CN109349117A - 蓝莓组培苗瓶外生根方法 - Google Patents

Abstract

一种蓝莓组培苗瓶外生根方法，该方法以卷纸为固定介质，把蓝莓组培苗茎段放置在培养皿内，放置在组培室内进行生根培养，达到简易高效产生大量生根苗的目的。其方案为：培养皿、卷纸和酸化水的灭菌、蓝莓组培苗预处理、蓝莓组培苗放培养皿内培养、生根期间的管理。本发明无须使用泥炭、苔藓、珍珠岩等基质和具有遮阴效果的大棚温室设施以及复杂的管理措施，仅用卷纸作为固定介质，把组培苗放在培养皿中进行生根，同时一天只需喷两次酸化水进行保湿，具有节省空间、操作简便、生根率高等优点。该方法解决了目前蓝莓组培苗瓶外生根存在操作复杂、管理要求高、生产成本高、生根率低等问题，加快了蓝莓良种繁育的进程。

Description

蓝莓组培苗瓶外生根方法

技术领域

本发明涉及生物组织培养技术领域，更具体地说，特别涉及一种蓝莓组培苗瓶外生根方法。

背景技术

蓝莓(Vaccinium spp.)是杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vaccinium L.)植物，因其果实具有极高的营养保健价值和经济价值而备受关注。目前世界栽培面积超过13万公顷，总产量超过25万吨。伴随国际需求量的不断提升，世界蓝莓的栽培面积、产量和生产国数量不断上升，对蓝莓苗的需求量也逐年增加。

利用组培繁殖蓝莓苗，是一种高效快捷的育苗途径，对于母株数量较少、无法获得大量扦插条的蓝莓新品种显得尤其重要。对于蓝莓组培快繁来讲，组培室内通过培养基增殖培养的组培苗，从无根的茎段扦插形成有根的小苗是关键一步。蓝莓组培苗瓶内生根较慢且生根率较低，生产上通常采用瓶外生根的方法。由于组培苗一直生长在几乎恒温、100%的湿度环境下，枝叶很嫩，扦插到基质后，对外界环境的适应性较弱，因此对水分、温度等环境要求特别高，环境或基质过湿容易引起组培苗腐烂，过干会使组培苗萎蔫，从而导致管理难度加大。因此通常的做法是，组培苗出瓶前需要提前炼苗7-10天，采用泥炭和珍珠岩的混合物或苔藓等保水透气性好的基质进行扦插，然后放到有遮阳和喷雾设备的温室或大棚内，雇佣有经验的工人进行管理。这类方法程序复杂，成本高，对场地和管理要求高，单位面积上繁殖效率低。

发明内容

（一）技术问题

如何有效解决蓝莓组培常规方法所存在的程序复杂、繁殖成本高等问题，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

（二）技术方案

本发明提供了一种蓝莓组培苗瓶外生根方法，该方法包括如下步骤：

S1、将生根培养用的培养皿、卷纸、酸化水121℃灭菌20分钟；

S2、用镊子将继代培养40-50天、未经炼苗的蓝莓组培苗取出，用蒸馏水洗去基部培养基，剪成小段，茎段基部在生根液中浸泡，拿出放置半小时后在1000倍的多菌灵中浸泡消毒；

S3、将已消毒的卷纸折叠后斜铺在培养皿内，把预处理过的组培苗茎段依次紧密放在卷纸上，然后在组培苗茎段的基部再盖一层折叠的卷纸，继续在卷纸上放置组培苗，以此类推将培养皿放满；

S4、用喷雾器往培养皿内喷上述酸化水，直到卷纸全部湿润，并在培养皿底部出现薄薄的水层为止，然后把盖子合上；将培养皿放在组培室内，定期向培养皿内喷酸化水和1000倍的多菌灵；四周后组培苗生根完成，可以进行移栽。

优选地，在所述步骤S1中，酸化水pH为3.5-4.0，用硫酸和去离子水配置。

优选地，在所述步骤S2中，组培苗茎段长度为1.5-2.0 cm，生根液为1500-2000 mgL^-1 的IBA溶液，茎段基部蘸生根液的时间为2-3秒，多菌灵溶液浸泡20-30分钟。

优选地，在所述步骤S3中，卷纸折叠后的厚度为4层，宽度为1.5-2.0 cm，斜铺在培养皿内的角度为50-60°，蓝莓组培苗茎段放在卷纸内的深度为茎段的一半。

优选地，在所述步骤S4中，浇水频率每天早晚各1次，卷纸底部水层高度为1.5-2mm，杀菌剂喷施频率为每5-7天1次。

（三）有益效果

本发明提供了一种蓝莓组培苗瓶外生根方法，在该方法中，本发明利用培养皿和卷纸，在组培室内进行大量蓝莓组培苗的扦插生根。即用一个直径115 mm、高25mm的培养皿，能够扦插100-120株左右的组培苗，约10-14天开始生根，四周后生根率达到96.5%，根系生长旺盛。生根苗移栽到装有V(珍珠岩): V(泥炭)=1:1基质的穴盘中培育，每天浇一次水，一个月后幼苗可以长到5 cm左右，移栽成活率达到95%以上。

本发明中，省去了炼苗的过程，减少了常规蓝莓组培苗瓶外生根技术的环节，因为在培养皿环境下生长一个月，相当于一个逐步炼苗的过程，完成生根的小苗可以直接进行移栽。本发明利用卷纸代替泥炭、苔藓等基质，一方面卷纸具有保湿透气的特点，给无根的茎段提供充足的湿度的同时，也提供了充足的氧气，有利于生根；另一方面降低了生产成本，且管理简单。使用1.5-2 cm的短茎段进行扦插繁殖，大大增加了组培苗的利用率，增加了繁殖系数。利用培养皿代替穴盘或扦插苗床，115 mm直径的培养皿能扦插100-120株组培苗，大大减少了生根阶段的生产场地面积。在组培室内进行生根培养，可以减少生根阶段占用大棚温室的时间，提高大棚温室设施的利用效率。本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，其操作简便、生根率高、节省空间、生根成本低廉。

附图说明

图1 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中刚扦插的组培苗的照片；

图2 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中扦插4周后组培苗的照片；

图3 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中扦插4周后组培苗生根状况的照片。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。

请参考图1至图3，其中，图1 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中刚扦插的组培苗的照片；图2 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中扦插4周后组培苗的照片；图3 为使用本发明提供的蓝莓组培苗瓶外生根方法，培养皿中扦插4周后组培苗生根状况的照片。

实施例1

（1）、培养皿、卷纸和酸化水的灭菌：将生根培养用的培养皿、卷纸、用硫酸和去离子水配制的pH 3.5的酸化水121℃灭菌20分钟。

（2）、蓝莓组培苗预处理：用镊子将继代培养40-50天、未经炼苗的南方高丛蓝莓组培苗取出，用蒸馏水洗去基部培养基，剪成2.0 cm长的小段，茎段基部在2000 mg L^-1 IBA溶液中蘸2秒，放置半小时后在1000倍的多菌灵中浸泡30分钟取出。

（3）、蓝莓组培苗放培养皿内培养：将已消毒的卷纸折叠成4层厚、2 cm宽的纸条，呈50°角斜铺在培养皿内，把处理后的组培苗茎段依次紧密放在卷纸上，放在卷纸内的深度为茎段的一半，然后在组培苗茎段的基部再盖一层上述折叠的卷纸，继续在卷纸上放置组培苗，以此类推将培养皿放满。

（4）、生根期间的管理：用喷雾器往培养皿内喷灭菌的酸化水，直到卷纸全部湿润，并在培养皿底部出现1.5 mm左右的水层为止，然后把盖子合上；将培养皿放在组培室内进行生根，室内温度25℃±2℃、光照度3000lx、光照时间16 h·d^-1；每天早晚向培养皿内各喷1次灭菌的酸化水，每周喷一次1000倍的多菌灵。

4周后经统计，蓝莓组培苗插条生根率达到97.5%，将生根苗移栽到装有V(珍珠岩): V(泥炭)=1:1（将珍珠岩与泥炭按体积比为1：1混合配置作为培养基质）基质的穴盘中培育，每天浇一次水，喷一次1000倍的多菌灵，一个月后幼苗可以长到5.5 cm左右，移栽成活率达到96.3%。

实施例2

（1）、培养皿、卷纸和酸化水的灭菌：将生根培养用的培养皿、卷纸、用硫酸和去离子水配制的pH 4.0的酸化水121℃灭菌20分钟。

（2）、蓝莓组培苗预处理：用镊子将继代培养40-50天、未经炼苗的兔眼蓝莓组培苗取出，用蒸馏水洗去基部培养基，剪成1.5 cm长的小段，茎段基部在1500 mg L^-1 IBA溶液中蘸3秒，放置半小时后在1000倍的多菌灵中浸泡20分钟取出。

（3）、蓝莓组培苗放培养皿内培养：将已消毒的卷纸折叠成4层厚、1.5 cm宽的纸条，呈50°角斜铺在培养皿内，把处理后的组培苗茎段依次紧密放在卷纸上，放在卷纸内的深度为茎段的一半，然后在组培苗茎段的基部上再盖一层上述折叠的卷纸，继续在卷纸上放置组培苗，以此类推将培养皿放满。

（4）、生根期间的管理：用喷雾器往培养皿内喷灭菌的酸化水，直到卷纸全部湿润，并在培养皿底部出现2 mm左右的水层为止，然后把盖子合上；将培养皿放在组培室内进行生根，室内温度25℃±2℃、光照度3000lx、光照时间16 h·d^-1；每天早晚向培养皿内各喷1次灭菌的酸化水，每隔5天喷一次1000倍的多菌灵。

4周后经统计，蓝莓组培苗插条生根率达到95.5%，将生根苗移栽到装有V(珍珠岩): V(泥炭)=1:1基质的穴盘中培育，每天浇一次水，喷一次1000倍的多菌灵，一个月后幼苗可以长到5 cm左右，移栽成活率达到97.8%。

本发明的实施例是为了示例和描述起见而给出的，而并不是无遗漏的或者将本发明限于所公开的形式。很多修改和变化对于本领域的普通技术人员而言是显而易见的。选择和描述实施例是为了更好说明本发明的原理和实际应用，并且使本领域的普通技术人员能够理解本发明从而设计适于特定用途的带有各种修改的各种实施例。

Claims (5)

1.一种蓝莓组培苗瓶外生根方法，其特征在于，

包括如下步骤：

S1、将生根培养用的培养皿、卷纸、酸化水121℃灭菌20分钟；

S2、用镊子将继代培养40-50天、未经炼苗的蓝莓组培苗取出，用蒸馏水洗去基部培养基，剪成小段，茎段基部在生根液中浸泡，拿出放置半小时后在1000倍的多菌灵中浸泡消毒；

S3、将已消毒的卷纸折叠后斜铺在培养皿内，把预处理过的组培苗茎段依次紧密放在卷纸上，然后在组培苗茎段的基部再盖一层折叠的卷纸，继续在卷纸上放置组培苗，以此类推将培养皿放满；

S4、用喷雾器往培养皿内喷上述酸化水，直到卷纸全部湿润，并在培养皿底部出现薄薄的水层为止，然后把盖子合上；将培养皿放在组培室内，定期向培养皿内喷酸化水和1000倍的多菌灵；四周后组培苗生根完成，可以进行移栽。

2.根据权利要求1所述的蓝莓组培苗瓶外生根方法，其特征在于，

在所述步骤S1中，酸化水pH为3.5-4.0，用硫酸和去离子水配置。

3.根据权利要求1所述的蓝莓组培苗瓶外生根方法，其特征在于，

在所述步骤S2中，组培苗茎段长度为1.5-2.0 cm，生根液为1500-2000 mg L^-1 的IBA溶液，茎段基部蘸生根液的时间为2-3秒，多菌灵溶液浸泡20-30分钟。

4.根据权利要求1所述的蓝莓组培苗瓶外生根方法，其特征在于，

在所述步骤S3中，卷纸折叠后的厚度为4层，宽度为1.5-2.0 cm，斜铺在培养皿内的角度为50-60°，蓝莓组培苗茎段放在卷纸内的深度为茎段的一半。

5.根据权利要求1所述的蓝莓组培苗瓶外生根方法，其特征在于，

在所述步骤S4中，浇水频率每天早晚各1次，卷纸底部水层高度为1.5-2 mm，杀菌剂喷施频率为每5-7天1次。