CN109964875B - 一种生产抗3型鸭甲肝病毒和屠体性能高的肉鸭配套方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生产抗3型鸭甲肝病毒且屠体性能高的肉鸭的配套方法。该方法包括如下步骤：(1)将母鸭和公鸭进行选配，获得非抗病毒品系；(2)以抗病毒鸭专门化品系为母本，以非抗病毒品系为父本进行选配，获得具有优良性状的肉鸭；所述优良性状为抗病毒和/或屠体性能提高。实验证明，采用本发明提供的方法生产的肉鸭的抗病毒能力和屠体性能均显著提高。本发明具有重要的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种生产抗3型鸭甲肝病毒和屠体性能高的肉鸭配套方法。
背景技术
鸭病毒性肝炎是一种严重危害养鸭业的急性高度致死性疾病，多发生于3周龄以内雏鸭，雏鸭病死率可达70％以上，是目前除禽流感外对肉鸭产业危害最大的疾病。
鸭病毒性肝炎的致病病原主要包括鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus，DHAV)和鸭星状病毒(Duck astrovirus，DAstV)。DHAV分为3个基因型，即DHAV-1、DHAV-2和DHAV-3。DAstV包括鸭肝炎病毒血清2型(DHV-2)和鸭肝炎病毒血清3型(DHV-3)。DHV-2所引起的死亡率与日龄有关，1-2周龄雏鸭感染DHV-2，死亡率可达50％。DHV-3所引起的死亡率一般不超过30％。相对而言，鸭甲肝病毒的危害更为严重。流行病学研究结果表明，鸭病毒性肝炎的发生主要由鸭甲肝病毒引起，在我国大陆养鸭业，DHAV-1和DHAV-2是导致鸭病毒性肝炎发生和流行的主要病原。2010年至今，DHAV-3的流行更为广泛。
针对DHAV-3病毒性肝炎的高危害性及其流行现状，培育抗DHAV-3的高抗鸭品系是减少鸭养殖业成本、解决鸭养殖业危害及消灭生物安全问题的有效途径。目前，已经培育出了抗DHAV-3的专门化品系，但抗DHAV-3的专门化品系生长速度慢且屠体性能较低，7周龄体重仅为2600g(张姣姣.北京鸭抗血清3型鸭甲型病毒性肝炎选育研究初探[D].北京.中国农业科学院，2015.)，而正常商品代肉鸭6周龄体重均在3000g以上。
发明内容
本发明的目的是生产抗3型鸭甲肝病毒且屠体性能高的肉鸭。
本发明首先保护一种生产具有优良性状的肉鸭的方法，可包括如下步骤：
(1)将母鸭和公鸭进行选配，获得非抗病毒品系；
(2)以抗病毒鸭专门化品系为母本，以非抗病毒品系为父本进行选配，获得具有优良性状的肉鸭；
所述优良性状为(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：
(a)抗病毒且屠体性能提高；
(b)抗病毒且屠体性能提高，且抗病毒能力和屠体性能均强于所述非抗病毒品系和所述抗病毒鸭专门化品系；
(c)抗病毒；
(d)抗病毒且抗病毒能力强于所述非抗病毒品系和所述抗病毒鸭专门化品系；
(e)屠体性能提高；
(f)屠体性能提高且屠体性能强于所述非抗病毒品系和所述抗病毒鸭专门化品系。
上述方法中，所述非抗病毒品系比所述抗病毒鸭专门化品系的屠体性能高。
上述任一所述屠体性能可为活体重、胴体重、全净膛、胸肌重、腿肌重和皮脂重中的至少一种。
上述任一所述屠体性能可为活体重、胴体重、全净堂重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率和腿肌率中的至少一种。
上述任一所述病毒可为鸭甲肝病毒。所述鸭甲肝病毒可为3型鸭甲肝病毒。所述3型鸭甲肝病毒具体可为DHAV-3 112803株。
上述任一所述鸭可为北京鸭。
上述任一所述方法中，所述北京鸭可为瘦肉型Z8品系北京鸭和/或瘦肉型Z7品系北京鸭。
上述任一所述方法中，所述非抗病毒品系可为瘦肉型Z7品系北京鸭。所述抗病毒鸭专门化品系可为抗病毒瘦肉型Z8品系北京鸭专门化品系。
上述任一所述的方法在生产肉鸭中的应用也属于本发明的保护范围。
上述应用中，所述肉鸭可为抗3型鸭甲肝病毒且屠体性能高的肉鸭。
采用本发明提供的方法可以生产具有优良性状的肉鸭，所述优良性状为抗3型鸭甲肝病毒且屠体性能提高，且抗3型鸭甲肝病毒能力和屠体性能均强于作为父本的非抗3型鸭甲肝病毒品系和作为母本的抗3型鸭甲肝病毒鸭专门化品系。本发明解决了抗3型鸭甲肝病毒鸭专门化品系的抗3型鸭甲肝病毒能力强而屠体性能低，非抗3型鸭甲肝病毒品系屠体性能高而抗3型鸭甲肝病毒能力差的问题，对肉鸭产业的发展具有重要的价值。
附图说明
图1为抗性品系感染DHAV-3的死亡情况。
图2为非抗性品系感染DHAV-3的死亡情况
图3为抗性群体(父本)和非抗性品系(母本)的杂交后代(正交后代)感染DHAV-3的死亡情况。
图4为非抗性群体(父本)和抗性品系(母本)的杂交后代(正交后代)感染DHAV-3的死亡情况。
图5为不同群体感染DHAV-3后的群体存活率比较。
图6为不同群体感染DHAV-3后6周龄的活体重、胴体重和全净膛的比较。
图7为不同群体感染DHAV-3后6周龄的胸肌重、腿肌重和皮脂重的比较。
图8为不同群体感染DHAV-3后6周龄的胸肌率、腿肌率和皮脂率的比较。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
抗DHAV-3北京鸭专门化品系记载于如下文献中：王笑言.抗DHAV-3北京鸭专门化品系的选育及G2代群体的抗病力差异机制[D].北京:中国农业科学院,2017.。在本发明中，抗DHAV-3北京鸭专门化品系具体是指抗DHAV-3瘦肉型Z8品系北京鸭专门化品系。抗DHAV-3瘦肉型Z8品系北京鸭专门化品系的选育方法已在中国发明专利文献CN 107432266 B中公开。在下文中，抗DHAV-3瘦肉型Z8品系北京鸭专门化品系简称抗DHAV-3北京鸭专门化品系或抗性品系。
DHAV-3 112803株(记载于如下文献中：郑利莎.鸭病毒性肝炎的病原检测和鸭甲肝病毒3型强毒株的制备[D].北京：中国农业大学，2014.)，由农业部动物流行病毒学重点实验室提供。DHAV-3 112803株在下文中简称112803株。
实施例1、攻毒材料的制备
1、将112803株经尿囊腔途径接种至9日龄鸭胚(每枚鸭胚0.2mL)，置于37℃孵化箱中培养，每日观察胚体状态；然后收集24h-72h死亡鸭胚的尿囊液、胚体和尿囊膜，充分研磨后混匀，4℃、7000r/min离心15min。
2、完成步骤1后，取上清，加入青链霉素混合液(Solarbio公司的产品)，即为制备的攻毒材料。攻毒材料中，青霉素的浓度为100U/mL，链霉素的浓度为0.1mg/mL。
用Reed-Muench法(记载于如下文献中：殷震，刘景华.动物病毒学第二版[M].北京：科学出版社，1997:323-336)测定攻毒材料的ELD50，具体步骤如下：
(1)取攻毒材料，用灭菌生理盐水进行10倍系列稀释，得到稀释液(稀释度为10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9或10-10)。
(2)完成步骤(1)后，将稀释液经尿囊腔途径接种至9日龄鸭胚，每个稀释度接种5枚鸭胚，每枚鸭胚0.2mL；然后观察7天，记录每日的死胚数量。
(3)完成步骤(1)后，将灭菌生理盐水经尿囊腔途径接种至9日龄鸭胚，共接种5枚鸭胚，每枚鸭胚0.2mL；然后观察7天，记录每日的死胚数量。
(4)完成步骤(2)和(3)后，按照Reed-Muench法计算ELD50。
结果表明，攻毒材料的ELD50为10-5.7/0.2mL。
将攻毒材料保存于-80℃备用。
实施例2、抗性品系、非抗性品系、正交后代和反交后代感染DHAV-3的试验及结果分析
一、抗性品系感染DHAV-3的试验
1、在自由采食和自由饮水条件下，将来自抗性品系的173个家系的1000只雏鸭(每只鸭带翅标，翅标上的翅号表示其系谱信息)饲养至3日龄；然后采用注射器向鸭群空气中喷洒500mL攻毒材料(此时即为感染0h)，之后每隔一段时间观察鸭群状态并统计死亡数、家系死亡率(某家系死亡率＝某家系死亡的雏鸭数/某家系雏鸭总数×100％)和总死亡率(总死亡率＝死亡的雏鸭总数/1000×100％)。感染120h后，统计雏鸭的存活数并统计抗性品系的群体存活率(群体存活率＝存活的雏鸭数/1000×100％)。
以感染后时间为横坐标，总死亡率为纵坐标，绘制抗性品系死亡曲线。
抗性品系死亡曲线见图1(死亡率即总死亡率)。结果表明，感染24h后开始死亡，第60h停止死亡。
感染120h后，各个家系的死亡率统计情况见表1。
表1
| 家系数(个) | |
| 家系死亡率＝100％ | 2 |
| 60<家系死亡率≤90 | 5 |
| 30<家系死亡率≤60 | 2 |
| 0<家系死亡率≤30 | 2 |
| 家系死亡率＝0％ | 162 |
抗性品系的群体存活率达到92.82％。
2、完成步骤1后，将存活的雏鸭按照《商品代肉鸭饲养手册》饲养至6周龄，然后随机选取18只公鸭、18只母鸭进行屠宰分割试验，统计抗性品系感染DHAV-3后存活个体的屠体性能指标(包括活体重、胴体重、全净堂重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率、腿肌率和皮脂率)，并按组(按公母分为两组)计算平均值和标准差。
统计结果见表2。
表2-1.母鸭的屠体性能指标统计结果
表2-2.公鸭的屠体性能指标统计结果
二、非抗性品系感染DHAV-3的试验
1、以瘦肉型Z7品系北京鸭为基础群体，选择屠体性能良好的公鸭56只和母鸭223只，组建223个家系(即223个非抗性品系)。具体步骤为：将223只母鸭单笼饲养，待产蛋稳定后，将1只公鸭固定4只母鸭(其中1只公鸭固定3只母鸭)进行循环配种，然后连续收集种蛋14天，每个种蛋记录双亲编号，然后进行系谱孵化，出雏时挑选发育良好的700只雏鸭进行后续实验。
2、在自由采食和自由饮水条件下，将来自223个家系(即223个非抗性品系)的700只雏鸭(每只鸭带翅标，翅标上的翅号表示其系谱信息)饲养至3日龄；然后采用注射器向鸭群空气中喷洒350mL攻毒材料(此时即为感染0h)，之后每隔一段时间观察鸭群状态并统计死亡数、家系死亡率(某家系死亡率＝某家系死亡的雏鸭数/某家系雏鸭总数×100％)和总死亡率(总死亡率＝死亡的雏鸭总数/700×100％)。感染120h后，统计雏鸭的存活数并统计非抗性品系的群体存活率(群体存活率＝存活的雏鸭数/700×100％)。
以感染后时间为横坐标，总死亡率为纵坐标，绘制非抗性品系死亡曲线。
非抗性品系死亡曲线见图2(死亡率即总死亡率)。结果表明，感染24h后开始死亡，第101h停止死亡。
感染120h后，各个家系的死亡率统计情况见表3。
表3
| 家系数(个) | |
| 家系死亡率＝100％ | 69 |
| 60<家系死亡率≤90 | 63 |
| 30<家系死亡率≤60 | 54 |
| 0<家系死亡率≤30 | 17 |
| 家系死亡率＝0％ | 20 |
非抗性品系的群体存活率仅为34.00％。
3、完成步骤2后，将存活的雏鸭按照《商品代肉鸭饲养手册》饲养至6周龄，然后随机选取公鸭、母鸭各25只进行屠宰分割试验，统计非抗性品系感染DHAV-3后存活个体的屠体性能指标(包括活体重、胴体重、全净堂重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率、腿肌率和皮脂率)，并按组(按公母分为两组)计算平均值和标准差。
统计结果见表4。
表4-1.母鸭的屠体性能指标统计结果
表4-2.公鸭的屠体性能指标统计结果
三、正交后代感染DHAV-3的试验
1、随机选择抗性品系公鸭18只和非抗性品系(瘦肉型Z7品系)北京鸭母鸭71只，组建71个家系。具体步骤为：将71只母鸭单笼饲养，待产蛋稳定后，将1只公鸭固定4只母鸭(其中1只公鸭固定3只母鸭)进行循环配种，然后连续收集种蛋14天，每个种蛋记录双亲编号，然后进行系谱孵化，出雏时挑选发育良好的600只雏鸭(600只雏鸭即正交后代)进行后续实验。
2、在自由采食和自由饮水条件下，将来自71个家系的600只雏鸭(每只鸭带翅标，翅标上的翅号表示其系谱信息)饲养至3日龄；然后采用注射器向鸭群空气中喷洒300mL攻毒材料(此时即为感染0h)，之后每隔一段时间观察鸭群状态并统计死亡数、家系死亡率(某家系死亡率＝某家系死亡的雏鸭数/某家系雏鸭总数×100％)和总死亡率(总死亡率＝死亡的雏鸭总数/600×100％)。感染120h后，统计雏鸭的存活数并统计正交后代的群体存活率(群体存活率＝存活的雏鸭数/600×100％)。
以感染后时间为横坐标，总死亡率为纵坐标，绘制正交后代死亡曲线。
正交后代死亡曲线见图3(死亡率即总死亡率)。结果表明，感染18h后开始死亡，第72h停止死亡。
感染120h后，各个家系的死亡率统计情况见表5。
表5
| 家系数(个) | |
| 家系死亡率＝100％ | 3 |
| 60<家系死亡率≤90 | 6 |
| 30<家系死亡率≤60 | 18 |
| 0<家系死亡率≤30 | 19 |
| 家系死亡率＝0％ | 25 |
正交后代的群体存活率为69.13％。
3、完成步骤2后，将存活的雏鸭按照《商品代肉鸭饲养手册》饲养至6周龄，然后随机选取公鸭、母鸭各15只进行屠宰分割试验，统计正交后代感染DHAV-3后存活个体的屠体性能指标(包括活体重、胴体重、全净堂重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率、腿肌率和皮脂率)，并按组(按公母分为两组)计算平均值和标准差。
统计结果见表6。
表6-1.公鸭的屠体性能指标统计结果
表6-2.母鸭的屠体性能指标统计结果
四、反交后代感染DHAV-3的试验
1、随机选择非抗性品系(瘦肉型Z7品系)北京鸭公鸭24只和抗性品系母鸭70只，组建70个家系。具体步骤为：将70只母鸭单笼饲养，待产蛋稳定后，将1只公鸭固定3只母鸭(其中1只公鸭固定1只母鸭)进行循环配种，然后连续收集种蛋14天，每个种蛋记录双亲编号，然后进行系谱孵化，出雏时挑选发育良好的600只雏鸭(600只雏鸭即反交后代)进行后续实验。
2、在自由采食和自由饮水条件下，将来自70个家系的600只雏鸭(每只鸭带翅标，翅标上的翅号表示其系谱信息)饲养至3日龄；然后采用注射器向鸭群空气中喷洒300mL攻毒材料(此时即为感染0h)，之后每隔一段时间观察鸭群状态并统计死亡数、家系死亡率(某家系死亡率＝某家系死亡的雏鸭数/某家系雏鸭总数×100％)和总死亡率(总死亡率＝死亡的雏鸭总数/600×100％)。感染120h后，统计雏鸭的存活数并统计反交后代的群体存活率(群体存活率＝存活的雏鸭数/600×100％)。
以感染后时间为横坐标，总死亡率为纵坐标，绘制反交后代死亡曲线。
反交后代死亡曲线见图4(死亡率即总死亡率)。结果表明，反交后代的总死亡率仅为2.7％。
感染120h后，各个家系的死亡率统计情况见表7。
表7
反交后代的群体存活率达到97.3％。
3、完成步骤2后，将存活的雏鸭按照《商品代肉鸭饲养手册》饲养至6周龄，然后随机选取公鸭、母鸭各15只进行屠宰分割试验，统计反交后代感染DHAV-3后存活个体的屠体性能指标(包括活体重、胴体重、全净堂重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率、腿肌率和皮脂率)，并按组(按公母分为两组)计算平均值和标准差。
统计结果见表8。
表8-1.公鸭的屠体性能指标统计结果
表8-2.母鸭的屠体性能指标统计结果
五、数据分析
1、群体存活率的比较
比较步骤一至四中抗性品系、非抗性品系、正交后代和反交后代的群体存活率。
比较结果见图5。结果表明，反交后代的群体存活率远远高于非抗性品系和正交后代的群体存活率。由此可见，正交后代的抗DHAV-3能力因杂交而降低，而反交后代的抗DHAV-3能力并没有因杂交而降低。因此，只有以抗性品系作为母本、非抗性品系作为父本进行杂交，才可以保证后代的抗DHAV-3能力不会降低。
2、群体屠体性能比较
比较步骤一至四中抗性品系、非抗性品系、正交后代和反交后代的群体屠体性能。群体屠体性能包括活体重、胴体重、全净膛、胸肌重、腿肌重、皮脂重、胸肌率、腿肌率和皮脂率。
比较结果见图6、图7和图8(数据均为公母鸭的平均值)。结果表明，与非抗性品系、正交后代或抗性品系相比，反交后代的活体重、胴体重、全净膛、胸肌重、腿肌重和皮脂重均显著增加。因此，只有以抗性品系作为母本、非抗性品系作为父本进行杂交，才可以屠体性能提高的杂交后代。
上述结果表明，以抗性品系作为母本、非抗性品系作为父本进行杂交，获得的杂交后代不仅抗DHAV-3而且屠体性能大大提高，可以满足市场的需求。解决了抗性品系的抗DHAV-3能力强而屠体性能低，非抗性品系屠体性能高而抗DHAV-3能力差的问题。
Claims (2)
1.一种生产具有优良性状的肉鸭的方法，包括如下步骤：
（1）将母鸭和公鸭进行选配，获得非抗病毒品系；
（2）以抗病毒鸭专门化品系为母本，以非抗病毒品系为父本进行选配，获得具有优良性状的肉鸭；
所述非抗病毒品系比所述抗病毒鸭专门化品系的屠体性能高；
所述优良性状为抗病毒且屠体性能提高，且抗病毒能力和屠体性能均强于所述非抗病毒品系和所述抗病毒鸭专门化品系；
所述屠体性能为活体重、胴体重、全净膛、胸肌重、腿肌重和皮脂重中的至少一种；
所述病毒为鸭甲肝病毒；
所述鸭甲肝病毒为3型鸭甲肝病毒；
所述3型鸭甲肝病毒为DHAV-3 112803株；
所述非抗病毒品系为瘦肉型Z7品系北京鸭；所述抗病毒鸭专门化品系为抗病毒瘦肉型Z8品系北京鸭专门化品系。
2.权利要求1所述的方法在生产肉鸭中的应用；所述鸭为北京鸭。
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