CN109602880B - 一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物及其应用 - Google Patents

一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物及其应用 Download PDF

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Abstract

一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，包括以下中药原料：广西莪术、紫花地丁和金银花，用于抗石斑鱼虹彩病毒。将该中药组合物作为防治石斑鱼虹彩病毒病药物的有效作用成分，通过合理配伍，能够干扰石斑鱼虹彩病毒吸附至宿主细胞、阻止病毒穿入细胞、抑制病毒在宿主细胞内的复制合成来发挥抗病毒作用，具有效率高，安全无毒副作用的特点。

Description

一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物及其应用
技术领域
本发明属于水产动物疾病防治领域，具体地，涉及一种抗石斑鱼虹彩病毒中药组合物及其应用。
背景技术
我国是水产养殖大国，石斑鱼是我国南方沿海各省以及东南亚各国最名贵的海水养殖鱼类之一，近年来养殖规模不断扩大，2017年我国石斑鱼养殖总量达到13万吨以上，具有极高经济价值。然而，目前在石斑鱼中暴发和流行的虹彩病毒造成了巨大的经济损失，严重地威胁着石斑鱼养殖业的健康可持续发展。石斑鱼虹彩病毒属于虹彩病毒科蛙虹彩病毒属，是从患病的石斑鱼中分离鉴定的一种高致病性的虹彩病毒，其致死率可高达90％以上。但是目前针对石斑鱼虹彩病毒病尚无批准许可和市场化的有效抗病毒药物，石斑鱼养殖业正处于无药可用的困局。而养殖户为追求高利益盲目用药、滥用西药的现象普遍，但是西药副作用大、效率低，还造成鱼体中有害药物残留等重大食品安全问题和养殖环境的不断恶化等严重后果。因此，开发安全无毒、绿色高效的防治石斑鱼虹彩病毒病药物，显得尤为迫切。
中草药来源于自然界的天然动植物，毒副作用小，在促进养殖动物生长、提高抗病力和免疫力方面效果明显。据此，可以将中药开发作为切入点，为控制石斑鱼虹彩病毒扩散、降低石斑鱼养殖户损失、促进我国石斑鱼养殖业健康可持续发展开拓新的思路。基于此，开发具有抗石斑鱼虹彩病毒作用、抗病毒机制清晰明确、绿色安全的中药制剂，并将其用于石斑鱼养殖中石斑鱼虹彩病毒病，有着重大的现实意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物及其应用，以解决上述技术问题中的至少一个。
根据本发明的一个方面，提供一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，包括以下中药原料：广西莪术、紫花地丁和金银花，用于抗石斑鱼虹彩病毒。
优选地，包括以下重量配比的中药原料：广西莪术2-8份、紫花地丁5-15份和金银花5-15份。
优选地，包括以下重量配比的中药原料：广西莪术3-7份、紫花地丁6-14份和金银花6-14份。
优选地，包括以下重量配比的中药原料：广西莪术4-6份、紫花地丁8-12份和金银花8-12份。
优选地，包括以下重量配比的中药原料：广西莪术4-6份、紫花地丁9-11份和金银花9-11份。
优选地，由以下重量配比的中药原料组成：广西莪术5份、紫花地丁10份和金银花10份。
根据本发明的另一个方面，提供一种如上所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物在制备防治石斑鱼虹彩病毒病药物中的应用。
根据本发明的另一个方面，提供一种防治石斑鱼虹彩病毒病药物，其以上述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物作为有效成分。
优选地，上述防治石斑鱼虹彩病毒病药物通过以下方式制备所得：向中药原料加水煎煮60分钟，过滤，将所得滤液浓缩至浓度为1g/mL的膏状物。。
优选地，上述防治石斑鱼虹彩病毒病药物通过以下方式制备所得：将中药原料混合均匀，研磨成粉。
本发明提供的中药组合物配伍合理，可通过干扰石斑鱼虹彩病毒吸附至宿主细胞、阻止病毒穿入细胞、抑制病毒在宿主细胞内的复制合成来发挥抗病毒作用，从而有效抑制石斑鱼虹彩病毒，并具有效率高，安全无毒副作用的特点。另外，利用本发明提供的中药组合物制备的防治石斑鱼虹彩病毒病药物对活体石斑鱼具有显著的保护和治疗作用，其生产工艺简单、易于操作，适宜于大规模工业化生产，而且用药方式便捷，可以一次性对一定区域内的石斑鱼实现石斑鱼虹彩病毒的防控、治疗。
附图说明
图1为在28℃下分别在含对应配方①～⑤的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基中培养感染了GIV-Gx的GS细胞48小时，GS细胞和培养基中衣壳蛋白MCP基因相对表达量与抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对应的配方及其初始浓度的关系示意图；
图2为在28℃下分别在含不同初始浓度的对应配方③抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基中培养感染了GIV-Gx的GS细胞48小时，GS细胞和培养基中衣壳蛋白MCP基因相对表达量对应抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏初始浓度的统计条形图；
图3为在28℃下分别在含不同初始浓度的对应配方③抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基中培养GS细胞48小时，GS细胞存活率的统计条形图；
图4为在4℃下分别在含对应配方③的10mg/mL抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基和不含药液的培养基中使GIV-Gx感染GS细胞，实验完结时，GS细胞和培养基中衣壳蛋白MCP基因相对表达量的统计条形图；
图5为在28℃下分别在含对应配方③的10mg/mL抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基和不含药液的培养基中培养感染了GIV-Gx的GS细胞2小时，再经过相同的处理至实验完结时，GS细胞和培养基中衣壳蛋白MCP基因相对表达量的统计条形图；
图6为在28℃下分别在含对应配方③的10mg/mL抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基和不含药液的培养基中培养感染了GIV-Gx的GS细胞10小时，GS细胞和培养基中衣壳蛋白MCP基因相对表达量的统计条形图；
图7为使用含有对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的鱼饲料投喂人工感染GIV-Gx的活体石斑鱼、使用不含有复方中药的鱼饲料投喂人工感染GIV-Gx的活体石斑鱼、使用含有对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的鱼饲料投喂投喂没有感染GIV-Gx的活体石斑鱼，过程中活体石斑鱼的累计死亡率统计图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。
本发明实施例所使用原料来源如下：
1.石斑鱼脾脏细胞(Grouper Spleen cell,GS)，保存于本实验室。
2.石斑鱼虹彩病毒(Grouper iridovirus Guangxi strain,GIV-Gx)，分离自广西北海患病的珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)，保存于本实验室。
3.石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白(Major capsid protein，MCP)引物：qMCP正向引物，5'-GCACGCTTCTCTCACCTTCA-3'；qMCP反向引物，5'-AACGGCAACGGGAGCACTA-3'。
4.内参基因β-actin引物：β-actin正向引物，5'-TACGAGCTGCCTGACGGACA-3'；β-actin反向引物，5'-GGCTGTGATCTCCTTCTGCA-3'。
实施例1抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的制备
按照配方的重量配比称取中药组合物，加水煎煮60分钟，用五层无菌纱布进行过滤，然后将滤液浓缩至浓度为1g/mL的清膏，各配方组成如表1所示。
表1各配方的中药原料重量配比
配方编号 广西莪术/g 紫花地丁/g 金银花/g
① 2 8 15
② 3 9 13
③ 5 10 10
④ 5 12 8
⑤ 7 6 12
实施例2抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒的抑制作用
将GS细胞按照40000个/孔的比例传入24孔板，28℃培养24小时，细胞长成单层。然后，将实施例1的5种抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏分别在细胞培养基中稀释成不同的浓度(10，5，1mg/mL)，然后将含有药液的培养基和被GIV-Gx感染的GS细胞一起加入24孔板的细胞中，28℃培养；设置两个对照组，以没有加入抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏和被GIV-Gx感染的GS细胞的培养基作为对照1组，以只加入了被GIV-Gx感染的GS细胞的培养基作为对照2组。在48小时将细胞和培养基收集提取RNA，用qRT-PCR检测石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的表达情况，来判断抗石斑鱼虹彩病毒复方中药对石斑鱼虹彩病毒的抑制作用。
实验开始后48小时，除了对照1组之外，斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因在其他组别的培养基中均有不同程度的表达，将5种抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的实验组分别与对照2组对比，如图1所示，随着投入的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏浓度增大，对应样品中的衣壳蛋白基因相对表达量逐渐降低，其中，加入了对应配方③抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基中的衣壳蛋白基因相对表达量下降幅度最大，图2展示了添加了对应配方③的不同浓度抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的培养基与对照1组、对照2组中的培养基中衣壳蛋白基因的表达情况。图1中的趋势线表明，实施例1中所制得的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒抑制能力与其浓度成正比，配方③对应的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒的抑制能力最强，因此，以配方③作为抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的最佳配方。
实施例3抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼脾脏细胞活力的影响
将GS细胞按照10000个/孔的比例传入96孔板，28℃培养24小时，然后在5组细胞培养基中添加配方③对应的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏，使其在5组细胞培养基中的浓度分别为20、15、10、5、1mg/mL，以没有加入抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的细胞培养基作为对照。将上述6组细胞培养基分别与96孔板中的GS细胞在28℃孵育培养48小时。为了检测细胞活性，各孔中的细胞加入20μL的WST-8溶液继续在28℃培养4小时，然后用酶标仪检测450nm处的吸光度，实验分别重复三次。根据细胞活力确定药物的最大无毒浓度。
图3展示了不同浓度抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对应的细胞存活率，浓度不超过10mg/mL的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对应的细胞存活率基本与对照组对应的细胞存活率相仿，说明浓度不超过10mg/mL的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏不影响GS细胞的正常生长和代谢，而浓度超过10mg/mL的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对GS细胞产生一定毒性，使GS细胞的存活率低于正常情况。由此可以得出，10mg/mL为配方③对应的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的最大安全浓度，将此与实施例2的结论相结合，可以确定将浓度为10mg/mL的配方③抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏用于抑制石斑鱼虹彩病毒的效果最佳。
实施例4抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒吸附至宿主细胞过程中的抑制作用
将GS细胞按照40000个/孔的比例传入24孔板，28℃培养24小时，细胞长成单层。然后将对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在细胞培养基中稀释成10mg/mL，再将含有药液的培养基和GIV-Gx一起加入24孔板的细胞中，4℃静置30分钟，然后将24孔板细胞中的培养基移除，用新鲜培养基将细胞清洗两次，并加入新鲜的培养基继续培养12小时，标记为中药组。本实验的对照组处理方法是：将不含有药液的培养基和GIV-Gx一起加入24孔板的细胞中，4℃静置30分钟，然后将24孔板细胞中的培养基移除，用新鲜培养基将细胞清洗两次，并加入新鲜的培养基继续培养12小时。然后将细胞和培养基收集提取RNA，用qRT-PCR检测石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的表达情况，来判断抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒吸附至宿主细胞过程中的抑制作用。
如图4所示，中药组的衣壳蛋白基因相对表达量明显低于对照组的衣壳蛋白基因相对表达量，说明抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒吸附至宿主细胞的过程中具有显著的抑制作用。
实施例5抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒穿透细胞膜侵入细胞过程中的抑制作用
将GS细胞按照40000个/孔的比例传入24孔板，28℃培养24小时，细胞长成单层。将GIV-Gx加入细胞中，4℃静置30分钟后移除细胞培养基。然后将对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在细胞培养基中稀释成10mg/mL，并加入24孔板的细胞中，28℃培养2小时，然后将24孔板细胞中的培养基移除，用新鲜培养基将细胞清洗两次，并加入新鲜的培养基继续培养10小时，标记为中药组。本实验的对照组处理方法是：GIV-Gx加入24孔板的细胞中，4℃静置30分钟后移除细胞中的培养基。将不含有药液的培养基加入24孔板的细胞中，28℃培养2小时，然后将24孔板细胞中的培养基移除，用新鲜培养基将细胞清洗两次，并加入新鲜的培养基继续培养10小时。然后将细胞和培养基收集提取RNA，用qRT-PCR检测石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的表达情况，来判断抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒穿透细胞膜侵入细胞过程中的抑制作用。
如图5所示，中药组的衣壳蛋白基因相对表达量明显低于对照组的衣壳蛋白基因相对表达量，说明抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对对石斑鱼虹彩病毒穿透细胞膜侵入细胞过程中具有显著的抑制作用。
实施例6抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏对石斑鱼虹彩病毒在宿主细胞内的复制合成过程中的抑制作用
将GS细胞按照40000个/孔的比例传入24孔板，28℃培养24小时，细胞长成单层。将GIV-Gx加入细胞中，4℃静置30分钟，然后将细胞移至28℃培养2小时。移除24孔板细胞中的培养基，用新鲜培养基将细胞清洗两次，然后将对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在细胞培养基中稀释成10mg/mL，并加入24孔板的细胞中，在28℃继续培养10小时，标记为中药组。本实验的对照组处理方法是：GIV-Gx加入24孔板的细胞中，4℃静置30分钟，然后将细胞移至28℃培养2小时，移除24孔板细胞中的培养基，用新鲜培养基将细胞清洗两次，并换成新鲜培养基，在28℃继续培养10小时。然后将细胞和培养基收集提取RNA，用qRT-PCR检测石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的表达情况，来判断抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在对石斑鱼虹彩病毒在宿主细胞内的复制合成过程中的抑制作用。
如图6所示，中药组的衣壳蛋白基因相对表达量明显低于对照组的衣壳蛋白基因相对表达量，说明抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在石斑鱼虹彩病毒在宿主细胞内的复制合成过程中具有显著的抑制作用。
实施例7抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在鱼活体水平对石斑鱼虹彩病毒的抑制作用
将石斑鱼(体长8-10厘米)20条/组，分别养殖在循环海水养殖系统中。将100μLGIV-Gx(107TCID50/mL)人工腹腔注射入石斑鱼，然后每天按10克/公斤鱼饲料的药量，将对应实施例1配方③的抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏拌入鱼饲料中，标记为中药组。本实验有两个对照组：对照1组，人工感染石斑鱼虹彩病毒的石斑鱼，投喂没有拌入复方中药的鱼饲料；对照2组，没有腹腔注射GIV-Gx的正常石斑鱼，投喂拌有复方中药的鱼饲料。向中药组、对照1组和对照2组连续投喂10天，记录累计死亡率，结果如图7所示：对照1组的石斑鱼在第3天开始死亡，至第7天累计死亡率达到90％；对照2组在10天内没有发现死亡的石斑鱼，说明拌有抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏的鱼饲料对石斑鱼没有毒害作用；实验组的石斑鱼在10天内累计死亡率仅为10％，说明抗石斑鱼虹彩病毒复方中药清膏在鱼活体水平对人工感染石斑鱼虹彩病毒的石斑鱼具有显著的保护作用。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解，技术人员阅读本申请说明书后依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，但这些修改或变更均未脱离本发明申请待批权利要求保护范围之内。

Claims (8)

1.一种抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，其特征在于，按重量份数计算，所述中药组合物由以下中药原料制成：广西莪术2-8份、紫花地丁5-15份和金银花5-15份；
所述中药组合物的加工方法如下：向所述中药组合物加水煎煮60分钟，过滤，将所得滤液浓缩至浓度为1g/mL的膏状物。
2.如权利要求1所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，其特征在于，按重量份数计算，所述中药组合物由以下中药原料制成：广西莪术3-7份、紫花地丁6-14份和金银花6-14份。
3.如权利要求1所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，其特征在于，按重量份数计算，所述中药组合物由以下中药原料制成：广西莪术4-6份、紫花地丁8-12份和金银花8-12份。
4.如权利要求1所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，其特征在于，按重量份数计算，所述中药组合物由以下中药原料制成：广西莪术4-6份、紫花地丁9-11份和金银花9-11份。
5.如权利要求1所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量配比的中药原料组成：广西莪术5份、紫花地丁10份和金银花10份。
6.如权利要求1~5任一项所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物在制备防治石斑鱼虹彩病毒病药物中的应用。
7.一种防治石斑鱼虹彩病毒病药物，其特征在于：以权利要求1~5任一项所述抗石斑鱼虹彩病毒的中药组合物作为有效成分。
8.如权利要求7所述的防治石斑鱼虹彩病毒病药物，其特征在于，所述防治石斑鱼虹彩病毒病药物通过以下方式制备所得：向所述中药组合物加水煎煮60分钟，过滤，将所得滤液浓缩至浓度为1g/mL的膏状物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110585223B (zh) * 2019-09-20 2023-04-11 广西科学院 一种抗鱼类病毒的黄酮类抑制剂及其制备方法和应用
CN110711190B (zh) * 2019-09-20 2023-08-25 广西科学院 一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂及其制备方法和应用
CN111329931A (zh) * 2020-04-30 2020-06-26 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种抗sgiv和nnv的中药添加剂及应用
CN114557998A (zh) * 2022-03-03 2022-05-31 广西民族大学 一种抗鱼类疾病的原花青素类抑制剂及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102861162A (zh) * 2012-10-18 2013-01-09 中国水产科学研究院长江水产研究所 一种抗病毒复方中药及制备方法和应用
CN106879876A (zh) * 2017-01-22 2017-06-23 嵊州市派特普科技开发有限公司 具有提升免疫力功能的草鱼饲料及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102861162A (zh) * 2012-10-18 2013-01-09 中国水产科学研究院长江水产研究所 一种抗病毒复方中药及制备方法和应用
CN106879876A (zh) * 2017-01-22 2017-06-23 嵊州市派特普科技开发有限公司 具有提升免疫力功能的草鱼饲料及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
The use of immunostimulating herbs in fish. An overview of research;Jeney Galina等;《Fish Physiology and Biochemistry》;20091115;第35卷(第4期);第669-676页 *

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