CN109705217B - 抗il-13抗体及其用途 - Google Patents

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Abstract

本申请公开了特异性结合人IL‑13的抗体或其抗原结合部分，编码所述抗体或其抗原结合部分的多核苷酸、包含所述多核苷酸的载体、包含所述多核苷酸或载体的宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及所述抗体或其抗原结合部分的应用。

Description

抗IL-13抗体及其用途
技术领域
本申请大体涉及基因工程和抗体药物领域；具体而言，涉及抗人白介素-13(IL-13)抗体领域及其用途。本申请开发了新的抗人IL-13抗体，并提供了该抗体在治疗IL-13介导的疾病中的用途。
发明背景
白介素-13(IL-13)由114个氨基酸组成，分子量约12kDa[1]。IL-13最开始作为T辅助细胞亚型2(Th2)CD4+淋巴细胞分泌因子而发现，随后发现Th1 CD4+T细胞、CD8+T细胞和非T细胞(如肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、巨噬细胞、单核细胞和气道平滑肌细胞)也分泌IL-13。
IL-13与IL-4一样属于I型细胞因子家族，有4个α螺旋的疏水束核心所构成的四级结构。IL-13与IL-4具有大约30％的氨基酸序列同源性和多种相似的功能[2]。IL-13需要与膜受体结合介导生物学效应，有两种膜受体IL13Rα1和IL13Rα2。IL13Rα2与IL-13的亲和力更高，但是两者结合后不能介导信号转导，现在公认IL13Rα2为诱饵受体调节IL-13的功能[3]。与IL13Rα2相比，IL13Rα1的亲和力较低，IL-13与IL13Rα1结合后还需要配合IL4Rα形成高亲和力的功能性受体，通过JAK-STAT6信号通路转导信号[4]。IL13Rα1/IL4Rα受体复合物在人B细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、巨噬细胞/单核细胞、DC细胞、纤维细胞、气道上皮和平滑肌细胞都有表达[5]。与IL-4不同的是IL-13是种属非特异性的，鼠IL-13可以与人细胞上IL-13受体结合发挥生物学效应，同样人IL-13也可以与鼠细胞上IL-13受体结合[1,6]。
IL-4和IL-13都能促进B细胞增殖，并联合CD40/CD40L共刺激诱导抗体类型转变成IgE[7]。在单核细胞/巨噬细胞中，IL13上调IgE低亲和力受体CD23(FcεRII)及II型MHC抗原的表达，下调Fcγ和CD14的表达，并抑制抗体依赖性细胞毒性[8,9]。不同于IL-4的是，IL-13不参与幼稚T细胞(
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T cell)向Th2细胞的分化[10]。IL-13可以激活嗜酸性粒细胞，促进其存活和募集[11]。IL-13还可以激活肥大细胞，促进肥大细胞合成IgE[12]。此外IL-13对非造血干细胞如平滑肌细胞、上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞也表现出重要的功能[13-15]。
多项研究表明IL-13与Th2免疫应答相关的自身免疫性疾病有关。尽管IL-13和IL-4具有某些功能相似性，但是一些研究表明IL-13在哮喘的疾病进展中发挥了比其他Th2细胞因子更为重要的作用[16]。基因多态性分析结果显示IL-13与特异性反应和哮喘有关[17,18]。哮喘是一种常见的肺部炎症疾病，以气道高反应性(AHR)、粘液分泌过多、纤维化和IgE水平升高为特征。非特异性刺激(如冷空气等)常常导致气道高反应性加剧，AHR和粘液分泌过多导致气道阻碍，这是哮喘致死的主要原因。IL-13可以促进杯状细胞的分化和纤维化。给未经过过敏原刺激的小鼠气道注射重组IL-13会导致气道炎症，粘液分泌过多和气道高反应性[13,14]，注射可溶性的IL13Rα2可以阻止小鼠AHR、粘液分泌过多和肺部炎症的发生。研究者发现肺部过表达IL-13的转基因小鼠，由于长期暴露在IL-13过表达的环境中发生淋巴细胞和嗜酸性粒细胞浸润，杯状细胞分化，上皮下纤维化[19]。在一项补充实验中发现，敲除IL-13基因的小鼠用过敏原刺激不能导致气道炎症，粘液分泌过多和AHR[20]。此外在哮喘患者样本支气管活组织、唾液和肺泡灌洗液细胞中也发现IL-13升高[21,22]。除了哮喘，IL-13还与慢性阻塞性肺病(COPD)、特应性皮炎等自身免疫性疾病有关。
新的抗IL-13抗体的开发和应用是本领域所需要的。
发明概述
第一方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链可变区，其中
所述HCDR1序列为NYGMS，所述HCDR2序列为TININGGDTYYPDSVKG，所述HCDR3序列为DGYDYDPAWFAY；或者
所述HCDR1序列为AFSVN，所述HCDR2序列为MMWGDGRTDYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYAMDY；或者
所述HCDR1序列为GYNVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYALAH；或者
所述HCDR1序列为GSSVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYFPYAMDY；
其中HCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20、23、26、29、31或者32所示。
第二方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中
所述LCDR1序列为RASQSISDDLH，所述LCDR2序列为YASHSIS，所述LCDR3序列为QNGHSFPFT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGSSFIH，所述LCDR2序列为LAYNLES，所述LCDR3序列为QQNNEAPRT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLES，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLKS，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；
其中LCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21、24、27、30、33或者34所示。
第三方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1序列为NYGMS，所述HCDR2序列为TININGGDTYYPDSVKG，所述HCDR3序列为DGYDYDPAWFAY，所述LCDR1序列为RASQSISDDLH，所述LCDR2序列为YASHSIS，所述LCDR3序列为QNGHSFPFT；或者
所述HCDR1序列为AFSVN，所述HCDR2序列为MMWGDGRTDYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGSSFIH，所述LCDR2序列为LAYNLES，所述LCDR3序列为QQNNEAPRT；或者
所述HCDR1序列为GYNVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYALAH，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLES，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；或者
所述HCDR1序列为GSSVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYFPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLKS，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；
其中HCDR和LCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：24所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：26所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：27所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：29所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：30所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示。
第四方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO：20、23、26、29、31或者32中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO：21、24、27、30、33或者34中任何一项具有至少90％的一致性。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为中和抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体以低于10pM的KD值的亲和力结合重组人IL-13。在一些具体实施方案中，所述KD值通过基于表面等离子体共振原理的仪器(如BIAcore)测定。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体以低于100pM的IC50值抑制人IL-13的活性。在一些具体实施方案中，所述IC50值通过在HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞中测量抗体抑制80pM人IL-13诱导表达的SEAP来确定。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为全人源抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区和/或包含选自κ亚型或者λ亚型的轻链恒定区。
第五方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面至第四方面所述的抗体或其抗原结合部分。
第六方面，本申请提供了药物组合物，其包含第一方面至第四方面所述的抗体和药学可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
在一些实施方案中，所述药物组合物用于治疗IL-13介导的疾病。
第七方面，本申请提供了第一方面至第四方面所述的抗体在制备用于预防或治疗IL-13介导的疾病的药物中的用途。
第八方面，本申请提供了预防或治疗IL-13介导的疾病的方法，包括向有需要的个体给予第一方面至第四方面所述的抗体或第六方面的药物组合物。
在第七方面和第八方面的一些实施方案中，IL-13介导的疾病为自身免疫性疾病。在一些具体实施方案中，自身免疫性疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病、特应性皮炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、特应性皮炎、移植排异反应、系统性红斑狼疮、炎性肠病、狼疮肾炎或多发性硬化。
附图说明
图1显示了通过ELISA测试分析本申请的抗IL-13单抗与不同种属IL-13的结合能力。
图2显示了本申请的示例性抗IL-13单抗与tralokinumab-mIgG2a竞争结合hIL-13的测试结果。
图3显示了本申请的示例性抗IL-13单抗对IL-13诱导的HEK-Blue IL-4/IL-13细胞表达SEAP的抑制曲线。
图4显示了本申请的示例性人源化抗IL-13单抗对IL-13诱导的HEK-Blue IL-4/IL-13表达SEAP的抑制曲线。
图5显示了本申请的示例性抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的人PBMC细胞的CD23表达的结果。
图6显示了本申请的示例性人源化抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的TF-1细胞的增殖的结果。
图7显示了本申请的示例性抗IL-13单抗的热稳定性分析结果。
序列说明
SEQ ID NO：1显示人(homo sapiens)IL-13胞外区(hIL-13)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：2显示小鼠(mus musculus)IL-13胞外区(mIL-13)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：3显示猕猴(Macaca mulatta)猕猴IL-13胞外区(mmIL-13)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：4显示人IL-13Ra1胞外区(hIL-13Ra1)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：5显示His标签(His)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：6显示人抗体IgG1的Fc段(Fc)的氨基酸序列。
SEQ ID NO：7显示鼠抗体IgG2a的Fc段(mFc)的氨基酸序列。
SEQ ID NO:8显示人IgG1亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:9显示人IgG2亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:10显示人IgG4亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO：11显示鼠IgG1亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:12显示鼠IgG2a亚型重链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:13显示人κ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:14显示人λ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO:15显示鼠κ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO：16显示鼠λ亚型轻链恒定区的氨基酸序列。
SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18分别显示tralokinumab的VH和VK的氨基酸序列。
SEQ ID NO：19显示鼠单链抗体S8H11的全长氨基酸序列，SEQ ID NO：20和21分别显示其VH和VK序列的氨基酸序列。
SEQ ID NO：22显示鼠单链抗体S9B7的全长氨基酸序列，SEQ ID NO：23和24分别显示其VH和VK序列的氨基酸序列。
SEQ ID NO：25显示鼠单链抗体S11C8的全长氨基酸序列，SEQ ID NO：26和27分别显示其VH和VK序列的氨基酸序列。
SEQ ID NO：28显示鼠单链抗体S11E4的全长氨基酸序列，SEQ ID NO：29和30分别显示其VH和VK序列的氨基酸序列。
SEQ ID NO:31显示人源化重链可变区S9B7VH-h1的氨基酸序列。
SEQ ID NO:32显示人源化重链可变区S9B7VH-h2的氨基酸序列。
SEQ ID NO:33显示人源化轻链可变区S9B7VK-h1的氨基酸序列。
SEQ ID NO:34显示人源化轻链可变区S9B7VK-h2的氨基酸序列。
发明详细描述
本申请的发明人通过抗体工程技术得到了新的抗人IL-13抗体。在本申请的多个方面，提供了新的抗人IL-13抗体或其抗原结合片段，编码该抗体或其抗原结合片段的多核苷酸、包含所述多核苷酸的载体、包含所述多核苷酸或载体的宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及所述抗体或其抗原结合片段的医学和生物学应用。根据本申请提供的抗体的可变区的序列，可构建全长的抗体分子作为药物用于治疗临床上由IL-13介导的疾病。
除非另外指明，本发明的实施采用本领域常规的分子生物学、微生物学、细胞生物学、生物化学以及免疫学技术。
除非另外指明，本申请中所用的术语具有本领域技术人员通常所理解的含义。
定义
如本文所用术语“抗体”，是指能够经由至少一个位于免疫球蛋白分子的可变区中的抗原识别位点特异性结合到标靶的免疫球蛋白分子。标靶包括但不限于碳水化合物、多聚核苷酸、脂质、多肽等。本文所使用的“抗体”不仅包括完整的(即全长的)抗体，而且还包括其抗原结合片段(例如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)、其变异体、包含抗体部分的融合蛋白、人源化抗体、嵌合抗体、双抗体、线性抗体、单链抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)及任何其他包含所需特异性的抗原识别位点的免疫球蛋白分子的修改配置，包括抗体的糖基化变体、抗体的氨基酸序列变体及共价修饰的抗体。
通常，完整或全长的抗体包含两个重链和两个轻链。每个重链含有重链变异区(VH)和第一、第二及第三恒定区(CH1、CH2及CH3)。每个轻链含有轻链变异区(VL)和恒定区(CL)。全长的抗体可以是任何种类的抗体，例如IgD、IgE、IgG、IgA或IgM(或上述的子类)，但抗体不需要属于任何特定的类别。根据重链的恒定域的抗体氨基酸序列，可以将免疫球蛋白指定为不同的类别。通常，免疫球蛋白有五种主要的类别：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，而且这些类别中有几个可以再被进一步区分成子类(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。对应于不同免疫球蛋白类别的重链恒定域分别称为α、δ、ε、γ、以及μ。不同类别的免疫球蛋白的子单元结构和三维结构是公知的。
如本文所用术语“抗原结合片段或抗原结合部分”，是指负责结合抗原的完整抗体分子的一部分或区域。抗原结合域可以包含重链变异区(VH)、轻链变异区(VL)或上述两者。VH和VL中的每个通常含有三个互补决定区CDR1、CDR2及CDR3。
本领域技术人员公知，互补决定区(CDR，通常有CDR1、CDR2及CDR3)是可变区中对抗体的亲和力和特异性影响最大的区域。VH或VL的CDR序列有两种常见的定义方式，即kabat定义和Chothia定义。(参阅例如Kabat,“Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest”，National Institutes of Health,Bethesda，Md.(1991)；A1-Lazikani etal.，J.Mol.Biol.273:927-948(1997)；以及Martin et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:9268-9272(1989))。对于给定抗体的可变区序列，可以根据Kabat定义或者Chothia定义来确定VH和VL序列中CDR区序列。在本申请的实施方案中，利用Kabat定义CDR序列。
对于给定抗体的可变区序列，可以通过多种方式分析可变区序列中CDR区序列，例如可以利用在线软件Abysis确定(http://www.abysis.org/)。
抗原结合片段的实例包括但不限于：(1)Fab片段，其可以是具有VL-CL链和VH-CH1链的单价片段；(2)F(ab')2片段，其可以是具有两个Fab'片段的二价片段，该两个Fab'片段由铰链区的二硫桥(即Fab'的二聚物)连接；(3)具有抗体的单臂的VL和VH域的Fv片段；(4)单链Fv(scFv)，其可以是由VH域和VL域经由胜肽连接符组成的单一多胜肽链；以及(5)(scFv)2，其可以包含两个由胜肽连接符连接的VH域和两个VL域，该两个VL域是经由二硫桥与该两个VH域组合。
如本文所用术语“特异性结合”，是指两个分子之间的非随机结合反应，例如抗体至抗原表位的结合。
本文所用术语“单克隆抗体”指由基本同质的抗体群体获得的抗体，即，除了可能在少量个体中存在自然发生的突变以外，组成群体的各个抗体是相同的。本文所述单克隆抗体特别包括“嵌合”抗体，其中重链和/或轻链的一部分与来源于具体物种或属于具体抗体类或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，而重链和/或轻链的余下部分与来源于另一物种或属于另一抗体类或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，并且还包括这样的抗体的片段，只要它们能表现出所期望的生物学活性(美国专利号4,816,567；和Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855(1984))。
在本文给出的核酸序列中涉及兼并碱基(除了A、T、C、G常规碱基之外)的使用，其含义与本领域技术人员通常理解的相同。例如，R代表A或G；Y代表C或T，M代表A或C；K代表G或T；S代表C或G；W代表A或T；H代表A或C或T；B代表C或G或T；V代表A或C或G；D代表A或G或T；N代表A或C或G或T。
第一方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链可变区，其中
所述HCDR1序列为NYGMS，所述HCDR2序列为TININGGDTYYPDSVKG，所述HCDR3序列为DGYDYDPAWFAY；或者
所述HCDR1序列为AFSVN，所述HCDR2序列为MMWGDGRTDYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYAMDY；或者
所述HCDR1序列为GYNVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYALAH；或者
所述HCDR1序列为GSSVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYFPYAMDY；
其中HCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20、23、26、29、31或者32所示。
第二方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中
所述LCDR1序列为RASQSISDDLH，所述LCDR2序列为YASHSIS，所述LCDR3序列为QNGHSFPFT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGSSFIH，所述LCDR2序列为LAYNLES，所述LCDR3序列为QQNNEAPRT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLES，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；或者
所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLKS，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；
其中LCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21、24、27、30、33或者34所示。
第三方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1序列为NYGMS，所述HCDR2序列为TININGGDTYYPDSVKG，所述HCDR3序列为DGYDYDPAWFAY，所述LCDR1序列为RASQSISDDLH，所述LCDR2序列为YASHSIS，所述LCDR3序列为QNGHSFPFT；或者
所述HCDR1序列为AFSVN，所述HCDR2序列为MMWGDGRTDYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGSSFIH，所述LCDR2序列为LAYNLES，所述LCDR3序列为QQNNEAPRT；或者
所述HCDR1序列为GYNVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYALAH，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLES，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；或者
所述HCDR1序列为GSSVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYFPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLKS，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；
其中HCDR和LCDR序列根据Kabat定义。
在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：24所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：26所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：27所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：29所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：30所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示。
第四方面，本申请提供了一种特异性结合人IL-13的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO：20、23、26、29、31或者32中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQ ID NO：21、24、27、30、33或者34中任何一项具有至少90％的一致性。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为中和抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体以低于10pM的KD值的亲和力结合重组人IL-13。在一些具体实施方案中，所述KD值通过基于表面等离子体共振原理的仪器(如BIAcore)测定，例如可参见本申请实施例的方案。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体以低于100pM的IC50值抑制人IL-13的活性。在一些具体实施方案中，所述IC50值通过在HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞中测量抗体抑制80pM人IL-13诱导表达的SEAP来确定，例如可参见本申请实施例的方案。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体为全人源抗体。
在第一方面至第四方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区和/或包含选自κ亚型或者λ亚型的轻链恒定区。
第五方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面至第四方面所述的抗体或其抗原结合部分。
在一些实施方案中，所述核酸分子可操作地连接到调控序列，调控序列可以被用所述载体转化过的宿主细胞识别。
第六方面，本申请提供了药物组合物，其包含第一方面至第四方面所述的抗体和药学可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
在一些实施方案中，药物组合物还可包含下述中的一种或多种：润滑剂，如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化剂；悬浮剂；防腐剂，如苯甲酸、山梨酸和丙酸钙；增甜剂和/或调味剂等。
在一些实施方案中，可将本申请中的药物组合物配制为片剂、丸剂、粉剂、锭剂、酏剂、悬液、乳剂、溶液、糖浆、栓剂或胶囊等形式。
在一些实施方案中，可以利用任何生理上可接受的给药方式递送本申请的药物组合物，这些给药方式包括但不限于：口服给药、肠胃外给药、经鼻给药、直肠给药、腹膜内给药、血管内注射、皮下给药、经皮给药、吸入给药等。
在一些实施方案中，可以通过混合具有所需纯度的试剂与视情况的药学上可接受的载体、赋形剂等，以冻干制剂或水溶液的形式配制用于治疗用途的药物组合物用于存储。
在一些实施方案中，所述药物组合物用于治疗IL-13介导的疾病。
第七方面，本申请提供了第一方面至第四方面所述的抗体在制备用于预防或治疗IL-13介导的疾病的药物中的用途。
第八方面，本申请提供了预防或治疗IL-13介导的疾病的方法，包括向有需要的个体给予第一方面至第四方面所述的抗体或第六方面的药物组合物。
在第七方面和第八方面的一些实施方案中，IL-13介导的疾病为自身免疫性疾病。在一些具体实施方案中，自身免疫性疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病、特应性皮炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、特应性皮炎、移植排异反应、系统性红斑狼疮、炎性肠病、狼疮肾炎或多发性硬化。
在其他方面，本申请还提供包含编码本申请抗体或其抗原结合部分的分离的核酸分子的载体以及包含所述核酸分子或载体的宿主细胞。
在其他方面，本申请还提供产生本申请抗体的方法。在一些实施方案中，产生抗体的方法包括培养宿主细胞以便于表达核酸。在一些实施方案中，产生抗体的方法还包括从宿主细胞培养基中回收抗体。
应当理解，以上详细描述仅为了使本领域技术人员更清楚地了解本申请的内容，而并非意图在任何方面加以限制。本领域技术人员能够对所述实施方案进行各种改动和变化。
以下实施例仅用于说明而非限制本申请范围的目的。
实施例
实施例1：重组蛋白的制备
制备抗IL-13单抗的过程中需要用到多种不同的重组蛋白，包括人IL-13胞外区(hIL-13，SEQ ID NO：1)、小鼠IL-13胞外区(mIL-13，SEQ ID NO：2)、猕猴IL-13胞外区(mmIL-13，SEQ ID NO：3)和人IL-13Ra1胞外区(hIL-13Ra1，SEQ ID NO：4)。这些蛋白有翻译后修饰(如糖基化或者二硫键等)，因而利用哺乳动物细胞表达系统更有利于保持重组蛋白的结构和功能。此外，为了有利于重组蛋白的纯化和单克隆抗体功能的鉴定，在这些重组蛋白的C端添加了His标签(His，SEQ ID NO：5)或者人抗体IgG1的Fc段(Fc，SEQ ID NO：6)或者鼠抗体IgG2a的Fc段(mFc，SEQ ID NO：7)。抗体重链恒定区可以是人IgG1亚型(SEQ ID NO:8)，人IgG2亚型(SEQ ID NO:9)、人IgG4亚型(SEQ ID NO:10)或者鼠IgG1亚型(SEQ ID NO：11)，鼠IgG2a亚型(SEQ ID NO:12)，轻链恒定区可以是人κ亚型(SEQ ID NO:13)、人λ亚型(SEQ ID NO:14)或者鼠κ亚型(SEQ ID NO:15)、鼠λ亚型(SEQ ID NO：16)。
根据Uniprot数据库的各种目的重组蛋白的氨基酸序列，设计并合成上述各种重组蛋白的基因(包含His标签或者Fc、mFc编码基因)。利用分子生物学技术将合成的各种重组蛋白基因克隆至合适的真核表达载体(如invitrogen公司的pcDNA3.1等)，然后利用脂质体(如invitrogen公司的293fectin等)或者其他阳离子转染试剂(如PEI等)将制备的重组蛋白表达质粒转染入HEK293细胞(如invitrogen公司的HEK293F)，在无血清悬浮培养条件下培养3-4天。然后通过离心等方式收获培养上清。
His标签融合表达的重组蛋白利用金属螯合亲和层析柱(如GE公司的HisTrap FF等)对培养上清中的重组蛋白进行一步纯化。Fc和mFc融合表达的重组蛋白用ProteinA/G亲和层析柱(如GE公司的Mabselect SURE等)进行一步纯化。然后利用脱盐柱(如GE公司的Hitrap desaulting等)将重组蛋白保存缓冲液置换为PBS(pH7.0)或者其他合适的缓冲液。必要时，可以对抗体样品进行过滤除菌，然后分装保存于-20℃。
实施例2：鼠抗人IL-13单抗的制备
1.小鼠免疫及免疫抗体库的制备
取6-8周龄BALB/c小鼠，免疫之前对小鼠进行尾静脉采血留本底血清。首次免疫取hIL-13-His融合蛋白以费氏完全佐剂乳化，每只小鼠腹腔注射50μg融合蛋白。间隔两周加强免疫，取hIL-13-His融合蛋白以费氏不完全佐剂乳化，每只小鼠腹腔注射50μg融合蛋白，注射前断尾采血，共进行两次加强免疫。第四次免疫改用冲击免疫，以不加佐剂的hIL-13-His重组抗原作为免疫原，每只小鼠腹腔注射50μg融合蛋白，冲击免疫后3天处死小鼠，收集脾细胞。
使用小鼠淋巴细胞分离液(达科为，CAT#DKW33-R0100)对小鼠脾脏淋巴细胞进行分离，利用细胞总RNA提取试剂盒(天根，CAT#DP430)，将分离的淋巴细胞进行总RNA的提取。以提取的总RNA为模板，利用第一链cDNA合成试剂盒(Thermo scientific，CAT#K1621)分别合成重链可变区和轻链可变区，反转录引物采取基因特异性引物，引物配对区分别位于抗体重链恒定区和抗体轻链恒定区，具体序列分别为PmCGR:TGCATTTGAACTCCTTGCC和PmCKR:CCATCAATCTTCCACTTGAC。将合成完成的cDNA立即存放于-70℃保存备用。然后以反转录得到的cDNA为模板，参考文献(Journal of Immunological Methods，201(1997)，35–55)合成引物，并利用PCR分别扩增鼠抗体VH和VK，然后利用重叠延伸PCR技术，构建单链抗体(scFv)。最后将制备的小鼠单链抗体基因克隆至载体pADSCFV-S(实验技术流程可参见中国专利申请201510097117.0号)，构建scFv库。此抗体库的库容达到3×10E8，正确率为80％。
2.小鼠免疫库的筛选和鉴定
按照与中国专利申请201510097117.0号相似的实验流程，以重组hIL-13-his为抗原，利用固相筛选策略筛选展示小鼠单链抗体库的噬菌体，通过结合、洗脱、中和、感染、扩增的方式共进行三轮固相筛选，最终获得多株序列不同、但能特异性结合hIL-13的鼠抗体。
实施列3：鼠单抗的鉴定
在鉴定出的鼠单链抗体中，选择以下4个克隆进行后续实验：S8H11(SEQ ID NO：19，VH和VK序列分别为SEQ ID NO：20和21)、S9B7(SEQ ID NO：22，VH和VK序列分别为SEQ IDNO：23和24)、S11C8(SEQ ID NO：25，VH和VK序列分别为SEQ ID NO：26和27)和S11E4(SEQ IDNO：28，VH和VK序列分别为SEQ ID NO：29和30)。利用分子生物学方法制备重组人IgG4-κ形式鼠-人嵌合抗体。同时参照美国专利申请US 7829090 B2的公开内容，合成并克隆抗hIL-13单抗tralokinumab的VH和VK基因(VH和VK的氨基酸序列分别为SEQ ID NO：17和SEQ IDNO：18)。类似地，制备两种不同版本的重组tralokinumab，一种为人IgG4版本(下文中标识为“tralokinumab”)，一种为鼠IgG2a版本(下文中标识为“tralokinumab-mIgG2a”)。
1.重组抗IL-13单抗的亲和力分析
利用Biacore X100测定IgG4嵌合抗体的亲和力。氨基偶联试剂盒，人抗体捕获试剂盒，CM5芯片和pH7.4的10×HBS-EP等相关试剂和耗材均购自GE healthcare。根据试剂盒中的说明书，使用氨基偶联的方法将抗人Fc段的抗体偶联至CM5芯片表面，稀释抗体蛋白至合适浓度，保证200RU左右的抗体被抗人Fc的抗体捕获。将hIL-13-his设置一系列的浓度梯度(15nM，5nM，1.67nM，0.56nM，0.185nM)流经固定相表面，用3M MgCl2对芯片表面进行再生，25℃下测定各单克隆抗体的亲和力。使用Biacore X100Evaluation软件(版本2.0.1)对biacore数据进行分析，拟合结果如表1所示。
表1.抗IL-13单抗结合hIL-13亲和力常数
K<sub>on</sub>(1/Ms) K<sub>off</sub>(1/s) KD(M)
tralokinumab 9.504*10<sup>6</sup> 4.764*10<sup>-4</sup> 5.013*10<sup>-11</sup>
S8H11 1.273*10<sup>7</sup> 6.509*10<sup>-4</sup> 5.113*10<sup>-11</sup>
S11C8 3.320*10<sup>6</sup> 1.063*10<sup>-4</sup> 3.202*10-<sup>11</sup>
S11E4 3.302*10<sup>6</sup> 4.322*10<sup>-5</sup> 1.309*10<sup>-11</sup>
S9B7 5.742*10<sup>6</sup> 7.137*10<sup>-5</sup> 1.243*10<sup>-11</sup>
2.重组抗IL-13单抗与不同种属IL-13的结合
将制备的人IL-13(hIL-13)、小鼠IL-13(mIL-13)和恒河猴IL-13(mmIL-13)分别包被于96孔ELISA板，1μg/ml，100μl/孔，4℃包被过夜。利用封闭液(2％脱脂奶粉-PBST)在37℃封闭1小时后，分别加入上文所述的四种重组抗IL-13单抗和对照tralokinumab，37℃结合1小时。用PBST洗涤ELISA板，加入HRP-抗人IgG(二抗)，37℃结合1小时。PBST洗涤ELISA板，加入OPD底物显色液，5-10分钟后用1M H2SO4终止显色，酶标仪492nm/630nm双波长测定光密度值。结果如图2所示，三种重组抗IL-13单抗(S9B7，S11C8和S11E4)都结合人和猴IL-13，不结合鼠IL-13，这与对照tralokinumab相似。单抗S8H11只结合人IL-13，而不结合鼠和猴IL-13。
3.抗IL-13单抗的表位分析
将抗原hIL-13-his包被于96孔板，1μg/ml，100μl/孔，4℃包被过夜。用固定浓度的tralokinumab-mIgG2a对单抗S8H11、S9B7、S11C8、S11E4和tralokinumab(人IgG4)进行梯度稀释，以100μl/孔加入96孔板中，37℃孵育1h。用HRP-抗小鼠IgG检测tralokinumab-mIgG2a和hIL3-his的结合信号。ELISA分析结果显示于图2。如图所示，在本申请的四株抗体中，只有S8H11阻断tralokinumab-mIgG2a和hIL-13-his的结合，S11C8和S11E4都不和tralokinumab-mIgG2a竞争结合人IL-13，S9B7在高浓度时能够抑制tralokinumab-mIgG2a结合hIL-13。该结果表明，S8H11与tralokinumab具有类似的hIL-13结合表位，S9B7结合人IL-13的表位与tralokinumab可能有部分重叠，而S11C8和S11E4与tralokinumab具有完全不同的hIL-13结合表位。
4.鼠单抗的生物活性鉴定
HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞(InvivoGen,hkb-il413)为InvivoGen公司基于HEK293细胞开发的一个报告基因细胞株。该细胞株中稳定转入人STAT6基因和SEAP(碱基磷酸酶)报告基因，当IL-4或者IL-13刺激该细胞时，细胞内的STAT6信号通路被激活，并诱导SEAP报告基因表达，合成并分泌SEAP到细胞上清中，选用特定的SEAP底物，结合酶标仪可以定量分析SEAP浓度。
本实施例用HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞评价不同抗IL-13单抗抑制IL-13的能力。简单而言，对96孔板的每孔接种5*104细胞，用一定浓度的IL-13(如80pM)刺激HEK-BlueTMIL-4/IL-13细胞，加入一系列梯度浓度的抗IL-13单克隆抗体(浓度范围6561pM～1pM，三倍稀释)阻断IL-13。结果显示(参见图3和表2)，上文所述的四种单抗都能有效抑制IL-13诱导的SEAP表达，其中S9B7抑制IL-13的能力最强，S9B7的IC50较tralokinumab低约10倍(表2)。
表2：抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的SEAP表达的IC50
Tralokinumab S8H11-IgG4 S9B7-IgG4 S11C8-IgG4 S11E2-IgG4
IC<sub>50</sub>(pM) 752.9 536.9 72.92 284.7 799.6
实施例4：鼠单抗的人源化及鉴定
1.鼠单抗的人源化改造
选取鼠抗体S9B7进行人源化研究以降低其免疫原性。将S9B7的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)分别与IMGT数据库中的人抗体胚系基因序列相比较，选择合适的胚系基因序列以提供抗体的框架区1至3(FR1+FR2+FR3)，选择合适的J区基因序列以提供框架区4(FR4)。这个模板可以根据多种因素选出，如抗体的相对总长度、CDR的大小、位于抗体框架区(FR)和超变区(CDR)之间连接处的氨基酸残基、序列整体的同源性等。所选的模板可以是多个序列的混合物或者可以是共有模板，目的是尽可能维持亲本互补决定区(CDR)的合适构象。对S9B7的重链进行CDR移植得到两个人源化版本S9B7VH-h1(SEQ ID NO:31)和S9B7VH-h2(SEQ ID NO:32)，对S9B7的轻链进行CDR移植得到两个人源化版本S9B7VK-h1(SEQ ID NO:33)和S9B7VK-h2(SEQ ID NO:34)。根据人源化抗体的氨基酸序列设计并合成抗体可变区基因，克隆至真核表达载体并组合表达人IgG4版本全抗体。
2.人源化抗IL-13单抗的亲和力分析
参照实施例3，利用BIAcore测定人源化IL-13单抗结合hIL-13和mmIL-13的能力，分析数据如表3和表4所示。
表3.人源化抗IL-13单抗结合hIL-13亲和力常数
Figure BDA0001446060920000191
表4.抗IL-13人源化单抗结合mmIL-13亲和力常数
Figure BDA0001446060920000192
3.基于HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞分析人源化抗IL-13单抗的生物活性
按照实施例3的方法，评价人源化抗IL-13单抗抗抑制IL-13的能力。结果(参见图4)显示：四种人源化单抗都能有效阻断IL-13诱导HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞表达SEAP，其中S9B7VH-h2+S9B7VK-h1和S9B7VH-h2+S9B7VK-h2两种人源化抗体阻断IL-13的能力较鼠亲本抗体S9B7更好，其IC50较tralokinumab低约15-18倍(表5)。
表5：人源化抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的SEAP表达的IC50
Figure BDA0001446060920000201
4.基于PBMC细胞分析人源化抗IL-13单抗的生物活性
CD23(FcεRII)是一种对IgE亲和力较低的细胞表面受体，在多种炎症细胞表面都有表达，CD23表达上调会提高支气管粘膜对抗原的摄取和提呈，导致过敏性反应。IL-13可以刺激单核细胞、巨噬细胞和B淋巴细胞表面CD23表达上调。利用Ficoll密度梯度离心法从健康人全血中分离PBMC，用一定浓度的IL-13(如800pM)刺激PBMC细胞，加入一系列浓度梯度抗IL-13单抗(最大浓度65536pM～1pM，四倍稀释)。将细胞在37℃5％CO2环境下培养48h，收集细胞，用抗CD23-PE(BD Pharmingen,555711)染色，用流式细胞术(BD AccuriTM C6)测定PBMC上CD23的表达。然后计算抗体样品对IL-13活性的抑制率，其中抑制率＝(各组MFI数据-空白组MFI)/(800pM IL-13刺激PBMC表达CD23的MFI-空白组MFI)，设定800pM IL-13刺激PBMC表达CD23的中位荧光强度(Median Fluorescence Intensity,MFI)为100％。结果(图5)显示两种人源化单抗S9B7VH-h2+S9B7VK-h1和S9B7VH-h2+S9B7VK-h2都能有效抑制抑制IL-13诱导PBMC中CD23表达上调，且其IC50较tralokinumab低约2-3倍(表6)。
表6：人源化抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的人PBMC CD23表达的IC50
Figure BDA0001446060920000202
Figure BDA0001446060920000211
5.基于TF-1细胞分析人源化抗IL-13单抗生物活性
人红细胞白血病细胞系(TF-1)由Kitamura等人在1989年建立，实验中所用TF-1来自ATCC细胞库(CRL-2003)。TF-1细胞生长完全依赖于GM-CSF或IL-3。此外，多种细胞因子(包括IL-4、IL-13等细胞因子)可以刺激TF-1细胞增殖。在96孔板细胞培养板中每孔接种1*104TF-1细胞，用一定浓度的IL-13(如：1nM)刺激TF-1细胞，加入一系列浓度梯度抗IL-13单克隆抗体(浓度范围1μM～0.001nM，四倍稀释)，用
Figure BDA0001446060920000214
发光法细胞活力检测试剂盒(Promega,G7571)测定活细胞数量。结果(图6)显示两种人源化抗体S9B7VH-h2+S9B7VK-h1和S9B7VH-h2+S9B7VK-h2都能有效抑制IL-13诱导的TF-1增殖，且IC50较tralokinumab低约6倍(表7)。
表7：人源化抗IL-13单抗抑制IL-13诱导的TF-1增殖的IC50
Figure BDA0001446060920000212
6.人源化抗IL-13单抗热稳定性分析
荧光探针可与蛋白的疏水区结合发射荧光信号，程序升温过程中，蛋白从折叠状态转变为展开状态，荧光信号随着疏水区的暴露改变，可以获得温度荧光曲线，可以根据曲线求得Tm值，判断蛋白热稳定性。在测试不同抗IL-13单抗热稳定性时，将某一种抗IL-13单抗(如：S9B7VH-h1-S9B7VK-h1)稀释至某一浓度(如1mg/ml)，加入一定比例的
Figure BDA0001446060920000213
Orange(Sigma，Cat#S5692-50UL)。在荧光定量PCR(ABI，7500Fast)仪器上运行融解曲线，升温程序：25℃加热到95℃，升温速度1℃/min，每个温度平衡2min，最后利用ProteinThermal ShiftTM Software 1.2进行数据分析和作图。图7展现了不同抗IL-13单抗的热稳定性，结果显示四种人源化抗IL-13单抗的热稳定性都较对照抗体tralokinumab好。
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<211> 112
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 1
Gly Pro Val Pro Pro Ser Thr Ala Leu Arg Glu Leu Ile Glu Glu Leu
1 5 10 15
Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Lys Ala Pro Leu Cys Asn Gly Ser Met
20 25 30
Val Trp Ser Ile Asn Leu Thr Ala Gly Met Tyr Cys Ala Ala Leu Glu
35 40 45
Ser Leu Ile Asn Val Ser Gly Cys Ser Ala Ile Glu Lys Thr Gln Arg
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Ser Leu His Val Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ala Gln Phe Val Lys
85 90 95
Asp Leu Leu Leu His Leu Lys Lys Leu Phe Arg Glu Gly Arg Phe Asn
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<210> 2
<211> 110
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 2
Pro Val Pro Arg Ser Val Ser Leu Pro Leu Thr Leu Lys Glu Leu Ile
1 5 10 15
Glu Glu Leu Ser Asn Ile Thr Gln Asp Gln Thr Pro Leu Cys Asn Gly
20 25 30
Ser Met Val Trp Ser Val Asp Leu Ala Ala Gly Gly Phe Cys Val Ala
35 40 45
Leu Asp Ser Leu Thr Asn Ile Ser Asn Cys Asn Ala Ile Tyr Arg Thr
50 55 60
Gln Arg Ile Leu His Gly Leu Cys Asn Arg Lys Ala Pro Thr Thr Val
65 70 75 80
Ser Ser Leu Pro Asp Thr Lys Ile Glu Val Ala His Phe Ile Thr Lys
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Leu Leu Ser Tyr Thr Lys Gln Leu Phe Arg His Gly Pro Phe
100 105 110
<210> 3
<211> 114
<212> PRT
<213> 猕猴(Macaca mulatta)
<400> 3
Ser Pro Ser Pro Val Pro Arg Ser Thr Ala Leu Lys Glu Leu Ile Glu
1 5 10 15
Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Lys Ala Pro Leu Cys Asn Gly
20 25 30
Ser Met Val Trp Ser Ile Asn Leu Thr Ala Gly Val Tyr Cys Ala Ala
35 40 45
Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Gly Cys Ser Ala Ile Glu Lys Thr
50 55 60
Gln Arg Met Leu Asn Gly Phe Cys Pro His Lys Val Ser Ala Gly Gln
65 70 75 80
Phe Ser Ser Leu Arg Val Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ala Gln Phe
85 90 95
Val Lys Asp Leu Leu Val His Leu Lys Lys Leu Phe Arg Glu Gly Arg
100 105 110
Phe Asn
<210> 4
<211> 322
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 4
Gly Gly Gly Gly Ala Ala Pro Thr Glu Thr Gln Pro Pro Val Thr Asn
1 5 10 15
Leu Ser Val Ser Val Glu Asn Leu Cys Thr Val Ile Trp Thr Trp Asn
20 25 30
Pro Pro Glu Gly Ala Ser Ser Asn Cys Ser Leu Trp Tyr Phe Ser His
35 40 45
Phe Gly Asp Lys Gln Asp Lys Lys Ile Ala Pro Glu Thr Arg Arg Ser
50 55 60
Ile Glu Val Pro Leu Asn Glu Arg Ile Cys Leu Gln Val Gly Ser Gln
65 70 75 80
Cys Ser Thr Asn Glu Ser Glu Lys Pro Ser Ile Leu Val Glu Lys Cys
85 90 95
Ile Ser Pro Pro Glu Gly Asp Pro Glu Ser Ala Val Thr Glu Leu Gln
100 105 110
Cys Ile Trp His Asn Leu Ser Tyr Met Lys Cys Ser Trp Leu Pro Gly
115 120 125
Arg Asn Thr Ser Pro Asp Thr Asn Tyr Thr Leu Tyr Tyr Trp His Arg
130 135 140
Ser Leu Glu Lys Ile His Gln Cys Glu Asn Ile Phe Arg Glu Gly Gln
145 150 155 160
Tyr Phe Gly Cys Ser Phe Asp Leu Thr Lys Val Lys Asp Ser Ser Phe
165 170 175
Glu Gln His Ser Val Gln Ile Met Val Lys Asp Asn Ala Gly Lys Ile
180 185 190
Lys Pro Ser Phe Asn Ile Val Pro Leu Thr Ser Arg Val Lys Pro Asp
195 200 205
Pro Pro His Ile Lys Asn Leu Ser Phe His Asn Asp Asp Leu Tyr Val
210 215 220
Gln Trp Glu Asn Pro Gln Asn Phe Ile Ser Arg Cys Leu Phe Tyr Glu
225 230 235 240
Val Glu Val Asn Asn Ser Gln Thr Glu Thr His Asn Val Phe Tyr Val
245 250 255
Gln Glu Ala Lys Cys Glu Asn Pro Glu Phe Glu Arg Asn Val Glu Asn
260 265 270
Thr Ser Cys Phe Met Val Pro Gly Val Leu Pro Asp Thr Leu Asn Thr
275 280 285
Val Arg Ile Arg Val Lys Thr Asn Lys Leu Cys Tyr Glu Asp Asp Lys
290 295 300
Leu Trp Ser Asn Trp Ser Gln Glu Met Ser Ile Gly Lys Lys Arg Asn
305 310 315 320
Ser Thr
<210> 5
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
His His His His His His
1 5
<210> 6
<211> 232
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 6
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20 25 30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35 40 45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50 55 60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65 70 75 80
Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85 90 95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100 105 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115 120 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130 135 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145 150 155 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165 170 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180 185 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195 200 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210 215 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 7
<211> 232
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 7
Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile
20 25 30
Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val
35 40 45
Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val
50 55 60
Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp
65 70 75 80
Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln
85 90 95
Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp
100 105 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val
115 120 125
Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr
130 135 140
Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu
145 150 155 160
Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr
165 170 175
Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr
180 185 190
Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr
195 200 205
Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys
210 215 220
Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
225 230
<210> 8
<211> 330
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 8
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 9
<211> 326
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 9
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 10
<211> 327
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 10
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 11
<211> 324
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 11
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Glu Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Pro Arg Pro Ser Glu Thr Val
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro
100 105 110
Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu
115 120 125
Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser
130 135 140
Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu
145 150 155 160
Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
165 170 175
Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn
180 185 190
Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro
195 200 205
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln
210 215 220
Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val
225 230 235 240
Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val
245 250 255
Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln
260 265 270
Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn
275 280 285
Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
290 295 300
Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His
305 310 315 320
Ser Pro Gly Lys
<210> 12
<211> 330
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 12
Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
145 150 155 160
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
165 170 175
Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
180 185 190
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
195 200 205
Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
210 215 220
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
245 250 255
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
260 265 270
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
275 280 285
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
290 295 300
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
305 310 315 320
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
325 330
<210> 13
<211> 107
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 13
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 14
<211> 106
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 14
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 15
<211> 107
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 15
Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg
35 40 45
Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu
65 70 75 80
Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
100 105
<210> 16
<211> 106
<212> PRT
<213> 小家鼠(Mus musculus)
<400> 16
Gly Gln Pro Lys Ser Ser Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Glu Thr Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Thr Ile Thr Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Val Val Thr Val Asp Trp Lys Val Asp Gly Thr Pro
35 40 45
Val Thr Gln Gly Met Glu Thr Thr Gln Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Met Ala Ser Ser Tyr Leu Thr Leu Thr Ala Arg Ala Trp Glu
65 70 75 80
Arg His Ser Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly His Thr Val
85 90 95
Glu Lys Ser Leu Ser Arg Ala Asp Cys Ser
100 105
<210> 17
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 17
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Asn Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Gly Gln Glu Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Ser Ser Ser Ser Trp Ala Arg Trp Phe Phe Asp Leu Trp
100 105 110
Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 18
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 18
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Ile Ile Gly Ser Lys Leu Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Asp Gly Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Thr Gly Ser Asp Pro
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 19
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 19
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Val Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ala Thr Ile Asn Ile Asn Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Gly Tyr Asp Tyr Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Ile Gln Ser Pro
130 135 140
Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg
145 150 155 160
Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Asp Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser
165 170 175
His Glu Ser Pro Arg Pro Leu Ile Lys Tyr Ala Ser His Ser Ile Ser
180 185 190
Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr
195 200 205
Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Asn Gly His Ser Phe Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu
225 230 235 240
Glu Ile Lys
<210> 20
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 20
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Val Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ala Thr Ile Asn Ile Asn Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Gly Tyr Asp Tyr Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 21
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 21
Asp Ile Gln Met Ile Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Asp
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Pro Leu Ile
35 40 45
Lys Tyr Ala Ser His Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly His Ser Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 22
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 22
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Phe
20 25 30
Ser Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Met Trp Gly Asp Gly Arg Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Gly Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu
130 135 140
Ala Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu
145 150 155 160
Ser Val Asp Ser Tyr Gly Ser Ser Phe Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Tyr Asn Leu Glu
180 185 190
Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Asn Asn Glu Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Leu Glu Ile Lys
<210> 23
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Phe
20 25 30
Ser Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Met Trp Gly Asp Gly Arg Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Gly Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 24
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 24
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr
20 25 30
Gly Ser Ser Phe Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Tyr Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn
85 90 95
Glu Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 25
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Tyr
20 25 30
Asn Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Asp Gly Lys Thr Val Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Arg Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Leu Ala His Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu
130 135 140
Ala Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu
145 150 155 160
Ser Val Asp Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Val His Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu
180 185 190
Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Asn Asn Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Leu Glu Ile Lys
<210> 26
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Tyr
20 25 30
Asn Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Asp Gly Lys Thr Val Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Arg Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Leu Ala His Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 27
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr
20 25 30
Gly Asn Ser Phe Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn
85 90 95
Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 28
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Ser
20 25 30
Ser Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Asp Gly Lys Thr Val Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp His Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Lys Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Gly Tyr Phe Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu
130 135 140
Ala Val Ser Leu Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu
145 150 155 160
Ser Val Asp Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Val His Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Lys
180 185 190
Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Asn Asn Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Leu Glu Ile Lys
<210> 29
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Ser
20 25 30
Ser Val Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Asp Gly Lys Thr Val Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp His Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Lys Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Gly Tyr Phe Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 30
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr
20 25 30
Gly Asn Ser Phe Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Lys Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn
85 90 95
Glu Asp Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 31
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Phe
20 25 30
Ser Val Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Met Met Trp Gly Asp Gly Arg Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Gly Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 32
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ala Phe
20 25 30
Ser Val Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Met Met Trp Gly Asp Gly Arg Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Val Leu
65 70 75 80
Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Gly Asp Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 33
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr
20 25 30
Gly Ser Ser Phe Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Tyr Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn
85 90 95
Glu Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 34
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr
20 25 30
Gly Ser Ser Phe Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Tyr Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Asp
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn
85 90 95
Glu Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110

Claims (6)

1.一种特异性结合人IL-13的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中
所述HCDR1序列为NYGMS，所述HCDR2序列为TININGGDTYYPDSVKG，所述HCDR3序列为DGYDYDPAWFAY，所述LCDR1序列为RASQSISDDLH，所述LCDR2序列为YASHSIS，所述LCDR3序列为QNGHSFPFT；或者
所述HCDR1序列为AFSVN，所述HCDR2序列为MMWGDGRTDYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGSSFIH，所述LCDR2序列为LAYNLES，所述LCDR3序列为QQNNEAPRT；或者
所述HCDR1序列为GYNVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYYPYALAH，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLES，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；或者
所述HCDR1序列为GSSVN，所述HCDR2序列为MIWGDGKTVYNSALKS，所述HCDR3序列为DGYFPYAMDY，所述LCDR1序列为RASESVDSYGNSFVH，所述LCDR2序列为LASNLKS，所述LCDR3序列为QQNNEDPRT；
其中HCDR和LCDR序列根据Kabat定义。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：24所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：26所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：27所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：29所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：30所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：33所示；或者
所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：32所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示。
3.如权利要求1或2所述的抗体，其中
所述抗体以低于10pM的KD值的亲和力结合重组人IL-13，所述KD值通过基于表面等离子体共振原理的仪器测定；和/或
所述抗体以低于100pM的IC50值抑制人IL-13的活性，所述IC50值通过在HEK-BlueTM IL-4/IL-13细胞中测量抗体抑制80pM人IL-13诱导表达的SEAP来确定。
4.核酸分子，其编码权利要求1-3中任一项所述的抗体。
5.药物组合物，其包含权利要求1-3中任一项所述的抗体和药学可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
6.权利要求1-3中任一项所述的抗体在制备用于预防或治疗选自以下的疾病的药物中的用途：哮喘、慢性阻塞性肺病、特应性皮炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、移植排异反应、系统性红斑狼疮、炎性肠病、狼疮肾炎或多发性硬化。
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