CN109562100A - 多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂和血清素受体(5-HT)拮抗剂用于治疗癌症的用途 - Google Patents

多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂和血清素受体(5-HT)拮抗剂用于治疗癌症的用途 Download PDF

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Abstract

提供抗癌疗法，所述抗癌疗法涉及非细胞毒性多巴胺β‑羟化酶(DBH)抑制剂如内匹司他、依他米司他及其类似物和药学上可接受的盐，和非细胞毒性血清素受体拮抗剂如安哌齐特及其类似物和药学上可接受的盐。非细胞毒性DBH抑制剂和血清素受体拮抗剂可以单独施用，或与一种或多种另外的抗癌剂或抗癌疗法组合施用。还提供含有非细胞毒性DBH抑制剂和血清素受体拮抗剂和一种或多种另外的抗癌剂的药物组合物和组合，和使用所述药物组合物和组合治疗癌症的方法。

Description

多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂和血清素受体(5-HT)拮抗剂用 于治疗癌症的用途
相关申请的交叉引用
根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求在2016年7月28日提交的美国临时专利申请No.62/367,728的优先权，其公开内容通过引用整体并入本文。
技术领域
本发明涉及多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂和血清素受体2A(5-HT2A)拮抗剂用于治疗癌症的用途。
背景技术
多巴胺β-羟化酶(DBH)
多巴胺β-羟化酶(DBH)，也被称为多巴胺β-单加氧酶，是一种在人体中由DBH基因编码的酶(EC 1.14.17.1)。多巴胺β-羟化酶催化多巴胺被氧气氧化为去甲肾上腺素的化学反应，如方案1所示：
方案1：由DBH催化的多巴胺氧化为去甲肾上腺素
DBH为一种290kDa的含铜加氧酶，其由四个相同的亚基组成，其活性需要抗坏血酸作为辅助因子[1]。
DBH为唯一参与小分子膜结合的神经递质合成的酶，使得去甲肾上腺素成为在囊泡内合成的唯一递质。去甲肾上腺素在中枢和外周神经系统的去甲肾上腺素能神经末梢以及肾上腺髓质的嗜铬细胞中表达。
DBH主要有助于痕量胺和儿茶酚胺的生物合成，包括肾上腺素(epinephrine)(肾上腺素(adrenaline))、去甲肾上腺素(norepinephrine)(去甲肾上腺素(noradrenaline))和多巴胺。其还参与与这些物质有关的外源性生物质的代谢。例如，人DBH酶催化苯丙胺和对羟基苯丙胺的β-羟基化，分别产生去甲麻黄碱和对羟基去甲麻黄碱[2-4]。
DBH被认为是与决策药物和成瘾药物相关的病症的相关因素，例如酒精中毒[5]和吸烟[6]、注意力缺陷多动障碍[7]、精神分裂症[8]和阿尔茨海默病[9]。DBH不足被称为多巴胺β羟化酶缺乏症。
DBH受到双硫仑[10]、托酚酮[11]的抑制，并且最有选择性地受到内匹司他(nepicastat)[12]和依他米司他(etamicastat)[13]的抑制。双硫仑是一种在20世纪20年代开发的药物，其用于通过抑制乙醛脱氢酶并产生对乙醇(酒精)的急性敏感性(这意味着在饮用酒精后立即感受到“宿醉”的许多作用)来支持慢性酒精中毒的治疗。作为一种DBH抑制剂，双硫仑也被研究用于治疗可卡因依赖，因为其可以防止多巴胺的分解，所述多巴胺为一种由可卡因刺激其释放的神经递质。过量的多巴胺导致焦虑增加、血压升高、烦躁不安和其他令人不快的症状。双硫仑也是一种蛋白酶体抑制剂[14]，其通过与金属形成复合物(例如二硫代氨基甲酸酯复合物)发挥作用，并代表了抑制蛋白酶体的新方法[15]。
尽管双硫仑在抑制癌症生长方面具有良好的临床前结果，但一些临床研究显示出混合的结果，并且表明双硫仑在治疗癌症患者中的用途有限。例如，在一项I期研究中，双硫仑被单独给药至非转移性复发性前列腺癌患者中[16]，研究人员得出结论，由于毒性和缺乏任何临床益处，不应在该人群中进一步开发双硫仑。在另一项I期研究中，在放化疗后使用双硫仑和替莫唑胺的组合治疗新诊断的胶质母细胞瘤[17]，500mg双硫仑的中位无进展生存期(PFS)为5.4个月，与之前放化疗的8.1个月相比更短。PFS缺乏显著改善可以被解释为患者中有限的蛋白酶体抑制，这被认为是双硫仑的作用机制。
在40名患者的II期试验中，在化疗例如顺铂和长春瑞滨中加入双硫仑似乎延长了新诊断的非小细胞肺癌患者的存活率[18]。然而，在另一项53名患者的II期研究中，比较了双硫仑加顺铂的作用与单独的顺铂的作用[19]，两组之间的应答率、进展时间或中位生存率均无统计学显著的差异。与之前发表的报告相反，双硫仑不会对顺铂产生显著的肾保护，事实上，其增强胃肠毒性和耳毒性。还有其他细胞毒性的DBH抑制剂，如已报道具有抗癌活性的托酚酮[20]，但它们直接抑制癌症生长的作用机制似乎与它们对DBH的作用不相关。例如，托酚酮及其衍生物显示出显著的对组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的选择性水平，并且其有效抑制T细胞淋巴细胞系的生长[21]。
血清素受体2A(5-HT2A受体)
哺乳动物5-HT2A受体为三种5-HT2受体A、B和C的亚型，其属于血清素受体家族，并且是G蛋白偶联受体(GPCR)[22]。这是血清素(5-HT)GPCR当中的主要的兴奋性受体亚型，尽管5-HT2A也可以对某些区域具有抑制作用[23]，如视觉皮质和眶额叶皮质[24]。该受体首先因其作为血清素能致幻药物(如麦角酸酰二乙氨(LSD))的靶点的重要性而被记录。然后，其又恢复了重要性，因为其也被发现至少部分地介导许多抗精神病药物(尤其是非典型的药物)的作用。
5-HT2A在整个中枢神经系统(CNS)中广泛表达。其在大多数血清素能末端富集区域的附近表达，包括新皮质(主要是前额叶、顶叶和躯体感觉皮质)和嗅结节。在皮质的V层的锥体细胞的顶端树突上的特别高浓度的这种受体可以通过增强谷氨酸释放，然后与5-HT1A[27]、GABAA[28]、腺苷A1[29]、AMPA[30]、mGluR2/3[31]、mGlu5[32]和OX2受体[33、34]的复杂相互作用，来调节认知过程、工作记忆和注意力[24-26]。在外周，其在血小板和心血管系统的许多细胞类型中、成纤维细胞中和外周神经系统的神经元中高度表达。此外，在人单核细胞中观察到5-HT2A mRNA表达[35]。
已知5-HT2A受体主要与Gαq信号转导通路偶联。在用激动剂刺激受体后，Gαq和β-γ亚基解离，以启动下游效应子通路。Gαq刺激磷脂酶C(PLC)活性，其随后促进二酰基甘油(DAG)和三磷酸肌醇(IP3)的释放，它们反过来刺激蛋白激酶C(PKC)活性和Ca2+释放[36]。存在许多额外的信号级联组分，其包括通过PLA2活性形成花生四烯酸、磷脂酶D的活化、Rho/Rho激酶的活化和由受体的激动剂刺激引发的ERK通路活化。
由5-HT2A受体介导的生理过程包括：
-CNS：神经元兴奋、行为作用、学习、焦虑；
-平滑肌：收缩(胃肠道和支气管)；
-血管收缩/血管舒张；
-血小板：聚集；
-记忆[26、37、38]
用1-(2,5-二甲氧基-4-碘苯基)-2-氨基丙烷(DOI)的5-HT2A受体的活化在多种组织(包括心血管和肠组织)中产生有效的抗炎作用。其他5-HT2A激动剂(如LSD)也具有抗TNF-α诱导的炎症的有效抗炎作用[39、40]。下丘脑中5-HT2A受体的活化导致催产素、催乳素、ACTH、皮质酮和肾素的激素水平增加[41、42]。
内匹司他和依他米司他为高选择性DBH抑制剂。内匹司他(也被称为SYN117和RS-25560-197)已被研究作为充血性心力衰竭的可能治疗方法，并且就这一点而论其似乎具有良好的耐受性[43]。内匹司他及其类似物(如依他米司他)在治疗高血压方面具有共同的潜在用途。评估内匹司他作为用于创伤后应激障碍(PTSD)和可卡因依赖的治疗方法的临床试验也已经完成。内匹司他在与可卡因共同施用时是安全的，并可以抑制其积极的主观作用，提示其为用于治疗可卡因使用障碍的药物疗法[44]。依他米司他(BIA 5-453)具有较低的脑-血-屏障渗透水平，其为一种多巴胺-β-羟化酶抑制剂，其降低外周交感神经支配组织中的去甲肾上腺素水平，而对自发性高血压大鼠的脑组织没有作用[45]。在II期临床研究中，观察到依他米司他在10天的治疗后剂量依赖性地降低收缩压和舒张压[46]。
安哌齐特(amperozide)为一种二苯基丁基-哌嗪类的非典型抗精神病药物，其充当5-HT2A受体的拮抗剂[47]。与大多数抗精神病药物一样，其不阻断多巴胺受体[48]，但其抑制多巴胺释放[49、50]，并改变多巴胺能神经元的放电模式[51]。其被研究用于治疗人的精神分裂症[52]，但从未在临床上采用。它主要用作兽药，主要用于集中养殖的猪，用于减少攻击性和压力，从而提高进食和繁殖力[53-56]。
据本发明人所知，尚未报道过内匹司他、依他米司他和安哌齐特在体外或体内的抗癌活性。
发明内容
本领域需要治疗癌症的改进方法，所述方法实现有效治疗但具有降低的细胞毒性或其他副作用。本发明基于令人惊讶的发现，即，非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂和非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂，特别是内匹司他、依他米司他和安哌齐特及其类似物和药学上可接受的盐，具有抗-癌症活性，并且可以单独或与一种或多种另外的抗癌疗法和/或抗癌剂(如化学治疗剂、靶向治疗剂或免疫治疗剂)组合用于治疗癌症。
在一个一般方面中，本发明涉及一种在需要其的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂或非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂和药学上可接受的载体。
在一个实施方案中，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂，特别是血清素受体2A(5-HT2A)拮抗剂，如安哌齐特或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
在另一个实施方案中，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性DBH抑制剂，如内匹司他或依他米司他，或其类似物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
在本发明的某些实施方案中，将包含非细胞毒性5-HT拮抗剂或非细胞毒性DBH抑制剂的药物组合物与至少一种另外的抗癌剂(例如化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂)组合施用。
在本发明的一些实施方案中，待治疗的癌症为结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌或胃癌。
在另一个一般方面中，本发明涉及一种药物组合，其包含：
(a)第一药物组合物，所述第一药物组合物包含治疗有效量的选自安哌齐特、内匹司他和依他米司他的化合物，或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体；和
(b)治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂，
其中，治疗有效量的至少一种另外的抗癌剂存在于第一组合物中，或存在于与第一组合物组合施用的第二组合物中。
本发明的其他方面涉及制备本发明的药物组合物和组合的方法，和用本发明的药物组合物和组合治疗癌症的方法。
根据以下公开，包括本发明的详细描述及其优选的实施方案和所附权利要求，本发明的其他方面、特征和优点将是显而易见的。
附图说明
图1显示如实施例3所描述通过细胞增殖试验测定的H22小鼠肝癌细胞中的安哌齐特和内匹司他的IC50数据；
图2A和图2B显示如实施例4中所描述在H22小鼠肝癌异种移植模型中，与紫杉醇处理相比，安哌齐特处理对体内肿瘤生长的作用；图2A显示肿瘤体积的变化；图2B显示体重的变化；
图3A和图3B显示如实施例4中所描述在H22小鼠肝癌异种移植模型中，与紫杉醇处理相比，内匹司他处理对体内肿瘤生长的作用；图3A显示肿瘤体积的变化；图3B显示体重的变化；
图4A和图4B显示如实施例5中所描述在H22肝癌异种移植模型中，与抗PD-1mAb处理(腹膜内施用)相比，内匹司他和依他米司他处理对体内肿瘤生长的作用；图4A显示内匹司他处理的肿瘤体积和体重的变化；图4B显示依他米司他处理的肿瘤体积和体重的变化；和
图5A和5B显示如实施例6中所描述在CT-26小鼠结肠癌和EMT-6小鼠乳腺癌异种移植模型中，内匹司他处理对体内肿瘤生长和体重的作用；图5A显示在CT-26小鼠结肠癌异种移植模型中，内匹司他处理对肿瘤体积和体重的作用；图5B显示在EMT-6小鼠乳腺癌异种移植模型中，内匹司他处理对肿瘤体积和体重的作用。
具体实施方式
在背景技术和整个说明书中引用或描述了各种出版物、文章和专利；这些参考文献中的每一篇均通过引用整体并入本文。包含在本说明书中的文献、法案、材料、装置、物品等的讨论的目的在于提供本发明的背景。这种讨论并不是承认任何或所有这些事项构成关于所公开或要求保护的任何发明的现有技术的一部分。
除非另外定义，本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。否则，本文使用的某些术语具有说明书中设定的含义。本文引用的所有专利、公开的专利申请和出版物都通过引用并入，如同在本文中完整阐述。必须注意，如本文和所附权利要求中所使用，单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”包括复数指代，除非上下文另有明确说明。
除非另有说明，任何数值(如本文所描述的浓度或浓度范围)应被理解为在所有情况下均由术语“约”修饰。因此，数值通常包括所述值的±10％。例如，1mg/mL的浓度包括0.9mg/mL至1.1mg/mL。同样，1％至10％(w/v)的浓度范围包括0.9％(w/v)至11％(w/v)。如本文所使用，数值范围的使用明确地包括所有可能的子范围，该范围内的所有单独数值，包括在这些范围内的整数和值的分数，除非上下文另有明确说明。
如本文所使用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”都旨在指代至少一个与癌症相关的可测量的身体参数的改善或逆转，其在受试者中不一定是可辨别的，但在受试者中是可以辨别的。术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”还可以指引起癌症的消退、阻止癌症的进展或至少减缓癌症的进展。在一个特别的实施方案中，“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指减轻与癌症相关的一种或多种症状，预防与癌症相关的一种或多种症状的发展或发作，或减少与癌症相关的一种或多种症状的持续时间。在一个特别的实施方案中，“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指预防癌症的复发。在一个特别的实施方案中，“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指患有癌症的受试者的存活率的增加。在一个特别的实施方案中，“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指受试者中的癌症的清除。
如本文所使用，术语“受试者”是指动物，优选哺乳动物。根据特别的实施方案，受试者为哺乳动物，包括非灵长类动物(例如，骆驼、驴、斑马、牛、猪、马、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠、兔、豚鼠或小鼠)或灵长类动物(例如猴子，黑猩猩或人)。在特别的实施方案中，受试者为人。
如本文所使用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指活性成分或组分在受试者中引发期望的生物或药物应答的量。在特别的实施方案中，有效量为活性成分或化合物与另一种活性成分或化合物有效地实现的协同作用的量。可以根据规定的目的凭经验和常规方式确定治疗有效量。例如，可以任选地使用体外测试来帮助确定最佳剂量范围。本领域技术人员可以基于对多种因素的考虑(例如经由临床试验)来确定特定有效剂量的选择，所述因素包括待治疗或预防的疾病、所涉及的症状、患者的体重、患者的免疫状态和本领域技术人员已知的其他因素。制剂中使用的精确剂量还将取决于施用途径和疾病的严重程度，并且应当根据医生的判断和每位患者的情况来决定。可以从来源于体外或动物模型测试系统的剂量-应答曲线外推得到有效剂量。
如本文所使用的短语“药学上可接受的盐”是指那些目标化合物的盐，其在哺乳动物中安全且有效地用于药物用途，并且具有期望的生物活性。药学上可接受的盐包括碱加成盐和酸加成盐，所述碱加成盐为存在于特定化合物中的碱性基团的盐，所述酸加成盐为存在特定化合物中的酸性基团的盐。酸性或碱性基团可以是有机的或无机的。对于药学上可接受的盐的综述，参见Berge等人,66J.Pharm.Sci.1-19(1977)，其通过引用并入本文。
如本文所使用，短语“抗癌剂”、“抗癌药物”和“抗癌疗法”是指任何物质或治疗，其可以用于引起癌症的消退，预防或减缓癌症的进展，消除或预防癌症的复发，或者提高患有癌症的受试者的存活率。通常，术语“剂”和“药物”用于指物质(例如，小分子化合物、抗体等)，而术语“疗法”用于指治疗方法。抗癌剂可以通过不同的机制发挥其作用，所述机制包括但不限于刺激免疫应答、抑制免疫抑制和/或抑制细胞增殖。抗癌剂或药物的示例包括但不限于化学治疗剂、免疫治疗剂和靶向治疗剂。抗癌疗法的示例包括但不限于手术、基因疗法、放射疗法和冷冻疗法。
如本文所使用，术语“化学治疗剂”和“靶向治疗剂”是指作为抗癌药物或抗癌剂的任何化学物质。通常，化学治疗剂和靶向治疗剂是阻断癌细胞生长和增殖的物质。化学治疗剂通常具有细胞毒性，这意味着它们杀死肿瘤细胞，但它们也可以杀死正常的健康细胞，因为它们通常在全身发挥作用。与化学治疗剂不同，靶向治疗剂利用正常细胞与癌细胞之间的差异，通过与针对通常参与癌症的生长、进展和扩散的癌细胞的分子相互作用，来阻断癌细胞的生长或增殖。
如本文所使用，术语“免疫治疗剂”或“免疫治疗调节剂”是指能够刺激免疫应答和/或抑制免疫抑制的任何试剂。癌症免疫疗法试图刺激免疫系统来排斥和破坏肿瘤。
如本文所使用，在向受试者施用两种或更多种疗法的情况下，短语“组合(incombination)”和“组合(in combination with)”是指使用一种以上疗法。短语“组合”和“组合”的使用不限制向受试者施用治疗的顺序。例如，可以在向受试者施用第二疗法(例如，有效量的免疫治疗剂、化学治疗剂或靶向治疗剂)之前(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、16小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之前)、同时或之后(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、16小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之后)施用第一疗法(例如，有效量的DBH抑制剂或血清素受体2A拮抗剂)。
方法和组合物
本发明涉及用非细胞毒性DBH抑制剂(如内匹司他、依他米司他及其类似物)和非细胞毒性5-HT拮抗剂特别是5-HT2A拮抗剂(如安哌齐特及其类似物)单独或与一种或多种抗癌剂和/或抗癌疗法组合治疗癌症和肿瘤的方法。
如本文所使用，“DBH抑制剂”为抑制酶多巴胺β-羟化酶(DBH)的任何化合物。DBH催化多巴胺氧化成去甲肾上腺素。DBH抑制剂包括减少或防止由DBH催化的多巴胺氧化为去甲肾上腺素的化合物。特别地，“非细胞毒性DBH抑制剂”为抑制酶DBH并抑制或减少体内肿瘤生长的任何化合物，但其在体外具有降低的细胞毒性作用(例如，杀死癌细胞)。DBH抑制剂的示例包括但不限于内匹司他、依他米司他、双硫仑和托酚酮。依他米司他也被认为是内匹司他的类似物。非细胞毒性DBH抑制剂的示例包括但不限于内匹司他和依他米司他及其药学上可接受的盐。在本发明的优选实施方案中，DBH抑制剂选自内匹司他和依他米司他，或其药学上可接受的盐。
如本文所使用，“5-HT拮抗剂”为抑制或阻断由5-HT受体介导的生物应答的任何化合物。特别地，“5-HT2A拮抗剂”为抑制或阻断由5-HT2A受体介导的生物应答的任何化合物。5-HT2A受体是一种G蛋白偶联受体(GPCR)，是血清素受体家族的一部分。如本文所使用，“非细胞毒性5-HT拮抗剂”为通过抑制或阻断由5-HT受体介导的生物应答来抑制或减少体内肿瘤生长的任何化合物，但其在体外具有降低的细胞毒性作用(例如，杀死癌细胞)。5-HT拮抗剂特别是5-HT2A拮抗剂的示例包括但不限于安哌齐特。
如本文所使用，“内匹司他”、“依他米司他”和“安哌齐特”是指具有以下化学结构的化合物：
在本发明的一个实施方案中，治疗需要其的受试者的癌症的方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的安哌齐特或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
在本发明的另一个实施方案中，治疗需要其的受试者的癌症的方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的内匹司他或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
在本发明的又一个实施方案中，治疗需要其的受试者的癌症的方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的依他米司他或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
癌症是由于正常控制的丧失造成的不受调节的细胞增殖，导致异常生长、缺乏分化、局部组织侵入，并且通常有转移。肿瘤是细胞或组织的异常生长，其可以是良性的或恶性的。可以根据如本文所描述的本发明的方法治疗任何癌症或肿瘤，包括但不限于结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌或胃癌。
在一些实施方案中，所述癌症为结肠癌、乳腺癌、肝癌或黑素瘤。在其他实施方案中，所述癌症为化学疗法耐受性、免疫疗法耐受性或放射耐受性癌症，如化学疗法耐受性、免疫疗法耐受性或放射耐受性乳腺癌、肝癌、结肠癌或黑素瘤。
可以通过任何可接受的途径施用本文所描述的化合物、试剂或药物组合物。例如，本文所描述的化合物、试剂或药物组合物可以口服、脂肪内(intraadiposally)、动脉内、关节内、颅内、皮内、病灶内、肌内、鼻内、眼内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、直肠内、鞘内、气管内、肿瘤内、脐内、阴道内、静脉内、囊内、玻璃体内、经脂质体、局部(locally)、经粘膜、肠胃外、经直肠、结膜下、皮下、舌下、外部(topically)、颊内、经皮、经阴道、在霜剂中、在脂质组合物中、经由导管、经由灌洗、经由连续输注、经由输注、经由吸入、经由注射、经由局部递送、经由局部灌注、通过直接沐浴靶细胞，或其任何组合施用。
根据本发明的药物组合物可以被配制用于施用的任何形式，包括可注射(静脉内)、粘膜、口服(固体和液体制剂)、吸入、眼内、直肠、外部或肠胃外(输注、注射、植入、皮下、静脉内、动脉内、肌肉内)施用。用于口服施用的固体制剂的示例包括但不限于粉末剂、胶囊、囊片、胶丸(gelcap)和片剂；用于口服或粘膜施用的液体制剂的示例包括但不限于混悬剂、乳剂、酏剂和溶液剂；并且外部制剂的示例包括但不限于乳剂、凝胶、软膏、霜剂、贴剂、糊剂、泡沫剂、洗剂、滴剂或精华。用于肠胃外施用的制剂的示例包括但不限于可注射溶液、可以溶解或混悬在药学上可接受的注射用载体中的干燥产品、可注射混悬剂和可注射乳剂。其他合适的组合物的示例包括滴眼剂和其他眼用制剂；气溶胶，如鼻内喷雾剂或吸入剂；适用于肠胃外施用的液体剂型；栓剂；和锭剂。
在优选的实施方案中，包含DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂的药物组合物被配制用于口服施用，包括固体制剂，如粉末剂、胶囊、囊片、胶丸和片剂；和液体制剂，如混悬剂、乳剂、酏剂和溶液剂。
根据本发明的药物组合物进一步包含药学上可接受的载体，如在药物制造领域中广泛使用的那些。如本文所使用，术语“载体”是指本领域熟知的用于药物制剂的任何赋形剂、稀释剂、填充剂、盐、缓冲剂、稳定剂、增溶剂、油、脂质、含囊泡的脂质、微球、脂质体包囊(encapsulation)或其他材料。药学上可接受的载体特别地为无毒的，并且可以包括一种或多种粘合剂，如羟丙基甲基纤维素；增溶剂，如聚维酮和氯化十六烷基吡啶；酸化剂，如海藻酸；致孔剂，如蔗糖；润滑剂，如硬脂酰富马酸酯；助流剂，如胶体二氧化硅；粘合剂(binders)、混悬剂、乳化剂、稀释剂、填充剂、造粒剂、粘合剂(adhesives)、崩解剂、抗粘附剂、润湿剂、胶凝剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂和甜味剂等。药学上可接受的载体可以采取各种形式，取决于施用所需的制剂形式，并且量和类型将根据需要而变化。根据本公开，本领域普通技术人员将能够容易地确定要添加到本发明的药物组合物中的合适载体。载体的非限制性示例包括生理盐水和水。
根据所选择的特定施用方式，例如基于所需剂量、流体体积、粘度等选择DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂的剂量。在一些实施方案中，以约1mg/天至4g/天的剂量，如1mg/天、10mg/天、50mg/天、100mg/天、200mg/天、300mg/天、400mg/天、500mg/天、600mg/天、700mg/天、800mg/天、900mg/天、1g/天、2g/天、3g/天或4g/天的剂量施用(优选口服施用)DBH抑制剂或5-HT拮抗剂。例如，可以以约20mg/天至2.5g/天，优选40mg/天至1.0g/天，更优选80mg/天至500mg/天的剂量(例如向人受试者)施用内匹司他或其药学上可接受的盐；可以以约1mg/天至100mg/天，优选2mg/天至50mg/天，更优选4mg/天至25mg/天的剂量(例如向人受试者)施用安哌齐特或其药学上可接受的盐；并且可以以约40mg/天至4.0g/天，优选80mg/天至2.0g/天，更优选160mg/天至1.0g/天的剂量(例如向人受试者)施用依他米司他。
在一些实施方案中，每日一次施用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂或其组合物。在其他实施方案中，每日两次施用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂或其组合物。在其他实施方案中，每天多次、每两天一次、每三天一次、每四天一次、每五天一次、每六天一次、每七天一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每两个月一次、每三个月一次、每四个月一次、每五个月一次、每六个月一次或每年一次施用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂或其组合物。DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂或其组合物可以施用持续一天、两天、三天、四天、五天、六天、七天、两周、三周、四周、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、一年、两年、三年、四年、五年、十年或十五年等。
根据本发明的实施方案，可以单独使用或与另外的抗癌疗法和/或抗癌剂组合使用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂。在一些实施方案中，另外的抗癌疗法或抗癌剂包括手术、放射疗法、化学疗法或化学治疗剂、毒素疗法、免疫疗法或免疫治疗剂、靶向治疗剂、冷冻疗法或基因疗法。当使用抗癌剂时，DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂可以与另外的抗癌剂在同一组合物中一起施用。可选地，可以在分开的组合物中施用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂和另外的抗癌剂。当作为分开的组合物施用时，可以通过相同的施用形式(例如，均经由口服施用)或通过与另外的抗癌剂所使用的不同的施用途径(例如，DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂口服施用，并且另外的抗癌剂注射施用)施用DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂。
本发明的其他方面涉及药物组合物和组合，其包含DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂、至少一种另外的抗癌剂和药学上可接受的载体。根据本公开，在本发明的组合物中可以使用任何DBH抑制剂和/或5-HT拮抗剂，包括但不限于安哌齐特、内匹司他、依他米司他、其类似物及其药学上可接受的盐。
根据本公开，可以通过本领域已知的任何方法制备药物组合物，并且本领域普通技术人员将熟悉用于制备药物组合物的这些技术。例如，可以通过将DBH抑制剂(例如，内匹司他、依他米司他等)或5-HT拮抗剂(例如，安哌齐特等)、至少一种另外的抗癌剂和药学上可接受的载体组合来制备本发明的药物组合物。
本发明的实施方案还涉及用本文所描述的药物组合物和组合治疗癌症的方法。根据本发明的实施方案，所述方法包括将药物组合物或组合施用至需要其的受试者。所述方法可以根据本公开用于治疗的任何癌症，并且可以根据本公开通过任何合适的途径施用于需要治疗的受试者。
实施方案
实施方案1为一种在需要其的受试者中治疗癌症或肿瘤的方法，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
实施方案2为一种在需要其的受试者中治疗癌症或肿瘤的方法，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
实施方案3为实施方案1所述的方法，其中所述非细胞毒性5-HT拮抗剂为安哌齐特或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案4为实施方案2所述的方法，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为内匹司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案5为实施方案2所述的方法，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为依他米司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案6为实施方案1-5中任一项所述的方法，其中将药物组合物口服施用至受试者。
实施方案7为实施方案1-6中任一项所述的方法，进一步包含向受试者施用治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂。
实施方案8为实施方案7所述的方法，其中至少一种另外的抗癌剂为免疫治疗剂。
实施方案9为实施方案1-8中任一项所述的方法，其中治疗与至少一种选自手术、基因疗法、放射疗法和冷冻疗法的另外的抗癌疗法组合进行。
实施方案10为实施方案1-9中任一项所述的方法，其中所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
实施方案11为实施方案10所述的方法，其中所述癌症为乳腺癌、结肠癌、肝癌或黑素瘤。
实施方案12为一种药物组合物，其包含治疗有效量的非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂或其药学上可接受的盐，例如内匹司他或依他米司他或其药学上可接受的盐；至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂；和药学上可接受的载体。
实施方案13为一种药物组合物，其包含治疗有效量的非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂或其药学上可接受的盐，例如安哌齐特或其药学上可接受的盐；至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂；和药学上可接受的载体。
实施方案14为一种制备实施方案12所述的药物组合物的方法，所述方法包括将非细胞毒性DBH抑制剂或其药学上可接受的盐、至少一种另外的抗癌剂和药学上可接受的载体组合。
实施方案15为一种制备实施方案13所述的药物组合物的方法，所述方法包括将非细胞毒性5-HT拮抗剂或其药学上可接受的盐、至少一种另外的抗癌剂和药学上可接受的载体组合。
实施方案16为一种药物组合，其包含：
(a)第一组合物，所述第一组合物包含治疗有效量的选自安哌齐特、内匹司他和依他米司他的化合物，或其类似物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体；和
(b)治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂，
其中，治疗有效量的至少一种另外的抗癌剂存在于第一组合物中，或存在于与第一组合物组合施用的第二组合物中。
实施方案17为实施方案16所述的药物组合，其中所述第一组合物包含治疗有效量的内匹司他或其药学上可接受的盐。
实施方案18为实施方案16所述的药物组合，其中所述第一组合物包含治疗有效量的依他米司他或其药学上可接受的盐。
实施方案19为实施方案16所述的药物组合，其中所述第一组合物包含治疗有效量的安哌齐特或其药学上可接受的盐。
实施方案20为一种在需要其的受试者中治疗癌症或肿瘤的方法，所述方法包括向受试者施用实施方案12-13中任一项所述的药物组合物或实施方案16-19中任一项所述的药物组合。
实施方案21为实施方案20所述的方法，其中所述癌症或肿瘤选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
实施方案22为实施方案21所述的方法，其中所述癌症为乳腺癌、结肠癌、肝癌或黑素瘤。
实施方案23为实施方案1-11和20-22中任一项所述的方法，其中所述受试者为人受试者。
实施方案24为实施方案12-13中任一项所述的药物组合物或实施方案16-19中任一项所述的药物组合，其用于在需要其的受试者中治疗癌症的用途。
实施方案25为一种药物组合物，其用于在需要其的受试者中治疗癌症的用途，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
实施方案26为一种药物组合物，其用于在需要其的受试者中治疗癌症的用途，所述药物组合物包含治疗有效量的非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
实施方案27为实施方案25所述的用途的药物组合物，其中所述非细胞毒性5-HT拮抗剂为安哌齐特或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案28为实施方案26所述的用途的药物组合物，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为内匹司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案29为实施方案26所述的用途的药物组合物，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为依他米司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案30为实施方案25-29中任一项所述的用途的药物组合物，其中将药物组合物配制用于口服施用。
实施方案31为实施方案25-30中任一项所述的用途的药物组合物，其中将药物组合物与治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂组合使用。
实施方案32为实施方案31所述的用途的药物组合物，其中至少一种另外的抗癌剂为免疫治疗剂。
实施方案33为实施方案25-32中任一项所述的用途的药物组合物，其中将药物组合物与至少一种选自手术、基因疗法、放射疗法和冷冻疗法的另外的抗癌疗法组合使用。
实施方案34为实施方案25-33中任一项所述的用途的药物组合物，其中所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
实施方案35为实施方案34所述的用途的药物组合物，其中所述癌症为乳腺癌、结肠癌、肝癌或黑素瘤。
实施方案36为非细胞毒性血清素受体(5-HT)拮抗剂或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
实施方案37为非细胞毒性多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
实施方案38为实施方案36所述的用途，其中所述非细胞毒性5-HT拮抗剂为安哌齐特或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案39为实施方案37所述的用途，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为内匹司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案40为实施方案37所述的用途，其中所述非细胞毒性DBH抑制剂为依他米司他或其类似物，或其药学上可接受的盐。
实施方案41为实施方案36-40中任一项所述的用途，其中将药物配制用于口服施用。
实施方案42为实施方案12或13所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
实施方案43为实施方案16-19中任一项所述的药物组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
实施方案44为实施方案36至43中任一项所述的用途，其中所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
实施方案45为实施方案44所述的用途，其中所述癌症为乳腺癌、结肠癌、肝癌或黑素瘤。
实施方案46为实施方案3、6-11和20-22中任一项所述的方法，其中以约1mg/天至100mg/天，优选2mg/天至50mg/天，更优选4mg/天至25mg/天的剂量施用安哌齐特或其类似物或其药学上可接受的盐。
实施方案47为实施方案4、6-11和20-22中任一项所述的方法，其中以约20mg/天至2.5g/天，优选40mg/天至1.0g/天，更优选80mg/天至500mg/天的剂量施用内匹司他或其类似物或其药学上可接受的盐。
实施方案48为实施方案5-11和20-22中任一项所述的方法，其中以约40mg/天至4.0g/天，优选80mg/天至2.0g/天，更优选160mg/天至1.0g/天的剂量施用依他米司他或其类似物或其药学上可接受的盐。
本发明的以下实施例进一步阐明本发明的性质。应当理解，以下实施例不限制本发明，并且本发明的范围由所附的权利要求所确定。
实施例
实施例1：在H22小鼠肝癌细胞系中的体外细胞增殖测试的实验程序
材料和方法：
材料：
试剂：
1.化合物：安哌齐特、内匹司他
2.阳性对照化合物：紫杉醇
3.CTG测试试剂盒(Promega)-Cat No.G7572
4.RPMI-1640介质(Invitrogen)-Cat No.11875093
5.PBS(Hyclone)-Cat No.SH30256-01B
6.胰蛋白酶/EDTA(Invitrogen)-25200-056
7.FBS(Biowest)-Cat No.S1580-500
8.青霉素-链霉素液体(Invitrogen)-Cat No.15140-122
9.96孔空白板(Costar)-Cat No.3917
仪器：EnVision 2104多标记读板器(EnVision 2104Multilabel Reader)
方法：
(1)在37℃和5％CO2气氛下，在补充有10％FBS、100U/ml青霉素和100mg/ml链霉素的RPMI-1640介质中培养细胞。在测试中使用80％融合的细胞。
(2)将细胞以1000rpm旋转4分钟，重新悬浮于补充有10％FBS的新鲜介质中，然后调节细胞密度，将细胞接种于96孔空白板中，3000细胞/孔/90μl H22细胞，3个孔/组。
(3)在24小时后，制备10×化合物溶液，将10μl 10×化合物溶液转移至各孔中，使最终浓度为1μM和0.1μM(溶剂对照：0.1％DMSO；空白对照：无细胞，仪器自动归零)。
(4)将细胞与化合物在37℃和5％CO2气氛下温育72小时。
(5)将板及其内容物在室温平衡30分钟。
(6)然后，将100μL试剂加入到96孔空白板的每个孔中。
(7)将内容物在定轨振荡器上混合2分钟以诱导细胞裂解。
(8)将板在室温温育10分钟以稳定荧光信号。
(9)使用EnVision 2104多标记读板器记录荧光。
实施例2：用于在小鼠H22、CT-26和EMT-6异种移植模型中测试体内肿瘤生长的实验程序
如下面所描述进行使用小鼠H22、CT-26和EMT-6异种移植模型的实验。
细胞系和动物：
测试物：
细胞培养：
在5％CO2的空气气氛中，在37℃，在补充有10％FBS的RPMI-1640介质中培养细胞。每周三次对肿瘤细胞进行常规传代培养。收获在指数生长期生长的细胞并计数用于肿瘤接种。
肿瘤接种：
将小鼠(雌性，6-8周龄)在右胁腹皮下接种0.1mL PBS中的肿瘤细胞(H22、EMT-6或CT-26)用于肿瘤生长。当肿瘤体积达到约60-80mm3时，根据动物体重和肿瘤体积将小鼠随机分组。每组有5-8只荷瘤小鼠。
观察
在常规监测时，检查肿瘤生长和治疗对动物的正常行为如活动性、食物和水消耗(仅通过观察)、和体重增加/减少(体重每周测量三次)、眼/毛发光泽(matting)的任何作用和任何其他异常作用。基于每个子集内的动物数量记录死亡和观察到的临床症状。
肿瘤测量和终点
主要终点是确定是否可以延迟肿瘤生长或是否可以将小鼠治愈。使用卡尺在两个维度上每周三次测量肿瘤体积，并使用以下公式以mm3表示体积：V＝0.5a xb2，其中a和b分别为肿瘤的长径和短径。T/C值(百分比)为抗肿瘤效果的指征，其中T和C分别为给定日的治疗组和对照组的平均体积。根据TV计算T-C值。用T和C计算T-C，所述T为治疗组肿瘤达到预定尺寸(例如，TV为1000mm3)所需的中位时间(以天计)，所述C为对照组肿瘤达到相同尺寸的中位时间(以天计)。同时测量和记录体重，以观察化合物的毒性。在研究结束时将动物处死。
统计分析
在每个时间点为每组的肿瘤体积提供概括统计，包括平均值和平均值的标准误差(SEM)。进行双向方差分析(ANOVA)以比较体重、肿瘤体积和肿瘤体积变化。进行单向ANOVA以比较肿瘤重量。使用GraphPad Prism 5分析所有数据。p<0.05被认为是统计学显著的。
实施例3：安哌齐特和内匹司他在H22小鼠肝癌细胞系中的细胞增殖测试
根据实施例1中描述的实验程序，在H22小鼠肝癌细胞系中测试安哌齐特、内匹司他和紫杉醇的抗增殖活性。结果示于表1。
如表1所示，紫杉醇在1μM和0.1μM的浓度时对H22小鼠肝癌细胞系显示出强烈的抑制作用。在这些相同浓度时，安哌齐特和内匹司他对H22小鼠肝癌细胞系没有显示出任何显著的抗增殖作用，表明这两种化合物是非细胞毒性的。
表1：紫杉醇、安哌齐特和内匹司他在H22小鼠肝癌细胞系中的体外抗增殖测试
数据显示在图1中，其中安哌齐特和内匹司他在H22小鼠肝癌细胞增殖中的IC50分别计算为38.84μM和52.59μM。据报道，临床剂量的安哌齐特(10mg/天)[57]和内匹司他(160mg/天)[58]的血浆最大浓度(Cmax)分别为约0.1μM和0.2μM。临床剂量的安哌齐特和内匹司他的Cmax值远小于其H22小鼠肝癌细胞增殖的IC50值，提示安哌齐特和内匹司他在有效抑制肿瘤生长的浓度下都是非细胞毒性的。
上述结果证明，安哌齐特和内匹司他在小鼠H22肝癌细胞系中是非细胞毒性的。
实施例4：安哌齐特和内匹司他在小鼠肝癌模型中的体内抗癌活性
根据实施例2中描述的实验程序，在H22小鼠肝癌异种移植模型中评价安哌齐特和内匹司他的抗癌活性。通过测量肿瘤体积的变化来评价抗癌活性。
表2中显示在肿瘤接种后不同时间点在所有治疗组中的肿瘤体积变化的结果。对于安哌齐特，表示肿瘤生长和体重变化的数据分别显示在图2A和图2B中；内匹司他的那些数据分别显示在图3A和图3B中。表3总结了安哌齐特和内匹司他在抑制H22肿瘤体内生长中的活性。在第19天，载体组的平均肿瘤体积达到3027mm3。阳性对照紫杉醇在研究中显示出抗肿瘤作用，其中平均肿瘤体积为1982mm3(T/C＝65.5％，肿瘤生长抑制率＝34.5％，p<0.001)，表明成功建立肿瘤模型。安哌齐特(2mg/kg)和内匹司他(48mg/kg)组的平均肿瘤体积分别为1948mm3(T/C＝64.4％，肿瘤生长抑制率＝35.6％，p<0.001)和1992mm3(T/C＝66％，肿瘤生长抑制率＝34.2％，p<0.001)。
表2：用安哌齐特和内匹司他处理的H22小鼠肝癌异种移植的肿瘤体积变化。
表3：安哌齐特和内匹司他在H22小鼠肝癌异种移植的处理中的抗肿瘤活性
a“T/C”是指(测试组的平均肿瘤体积)/(对照(载体)组的平均肿瘤体积)；
b“TGI”指肿瘤生长抑制率；与载体相比，ns：不显著；*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001
上面的结果表明，安哌齐特和内匹司他具有与紫杉醇相似的肿瘤抑制活性。然而，如上面的实施例3中所描述的体外抗增殖测试的结果所证明，安哌齐特和内匹司他不具有与紫杉醇相同的细胞毒性作用。
实施例5：在小鼠肝癌模型中内匹司他和依他米司他与抗PD-1单克隆抗体相比的体内抗癌活性
根据实施例2中描述的实验程序，在H22小鼠肝癌异种移植模型中评价内匹司他、依他米司他和抗PD-1单克隆抗体(mAb)的抗癌活性。
表4中显示在肿瘤接种后不同时间点在所有处理组中的肿瘤体积变化的结果。图4A和图4B分别显示表示通过内匹司他和依他米司他处理的肿瘤生长和体重变化的数据。表5总结了内匹司他、依他米司他和抗PD-1mAb对H22肝肿瘤的体内生长的抑制活性。在第22天，载体组的平均肿瘤体积达到1718.9mm3。阳性对照抗PD-1mAb(10mg/kg，每周两次(BIW)x6剂量，腹腔内施用(i.p.))在研究中显示出强大的抗肿瘤功效，其中平均肿瘤体积为165.65mm3(T/C＝9.64％，肿瘤生长抑制率＝90.36％，p<0.001)，表明成功建立肿瘤模型。50mg/kg和100mg/kg内匹司他(每日一次(QD)×20天，口服施用(p.o.))处理组的平均肿瘤体积分别为880.28mm3(T/C＝51.21％，肿瘤生长抑制率＝48.79％，p<0.001)和1275.47mm3(T/C＝74.20％，肿瘤生长抑制率＝25.80％，p<0.001)。80mg/kg和160mg/kg依他米司他(每日一次(QD)×20天，口服施用(p.o.))处理组的平均肿瘤体积分别为1210.52mm3(T/C＝70.42％，肿瘤生长抑制率＝29.58％，p<0.05)和1309.12mm3(T/C＝76.16％，肿瘤生长抑制率＝23.84％，p>0.05)。
表4：用内匹司他、依他米司他和抗PD-1mAb处理的H22小鼠肝癌异种移植的肿瘤体积变化。
表5：内匹司他、依他米司他和抗PD-1mAb在H22小鼠肝癌异种移植的处理中的抗肿瘤活性
a“T/C”是指(测试组的平均肿瘤体积)/(对照(载体)组的平均肿瘤体积)；
b“TGI”指肿瘤生长抑制率；与载体相比，ns：不显著；*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001
上面的结果证明了内匹司他和依他米司他在体内H22肝癌模型中的抗肿瘤抑制活性。
实施例6：内匹司他在CT-26小鼠结肠癌和EMT-6小鼠乳腺癌异种移植模型中的体内抗癌活性
还测试了内匹司他在CT-26小鼠结肠癌和EMT-6小鼠乳腺癌异种移植模型中的体内肿瘤生长抑制。口服施用内匹司他。
图5A中显示了口服施用内匹司他对CT-26小鼠结肠癌异种移植模型中的肿瘤生长抑制和体重变化的结果。图5B中显示了口服施用内匹司他对EMT-6小鼠乳腺癌异种移植模型中肿瘤生长抑制和体重变化的结果。表6中显示了在肿瘤接种后不同时间点表示每个指定处理组的肿瘤体积变化的数据(5只小鼠/组)。表7总结了内匹司他在CT-26和EMT-6小鼠肿瘤模型中的抗肿瘤抑制功效。口服施用50mg/kg内匹司他(每日一次(QD))的组分别在CT2-6和EMT-6模型中显示出34.30％(p<0.001)和23.09％(p<0.001)的肿瘤抑制率。
表6：用内匹司他处理的CT-26和EMT-6异种移植的肿瘤体积变化。
表7：内匹司他处理在CT-26和EMT-6异种移植中的抗肿瘤活性
a“T/C”是指(测试组的平均肿瘤体积)/(对照(载体)组的平均肿瘤体积)；
b“TGI”指肿瘤生长抑制率；与载体相比，ns：不显著；*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001
上面的结果表明，内匹司他还具有抗结肠癌和乳腺癌的抗肿瘤抑制作用。
本领域技术人员将理解，可以对上面描述的实施方案进行改变而不脱离其广泛的发明构思。因此，应理解，本发明不限于所公开的特定实施方案，而是旨在包含由所附权利要求限定的本发明的精神和范围内的修改。
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Claims (18)

1.一种在需要其的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的安哌齐特或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的载体。
2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括向受试者施用治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中将治疗与至少一种选自手术、基因疗法、放射疗法和冷冻疗法的另外的抗癌疗法组合进行。
4.一种在需要其的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的选自内匹司他和依他米司他的多巴胺β-羟化酶(DBH)抑制剂或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
5.根据权利要求4所述的方法，其中DBH抑制剂为内匹司他或其药学上可接受的盐。
6.根据权利要求4所述的方法，其中DBH抑制剂为依他米司他或其药学上可接受的盐。
7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，进一步包括向受试者施用至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂。
8.根据权利要求4至7中任一项所述的方法，其中将治疗与至少一种选自手术、基因疗法、放射疗法和冷冻疗法的另外的癌症疗法组合进行。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述癌症为乳腺癌、肝癌、结肠癌或黑素瘤。
11.一种药物组合，其包含：
(a)第一组合物，所述第一组合物包含治疗有效量的选自安哌齐特、内匹司他和依他米司他的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体；和
(b)治疗有效量的至少一种选自化学治疗剂、靶向治疗剂和免疫治疗剂的另外的抗癌剂，
其中，治疗有效量的至少一种另外的抗癌剂存在于第一组合物中，或存在于与第一组合物组合施用的第二组合物中。
12.一种在需要其的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向受试者施用根据权利要求11所述的药物组合。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、肝癌、黑素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、肾细胞癌、膀胱癌和胃癌。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述癌症为乳腺癌、肝癌、结肠癌或黑素瘤。
15.根据权利要求1-10和12-14中任一项所述的方法，其中所述受试者为人受试者。
16.根据权利要求1-3、7-10和12-15中任一项所述的方法，其中以约1mg/天至100mg/天，优选2mg/天至50mg/天，更优选4mg/天至25mg/天的剂量施用安哌齐特或其药学上可接受的盐。
17.根据权利要求4-5、7-10和12-15中任一项所述的方法，其中以约20mg/天至2.5g/天，优选40mg/天至1.0g/天，更优选80mg/天至500mg/天的剂量施用内匹司他或其药学上可接受的盐。
18.根据权利要求4、6-10和12-15中任一项所述的方法，其中以约40mg/天至4.0g/天，优选80mg/天至2.0g/天，更优选160mg/天至1.0g/天的剂量施用依他米司他或其药学上可接受的盐。
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