CN109475518A - 梅尼埃病的治疗 - Google Patents

Abstract

本文公开了用于治疗MD和/或内淋巴水肿的新的方法和组合物。该组合物包含依布硒啉和任选地一种或更多种谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物和/或一种或更多种处方利尿化合物。还公开了在受试者中增加GPx活性和减少自由基物质以及耳蜗或前庭的炎症的方法。

Description

梅尼埃病的治疗

背景

发明领域

本公开内容涉及可用于治疗梅尼埃病和/或内淋巴水肿的组合物和方法。

相关技术描述

梅尼埃病(MD)被定义为发作性眩晕、听力损失和耳鸣的三联征。经常报告耳部压力或耳胀(aural fullness)，且大多数听觉和前庭症状在频率和强度上有波动。虽然MD的病因不明，但它与内淋巴水肿相关。内淋巴水肿是内耳内淋巴区室的肿胀。在以眩晕为最常见的特征的急性期后，慢性期出现，在慢性期听力损失和耳鸣成为最常见的特征，尽管经常报告平衡障碍。没有FDA批准用于预防或治疗MD的药物。大多数MD患者利用低盐饮食和/或噻嗪类利尿剂进行医学治疗，但成效有限。

本公开内容解决了对于治疗MD和/或内淋巴水肿的疗法的临床需求。

概述

发明人已经发现并显示在治疗患有MD和/或特发性和非特发性内淋巴水肿的人受试者后几种听觉和前庭症状的改善，所述治疗包括单独施用有效量的依布硒啉(SPI-1005)或与一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物和/或一种或更多种处方利尿化合物组合施用有效量的依布硒啉(SPI-1005)。

本公开内容提供了：在可用于治疗、预防和/或改善梅尼埃病和/或内淋巴水肿的药物组合物中可用的新的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物，所述药物组合物包含单独的依布硒啉或与一种或更多种这样的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物和/或一种或更多种处方利尿化合物组合的依布硒啉；制备包含依布硒啉或包含包括依布硒啉与新的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物和/或一种或更多种处方利尿化合物的组合的此类药物组合物的方法；包含依布硒啉或包含包括依布硒啉与新的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物和/或一种或更多种处方利尿化合物的组合的药物组合物；以及使用这些药物组合物治疗、预防和/或改善梅尼埃病和/或内淋巴水肿的方法。

新组合的组合物的一些实施方案包含至少两种化合物或其药学上可接受的盐，其中第一化合物是依布硒啉，且第二化合物是谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物。

本公开内容的又另一方面特征在于治疗罹患或被诊断患有MD和/或内淋巴水肿的受试者的方法，包括向受试者施用治疗有效量的包含单独的依布硒啉，或依布硒啉、一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物以及任选地一种或更多种处方利尿剂化合物的组合的药物组合物。新组合中包含的每种化合物的治疗有效量可分别为从约0.1mg/天至约5000mg/天。

本公开内容的另一方面特征在于包含本文所述的任一种组合物和使用说明书的试剂盒。

本公开内容的另一方面特征在于一种用于平衡受试者内耳压力的方法，所述方法包括施用治疗有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物和/或一种或更多种处方利尿化合物的组合物。

在又另一个方面，本公开内容包括用于减少受试者耳中自由基物质产生和/或炎症的方法，包括施用治疗有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

本公开内容特征还在于制备药物组合物的方法，该方法包括将依布硒啉以及谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物或处方利尿剂化合物中的任一种与一种或更多种药学上可接受的载体混合。

本公开内容提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含依布硒啉和一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物；或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

本公开内容提供了一种组合物，其中一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在，并且选自由以下组成的组：

2,2'-二硒基-双-β-环糊精；

其中

R₁是H、甲基、乙基或异丙基；

R₂是H或乙基；

R₃是H、乙酰基、苯乙酰基、

其中

R₁是H、氧代、甲基、乙基、正丙基、正戊基、苯基、–(CHOH)_nCH₂OH或其中n是1-5；R₂是H或–COOH；

和6A,6B-二亚硒酸-6A’,6B’-硒桥β-环糊精。

本公开内容提供了一种组合物，其中一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且是2,2'-二硒基-双-β-环糊精。

本公开内容提供了一种组合物，其中所述组合物包含依布硒啉或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

本公开内容提供了一种组合物，其中所述组合物还包含一种或更多种利尿化合物。

本公开内容提供了包含本文所述实施方案中任一个的组合物和使用说明书的试剂盒。

本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含任选地与处方利尿化合物组合的依布硒啉的组合物。

本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含任选地与处方利尿剂化合物组合的依布硒啉和一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者的内淋巴水肿的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含任选地与处方利尿化合物组合的依布硒啉的组合物。

本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者内淋巴水肿的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含任选地与处方利尿剂化合物组合的依布硒啉和一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且选自由以下组成的组：

2,2'-二硒基-双-β-环糊精；

其中

R₁是H、甲基、乙基或异丙基；

R₂是H或乙基；

R₃是H、乙酰基、苯乙酰基、 其中

R₁是H、氧代、甲基、乙基、正丙基、正戊基、苯基、–(CHOH)_nCH₂OH或其中n是1-5；R₂是H或–COOH；

和6A,6B-二亚硒酸-6A’,6B’-硒桥β-环糊精。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且是2,2'-二硒基-双-β-环糊精。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中GPx活性在患有梅尼埃病或内淋巴水肿的受试者中增加。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中施用是口服施用。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中通过选自由纯音测听、语音辨别测试(speech discrimination testing)、耳蜗电图描记法(electrocochleography)或磁共振成像组成的组的技术测量该方法的功效。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述治疗改善了受试者的纯音测听、语音辨别测试、耳蜗电图描记法或磁共振成像中的至少一个。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述治疗增加了受试者的测试评分中的至少一个，所述测试评分选自由眩晕症状量表(Vertigo SymptomsScale,VSS)、头晕残疾清单(Dizziness Handicap Inventory,DHI)、耳鸣功能指数(Tinnitus Functional Index,TFI)或耳鸣残疾清单(Tinnitus Handicap Inventory,THI)组成的组。

本公开内容提供了减少受试者内耳中自由基产生和/或炎症的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述自由基选自由过氧亚硝酸根(peroxynitrite)、过氧化氢阴离子、超氧阴离子、一氧化氮、硝基酪氨酸和羟基组成的组。

本公开内容提供了平衡内耳压力的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物和任选地处方利尿剂的组合物。

本公开提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中受试者患有眩晕(vertigo)。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中受试者患有头晕(dizziness)。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中受试者患有听力损失。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中受试者患有耳鸣。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中通过耳蜗电图描记法或磁共振成像显示内耳压力。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述药物组合物还包含一种或更多种利尿化合物，包括处方利尿化合物。

本公开内容提供了本文所述任一实施方案的组合物，其中所述组合物包含依布硒啉和/或依布硒啉的二聚体，即由下式表示的化合物：该化学结构中的Se-Se键相对较弱。例如，已知从依布硒啉形成Se-Se键的二聚反应将在较低pH环境自发发生。也已知二聚反应在热力学控制之下并且是可逆的。这意味着，依布硒啉可以由二聚体形式/化合物制成并且可以以二聚体形式/化合物的某种平衡存在。因此，本发明人考虑并且在此公开：出于本公开内容的这样的目的，依布硒啉和该二聚体化合物是等同的。因此，用于用途、试剂盒、方法和组合物的两种活性化学物质在本文被公开。这样，本文考虑，无论何时在本公开内容中提及时，术语依布硒啉(可以是和)可以替换为这种二聚体化合物。

本公开内容提供了本文所述实施方案中任一个的方法，其中所述药物组合物包含为依布硒啉二聚体形式的化合物，即由下式表示的化合物：

根据下面的详细讨论、方案、实施例和权利要求，另外的实施方案及其优点将变得明显。

附图简述

考虑结合附图对本公开内容的各种实施方案的以下详细描述，可以更全面地理解本公开内容，在附图中：

图1是显示实施例1的临床治疗结果的表格，其中在人受试者中测量听力损失的次要终点。

图2是显示实施例1的临床治疗结果的表格，其中在人受试者中测量听力损失的次要终点。

图3是显示实施例1的临床治疗结果的表格，其中在人受试者中测量听力损失的次要终点。测量的次要终点包括：在治疗前、治疗期间和治疗后使用纯音测听法(PTA)、使用单词噪声测试(Words-in-Noise Test,WINT)的语音辨别的感觉神经性听力损失的严重度，在治疗前、治疗期间和治疗后使用耳鸣功能指数(TFI)和耳鸣响度(Tinnitus Loudness,TL)的耳鸣严重度，以及在治疗前、治疗期间和治疗后使用眩晕症状量表(VSS，缩短形式)的眩晕严重度。

详细描述

在各种实施方案中，本公开提供了治疗、预防和/或改善MD和/或内淋巴水肿的方法，所述方法包括施用治疗有效量的包含依布硒啉的组合物。

本公开内容的具体实施方案涉及可用于治疗、预防和/或改善MD和/或内淋巴水肿的方法和组合物，所述组合物包含至少两种化合物的组合，第一化合物是依布硒啉且一种或更多种其他化合物是谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物。

在整个说明书和权利要求书中描述了新组合的代表性化合物。

在一些实施方案中，谷胱甘肽过氧化物酶调节剂包含选自由以下组成的组的化合物：谷胱甘肽过氧化物酶模拟化合物、谷胱甘肽、谷胱甘肽前药和半胱氨酸前药。

在一些实施方案中，谷胱甘肽过氧化物酶模拟化合物的代表性化合物包含依布硒啉，(2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)，其经验式为C₁₃H₉NOSe，分子量为274.2，并且式为：

在一些实施方案中，谷胱甘肽过氧化物酶模拟化合物包括2,2'-二硒基-双-β-环糊精和6A,6B-二亚硒酸-6A',6B'-硒桥β-环糊精。

谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟物，如谷胱甘肽过氧化物酶，通过自由基与其Se部分的结合来减少活性氧物质。通过与谷胱甘肽反应，谷胱甘肽过氧化物酶模拟物限制自由基毒性，从而表现出对过氧亚硝酸根的强活性。依布硒啉是一种谷胱甘肽过氧化物酶模拟物，在脂质过氧化期间减少线粒体中细胞色素C的释放和核损伤，从而减轻与氧化应激相关的神经细胞凋亡。降低活性氧物质活性的剂可改善氧化应激加剧和由此类应激引起的疾病的有害影响，所述疾病包括但不限于其他神经病学疾病或疾患、以及其相关症状或并发症。

在一些实施方案中，代表性谷胱甘肽前药包含下式的化合物：

其中

R₁是H、甲基、乙基或异丙基；

R₂是H或乙基；且

R₃是H、乙酰基、苯乙酰基、

在一些实施方案中，代表性的半胱氨酸前药包含具有下式的N-乙酰半胱氨酸(NAC)：

半胱氨酸前药的一些实施方案包括N,N'-二乙酰基-半胱氨酸、N-乙酰基半胱氨酸酰胺、NAC酯(烷基酯、羟基乙酰胺酯和酰氧基(acycloxy)甲基酯)、S-烯丙基半胱氨酸、S-甲基半胱氨酸、S-乙基半胱氨酸、S-丙基半胱氨酸、或下式的化合物：

其中

R₁是H、氧代、甲基、乙基、正丙基、正戊基、苯基、–(CHOH)_nCH₂OH且

其中n是1-5或且

R₂是H或–COOH。

半胱氨酸前药的一些实施方案包含具有醛糖单糖的2-取代的噻唑烷-4-羧酸，所述醛糖单糖例如甘油醛、阿拉伯糖、来苏糖、核糖、木糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。

本公开内容的另一方面特征在于药物组合物，所述药物组合物包含谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物与至少一种药学上可接受的载体的组合。

本公开内容进一步特征在于制备药物组合物的方法，包括混合新组合的任何化合物与药学上可接受的载体。

在进一步的实施方案中，用于在有相应需要的受试者中治疗或改善MD和/或内淋巴水肿的方法包括向受试者施用治疗有效量的包含依布硒啉或依布硒啉与一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合的组合物，其中该组合中每种化合物的治疗有效量为从约0.1mg/剂至约5g/剂。具体而言，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.5mg/剂至约1000mg/剂。更具体地，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约1mg/剂至约100mg/剂。在另一个实施方案中，组合物每天的剂量数为1至3剂。在另一个实施方案中，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.001mg/kg/天至约30mg/kg/天。更具体地，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.01mg/kg/天至约2mg/kg/天。

在进一步的实施方案中，用于在有相应需要的受试者中预防或抑制MD和/或内淋巴水肿的进展的方法包括向受试者施用治疗有效量的包含依布硒啉或依布硒啉与一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合的组合物，其中该组合中每种化合物的治疗有效量为从约0.1mg/剂至约5g/剂。具体地，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.5mg至约1000mg/剂。更具体地，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约1mg/剂至约100mg/剂。在另一个实施方案中，组合物每天的剂量数为1至3剂。在另一个实施方案中，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.001mg/kg/天至约30mg/kg/天。更具体地，组合物中每种化合物的治疗有效量为从约0.01mg/kg/天至约2mg/kg/天。

定义/术语

通常，权利要求书和说明书中使用的术语旨在被解释为具有本领域普通技术人员理解的普通含义。下面定义了某些术语以提供额外的清晰度。如果普通含义与提供的定义发生冲突，则使用提供的定义。除非另有说明，在权利要求书和说明书中使用的术语如下文列出的来定义或根据其在整个本公开内容中的使用来定义。

在本领域中用于确定所公开的药物组合物或所公开的药物组合(无论是否配制在相同的组合物中)为了治疗和预防目的的有效剂量的方法是已知的。对于治疗目的，本文使用的术语“治疗有效量”，表示研究人员、兽医、医生或其他临床医生所寻求的在组织系统、动物或人中引起生物或医学响应的单独或组合的每种活性化合物或药剂的量，所述响应包括减轻正在治疗的疾病或疾患的症状。对于预防目的(即，抑制疾患的发作或进展)，术语“治疗有效量”是指研究人员、兽医、医生或其他临床医生所寻求的在受试者中治疗或抑制疾患的发作或进展的单独或组合使用的每种活性化合物或药剂的量。因此，本公开内容提供了两种或更多种药物的组合，其中，例如，(a)每种药物以独立治疗或预防有效量施用；(b)如果单独施用，则组合中至少一种药物以亚治疗或亚预防的量施用，但当与根据本公开内容的第二种或另外的药物联合施用时是治疗性或预防性的；或(c)如果单独施用，两种(或更多种)药物以亚治疗或亚预防的量施用，但当一起施用时是治疗性或预防性的。

术语“梅尼埃病(Meniere’s disease)”是指内耳的进行性或非进行性的疾病或疾患。梅尼埃病的“经典”表现是眩晕、听力损失和耳鸣。在此，梅尼埃病这一术语并不局限于被解释为仅限于那些具有所有三种上述症状的状况或疾患。而是，MD被认为是如实施例1中所述诊断的疾患。

术语“内淋巴水肿”是指由于耳内内淋巴液积聚导致的内淋巴区室(endolymphatic compartment)肿胀。

术语“药学上可接受的盐”是指无毒的药学上可接受的盐(参见InternationalJ.Pharm.，1986,33,201-217；J.Pharm.Sci.,1997(1月),66,1,1)。然而，本领域众所周知的其他盐可用于制备根据本公开内容的化合物或其药学上可接受的盐。代表性的有机或无机酸包括但不限于，盐酸、氢溴酸、氢碘酸、高氯酸、硫酸、硝酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、羟基乙磺酸、苯磺酸、草酸、双羟萘酸、2-萘磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、糖精酸或三氟乙酸。代表性的有机或无机碱包括但不限于，碱性或阳离子盐，例如苄星青霉素、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普鲁卡因、铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌。

术语“组合物”旨在包括含有指定量的指定成分的产物，以及直接或间接由指定量的指定成分的组合产生的任何产物。

术语“受试者”包括生物体，动物，包括哺乳动物，人或非人，雄性或雌性，其是治疗、观察、临床试验或实验的客体。受试者可以是人患者。术语“人”通常是指智人(Homosapiens)。本文使用的术语“哺乳动物”包括但不限于人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠、豚鼠、毛丝鼠(chinchilla)和猴。除人之外的哺乳动物可以有利地用作代表例如听力损失、精神分裂症、双相情感障碍和/或任何其他精神疾患的动物模型的受试者。

术语“统计上显著”被定义为结果不是由随机机会引起的概率。

在两个或更多个核酸或多肽序列的上下文中，术语“同一性百分比”或“序列同一性百分比”是指当针对最大的对应性比较和对齐时如利用下面描述的序列比较算法中的一个(例如BLASTP和BLASTN或技术人员可得的其他算法)或通过视觉检查所测量的具有指定百分比的相同的核苷酸或氨基酸残基的两个或更多个序列或子序列。取决于应用，百分比“同一性”可以存在于被比较的序列的区域上，例如，在功能结构域上，或者，可选地存在于待比较的两个序列的全长上。

对于序列比较，通常一个序列充当参考序列，测试序列与其比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入计算机中，如需要则指定子序列坐标，并指定序列算法程序参数。然后序列比较算法基于指定的程序参数计算一个或更多个测试序列相对于参考序列的序列同一性百分比。

用于比较的序列的最佳比对可以例如通过Smith&Waterman，Adv.Appl.Math.2：482(1981)的局部同源性算法，通过Needleman&Wunsch，J.Mol.Biol.48：443(1970)的同源性比对算法，通过Pearson&Lipman，Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA 85：2444(1988)的相似性搜寻方法，通过这些算法的计算机化实施(在Wisconsin Genetics软件包，GeneticsComputer Group，575Science Dr.,Madison，Wis.中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通过目测检查(一般参见以下Ausubel等)执行。

适合于确定序列同一性百分比和序列相似性百分比的算法的一个实例是BLAST算法，所述BLAST算法被描述于Altschul等，J.Mol.Biol.215：403-410(1990)。用于进行BLAST分析的软件为通过美国国家生物技术信息中心网站公共可得的。

术语“统计上显著”被定义为结果不是由随机机会引起的概率。

必须注意，除非上下文另外清楚地指示，如在说明书和所附权利要求书中使用的，单数形式“一(a)”，“一个(an)”和“该(the)”包括复数指示物。

整个说明书中使用的缩写或首字母缩略词包括：

●AEC：不良事件清单

●ECochG：耳蜗电图描记法(Electrocochleography)

●EOS：研究结束

●GSH：谷胱甘肽的还原形式

●GSSG：谷胱甘肽的氧化形式

●GPx：谷胱甘肽过氧化物酶

●GR：谷胱甘肽还原酶

●NAC：N-乙酰基-半胱氨酸

●NC：正常对照

●POC：概念证明

●氧化还原：还原/氧化

●RNS：活性氮物质

●ROS：活性氧物质

●SOD：超氧化物歧化酶

●h或hr(小时)

●LCMS(带质谱仪的高压液相色谱法)

●Me(甲基)

●Mg(毫克)

●rt或RT(室温)

治疗方法

在梅尼埃病中，液体的积聚始于内耳并流入其他区域，造成损害。这种液体积聚被称为“水肿”。当压力增加和引流被阻塞时，鼓膜(membranes)变得膨胀(拉伸变薄，像气球一样)。这可能与负责身体平衡感的内耳前庭系统中内淋巴囊或其他组织的肿胀有关。梅尼埃病的症状各不相同。并非所有患者同时出现相同的症状。

几项临床前动物研究已证明谷胱甘肽过氧化物酶活性，特别是SPI-1005(依布硒啉)在预防和治疗感觉神经性听力损失的不同获得性形式方面的功效。GPx1是哺乳动物内耳中的主要催化抗氧化酶，且其活性在耳毒性损伤后降低。依布硒啉治疗已显示防止或逆转噪音或耳毒素引起的损伤后耳蜗中的病理变化。

在耳蜗中，谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)与谷胱甘肽反应以限制自由基毒性。而且，谷胱甘肽过氧化物酶通过自由基与其Se部分的结合而减少活性氧物质。通过这种方式，谷胱甘肽过氧化物酶能够限制来自许多细胞途径的自由基毒性。在正常功能性细胞中，GPx以接近最大能力发挥功能。然而，患有MD和/或内淋巴水肿的患者耳蜗组织中的GPx活性严重下降。然后耳蜗GPx活性的恢复可能会抑制或甚至逆转这些疾患和伴随的炎症的影响。

由于酶的大尺寸和相对不稳定性，用酶本身增加GPx活性是不实际的。然而，已经由许多研究组合成并研究了用于GPx活性的小分子调节剂和/或模拟物。

依布硒啉[SPI-1005或2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮]是GPx活性的模拟物，并对过氧亚硝酸根(ONOO-)具有很强的活性，过氧亚硝酸根是由两种自由基，超氧阴离子和一氧化氮的组合形成的超级活性氧物质(ROS)(Noguchi等，1992；Noguchi等，1994)。依布硒啉在脂质过氧化期间减少细胞色素C从线粒体释放和核损伤(Namura等，2001)。

因此，本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者中MD和/或内淋巴水肿的方法，该方法包括向有相应需要的受试者施用治疗有效量的包含依布硒啉或依布硒啉与一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物组合的组合物。

在一个方面，本公开内容提供了平衡内耳的压力。内耳中的压力系统非常复杂并且对中耳静压的细微变化敏感。同时，内耳的压力平衡被中耳中变化的起始而激活。中耳的压力主要受与中耳组织的气体交换支配。此外，咽鼓管的瞬时开放也有助于这种压力平衡。气体交换可以通过咀嚼或打哈欠来触发，但它对海拔也很敏感，例如飞行或潜水时(耳朵清除)。梅尼埃病患者可能经历明显较差的中耳压力调节。中耳的通气(气体交换)受内淋巴液水平的影响，且对梅尼埃病的发展和进展有效。因此，降低内淋巴液水平的剂影响前面的病理学并立即引起梅尼埃病。因此，本公开内容提供了平衡受试者内耳中的压力的方法，该方法包括向有相应需要的受试者施用治疗有效量的包含依布硒啉或依布硒啉与一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合的组合物。

在一个方面，本公开内容提供了减少受试者耳朵的耳蜗组织中的自由基产生和/或炎症的方法，包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。具体的自由基物质包括活性氧物质。更具体地，自由基包括但不限于过氧亚硝酸根、超氧阴离子、一氧化氮、硝基酪氨酸和羟基自由基。

在一个方面，本公开内容提供了治疗、预防和/或改善受试者中MD和/或内淋巴水肿的方法，其中所述方法恢复或部分恢复听力损失或预防受试者的听力损失。本公开内容提供了方法，其中内耳的前庭系统中的内淋巴区室或其他组织的肿胀被减少、改善、阻止或以其他方式消除。本公开内容提供了其中受试者经历减少的眩晕和/或耳鸣的方法。本公开内容提供了方法，其中该方法减少了耳朵中组织的炎症。

此外，在本文所述的任何方法中，一种或更多种GPx调节剂或模拟化合物可以与依布硒啉在每一单剂量中或间歇地共同施用，例如每隔一次剂量、或每三次剂量、或每四次剂量、或每五次剂量、或每六至二十剂量。当然，预期一种或更多种GPx调节剂或模拟化合物可以定期给予，其可以与或可以不与依布硒素的给药重叠。在这种情况下，GPx模拟物或调节剂可以每4小时一次、每6小时一次、每12小时一次、每天一次、每隔一天一次、每三天一次、每五天一次、每周一次、每十天一次、每两周一次、多达每个月一次给予。

在本文所述的任何方法中，依布硒啉和一种或更多种GPx调节剂或模拟化合物或其药学上可接受的盐、酯或前药被口服、经鼻、透皮、经肺、吸入、含服、舌下、耳内、耳蜗内、鼓室内、腹膜内、皮下、肌内、静脉内、经直肠、胸膜内、鞘内和胃肠外施用。化合物被口服施用。在另一个实施方案中，化合物通过局部施用至内耳、中耳或外耳来施用。

在本文所述的任何方法中，依布硒啉和一种或更多种GPx调节剂或模拟化合物可通过各种途径施用，包括通过肠胃外、肠内和局部施用途径。肠胃外递送的方法包括肌内、鞘内、脑室内、动脉内、皮下、髓内、静脉内或鼻内施用。另外，组合物可含有合适的药学上可接受的载体，其包含赋形剂和促进施用至哺乳动物受试者的其他化合物。

在本文所述的任何方法中，一种或更多种处方利尿化合物可以与依布硒啉组合使用，或与依布硒啉和一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物组合使用，以制备可用于施用于受试者的组合物。

化合物

在整个说明书和权利要求中描述了本公开内容的代表性化合物。

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)模拟物的代表性化合物包括依布硒啉，(2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)，其经验式为C₁₃H₉NOSe，分子量为274.2，其式为：

在一些实施方案中，依布硒啉是在制剂中施用的唯一活性成分。依布硒啉在25℃微溶于水性溶液中。依布硒啉充当催化剂并且在解毒反应期间不被消耗(Muller等，1988)。通过HPLC证实，依布硒啉制剂的一个实施方案纯度>99％。该制剂的合成由Rhodia PharmaSolutions提供，并包括密封在泡罩包装中的胶囊。每粒胶囊含有200mg依布硒啉制剂或SPI-1000(安慰剂)。

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)模拟物的其他代表性化合物包括2,2'-二硒基-双-β-环糊精和6A,6B-二亚硒酸-6A',6B'-硒桥β-环糊精。

组合中GPx调节剂化合物的代表性化合物包括谷胱甘肽(GSH)、表1中列出的谷胱甘肽前药和表2中列出的半胱氨酸前药。

表1-谷胱甘肽前药

表2–半胱氨酸前药

半胱氨酸前药的一些其他实施方案包括具有醛糖单糖的2-取代的噻唑烷-4-羧酸，醛糖单糖例如甘油醛、阿拉伯糖、来苏糖、核糖、木糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。

本公开内容提供了一种或更多种利尿化合物。利尿剂是治疗高血压、心脏病和某些种类的肾脏或肝脏疾病的药物。它们刺激肾脏从体内除去水。这些化合物是本领域公知的且通常分为三类：噻嗪类利尿剂、保钾剂和长效利尿剂。为利尿剂化合物的化合物的实例包括但不限于Aquatensen(甲氯噻嗪)、Diucardin(氢氟噻嗪)、Diulo(美托拉宗)、Diuril(氯噻嗪)、Enduron(甲氯噻嗪)、Esidrix(氢氯噻嗪)、Hydro-chlor(氢氯噻嗪)、Hydro-D(氢氯噻嗪)、HydroDIURIL(氢氯噻嗪)、Hydromox(喹乙宗)、Hygroton(氯噻酮)、Metahydrin(三氯噻嗪)、Microzide(氢氯噻嗪)、Mykrox(美托拉宗)、Naqua(三氯噻嗪)、Naturetin(苄氟噻嗪)、Oretic(氢氯噻嗪)、Renese(泊利噻嗪)、Saluron(氢氟噻嗪)、Thalitone(氯噻酮)、Trichlorex(三氯噻嗪)、Zaroxolyn(美托拉宗)、Aldactone(螺内酯)、Dyrenium(氨苯蝶啶)、Midamor(阿米洛利)、Bumex(布美他尼)、Demadex(托塞米)、Edecrin(依他尼酸)、和Lasix(呋塞米)、Myrosemide(呋塞米)。处方利尿化合物可以从商业上获得。

在一个方面，本公开内容提供谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟物，包括但不限于2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮(依布硒啉)；6A,6B-二亚硒酸-6A',6B'-硒桥β-环糊精(6-diSeCD)；和2,2'-二硒基-双-β-环糊精(2-diSeCD)。

在一个方面，本公开内容提供了氨基酸或肽，其与本文公开的氨基酸或肽具有至少90％、更优选95％、仍还更优选98％、仍还更优选99％、和仍还更优选100％的序列同一性。。

当根据本公开内容的化合物具有至少一个手性中心时，它们可因此作为对映异构体存在。在化合物具有两个或更多个手性中心的情况下，它们可另外作为非对映异构体存在。在根据本公开内容的化合物的制备方法给出立体异构体的混合物的情况下，这些异构体可以通过常规技术如制备色谱法分离。化合物可以以外消旋形式或通过立体特异合成或通过拆分作为单独的对映异构体或非对映异构体制备。化合物可以，例如，通过标准技术被拆分成其组分对映异构体或非对映异构体，例如通过与光学活性碱形成盐来形成立体异构对，然后分级结晶并再生游离酸。化合物也可通过形成立体异构酯或酰胺，然后进行色谱分离和除去手性助剂来拆分。可选地，可以使用手性HPLC柱拆分化合物。应当理解，所有立体异构体、外消旋混合物、非对映异构体、几何异构体及其对映异构体都被包括在本公开内容的范围内。

此外，化合物的一些结晶形式可以作为多晶型存在，并且因此旨在被包括在本公开内容中。此外，一些化合物可以与水(即水合物)或常见的有机溶剂形成溶剂化物，并且这些溶剂化物也旨在被包括在本公开内容的范围内。

在一个方面，单独或与一种或更多种GPx调节剂或模拟物或一种或更多种处方利尿化合物组合的依布硒啉可用于通过将化合物与一种或更多种药物佐剂和/或赋形剂混合来制备药物组合物。

化合物的合成

通常，本公开内容的依布硒啉和GPx化合物是可商购的，但尚未被批准作为处方药。可选地，本文所述的依布硒啉和GPx调节剂和模拟物已在美国专利号5,008,394、5399573、国际专利公布号WO2010/074992、WO2013/016727、和中国专利申请号201410299898和美国专利申请号10/750,005中制备或合成，上述文献的全文特此并入。对这些化合物的任何必要的修改，例如一个或更多个有机官能团或保护基团转化以制备例如本文公开的化合物式的必需R基团，可由本领域技术人员通过T.W.Greene和P.G.M Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第三版，Wiley，New York，1999中描述的有机合成技术容易地进行。

一般施用、制剂和剂量

本公开内容化合物是GPx调节剂或模拟物，并因此可用于治疗、预防或抑制MD和/或内淋巴水肿的进展。

一个实施方案特征在于治疗患有MD和/或内淋巴水肿的受试者的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用治疗有效量的包含本文公开的一种或更多种化合物的药物组合物。

实施方案还包括本文公开的化合物的前药。通常，此类前药是化合物的功能性衍生物，其在体内易于转化为所需化合物。因此，在本公开内容的治疗方法中，术语“施用”将包括用具体公开的化合物或用可能未具体公开但在施用于受试者后体内转化为指定化合物的化合物治疗所述的各种疾患。选择和制备合适的前药衍生物的常规方法描述于例如“Design ofProdrugs”，ed.H.Bundara，Elsevier，1985。

化合物的一些结晶形式可以以多晶型形式存在，并且因此旨在被包括在本公开内容中。此外，一些化合物可以与水(即水合物)或常见的有机溶剂形成溶剂化物，并且这些溶剂化物旨在被一些实施方案涵盖。

当制备本文公开的化合物的方法产生立体异构体的混合物时，这些异构体可通过常规技术如制备色谱法分离。化合物可以以外消旋形式或通过立体特异合成或通过拆分作为单独的对映异构体或非对映异构体制备。化合物可以，例如，通过标准技术被拆分成其组分对映异构体或非对映异构体，例如通过与光学活性碱形成盐来形成立体异构对，然后分级结晶并再生游离酸。化合物也可通过形成立体异构酯或酰胺，然后进行色谱分离和除去手性助剂来拆分。可选地，可以使用手性HPLC柱拆分化合物。应当理解，所有立体异构体、外消旋混合物、非对映异构体、顺-反异构体及其对映异构体都被一些实施方案涵盖。

剂量

MD和/或内淋巴水肿治疗领域中的技术人员可以从下文提供的测试结果和其他信息中确定有效的每日量。本领域技术人员熟知，施用的准确剂量和频率取决于所使用的本公开内容的特定化合物、被治疗的特定状况、被治疗状况的严重度、特定患者的年龄、体重、一般身体状况以及患者可能服用的其他药物。此外，明显的是，根据治疗患者的响应和/或根据开具本公开内容的化合物处方的医生的评价，可以降低或增加所述有效每日量。因此本文提及的有效每日量范围仅是实施本公开内容的指导。

对于使用本文公开的任何化合物治疗本文所述的MD和/或内淋巴水肿的方法，剂型将含有药学上可接受的载体，含有从约0.1mg至约5000mg；特别是从约0.5mg至约1000mg；和，更特别地，从约1mg至约100mg的化合物，并且可以构成适合于所选择的施用方式的任何形式。然而，剂量可以根据受试者的需求、所治疗状况的严重度和所用的化合物而变化。可以采用每日施用或周期后(post-periodic)给药。

本文的药物组合物将含有每单位剂量单位例如从约0.001mg/kg/天至约10mg/kg/天(特别是从约0.01mg/kg/天至约1mg/kg/天；且更具体地，从约0.1mg/kg/天至约0.5mg/kg/天)的片剂、胶囊剂、粉剂、注射剂、栓剂、一茶匙的量(teaspoonful)等，并且可以以从约0.001mg/kg/天至约30mg/kg/天(特别是从约0.01mg/kg/天至约2mg/kg/天、更特别是从约0.1mg/kg/天至约1mg/kg/天甚至更特别地，从约0.5mg/kg/天至约1mg/kg/天)的剂量给予。

这些组合物是以单位剂型，从例如片剂、丸剂、胶囊、用于重构或吸入的干粉、颗粒、锭剂、无菌肠胃外溶液或悬浮液、计量气溶胶或液体喷雾剂、滴剂、安瓿、自动注射装置或栓剂，用于通过口服、鼻内、舌下、眼内、透皮、肠胃外、直肠、阴道、干粉吸入器或其他吸入或吹入方式施用。可选地，组合物可以以适合每周一次或每月一次施用的形式呈现；例如，活性化合物的不溶性盐，例如癸酸盐，可以适合于提供用于肌内注射的长效制品。

为了制备固体药物组合物如片剂，将主要活性成分与药物载体混合，药物载体例如常规的压片成分，如稀释剂、粘合剂(binder)、胶粘剂(adhesive)、崩解剂、润滑剂、抗粘剂和助流剂。合适的稀释剂包括但不限于淀粉(即玉米、小麦或马铃薯淀粉，其可以水解)、乳糖(颗粒状、喷雾干燥或无水的)、蔗糖、基于蔗糖的稀释剂(糖果剂的糖(confectioner'ssugar)；蔗糖加上约7％-10％重量的转化糖；蔗糖加约3％重量的改性糊精；蔗糖加转化糖，约4％重量的转化糖，约0.1％至0.2重量％的玉米淀粉和硬脂酸镁)、右旋糖、肌醇、甘露醇、山梨糖醇、微晶纤维素(即，可得自FMCCorp.的AVICEL^TM微晶纤维素)、磷酸二钙、二水合硫酸钙、三水合乳酸钙等。适合的粘合剂和胶粘剂包括但不限于阿拉伯树胶、瓜尔胶、黄蓍胶、蔗糖、明胶、葡萄糖、淀粉和纤维素(即甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素等)、水溶性或水可分散性粘合剂(即海藻酸及其盐、硅酸铝镁、羟乙基纤维素[即，可从HoechstCelanese获得的TYLOSE^TM]、聚乙二醇、多糖酸、膨润土、聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸酯和预胶化淀粉)等。合适的崩解剂包括但不限于淀粉(玉米淀粉、马铃薯淀粉等)、羟乙酸淀粉钠、预糊化淀粉、粘土(硅酸铝镁)、纤维素(如交联羧甲基纤维素钠和微晶纤维素)、藻酸盐、预糊化淀粉(即玉米淀粉等)、胶质(即琼脂、瓜尔豆胶、刺槐豆胶、刺梧桐胶、果胶和黄蓍胶)、交联聚乙烯吡咯烷酮等。适合的润滑剂和抗粘剂包括但不限于硬脂酸盐(硬脂酸镁、硬脂酸钙和硬脂酸钠)、硬脂酸、滑石蜡、stearowet、硼酸、氯化钠、DL-亮氨酸、carbowax 4000、carbowax 6000、油酸钠、苯甲酸钠、乙酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁等。适合的助流剂包括但不包括限于，滑石、玉米淀粉、二氧化硅(即可从Cabot获得的CAB-O-SIL^TM二氧化硅，可从W.R.Grace/Davison获得的SYLOID^TM二氧化硅和可从Degussa获得的AEROSIL^TM二氧化硅)等。可将甜味剂和调味剂添加到可咀嚼的固体剂型中以改善口服剂型的适口性。另外，着色剂和包衣可以添加或应用于固体剂型以便于药物的标识或用于美观目的。这些载体与药物活性物质一起配制以提供具有治疗释放曲线的准确、适当剂量的药物活性物质。

通常将这些载体与药物活性物质混合以形成固体预制剂组合物，其含有本公开内容的药物活性形式或其药学上可接受的盐的均匀混合物。通常，预制剂将通过三种常用方法之一形成：(a)湿法制粒、(b)干法制粒和(c)干混。当提及这些预制剂组合物为均匀的时，其意指将活性成分均匀分散遍及组合物，使得组合物可以容易地再分成等效剂型例如片剂、丸剂和胶囊。然后将此固体预制剂组合物再分成含有约0.1mg至约5000mg本公开内容的活性成分的上文描述的类型的单位剂型。含有该新型组合物的片剂或丸剂也可配制成多层片剂或丸剂以提供持续或提供双重释放产物。例如，双重释放片剂或丸剂可以包含内部剂量组分和外部剂量组分，后者是呈包封在前者上的形式。两种组分通过肠溶层被分开，肠溶层用以抵抗胃中的分解并且允许内部组分完整通过进入十二指肠或延迟释放。各种材料可用于此类肠溶层或包衣，这类材料包括许多聚合物材料例如虫胶、醋酸纤维素(即，邻苯二甲酸醋酸纤维素、偏苯三酸醋酸纤维素)、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素乙酸酯琥珀酸酯、甲基丙烯酸酯和丙烯酸乙酯共聚物、甲基丙烯酸酯和甲基丙烯酸甲酯共聚物等。也可以使用溶液中的微溶或不溶物质(用于湿法制粒作为粘合剂)或低熔点固体熔融形式(在湿法制粒中可掺入活性成分)通过薄膜包衣或湿法制粒制成持续释放片剂。这些材料包括天然和合成的聚合物蜡、氢化油、脂肪酸和醇类(即，蜂蜡、巴西棕榈蜡、十六醇、十六烷基硬脂醇等)、脂肪酸金属皂的酯，以及可用于制粒、包衣、包埋或以其他方式限制活性成分的溶解度以实现延长或持续释放的产物的其他可接受的材料。

本文公开的新组合物可被掺入其中的用于口服施用或通过注射施用的液体形式包括但不限于水溶液、合适调味的糖浆剂、水或油悬浮液、和具有食用油例如棉花籽油、芝麻油、椰子油或花生油的调味的乳剂以及酏剂和类似的药物媒介物。用于水性悬浮液的适宜悬浮剂包括合成和天然的胶质，例如阿拉伯树胶、琼脂、海藻酸盐(即，海藻酸羟丙酯(propylene alginate)、海藻酸钠等)、瓜尔胶、刺梧桐树胶、刺槐豆胶、果胶、黄蓍胶和黄原胶，纤维素如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素及其组合，合成的聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆(即聚羧乙烯)和聚乙二醇；粘土如膨润土、锂蒙脱石、绿坡缕石或海泡石；和其他药学上可接受的悬浮剂如卵磷脂、明胶等。合适的表面活性剂包括但不限于多库酯钠、十二烷基硫酸钠、聚山梨醇酯、辛苯聚醇-9、壬苯醇醚-10、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、泊洛沙姆188、泊洛沙姆235及其组合。合适的抗絮凝剂或分散剂包括药用级卵磷脂。合适的絮凝剂包括但不限于简单的中性电解质(即氯化钠、氯化钾等、高度带电的不溶性聚合物和聚电解质物质、水溶性二价或三价离子(即钙盐、明矾或硫酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐(可以在制剂中共同地用作pH缓冲剂和絮凝剂)。合适的防腐剂包括但不限于对羟基苯甲酸酯(即，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸正丙酯和对羟基苯甲酸正丁酯)、山梨酸、硫柳汞、季铵盐、苯甲醇、苯甲酸、葡萄糖酸氯己定、苯乙醇等。有许多液体媒介物可用在液体药物剂型中，然而，在特定剂型中使用的液体媒介物必须与悬浮剂相容。例如，非极性液体媒介物如脂肪酯和油类液体媒介物最佳地与如低HLB(亲水亲脂平衡)表面活性剂、司拉氯铵水辉石(stearalkonium hectorite)、水不溶性树脂、水不溶性成膜聚合物等的悬浮剂一起使用。相反，极性液体如水、醇、多元醇和二醇最佳地与如高HLB表面活性剂、粘土硅酸盐、胶质、水溶性纤维素、水溶性聚合物等的悬浮剂一起使用。对于肠胃外施用，需要无菌悬浮液和溶液。可用于肠胃外施用的液体形式包括无菌溶液、乳液和悬浮液。当需要静脉内施用时，使用通常含有合适防腐剂的等渗制品。

此外，本文公开的化合物可以通过局部使用合适的鼻内媒介物或通过透皮皮肤贴剂以鼻内剂型施用，其组合物是本领域普通技术人员熟知的。为了以透皮递送系统的形式施用，治疗剂量的施用当然在整个施用方案中将是连续的而不是间歇的。

本文公开的化合物还可以以脂质体递送系统的形式施用，例如小单层囊泡、大单层囊泡、多层囊泡等。脂质体可以由多种磷脂例如胆固醇、硬脂酰胺、磷脂酰胆碱等形成。

本文公开的药物组合物的每日剂量可在从约0.1mg至约5000mg的宽范围变化；优选地，对于普通人来说，剂量将在每天从约1mg至约100mg的范围中。对于口服施用，组合物优选以含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250、500、750、1000、1250、1500、1750、2000、2500或3000毫克的活性成分的片剂形式提供，用于对被治疗的受试者的剂量的对症调整。有利地，本公开内容的化合物可以以单个每日剂量施用，或者每日总剂量可以以每日两次、三次或四次的分剂量施用。

本文公开的活性化合物或其药物组合物的治疗有效剂量可根据所需效果而变化。因此，待施用的最佳剂量可由本领域技术人员容易地确定，并且可根据所用的具体化合物、施用方式、制品强度和疾病状况的进展而变化。此外，与受治疗的特定受试者相关的因素，包括受试者年龄、体重、饮食和施用时间，将导致需要将剂量调整至适当的治疗水平。因此，上述剂量是典型情形的示例。当然，可以存在个别情况，其中较高或较低剂量范围是值得的，并且这样的情况在本公开内容的范围之内。

本文公开的化合物可以任何前述组合物和给药方案施用，或者通过本领域确立的那些组合物和给药方案施用，只要有相应需要的受试者需要使用本文公开的化合物作为GPx调节剂或模拟物。

制剂

为了制备本文公开的药物组合物，根据常规药物配制技术，将一种或更多种本文公开的化合物或其盐作为活性成分与药物载体紧密混合，该载体可以采取多种形式，这取决于施用(例如口服或肠胃外)所需的制品形式。适合的药学上可接受的载体是本领域熟知的。这些药学上可接受的载体中的一些的描述可以在由美国药学协会(AmericanPharmaceutical Association)和大英药学会(Pharmaceutical Society of GreatBritain)出版的The Handbook of Pharmaceutical Excipients中找到。

本公开内容的化合物可以配制成用于施用目的的各种药物形式。配制药物组合物的方法已在许多出版物中描述，例如Lieberman等编辑的Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets，第二版，修订和扩增，第1-3卷；Avis等编辑的Pharmaceutical Dosage Forms:Parenteral Medications,第1-2卷；和由Marcel Dekker，Inc.出版的Lieberman等编辑的Pharmaceutical Dosage Forms:Disperse Systems,第1-2卷。

制备胶囊形式的依布硒啉制剂用于以下实施例，以下实施例研究了依布硒啉作为MD和/或内淋巴水肿的新型治疗剂。依布硒啉可以是或可以不是制剂中的唯一活性成分，并且可以充当生化反应的催化剂，在这种情况下它不会在解毒反应期间被消耗。通过HPLC确定制剂纯度>99％。胶囊被密封在泡罩包装中。每个胶囊含有200mg依布硒啉，依布硒啉因为其独特的结构稳定性而具有低毒性。其硒(Se)部分在生物转化期间不会释放，并因此不会进入硒代谢。有可能在制造过程中存在未结合的硒。制造标准是，每个胶囊含有少于1微克无机硒。在人中，长期摄入大量硒后会出现硒毒性或硒中毒。成人硒的推荐每日允许量(Recommended Daily Allowance,RDA)为每天55微克。调整剂量使得研究期间监测的总硒暴露量明显低于RDA。

实施例

以下是用于实施本公开内容的具体实施方案的实例。提供以下实施例仅用于说明目的，并且不意图以任何方式限制本公开内容的范围。做出了努力以确保关于使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是当然应容许一些实验误差和偏差。

除非另有说明，本公开内容的实践将采用本领域技术范围内的蛋白质化学、生物化学、重组DNA技术和药理学的常规方法。此类技术在文献中被充分地解释。参见，例如T.E.Creighton,Proteins:Structures and Molecular Properties(W.H.Freeman andCompany,1993)；A.L.Lehninger,Biochemistry(Worth Publishers,Inc.,最新版本)；Sambrook,等,Molecular Cloning:A Laboratory Manual(第2版,1989)；Methods InEnzymology(S.Colowick和N.Kaplan编,Academic Press,Inc.)；Remington'sPharmaceutical Sciences,第18版(Easton,Pennsylvania:Mack PublishingCompany,1990)；Carey和Sundberg Advanced Organic Chemistry第3版.(Plenum Press)Vols Aand B(1992)。

实施例1：梅尼埃病患者的临床治疗

引言

梅尼埃病(MD)被定义为发作性眩晕、听力损失和耳鸣的三联征。经常报告耳部压力或耳胀，并且大多数听觉和前庭症状在频率和强度上波动。内淋巴水肿是内耳内淋巴区室的肿胀并与MD直接相关。大多数MD患者使用低盐饮食和/或噻嗪类利尿剂进行医学治疗，但成效有限。在以眩晕为最常见的特征的急性期后，慢性期出现，在慢性期，耳聋和耳鸣成为最常见的特征，尽管经常报告平衡障碍。

MD标准

梅尼埃病的AAO-HNS 1995诊断标准

可能的(possible)梅尼埃病

梅尼埃病型的阵发性眩晕，没有记录的听力损失，或

波动或固定的感觉神经性听力损失，具有平衡失调，但没有排除明确的发作其他原因

大概率的(probable)梅尼埃病

一个明确的眩晕事件

至少一次听力测定记录的听力损失

在治疗的耳朵中耳鸣或耳闷

排除其他原因

明确的(definite)梅尼埃病

两次或更多次明确的眩晕自发发作20分钟或更长时间

至少一次听力测定记录的听力损失

在治疗的耳朵中耳鸣或耳闷

排除其他原因

确信无疑的(certain)梅尼埃病

明确的梅尼埃病，加上组织病理学证实

American Academy of Otolaryngology-Head and Neck Foundation,Inc.Committee on Hearing and Equilibrium guidelines for the diagnosis andevaluation of therapy in Meniere's disease.Otolaryngol Head Neck Surg.1995 Sep；113(3):181-5。

Thorp MA，Shehab ZP，Bance ML，Rutka JA；AAO-HNS Committee on Hearing andEquilibrium.The AAO-HNS Committee on Hearing and Equilibrium guidelines forthe diagnosis and evaluation of therapy in Meniere's disease:have they beenapplied in the published literature of the last decade？Clin Otolaryngol Allied Sci.2003Jun；28(3):173-6。

调查SPI-1005对于梅尼埃病的安全性和有效性的一般方法是对40名患有梅尼埃病的成年人进行这种1b期、安全性、药代动力学和药效学研究。该研究是评估每天两次口服200、400或600mg的递增剂量的SPI-1005与安慰剂持续21天，对纯音测听、语音辨别、耳蜗电图描记法和使用经过验证的问卷评估眩晕和耳鸣的患者报告结果的影响(Hornibrook,等, 2012；Meikle,等,2011；Yardley,等,2004)。本研究正在进行中，并按照方案良好临床实践(GCP)和适用的法规要求进行。

研究目标

本研究的目的是评估三种剂量水平的SPI-1005(其被给予21天)与安慰剂相比在梅尼埃病患者中的安全性、PK和PD。

主要的目的

SPI-1005的安全性和耐受性通过检查可归因于治疗的毒性和不良事件来确定。安全性参数包括评估病史和体检中的临床体征和症状；生命体征，不良事件的发生率；和实验室检查结果异常。

第二目的

本研究的第二个目的是确定SPI-1005各剂量水平的药代动力学；在治疗前、治疗期间和治疗后使用纯音测听法和使用单词噪声测试(WINT)的语音辨别测试的感觉神经性听力损失的严重度；在治疗前、治疗期间和治疗后使用眩晕症状量表(缩写形式VSS)的眩晕的严重度；在治疗前、治疗期间和治疗后使用耳鸣功能指数(TFI)的耳鸣的严重度；以及在治疗前，治疗期间和治疗后使用耳蜗电图描记法(ECochG)的药效学响应。

研究设计

在这项双盲、剂量递增研究中，研究参与者被随机分配到SPI-1005或安慰剂，以评估其安全性和初步功效。年龄在19-70岁之间，患有大概率的或明确的梅尼埃病的患者已经过基线测试以获得他们的在开始研究治疗之前确定的感觉神经性听力损失、耳鸣和眩晕的严重度(见表3：评估时间表)。

在施用SPI-1005之前、期间和之后的28天，通过病史、体检、生命体征和血液试验(全血细胞计数[CBC]，Chemistry-20[Chem-20])评估患者的安全性。在某些时间点使用液相色谱-质谱(LCMS)确定依布硒啉及其主要代谢物的峰血浆水平和谷血浆水平。另外，在相应的时间点通过高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)分析血浆的总硒。在每次门诊就诊时监测患者的不良事件。对女性患者进行妊娠试验，并将那些发现怀孕的患者排除在研究之外或终止研究，并对其监测不良事件。安全性检测在完成治疗后延长四周。

在基线、在治疗21天结束和完成治疗后28天评估SPI-1005对听力和眩晕的影响。在基线、治疗期间每周和治疗后7天和28天评估耳鸣。使用0.25、0.5、1、2、3、4、6和8kHz的纯音测听测试和使用24、20、16、12、8、4和0信号-噪声比(SNR)的WINT的语音辨别评估听力。使用VSS评价眩晕的严重度。使用TFI评价耳鸣的严重度。此外，ECochG在基线、治疗结束和完成治疗后28天进行，以便测量药效学响应。

治疗说明

化合物

SPI-1005是化合物依布硒啉的专利制剂，由含有200mg活性药物成分依布硒啉和150mg赋形剂，微晶纤维素，交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁的明胶胶囊组成。

给药水平

有三种剂量水平：200mg、400mg和600mg的SPI-1005。

给药方案

患者在三个连续的剂量递增组群中随机分配至SPI-1005或安慰剂：组群1：200mg口服每天两次(n＝10)或安慰剂(n＝3)，持续21天；组群2：400mg口服每天两次(n＝10)或安慰剂(n＝3)，持续21天；组群3：600mg口服每天两次(n＝10)或安慰剂(n＝4)，持续21天。

每个剂量按在早上进食前三个胶囊和晚上进食前三个胶囊施用。三个胶囊包括SPI-1005和/或相同安慰剂胶囊的组合以提供目标剂量水平。

剂型

#1号胶囊含有200mg依布硒啉或匹配的安慰剂。

制造商

SPI-1005由Catalent Pharma Solutions,Somerset,NJ制造。

施用途径

SPI-1005(或匹配的安慰剂)被口服递送。

研究程序

治疗持续时间

在从研究第1天开始的21天期间施用研究治疗。

研究持续时间

患者参加该临床试验约7至9周，从基线测试开始，并持续超过最终一剂4周，以便进行药物安全性监测。允许两周的窗口(研究第-14至-1天)完成基线测试。每位患者在研究期间有六次临床访问(见表3，评估时间表)。

通过电话进行初步筛查，以获得简短的病史，审查纳入和排除标准，讨论知情同意表，解释门诊就诊和抽血的报酬，并且如果适当和同意，则安排第一次门诊就诊。

门诊访问1(第-14天至第-1天)

在进行研究评估之前，获得了参与研究的知情同意。在治疗开始(研究第1天)前多达14天进行了病史和体检、生命体征、身高/体重、血液试验(Chem-20，CBC)和尿妊娠试验。记录基线症状和伴随药物。获得血液的总硒水平。基线听力评估由以下组成：耳镜检查、鼓室压测量、在0.25、0.5、1、2、3、4、6和8kHz的纯音测听和在24、20、16、12、8、4和0SNR使用WINT的语音辨别。使用VSS评估基线眩晕。使用TFI进行基线耳鸣评估。执行基线ECochG。

在收到知情同意书、血液试验、病史、体检、基线听力测试、研究登记和关于方案的口头说明后，每位患者都收到含有SPI-1005和/或安慰剂胶囊的药物卡。配药临床医生记录了每张发出卡的受试者识别码、发出日期和卡号。患者被建议在下次门诊就诊的早晨在回到诊所之前不要服用其早晨剂量。

门诊就诊2(第7天，上午剂量前)

进行病史和体检以及生命体征。记录不良事件。记录伴随药物。通过患者病史和药丸计数测量对治疗的依从性。进行血液试验，包括但不限于Chem-20和CBC。在早晨剂量的研究药物之前抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的谷血液样品。使用TFI进行耳鸣评估。患者被建议在下次门诊就诊的早晨在回到诊所前不要服用其早晨剂量。

门诊就诊3(第14天，上午剂量前)

进行病史和体检以及生命体征。记录不良事件。记录伴随药物。通过患者病史和药丸计数测量对治疗的依从性。在早晨剂量的研究药物之前抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的谷血液样品。使用TFI进行耳鸣评估。患者被建议在下次门诊就诊的早晨在回到诊所前不要服用其早晨剂量。

门诊就诊4(第21天，在给药最后一天早晨剂量之前和之后)

进行病史和体检以及生命体征。记录不良事件。记录伴随药物。通过患者病史和药丸计数测量对治疗的依从性。进行血液试验，包括但不限于Chem-20和CBC。在研究药物的早晨剂量之前抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的谷血液样品。在研究药物施用后2小时抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的峰血液样品。听力评估由在0.25、0.5、1、2、3、4、6和8kHz的纯音测听和在24、20、16、12、8、4和0SNR使用WINT的语音辨别组成。使用VSS评价眩晕。使用TFI进行耳鸣评估。进行治疗结束ECochG。

门诊就诊5(第28天，最后一剂SPI-1005后7天)

进行病史和体检以及生命体征。记录不良事件。记录伴随药物。通过患者病史和药丸计数测量对治疗的依从性。抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的血液样品。使用TFI进行耳鸣评估。

门诊就诊6(第49天，最后一剂SPI-1005后28天)

进行病史和体检以及生命体征。记录不良事件。记录伴随药物。通过患者病史和最终药丸计数测量对治疗的依从性。进行血液试验，包括但不限于Chem-20和CBC。抽取用于总硒和依布硒啉及其代谢物水平的血液样品。听力评估由在0.25、0.5、1、2、3、4、6和8kHz的纯音测听和在24、20、16、12、8、4和0SNR使用WINT的语音辨别组成。使用VSS评价眩晕。使用TFI进行耳鸣评估。进行治疗后ECochG。

安全性和有效性评价

医疗评估

进行病史和体检、生命体征和实验室报告分析，以评估SPI-1005的安全性。有执照的医生(MD)或医师助理(PA)在指定的研究间隔使用标准临床设备进行体检。根据目前建立的实验室规范分析血液试验结果。每次门诊就诊时询问患者不良事件。

实验室测试

在规定的时间间隔进行血液试验，以评估SPI-1005的安全性。合格的医学实验室技术人员使用标准设备和建立的用于采集和处理血液样品的通用安全性预防措施进行实验室测试。进行的血液试验包括CBC和Chem-20。采集血液并运送到指定的CRO以定量依布硒啉、依布硒啉代谢物和总硒。

听力测试

在指定的时间间隔进行听力评估，以评估SPI-1005的功效。测试包括由医师或合格的听力学家进行的耳镜检查、鼓室压测量、纯音测听、骨传导和语音辨别(Wilson和 Burks，2005)。在指定的时间间隔由医生专家执行ECochG。自我调查问卷的患者报告的结果包括VSS(Yardley等，2004)和TFI(Meikle等，2011)。这些由研究人员评分。

分析

多个临床评价及听觉和前庭功能分析

纯音测听和单词识别评分：基线、治疗第21天(21d tx)和治疗后28天(28dpost-tx)

●听力损失通常是单侧和低频(0.25、0.5和1kHz)

√显著的听力改善从基线减少≥10dB

●单词噪声测试(WINT)每个耳朵的7个不同SNR下的35个单词(0-35)

√显著的WINT改善从基线增加≥10％

耳鸣功能指数(TFI)：基线，以及治疗第7天、第14天和第21天，

以及治疗后7天和28天

●患者回答关于其耳鸣严重度的25个问题(0-100)

√显著的TFI改善从基线减少≥10pt

●患者以视觉模拟量表回答了耳鸣响度(TL)(0-10)

√显著的TL改善从基线减少≥2pt

眩晕症状量表(VSS)：基线、治疗第21天和治疗后28天

●患者回答关于眩晕严重度的15个问题(0-60)

√显著的VSS改善从基线减少≥6pt

研究终点的统计分析

使用MedDRA(版本18.1或更高版本)对不良事件进行编码，并根据每个剂量水平(安慰剂、200、400和600mg一天两次)对不良事件的数量进行汇总。在基线、治疗时及7天和28天的随访值之间进行比较。

对每个剂量水平总结了生命体征和临床实验室结果。在基线、治疗时、7天和28天随访值之间进行比较。鉴定异常值并对严重度进行分类。

以分类和连续变量的形式收集听力数据。使用卡方分布分析分类数据。使用混合效应多次重复测量和事后分析来分析连续数据，并且在必要时使用Bonferroni应用调整。非参数检验包括Mann-Whitney U。计算的p值在α值为0.05或低于0.05时被认为是统计学显著的。使用逆向逐步回归确定最终模型，最终模型仅包括在.05水平具有显著性的变量。40名患者的样本量足以提供安全性、PK和PD结果，以指导未来的剂量选择。

实施例2：临床治疗数据

初步安全性、听觉和前庭发现

口服给药21天耐受性良好，没有因研究药物引起的不良事件

纯音测听(PTA)和单词识别评分(WRS)显示出某种一致

●在低频(.25，.5和1kHz)听力情况下，改善高达35dB

√60％的活性物质组显著的听力改善≥10dB

√没有观察到安慰剂组的显著改善

●改善比基线WRS高达120％

√35％的活性物质组显著的WINT改善增加≥10％

√没有观察到安慰剂组的显著改善

相比于安慰剂，对于活性物质，PTA/WINT二者的改善是显著且特异性的

低频听力的改善可以先于WRS的改善

耳鸣功能指数(TFI)和耳鸣响度(TL)显示出某种一致

●TFI评分的提高高达62pt降低(0-100)

√40％的活性物质组，显著的TFI改善≥10pt减少

√安慰剂组显著改善TFI为50％

√耳鸣响度的改善高达8pt降低(0-10)

70％活性物质组显著的TL改善减少≥2pt

安慰剂组显著TFI改善为33％

眩晕症状量表(VSS)

■改善高达33pt降低(0-60)

√55％活性物质组显著的VSS改善≥6pt降低

√安慰剂组显著VSS改善为33％

TL和VSS的改善在活性物质组比安慰剂组更大

TFI、TL和VSS均显示安慰剂效应

结果讨论

如上所述，在过去12个月中符合AAO-HNS 1995标准的四十(40)名成年志愿者参与临床治疗。来自四十(40)名成人受试者中二十六(26)名的子集的临床结果列于图1-3中。由这前两个组群产生的数据表明，依布硒啉的施用是安全的并且耐受良好，因为没有观察到显著不良事件。此外，没有发生与药物相关的不良事件。

最初的功效分析表明，与安慰剂相比，依布硒啉实现了几个次要终点。

依布硒啉治疗显示两个分析的组群中听力、耳鸣和眩晕的临床相关改善。

来自该临床治疗的数据支持使用依布硒啉，且更一般地，谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂和模拟物来限制自由基损伤、耳蜗或前庭炎症。总之，GPx调节剂，即依布硒啉在这些组群中表现出用于治疗、预防和/或改善MD和/或内淋巴水肿的良好的临床功效。

出于所有目的，在本说明书的主体内引用的所有参考文献、授权专利和专利申请均通过引用整体特此并入。

参考文献列表

American Academy of Otolaryngology-Head and NeckFoundation.Committeeon Hearing and Equilibrium guidelines for the diagnosis and evaluation oftherapy in Meniere’s disease.Otolaryngol Head Neck Surg.1995；113:181-5.

Hornibrook J,Kalin C,Lin E,等Transtympanic electrocochleography forthe diagnosis of Meniere’s disease.Int J Otolaryngol 2012；article 852714:1-11.

Kil J,Pierce C,Tran H,Gu R,Lynch ED.Ebselen treatment reduces noise-induced hearing loss via the mimicry and induction of glutathioneperoxidase.Hearing Res 2007；226:44-51.

Lee JE,Nakagawa T,Kim TS,Endo T,Shiga A,Iguchi F,Lee SH,Ito J.Role ofreactive radicals in degeneration of the auditory system of mice followingcisplatin treatment.Acta Otolaryngol.2004Dec；124(10):1131-5.

fLynch ED,Gu R,Pierce C,Kil J.Reduction of acute cisplatinototoxicity and nephrotoxicity in rats by oral administration of allopurinoland ebselen.Hear Res.2005bMar；201(1-2):81-9.

Meikle MB,Henry JA,Greist SE,等Tinnitus Functional Index:Developmentof a new clinical measure for chronic,intrusive tinnitus Ear Hearing 2011；33:153-176.

Müller A,Cadenas E,Graf P,Sies H.A novel biologically active seleno-organic compound—I.Glutathione peroxidase-like activity in vitro andantioxidant capacity of PZ51(ebselen).Biochem Pharmacol 1984；(33):3235-9.

Müller A,Gabriel H,Sies H,Terlinden R,Fischer H,Romer A.A novelbiologically active seleno-organic compound--VII.Biotransformation of ebselenin perfused rat liver.Biochem Pharmacol.1988Mar 15；37(6):1103-9.

Namura S,Nagata I,Takami S,Masayasu H,Kikuchi H.Ebselen reducescytochrome c release from mitochondria and subsequent DNA fragmentation aftertransient focal cerebral ischemia in mice.Stroke 2001 Aug；32(8):1906-11.

Noguchi N,Yoshida Y,Kaneda H,Yamamoto Y,Niki E.Action of ebselen asan antioxidant against lipid peroxidation.Biochem Pharmacol.1992 Jul 7；44(1):39-44.

Noguchi N,Gotoh N,Niki E.Effects of ebselen and probucol on oxidativemodifications of lipid and protein of low density lipoprotein induced by freeradicals.Biochim Biophys Acta.1994 Jul 14；1213(2):176-182.

Reiter R,Wendel A.Selenium and drug metabolism--II.Independence ofglutathione peroxidase and reversibility of hepatic enzyme modulations indeficient mice.Biochem Pharmacol 1984 Jun 15；33(12):1923-8.

Thorp MA,Shehab ZP,Bance ML,Rutka JA.AAO-HNS Committee on Hearing andEquilibrium.The AAO-HNS Committee on Hearing and Equilibrium guidelines forthe diagnosis and evaluation of therapy in Meniere’s disease:have they beenapplied in the published literature of the last decade？Clin OtolaryngolAllied Sci 2003；28:173-6.

Wendel A,Fausel M,Safayhi H,Tiegs G,Otter R.A novel biologicallyactive seleno-organic compound--II.Activity of PZ 51 in relation toglutathione peroxidase.Biochem Pharmacol 1984 Oct 15；33(20):3241-5.

Wilson RH,Burks CA.Use of 35 words for evaluation of hearing lossinsignal-to-noise babble ratio:A clinical protocol.JRRD 2005；42:839-52.

Yardley L,Donovan-Hall M,Smith HE,Walsh BM,Mullee M,Bronstein AM.Effectiveness of primary care-based vestibular rehabilitation for chronicdizziness.Ann Intern Med 2004；141:598-605.

Claims (33)

1.一种药物组合物，所述药物组合物包含依布硒啉以及一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)调节剂或模拟化合物；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在，并且选自由以下组成的组：

2,2'-二硒基-双-β-环糊精；

其中

R₁是H、甲基、乙基或异丙基；

R₂是H或乙基；

R₃是H、乙酰基、苯乙酰基、

其中

R₁是H、氧代、甲基、乙基、正丙基、正戊基、苯基、–(CHOH)_nCH₂OH或其中n是1-5；R₂是H或–COOH；

和6A,6B-二亚硒酸-6A’,6B’-硒桥β-环糊精。

3.如权利要求1所述的组合物，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且是2,2'-二硒基-双-β-环糊精。

4.如权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含一种或更多种处方利尿化合物。

5.一种试剂盒，所述试剂盒包含权利要求1-4中任一项所述的组合物和使用说明书。

6.一种治疗、预防和/或改善受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物。

7.一种治疗、预防和/或改善受试者的梅尼埃病的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉以及一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物。

8.一种治疗、预防和/或改善受试者的内淋巴水肿的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物。

9.一种治疗、预防和/或改善受试者的内淋巴水肿的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉以及一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物。

10.如权利要求7或9所述的方法，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且选自由以下组成的组：

2,2'-二硒基-双-β-环糊精；

其中

R₁是H、甲基、乙基或异丙基；

R₂是H或乙基；

R₃是H、乙酰基、苯乙酰基、

其中

R₁是H、氧代、甲基、乙基、正丙基、正戊基、苯基、–(CHOH)_nCH₂OH或其中n是1-5；R₂是H或–COOH；

和6A,6B-二亚硒酸-6A’,6B’-硒桥β-环糊精。

11.如权利要求7或9所述的方法，其中所述一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物作为一种化合物存在并且是2,2'-二硒基-双-β-环糊精。

12.如权利要求6-11中任一项所述的方法，其中GPx活性在患有梅尼埃病或内淋巴水肿的受试者中增加。

13.如权利要求6-12中任一项所述的方法，其中所述施用是口服施用。

14.如权利要求6-13中任一项所述的方法，其中通过选自由纯音测听、语音辨别测试、耳蜗电图描记法或磁共振成像组成的组的技术测量所述方法的功效。

15.如权利要求6-14中任一项所述的方法，其中所述治疗改善了受试者的纯音测听、语音辨别测试、耳蜗电图描记法或磁共振成像评分中的至少一个。

16.如权利要求6-15中任一项所述的方法，其中所述治疗增加了选自由以下组成的组的受试者测试评分中的至少一个：眩晕症状量表(VSS)、头晕残疾清单(DHI)、耳鸣功能指数(TFI)或耳鸣残疾清单(THI)。

17.一种减少受试者内耳中自由基产生的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述自由基选自由过氧亚硝酸根、过氧化氢阴离子、超氧阴离子、一氧化氮、硝基酪氨酸和羟基组成的组。

19.一种平衡内耳压力的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述受试者患有眩晕。

21.如权利要求19所述的方法，其中所述受试者患有头晕。

22.如权利要求19所述的方法，其中所述受试者患有听力损失。

23.如权利要求19所述的方法，其中所述受试者患有耳鸣。

24.如权利要求19-23中任一项所述的方法，其中通过耳蜗电图描记法或磁共振成像显示了所述内耳压力。

25.如权利要求6-24中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含一种或更多种处方利尿化合物。

26.如权利要求6-25中任一项所述的方法，其中所述组合物包含作为依布硒啉的替代品。

27.如权利要求6-26中任一项所述的方法，其中所述方法在多个低频率降低听力损失。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述频率选自由以下组成的组：0.25kHz、0.5kHz和1kHz。

29.如权利要求6-28中任一项所述的方法，其中所述方法将显著阈值移动的发生从基线测量值降低至少10dB。

30.如权利要求7-29中任一项所述的方法，其中所述受试者的全血细胞计数(CBC)和/或Chemistry-20保持不变。

31.如权利要求6-30中任一项所述的方法，其中所述方法将VSS评分从基线测量值降低至少六(6)个点。

32.一种减少耳蜗或前庭的炎症的方法，所述方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的包含依布硒啉和任选地一种或更多种其他谷胱甘肽过氧化物酶调节剂或模拟化合物的组合物。

33.如权利要求1-4任一项所述的组合物或权利要求5所述的试剂盒，其中所述组合物包含作为依布硒啉的替代品。