CN109479704A - 一种早熟蟠桃胚挽救的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种早熟蟠桃胚挽救的方法，属于胚挽救技术领域，包括以下步骤：1)早熟蟠桃母株在避雨设施内杂交后，进行母株管理；2)花朵露红期和盛花后40d内喷施多效唑150～250倍液；3)果实硬核期疏果；4)果实成熟前4～8d进行采收，获得离体果实；5)从步骤4)中所述的离体果实中分离蟠桃胚，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中在2～6℃培养70～90d获得接种胚；6)将所述接种胚置于18～25℃光照条件下培养和移栽。本发明提供的方法的萌发率、成苗率和移栽成活率均较高。

Description

一种早熟蟠桃胚挽救的方法

技术领域

本发明属于植物育种技术领域，尤其涉及一种早熟蟠桃胚挽救的方法。

背景技术

蟠桃是桃的变种，因其风味独特、外观奇异、食用方便、可食率高等特点，受到人们的广泛喜爱。但是蟠桃果实易出现烂顶，不耐贮藏，并且成熟期比较集中，限制了蟠桃产业的发展。因此，培育早熟耐贮品种是目前蟠桃育种的重要目标之一。早熟品种因果实发育期短，种子发育不完整，胚易出现败育，利用常规的播种方法育苗，蟠桃种子的发芽率很低，利用胚挽救技术能够促进非成熟胚的继续发育，有助于提高早熟蟠桃亲本种胚的萌发率，是提高蟠桃育种效率的关键技术。蟠桃与圆桃相比，具有以下几个特点1)幼果期更容易遭受低温和高温的伤害，落果严重；2)果实在露天栽培条件下，果顶容易开裂并造成裂核流胶，降低好果比例；3)蟠桃种胚较圆桃败育比例更高，4)蟠桃胚形状为圆球型，子叶半圆型，去除种皮后两个子叶容易散落，接种困难。5)蟠桃较圆桃品种树体更容易疯长，造成徒长枝条多，花芽数量少。

传统的胚挽救技术大多是关于圆桃的，蟠桃的研究较少，不适于应用于蟠桃的胚挽救。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种裂果率低、萌芽率、成苗率和移栽成活率高的早熟蟠桃胚挽救的方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种早熟蟠桃胚挽救的方法，包括以下步骤：

1)早熟蟠桃母株在避雨设施内杂交后，进行母株管理，所述母株管理包括疏除徒长枝、过密枝和喷施多效唑150～250倍液；

2)花朵露红期和盛花后40d内喷施多效唑150～250倍液；

3)果实硬核期疏果，长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

4)果实成熟前4～8d进行采收，获得离体果实；

5)从步骤4)中所述的离体果实中分离蟠桃胚，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中在2～6℃培养70～90d获得接种胚；

6)将所述接种胚置于18～25℃光照条件下培养和移栽。

优选的，步骤5)中所述WPM培养基中还包括0.1～2mg/L的6-BA。

优选的，所述蟠桃胚分离后、接种前还包括在蟠桃胚的种皮上划1～4个划口。

优选的，在所述母株的花期和幼果期进行温度控制，所述花期和幼果期的温度控制为0～30℃。

优选的，所述花期和幼果期的温度控制为15～28℃。

优选的，步骤1)中所述多效唑150～250倍液、步骤2)中所述多效唑150～250倍液的喷施程度为：喷施至叶面滴水。

优选的，在步骤5)从离体果实中分离蟠桃胚之前对离体果实进行消毒。

优选的，所述消毒为将所述离体果实置于NaClO溶液中浸泡8～12min后，置于乙醇水溶液中浸泡8～12min。

优选的，所述NaClO溶液的质量浓度为4.5～5.5％，所述乙醇水溶液的体积浓度为60～80％。

优选的，所述避雨设施为单栋大棚或连栋大棚。

本发明的有益效果：

本发明提供了一种早熟蟠桃胚挽救的方法，在避雨设施内进行蟠桃的杂交工作，防止蟠桃裂果；喷施多效唑150～250倍液，抑制树体旺长和徒长枝的形成，促进花芽的形成和坐果；增加疏果时的留果量，使得离体果实个头相对较小，种仁发育良好，胚败育率低，适合接种培养；在果实成熟期前4～8d进行采摘，此时采摘，离体果实中胚已发育完善，离体果实糖度低，细菌少，接种后污染率低。

进一步的，本发明所述WPM培养基中还包括0.1～2mg/L的6-BA，所述6-BA可以促进生根，使植株生长健壮，提高移栽成活率。

进一步的，由于蟠桃种子为圆型，拿在手里容易滑落，种皮的剥离操作困难，本发明不对种皮进行剥离，而是在种皮上划1～4个划口，操作简单，并且能够增加胚的透气性，促进种子的萌发。

根据本发明实施例的记载，本发明所述蟠桃胚挽救方法与传统操作方法相比，杂交果的座果率增加了7％左右，果实的裂果率减少9％，病虫果率减少5％，种仁的饱满比例增加12％，出苗率提高9％，每棵树得到的杂交苗数量是对照的2.4倍，大大提高了蟠桃的育种效率。

附图说明

图1为蟠桃试管苗萌发情况；

图2为蟠桃胚挽救苗移栽前植株生长情况；

图3为蟠桃胚挽救苗移栽到营养钵中；

图4为营养钵中蟠桃杂交苗生长情况。

具体实施方式

一种早熟蟠桃胚挽救的方法，包括以下步骤：

1)早熟蟠桃母株在避雨设施内杂交后，进行母株管理，所述母株管理包括疏除徒长枝、过密枝和喷施多效唑150～250倍液；

2)花朵露红期和盛花后40d内喷施多效唑150～250倍液；

3)果实硬核期疏果，5-15cm的果枝留1个果，15-30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

4)果实成熟前4～8d进行采收，获得离体果实；

5)从步骤4)中所述的离体果实中分离蟠桃胚，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中在2～6℃培养70～90d获得接种胚；

6)将所述接种胚置于18～25℃光照条件下培养和移栽。

本发明将早熟蟠桃母株在避雨设施内杂交后，进行母株管理。本发明对所述早熟蟠桃母株的品种没有特殊限定采用本领域常规的早熟蟠桃品种即可，在本发明具体实施过程中，所述早熟蟠桃母株的品种为‘沪蟠1号’，所述‘沪蟠1号’的果实成熟期在7月中上旬。本发明中用于与母株杂交的父本的品种没有特殊要求，可以为蟠桃品种或油桃品种，在本发明具体实施过程中，所述父本的品种优选为‘沪油005’。本发明中所述杂交操作采用本领域常规的杂交操作即可，具体的包括以下步骤：选择父本后，取父本花粉；如果父本花期早于母本花期，取当年生父本花药，烘干，得到父本花粉；如果父本花期晚于母本花期，则在前一年春季取父本花药，用硫酸纸包裹父本花药，埋入硅胶中20～30℃，1～2d进行阴干处理，散粉后-20℃保存1～3年。母本初花期时，第一授粉在花朵开放数量占总花苞数量的4％～6％时进行，将大苞花蕾用指甲掐去花被、雄蕊和花瓣(连被去雄)，使用铅笔的橡皮头将花粉点在柱头上；第二授粉在大苞数量占剩余花苞的数量≥60％时进行。大苞指气球期(气球期)的花苞，是花朵含苞欲放的状态。避雨设施内的温度优选为15～25℃。本发明中，所述避雨设施优选为单栋大棚或连栋大棚，所述避雨设施也可以为其他能够避雨保温的设施。本发明在所述的杂交操作后，进行母株管理，所述母株管理包括疏除徒长枝、过密枝和喷施多效唑150～250倍液。在本发明中，所述疏除徒长枝、过密枝优选的在5～9月份进行，所述疏除徒长枝、过密枝的方法采用本领域常规方法即可。本发明中，所述喷施多效唑150～250倍液优选的在7月中旬进行，所述喷施多效唑150～250倍液的作用为抑制新稍的生长，促进花芽的形成。

本发明在花朵露红期和盛花后40d内喷施多效唑150～250倍液；本发明中所述喷施多效唑150～250倍液的作用为控制旺长，放止落果，提高座果率。本发明优选的在所述母株的花期和幼果期进行温度控制，所述花期和幼果期的温度控制为0～30℃，优选为15～28℃；所述温度控制优选的通过开关避雨设施单栋大棚或连栋大棚的棚膜进行。本发明中，所述温度控制的目的是预防低温和高温对果实的伤害，由于蟠桃呈扁平型，果顶和果柄与种仁之间的果肉厚度较圆桃薄，因此更容易受外界温度的影响，花期和坐果期的温度过高或过低均会造成大量落果。

本发明在果实硬核期疏果。本发明中所述疏果根据果枝的长度进行，具体为长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；本发明所述疏果方法留果量为常规疏果方法的留果量的1.5～2倍，留果量多，每一个果实的个头相对较小，常规生产留果量少，追求个头较大的果，但是大果果肉较厚，果肉中的激素高于种子中的激素含量，造成胚败育率比较高，本发明增加留果量，果实个头中等或者较小，种仁发育更好，更适合接种培养。

本发明在所述果实成熟前4～8d进行采收，获得离体果实。在本发明中所述果实成熟前4～8d时，果皮由绿转白或转黄，此时果实糖度较低，操作起来细菌较少，接种后污染率低。本发明对所述采收没有特殊限定，采用本领域常规的蟠桃采收方法即可。本发明在获得所述离体果实后，优选的对所述离体果实进行消毒；本发明中，所述消毒为将所述离体果实置于NaClO溶液中浸泡后，置于乙醇水溶液中浸泡。本发明中，所述NaClO溶液的质量浓度优选为4.5～5.5％，更优选为5％；所述NaClO溶液中浸泡的时间优选为8～12min，更优选为10min；所述乙醇水溶液的体积浓度优选为60～80％，更优选为70％，所述置于乙醇水溶液中浸泡的时间优选为8～12min，更优选为10min。

本发明在所述离体果实消毒后，从所述的离体果实中分离蟠桃胚，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中在2～6℃培养70～90d获得接种胚。本发明在获得所述离体果实后，优选的立即从所述的离体果实中分离蟠桃胚。如果无法实现立即从所述的离体果实中分离蟠桃胚，优选的将所述离体果实晾干，进行果实冷藏；所述果实保藏的容器优选为塑料袋，更优选为塑料马夹袋；所述塑料马夹袋的规格优选为(35～40)cm×(45～55)cm，更优选为38cm×50cm；每个塑料马夹袋盛放的果实数量优选为50～70个，更优选为55～65个；所述塑料马夹袋上有圆形气孔；所述每个塑料马夹袋上圆形气孔的数量优选为6～8个；所述圆形气孔的直径优选为4～6cm，更优选为5cm；本发明对圆形气孔的分布位置没有特殊要求；在本发明中，规格为38cm×50cm的塑料马夹袋既方便搬运，又可以降低因为一个大袋子内有桃发霉对周围桃的污染的问题。采用本发明所述的塑料马夹袋可以对所述离体果实保藏15～20d。

本发明对所述分离蟠桃胚的方法没有特殊限定，采用本领域常规的分离蟠桃胚的方法即可，在本发明具体实施过程中，将所述离体果实使用剪刀从缝合线的地方剖开。本发明在获得所述蟠桃胚后，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中培养获得接种胚。本发明在所述接种前优选的还包括在所述蟠桃胚的种皮上划1～4个划口，优选为2～3个，本发明中，优选的采用解剖刀进行种皮划口。本发明中在蟠桃种皮上划划口，不进行种皮剥离，操作简单，并且能够增加胚的透气性，促进种子的萌发。本发明中，所述WPM培养基为市售WPM培养基，优选的购自青岛海博生物技术有限公司，所述WPM培养基成分以mg/L计，如下硝酸钙556、硝酸铵400、磷酸二氢钾170、硫酸镁370、氯化钙96、硫酸钾990、EDTA-2Na 37.3、硫酸亚铁27.8、硼酸6.2、硫酸锰22.4、硫酸锌8.6、钼酸钠0.25、硫酸铜0.25、肌醇100、甘氨酸2盐酸硫胺素1、盐酸吡哆醇0.5、烟酸0.5。本发明所述WPM培养基中优选的还包括0.1～2mg/L的6-BA，更优选为0.5～1.5mg/L；本发明在所述WPM培养基中添加6-BA可以促进生根，使植株生长健壮，提高移栽成活率。本发明中所述培养的温度优选为3～5℃，更优选为4℃；所述培养的时间优选为75～85d。

本发明在获得所述接种胚后，将所述接种胚置于18～25℃光照条件下培养和移栽。本发明对所述培养和移栽没有特殊限定，采用本领域常规的培养和移栽操作即可。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

避雨设施：单栋大棚

早熟蟠桃母株：‘沪蟠1号’，该品种由上海市农业科学院选育的蟠桃品种，花期3月24日，果实成熟期为7月中旬，是优良的早熟蟠桃品种。

父本：‘沪油005’

实验组：

在单栋大棚内杂交授粉后，进行母株管理，7月中旬，喷施多效唑150～250倍液抑制新稍的生长，促进花芽的形成，喷液量以叶面滴水为度；

花朵露红期和盛花后40d根据树势喷施多效唑150～250倍液，喷液量以叶面滴水为度；

花期和幼果期通过开关棚膜进行温度的调控，预防低温和高温对果实的伤害；控制温度在15～25℃；

疏果时留果量是常规留果量的1.5倍，长度小于15cm的果枝留1个果，15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

果实成熟前7d(7月6日)，果皮由绿转白或转黄时集中采收；采收后的离体果实放入5％的NaClO消毒10min，然后放入70％的酒精消毒10min。晾干后，置于塑料马夹袋中保藏，等待接种；

在超净工作台上用剪刀破核取出种子，用消毒干净的解剖刀在种子侧面划伤2～3下来代替传统的剥皮处理，然后接种在培养基中，接种用的WPM培养基添加1.5mg/L的6-BA；10个种胚为一组，三次重复。

接种后冷库中4℃放置80d即可满足种植打破休眠所需的需冷量；

接种胚出库后光照条件下20℃条件下培养即可萌发移栽。

试管苗长到一定大小后，进行移苗和统计调查。

调查方法：

幼苗从试管中移在到基质中时调查下列指标：

(a)胚的萌芽率＝(萌芽数/接种数)×100％(萌发数是指苗具有根、茎、叶的其中一种)；

(b)胚的成苗率＝(正常苗数/接种数)×100％(萌发数是指苗具有5条和5条以上的根的发育正常的苗数)；

(c)移栽的成活率＝(成活苗数/移栽数)×100％(成活苗数是指移栽30天后调查，正常生长的苗数)；

(d)幼苗的顶部指数(1级，胚死亡；2级，胚绿色或白色但没有成芽；3级，苗弱，顶部枯死；4级苗弱，生长不良；5级苗健壮)；

(e)根部级别(1级，少于5条根；2级，5-10条根；3级，11-20条根；4级，不少于21条根)；

(f)污染率＝(污染数/接种数)×100％

(7)数据整理和作图使用EXCEL软件，显著性分析使用SPSS软件。

对照组1

除了在6月22日采收，使用SH培养基进行种胚培养，其他操作与实验组一致。

对照组2

除了在6月30日采收，使用SH培养基进行种胚培养，其他操作与实验组一致。

萌发率、成苗率和移栽成熟率结果见表1。

由表1可以看出，随着取样时期的延后，果实发育的时间增加，种胚的发育的逐渐充实，种胚的萌发率和成苗率升高。7月6日取样接种的种胚发育时间最长，种胚比较饱满，种胚的萌发率最高，为47.2％。6月22日的种胚萌发率最低，种胚很难成型，呈现碎块状。7月6日的成苗率最高，显著高于其他两个时期。

表1不同取样时间对胚挽救的影响

实施例2

避雨设施：单栋大棚

早熟蟠桃母株：‘沪蟠1号’，该品种由上海市农业科学院选育的蟠桃品种，花期3月24日，果实成熟期为7月中旬，是优良的早熟蟠桃品种。

父本：‘沪油005’

实验组：

在单栋大棚内杂交授粉后，进行母株管理，7月中旬，喷施多效唑150～250倍液抑制新稍的生长，促进花芽的形成，喷液量以叶面滴水为度；

花朵露红期和盛花后40d根据树势喷施多效唑150～250倍液，喷液量以叶面滴水为度；

花期和幼果期通过开关棚膜进行温度的调控，预防低温和高温对果实的伤害；控制温度在15～25℃；

疏果时留果量是常规留果量的1.5倍，长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

果实成熟前7d(7月6日)，果皮由绿转白或转黄时集中采收；采收后的离体果实放入5％的NaClO消毒10min，然后放入70％的酒精消毒10min。晾干后，置于塑料马夹袋中保藏，等待接种；

在超净工作台上用剪刀破核取出种子，用消毒干净的解剖刀在种子侧面划伤2～3下来代替传统的剥皮处理，然后接种在培养基中，接种用的WPM培养基添加1.5mg/L的6-BA；10个种胚为一组，三次重复。

接种后冷库中4℃放置70d即可满足种植打破休眠所需的需冷量；

接种胚出库后光照条件下20℃条件下培养即可萌发移栽。

试管苗长到一定大小后，进行移苗和统计调查。

实施例3

避雨设施：单栋大棚

早熟蟠桃母株：‘沪蟠1号’，该品种由上海市农业科学院选育的蟠桃品种，花期3月24日，果实成熟期为7月中旬，是优良的早熟蟠桃品种。

父本：‘沪油005’

在单栋大棚内杂交授粉后，进行母株管理，7月中旬，喷施多效唑150-250倍液抑制新稍的生长，促进花芽的形成，喷液量以叶面滴水为度；

花朵露红期和盛花后40d根据树势喷施多效唑150～250倍液，喷液量以叶面滴水为度；

花期和幼果期通过开关棚膜进行温度的调控，预防低温和高温对果实的伤害；控制温度在15～25℃；

疏果时留果量是常规留果量的1.5倍，长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

果实成熟前7d(7月6日)，果皮由绿转白或转黄时集中采收；采收后的离体果实放入5％的NaClO消毒10min，然后放入70％的酒精消毒10min。晾干后，置于塑料马夹袋中保藏，等待接种；

在超净工作台上用剪刀破核取出种子，用消毒干净的解剖刀在种子侧面划伤2～3下来代替传统的剥皮处理，然后接种在培养基中，接种用的WPM培养基添加1.5mg/L的6-BA；10个种胚为一组，三次重复。

接种后冷库中4℃放置80d即可满足种植打破休眠所需的需冷量；

接种胚出库后光照条件下20℃条件下培养即可萌发移栽。

试管苗长到一定大小后，进行移苗和统计调查。

实施例4

避雨设施：单栋大棚

早熟蟠桃母株：‘沪蟠1号’，该品种由上海市农业科学院选育的蟠桃品种，花期3月24日，果实成熟期为7月中旬，是优良的早熟蟠桃品种。

父本：‘沪油005’

在单栋大棚内杂交授粉后，进行母株管理，7月中旬，喷施多效唑150～250倍液抑制新稍的生长，促进花芽的形成，喷液量以叶面滴水为度；

花朵露红期和盛花后40d根据树势喷施多效唑150～250倍液，喷液量以叶面滴水为度；

花期和幼果期通过开关棚膜进行温度的调控，预防低温和高温对果实的伤害；控制温度在15～25℃；

疏果时留果量是常规留果量的1.5倍，长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

果实成熟前7d(7月6日)，果皮由绿转白或转黄时集中采收；采收后的离体果实放入5％的NaClO消毒10min，然后放入70％的酒精消毒10min。晾干后，置于塑料马夹袋中保藏，等待接种；

在超净工作台上用剪刀破核取出种子，用消毒干净的解剖刀在种子侧面划伤2～3下来代替传统的剥皮处理，然后接种在培养基中，接种用的WPM培养基添加1.5mg/L的6-BA；10个种胚为一组，三次重复。

接种后冷库中4℃放置90d即可满足种植打破休眠所需的需冷量；

接种胚出库后光照条件下20℃条件下培养即可萌发移栽。

试管苗长到一定大小后，进行移苗和统计调查。

实施例2～4中的萌发率、成苗率和移栽成活率的结果见表2。由表2可以看出，胚萌发率和成苗率随着低温处理时间延长而呈下降趋势。其中70d、80d、90d低温处理后的萌发率依次是47.22％、25％、19.44％，成苗率依次是42.0％、22.2％％、19.4％，70d低温处理的萌发率和成苗率显著高于后两个处理。三种处理中以低温处理70d移栽成活率最低，但是三个处理差异未达到显著性。说明种胚经过适当的低温处理可以提高种胚的萌发率，但是过长时间的低温处理反而会对种胚造成伤害，不利于种胚的萌发。

表2不同低温处理时间对胚挽救各指标影响

实施例2～4所述方法获得的移栽秒的顶级、根级、株高、根量、根长见表3，由表3可以看出，低温80d处理的幼苗叶片数显著高于低温70d处理的幼苗。顶级、根级、株高、根量、根长均未出现显著差异。

表3不同低温处理时间对幼苗生长的影响

实施例5

外源激素对胚挽救的影响

获得接种胚培养基：以WPM作为基础培养基，分别在培养基中添加0.5、1、2mg/L浓度的赤霉素GA₃，0.5、1、2mg/L浓度的吲哚-3-乙酸IAA(细胞生长素)，0.5、1、2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤6-BA(细胞分裂素)，其余方法同实施例1实验组。

由表4可知，随着GA3浓度的升高萌发率呈上升趋势，分别比对照增加了11.2％，25.0％，45％。IAA三个浓度分别比对照增加了25.0％，0，22.1％，6-BA三个浓度分别比对照增加了22.1％，25.0％，14.7％。三类激素除1mg/L的IAA浓度外均能提高胚的萌发率，但是以GA₃(2mg/L)处理的种胚萌发率最高，与对照差异达到显著性。

GA₃(2mg/L)、IAA(2mg/L)、IAA(0.5mg/L)、6-BA(2mg/L)四个处理的成苗率均大于对照，其余处理成苗率低于对照，但是差异都未达到显著性。

表4外源激素种类和浓度对胚挽救各指标的影响

注：不同小写字母表示经邓肯式新复极差法分析P＝0.05水平上存在显著性差异

由表5、表6可知，GA₃三个浓度和IAA三个浓度及6-BA(1mg/L)的浓度处理均能提高顶部级数、株高和根部级数，6-BA0.5mg/L与2mg/L处理对幼苗生长影响不大。6-BA(1mg/L)的处理株高、根级、根量都是最高的，均显著高于对照。在对移栽30天后的苗进行调查时发现，添加6-BA(1mg/L)的株高和叶片数也是最高的。

表5外源激素种类和浓度对胚挽救各指标的影响

表6移苗30天后不同激素对试管苗生长的影响

实施例6

材料与方法：母本‘沪蟠1号’，父本‘锦绣黄桃’于金山某合作社内的设施棚内和设施棚外均进行杂交，其他步骤同实施例1中的实验组。调查坐果率和商品果率及接种数量出苗数量等。设施内外蟠桃授粉杂交的相关数据见表7。

表7设施内外蟠桃授粉杂交的相关数据

由上述实施例可知，本发明提供的方法的萌发率、成苗率和移栽成活率均较高。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种早熟蟠桃胚挽救的方法，包括以下步骤：

1)早熟蟠桃母株在避雨设施内杂交后，进行母株管理，所述母株管理包括疏除徒长枝、过密枝和喷施多效唑150～250倍液；

2)花朵露红期和盛花后40d内喷施多效唑150～250倍液；

3)果实硬核期疏果，长度小于15cm的果枝留1个果，长度为15～30cm的果枝留3～4个果，长度大于30cm的果枝留5～7个果；

4)果实成熟前4～8d进行采收，获得离体果实；

5)从步骤4)中所述的离体果实中分离蟠桃胚，将所述蟠桃胚接种于WPM培养基中在2～6℃培养70～90d；

6)将所述接种胚置于18～25℃光照条件下培养并进行移栽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)中所述WPM培养基中还包括0.1～2mg/L的6-BA。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述蟠桃胚分离后、接种前还包括用解剖刀在蟠桃胚的种皮上划1～4个划口以割破种皮。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述母株的花期和幼果期进行温度控制，所述花期和幼果期的温度控制为0～30℃。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述花期和幼果期的温度控制为15～28℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述多效唑150～250倍液、步骤2)中所述多效唑150～250倍液的喷施程度为喷施至叶面滴水。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤5)从离体果实中分离蟠桃胚之前对离体果实进行消毒。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述消毒为将所述离体果实置于NaClO溶液中浸泡8～12min后，置于乙醇水溶液中浸泡8～12min。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述NaClO溶液的质量浓度为4.5～5.5％，所述乙醇水溶液的体积浓度为60～80％。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述避雨设施为单栋大棚或连栋大棚。