CN109644868A

CN109644868A - 一种苦草的选育方法

Info

Publication number: CN109644868A
Application number: CN201811593903.XA
Authority: CN
Inventors: 何文辉
Original assignee: Shanghai Taihe Water Environment Technology Development Ltd By Share Ltd
Current assignee: Shanghai Taihe Water Environment Technology Development Ltd By Share Ltd
Priority date: 2018-12-25
Filing date: 2018-12-25
Publication date: 2019-04-19

Abstract

本发明提供一种苦草的选育方法，采用本方法可以筛选出四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐污染、净化效率高、耐逆温和耐弱光的苦草，应用于重营养盐污染水体后，具有净化效率高，不易长出水面，便于维护等特点。本方法培育的苦草具有用于污染水体水生态修复应用价值，可以在实际中推广使用。

Description

一种苦草的选育方法

技术领域

本发明涉及一种苦草选育方法。

背景技术

苦草，拉丁学名：Vallisneria natans(Lour.)Hara，分类学上属水鳖科，是典型的沉水植物。因其具有很高的水质净化能力，因此在河道、湖泊等地表水体生态修复领域中具有很高的应用价值。但是，在实际应用过程中自然苦草种，存在着一系列的个性问题，如：季节性衰败、易长出水面、大肆蔓延、抗逆温能力差、对高营养盐水体的适应能力弱等不仅导致以其构建的水生态系统不稳定，而且使其应用范围受到很大的限制。

苦草既可以进行无性繁殖，也可以进行有性繁殖，苦草的球茎，且萌芽生长略早于种籽，6～7月份是分蘖生长的旺盛期，10月中旬以后，分蘖逐渐停止，生长进入衰老期，茎叶枯萎，使其不能发挥在冬季的净化效果，影响治水进程，同时，其在冬季衰败的叶片腐烂，引发营养盐再次进入水体，导致水体二次污染。苦草为雌雄异株，是典型的水媒花，开花期为8月上中旬至10月初，10月份果实进入成熟期，花柄逐渐衰花，腐败，果实漂浮于水面，影响修复水体的感官效果，水草的大肆蔓延，难以控制，则需要大量的维护工作。

综上所述，为扩大苦草的适用范围、净化效率、耐污能力，以及方便后期管理，急需改良、选育一种具有四季常绿、不开花、不结籽、矮生、可以耐受高浓度营养盐、净化效率高、抗逆境能力强等稳定性状的苦草优良品种。

发明内容：

鉴于以上所述苦草存在的广泛应用技术性不足问题，本发明的目的在于提供一种苦草的选育方法，用于解决现有苦草应用中由于苦草的季节性荣枯、过度生长、抗逆境能力弱等问题而导致构建的生态系统不稳定、净化效率波动大、适应范围小，以及景观效果不佳等问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种苦草的选育方法，所述方法至少包括以下步骤：

(1)3-4月份筛选10-20万枚颗粒饱满上一年收集的苦草种子，将种子用水打湿，紫外灯下照射萌发。

进一步地，所述种子距离光源30～60cm，照射时间为1～2小时，每天照射一次，连续照射2～4天。

进一步地，所述种子平铺于载体上，种子厚度为1～2cm。

进一步地，所述温度和湿度为外界自然环境温度，一般可以为3-25℃、湿度为60％-80％。

(2)将步骤(1)处理后的种子均匀撒在培养基上，加培养液，待萌发后增加培养液，继续培养40-50天，筛选高15-20cm植株。

进一步地，所述培养基采用的器皿为秧盘。秧盘为透光玻璃容器，宽0.5m，长0.9m，高65m。

进一步地，秧盘底部铺有10～15cm厚土壤，加培养液深10～15cm，待种子萌发后，加培养液至深为60～70cm。

进一步地，所述温度和湿度为外界自然环境温度。

(3)将步骤(2)筛选到的苦草植株移植，种植于培养器中，加培养液，用紫外灯进行照射40-50天，增加培养液，继续培养，于当年9～第二年3月筛选四季常绿、不开花不结籽的苦草植株。

进一步地，所述温度和湿度为外界自然环境条件。

由于选择的种子的数量比较多，所以紫外照射时一定可以选择出具有上述性状的植株，因此具有可重复性。

(4)将步骤(3)获得的苦草植株种植于培养器中，加培养液，采用紫外灯照射40-50天，增加培养液，于当年9-11月，筛选植株高度为25～32cm的苦草植株，并伴有四季常绿、不开花、不结籽特性；

进一步地，所述步骤(4)的次年继续培养一年，并于当年9-11月，筛选高度为25～32cm的苦草植株，并伴有四季常绿、不开花、不结籽特性植株。进一步地，培养时的条件中培养液的深度为60-80cm，环境温度为自然条件。本次培养目的是为了筛选出性状稳定的植株。

进一步地，所述步骤(1)～(4)采用培养液都是低氮磷的培养液，其中总氮浓度为1.5～2.0mg/L，总磷浓度为0.3～0.4mg/L。

(5)将步骤(4)获得的苦草植株种植于培养器中，加培养液，对苦草苗采用紫外灯照射20-30天，增加培养液，继续培养，每个所述培养器中培养液中总氮、总磷呈浓度梯度，筛选耐高营养盐、净化效率高，并伴有四季常绿、不开花、不结籽、25～32cm植株，所述高营养盐是指总磷的含量不低于1mg/L，总氮的含量不低于：8mg/L。进一步地，所述步骤(5)中磷的浓度梯度间隔为0.05-0.1mgL^-1，氮的浓度梯度间隔为0.5-1mgL^-1。进一步地，所述总磷的浓度为0.4-1.0mgL^-1，总氮的浓度为1-8.5mgL^-1。

进一步地，所述步骤(5)的次年，继续培养一年，设置氮磷浓度梯度，于当年筛选耐高营养盐、净化效率高、并伴有四季常绿、不开花、不结籽、25～32cm的植株。进一步地，次年培养时氮的浓度梯度间隔为0.2～1mgL^-1，磷的浓度梯度间隔为0.03～0.1mgL^-1。进一步地，所述总磷的浓度为1.05～1.4mgL^-1，总氮的浓度为8.3～11mgL^-1。

所述耐高营养盐、净化效率高是指在总磷的含量不低于1mg/L，总氮的含量不低于：8mg/L的情况下都可以茁壮成长的植株。

进一步地，所述磷来源于硝酸铵，所述磷来源于磷酸二氢钠。

(6)将步骤(5)筛选获得的苦草植株种植于若干培养器中，加培养液，对其采用紫外灯照射20-30天，增加培养液，设置光照强度梯度，继续培养，筛选耐弱光，即耐受最弱光强为200lux，伴有四季常绿、不开花、不结籽、耐高营养盐、净化效率高、25～32cm的苦草植株。

耐弱光即耐受最弱光强为200lux的情况下都能茁壮成长的植株。

进一步地，所述光照梯度为100-650lux，光照强度梯度间隔为40～50lux。

进一步地，所述第步骤(6)的次年，设置光照强度梯度，继续培养，筛选出具有稳定性状的植株。更进一步地，所述光照强度为210～300lux。更进一步地，所述光照强度梯度的间隔为10～20lux。

(7)将步骤(6)筛选获得的苦草植株种植于培养器中，加培养液，对其采用紫外灯照射20～30天，增加培养液，调整苦草培养液温度进行培养，使其夜间温度为0～5℃，昼间温度在5～35℃，设置昼间温度梯度，筛选耐逆温能力强，并伴有四季常绿、不开花、不结籽、耐高营养盐、净化效率高、耐弱光特性的苦草植株。

耐逆温能力强是指在夜间温度为0～5℃，昼间温度在30℃及其以上的情况下都可以茁壮成长的植株。

进一步地，所述昼间温度梯度间隔为5～10℃。

进一步地，所述步骤(6)的次年设置昼间温度梯度，筛选稳定性状的植株。

进一步地，所述昼间温度为进一步地，所述步骤(3)～(7)中紫外照射的条件为：采用30-50瓦紫外灯，植株距离光源30～60cm，每天照射4～6小时。

进一步地，所述步骤(3)～(7)所述加培养液是指培养液深度为30～40cm，所述增加培养液是指培养液深度为60～80cm。

进一步地，所述上述步骤(1)～(7)培养过程中保持培养液恒定。这就要求在培养的过程中不断的补充培养液，保持恒液位。

进一步地，所述步骤(6)～(7)中采用的培养液总磷的含量不低于1mg/L，总氮的含量不低于：8mg/L。

进一步地，所述步骤(1)～(5)都是采用自然光照条件培养。此处是指去除紫外光照的时段的时间。

进一步地，所述自然环境条件是指北纬25～35度的地理位置处的环境条件。本申请中的实验地点为上海。

上述浓度梯度是指在在同培养同一培养时期内设置多个植株，多植株之间的营养盐呈浓度梯度，形成平行试验。光照强度梯度以及温度梯度也是多个植株之间呈光照强度梯度、温度梯度。

进一步地，所述方法还包括：

(8)将步骤(7)筛选到的苦草植株种植于水塘中，调整水体中营养盐浓度至水草最高耐受浓度，即氮的浓度不低于8mg/L、磷的浓度不低于1mg/L，于当年9～至第二年3月筛选不开花、不结籽、四季常绿、25～32cm、耐高营养盐、净化效率高的苦草植株。

进一步地，所述步骤(8)的次年重复步骤(8)，筛选稳定性状的植株。

(9)将步骤(8)筛选获得的苦草植株种植于若干培养器中，调整温度和光照，即夜间温度为0～5℃，昼间温度在5～35℃，光照强度为200lux，筛选目的植株。

进一步地，所述种子来自自然河道中苦草繁殖所得的种子。本申请中的实验采用太湖附近河流的内的苦草种子。

如上所述，经过10年实验室筛选和3年全国不同区域水体中试试验表明，本发明的苦草选育方法，具有以下有益效果：

本申请通过合理的控制诱变参数，先选择具有不稳定形状(例如四季常绿、不开花、不结籽)的植株，然后选择其他性状，最终获得的苦草，具有四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐污染、净化效率高、耐逆温和耐弱光等特性。应用于重营养盐污染水体后，具有净化效率高，不易长出水面，便于维护等特点，具有用于污染水体水生态修复应用价值，可以在实际中推广使用。

具体实施方式：

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。

说明：

(1)种子来源：实验过程中选用的苦草种子来源于上一年在自然河道生长的苦草开花结籽所得。

(2)实验场地：实验紫外光处理种子、植株，以及后期成苗种植，性状筛选均在恒温培养箱中进行，恒温培养箱功率为2400瓦，容积1000升，培养箱内部尺寸(长*宽*高)为1130*610*1450mm³，外部尺寸(长*宽*高)为1240*735*1870mm³。实验室为一般的实验楼，面积100m²。

(3)实验过程中实验室照明采用20w白炽灯20个，采用的紫外光照射条件均为30瓦杀菌紫外灯，苗或者种子距离光源均30～60cm。

(4)实验过程中成苗种植间距均为1cm，培养箱中的土为泥沙混合土，厚约10cm。

(5)实验过程中使用的苦草植株来源于苦草种子萌发，以及苦草繁殖(有性繁殖和无性繁殖)过程中产生的。

(6)管理说明：实验期间，有专业的技术人员控制实验条件以便于筛选目的植株。苦草在实际应用过程中，待系统稳定后无需人工管理。

(7)实施例6与中试同时进行。

(8)下述实施例在上海完成，上海一年四季自然环境条件：温度范围为0～38度，湿度为60％～80％。

实施例1四季常绿、不开花、不结籽苦草优良种筛选

1997年3月份，筛选上一年收集的太湖流域自然河道中颗粒饱满的苦草种子约40万颗，将种子用水打湿，平铺于培养皿中放在杀菌紫外灯下照射，30瓦杀菌紫外灯，种子距离光源均45cm，每天照射1～2小时，连续照射3天。种子厚度为1～2cm。

将照射处理后的种子平铺于培养箱中等待种子萌发，培养箱概况：共80个，培养箱宽0.5m，长0.9m，高65m，为透光玻璃容器，底部覆泥沙混合土10cm。加培养液至水深35cm。培养45天，筛选株高为20cm，健康的，长势一致的成株培养。

将前面处理得到的苦草植株种植于培养箱中，加培养液至35cm，紫外光照射，30瓦杀菌紫外灯，种子距离光源均45cm，每天照射5小时，连续照射45天。之后继续加培养液至深60cm，继续培养。

培养液：80％的自来水加20％的海水，盐度约为5‰，水体中氨氮浓度为1.5～2.0mg/L，总磷浓度为0.3～0.4mg/L。

上述培养过程中温度、湿度、光照强度均为当时的实验室外环境条件。

继续对种植的苦草苗进行培养，于当年9～第二年3月份筛选四季常绿、不开花、不结籽的苦草植株。

实施例2四季常绿、不开花、不结籽、矮生型苦草优良种筛选

1999年—2000年，不开花、不结籽、四季常绿、矮型苦草优良种筛选

将1998年获得的性状稳定的不开花、不结籽、四季常绿的苦草植株种植于培养箱中，加水至培养液深35cm，进行紫外光照射，诱发其变异。照射后加培养液至深为70cm，继续培养，种植箱为透光玻璃容器，宽1m，长1m，高1m，共40个，底部铺有10cm厚种植土。

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选植株高度在25～32cm的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽特性。

培养箱概况：共80个，培养箱宽0.5m，长0.9m，高65m，为透光玻璃容器，底部覆泥沙混合土10cm。

培养液情况：80％的自来水加20％的海水，盐度约为5‰，水体中氨氮浓度为1.5～2.0mg/L，总磷浓度为0.3～0.4mg/L。

紫外光照射条件：30瓦紫外灯、距离光源45cm，每天照射5小时，照射45天。

温度、湿度、光照强度：水草种植于放置于恒温箱中的培养箱中，温度、湿度和光照强度均为当时的实验室外环境条件。

于1999年9～11月份筛选矮生型，并伴有四季常绿、不开花、不结籽特性的苦草植株。

于2000年对1999年获得的植株在相同的条件下进行种植培养，获得矮生性状稳定，并伴有不开花、不结籽、四季常绿特性的苦草植株。

实施例3四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐、

净化效率高性状稳定的苦草优良种筛选

2001年，不开花、不结籽、四季常绿、矮生型、耐高浓度营养盐环境苦草优良种筛选。

将2000年底获得的不开花、不结籽、四季常绿、矮生型苦草植株在2001年3月份种植于培养箱中，加水至35cm，用紫外光进行照射，诱发其变异。照射后加水至60cm后继续培养，

紫外光照射条件：30瓦紫外灯、距离光源30～60cm，每天照射5小时，照射45天。

培养土和培养液情况：80％的自来水加20％的海水，盐度约为5‰，培养土和水体中氨氮、总磷和总氮浓度情况如表1所示。每周定期监测水体中营养盐水质指标，营养盐不足的及时添加，保证水体的营养盐在设计的浓度范围内浮动不超过±10％；每隔10天统计苦草的生长发育状况。

表1试验水体的营养盐浓度(单位：mgL^-1)

T0组	TP	TN
			T01	0.4	1
T02	0.5	2
			T03	0.6	3
T04	0.65	4
			T05	0.7	5
T06	0.75	6
			T07	0.80	6.5
T08	0.85	7
			T09	0.90	7.5
T010	0.95	8
			T011	1.0	8.5

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐高营养盐(浓度为TP：1mg/L(b1)、TN：8mg/L(c1))、溶液中营养盐削减多的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生特性。

2002年，不开花、不结籽、四季常绿型、矮生、耐高营养盐性状稳定的苦草优良种筛选。

将2001年获得的苦草植株种植于种植箱中继续种植，水深60cm。

培养土和培养液情况：80％的自来水加20％的海水，培养土和水体中氨氮、总磷和总氮浓度情况如表2所示。每周定期监测水体中营养盐水质指标，营养盐不足的及时添加，保证水体的营养盐在设计的浓度范围内浮动不超过±10％；每隔10天统计苦草的生长发育状况。

表2第二年试验水体的营养盐浓度(单位：mgL^-1)

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐高营养盐高、溶液中营养盐削减多的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生特性。

经过筛选，实验获得的苦草可耐受的最高营养盐氨氮和总磷浓度分别约为8mg/L和1mg/L。

实施例4四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光性状稳定的苦草优良种筛选

2003年，不开花、不结籽、四季常绿、矮生型、耐高营养盐、耐弱光环境苦草优良种筛选

将2002年底获得的不开花、不结籽、四季常绿、矮生型、耐高营养盐的苦草植株种植于培养箱中，加水至35cm，用紫外光进行照射，诱发其变异。照射后加水至60cm继续培养。

紫外光照射条件：30瓦紫外灯、距离光源30～60cm，每天照射5小时，照射25天。

温度、湿度强度：水草种植于放置于恒温箱中的培养箱中，温度、湿度均为当时的实验室外环境条件。

试验条件：在保持2002年实验条件的基础上，调整恒温培养箱中植株生长光照条件，使其分别达到设计标准(表3)中的光照要求，温度和湿度为自然情况下进行培养。.

试验期间配备光照强度测量仪器。

表3试验水草种植光强(单位：lux)

T4组	光强度(营养盐浓度为最高耐受浓度)
		T41	650
T42	600
		T43	550
T44	500
		T45	450
T46	300
		T47	250
T48	200
		T49	150
T410	100

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐耐弱光(光强度：200lux(c1))能力最强的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生、耐营养盐浓度强、净化效率高特性。

2004年，不开花、不结籽、四季常绿、矮型、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光性状稳定植株筛选

将2003年获得的苦草植株种植于种植箱中继续种植，水深60cm。

温度、湿度：水草种植于放置于恒温箱中的培养箱中，温度、湿度均为当时的实验室外环境条件。

实验条件：光照条件为2004年筛选到的耐弱光能力最强的植株，调整期光照强度，使其分别达到设计标准(表4)中的要求，进一步强化植株耐弱光能力强。

表4试验水草种植光强(单位：lux)

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐耐弱光能力最强的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生、耐高营养盐能力强、净化效率高浓度特性。

经过筛选，实验获得的苦草可耐受的最弱光为200lux。

实施例5四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光、耐逆温性状稳定的苦草优良种筛选

2005年，不开花、不结籽、四季常绿、矮型、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光、耐逆温环境苦草优良种筛选

将2004年底获得的苦草植株种植于培养箱中，加水至35cm，用紫外光进行照射，诱发其变异。照射后加水至60cm继续培养。

湿度：水草种植于放置于恒温箱中的培养箱中，湿度为当时的实验室外环境条件。

试验条件：在保持2004年实验条件的基础上，调整植株生长温度情况，使其分别达到设计标准(表5)中的光照要求。

表5试验水草逆温条件

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐逆温(逆温：夜间0～5℃、昼间30℃)能力最强的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光能力最强特性。

2006年，不开花、不结籽、四季常绿、矮型、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光、耐逆温环境性状稳定植株筛选

将2005年获得的苦草植株种植于种植箱中继续种植，水深60cm。

实验条件：在保持2004年实验条件的基础上，调整植株生长温度情况，使其分别达到设计标准(表6)中的光照要求。

表6试验水草逆温条件

T3组	温度(营养盐浓度为最高耐受浓度，光照适宜)
		T31	夜间0～5℃、昼间a1
T32	夜间0～5℃、昼间a1+0.5℃
		T33	夜间0～5℃、昼间a1+1℃
T34	夜间0～5℃、昼间a1+1.5℃
		T35	夜间0～5℃、昼间a1+2℃

继续对种植的苦草苗进行培养，在其生长季4～11月份筛选耐耐逆温能力最强的苦草植株。筛选的植株伴随有四季常绿、不开花、不结籽、矮生、耐高营养盐能力强、净化效率高、耐弱光特性。

经过筛选，实验获得的苦草可耐受的最差逆温为夜间0～5℃、昼间30℃。

实施例6苦草四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐、净化效率高性状稳定苦草水塘种植筛选

2007年，将经过10年筛选的苦草植株种植于水塘中，调整水体中的营养盐浓度，进行大田培养，筛选，在自然环境条件的情况下，筛选四季常绿，不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐、净化效率高性状稳定的苦草植株。

此次种植过程中，水田中氮、磷浓度慢慢增加直至为苦草耐盐度和净化效率高筛选过程中筛选的最高浓度。

于当年9～至第二年3月份筛选含有目的性状的植株。

于2008年，重复2007年的工作，进一步筛选含目的性状的苦草植株。

实施例7耐逆温、耐弱光、苦草四季常绿、不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐、净化效率高性状稳定苦草水塘种植筛选

2009年，将经过10年筛选和两年水塘大田种植筛选到的苦草植株种植于培养箱中，调整培养箱温度和光照条件，满足十年筛选得到的苦草可耐受的最弱光(200lux)和最差逆温(夜间0～5℃，昼间30～32℃)。在实验室条件下，筛选耐逆温、耐弱光，并伴有四季常绿，不开花、不结籽、矮生型、耐高营养盐、净化效率高性状稳定的苦草植株。

培养期间，培养液中的氮、磷浓度为苦草耐盐度和净化效率高筛选过程中筛选的最高浓度。

于当年9～11月份筛选含有目的性状的植株。

实施例8上海市段浦河

项目位于上海市宝山区庙行镇场北路长临路，河道总长1.5km，水域面积约26000m²，平均水深2m，治理前为黑臭断头河涌，淤泥深厚(约90cm)，补给水为雨水汇集。

治理后，有效容纳了少量直排污水和雨污，透明度清澈见底，水质主要富营养化指标达到地表III～IV类水，效果保持至今，底泥平均削减3～4cm/a。

实施例9滴水湖D港

滴水湖D港引水通道座落于上海市临港新城，是滴水湖的主要引水通道之一。滴水湖D港引水通道水下生态修复与水质净化工程规模为河长1000m，河宽49m，水深3.7m，生态修复前常年水质为V-劣V类，透明度为30-50cm。以我司四季常绿矮型苦草技术为主导，同时采用食藻虫技术的综合水生态修复集成技术，经过3年的实践治理，水域生态修复作用效果明显：水质总氮由原来1.85±0.17mg/L下降到1.0mg/L以下；氨氮由原来0.43±0.17mg/L下降到0.14～0.26mg/L之间；总磷由原来0.25～0.31mg/L下降到0.05～0.12mg/L之间；活性磷从0.052-0.075mg/L下降到0.012～0.029mg/L；总氮含量平均降低率为62.05％；氨氮含量平均降低率为72.0％；总磷含量平均降低率为83.14％；而叶绿素-a下降了99％以上，水质由原来的V类转变为国家地表水Ⅲ类水质，透明度达到250cm以上。生态修复区主要水质富营养指标，达到国家地表水Ⅲ类水质标准,部分接近Ⅱ类，透明度稳定在2.5m以上，最高达3.5m，基本达到了水清见底的景观效果；通过流水(流量7000-10000m³/天)测试，外源V类水体经过修复的水下生态净化系统后，主要水质富营养指标接近国家地表水Ⅲ类标准，水质透明度2.5m以上，表明构建的41000m²水下生态净化系统具有较大的水质改善能力。

实施例10北京圆明园

圆明园项目水域包括圆明园遗址公园内的鉴碧亭、凤麟洲、松风萝月、如园、玉玲珑馆、方河、廓然大公水域，面积共191567m²，水体水深1.0～2.0m，水体水源补给主要是降雨、河道水体和自来水。目前，这些水域已经完成水体生态修复。修复后，透明度达到1.2m以上，水体深度小于1.2m区清澈见底，水质主要富营养指标达到国家地表Ⅲ类水标准，水体生态系统良好，处于生态维护状态。

以上的实施例是为了说明本发明公开的实施方案，并不能理解为对本发明的限制。此外，本文所列出的各种修改以及发明中方法、组合物的变化，在不脱离本发明的范围和精神的前提下对本领域内的技术人员来说是显而易见的。虽然已结合本发明的多种具体优选实施例对本发明进行了具体的描述，但应当理解，本发明不应仅限于这些具体实施例。事实上，各种如上所述的对本领域内的技术人员来说显而易见的修改来获取发明都应包括在本发明的范围内。

Claims

1.一种苦草的选育方法，所述苦草的选育方法至少包括以下步骤：

(1)3-4月份筛选10-20万枚颗粒饱满上一年收集的苦草种子，将种子用水打湿，紫外灯下照射萌发；

(2)将步骤(1)处理后的种子均匀撒在培养基上，加培养液，待萌发后增加培养液，继续培养40-50天，筛选高15-20cm植株；

(3)将步骤(2)筛选到的苦草植株移植，种植于培养器中，加培养液，用紫外灯进行照射40-50天，增加培养液，继续培养，于当年9～第二年3月筛选四季常绿、不开花不结籽的苦草植株；

(5)将步骤(4)获得的苦草植株种植于若干培养器中，加培养液，对苦草采用紫外灯照射20-30天，增加培养液，继续培养，所述培养器中培养液中总氮、总磷呈浓度梯度，于当年筛选耐高营养盐、净化效率高，并伴有四季常绿、不开花、不结籽、25～32cm植株，所述高营养盐是指总磷的含量不低于1mg/L，总氮的含量不低于：8mg/L；

(6)将步骤(5)筛选获得的苦草植株种植于若干培养器中，加培养液，对其采用紫外灯照射20-30天，增加培养液，设置光照强度梯度，继续培养，筛选耐弱光，即耐受最弱光强为200lux，伴有四季常绿、不开花、不结籽、耐高营养盐、净化效率高、25～32cm的苦草植株；

(7)将步骤(6)筛选获得的苦草植株种植于若干培养器中，加培养液，对其采用紫外灯照射20-30天，增加培养液，调整苦草培养液温度进行培养，使其夜间温度为0～5℃，昼间温度5～35℃，设置昼间温度梯度，筛选耐逆温能力强，并伴有四季常绿、不开花、不结籽、耐高营养盐、净化效率高、耐弱光特性的苦草植株。

2.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(1)还包括以下技术特征中的任意一种或几种：

a.所述种子距离光源30～60cm，照射时间为1～2小时，每天照射一次，连续照射2-4天；

b.所述种子平铺于载体上，种子厚度为1～2cm；

c.所述种子的生长所需温度和湿度为外界自然环境条件。

3.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(2)中所述培养基中盛有厚度为10～15cm土壤，培养液深10～15cm，待种子萌发后，加培养液至深为60～70cm，温度和湿度为外界自然环境条件。

4.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(4)还包括次年继续培养一年，并于次年9-11月，筛选高度为25～32cm的苦草植株，并伴有四季常绿、不开花、不结籽特性植株。

5.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(5)中总磷的浓度为0.4-1.0mgL^-1，磷的浓度梯度间隔为0.05-0.1mgL^-1，所述总氮的浓度为1-8.5mgL^-1，氮的浓度梯度间隔为0.5-1mgL^-1。

6.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(5)还包括次年继续培养一年，设置氮、磷浓度梯度，并筛选耐高营养盐、净化效率高、并伴有四季常绿、不开花、不结籽、25～32cm的植株，所述氮的浓度为8.3-11mgL^-1，氮浓度梯度间隔为0.2-1mgL^-1，所述磷的浓度为1.05-1.4mgL^-1，磷的浓度梯度间隔为0.03-0.1mgL^-1。

7.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(6)中光照强度为100-650lux，光照强度梯度间隔为40-50lux。

8.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(6)的还包括次年设置光照强度梯度，继续培养，筛选出具有稳定性状的植株，所述光照强度为210-300lux，所述光照强度梯度的间隔为10-20lux。

9.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(7)中昼间温度梯度间隔为2～5℃。

10.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述步骤(7)还包括次年设置温度梯度、继续培养，其中夜间温度为0～5℃，昼间温度为30～32℃，昼间温度梯度间隔为0.5～1℃。

11.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述方法还包括以下技术特征中的任意一种或几种：

a.所述步骤(3)～(7)中紫外照射的条件为：采用30-50瓦紫外灯，植株距离光源30～60cm，每天照射4-6小时；

b.所述步骤(1)～(4)采用培养液中总氮浓度为1.5～2.0mg/L，总磷浓度为0.3～0.4mg/L；

c.所述步骤(3)～(7)所述加培养液指培养液深度为30-40cm，所述增加培养液指培养液深度为60-80cm；

d.所述步骤(1)～(5)都是采用自然光照条件培养；

e.所述种子来自自然河道中苦草繁殖所得的种子；

f.所述自然环境条件是指北纬25～35度的地理位置处的环境条件。

12.根据权利要求1所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述方法还包括步骤(8)：将步骤(7)筛选到的苦草植株种植于水塘中，调整水体中营养盐浓度至水草最高耐受浓度，即氮的浓度为8mg/L、磷的浓度为1mg/L，于当年9～至第二年3月筛选不开花、不结籽、四季常绿、25～32cm、耐高营养盐、净化效率高的苦草植株。

13.根据权利要求12所述的苦草的选育方法，其特征在于：所述方法还包括步骤(9)：将步骤(8)筛选获得的苦草植株种植于若干培养器中，调整温度和光照，即夜间温度为0～5℃，昼间温度在30～32℃，光照强度为200lux，筛选目的植株。