CN109875939B - 一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1‑1份、烟酰胺1‑5份、熊果叶提取物0.1‑3份、粗糙帽果提取物0.1‑3份、藤茶提取物0.1‑3份、姜根提取物0.1‑3份、聚山梨醇酯‑80 0.1‑1份、去离子水0.5‑5份。该美白祛斑组合物采用最优比例将六种组分进行配伍，组分配方合理，各活性成分相辅相成，可协同增效，各成分分别通过不同的途径或机制全方位多角度地来抑制黑色素的生成或转移，使产品的美白祛斑效果显著且长效。将该组合物应用于化妆品中，使制备得到的产品安全性能高，具有显著的长效的美白祛斑效果。

Description

一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于护肤品技术领域，具体涉及一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用。

背景技术

皮肤颜色的深浅受多种因素调控，主要取决于黑色素的含量及分布。黑色素是一种氨基酸衍生物，是酪氨酸或3,4-二羟苯丙氨酸经过一连串化学反应所形成的，其常以聚合的方式存在。黑色素由人表皮基底层中的黑色素细胞合成，当紫外线照射到皮肤上，肌肤就会处于“自我防护”的状态，激活酪氨酸酶的活性，催化酪氨酸或3,4-二羟苯丙氨酸氧化生成黑色素，来保护我们的皮肤细胞。黑色素又经由细胞代谢的层层移动，到了肌肤表皮层形成雀斑、晒斑、黑斑等。

黑色素合成过程主要参与的酶有酪氨酸酶、多巴色素互变酶、二羟基吲哚羧酸氧化酶，其中酪氨酸酶属于氧化还原酶，是黑色素合成的主要限速酶，其活性大小决定黑色素形成的数量。酪氨酸酶同时有着单酚酶和二酚酶的特性，即具有加氧酶和氧化酶的功能。在黑色素合成过程中，它能够催化L-酪氨酸羟基化为左旋多巴(单酚酶活性)；第二步氧化左旋多巴生成多巴醌(二酚酶活性)，多巴醌性质不稳定，经过各种复杂的非酶促反应之后，最终产生黑色素。

CN101780023A公开了一种猕猴桃籽油祛斑化妆品及其制备方法。猕猴桃籽油以猕猴桃果籽为原料，经粉碎、超临界CO₂萃取而得，再经超高压均质处理，使猕猴桃籽油粒径在120nm以下。该发明首次发现猕猴桃籽油具有祛斑功效，尤其对老年斑的祛除效果显著，主要是基于其富含的营养成份。

CN107213084A公开了一种美白祛斑组合物及化妆品，所述美白祛斑组合物按重量份计包括：抑制酪氨酸酶活性或者将真黑素转化为淡黑素的原料，0.01-15份；抑制酪氨酸酶表达的原料，0.1-15份；增加黑素细胞的促黑素细胞激素受体活性的原料，0.01-10份；液晶乳化剂，0.1-8份；本发明所述美白祛斑组合物，充分发挥各成分的协同功效，能有效改善皮肤暗沉，提亮肤色。

但以上现有技术公开的几种产品其美白祛斑效果并不十分显著和长效，因此，开发一种制备方法简单，且美白祛斑功效显著且长效的产品是十分有意义的。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种美白祛斑组合物，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1-1份、烟酰胺1-5份、熊果叶提取物0.1-3份、粗糙帽果提取物0.1-3份、藤茶提取物0.1-3份、姜根提取物0.1-3份、聚山梨醇酯-80 0.1-1份、去离子水0.5-5份。

本发明所述美白祛斑组合物中所含有的六种主要活性成分搭配合理，相辅相成，可协同增效，各成分分别通过不同的途径或机制全方位多角度地来抑制黑色素的生成或转移，使产品的美白祛斑效果显著且长效。具体来看：酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶，而苯乙基间苯二酚能非竞争性抑制酪氨酸酶的活性，其能与酪氨酸酶的活性中心结合形成氢键，并伴有疏水结构；熊果叶含有的主要成分熊果苷、洋梨甙、毛柳甙等，其也能非竞争性抑制酪氨酸酶的活性；藤茶提取物中含有的黄酮类成分，例如槲皮素、二氢槲皮素、杨梅素、二氢杨梅素等，均能很好地通过竞争性抑制和非竞争性抑制相结合的方式抑制酪氨酸酶的活性；烟酰胺能非竞争性抑制酪氨酸酶的活性。

其次，酪氨酸酶是一种含铜需氧酶，在酪氨酸转化为黑色素的反应过程中，必须有氧自由基参与，因此氧自由基的清除可以阻断酪氨酸酶的催化反应，从而使酪氨酸氧化反应的强度减弱，而烟酰胺能有效消除人体自由基，切断酪氨酸酶的催化反应，藤茶提取物中的黄酮类成分也能通过清楚自由基从而阻断酪氨酸酶的催化反应；另外，粗糙帽果提取物和姜根提取物也能够清除人体多余的自由基。

此外，由于表皮基底层的黑色素细胞中黑色素小体内合成黑色素后，需要进一步转运到皮肤皮角质层，故除了通过抑制黑色素的生成外，通过抑制黑色素的转运，可协同达到皮肤美白祛斑的效果，而组分中的烟酰胺能非常有效阻断黑色素从基底层向角质层的运输。

最后，粗糙帽果提取物和姜根提取物能够抑制由日晒、微生物、空气污染等引起的炎症反应，抑制炎症性色素沉着反应。

综上，本发明所述组合物中的成分缺一不可，它们分别通过不同的途径或机制全方位多角度地来抑制黑色素的生成或转移，且这几种成分的重量份数配比也是特定选择的，只有在这样的重量份数配比下才能达到最好的美白祛斑的效果。

所述苯乙基间苯二酚的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述烟酰胺的重量份数可以为1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份或5份等。

所述熊果叶提取物的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.6份、0.8份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。

所述粗糙帽果提取物的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.6份、0.8份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。

所述藤茶提取物的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.6份、0.8份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。

所述姜根提取物的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.6份、0.8份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。

所述聚山梨醇酯-80的重量份数可以为0.1份、0.2份、0.4份、0.5份、0.6份、0.8份或1份等。

所述去离子水的重量份数可以为0.5份、0.7份、0.8份、1份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份或5份等。

优选地，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1-0.5份、烟酰胺3-5份、熊果叶提取物0.2-1份、粗糙帽果提取物0.2-1份、藤茶提取物0.2-1份、姜根提取物0.2-1份、聚山梨醇酯-80 0.2-0.5份、去离子水0.5-2份。

优选地，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1份、烟酰胺3份、熊果叶提取物0.5份、粗糙帽果提取物0.5份、藤茶提取物0.5份、姜根提取物0.5份、聚山梨醇酯-80 0.2份、去离子水1份。

另一方面，本发明提供一种如上所述的美白祛斑组合物的制备方法，所述制备方法为：

将烟酰胺、熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、藤茶提取物、姜根提取物和去离子水混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚均质乳化，得到所述美白祛斑组合物。

该组合物的制备方法简单可行，易于制备。

优选地，所述藤茶提取物制备方法为：将藤茶茎叶干燥、粉碎，以乙醇为溶媒，加入酶液，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过树脂纯化得到藤茶提取物。

优选地，所述酶为纤维素酶和果胶酶。

优选地，所述纤维素酶和果胶酶的重量份数比是3:1。

优选地，所述酶液的质量百分含量为0.4-2％。

优选地，所述乙醇浓度为60-80％，例如60％、65％、70％、72％、75％、76％、78％或80％等。

优选地，所述乙醇浓度为75％。

优选地，所述树脂为大孔树脂，优选AB-8大孔树脂。

作为本发明的优选技术方案，所述制备方法为：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在60-80℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在60-80℃下进行乳化，在20-30℃下静置5-10min，得到所述美白祛斑组合物。

再一方面，本发明提供一种化妆品，所述化妆品的原料组成中包含如上所述的美白祛斑组合物。

优选地，所述美白祛斑组合物在化妆品中的添加量为0.1-30％，例如0.1％、0.5％、1％、2％、5％、10％、15％、20％或30％等，优选5-10％。

优选地，所述化妆品的原料组成中还包括添加剂，所述添加剂包括溶剂、乳化剂、防腐剂或增稠剂中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如溶剂和乳化剂的组合、防腐剂和增稠剂的组合、乳化剂和防腐剂和增稠剂的组合等。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明所涉及的组合物采用最优比例将六种组分进行配伍，组分配方合理，各活性成分相辅相成，可协同增效，各成分分别通过不同的途径或机制全方位多角度地来抑制黑色素的生成或转移，使产品的美白祛斑效果显著且长效。将该组合物应用于化妆品中，使制备得到的产品安全性能高，具有显著的长效的美白祛斑效果。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。

实施例1

本实施例提供一种美白祛斑组合物(Ⅰ)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1份、烟酰胺3份、熊果叶提取物0.5份、粗糙帽果提取物0.5份、藤茶提取物0.5份、姜根提取物0.5份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述美白祛斑组合物(Ⅰ)。

实施例2

本实施例提供一种美白祛斑组合物(Ⅱ)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.5份、烟酰胺4份、熊果叶提取物0.2份、粗糙帽果提取物0.1份、藤茶提取物3份、姜根提取物3份、去离子水0.5份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以80％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在60℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在60℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述美白祛斑组合物(Ⅱ)。

实施例3

本实施例提供一种美白祛斑组合物(Ⅲ)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚1份、烟酰胺5份、熊果叶提取物3份、粗糙帽果提取物3份、藤茶提取物0.1份、姜根提取物0.1份、去离子水5份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以60％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在80℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述美白祛斑组合物(Ⅲ)。

实施例4

本实施例提供一种美白祛斑组合物(Ⅳ)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1份、烟酰胺1份、熊果叶提取物1份、粗糙帽果提取物1份、藤茶提取物1份、姜根提取物1份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述美白祛斑组合物(Ⅳ)。

实施例5

本实施例提供一种美白祛斑化妆品(Ⅰ)，所述美白祛斑化妆品按重量份数计包括如下组分：

其制备方法包括以下步骤：

(1)将A组物料称重后投入洁净乳化锅中搅拌加热至85℃，保温搅拌至溶解完全，备用；

(2)将B组物料称重后混合至均一，备用；

(3)抽真空，将B组混合物料抽入到乳化锅内与A组物料混合，抽完后，开启均质器，高速均质，保温消泡后，开冷却水冷却降温；

(4)当温度降到45℃时，加入C组物料，搅拌均匀，38℃出料。

实施例6

本实施例提供一种美白祛斑化妆品(Ⅱ)，所述美白祛斑化妆品按重量份数计包括如下组分：

其制备方法与实施例5一致。

实施例7

本实施例提供一种美白祛斑化妆品(Ⅲ)，所述美白祛斑化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“美白祛斑组合物(Ⅲ)”，其制备方法与实施例6一致。

实施例8

本实施例提供一种美白祛斑化妆品(Ⅳ)，所述美白祛斑化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“美白祛斑组合物(Ⅳ)”，其制备方法与实施例6一致。

对比例1

本对比例提供一种组合物(A)，所述组合物按重量份数计包括如下组分：烟酰胺3.1份、熊果叶提取物0.5份、粗糙帽果提取物0.5份、藤茶提取物0.5份、姜根提取物0.5份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，得到所述组合物(A)。

对比例2

本对比例提供一种组合物(B)，所述组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚1.1份、熊果叶提取物1份、粗糙帽果提取物1份、藤茶提取物1份、姜根提取物1份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述组合物(B)。

对比例3

本对比例提供一种组合物(C)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.2份、烟酰胺3.1份、粗糙帽果提取物0.6份、藤茶提取物0.6份、姜根提取物0.6份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述组合物(C)。

对比例4

本对比例提供一种组合物(D)，所述组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.2份、烟酰胺3.1份、熊果叶提取物0.6份、粗糙帽果提取物0.6份、姜根提取物0.6份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述组合物(D)。

对比例5

本对比例提供一种组合物(E)，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.3份、烟酰胺3.4份、熊果叶提取物0.7份、藤茶提取物0.7份、去离子水1份。

其制备方法包括以下步骤：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、烟酰胺、去离子水在75℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在80℃下进行乳化，在25℃下静置10min，得到所述组合物(E)。

对比例6

本对比例提供一种化妆品(A)，所述化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“组合物(A)”，其制备方法与实施例6一致。

对比例7

本对比例提供一种化妆品(B)，所述化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“组合物(B)”，其制备方法与实施例6一致。

对比例8

本对比例提供一种化妆品(C)，所述化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“组合物(C)”，其制备方法与实施例6一致。

对比例9

本对比例提供一种化妆品(D)，所述化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“组合物(D)”，其制备方法与实施例6一致。

对比例10

本对比例提供一种化妆品(E)，所述化妆品按重量份数计包括的组分与实施例6的区别仅在于将“美白祛斑组合物(Ⅱ)”替换为“组合物(E)”，其制备方法与实施例6一致。

应用例1

DPPH自由基清除率试验：

实验目的：测定实施例1-4和对比例1-5的自由基清除能力。

实验仪器及试剂：

主要仪器：分光光度计SpectronicGENESYS-5，美国Thermo公司。

主要试剂：DPPH，分析纯，天津大茂；甲醇，分析纯，天津大茂；抗坏血酸，分析纯，上海国药。

溶液配制：首先取DPPH 1mg溶于约20mL甲醇中，超声5min，充分振摇，使上下各部分均匀。取1mL该DPPH溶液，在519nm处测A值，使A＝1.2-1.3之间；再配制各样品溶液：将实施例1-4和对比例1-5的组合物用甲醇稀释，配制质量分数0.01％、0.05％、0.1％、0.5％、1％；再配制抗坏血酸溶液：抗坏血酸用甲醇稀释，质量分数0.01％、0.05％、0.1％、0.5％、1％。

具体方法：各组试验加样体系如表1所示，将反应溶液摇匀后放置于37℃水浴加热15min后取出，用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度值。

表1

试剂	C1/mL	C2/mL	C3/mL
				DPPH溶液	2	2	0
样品/抗坏血酸溶液	0	2	2
				无水甲醇	2	0	2

DPPH自由基清除率的计算公式如下式所示：

DPPH自由基清除率＝1-(A2-A3)/A1×100％

式中，A1、A2、A3分别为C1、C2、C3的吸光度值。

试验结果如表2所示：

表2

由表2数据可知：实施例的DPPH自由基清除率整体比对比例高，说明当组合物中缺少任一种成分都会使清除DPPH自由基的效果有所下降，其中，由对比例2、3、5的数据可知，当组合物中缺少烟酰胺、藤茶提取物、粗糙帽果提取物和姜根提取物时，DPPH自由基的清除效果显著变差。

应用例2

酪氨酸酶活性抑制实验

试验目的：测定实施例1-4和对比例1-5的酪氨酸酶活性抑制能力。

试验仪器与试剂：

主要仪器：分光光度计SpectronicGENESYS-5，美国Thermo公司。

主要试剂：酪氨酸酶粉末，酶活力为25000U，美国sigma公司；L-酪氨酸，分析纯，上海JCBIO；抗坏血酸，分析纯，上海国药。

溶液配制：称取磷酸二氢钠7.8g和磷酸氢二钠17.91g，用蒸馏水溶解定容至500mL，制备pH6.8、0.1mol/L磷酸盐缓冲液；准确量取质量分数为36％-38％的盐酸0.431mL，用蒸馏水定容至50mL，制备0.1mol/L盐酸；称取0.05g L-酪氨酸溶于35mL0.1mol/L的盐酸，再加入65mL、pH6.8的PBS缓冲液，得到质量分数为0.05％的L-酪氨酸溶液；将酶活25000U的酪氨酸酶溶于250mL纯水中，制成酶活为100U/mL的酪氨酸酶溶液，分装1.5mL的EP管中，每只1mL放于-40℃冰箱保存；用PBS缓冲液稀释各样品及抗环血酸，使其质量分数浓度均为5％。

具体方法：各组试验加样体系如表3所示，先将PBS缓冲液、L-酪氨酸溶液、各样品及抗环血酸溶液混合，放入37℃恒温水浴锅中水浴10-15min；再将酪氨酸酶加入反应溶液中、摇匀，准确计时，反应15min停止；依次在96孔板上点板，用酶标仪测定其吸光度并计算抑制率。

表3

试剂	C1/mL	C2/mL	S1/mL	S2/mL
					PBS	4	5	2	3
样品	0	0	2	2
					L-酪氨酸	2	2	2	2
酪氨酸酶溶液	1	0	1	0

酪氨酸酶抑制率的计算公式如下式所示：

酪氨酸酶抑制率＝[(A1-A2)-(A3-A4)]/(A1-A2)×100％

式中，A1、A2、A3、A4分别为C1、C2、S1、S2的吸光度值。

试验结果如表4所示：

表4

由表4数据可知：实施例1-4的酪氨酸酶抑制率整体比对比例1-5高，说明当组合物中缺少任一种成分都会使抑制酪氨酸酶的效果有所下降，其中，实施例4的酪氨酸酶抑制率稍低于实施例1-3。

应用例3

安全性测试：

试验目的：对实施例5-8的产品进行安全性测试。

具体方法：采用48h封闭式斑贴试验进行。分别称取该发明美白祛斑化妆品及对照品20mg至斑试器中，同时设置空白对照组，对照即为该化妆品的稀释剂。选取健康志愿者120名，年龄18-24岁，无过敏史，清洁受试者背部后，将加有样品的斑试器用无刺激胶带贴敷于背部选定位置，粘贴好后用手指轻压使之均匀贴于皮肤上，持续48h。嘱受试者48h内保持斑贴部位干燥，避免激烈运动、挠抓斑试部位、长时间日光照射等。48h后去除试器并做好标记，30min后等压痕消失后在充足灯光下进行判定，并分别在72h和96h内进行回访观察。

皮肤不良反应分级标准如表5所示：

表5

试验结果如表6所示：

表6

由表6数据可知：受试者基本都为阴性反应，判定本发明所述美白祛斑组合物对人体无不良反应。

应用例4

黑色素活跃度测试：

具体方法：在人脸上分别使用实施例5-8、对比例6-10所制得的产品，同时去照射太阳，使用韩国数字图像分析仪Dermaview-pro仪器测试黑色素活跃度。该测试为本领域技术人员所熟悉的测试手段，具体的测试方法不在此赘述。具体的测试数值见表7(其中，深蓝色、蓝色、黄色、红色、深红色均表征黑色素活跃度，其中深蓝色到深红色表示黑色素活跃度逐渐升高。)。

表7

由表7数据可知：与对比例6-10相比，在人脸上使用本发明所述美白祛斑化妆品前后，其黑色素活跃度更低。由此可知，苯乙基间苯二酚、烟酰胺、藤茶提取物、熊果叶提取物、粗糙帽果提取物和姜根提取物复配而成的美白祛斑组合物产生了协同作用，进一步抑制了皮肤中酪氨酸酶的活性，降低了皮肤黑色素活跃度，提高美白祛斑组合物的美白效果。

应用例5

功效性测试：Lab色度系统测量皮肤颜色变化

试验目的：为验证实施例5-8、对比例6-10所制得的产品是否具有美白、祛斑效果。

具体方法：在人脸上分别使用实施例5-8、对比例6-10所制得的产品，每10个人使用一个样品，并采用CK-PMA6CL400皮肤测试仪测试皮肤的L(亮泽度)、b(黑色素)、ITA(个体肤色度数)，分别测试使用前、6天、13天、27天的L、b、ITA值，测得的各样品的L、b、ITA值的平均值如表8所示。

表8

由表8数据可知：使用本发明所述美白祛斑产品27天(一个新陈代谢周期)后，L、ITA值显著增加，b值显著下降；当产品中缺少苯乙基间苯二酚、烟酰胺、藤茶提取物、熊果叶提取物、粗糙帽果提取物和姜根提取物中的任意一种时，L、b、ITA值的变化相对较小，由此说明本发明美白祛斑组合物各组分复配后可产生良好的协同美白、淡化黑色素的作用，可以有效提亮肤色。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种美白祛斑组合物及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (15)

1.一种美白祛斑组合物，其特征在于，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1-1份、烟酰胺1-5份、熊果叶提取物0.1-3份、粗糙帽果提取物0.1-3份、藤茶提取物0.1-3份、姜根提取物0.1-3份、聚山梨醇酯-80 0.1-1份、去离子水0.5-5份；

所述美白祛斑组合物是由如下制备方法制得的：

将烟酰胺、熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、藤茶提取物、姜根提取物和去离子水混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚，均质乳化，得到所述美白祛斑组合物；

所述藤茶提取物是由如下制备方法制得的：将藤茶茎叶干燥、粉碎，以乙醇为溶媒，加入酶液，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过树脂纯化得到藤茶提取物；所述树脂为大孔树脂。

2.如权利要求1所述的美白祛斑组合物，其特征在于，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1-0.5份、烟酰胺3-5份、熊果叶提取物0.2-1份、粗糙帽果提取物0.2-1份、藤茶提取物0.2-1份、姜根提取物0.2-1份、聚山梨醇酯-80 0.2-0.5份、去离子水0.5-2份。

3.如权利要求1所述的美白祛斑组合物，其特征在于，所述美白祛斑组合物按重量份数计包括如下组分：苯乙基间苯二酚0.1份、烟酰胺3份、熊果叶提取物0.5份、粗糙帽果提取物0.5份、藤茶提取物0.5份、姜根提取物0.5份、聚山梨醇酯-80 0.2份、去离子水1份。

4.如权利要求1-3中任一项所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：

将烟酰胺、熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、藤茶提取物、姜根提取物和去离子水混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚，均质乳化，得到所述美白祛斑组合物；

所述藤茶提取物的制备方法为：将藤茶茎叶干燥、粉碎，以乙醇为溶媒，加入酶液，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过树脂纯化得到藤茶提取物；所述树脂为大孔树脂。

5.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述酶为纤维素酶和果胶酶。

6.如权利要求5所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶和果胶酶的重量份数比是3:1。

7.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述酶液的质量百分含量为0.4-2％。

8.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述乙醇浓度为60-80％。

9.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述乙醇浓度为75％。

10.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述树脂为AB-8大孔树脂。

11.如权利要求4所述的美白祛斑组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：

将藤茶茎叶晒干、粉碎，以75％乙醇为溶媒，加入纤维素酶和果胶酶，通过超声波辅助提取法进行提取，过滤、减压浓缩后经过AB-8大孔树脂纯化得到藤茶提取物，将其与熊果叶提取物、粗糙帽果提取物、姜根提取物、烟酰胺、去离子水在60-80℃下进行混合溶解，得到水相混合液，再向其中加入聚山梨醇酯-80、苯乙基间苯二酚在60-80℃下进行乳化，在20-30℃下静置5-10min，得到所述美白祛斑组合物。

12.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品的原料组成中包含如权利要求1-3中任一项所述的美白祛斑组合物。

13.如权利要求12所述的化妆品，其特征在于，所述美白祛斑组合物在化妆品中的添加量为0.1-30％。

14.如权利要求12所述的化妆品，其特征在于，所述美白祛斑组合物在化妆品中的添加量为5-10％。

15.如权利要求12所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品的原料组成中还包括添加剂，所述添加剂包括溶剂、乳化剂、防腐剂或增稠剂中的任意一种或至少两种的组合。