CN109553660A - 靶向rage胞浆内段接头slp76及其sam的用途 - Google Patents

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Abstract

一种TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白具有抑制脓毒症过程中炎症反应的效用。通过细胞穿透肽TAT将SLP76蛋白的SAM功能结构域带到细胞内，竞争性结合于RAGE受体的胞浆内段，拮抗脓毒症发生发展过程中RAGE与内源性接头蛋白SLP76相互作用介导的细胞信号转导，减轻脓毒症过程中炎症因子的释放，从而发挥治疗脓毒症或改善预后的作用。该TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白可作为脓毒症治疗的靶向药，以非经典内吞方式直接穿过细胞膜进入细胞的多肽，其重要特点是可以携带多种不同大小和性质的生物活性物质进入细胞。

Description

靶向RAGE胞浆内段接头SLP76及其SAM的用途
技术领域
本发明属于生物医药领域，特别涉及一种靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76(SH2domain containing leukocyte protein of 76kDa)的SAM功能结构域在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。
背景技术
脓毒症(sepsis)是由病原微生物感染引起的全身炎症反应综合征(systemicinflammatory response syndrome，SIRS)，是严重创伤、烧伤、外科大手术后等危重患者的常见并发症，也是诱发脓毒性休克(septic shock)、急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratory distress syndrome,ARDS)和多器官功能障碍综合征(multiple organdysfunction syndrome，MODS)的重要原因。脓毒症发生率高，全球每年有超过1800万严重脓毒症病例，而且这一数字还在以每年1.5％～8.0％的速度上升。流行病学调查显示，脓毒症的病死率已经超过心肌梗死，成为重症监护病房内非心脏病人死亡的主要原因，由于脓毒症来势凶猛，病情进展迅速，病死率高，给临床救治工作带来了极大的困难。
长期以来，尽管脓毒症严重影响人类的生活质量，对人类健康造成巨大威胁，但是公众对其认识仍然不足，迄今为止临床上还没有一种特异高效的脓毒症治疗药物。脓毒症是一个涉及大量局部和全身性炎症反应的复杂病理过程，其病程迅速而凶险，预后恶劣。由于其发病涉及诸多环节，给脓毒症的治疗带来了极大的困难和挑战。
脓毒症临床治疗试验的历史可以追溯到1963年，研究者将高剂量的皮质类固醇用于调节炎症系统，然而后续的几项临床试验表明高剂量的皮质类固醇并不能显著改善脓毒症患者的预后。由于脓毒症的发病本质是病原微生物感染所引起的失控性炎症反应，近年来的药物研究主要为抗LPS的治疗方案，使用抗LPS血清治疗可以显著提高脓毒症小鼠的存活率，然而多中心、大量的临床实验证明，抗LPS血清并不能显著降低脓毒症患者的死亡率。随后，科研人员将研究重心转移至抗TLR4信号通路上，TLR4作为LPS的受体，在机体感染时起着非常重要的作用。然而，无论是针对TLR4受体本身还是TLR4信号转导通路，抑或是抗细胞因子(TNF-α、IL-1等)的干预手段在临床治疗脓毒症患者时，均不能明显改善脓毒症患者的生存时间。
目前进行的针对TLRs各个环节多种干预治疗的研究，尽管在动物实验中取得了满意的结果，但遗憾的是迄今没有一项实验成果能够通过Ⅲ期临床研究，因此寻找脓毒症治疗的新策略显得尤为迫切和重要。
因此针对现有技术不足，亟待提供一种新的脓毒症治疗理论并发现潜在的治疗靶点。RAGE是Ⅰ型免疫球蛋白超家族跨膜受体的成员之一，属于多配体受体，能够与多种炎性配体结合(如AGEs、HMGB1、Aβ、S100/钙粒蛋白等)，从而激活细胞内的包括转录因子NF-κB、MAPKs、黏附因子在内的多种信号分子，最终引起急性和慢性炎症。基于RAGE在维持和放大炎症反应的关键性作用，越来越多的研究表明这种受体参与到多种炎症相关性疾病的病理过程。该发明以脓毒症为例，提供一种靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域在作为治疗脓毒症等RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途以解决现有技术不足甚为必要。
发明内容
本发明的目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，能够竞争性结合于RAGE受体的胞浆内段，拮抗脓毒症发生发展过程中RAGE与SLP76相互作用介导的细胞信号转导，从而减轻脓毒症过程中炎症因子的释放，从而发挥治疗脓毒症或改善预后的作用。
本发明的上述目的通过以下技术措施实现：
提供靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76(SH2domain containing leukocyteprotein of 76kDa)的SAM功能结构域，进入细胞内之后与细胞膜表面受体RAGE胞浆内段结合，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
优选的，所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，SLP76蛋白的SAM功能结构域通过细胞穿透肽带入细胞内。
优选的，所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，SLP76蛋白的SAM功能结构域通过TAT细胞穿透肽带入细胞内。
优选的，所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，氨基酸序列为YGRKKRRQRRRVLAWNSDNLADYF RKLNYRDCEKAVKKYHIDGARFLNLTENDIQKFPKLRMPLLSKLSQDINKNEER。
优选的，所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。
优选的，所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，在作为治疗RAGE介导的相关炎症性疾病包括脓毒症、肿瘤、心血管、脑血管、神经退行性疾病等炎性疾病的药物方面的用途。
本发明的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，进入细胞内之后与细胞膜表面受体RAGE胞浆内段结合，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
本发明同时提供一种细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，细胞穿透肽TAT作为运转载体将SLP76蛋白的SAM功能结构域带入细胞内之后结合于受体RAGE胞浆内段，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
优选的，细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。
本发明的细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，作为抑制脓毒症发病过程中炎症反应的药物用途。通过细胞穿透肽TAT将SLP76蛋白的SAM功能结构域带到细胞内，竞争性结合于RAGE受体的胞浆内段，拮抗脓毒症发生发展过程中RAGE与SLP76相互作用介导的细胞信号转导，减轻脓毒症过程中炎症因子的释放，从而发挥治疗脓毒症或改善预后的作用。
本发明的另一目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种用于治疗脓毒症TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白的靶向药。该用于治疗脓毒症的TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白的靶向药将SLP76蛋白的SAM功能结构域与细胞穿透肽HIV转录病毒反式激活因子(HIV transactivator of transcription，TAT)结合合成融合蛋白作为干预治疗的策略。
本发明的上述目的通过以下技术措施实现：
提供一种用于治疗RAGE相关炎性疾病的融合蛋白TAT-SAM的靶向药，含有上述的融合蛋白TAT-SAM。
优选的，所述靶向药为静脉注射方式用药。
优选的，所述靶向药包括有以小分子化合物、染料、多肽、多肽核酸、蛋白质、质粒DNA、siRNA、200nm的脂质体、噬菌体颗粒和超顺磁性粒子等为载体介导SLP76蛋白的SAM功能结构域进入细胞内的方式。
该用于治疗RAGE相关炎性疾病的融合蛋白TAT-SAM的靶向药，非经典内吞方式直接穿过细胞膜进入细胞的多肽，其重要特点是可以携带多种不同大小和性质的生物活性物质进入细胞。TAT是细胞穿透肽蛋白中的一段长度为11个氨基酸残基，碱性氨基酸序列为YGRKKRRQRRR，作为载体的优势在于低毒性和无细胞类型的限制。
本发明的上述目的通过以下技术措施实现：
本发明的一种细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM的应用方法，通过噬菌体展示技术从人肺cDNA文库经过筛选得到能够与RAGE胞浆内段结合的噬菌体克隆，筛选得到与RAGE受体胞浆内段发生相互作用的接头蛋白SLP76。通过突变体以及免疫共沉淀的技术方法筛选得到能够与RAGE受体胞浆内段结合的SLP76蛋白SAM功能结构域，提出使用细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白SAM功能结构合成融合蛋白，进而通过细胞穿透肽TAT的功能将SAM功能结构域带入细胞内，靶向作用于RAGE的胞浆内段，竞争性抑制SLP76与RAGE的结合，从而阻断脓毒症等RAGE介导的炎性相关性疾病的发生发展过程，具有一定的创新性和明确的临床应用前景。
附图说明
利用附图对本发明作进一步的说明，但附图中的内容不构成对本发明的任何限制。
图1为TAT-EGFP进入RAW264.7细胞的浓度效应结果图。
图2为T7噬菌体展示技术流程结果图。
图3为T7噬菌体展示技术的筛选轮次结果图。
图4为RAGE与SLP76相互作用体外结合实验结果图。
图5为RAGE与SLP76相互作用具有AGEs刺激时间和浓度依赖性结果图。
图6为SLP76蛋白功能结构域可募集不同的接头蛋白并形成接头蛋白复合体示意图。
图7为SAM结构域介导SLP76与RAGE之间的相互作用结果图。
图8为TAT-SAM预处理显著抑制AGEs引起的细胞内信号通路的活化结果图。
图9为TAT-SAM预处理可显著降低AGEs刺激所诱导的细胞因子释放结果图。
图10为TAT-SAM干预治疗可显著降低CLP脓毒症模型小鼠血清内细胞因子以及趋化因子的释放结果图。
图11为TAT-SAM干预治疗CLP诱导的模型小鼠肝、肺损伤情况结果图。
图12为TAT-SAM干预治疗脓毒症模型小鼠存活率结果图。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1。
一种靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，进入细胞内之后与细胞膜表面受体RAGE胞浆内段结合，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
其中，SLP76蛋白的SAM功能结构域通过细胞穿透肽带入细胞内，具体可通过TAT细胞穿透肽带入细胞内。
上述靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，氨基酸序列为YGRKKRRQRRRVLAWNSDNLADYF RKLNYRDCEKAVKKYHIDGARFLNLTENDIQKFPKLRMPLLSKLSQDINKNEER。
该靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面具有明确的用途。具体，在作为治疗干预脓毒症等RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途，RAGE介导的相关炎症性疾病包括肿瘤、心血管、脑血管、神经退行性疾病等。
本发明的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，进入细胞内之后与细胞膜表面受体RAGE的胞浆内段结合，拮抗内源性SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
本实施例还提供一种细胞穿透肽TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，细胞穿透肽TAT作为运转载体将SLP76蛋白的SAM功能结构域带入细胞内之后结合于受体RAGE胞浆内段，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
融合蛋白TAT-SAM，在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。用于作为抑制RAGE介导的信号转导通路的活化，包括有HIV转录病毒反式激活因子的TAT细胞穿透肽合成蛋白和SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白。
其中TAT细胞穿透肽合成蛋白为具有11个氨基酸残基的合成蛋白。
TAT细胞穿透肽合成蛋白的氨基酸序列为YGRKKRRQRRR。
该TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白，作为治疗脓毒症中炎症药物的用途。通过细胞穿透肽(CPPs)TAT将SLP76蛋白的SAM功能结构域(sterileαmotif)带到细胞内，竞争性结合于RAGE受体的胞浆内段，拮抗脓毒症发生发展过程中RAGE与SLP76相互作用介导的细胞信号转导，减轻脓毒症过程中炎症因子的释放，从而发挥治疗脓毒症或改善预后的作用。
实施例2。
一种用于治疗脓毒症TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白的靶向药,具有TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白。
该用于治疗脓毒症TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白的靶向药为静脉注射方式用药。
该靶向于SLP76蛋白SAM功能结构域用于治疗脓毒症的靶向药包括有小分子化合物、染料、多肽、多肽核酸、蛋白质、质粒DNA、siRNA、200nm的脂质体、噬菌体颗粒和超顺磁性粒子等介导SLP76蛋白SAM功能结构域进入细胞内的方式。
TAT是细胞穿透肽蛋白中的一段长度为11个氨基酸残基，碱性氨基酸序列为YGRKKRRQRRR。该细胞穿透肽蛋白作为载体的优势在于低毒性和无细胞类型的限制。细胞穿透肽TAT与EGFP荧光蛋白的融合蛋白(TAT-EGFP)验证其细胞穿透能力，如图1。实验结果表明，TAT-EGFP能浓度依赖性的将EGFP带入到细胞内。
该用于治疗脓毒症TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域融合蛋白的靶向药，以非经典内吞方式直接穿过细胞膜进入细胞的多肽，其重要特点是可以携带多种不同大小和性质的生物活性物质进入细胞。TAT是细胞穿透肽蛋白中的一段长度为11个氨基酸残基，碱性氨基酸序列为YGRKKRRQRRR，作为载体的优势在于低毒性和无细胞类型的限制。
实施例3。
一种鉴定RAGE受体胞浆内段相互作用蛋白的筛选方法：通过噬菌体展示技术从cDNA文库经过筛选得到能够与RAGE胞浆内段结合的噬菌体克隆，经3轮筛选后得到能够与RAGE胞浆内段结合的SLP76蛋白。本发明的cDNA文库为人肺cDNA文库。本发明的筛选次数为2～5次。本实施例具体的筛选次数为3次。
需说明的是，本发明的筛选次数可以为3次，也可以为2、4或者5次，具体的实施情况根据实际情况而定。
本发明以T7噬菌体展示实验从人肺cDNA文库中经过3轮筛选得到能够与RAGE胞浆内段结合的噬菌体克隆，经过验证和DNA测序鉴定，共筛选出12种结合蛋白，如图2和图3。其中的一种结合蛋白为本发明中的血源性细胞所特有的接头蛋白SLP76。
本发明据实验原核表达或真核表达纯化带有GST标签的RAGE和带有His标签的SLP76融合蛋白，通过pull down体外结合实验，通过体外结合实验验证RAGE与SLP76蛋白之间的离体相互作用，实验结果如图4。
为了进一步验证RAGE与SLP76之间的相互作用，本发明将pcDNA3-HA-RAGE和cDNA3-Flag-SLP76质粒过表达于HEK293细胞中，然后使用100μg/ml的AGEs刺激HEK293细胞，实验分为7组，分别为AGEs刺激0min、10min、15min、30min、60min、90min和120min；或者使用不同浓度AGEs，具体本为0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml和200μg/ml分别刺激15min。裂解细胞使用免疫共沉淀方法在HEK293细胞内验证外源性RAGE与SLP76之间的相互作用，如图5中的A，图5中的B，图5中的C。
此外，本发明使用SLP76和RAGE的特异性抗体在RAW264.7细胞中验证其内源性蛋白的相互作用，结果表明RAGE和SLP76相互作用的刺激依赖性及其量效关系，如图5中的D。
SLP76具有四个不同的功能结构域，通过这些结构域SLP76可募集不同的接头蛋白并形成接头蛋白复合体，如图6。
本发明经过对SLP76蛋白的基因序列及其分子结构进行分析，结合之前的研究，构建了的四种不同的突变体：pcDNA3-Flag-SLP76-145A、pcDNA3-Flag-SLP76-173A、pcDNA3-Flag-SLP76-207A和pcDNA3-Flag-SLP76-ΔSAM。通过这四种突变体来研究RAGE和SLP76的相互作用的结合结构域，以研究具体是哪个结构域在与RAGE的相互作用中起到重要作用。
本发明分别将SLP76野生型以及各突变体质粒与RAGE野生型质粒共转染入HEK293细胞中，然后给予100μg/mlAGEs刺激15min，对细胞蛋白提取物使用偶联了HA抗体的beads进行免疫共沉淀实验，如图7。SLP76蛋白的SAM结构与缺失突变体能够降低AGEs诱导的SLP76与RAGE受体的相互作用，且SAM结构域缺失后的影响更为显著。
一种TAT与SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白的应用方法，通过噬菌体展示技术从cDNA文库经过筛选得到能够与RAGE胞浆内段结合的噬菌体克隆，筛选得到能够与RAGE胞浆内段发生相互作用蛋白SLP76。通过突变体及免疫共沉淀技术方法筛选得到的SLP76蛋白的SAM功能结构域并将其与细胞穿透肽TAT合成融合蛋白，进而通过细胞穿透肽TAT的作用进入细胞内，靶向作用于RAGE的胞浆内段，竞争性抑制SLP76与RAGE的结合，从而阻断脓毒症的发生发展过程，具有较好的创新性和临床应用价值。
实施例4。
本发明的合成TAT融合蛋白以及以TAT细胞穿透肽为载体的SLP76功能结构域融合短肽，即TAT-SAM细胞内信号转导通路的活化的效果实验。将RAW264.7细胞以1×105个每孔种入24孔板中，刺激前使用TAT或TAT-SAM(2μM)融合蛋白预处理细胞30min，然后使用AGEs(100μg/ml)刺激观察细胞15min，观察融合蛋白预处理对AGEs刺激引起的信号转导通路的影响。图8的实验结果表明，TAT-SAM预处理可显著抑制AGEs引起的细胞内信号转导通路的活化。
再将RAW264.7细胞以1×105个每孔种入24孔板中，刺激前使用TAT或TAT-SAM(2μM)融合蛋白预处理细胞30min，然后使用AGEs(100μg/ml)刺激观察细胞12h，观察融合蛋白预处理对AGEs刺激引起验证因子释放的影响。图9的实验结果表明，TAT-SAM预处理可显著降低AGEs诱导的细胞因子释放。
实施例5。
本发明以盲肠结扎穿孔术(cecal ligation andpuncture，CLP)诱导小鼠脓毒症模型。CLP模型是经典的脓毒症模型，被广泛应用于脓毒症和脓毒症休克的实验研究，在这个模型中，脓毒症发病于腹腔内的多种致病菌感染，随后是致病菌侵袭入血，最终触发系统性炎症反应。
具体方法如下：消毒，沿小鼠腹白线中段作切口，探查取出盲肠，用丝线距盲端1cm处结扎，用针穿刺孔，挤出少许粪便于腹腔内，回纳盲肠，分层缝合腹腔。脓毒症模型制备好后将小鼠固定，经尾缘静脉注射TAT-SAM(10μM)融合蛋白到小鼠体内进行干预治疗。
图10的实验结果表明，TAT-SAM进入细胞后可竞争性的阻断内源性SLP76与RAGE胞浆内段的相互作用，从而降低脓毒症模型小鼠血清中细胞因子和趋化因子的释放。
实施例6。
本发明以CLP诱导小鼠脓毒症模型，随后经尾缘静脉注射TAT-SAM(10μM)融合蛋白到小鼠体内进行干预治疗。CLP后12小时取小鼠肝脏及肺脏组织，HE染色后观察其器官损伤。图11的实验结果表明，与Sham组及CLP+TAT组相比，TAT-SAM可显著性降低CLP诱导的模型小鼠肝、肺损伤情况。
此外，同样使用CLP脓毒症模型小鼠，给予TAT-SAM(10μM)融合蛋白干预治疗，观察小鼠7天存活率。图12的结果表明，与Sham组及CLP+TAT组相比，TAT-SAM并显著提高脓毒症小鼠的存活率。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
序列表
<110> 南方医科大学
<120> 靶向RAGE胞浆内段接头SLP76及其SAM的用途
<130> GZZRH0504-18-1-675
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 78
<212> PRT
<213> 人工序列(artificial)
<400> 1
Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Val Leu Ala Trp Asn
1 5 10 15
Ser Asp Asn Leu Ala Asp Tyr Phe Arg Lys Leu Asn Tyr Arg Asp Cys
20 25 30
Glu Lys Ala Val Lys Lys Tyr His Ile Asp Gly Ala Arg Phe Leu Asn
35 40 45
Leu Thr Glu Asn Asp Ile Gln Lys Phe Pro Lys Leu Arg Met Pro Leu
50 55 60
Leu Ser Lys Leu Ser Gln Asp Ile Asn Lys Asn Glu Glu Arg
65 70 75

Claims (9)

1.靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：进入细胞内之后与细胞膜表面RAGE受体的胞浆内段结合，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低细胞因子的释放。
2.根据权利要求1所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：SLP76蛋白的SAM功能结构域通过细胞穿透肽带入细胞内。
3.根据权利要求2所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：SLP76蛋白的SAM功能结构域通过TAT细胞穿透肽带入细胞内。
4.根据权利要求1或2或3所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：氨基酸序列为YGRKKRRQRRRVLAWNSDNLADYF
RKLNYRDCEKAVKKYHIDGARFLNLTENDIQKFPKLRMPLLSKLSQDINKNEER。
5.如权利要求4所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。
6.根据权利要求5所述的靶向RAGE胞浆内段接头蛋白SLP76的SAM功能结构域，其特征在于：在作为治疗干预脓毒症RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途，至少包括肿瘤、心血管、脑血管、神经退行性疾病。
7.细胞穿透肽TAT与如权利要求1至6任意一项所述的SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，其特征在于：细胞穿透肽TAT作为运转载体将SLP76蛋白的SAM功能结构域带入细胞内之后结合于受体RAGE胞浆内段，拮抗SLP76蛋白与RAGE受体的结合，抑制RAGE介导的下游信号转导，降低促炎细胞因子的释放。
8.细胞穿透肽TAT与如权利要求7所述的SLP76蛋白的SAM功能结构域的融合蛋白TAT-SAM，其特征在于：在作为治疗RAGE相关炎性疾病的药物方面的用途。
9.一种用于治疗RAGE相关炎性疾病的融合蛋白TAT-SAM的靶向药，其特征在于：含有如权利要求8所述的融合蛋白TAT-SAM。
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