CN109464397A - 一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统及其制备方法和应用。本发明将氧化石墨烯进行羧基化或多糖化修饰，利用磷酸钙矿化羧基化或多糖化修饰的氧化石墨烯表层，得到所述多药共载载体；该载体可以通过π‑π堆积、疏水力作用稳定荷载偶氮芳香类药物，也能够利用磷酸钙共沉淀原理和静电吸附作用负载含有磷酸根基团的小分子化药和核酸类药物以及带负电的蛋白药物，从而得到能同时递送不同性质药物的多药共载系统。该多药共载系统对不同性质的药物具有较广谱的适用性，可开发应用于不同疾病的多通路联合治疗，显著提高疗效，是疾病联合治疗技术和药物递送系统领域的创新。

Description

一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统及其制备方法 和应用

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统及其制备方法和应用。

背景技术

许多疾病如癌症机制复杂，且治愈率低，易复发或转移，因此两种或多种治疗手段相结合的治疗策略应运而生，常用的包括药物治疗和射线治疗联用、药物治疗和手术治疗联用、多种药物联合治疗等。由于药物联合治疗相对于手术治疗和射线治疗等联合治疗来说更易操作、成本较低，且能够通过不同的凋亡信号通路杀死肿瘤细胞，达到疗效增加、克服肿瘤耐药的作用，故多种药物联合治疗具有广阔前景[R. Jadia, C. Scandore, P.Rai, Int. J. Nanotechnol. Nanomed., 2016, 1, 1-15.]。但是，药物因作用机制不同通常具备不同的理化性质，如亲水/疏水性、分子量、分子结构刚/柔性、荷电性、电离能力等，所以多药共载系统通常也需要针对复杂的药物性质进行巧妙的结构和功能设计，以满足不同性质药物的共载需求，这对材料学、物理化学、制剂学提出了很高的要求，是多药共载系统发展一大障碍。

氧化石墨烯质量轻，比表面积大（2600 m²/g），具有很高的强度和高的拉伸模量，良好的生物相容性和较小的细胞毒性，以及红外光吸收性质，因此在药物缓控释载体及光热治疗方面有着广阔的应用前景。纳米级氧化石墨烯能通过π-π堆积、疏水作用及氢键吸附作用等非共价作用荷载具有偶氮芳香性的化合物，对这类药物的包载效率极高[Z. Xu, S.Wang, Y. Li, M. Wang, P. Shi and X. Huang, ACS Appl. Mater. Interfaces, 2014,6, 17268-17276.]。但石墨烯类纳米材料因为电荷屏蔽效应，在生理条件下易发生聚集，稳定性较低，而对其进行表面修饰可以解决这一问题[E. Song, W. Han, C. Li, D. Cheng,L. Li, L. Liu, G. Zhu, Y. Song and W. Tan, ACS Appl. Mater. Interfaces, 2014,6, 11882-11890.]。常用来修饰氧化石墨烯的高分子中，天然多糖因为良好的生物相容性和可降解性，且具有大量如羧基、氨基、羟基等活性基团，比大多数合成高分子及生物大分子更便于利用且安全，显示出极大的优势。

生物矿化是指由生物体通过生物大分子的调控生成无机矿物的过程，典型的生物矿物有磷酸钙。生物矿物通常在温和的反应条件下（如水溶液、常温常压、近中性pH）形成，故这种仿生矿化手段近来常用于合成有机-无机功能材料。由于生物矿物无细胞毒性且在酸性条件下可降解，有研究者[F. L. Graham and A. J. van der Eb, Virology, 1973,52, 456-467.]基于生物矿化原理，提出磷酸钙-DNA共沉淀载药系统，利用钙离子和磷酸根粒子之间的强静电作用在其晶核生长过程中包载带负电的DNA，但该共沉淀系统晶体生长迅速且难以控制，故限制了该体系的应用。随着生物矿化技术的发展，出现了越来越多的控制磷酸钙晶体生长的方法，包括包覆脂质、PEG修饰或多糖修饰等[J. Li, Y. Yang and L.Huang, J Control Release, 2012, 158, 108-114; F. Pittella, H. Cabral, Y.Maeda, P. Mi, S. Watanabe, H. Takemoto, H. J. Kim, N. Nishiyama, K. Miyataand K. Kataoka, J Control Release, 2014, 178, 18-24; M. S. Lee, J. E. Lee, E.Byun, N. W. Kim, K. Lee, H. Lee, S. J. Sim, D. S. Lee and J. H. Jeong, JControl Release, 2014, 192, 122-130.]，这些方式除能控制晶体大小外还能增加制剂物理稳定性，有效保护核酸类药物不被生理环境下的酶降解，且相对于病毒载体、阳离子脂质体、胶束等常用的基因药物的载体来说，无免疫原性、蛋白吸附等毒副作用。例如有研究者[C. Qiu, W. Wei, J. Sun, H. Zhang, J. Ding, J. Wang and Q. Zhang,Nanoscale, 2016, 8, 13033-13044.]利用阿仑膦酸钠修饰的透明质酸来控制磷酸钙-siRNA的共沉淀，还有研究者[V. Sokolova, A. Kovtun, R. Heumann and M. Epple, J.Biol. Inorg. Chem., 2007, 12: 174-179.]在用磷酸钙负载DNA的同时还利用静电吸附负载牛血清白蛋白（BSA），这里BSA共价偶联了荧光标记物用于磷酸钙-DNA的胞内转运示踪，基于这些研究，磷酸钙共沉淀系统还可用于含磷酸根药物以及带负电的多肽、蛋白药物的递送，制备方便、结构精巧，可用于多药递送，但是基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载体系尚未见任何文献和专利报道。

发明内容

为了克服现在技术中的缺点与不足，本发明提供一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统及其制备方法和应用，该多药共载体系具有良好的生物相容性和载药稳定性，可避免有机溶剂、加热条件的使用，制备工艺简单易行，载药量高且药物比例可调等特征，实现了多药稳定共载、增效减毒等目的。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，所述多药共载系统包括多药共载载体和药物；所述多药共载载体包括磷酸钙晶体和氧化石墨烯；所述磷酸钙晶体均匀分布于氧化石墨烯上；所述药物为偶氮芳香性药物、含磷酸基团的药物、蛋白药物中的一种或两种及两种以上的组合；所述多药共载载体通过π-π堆积、疏水力作用稳定荷载偶氮芳香类药物，通过磷酸钙共沉淀原理和静电吸附作用分别负载含磷酸基团的药物和蛋白药物，从而得到能同时递送不同性质药物的多药共载系统。

优选地，所述氧化石墨烯的高度为0.8-1.2 nm，尺寸为0.1-5.0 μm。

优选地，所述偶氮芳香性药物包括阿霉素、表柔比星、喜树碱、SN38、伊立替康、米托蒽醌、甲氨蝶呤、白藜芦醇、布洛芬、竹红菌素、小檗碱、索拉菲尼、姜黄素和昂丹司琼。

优选地，所述含磷酸基团的药物包括小分子药物、磷酸化修饰前药和核酸类药物；所述蛋白药物包括腺苷酸脱氢酶、生长激素释放因子、胰岛素、干扰素和白介素；其中，所述小分子药物包括阿仑膦酸钠、氯屈膦酸二钠、帕米磷酸二钠、唑来膦酸、伊班磷酸，磷酸化修饰前药包括磷酸化槲皮素、单磷酸化吉西他滨、三磷酸化吉西他滨、磷酸化布帕伐醌、磷酸化苯妥英、三磷酸阿糖胞苷；所述核酸类药物包括具有特定功能的siRNA、miRNA、shRNA、反义寡核苷酸、pDNA、Aptamer、肽核酸。

一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备方法，包括以下步骤：

（1）将氧化石墨烯进行羧基化或多糖化修饰，得到羧基化氧化石墨烯溶液或者多糖修饰的氧化石墨烯溶液；

（2）将偶氮芳香性药物用药学上可接受溶剂溶解后，按照偶氮芳香性药物和氧化石墨烯质量比为0.1-5.0的比例加入上述步骤（1）的羧基化氧化石墨烯溶液或者多糖修饰的氧化石墨烯溶液中，用透析法或超滤法除去非水溶剂和小分子，得到修饰后氧化石墨烯药物单载组合物；

（3）向钙离子浓度为0.05-3.0 M的水溶液中加入零种、一种或一种以上的可与磷酸钙共沉淀或静电吸附的药物，搅拌0.5-6 h，得到混合溶液A；

（4）将羧基化氧化石墨烯或者多糖修饰的氧化石墨烯或者修饰后氧化石墨烯药物单载组合物于去离子水中分散，得到浓度为1-10 mg/mL的溶液，加入含磷酸根离子的水溶液，搅拌，按钙/磷摩尔比为1.5-100的比例加入混合溶液A，搅拌0.5-12 h，静置6-12 h老化，透析或超滤除杂制得粒径为10-1000 nm的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其中，所述含磷酸根离子的水溶液和混合溶液A的加入顺序可以调换。

优选地，所述步骤（1）多糖化修饰选用的多糖包括透明质酸、N-脱硫酸化肝素、羧甲基壳聚糖、软骨素以及衍生物。

优选地，所述步骤（3）钙离子由氯化钙、硝酸钙或乙酸钙提供；所述磷酸根离子由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、焦磷酸钠、焦磷酸、三聚磷酸钠或由磷酸根基团修饰的高分子材料提供。

优选地，所述由磷酸根基团修饰的高分子材料包括磷酸化透明质酸、聚乙二醇、肝素、羟乙基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、软骨素及其衍生物。

所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统作为制备治疗疾病药物的应用。

优选地，所述药物剂型为注射剂、口服药、外用贴或粘膜给药系统。

本发明与现有技术相比，其有益效果为：

一、本发明利用羧基化或多糖修饰的氧化石墨烯控制磷酸钙晶体的生长改善了晶体大小和物理稳定性；以氧化石墨烯为位点与加入的磷酸根离子反应生成磷酸钙晶体，而氧化石墨烯与磷酸钙矿化技术紧密结合，且磷酸钙晶体均匀分布于氧化石墨烯上，扩展了氧化石墨烯的载药适用性范围。制备基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，该多药共载系统一方面可以通过π-π堆积等作用于氧化石墨烯上稳定荷载偶氮芳香类药物，另一方面也能够利用磷酸钙共沉淀原理和静电吸附作用负载含有磷酸根基团的小分子化药、核酸类药物以及带负电的蛋白药物。该多药共载系统具有良好的生物相容性和载药稳定性，可避免有机溶剂、加热条件的使用，制备工艺简单易行，载药量高且药物比例可调等特征，实现了多药稳定共载、增效减毒等目的。

二、本发明巧妙利用氧化石墨烯载体和生物矿化的特性设计多药共载系统，利用同一载药系统同时递送一种或两种以上不同理化性质的药物，同时作用于靶标部位，通过多种通路联合治疗疾病，显著提高药效，且对不同性质的药物具有较广谱的适用性，可开发用于不同疾病的多通路联合治疗。

三、本发明通过控制羧基化或者多糖修饰后的氧化石墨烯的浓度、钙离子和磷酸根离子的浓度和比例、药物与载体的比例、药物与药物之间的比例、反应时间等，可实现该多药共载体系的尺寸可控。

四、本发明提供的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统可用于注射、口服、外用或粘膜给药，安全性高。

五、本发明的整个操作过程在温和液相体系下进行，方法简单，原料易得。

附图说明

图1为本发明实施例9中得到的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的高分辨透射电子显微镜图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件按照说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：多糖修饰氧化石墨烯的制备

将0.1 mmol氧化石墨烯置于去离子水中，冰浴超声得到0.5 mg/mL的氧化石墨烯分散液，加入0.3 mmol乙二胺修饰的透明质酸，以0.3 mmol EDC和0.3 mmol NHS为活化剂，反应24 h。反应结束后用透析袋（MWCO 20000、25000、50000）在去离子水中透析48 h，过滤并冻干得透明质酸修饰的氧化石墨烯。

实施例2：多糖修饰氧化石墨烯的制备

本例与实施例1基本相同，不同的是：多糖为羧甲基壳聚糖，以0.3 mmol EDC和0.3mmol DMAP为活化剂。

实施例3：多糖修饰氧化石墨烯的制备

本例与实施例1基本相同，不同的是：氧化石墨烯分散液浓度为1 mg/mL，多糖为N-脱硫酸化肝素。

实施例4：羧基化氧化石墨烯的制备

将0.1 mmol氧化石墨烯置于去离子水中，冰浴超声得到1.0 mg/mL的氧化石墨烯分散液，加入0.3 mmol氢氧化钠和0.3 mmol氯乙酸钠，水浴超声2 h，调节反应液pH至7.0，用透析袋（MWCO 3500）在去离子水中透析24 h或者超滤除去小分子，过滤并冻干得到羧基化修饰的氧化石墨烯。

实施例5：羧基化或者多糖修饰氧化石墨烯药物单载组合物的制备

将10 mg透明质酸修饰的氧化石墨烯置于10 mL去离子水中，冰浴超声分散得到1 mg/mL的透明质酸修饰的氧化石墨烯溶液。将10 mg偶氮芳香性药物盐酸阿霉素溶于1 mL药学可接受溶剂中，然后两者混合，冰浴超声1 h后，用透析袋（MWCO 3500）在去离子水中透析24h或者超滤除去小分子和有机溶剂，过滤并冻干得透明质酸修饰氧化石墨烯阿霉素单载组合物。

实施例6：羧基化或者多糖修饰氧化石墨烯药物单载组合物的制备

本例与实施例5基本相同，不同的是：修饰后的氧化石墨烯为羧甲基壳聚糖修饰的氧化石墨烯，偶氮芳香性药物为表柔比星，药物浓度为5 mg/mL。

实施例7：羧基化或者多糖修饰氧化石墨烯药物单载组合物的制备

本例与实施例5基本相同，不同的是：除去小分子的方法不是透析或超滤法而是离心法，即12000 rpm离心5分钟取沉淀，将沉淀用水溶解至原体积再次离心，重复此操作至上清液无红色，取沉淀真空干燥。

实施例8：羧基化或者多糖修饰氧化石墨烯药物单载组合物的制备

本例与实施例5基本相同，不同的是：修饰后的氧化石墨烯为羧基化氧化石墨烯，偶氮芳香性药物为甲氨蝶呤。

实施例9：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备

取0.05 M的氯化钙的DEPC溶液1 mL，加入5 mg氯屈膦酸二钠和5 nmol siRNA，搅拌30min，得到混合溶液A；取实施例5中得到的透明质酸修饰氧化石墨烯阿霉素单载组合物10mg，冰浴超声分散于5 mL去离子水中，加入混合溶液A，搅拌20 min，加入pH=7.4的0.02 M的磷酸氢二钠溶液1 mL，搅拌1 h，静置12 h老化，用透析袋（MWCO 50000）在去离子水中透析12 h除去杂质，制得基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，该系统平均粒径为160.2nm，Zeta电位为-20.4 mV，阿霉素载药量为41.2%，氯屈膦酸二钠载药量为9.7%，siRNA包封率为90.5%，其高分辨透射电子显微镜图如图1所示。

实施例10：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备

取0.05 M的硝酸钙的DEPC溶液1 mL，加入6 mg帕米磷酸二钠和5 nmol siRNA，搅拌1h，得到混合溶液A；取实施例6中得到的羧甲基壳聚糖修饰氧化石墨烯表柔比星单载组合物10 mg，冰浴超声分散于5 mL去离子水中，加入pH=7.4的0.01 M的磷酸二氢钾溶液1 mL，搅拌20 min，加入混合溶液A，搅拌3 h，静置6 h老化，用透析袋（MWCO 50000）在去离子水中透析24 h除去杂质，制得基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，该系统平均粒径为157.2nm，Zeta电位为-16.9 mV，表柔比星载药量为25.1%，帕米磷酸二钠载药量为11.2%。

实施例11：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备

取0.2 M的氯化钙的DEPC溶液1 mL，加入12 mg三磷酸化吉西他滨和2.5 nmol shRNA，搅拌40 min，得到混合溶液A；取实施例8中得到的羧基化氧化石墨烯甲氨蝶呤单载组合物8mg，冰浴超声分散于5 mL去离子水中，加入混合溶液A，搅拌20 min，加入pH=7.4的0.05 M的磷酸氢二铵溶液1 mL，搅拌1 h，静置12 h老化，用透析袋（MWCO 50000）在去离子水中透析12 h除去杂质，制得基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，该系统平均粒径为148.3nm，Zeta电位为-18.5 mV，甲氨蝶呤载药量为40.4%，三磷酸化吉西他滨载药量为13.8%，shRNA包封率为93.7%。

实施例12：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备

取0.5 M的氯化钙溶液1 mL，加入6 mg三磷酸化吉西他滨和0.1 mg白介素-2，搅拌1 h，得到混合溶液A；取实施例1中得到的透明质酸修饰氧化石墨烯6 mg，冰浴超声分散于5 mL去离子水中，加入pH=7.4的0.05 M的磷酸二氢钾溶液1 mL，搅拌20 min，加入混合溶液A，搅拌12 h，静置12 h老化，用透析袋（MWCO 50000）在去离子水中透析24 h除去杂质，制得基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，该系统平均粒径为202.8 nm，Zeta电位为-19.7 mV，三磷酸化吉西他滨载药量为10.1%，白介素-2载药量为3.6%。

实施例13：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用

本例为实施例9中制得的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用，即调节该系统等渗后进行静脉注射用来治疗耐药乳腺癌及其伴有的高钙血症。其中阿霉素用于治疗乳腺癌，而siRNA为抑制P-糖蛋白（Pgp）表达的si-Pgp，能够增加阿霉素在耐药乳腺癌中的聚积且增加耐药乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性，又因为恶性的乳腺癌中常伴有高钙血症的出现，故氯屈膦酸二钠可以抑制骨转移的发生或者在骨转移发生后治疗高钙血症。

实施例14：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用

本例为实施例10中制得的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用，即调节该系统等渗后进行静脉注射并辅以近红外光照用来治疗易发生溶骨性转移的肺癌。其中表柔比星用于治疗肺癌，同时利用氧化石墨烯的光热转换作用辅以近红外光照，既促进表柔比星的释放又抑制肺癌的溶骨性转移，而帕米磷酸二钠用于抑制骨转移的发生或者在骨转移发生后缓解溶骨性骨转移所致的疼痛。

实施例15：基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用

本例为实施例11中制得的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的应用，即调节该系统等渗后进行静脉注射用来从多通路治疗耐药乳腺癌。其中甲氨蝶呤通过抑制二氢叶酸还原酶而阻碍DNA的合成来治疗乳腺癌；而吉西他滨入胞后会被磷酸化得到其活性产物三磷酸化吉西他滨，通过掺入DNA来抑制DNA的合成，且避开了细胞膜上药物外排蛋白，达到治疗耐药乳腺癌的目的；同时shRNA为抑制Bcl-2基因表达的shBcl-2，非外排蛋白耐药的机制主要是Bcl-2蛋白的抗凋亡作用被激活，这里shBcl-2能够长期地特异性抑制Bcl-2蛋白的表达，抑制耐药的同时促进癌细胞的凋亡。

以上所述，仅是本发明较佳的实施例而已，并非对本发明的技术范围作任何限制，故凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何细微修改、等同变化和修饰，均属于本发明技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其特征在于，所述多药共载系统包括多药共载载体和药物；所述多药共载载体包括磷酸钙晶体和氧化石墨烯；所述磷酸钙晶体均匀分布于氧化石墨烯上；所述药物为偶氮芳香性药物、含磷酸基团的药物、蛋白药物中的一种或两种及两种以上的组合；所述多药共载载体通过π-π堆积作用稳定荷载偶氮芳香类药物，通过磷酸钙共沉淀原理和静电吸附作用分别负载含磷酸基团的药物和蛋白药物。

2.根据权利要求1所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其特征在于，所述氧化石墨烯的高度为0.8-1.2 nm，尺寸为0.1-5.0 μm。

3.根据权利要求1所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其特征在于，所述偶氮芳香性药物包括阿霉素、表柔比星、喜树碱、SN38、伊立替康、米托蒽醌、甲氨蝶呤、白藜芦醇、布洛芬、竹红菌素、小檗碱、索拉菲尼、姜黄素和昂丹司琼。

4.根据权利要求1所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其特征在于，所述含磷酸基团的药物包括小分子药物、磷酸化修饰前药和核酸类药物；所述蛋白药物包括腺苷酸脱氢酶、生长激素释放因子、胰岛素、干扰素和白介素。

5.权利要求1-4任一所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将氧化石墨烯进行羧基化或多糖化修饰，得到羧基化氧化石墨烯溶液或者多糖修饰的氧化石墨烯溶液；

将偶氮芳香性药物用药学上可接受溶剂溶解后，按照偶氮芳香性药物和氧化石墨烯质量比为0.1-5.0的比例加入上述步骤（1）的羧基化氧化石墨烯溶液或者多糖修饰的氧化石墨烯溶液中，用透析法或超滤法除去非水溶剂和小分子，得到修饰后氧化石墨烯药物单载组合物；

向钙离子浓度为0.05-3.0 M的水溶液中加入零种、一种或一种以上的可与磷酸钙共沉淀或静电吸附的药物，搅拌0.5-6 h，得到混合溶液A；

将羧基化氧化石墨烯或者多糖修饰的氧化石墨烯或者修饰后氧化石墨烯药物单载组合物于去离子水中分散，得到浓度为1-10 mg/mL的溶液，加入含磷酸根离子的水溶液，搅拌，按钙/磷摩尔比为1.5-100的比例加入混合溶液A，搅拌0.5-12 h，静置6-12 h老化，透析或超滤除杂制得粒径为10-1000 nm的基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统，其中，所述含磷酸根离子的水溶液和混合溶液A的加入顺序可以调换。

6.根据权利要求5所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）多糖化修饰选用的多糖包括透明质酸、N-脱硫酸化肝素、羧甲基壳聚糖、软骨素以及衍生物。

7.根据权利要求5所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）钙离子由氯化钙、硝酸钙或乙酸钙提供；所述磷酸根离子由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、焦磷酸钠、焦磷酸、三聚磷酸钠或由磷酸根基团修饰的高分子材料提供。

8.根据权利要求7所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统的制备方法，其特征在于，所述由磷酸根基团修饰的高分子材料包括磷酸化透明质酸、聚乙二醇、肝素、羟乙基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、软骨素及其衍生物。

9.权利要求1所述的一种基于生物矿化的氧化石墨烯多药共载系统作为制备治疗疾病药物的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物剂型为注射剂、口服药、外用贴或粘膜给药系统。