CN109331641A - 一种垃圾除臭剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种垃圾除臭剂的制备方法,涉及除臭剂技术领域。所述垃圾除臭剂的制备方法包括如下步骤:将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂;将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂;将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂;向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品。本发明旨在制备一种可以降解垃圾、除臭效果好、无污染的微生物除臭剂。
Description
技术领域
本发明涉及除臭剂技术领域,特别涉及一种垃圾除臭剂的制备方法。
背景技术
随着经济的不断发展,生活水平不断提高,各地方的垃圾产量大幅度增加,这些垃圾堆积后会产生大量恶臭、有强烈刺激性的且易燃易爆的气体,这大量的臭气不但影响着周边居民的工作,生活环境,更重要的是对人的健康有很大的影响,尤其是对处理垃圾的工作人员的身体健康有很大的威胁。因此,解决臭气污染的问题显得尤为重要。
目前市场上常见为化学除臭剂及物理除臭剂,这些除臭剂都存在不能从根本上除臭、治理效果不理想、会对环境造成二次污染等问题。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种垃圾除臭剂的制备方法,旨在制备一种可以降解垃圾、除臭效果好、无污染的微生物除臭剂。
为实现上述目的,本发明提出的一种垃圾除臭剂的制备方法,包括如下步骤:
将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂;
将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂;
将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂;
向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品。
优选地,所述将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌的菌数不小于3×109CFU/mL,所述解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌的菌数不小于2×1010CFU/mL。
优选地,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,
所述发酵培养基包括18~30g/L葡萄糖、10~18g/L大豆蛋白胨、14~22g/L玉米浆干粉、1~5g/L氯化钠、0.05~0.5g/L硫酸镁、1.5~3g/L磷酸二氢钾和10~18g/L磷酸氢二钾;
所述发酵培养基的pH为7~7.5。
优选地,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,发酵培养的条件为:培养方式为恒温摇床培养,所述摇床的转速为150~220r/min,培养时间为16~48h,培养温度为25~40℃。
优选地,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌种子液的转接量与所述发酵培养基的体积比为(0.5~6):100。
优选地,所述将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂的步骤中,发酵培养的条件为:培养方式为恒温摇床培养,所述摇床的转速为150~220r/min,培养时间为16~48h,培养温度为25~40℃。
优选地,所述将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌种子液的转接量与所述发酵培养基的体积比为(0.5~6):100。
优选地,所述将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂的体积比为1:(0.1~10)。
优选地,所述向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品的步骤中,
所述加益粉与所述复合菌剂的固液比为(0.3~5):1;和/或,
干燥的温度为40~75℃,干燥时间为1~16h。
优选地,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤之前还包括如下步骤:
将枯草芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得枯草芽孢杆菌菌落,挑取所述枯草芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得枯草芽孢杆菌种子液;
将解淀粉芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得解淀粉芽孢杆菌菌落,挑取所述解淀粉芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得解淀粉芽孢杆菌种子液;
其中,所述摇床的转速均为150~220r/min。
本发明技术方案中,选用枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂的复合菌剂作为除臭剂主要成分,利用枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的特性将垃圾中的有刺激性气味的含硫化合物(如硫化氢)和含氮的化合物(如氨气)等,通过微生物的新陈代谢转化成没有刺激性气味的其他硫化物和胺类物质,不仅从根本上解决了垃圾发臭的问题,而且经其处理后的垃圾可以作为肥料使用,不会污染环境,绿色环保;此外,选用水溶性极好的加益粉作为载体,不仅避免了液体剂型除臭剂运输不便的问题,而且解决了固体剂型除臭剂除臭效果不佳的缺陷。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。
图1为本发明提供的垃圾除臭剂的制备方法的一实施例的流程示意图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例,参照附图做进一步说明。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
目前市场上常见的化学除臭剂及物理除臭剂都存在不能从根本上除臭、治理效果不理想、会对环境造成二次污染等问题。
鉴于此,本发明提出一种垃圾除臭剂的制备方法,请参阅图1,所述垃圾除臭剂的制备方法包括如下步骤:
步骤S30、将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂;
步骤S40、将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂。
上述步骤S30和步骤S40的作用在于将枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液发酵培养成发酵液,其培养过程可以选用不同类型的发酵培养基以及培养方式,均能达到制成菌剂的目的。为了发酵制得更多菌数,在本实施例中,步骤S30和步骤S40所采用的培养基均包括:18~30g/L葡萄糖、10~18g/L大豆蛋白胨、14~22g/L玉米浆干粉、1~5g/L氯化钠、0.05~0.5g/L硫酸镁、1.5~3g/L磷酸二氢钾和10~18g/L磷酸氢二钾;且培养基的pH为7~7.5。符合上述组分及其组分含量要求的培养基均在本发明的范围内。同时,两个步骤中,培养方式均优选为恒温摇床培养,所述摇床的转速优选为150~220r/min,培养时间优选为16~48h,培养温度优选为25~40℃。上述培养基及培养条件为枯草芽孢杆菌与解淀粉芽孢杆菌提供了良好的生长条件。
此外,为保证菌剂中包含足够多的菌数,枯草芽孢杆菌种子液以及解淀粉芽孢杆菌种子液的转接量与各自的发酵培养基的体积比均为(0.5~6):100。
步骤S60、将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂。
枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌均具有降解、净化的作用,可以将垃圾中的有刺激性气味的含硫化合物(如硫化氢)和含氮的化合物(如氨气)等,通过新陈代谢转化成没有刺激性气味的其他硫化物和胺类物质,同时,经对比发现,将二者一定的比例混合制备的复合菌剂的除臭效果更好。在本实施中,所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂的体积比为1:(0.1~10)。
需要注意的是,由于菌剂中菌数的多少会直接影响到复合菌剂的除臭效果,经多次实验,发明人认为枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌的菌数需要不小于3×109CFU/mL,解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌的菌数需要不小于2×1010CFU/mL。
因此在步骤S60将两种菌剂混合之前,需要先确定菌剂中菌数是否达到上述标准,在本发明的一实施例中,请参阅图1,在步骤S60中将两种菌剂混合之前,加入了步骤S50,即对两种菌剂分别进行计数,其使用的计数方法可以是采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌剂进行计数。其目的在于检测菌剂中的菌数是否达到标准,并根据检测结果判断是继续进行步骤S60,还是重新制备菌剂直至其菌数达到标准;或者在于根据计数值,直观地了解复合菌剂甚至除臭剂成品中两种菌的菌含量。
而由于步骤S60的目的仅在于将枯草芽孢杆菌菌剂与解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,因此,在具体实施时,步骤S30和步骤S40不存在先后顺序。
S70、向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品。
除臭剂成品可以有多种存在形式,诸如菌液、冻干粉、添加辅料的固体除臭剂等。由于液体剂型的除臭剂不利于运输和储存,运输和储存耗费的成本较大,因此,本发明将复合菌剂与加益粉混合干燥制成装载量大的固体剂型,同时,由于选作的载体为水溶性极好的加益粉,本发明制成的固体除臭剂不仅对微生物的装载效果好,而且具有较好的水溶性,使用时可以很容易的溶于水中,进而均匀地喷洒到固体垃圾表面,以充分发挥除臭效果。
上述步骤S70在具体实施时,可以按下述步骤进行:
向所述复合菌剂中按固液比为(0.3~5):1添加加益粉,得除臭剂湿品;
将上述除臭剂湿品在40~75℃温度下恒温干燥1~16h,得除臭剂成品。
此外,由于步骤S30中的枯草芽孢杆菌种子液及步骤S40中的解淀粉芽孢杆菌种子液可以经过培养制得,因此,在步骤S30之前,还包括步骤S10及步骤S20,具体步骤如下:
步骤S10、制备枯草芽孢杆菌种子液:将枯草芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得枯草芽孢杆菌菌落,挑取所述枯草芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得枯草芽孢杆菌种子液;
步骤S20、制备解淀粉芽孢杆菌种子液:将解淀粉芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得解淀粉芽孢杆菌菌落,挑取所述解淀粉芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得解淀粉芽孢杆菌种子液。
其中,所述摇床的转速均为150~220r/min。
上述步骤中,所使用的枯草芽孢杆菌菌种及解淀粉芽孢杆菌菌种均为冷冻保存的菌种,经上述活化处理后,即可制得后续步骤需要的枯草芽孢杆菌种子液及解淀粉芽孢杆菌种子液。
以下结合具体实施例和附图对本发明的技术方案作进一步详细说明,应当理解,以下实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于25℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于25℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养12h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照0.5%的接菌量转接0.25mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖18g/L、大豆蛋白胨10g/L、玉米浆干粉14g/L、氯化钠1g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾3g/L和磷酸氢二钾10g/L,pH=7.0。将发酵培养基置于35℃、转速为200r/min的恒温摇床中培养30h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为4.6x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照1%的接菌量转接0.5mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖30g/L、大豆蛋白胨18g/L、玉米浆干粉22g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.05g/L、磷酸二氢钾1.5g/L和磷酸氢二钾18g/L,pH=7.5。将发酵培养基置于25℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养48h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.1x1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:0.1的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照0.3:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于75℃烘箱中恒温干燥16h,得到除臭剂成品。
实施例2
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于37℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养12h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照1%的接菌量转接0.5mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖25g/L、大豆蛋白胨14g/L、玉米浆干粉17g/L、氯化钠3g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.4。将发酵培养基置于37℃、转速为200r/min的恒温摇床中培养24h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为5.2x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照2%的接菌量转接1mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖20g/L、大豆蛋白胨15g/L、玉米浆干粉16g/L、氯化钠2.5g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.4。将发酵培养基置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养28h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.4x1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:1的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照3:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于65℃烘箱中恒温干燥6h,得到除臭剂成品。
实施例3
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于37℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养12h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照2%的接菌量转接1mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖30g/L、大豆蛋白胨18g/L、玉米浆干粉22g/L、氯化钠1g/L、硫酸镁0.05g/L、磷酸二氢钾3g/L和磷酸氢二钾18g/L,pH=7.5。将发酵培养基置于40℃、转速为200r/min的恒温摇床中培养24h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为4.1x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照2%的接菌量转接1mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖18g/L、大豆蛋白胨10g/L、玉米浆干粉14g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L和磷酸氢二钾10g/L,pH=7.0。将发酵培养基置于30℃、转速为160r/min的恒温摇床中培养36h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.3x 1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:0.5的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照5:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于40℃烘箱中恒温干燥1h,得到除臭剂成品。
实施例4
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于37℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养12h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照4%的接菌量转接2mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖28g/L、大豆蛋白胨18g/L、玉米浆干粉20g/L、氯化钠4g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾1.8g/L和磷酸氢二钾12.8g/L,pH=7.4。将发酵培养基置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养28h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为4.8x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照6%的接菌量转接3mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖19g/L、大豆蛋白胨12g/L、玉米浆干粉15g/L、氯化钠2g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾2.5g/L和磷酸氢二钾16.3g/L,pH=7.5。将发酵培养基置于37℃、转速为180r/min的恒温摇床中培养28h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.4x 1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:5的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照5:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于65℃烘箱中恒温干燥8h,得到除臭剂成品。
实施例5
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于37℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于37℃、转速为150r/min的恒温摇床中培养8h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照6%的接菌量转接3mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖25g/L、大豆蛋白胨14g/L、玉米浆干粉17g/L、氯化钠3g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.4。将发酵培养基置于25℃、转速为220r/min的恒温摇床中培养16h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为5.4x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照3%的接菌量转接1.5mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖25g/L、大豆蛋白胨14g/L、玉米浆干粉17g/L、氯化钠3g/L、硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.4。将发酵培养基置于37℃、转速为150r/min的恒温摇床中培养24h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.3x1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:10的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照1:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于65℃烘箱中恒温干燥12h,得到除臭剂成品。
实施例6
取出-80℃条件下保藏的枯草芽孢杆菌和解淀粉枯草芽孢杆菌,分别用平板划线法在LB固体培养基上划线,置于40℃恒温培养箱得到单菌落。分别挑取单菌落接种于5mL液体培养基中,置于40℃、转速为220r/min的恒温摇床中培养14h得到枯草芽孢杆菌种子液和解淀粉枯草芽孢杆菌种子液。
将枯草芽孢杆菌种子液按照2%的接菌量转接1mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖20g/L、大豆蛋白胨15g/L、玉米浆干粉16g/L、氯化钠2.5g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.5。将发酵培养基置于40℃、转速为150r/min的恒温摇床中培养48h,得到枯草芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌含量为4.9x 109CFU/mL,符合菌含量要求。
将解淀粉芽孢杆菌种子液按照0.5%的接菌量转接0.25mL种子液于50mL发酵培养基中,发酵培养基中含有葡萄糖20g/L、大豆蛋白胨15g/L、玉米浆干粉16g/L、氯化钠2.5g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾2.3g/L和磷酸氢二钾12.5g/L,pH=7.5。将发酵培养基置于40℃、转速为220r/min的恒温摇床中培养16h,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂。采用固体LB培养基通过稀释涂布平板法对菌落计数,得到解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌含量为2.1x1010CFU/mL,符合菌含量要求。
将上述枯草芽孢杆菌菌剂和解淀粉芽孢杆菌菌剂按照1:1的体积比混合得到复合菌剂。
将复合菌剂按照3:1的固液比添加加益粉,得除臭剂湿品,将除臭剂湿品置于65℃烘箱中恒温干燥6h,得到除臭剂成品。
将上述实施例1~6制得的除臭剂溶于水,配成除臭剂溶液,除臭剂溶液中含有的微生物数量约为5×106个/mL。
取家庭生活垃圾放置5天发臭,作为实验对象,后文简称生活垃圾。
采用美国颁布的《水质检测方法中的嗅阈值测定方法》(2000年)对臭气阈值等级的划分(见表一)来评估处理实施例1~6制得的除臭剂对生活垃圾的除臭效果。
表一、嗅气阈值强度分级
等级 | 强度 | 说明 |
0 | - | 无臭味 |
1 | + | 刚能闻到但气味强度和种类难以判断 |
2 | ++ | 能判断何种气味 |
3 | +++ | 明显闻到气味 |
4 | ++++ | 较强气味 |
5 | +++++ | 强烈气味 |
一、不同处理时间下除臭效果对比
在500mL广口瓶中加入50g生活垃圾,按照除臭剂溶液占生活垃圾3%的质量比均匀地喷洒在生活垃圾表面,密闭并置于25℃条件下,分别在处理时间为1d、2d、4d、6d、8d、10d、12d时评估生活垃圾的臭气程度。结果如表二所示。
表二不同处理时间下除臭效果对比
由上表可知,本发明制备的除臭剂除臭效果良好,在处理10~12天后,即能清除生活垃圾的臭气。
二、不同温度下除臭效果对比
在500mL广口瓶中加入50g生活垃圾,按照除臭剂溶液占生活垃圾4%的质量比均匀地喷洒在生活垃圾表面,密闭并分别置于20℃、25℃、30℃条件下,以生活垃圾的臭气程度为1级强度作为标准,记录处理时长。以未加除臭剂的生活垃圾作空白对照。结果如表三所示。
表三不同温度下除臭效果对比
实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 | 实施例6 | 对照 | |
20℃ | 18d | 16d | 20d | 18d | 17d | 18d | 40d |
25℃ | 13d | 11d | 12d | 14d | 10d | 13d | 40d |
30℃ | 9d | 10d | 9d | 10d | 8d | 10d | 35d |
由上表可知,在常温下,本发明制备的除臭剂除臭效果良好,且温度升高有利于除臭剂的除臭效果。
三、除臭剂对臭气中氨气和硫化氢的吸收效果
在500mL广口瓶中加入50g生活垃圾,按照除臭剂溶液占生活垃圾2%的质量比均匀地喷洒在生活垃圾表面,用带孔橡皮塞塞住,导管一端插入广口瓶内,另一端伸入吸收液中,置于30℃条件下放置。每隔4d测量吸收液中氨气和硫化氢的浓度。结果如表四所示。
表四除臭剂对臭气中氨气和硫化氢的吸收效果
由上表可知,经本发明制备的除臭剂处理的生活垃圾后,其臭气中氨气和硫化氢呈逐渐减少趋势,除臭剂除臭效果良好。
以上仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂;
将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂;
将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂;
向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品。
2.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌菌剂中枯草芽孢杆菌的菌数不小于3×109CFU/mL,所述解淀粉芽孢杆菌菌剂中解淀粉芽孢杆菌的菌数不小于2×1010CFU/mL。
3.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,
所述发酵培养基包括18~30g/L葡萄糖、10~18g/L大豆蛋白胨、14~22g/L玉米浆干粉、1~5g/L氯化钠、0.05~0.5g/L硫酸镁、1.5~3g/L磷酸二氢钾和10~18g/L磷酸氢二钾;
所述发酵培养基的pH为7~7.5。
4.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,发酵培养的条件为:培养方式为恒温摇床培养,所述摇床的转速为150~220r/min,培养时间为16~48h,培养温度为25~40℃。
5.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌种子液的转接量与所述发酵培养基的体积比为(0.5~6):100。
6.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂的步骤中,发酵培养的条件为:培养方式为恒温摇床培养,所述摇床的转速为150~220r/min,培养时间为16~48h,培养温度为25~40℃。
7.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将解淀粉芽孢杆菌种子液转接于所述发酵培养基中培养,得解淀粉芽孢杆菌菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌种子液的转接量与所述发酵培养基的体积比为(0.5~6):100。
8.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂混合,得复合菌剂的步骤中,所述枯草芽孢杆菌菌剂与所述解淀粉芽孢杆菌菌剂的体积比为1:(0.1~10)。
9.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述向所述复合菌剂中添加加益粉,干燥后得除臭剂成品的步骤中,
所述加益粉与所述复合菌剂的固液比为(0.3~5):1;和/或,
干燥的温度为40~75℃,干燥时间为1~16h。
10.如权利要求1所述的垃圾除臭剂的制备方法,其特征在于,所述将枯草芽孢杆菌种子液转接于发酵培养基中培养,得枯草芽孢杆菌菌剂的步骤之前还包括如下步骤:
将枯草芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得枯草芽孢杆菌菌落,挑取所述枯草芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得枯草芽孢杆菌种子液;
将解淀粉芽孢杆菌菌种用平板划线法在LB固体培养基上划线,于25~40℃恒温培养得解淀粉芽孢杆菌菌落,挑取所述解淀粉芽孢杆菌菌落接种于LB液体培养基中,于25~40℃下恒温摇床培养8~14h,得解淀粉芽孢杆菌种子液;
其中,所述摇床的转速均为150~220r/min。
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