对于模型组差异十分 显著。*p<0.05为相对于模型组差异显著。楤木单体皂苷(原型皂苷)的结 构式为：
由图1e和图1j中可以看出，在0.02μM、0.1μM、0.5μM三个浓度下， 楤木皂苷单体衍生物K5和K10与模型组相比，均具有显著性差异，且细胞 存活率结果显示均优于原型楤木单体皂苷的细胞存活率，因此，楤木皂苷单 体衍生物K5和K10在此三个浓度下的活性均优于原型皂苷(0.5μM)，提示 半乳糖片段有利于该母核心肌保护活性的增强。
由图1i中可以看出，在0.02μM浓度下，楤木皂苷单体衍生物K9相对 于模型组具有显著性差异，且细胞存活率优于原型皂苷的细胞存活率，因 此，楤木皂苷单体衍生物K9在该浓度下活性优于原型皂苷(0.5μM)。
由图1a和图1b中可以看出，在0.1μM浓度下，楤木皂苷单体衍生物 K1和K2相对于模型组具有显著性差异，且细胞存活率均高于原型皂苷的细 胞存活率，因此，楤木皂苷单体衍生物K1和K2在该浓度下，优于原型皂苷 (0.5μM)。
所属领域的普通技术人员应当理解：以上任何实施例的讨论仅为示例性 的，并非旨在暗示本公开的范围(包括权利要求)被限于这些例子；在本发 明的思路下，以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组 合，并存在如上所述的本发明的不同方面的许多其它变化，为了简明它们没 有在细节中提供。因此，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何省略、 修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种辽东楤木单体皂苷衍生物，其特征在于，具有通式(Ⅰ)所示的结构：
式中：R1、R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自H或OH；
R7选自H或CH2OH；
R8、R9和R11各自独立地选自H或CH3；
R10为CH3。
2.根据权利要求1所述的辽东楤木单体皂苷衍生物，其特征在于，R1和R2不同，R3和R4不同，R5和R6不同，R9和R11不同。
3.根据权利要求2所述的辽东楤木单体皂苷衍生物，其特征在于，所述的辽东楤木单体皂苷衍生物为下述结构式所示的化合物K1～K10，
4.一种如权利要求1-3任一项所述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
在有机碱的作用下，齐墩果酸或熊果酸分别与溴苄反应得到中间体S1～S2；
中间体S1～S2分别与中间体D1～D5反应得到中间体F1～F10；
在H2/钯碳的作用下，中间体F1～F10分别还原得到中间体G1～G10；
中间体G1～G10分别与炔丙胺反应得到中间体H1～H10；
中间体H1-H10分别与甲醇钠甲醇溶液反应得到中间体J1～J10；
咖啡酸与3-叠氮基丙胺反应得到中间体P；
中间体P分别与中间体J1～J10反应得到辽东楤木单体皂苷衍生物K1～K10。
5.根据权利要求4所述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，其特征在于，中间体D1～D5采用以下方法制备得到：
单糖与苯甲酰氯反应得到中间体A1～A5；
中间体A1～A5分别与溴化氰醋酸溶液反应得到中间体B1～B5；
中间体B1～B5分别与水和氧化银反应生成中间体C1～C5；
中间体C1～C5分别与三氯乙腈反应生成中间体D1～D5。
6.根据权利要求4所述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，其特征在于，齐墩果酸或熊果酸分别用二氯甲烷溶解，再依次加入四丁基溴化铵和K2CO3溶液并搅拌20-40分钟，0℃条件下滴加溴苄，室温条件下搅拌1-3天，得到中间体S1～S2；
中间体S1～S2和中间体D1～D5分别用二氯甲烷溶解，加入粉末状4A分子筛，在氮气保护下，室温条件下反应0.5-1.5小时，随后加入催化量的三氟甲磺酸三甲基硅酯继续反应1.5-2.5h，得到中间体F1～F10；
中间体F1～F10分别用乙酸乙酯溶解，通氮气4-6分钟后，开始通氢气，并加入钯碳催化剂，40-50℃条件下加热回流1-3h，得到中间体G1～G10；
中间体G1-G10分别用二氯甲烷溶解，加入1-羟基苯并三唑和碳化二亚胺，室温条件下搅拌0.5-1.5h后，0℃条件下滴加炔丙胺，室温条件下继续反应3-5小时，得到中间体H1～H10；
中间体H1～H10分别用干燥甲醇和干燥二氯甲烷的混合溶液溶解，加入甲醇钠甲醇溶液，室温条件下反应1-3h，得到中间体J1～J10；
咖啡酸用N，N-二甲基甲酰胺溶解，再加三乙胺，得到N，N-二甲基甲酰胺混合液；将六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(二甲氨基)磷溶解于二氯甲烷中，0℃条件下滴加3-叠氮基丙胺，得到3-叠氮基丙胺混合液；将3-叠氮基丙胺混合液滴加到滴加到N，N-二甲基甲酰胺混合液中，先在0℃条件下反应20-40分钟，然后在室温条件下反应1-3小时，得到中间体P；
中间体P用甲醇溶解，加入催化剂噻吩-2-甲酸铜，再分别加入中间体J1～J10，室温条件下搅拌过夜，得到辽东楤木单体皂苷衍生物。
7.根据权利要求5所述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，其特征在于，中间体D1～D5采用以下方法制备得到：
单糖和苯甲酰氯在室温条件下反应15-20小时，得到中间体A1～A5；
中间体A1～A5和33％溴化氰醋酸溶液在室温条件下反应1-3小时，得到中间体B1～B5；
中间体B1～B5用丙酮溶解，加入水和氧化银，室温条件下反应3-5小时，得到中间体C1～C5；
中间体C1～C5用二氧甲烷溶解，加入三氯乙腈和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯，室温条件下反应3-5小时，得到中间体D1～D5。
8.根据权利要求5或7所述的辽东楤木单体皂苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述单糖选自葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖或半乳糖中的一种。
9.一种药物组合物，其特征在于，包括根据权利要求1-3任一项所述的辽东楤木单体皂苷衍生物和药用载体。
10.权利要求1-3任一项所述的辽东楤木单体皂苷衍生物在制备保护心脑血管药物中的用途。
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