CN110129215A - 一种复合微生物制剂及其应用 - Google Patents

一种复合微生物制剂及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110129215A
CN110129215A CN201910299050.7A CN201910299050A CN110129215A CN 110129215 A CN110129215 A CN 110129215A CN 201910299050 A CN201910299050 A CN 201910299050A CN 110129215 A CN110129215 A CN 110129215A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
torch
complex microorganism
microorganism preparations
nicotianae
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910299050.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110129215B (zh
Inventor
孙军伟
范志勇
户艳霞
黄娟
刘玉珍
朱春苗
郭小红
骆毛喜
林克明
李肖宇
余劲聪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yunnan Tobacco Co Dalizhou Co
Zhangzhou Sunju Biology Technology Co ltd
Original Assignee
Yunnan Tobacco Co Dalizhou Co
Zhangzhou Sunju Biology Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yunnan Tobacco Co Dalizhou Co, Zhangzhou Sunju Biology Technology Co ltd filed Critical Yunnan Tobacco Co Dalizhou Co
Priority to CN201910299050.7A priority Critical patent/CN110129215B/zh
Publication of CN110129215A publication Critical patent/CN110129215A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110129215B publication Critical patent/CN110129215B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C05F17/50—Treatments combining two or more different biological or biochemical treatments, e.g. anaerobic and aerobic treatment or vermicomposting and aerobic treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明提供一种复合微生物制剂及其应用，涉及微生物技术领域，本发明所述的复合微生物制剂由包含以下步骤的方法制成：向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬‑17发酵液进行第一发酵15～20d，得到第一发酵物；向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬‑16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂。本发明所述复合微生物制剂中生物三种菌株均为发明人自行分离。本发明提供的复合微生物制剂解决了现有技术存在的绿色农用制剂尚无成熟产品、潜在市场缺口较大的问题，具有农药和肥料双重功效，使用时可有效减少用肥次数和使用成本，具有显著的环保价值、社会效益和经济效益。

Description

一种复合微生物制剂及其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种复合微生物制剂及其应用。
背景技术
自20世纪70年代以来，欧、美、日本等国家都相继研制成功了一些复合菌剂，很多已经开始进行大规模的生产，并形成了系列化的产品。其中，由日本琉球大学比嘉照夫教授于20世纪80年代初期的EM菌剂是最成功的，已经在90多个国家广泛用于种植业、养殖业及环境净化方面，产生了显著的经济、生态和社会效益。
大量的研究证明很多有机物的降解或转化需要多种微生物的协同作用才能完成，降解过程中发生的一些重要的反应仅用单一菌株是不能或只能微弱的进行的。因此，微生物混合培养技术非常重要，它是复合菌剂研制的理论基础和关键步骤。随着工农业生产的迅速发展和产业结构的变化，将会出现越来越多结构复杂的化合物，大多对环境有毒害作用，其生物降解过程更是需要多种微生物的参与。所以，复合微生物制剂比单一菌株制剂在实际生产生活中更具有重要意义。
农作物秸秆含有纤维且富含氮、磷、钾、钙、镁和有机质等，是一种具有多用途的可再生生物资源。我国农作物秸秆年均产量7亿吨，其中三分之一被丢弃或者焚烧，而秸秆焚烧会增加空气中二氧化碳的含量和可吸入颗粒物等，不仅造成资源浪费，还导致严重的环境污染，危害人体健康。
中国专利CN201010228347.3提供了一种用于降解秸秆的腐熟剂，其活性成分为热带假丝酵母、米曲霉、绿色木霉菌和枯草芽孢杆菌，该腐熟剂能快速腐熟秸秆、稻杆、红薯藤等纤维物质含量高的生活垃圾，具有降解时间短、堆肥过程中堆温较高进而杀灭秸秆等原料中的病原菌，其秸秆腐熟剂中的有益微生物还可起到抑制杀灭土传病害的作用，增强作物的抗病能力。
中国专利CN201310666396.9提供了一种秸秆腐熟剂，以枯草芽孢杆菌CICC10088、米曲霉CICC2436、里氏木霉ACCC30449、白腐菌ACCC30414以及嗜热脂肪地芽孢杆菌CICC10208作为制备菌种，将各菌种分别活化后分别进行一级菌种培养和二级发酵，将得到的个菌种发酵液均匀混合后得到混合菌液，将混合菌液接种于复合菌剂培养基中，培养4～7d，得到秸秆腐熟剂。该秸秆腐熟剂能够加快秸秆的腐熟进程，从而制备成生物有机肥料，制备的秸秆有机肥料可作为基肥使用。
现有技术主要采用复合微生物构建秸秆腐熟剂，进而对秸秆进行堆腐发酵，然而秸秆堆腐发酵具有费劳力、成本高的缺点。而且常规秸秆腐熟剂发酵得到的腐熟秸秆多只能用作肥料，对土壤改善和土传病害的防治还需要施用土壤改良剂和农药，农业生产中的施肥和施药成本较高，对环境也存在较大的危害。目前缺少一种兼具农药和肥料双重功能的绿色农用制剂。
发明内容
本发明为了克服现有腐熟秸秆成本高、费时费力、防治病害的作用较弱的缺陷，提供了一种绿色无公害的复合微生物制剂，兼具农药和肥料双重功能，可有效降低施肥次数、减少农药使用成本，对环境友好。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种复合微生物制剂，由包含以下步骤的方法制成：
(1)向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液后进行第一发酵，所述第一发酵的时间为15～20d，得到第一发酵物；
所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.15403；
(2)向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬-16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂；
所述胶冻样芽孢杆菌粉三炬-01保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.3995；
所述烟草节杆菌三炬-16保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.15402。
优选的，所述步骤(1)中，解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液的活菌数为4.5亿/g以上。
优选的，所述步骤(1)中，解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液的接种量为秸秆质量的10～30％。
优选的，所述步骤(1)中，第一发酵期间控制含水量20％～45％，若超出含水量范围则进行一次抛翻。
优选的，所述步骤(2)中，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液的活菌数为2.0亿/g以上；烟草节杆菌三炬-16发酵液的活菌数为3.0亿/g以上。
优选的，所述步骤(2)中，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液的接种量为第一发酵物质量的5～25％；烟草节杆菌三炬-16发酵液的接种量为第一发酵物质量的10～20％。
优选的，所述第二发酵期间，进行间歇式翻抛。
优选的，所述间歇性翻抛的次数为2～3次。
优选的，以无氮培养基培养胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株，得到胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液；以牛肉膏培养基培养解淀粉芽孢杆菌三炬-17，得到解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液；以牛肉膏培养基培养烟草节杆菌三炬-16，得到烟草节杆菌三炬-16发酵液。
本发明还提供了前述技术方案所述复合微生物制剂在提高作物产量、降低重金属对作物毒害和防止烟草青枯病中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明提供了一种复合微生物制剂，由包含以下步骤的方法制成：首先向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液进行第一发酵15～20d，得到第一发酵物；向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬-16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂。本发明所述的复合微生物制剂中采用了三种发明人自行分离的菌株(已保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心)，利用上述三株菌株对秸秆进行两次腐熟即可得到本发明所述的复合微生物制剂。
试验表明，本发明提供的复合微生物制剂不仅含有促进作物生长的活性物质和游离氨基酸，还可通过所含复合微生物降解土壤中的磷、钾元素为作物提供更多的必需营养物质。同时，本发明所述微生物复合菌剂中的胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株能通过解钾、解硅钝化作物根基的重金属，降低重金属对作物的毒害；菌剂中的烟草节杆菌三炬-16还可以防治烟草青枯病。
本发明提供的复合微生物制剂解决了现有技术存在的绿色农用制剂尚无成熟产品、潜在市场缺口较大的问题，是一种无公害绿色菌剂，具有农药和肥料双重功效，使用时可有效减少用肥次数和使用成本，产生药肥互相促进、互相提高的增效作用，具有显著的环保价值、社会效益和经济效益。
生物保藏信息
解淀粉芽孢杆菌三炬-17，拉丁文为Bacillus amyloliquefaciens，已于2018年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏登记入册编号为CGMCC No.15403；
胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株，拉丁文为Bacillus mucilaginosus，已于2010年7月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏登记入册编号为CGMCC NO.3995；
烟草节杆菌三炬-16，拉丁文为Arthrobacter nicotianae，已于2018年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏登记入册编号为CGMCC No.15402。
具体实施方式
本发明提供了一种复合微生物制剂，由包含以下步骤的方法制成：
(1)向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液后进行第一发酵，所述第一发酵的时间为15～20d，得到第一发酵物；
所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.15403；
(2)向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬-16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂；
所述胶冻样芽孢杆菌粉三炬-01保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.3995；
所述烟草节杆菌三炬-16保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.15402。
本发明制备得到的复合微生物制剂中含有解淀粉芽孢杆菌三炬-174.5亿/g，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株2.0亿/g和烟草节杆菌三炬-163.0亿/g，有机质含量43％。
本发明向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液后进行第一发酵，所述第一发酵的时间为15～20d，得到第一发酵物。在本发明中，所述秸秆优选为粉碎的秸秆，以便发酵。所述粉碎的秸秆粒度在80目以上，更优选为100目以上。
在本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液中的活菌数优选为4.5亿/g以上。在本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液的接种量优选为秸秆总质量的10～30％，更优选为15～25％。在本发明中，采用牛肉膏培养基发酵所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17，得到解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液。在本发明中，所述第一发酵的时间优选为16～18d。在本发明中，所述第一发酵期间优选的控制含水量在20～45％(质量百分比)，更优选为30～40％；当所述第一发酵期间的含水量高于控制含水量时，则进行一次抛翻。本发明进行间歇性抛翻的目的是保证物料充分发酵，同时促进微生物充分繁殖。
得到第一发酵物后，本发明向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬-16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂。
在本发明中，所述胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液中的活菌数优选为2.0亿/g以上，更优选为。在本发明中，所述胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液的接种量优选为第一发酵物总质量的5～25％，更优选为10～20％。在本发明中，采用无氮培养基发酵胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株，得到胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液。所述无氮培养基配方优选为蔗糖10g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.2g/L、氯化钠0.2g/L、碳酸钙1g/L、琼脂粉20g/L，pH＝7.5。
在本发明中，所述烟草节杆菌三炬-16发酵液中的活菌数优选为3.0亿/g以上。在本发明中，所述烟草节杆菌三炬-16发酵液的接种量优选为第一发酵物总质量的10～20％，更优选为12～18％。在本发明中，采用牛肉膏培养基发酵烟草节杆菌三炬-16，得到烟草节杆菌三炬-16发酵液。
在本发明中，所述第二发酵的时间优选为5.5～6.5d。在本发明中，所述第二发酵优选的采用堆肥发酵，发酵期间进行间歇式抛翻。在本发明中，所述间歇式抛翻时，根据物料发酵程度决定翻抛时间间隔。
本发明采用解淀粉芽孢杆菌进行第一发酵、胶冻样芽孢杆菌和烟草节杆菌进行第二发酵的目的是让三种菌充分繁殖，共同生长。。
本发明还提供了上述技术方案所述复合微生物制剂在提高作物产量、降低重金属对作物毒害和防止烟草青枯病中的应用。具体的，本发明所述复合微生物同时具有肥料和农药功效，可有效提高作物产量和品质，降低重金属对作物的毒害，还可防止烟草青枯病等土传病害，复合微生物分解土壤中的磷、钾等元素可持续不断的为作物提供营养，降低施肥次数和农药施用量，有效降低作物施肥和施药成本，安全环保，绿色节约。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1、原料粉碎：将秸秆充分粉碎80～100目以下，并混合均匀进行充分发酵；
2、以牛肉膏培养基培养解淀粉芽孢杆菌三炬-17(保藏编号CGMCC NO.15403)，发酵温度22～28℃，发酵时间2d，得到活菌数为4.5亿/g的解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液；
以无氮培养基培养胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株(保藏编号CGMCC NO.3995)，发酵温度22～28℃，发酵时间2d，得到活菌数为2.0亿/g的胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液；
以牛肉膏培养基培养烟草节杆菌三炬-16(保藏编号CGMCC NO.15402)，发酵温度22-28℃，发酵时间2d，得到活菌数为3.0亿/g的烟草节杆菌三炬-16发酵液；
3、将解淀粉芽孢杆菌发酵液按照秸秆总质量10％的接种量，撒入上述粉碎的秸秆中，并混合均匀，发酵温度28℃，进行第一发酵20d。第一发酵期间，每隔4d用抛翻机进行一次抛翻。
4、控制含水量20％～45％左右，进行第一发酵，得到第一发酵物。第一发酵的温度为28℃。发酵过程中保持湿润状态，定时观察含水量变化，及时补充水分。发酵期间用翻抛机进行翻抛，初次发酵时间为20天
5、将分别单独发酵得到的胶冻样芽孢杆菌发酵液按第一发酵物质量的5％的接种量、烟草节杆菌发酵液按第一发酵物质量的10％的均匀撒入第一发酵物中，并用翻抛机混合均匀，再进行第二发酵，发酵时间6天，即得复合微生物制剂。
制备得到的复合微生物制剂中，含有解淀粉芽孢杆菌三炬-174.5亿/g，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株2.0亿/g，烟草节杆菌三炬-163.0亿/g，
实施例2
1、供试品种为柑橘，品种为芦柑，种植年限10年。将供试品种移栽至同一小区，进行同一管理。
供试土壤：试验地土壤为灰泥田，土壤有机质22.6g/kg、全氮1.12g/kg、碱解氮89.6mg/kg、有效磷36.9mg/kg、速效钾102mg/kg、pH值5.2，土壤肥力水平中等。
按照下述处理分别于移栽期(1月10日)、生长期(4月8日)、开花期(5月29日)、壮果期(8月25日)进行施肥：
处理1：空白对照，不施肥；
处理2：常规施肥；
处理3：常规施肥+灭活实施例1制备的复合微生物制剂，以500kg/亩施用灭活后的实施例1制备的复合微生物制剂；
处理4：常规施肥+实施例1制备的复合微生物制剂，以500kg/亩施用实施例1制备的复合微生物制剂。
柑橘常规施肥：每666.7m2施：复合肥(N+P2O2+K2O)≥45％112.0kg、钙镁磷肥48.0kg、尿素20.0kg、硫酸钾30.0kg和硫酸镁50.0kg。
调查结果从采收开始分别对各小区产量进行登记，并统计产量。在采收结束期(12月16日)进行生物产量统计。
2、结果如下所示
(1)不同处理对柑橘树体生长情况的影响
田间调查表明，柑橘施微生物菌剂后柑橘树体生长健壮，叶色较绿、叶片较厚有光泽，柑橘根系生长粗壮，促进幼果平衡生长，树体长势旺盛。
(2)不同处理对柑橘产量影响
试验实收产量(见表1)可算出，处理4(复合微生物制剂+常规施肥)产量最高，平均666.7m2产量为1749.5kg，比处理3(灭活的复合微生物制剂+常规施肥)每666.7m2产量1593.6kg增加155.9kg，增产9.78％；比处理2(常规施肥)每666.7m2产量1576.8kg增加172.7kg，增产10.95％；比处理1(空白对照)每666.7m2产量767.4kg增加982.1kg，增产128.0％。
表1不同处理对柑橘产量的影响
注：小区面积为55.6平方米。
对试验处理小区产量方差分析，F＝14.281＞F0.01＝8.02，说明处理间产量差异达极显著水平。
表2方差分析表
注：*表示差异达显著水平，**表示差异达极显著水平。
表3多重比较
注：LSD0.05＝7.089kg/小区，LSD0.01＝10.915kg/小区，不同小写字母表示经LSD检验为差异显著，不同大写字母表示经LSD检验为差异极显著。
多重比较结果表明(见表3)：处理4与处理1、2、3产量差异达极显著水平，处理2、3与处理1产量差异达极显著水平，处理2与处理3产量差异不显著。施用微生物菌剂可显著提高柑橘产量，分析原因主要是微生物菌剂能够增强柑橘的光合作用，促进柑橘叶片增厚、浓绿；菌剂中的芽孢杆菌等可活化土壤的生物肥力，改善根系生长环境，促进柑橘对肥料吸收利用及抗病能力的提高。
(3)不同处理对柑橘品质的影响
从柑橘品质分析来看(表4)，处理4比处理1、2、3柑橘品质均有所提高，处理4可溶性总糖含量、可溶性固形物和维生素C含量均有提高的趋势，可滴定酸含量有下降的趋势。处理4比处理3可溶性总糖含量、可溶性固形物和维生素C含量分别提高0.7％、0.5％和1.5mg/100g；可滴定酸含量下降0.13g/100g。分析原因可能是供试肥料中的有益微生物等的作用，通过叶片吸收有益微生物能较好地促进柑橘叶片的生长，有利于果实可溶性总糖含量、可溶性固形物和维生素C含量的积累，从而提高果实品质。
表4不同处理对柑橘品质的影响
(4)不同处理对土壤重金属镉和铬含量的影响
施用复合微生物制剂在柑橘成熟期取样，根据陈英旭(1995)提供的土壤有效态铬的检测方法、GB/T 23739-2009检测土壤中有效态镉的含量，结果如表5所示：
处理4中的有效铬含量显著低于空白对照(处理1)和常规施肥(处理2)，土壤中有效铬降低了80.49％；处理4中的有效镉含量显著低于空白对照(处理1)和常规施肥(处理2)，土壤中有效镉降低了80.39％；处理3和处理4中补贴有效态总件数含量差异显著，同时处理3有效态总件数含量显著低于处理1和处理2，可见有机或只能怪载体本身具有降低土壤中的有效态重金属的作用，和功能微生物复配效果显著。综上所述，在污染土壤中施用多菌组合的微生物菌剂可降低土壤中有效态重金属含量，降低范围＞80％。
表5多菌组合微生物菌剂对土壤有效铬和有效态镉含量的影响
实施例3
1、供试品种：烟草，供试样品：实施例1制备的复合微生物制剂。
2月5日至3月15日，按120cm规格起垄，垄体高度35cm以上。在起垄过程中，按常规生产要求施入基肥。
供试土壤：试验地土壤为赤红壤，土壤有机质19.6g/kg、全氮1.02g/kg、碱解氮89.6mg/kg、有效磷31.2mg/kg、速效钾79.8mg/kg、pH值5.3，土壤肥力水平中等。
处理组4于2018年3月30日(移栽前1天)以50kg/666.7m2的施用量将复合微生物制剂施入烟穴中，每株50g，并按照常规施肥。4月13日，烟草带基质移栽；
同时期，处理组3施入等量灭活的复合微生物制剂(基质)；
同时期，处理组2按常规施肥进行；
同时期，处理组1不施肥。
生长期间其他施肥、农药管理方法一致。
烟草常规施肥：基肥666.7m2施用腐熟的有机肥1000kg、羊粪200kg、烟草专用复合肥(15：10：20)15kg，3月15日团棵期每666.7m2用烟草专用复合肥(15：10：20)12.5kg。
当烟叶打顶后7天，每个小区取5点，每点调查3棵有代表性的烟株，测量各处理烟株株高、有效叶数、最大叶长、最大叶宽、茎围等农艺性状。
7月7日和7月27日对烟草青枯病进行调查。8月25日进行烟草产量计算。
2、试验结果
(1)多菌组合微生物菌剂对烟株各项农艺性状指标影响
从表6可以看出，处理4比处理1、2、3烤烟的株高、茎围、叶片数有所增加，对下、中、上部叶面积明显增加；处理4比处理3的株高、茎围、叶片数有所增加，分别为4.0cm、0.2cm和0.6片，对下、中、上部叶面积增加明显，说明烟草喷施微生物菌剂能明显促进烟株的生长和产量的提高。
表6烤烟主要农艺性状
(2)不同处理对烟叶产量的影响
试验实收产量(见表7)可算出，处理4(复合微生物制剂+常规施肥)产量最高，平均666.7m2产量为160.23kg，比处理3(灭活复合微生物制剂+常规施肥)每666.7m2产量146.01kg增加14.22kg，增产9.74％；比处理2(常规施肥)每666.7m2产量145.12kg增加15.11kg，增产10.41％；比处理1(空白对照)每666.7m2产量98.45kg增加61.78kg，增产62.75％。
表7不同处理对烟叶产量的影响
注：小区面积为30平方米。
对试验处理小区产量方差分析，F＝14.863＞F0.01＝8.02，说明处理间产量差异达极显著水平。
(3)不同处理对烟叶产值影响
微生物菌剂按3元/kg计算产投比。烟草喷施微生物菌剂后，由于上中等烟比例有所增加，烟叶收购均价明显提高。处理4(复合微生物制剂+常规施肥)产量比处理2(常规施肥)产量每666.7m2增加15.11kg，增加产值586.68元，扣除每666.7m2微生物菌剂成本300元及施用微生物菌剂工钱80元(每666.7m2)，每666.7m2增收206.68元(见表8)。
表8不同处理对烟叶产值影响
处理4比处理2每666.7m2多投入微生物菌剂300元及施用微生物菌剂工钱80元，增加产值586.68元，投入产出比1：1.54。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种复合微生物制剂，其特征在于，由包含以下步骤的方法制成：
(1)向秸秆接入解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液后进行第一发酵，所述第一发酵的时间为15～20d，得到第一发酵物；
所述解淀粉芽孢杆菌三炬-17保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.15403；
(2)向第一发酵物中接种胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液和烟草节杆菌三炬-16发酵液后进行第二发酵，所述第二发酵的时间为5～7d，得到复合微生物制剂；
所述胶冻样芽孢杆菌粉三炬-01保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.3995；
所述烟草节杆菌三炬-16保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.15402。
2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述步骤(1)中，解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液的活菌数为4.5亿/g以上。
3.根据权利要求2所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述步骤(1)中，解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液的接种量为秸秆质量的10～30％。
4.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述步骤(1)中，第一发酵期间控制含水量20％～45％，若超出含水量范围则进行一次抛翻。
5.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述步骤(2)中，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液的活菌数为2.0亿/g以上；烟草节杆菌三炬-16发酵液的活菌数为3.0亿/g以上。
6.根据权利要求5所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述步骤(2)中，胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液的接种量为第一发酵物质量的5～25％；烟草节杆菌三炬-16发酵液的接种量为第一发酵物质量的10～20％。
7.根据权利要求1～6任意一项所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述第二发酵期间，进行间歇式翻抛。
8.根据权利要求7所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述间歇性翻抛的次数为2～3次。
9.根据权利要求1～6任意一项所述的复合微生物制剂，其特征在于，以无氮培养基培养胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株，得到胶冻样芽孢杆菌三炬01号菌株发酵液；以牛肉膏培养基培养解淀粉芽孢杆菌三炬-17，得到解淀粉芽孢杆菌三炬-17发酵液；以牛肉膏培养基培养烟草节杆菌三炬-16，得到烟草节杆菌三炬-16发酵液。
10.权利要求1～9任意一项所述复合微生物制剂在提高作物产量、降低重金属对作物毒害和防止烟草青枯病中的应用。
CN201910299050.7A 2019-04-15 2019-04-15 一种复合微生物制剂及其应用 Active CN110129215B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910299050.7A CN110129215B (zh) 2019-04-15 2019-04-15 一种复合微生物制剂及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910299050.7A CN110129215B (zh) 2019-04-15 2019-04-15 一种复合微生物制剂及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110129215A true CN110129215A (zh) 2019-08-16
CN110129215B CN110129215B (zh) 2020-10-27

Family

ID=67569989

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910299050.7A Active CN110129215B (zh) 2019-04-15 2019-04-15 一种复合微生物制剂及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110129215B (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142210A (zh) * 2017-04-23 2017-09-08 贵州省烟草公司黔西南州公司 一种硬质秸秆发酵菌剂的配制方法
CN111793498A (zh) * 2020-07-31 2020-10-20 福建三炬生物科技股份有限公司 一种微生物菌剂及其制备方法和应用
CN112795518A (zh) * 2021-02-25 2021-05-14 福建三炬生物科技股份有限公司 一种抗病、提质的烟草专用微生物菌剂及其应用
CN112980717A (zh) * 2020-12-24 2021-06-18 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种固体芽孢杆菌微生物菌剂及其制备方法
CN113387757A (zh) * 2021-07-06 2021-09-14 石河子大学 一种复合微生物肥料及其制备方法与应用
CN114907991A (zh) * 2022-05-09 2022-08-16 漳州三炬生物技术有限公司 一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105219668A (zh) * 2015-08-31 2016-01-06 福建三炬生物科技股份有限公司 一种土壤重金属活化菌剂及其制备方法与应用
CN105884415A (zh) * 2016-04-21 2016-08-24 福建三炬生物科技股份有限公司 一种海藻寡糖复合微生物肥及其制备方法
CN108191565A (zh) * 2018-01-03 2018-06-22 青岛农业大学 用于改良植烟土壤的堆肥产物及其应用
CN109072168A (zh) * 2015-07-25 2018-12-21 生物联盟有限公司 农业上有利的微生物、微生物组合物以及聚生体

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109072168A (zh) * 2015-07-25 2018-12-21 生物联盟有限公司 农业上有利的微生物、微生物组合物以及聚生体
CN105219668A (zh) * 2015-08-31 2016-01-06 福建三炬生物科技股份有限公司 一种土壤重金属活化菌剂及其制备方法与应用
CN105884415A (zh) * 2016-04-21 2016-08-24 福建三炬生物科技股份有限公司 一种海藻寡糖复合微生物肥及其制备方法
CN108191565A (zh) * 2018-01-03 2018-06-22 青岛农业大学 用于改良植烟土壤的堆肥产物及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KAI WU ET AL.,: "Effects of bio-organic fertilizer plus soil amendment on the control of tobacco bacterial wilt and composition of soil bacterial communities", 《BIOL FERTIL SOILS》 *
王旭辉等: "生物菌肥促生机制研究", 《现代农业科技》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142210A (zh) * 2017-04-23 2017-09-08 贵州省烟草公司黔西南州公司 一种硬质秸秆发酵菌剂的配制方法
CN111793498A (zh) * 2020-07-31 2020-10-20 福建三炬生物科技股份有限公司 一种微生物菌剂及其制备方法和应用
CN112980717A (zh) * 2020-12-24 2021-06-18 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种固体芽孢杆菌微生物菌剂及其制备方法
CN112980717B (zh) * 2020-12-24 2023-07-07 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 一种固体芽孢杆菌微生物菌剂及其制备方法
CN112795518A (zh) * 2021-02-25 2021-05-14 福建三炬生物科技股份有限公司 一种抗病、提质的烟草专用微生物菌剂及其应用
CN113387757A (zh) * 2021-07-06 2021-09-14 石河子大学 一种复合微生物肥料及其制备方法与应用
CN114907991A (zh) * 2022-05-09 2022-08-16 漳州三炬生物技术有限公司 一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用
CN114907991B (zh) * 2022-05-09 2024-03-29 漳州三炬生物技术有限公司 一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110129215B (zh) 2020-10-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110129215A (zh) 一种复合微生物制剂及其应用
CN102603391B (zh) 复合氨基酸有机肥及其生产方法
CN105294284B (zh) 一种秸秆发酵生物肥料的制备方法
CN103848698B (zh) 一种利用沼渣好氧发酵制备的生物有机肥及其制备方法
CN102199564B (zh) 一种用于直接腐熟作物秸秆还田的复合微生物菌剂及制备方法
CN101691317B (zh) 用茶籽粕生产杀螺型有机肥及其制备方法
CN103819237A (zh) 烟草专用微生物肥及其制备方法
CN107580818B (zh) 一种土壤调理与修复的综合方法
CN111793498A (zh) 一种微生物菌剂及其制备方法和应用
CN103518781B (zh) 一种核心生防菌素及含该核心生防菌素的有机肥
CN109650986A (zh) 一种改良退化蔬菜地土壤的炭基生物有机肥及其应用
CN107473867B (zh) 一种采用畜禽废弃物制备的生物菌肥及其制备方法
CN103194405A (zh) 用于促进生姜生长及防控连作生姜土传枯萎病的促生菌及其微生物有机肥料
CN109796274A (zh) 一种生物肥料及其制备方法和应用
CN116253600B (zh) 有机肥以及促进蔬菜生长和/或防治蔬菜病害的方法
CN109232085A (zh) 黄桃专用生物有机肥及其制备方法和应用
CN106045677A (zh) 一种果树专用的有机复合生物肥的制备方法
CN101948780A (zh) 防治连作辣椒疫病的拮抗菌及其微生物有机肥料
CN106977350A (zh) 一种白芨生物肥料及其制备方法
CN106045679A (zh) 一种花生专用的有机复合生物肥的制备方法
CN106348865A (zh) 一种以蚕沙和烟梗为有机原料的有机无机复混肥料及其制备方法
CN107815419A (zh) 一种提高秸秆还田后营养元素利用率的方法
CN104609912A (zh) 基于新型复合生物活菌制剂的复合生物菌肥及其制备方法
CN117602979A (zh) 一种促进土壤固碳降害的生物菌肥及其应用
CN106083444A (zh) 一种水稻专用的有机复合生物肥的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant