CN109312157A - 治疗癌症的lls化合物 - Google Patents

治疗癌症的lls化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN109312157A
CN109312157A CN201780022401.9A CN201780022401A CN109312157A CN 109312157 A CN109312157 A CN 109312157A CN 201780022401 A CN201780022401 A CN 201780022401A CN 109312157 A CN109312157 A CN 109312157A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
base
compound
amino
aryl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201780022401.9A
Other languages
English (en)
Inventor
K·S·拉姆
刘瑞武
T-C·施
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of California
Original Assignee
University of California
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of California filed Critical University of California
Publication of CN109312157A publication Critical patent/CN109312157A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/18—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with aryl radicals directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G73/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a linkage containing nitrogen with or without oxygen or carbon in the main chain of the macromolecule, not provided for in groups C08G12/00 - C08G71/00
    • C08G73/06—Polycondensates having nitrogen-containing heterocyclic rings in the main chain of the macromolecule
    • C08G73/18—Polybenzimidazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L79/00—Compositions of macromolecular compounds obtained by reactions forming in the main chain of the macromolecule a linkage containing nitrogen with or without oxygen or carbon only, not provided for in groups C08L61/00 - C08L77/00
    • C08L79/04—Polycondensates having nitrogen-containing heterocyclic rings in the main chain; Polyhydrazides; Polyamide acids or similar polyimide precursors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/14—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明提供了苯并咪唑化合物和利用所述化合物作为半乳糖凝集素‑1抑制剂的方法。

Description

治疗癌症的LLS化合物
相关申请的交叉参考
本申请要求2016年4月4日提交的编号62/318,085以及2016年7月7日提交的编号62/359,604的美国临时申请的优先权，其内容通过引用并入本文。
关于对在联邦政府资助的研发下作出的发明的权利的声明
本发明是在由国家癌症研究中心颁发基金号5R33CA160132-03的支持下完成的。政府享有本发明的一定权利。
背景技术
半乳糖凝集素-1(gal-1)是一种相当普遍存在的碳水化合物结合蛋白，可与各种细胞表面受体上的β-半乳糖苷基团结合。它可以在细胞内定位或分泌到细胞外空间中。在包括前列腺癌在内的几种癌症中，Gal-1常被发现在肿瘤基质中大幅升高。肿瘤和支持肿瘤的结缔组织中gal-1的表达上升被认为是恶性进展的明确迹象，通常与肿瘤的侵袭性和转移表型的获得相关(Ingrassia(2006)Curr.Med.Chem.13:3513；Rorive(2001)Glia 33:241；范登Brule(2001)J.Pathol.193:80)。Gal-1已在肿瘤转化、肿瘤细胞增殖、细胞聚集、粘附、迁移、细胞凋亡和免疫调节中显示出重要作用。此外，它与患者的预后不良有关，并且经常与肿瘤细胞在远距离(转移)或向周围正常组织中的播散有关。来自Castronovo组的研究表明，gal-1在细胞周围积聚可能通过诱导活化的T细胞凋亡(范登Brule(2003)Lab.TheInvestigation 83:377)、调节效应T细胞的存活或极化(Rubinstein(2004)Cancer Cell5：241)而起到免疫屏障的作用。因此，除了直接参与癌细胞生物学以外，gal-1还直接参与了肿瘤的免疫逃逸过程。Gal-1延长了VEGF受体2(VEGFR2)的细胞表面保留并刺激了VEGF非依赖性肿瘤的血管新生(Croci(2014)Cell 156:744)。Gal-1通过导致肿瘤免疫逃逸和转移的机制促进了肿瘤的进展(Rubinstein，op.cit.；Banh(2011)Cancer Res.71:4423；Dalotto-Moreno(2013)Cancer Res.73:1107)。有趣的是，gal-1受缺氧调节(Bahn，op.cit.)并控制EC信号传导(Hsieh(2008)Oncogene 27：3746)、VEGFR转运(D'Haene(2013)PloS One 8：e67029)和肿瘤血管新生(Thijssen(2006)PNAS USA 103:15975；Laderach(2013)Cancer Res.73:86；Mathieu(2012)J.Investig.Dermat.132:2245)。因此，Gal-1可以在对抗许多不同类型的癌症中提供重要的治疗靶点。
由于gal-1的致瘤作用已经确定，研究人员已经开始努力识别分子以阻断其功能。迄今报道的大多数化合物是β-半乳糖苷类似物、糖缀合物、肽或用有机部分修饰的碳水化合物，其靶向经典的碳水化合物结合位点。大多数化合物相当弱地且非特异性地结合于gal-1(Kd>100μM)，其主要是由于所有半乳糖凝集素中β-半乳糖苷结合位点的保守结构同源性。此外，由于生物利用度差，很少有这些化合物在体内进行了测试。小分子应该在体内更好暴露，因为它们对血浆蛋白酶和糖苷酶具有抗性。
发明概述
在一实施方式中，本发明提供了具有式J结构的化合物：
其中，式J的Ar可以是C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中Ar可被0-4个R5基团取代。R1可以是C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地被1-4个R1c基团取代。R1a和R1b可各自独立为氢或C1-6烷基。式I的R2可以是NR2aR2b、C5-12杂芳基或C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地被C1-6羟烷基取代。R2a和R2b可各自独立地为C1-6烷基、C1-6羟基烷基、或C1-6烷基-OC(O)CH3。或者，R2a和R2b可以是与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子可以是N、O、或S，其中所述C3-8杂环烷基任选地被1-4个R2c基团取代。各R1c和R2c可各自独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基或C6-12芳基。式I的R3可以是氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代。各R3a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、或-SO2-C6-12芳基。式I的R4可以是氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a或-C(O)NR4aR4b。各R4a和R4b可独立地为氢或C1-6烷基。式I的各R5和R6可独立地为氢或C1-6烷基。式I的R7可以是氢或C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代。各R7a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、或C1-6卤代烷氧基。式I的X1可以是C1-6亚烷基。式I的X2可以是无或C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。式I的下标n和m可独立地为0-3的整数。式I化合物还可以是其药学上可接受的盐和异构体。
在另一实施方式中，本发明提供了具有式I结构的化合物:
其中式I的R1可以是C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代。R1a和R1b可各自独立地为氢或C1-6烷基。式I的R2可以是NR2aR2b、C5-12杂芳基或C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代。R2a和R2b可各自独立地为C1-6烷基、C1-6羟烷基、或C1-6烷基-OC(O)CH3。或者，R2a和R2b可以与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子可以是N、O、或S，其中所述C3-8杂环烷基任选地被1-4个R2c基团取代。各R1c和R2c可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、或C6-12芳基。式I的R3可以是氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代。各R3a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、或-SO2-C6-12芳基。式I的R4可以是氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a或-C(O)NR4aR4b。各R4a和R4b可独立地为氢或C1-6烷基。式I的各R5和R6可独立地为氢或C1-6烷基。式I的R7可以是氢或C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代。各R7a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、或C1-6卤代烷氧基。式I的X1可以是C1-6亚烷基。式I的X2可以是无或C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。式I的下标s、n和m可独立地为0-3的整数。下标q可以是0-4的整数。式I化合物也可以是其药学上可接受的盐和异构体。
在另一实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其含有式I化合物和药学上可接受的赋形剂。
在另一实施方式中，本发明提供了一种治疗疾病的方法，所述方法包括向需要这种治疗的对象施用治疗有效量的式I化合物。
简要附图说明
图1显示了制备本发明化合物的合成方案。
图2显示了使用免疫细胞化学(抗切割的半胱天冬酶3抗体)染色珠结合SVOV3卵巢癌细胞的筛选实验的显微照片结果。
图3显示了通过用LLS2处理杀死的细胞的碘化丙啶染色。
图4显示了用各种浓度的生物素化LLS2处理72小时的SKOV3细胞的细胞存活率测定。
图5显示了可溶性LLS2杀死来自不同癌细胞系的细胞的能力。
图6显示(a)单独的LLS2、单独的PTX和LLS2与PTX组合的细胞毒性。(b)LLS2和PTX组合治疗的组合指数(C.I.)。C.I.<0.9表示协同作用，C.I.＝0.9-1.10表示叠加效应，C.I.>1.1表示拮抗作用。(c)LLS2在不同浓度下增强PTX的抗癌作用，和(d)联合处理SKOV3细胞后细胞凋亡增加。
图7显示(a)异种移植肿瘤。(b)肿瘤生长曲线，(c)接种裸鼠中异种移植物的肿瘤重量，和(d)裸鼠体重。简言之，将2.5×106个SKOV3细胞皮下注射到雌性先天性无胸腺BALB/c裸鼠背侧右侧。使肿瘤生长至约100mm3。然后，将小鼠随机分成对照组和治疗组(n＝5)。小鼠每天I.V.给药，连续5天给药。
图8显示(a)通过LC MS/MS从下拉测定中鉴定出洗脱蛋白为半乳糖凝集素-1，(b)使用抗半乳糖凝集素-1抗体的免疫印迹分析验证LC MS/MS的结果(1：空白珠，2：LLS2-珠，3：对照小分子珠)，(c)免疫染色结果显示LLS2与半乳糖凝集素-1共定位(SKOV3、A549、PC3和XPA3细胞被生物素化的LLS2染色(绿色)、Gal-1抗体染色(红色)和细胞核用DAPI(蓝色)染色，和(d)计算机模拟显示LLS2结合半乳糖凝集素-1二聚体的界面(显示了LLS2在3.5埃以内的残基。比例尺：50μm。)
图9显示了(a)半乳糖凝集素-1和H-Ras的共定位。(b)一旦被EGF激活，H-Ras将部分转运到质膜，引起Erk途径的激活。用LLS2(25μM)处理15分钟后，膜定位的H-Ras丢失。值得注意的是，LLS2处理30分钟后，细胞内的H-Ras增加了。(c)用缓冲液(-)或LLS2(+)处理后，通过免疫印迹分析膜相关H-Ras(活性形式)的定量表明LLS2能够降低膜相关H-Ras的水平。(d)LLS2也错误定位EGF刺激的K-Ras(G12V)而非N-Ras(Q61D)。(f)用LLS2处理2小时后磷酸化Mek和磷酸化Erk下调。
图10显示(A)在Matrigel包被的平板上培养的HUVEC，该平板具有(a)PC3条件培养基(CM)，(b)PC3CM+LLS2(10μM)，(c)半乳糖凝集素-1(1μM)和(d)半乳糖凝集素-1(1μM)+LLS2(10μM)；(B)通过在相差显微镜下培养24小时后测定分枝结节数确定的小管形成。
图11显示了响应于用本发明化合物治疗的异种移植肿瘤的生长抑制。
图12显示(a)LLS30(25μM)抑制MPNST细胞中的MEK/ERK途径。(b)LLS30至MPNST细胞死亡。
图13显示LLS30与恩杂鲁胺(上图)或多西紫杉醇(PC3，下图)的协同抗癌作用。
图14显示了本发明的珠结合的苯并咪唑基小分子库的合成方案。
图15显示了与图13的合成方案一起使用的氨基酸结构。
图16显示了与图13的合成方案一起使用的伯胺结构。
图17显示了与图13的合成方案一起使用的醛结构。
发明详述
I.概述
本发明提供了能够抑制糖结合蛋白半乳糖凝集素-1的化合物，从而提供了有益的治疗效果。本发明还提供了通过采用本发明化合物抑制半乳糖凝集素-1来治疗疾病和病症的方法。
II.定义
本文使用的缩写在化学和生物学领域中具有其常规含义。
当取代基用它们的常规化学式说明时，从左到右书写，它们同样包含从右到左书写结构所产生的化学上相同的取代基，例如-CH2O-等同于-OCH2-。
“烷基”是指具有所指碳原子数的直链或支链饱和脂族基团。烷基可以包括任意数量的碳，例如C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C1-7、C1-8、C1-9、C1-10、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6和C5-6。例如C1-6烷基包括(但不限于)：，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基等。烷基还可以指具有多达20个碳原子的烷基，例如(但不限于)庚基、辛基、壬基、癸基等。烷基可以是取代的或未取代的。
“羟烷基”或“烷羟基”是指如上定义的烷基基团，其中至少一个氢原子被羟基取代。关于烷基，烷羟基可以具有任何合适数目的碳原子，例如C1-6。示例性的烷羟基包括(但不限于)：羟甲基、羟乙基(其中所述羟基位于1-或2-位)、羟丙基(其中所述羟基位于1-、2-或3-位)、羟基丁基(其中所述羟基位于1-、2-、3-或4-位)、羟基戊基(其中所述羟基位于1-、2-、3-、4-或5-位)、羟基己基(其中所述羟基位于1-、2-、3-、4-、5-或6-位)、1,2-二羟乙基等等。
“亚烷基”是指具有所指碳原子数的直链或支链饱和脂族基团，并与至少两个其它基团相连，例如，二价烃基。与亚烷基相连的两个部分可以连接于亚烷基基团相同或不同的原子。例如，直链亚烷基可以是-(CH2)n-的二价基团，其中n是1、2、3、4、5或6。代表性的亚烷基基团包括(但不限于)：亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基、亚丁基、亚异丁基、亚仲丁基、亚戊基和亚己基。亚烷基可以是取代的或未取代的。
“烷氧基”是指具有与烷基基团与连接点相连的氧原子的烷基基团：烷基-O-。对于烷基，烷氧基可以具有任何合适数目的碳原子，例如C1-6。烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、2-丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。所述烷氧基还可以被本文所述的多个取代基取代。烷氧基可以是取代的或未取代的。
“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
“卤代烷基”是指如上所述的烷基，其中部分或所有氢原子被卤素取代。对于烷基，卤代烷基可以具有任何合适数目的碳原子，例如C1-6。例如，卤代烷基包括三氟甲基、氟甲基等。在某些情况下，术语“全氟”可以用于定义一种化合物或基团，其中所有的氢被氟取代。例如，全氟甲烷包括1,1,1-三氟甲基。
“卤代烷氧基”是指其中一些或所有氢原子被卤素原子取代的烷氧基。对于烷基基团，卤代烷氧基可以具有任何合适数目的碳原子，例如C1-6。该烷氧基可以被1、2、3或更多个卤素取代。当所有的氢被卤素取代时，例如被氟取代，则该化合物是完全取代的，例如全氟化的。卤代烷氧基包括(但不限于)：三氟甲氧基、2,2,2,-三氟乙氧基、全氟乙氧基等。
“环烷基”是指含有3-12个环原子或所示原子数的饱和或部分不饱和的单环、稠合双环或桥连多环。环烷基可包括任意数量的碳，例如C3-6、C4-6、C5-6、C3-8、C4-8、C5-8、C6-8、C3-9、C3-10、C3-11和C3-12。饱和单环环烷基环包括，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环辛基。饱和双环和多环环烷基环包括，例如降冰片烷、[2.2.2]二环辛烷、十氢化萘和金刚烷。环烷基也可以是部分不饱和的，在环中具有一个或多个双键或三键。代表性的部分不饱和环烷基包括(但不限于)：，环丁烯、环戊烯、环己烯、环己二烯(1,3-、1,4-异构体)、环庚烯、环庚二烯、环辛烯、环辛二烯(1,3-、1,4-和1,5-异构体)、降冰片烯和降冰片二烯。当环烷基是饱和单环C3-8环烷基，示例性的基团包括(但不限于)：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。当环烷基是饱和单环C3-6环烷基，示例性的基团包括(但不限于)：环丙基、环丁基、环戊基和环己基。环烷基可以是取代的或未取代的。
“杂环烷基”是指具有3-12个环成员且1-4个来自N、O和S的杂原子的饱和环系。也可采用其它杂原子，包括(但不限于)：B、Al、Si和P。所述杂原子也可被氧化，例如(但不限于)-S(O)-和-S(O)2-。杂环烷基可以包括任意数量的环原子，例如，3-6、4-6、5-6、3-8、4-8、5-8、6-8、3-9、3-10、3-11或3-12个环成员。所述杂环烷基可以包括任何合适数量的杂原子，例如1、2、3或4，或1-2、1-3、1-4、2-3、2-4或3-4。所述杂环烷基基团可包括例如氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷(azepane)、偶氮烷(azocane)、奎宁环、吡唑烷，咪唑烷、哌嗪(1,2-、1,3-和1,4-异构)、环氧乙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、氧杂(四氢吡喃)、环氧己烷、环硫乙烷、硫杂环丙烷、硫杂环丁烷(四氢噻吩)、硫化环戊烷(四氢噻喃)、噁唑烷、异噁烷、噻唑烷、异噻唑烷、二氧戊环、二硫戊环、吗啉、硫代吗啉、二噁烷或二噻烷。所述杂环烷基也可以与芳香族或非芳香族环系稠合以形成包括(但不限于)：二氢吲哚的成员。杂环烷基可以是未取代的或取代的。例如，杂环烷基可以被C1-6烷基或氧代(＝O)等取代。
所述杂环烷基可以通过环上的任何位置连接。例如，氮丙啶可以是1-或2-氮丙啶，氮杂环丁烷可以是1-或2-氮杂环丁烷，吡咯烷可以是1-、2-或3-吡咯烷，哌啶可以是1-、2-、3-或4-哌啶，吡唑烷可以是1-、2-、3-或4-吡唑烷，咪唑烷可以是1-、2-、3-或4-咪唑烷，哌嗪可以是1-、2-、3-或4-哌嗪，四氢呋喃可以是1-或2-四氢呋喃，噁唑烷可以是2-、3-、4-或5-噁唑烷，异噁唑烷可以是2-、3-、4-或5-异噁唑烷，噻唑烷可以是2-、3-、4-或5-噻唑烷，异噻唑烷可以是2-、3-、4-或5-异噻唑烷，吗啉可以是2-、3-或4-吗啉。
当杂环烷基包含3-8个环成员和1-3个杂原子时，代表性的环包括(但不限于)：，吡咯烷、哌啶、四氢呋喃、环氧乙烷、四氢噻吩、硫化环戊环、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、吗啉、硫代吗啉、二噁烷和二噻烷。杂环烷基也可形成具有5-6个环成员和1-2个杂原子的环，其代表性的环包括(但不限于)：，吡咯烷、哌啶、四氢呋喃、四氢噻吩、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷和吗啉。
“芳基”是指具有任何合适数量环原子和任何合适数量的环的芳环系统。芳基基团可包括任何合适数目的环原子，例如，6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个环原子，以及6-10、6-12、或6-14元环。芳基基团可以是单环的、稠合形成双环或三环基团，或通过键连接形成双芳基基团。代表性的芳基基团包括苯基、萘基和二苯基。其他芳基基团包括具有亚甲基连接基团的苄基。一些芳基基团具有6-12元环，例如苯基、萘基或双苯基。其他芳基基团具有6-10元环，例如苯基或萘基。其他一些芳基基团具有6元环，例如苯基。芳基可以是取代的或未取代的。
“烷基-芳基”是指具有烷基组分和芳基组分的基团，其中烷基组分和所述芳基组分在连接点相连。所述烷基组分如上所定义，不同之处在于所述烷基组分至少为二价的，亚烷基，与所述芳基组分在连接点相连。该烷基组分可包含任意数目的碳，例如C0-6、C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6和C5-6。在某些情况下，烷基组分可以为无。所述芳基组分如上所定义。烷基-芳基团的例子包括(但不限于)：，苄基和乙基-苯。烷基-芳基基团可以是取代的或未取代的。
“杂芳基”是指组合含有5-16个环原子的单环或稠合双环或三环芳环，其中1-5个环原子是杂原子，例如N、O或S。也可以采用其它杂原子，包括(但不限于)：B、Al、Si和P。所述杂原子也可以被氧化，例如(但不限于)-S(O)-和-S(O)2-。杂芳基基团可包含任意数目的环原子，例如，3-6、4-6、5-6、3-8、4-8、5-8、6-8、3-9、3-10、3-11或3-12个环成员。在所述杂芳基基团可以包含任何合适数目的杂原子，例如1、2、3、4或5，或1-2、1-3、1-4、1-5、2-3、2-4、2-5、3-4或3-5个。杂芳基基团可具有5-8个环成员并具有1-4个杂原子、或具有5-8个环成员并具有1-3个杂原子，或具有5-6个环成员并具有1-4个杂原子，或具有5-6个环成员并具有1-3个杂原子。所述杂芳基基团可以包括的基团例如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、四唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-、1,2,4-和1,3,5-异构体)、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑和异噁唑。所述杂芳基基团可稠和至芳香环系(例如苯环)以形成(但不限于)苯并吡咯(例如吲哚和异吲哚)、苯并吡啶(例如喹啉和异喹啉)、苯并吡嗪(喹喔啉)、苯并嘧啶(喹唑啉)、苯并哒嗪(例如酞嗪和噌啉)、苯并噻吩和苯并呋喃。其它杂芳基基团包括通过键而连接的杂芳基环，例如双吡啶。杂芳基基团可以是取代的或未取代的。
所述杂芳基基团可以通过环上的任意位置相连。例如，吡咯包括1-、2-和3-吡咯，吡啶包括2-、3-和4-吡啶，咪唑包括1-、2-、4-和5-咪唑，吡唑包括1-、3-、4-和5-吡唑，三唑包括1-、4-和5-三唑，四唑包括1-和5-四唑，嘧啶包括2-、4-、5-和6-嘧啶，哒嗪包括3-和4-哒嗪，1,2,3-三嗪包括4-和5-三嗪，1,2,4-三嗪包括3-、5-和6-三嗪，1,3,5-三嗪包括2-三嗪，噻吩包括2-和3-噻吩，呋喃包括2-和3-呋喃，噻唑包括2-、4-和5-噻唑，异噻唑包括3-、4-和5-异噻唑，噁唑包括2-、4-和5-噁唑，异噁唑包括3-、4-和5-异噁唑，吲哚包括1-、2-和3-吲哚，异吲哚包括1-和2-异吲哚，喹啉包括2-、3-和4-喹啉，异喹啉包括1-、3-和4-异喹啉，喹唑啉包括2-和4-喹唑啉，噌啉包括3-和4-噌啉，苯并噻吩包括2-和3-苯并噻吩，和苯并呋喃包括2-和3-苯并呋喃。
一些杂芳基基团包括具有5-10个环成员和1-3个环原子(包括N、O或S)的那些，例如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-、1,2,4-和1,3,5-异构体)、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑、异噁唑、吲哚、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、噌啉、苯并噻吩和苯并呋喃。其它杂芳基基团包括具有5-8个环成员和1-3个杂原子的那些，例如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-、1,2,4-和1,3,5-异构体)、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑和异噁唑。某些其它杂芳基基团包括具有9-12环成员和1-3个杂原子的那些，例如吲哚、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、噌啉、苯并噻吩、苯并呋喃和双吡啶。还有其它杂芳基基团包括具有5-6个环成员和1-2个环杂原子(包括N、O或S)的那些，例如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑、和异噁唑
一些杂芳基基团包括5-10个环成员并仅含有氮杂原子，例如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-、1,2,4-和1,3,5-异构体)、吲哚、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、和噌啉。其它杂芳基基团包括5-10个环成员并仅含有氧杂原子，例如呋喃和苯并呋喃。某些其它杂芳基基团包括5-10个环成员并仅含有硫杂原子，例如噻吩和苯并噻吩。还有其它杂芳基基团包括5-10个环成员并含有至少两个杂原子，例如咪唑、吡唑、三唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-、1,2,4-和1,3,5-异构体)、噻唑、异噻唑、噁唑、异噁唑、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、和噌啉。
“烷基-杂芳基”是指具有烷基组分和杂芳基组分的基团，其中所述烷基组分与所述杂芳基组分在连接点相连。所述烷基组分的定义如上，区别在于所述烷基组分至少为二价的，亚烷基，以与所述杂芳基组分相连并连接于连接点。所述烷基组分可以含有任意数目的碳，例如C0-6、C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6和C5-6。在某些情况下，所述烷基组分可以为无。所述杂芳基组分如本文所述。烷基-杂芳基基团可以是取代的或未取代的。
“盐”是指本发明方法中使用的化合物的酸或碱盐。药物上可接受的盐的说明性实例是无机酸(盐酸、氢溴酸、磷酸等)盐、有机酸(乙酸、丙酸、谷氨酸、柠檬酸等)盐、季铵(甲基碘、乙基碘等)盐。应理解，所述药物上可接受的盐是无毒的。关于合适的药学上可接受的盐的其他信息可在雷明顿制药学，第17版(Remington's Pharmaceutical Sciences，17版，Mack Publishing Company，Easton，PA.,1985)中找到，其通过引用并入本文。
本发明酸性化合物的药学上可接受的盐是与碱形成的盐，即阳离子盐，例如碱金属和碱土金属盐，例如钠、锂、钾、钙、镁、以及铵盐，例如铵，三甲基铵、二乙基铵和三(羟甲基)甲基铵盐。
类似地，酸加成盐，例如无机酸，有机羧酸和有机磺酸，例如盐酸、甲磺酸、马来酸，也是可以的，条件是如吡啶基的碱性基团构成结构的一部分。
化合物的中性形式可以通过将盐与碱或酸接触并以常规方式将母体化合物分离来再生。该化合物的母体形式在某些物理性质上不同于各种盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但是为了本发明的目的，该盐等同于该化合物的母体形式。
“水合物”是指与至少一种水分子复合的化合物。本发明化合物可以与1-10个水分子复合。
“异构体”是指具有相同化学式但在结构上可区分的化合物。本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋物、非对映异构体、几何异构体和单个异构体均包含在本发明的范围内。
“互变异构体”是指两个或更多个结构异构体中的一个，其平衡存在并且易于从一种形式转化为另一种形式。本发明包括本发明化合物的所有互变异构体和立体异构体，可以是混合物，也可以是纯的或基本上纯的形式。本发明化合物可以在碳原子上具有不对称中心，因此本发明化合物可以以非对映异构或对映异构形式或其混合物存在。所有构象异构体(例如，顺式和反异构体)和所有光学异构体(例如，对映异构体和非对映异构体)、外消旋、非对映异构体和这些异构体的其他混合物，以及溶剂化物、水合物、同形体、多晶型和互变异构体属于本发明的范围。本发明的化合物可以使用非对映异构体、对映异构体或外消旋混合物作为起始原料从而进行制备。此外，非对映异构体和对映异构体产物可以通过色谱法、分步结晶或本领域技术人员已知的其他方法进行分离。
“药学上可接受的赋形剂”和“药学上可接受的载体”是指有助于活性药物的施用以及受试者吸收的物质，并且可以包含在本发明组合物中而不会对患者造成显著的毒副作用。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括水、NaCl、生理盐水溶液、乳酸林格氏液、常规蔗糖、常规葡萄糖、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣、甜味剂、调味剂和着色剂等。本领域技术人员将认识到其他药物赋形剂可用于本发明。
“接触”是指将至少两种不同物质相接触的过程，使得它们可以彼此反应或相互作用，从而使一种物质对另一种物质起作用。然而，应该理解，所得反应产物可以直接由所添加试剂之间的反应产生，或者由一种或多种可以在反应混合物中产生的所添加试剂的中间产物产生。
“治疗”、“处理”和“疗法”是指任何成功治疗或改善损伤、病理或病症的标志，包括任何客观或主观参数，例如减轻、缓解、消除症状或使患者更容易耐受伤害、病理或病症；减缓退化或衰退的速度；使退化的最后节点的虚弱得到改善；改善患者的身心健康。症状的治疗或改善可以基于客观或主观参数；包括身体检查、神经精神病学检查和/或精神病评估的结果。
“患者”或“有需要的受试者”是指患有或倾向于病症的活生物体，所述病症可通过施用本文提供的药物组合物治疗。非限制性实例包括人、其他哺乳动物和其他非哺乳动物。
“疾病”或“病症”是指能够用本发明半乳糖凝集素-1(gal-1)抑制剂治疗的患者或受试者的生存或健康状态。疾病或病症包括(但不限于)：，卵巢癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、胰腺癌、结肠癌和非小细胞肺癌。
“化学治疗剂”是指可用于治疗或改善癌症的化合物或药物组合物。该药剂可以具有治疗意图，旨在延长寿命或减轻症状。
本发明化合物的描述受到本领域技术人员已知的化学键合原理的限制。因此，当基团可以被许多取代基中的一个或多个取代时，选择这样的取代以符合化学键合的原理并且提供并非本身就不稳定和/或本领域技术人员所知的在环境条件下(例如水性、中性或生理环境)可能不稳定的化合物。
III.化合物
本发明提供了多种式I和J的半乳糖凝集素-1(gal-1)抑制剂。在一些实施方案中，本发明提供了具有以下结构的化合物
其中式J的Ar可以是C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中Ar可以被0-4个R5基团取代。R1可以是C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代。R1a和R1b可各自独立地为氢或C1-6烷基。式I的R2可以是NR2aR2b、C5-12杂芳基或C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代。R2a和R2b可各自独立地为C1-6烷基、C1-6羟烷基、或C1-6烷基-OC(O)CH3。或者，R2a和R2b可以与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子可以是N、O、或S，其中所述C3-8杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代。每个R1c和R2c可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、或C6-12芳基。式I的R3可以是氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代。每个R3a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、或–SO2-C6-12芳基。式I的R4可以是氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a或-C(O)NR4aR4b。每个R4a和R4b可独立地为氢或C1-6烷基。式I的每个R5和R6可独立地为氢或C1-6烷基。式I的R7可以是氢或C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代。每个R7a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、或C1-6卤代烷氧基。式I的X1可以是C1-6亚烷基。式I的X2可以为无或C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。式I中的下标n和m可独立地为0-3的整数。式I化合物也可以是其药学上可接受的盐和异构体。
在一些实施方式中，Ar可以是C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中Ar可以被0-4个R5基团取代。代表性的芳基和杂芳基基团包括(但不限于)：，苯基、吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑、异噁唑、吲哚、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、噌啉、苯并噻吩和苯并呋喃。在一些实施方式中，Ar可以是苯基或吡啶基。在一些实施方式中，Ar可以是苯基。在一些实施方式中，Ar可以是吡啶基。
在一些实施方式中，本发明提供了具有以下结构的化合物
其中式I的R1可以是C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代。R1a和R1b可各自独立地为氢或C1-6烷基。式I的R2可以是NR2aR2b、C5-12杂芳基或C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代。R2a和R2b可各自独立地为C1-6烷基、C1-6羟烷基、或C1-6烷基-OC(O)CH3。或者，R2a和R2b可以与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子可以是N、O、或S，其中所述C3-8杂环烷基任选地被1-4个R2c基团取代。R1c和R2c可各自独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、或C6-12芳基。式I的R3可以是氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代。每个R3a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、或–SO2-C6-12芳基。式I的R4可以是氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a或-C(O)NR4aR4b。R4a和R4b可各自独立地为氢或C1-6烷基。式I的R5和R6可各自独立地为氢或C1-6烷基。式I的R7可以是氢或C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代。各R7a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、或C1-6卤代烷氧基。式I的X1可以是C1-6亚烷基。式I的X2可以是无或C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。式I的下标n和m可独立地为0-3的整数。下标q可以是0-4的整数.式I化合物也可以是其药学上可接受的盐和异构体。
在一些实施方式中，式I的R1可以是C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代。在一些实施方式中，R1可以是C1-6烷基，-NH2、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代。在一些实施方式中，R1可以是C1-6烷基、-NH2、C3-10环烷基、C5-6杂环烷基或C5-6杂芳基，其中所述杂环烷基或杂芳基具有1、2、或3个N原子。在一些实施方式中，R1可以是C1-6烷基、-NH2、金刚烷基、哌啶基、苯基、吡啶基、和咪唑基，其中所述苯基任选地由1-4个R1c基团取代。在一些实施方式中，R1a和R1b可各自独立地为氢或C1-6烷基。R1a或R1b的所述烷基可独立地为任何合适的烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、和己基等。
在一些实施方式中，式I的R1是任选地由1-4个R1c基团取代的芳基。在一些实施方式中，每个R1c可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基或C6-12芳基。在一些实施方式中，各R1c可独立地为卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基或C1-6卤代烷氧基。在一些实施方式中，每个R1c可独立地为氟、氯、-CF3、-OCH3、或–OCF3。
在一些实施方式中，式I的R2可以是NR2aR2b、C5-12杂芳基、或C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代。在一些实施方式中，式I的R2可以是NR2aR2b。在一些实施方式中，R2a和R2b可各自独立地为C1-6烷基、C1-6羟烷基、或C1-6烷基-OC(O)CH3。在一些实施方式中，R2a和R2b可以与其所相连的氮结合形成具有0-2个另外杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子可以是N、O、或S，其中所述C3-8杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代。在一些实施方式中，R2a和R2b可各自独立地为-CH2CH2OH或–CH2CH2OC(O)CH3。在一些实施方式中，R2a和R2b与其所相连的氮形成4-吗啉基或4-甲基哌嗪-1-基。
在一些实施方式中，每个R2c可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基或C6-12芳基。在一些实施方式中，每个R2c独立地为C1-6烷基。每个R2c的所述烷基可独立地为任何合适的烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、和己基等。
在一些实施方式中，式I的R3可以是氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基、和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代。在一些实施方式中，R3可以是氢、C3-8环烷基、C6-12芳基、或C5-12杂芳基，其中所述芳基和杂芳基任选地被1-4个R3a基团取代。在一些实施方式中，R3可以是氢、C3-8环烷基、C6-12芳基或C5-6杂芳基，其中所述芳基和杂芳基可任选地被1-4个R3a基团取代。在一些实施方式中，R3可以是氢、环己基、苯基、萘基、吡咯基、吲唑基、吲哚基、和硫代苯基，其中所述苯基、吡咯基、和硫代苯基任选地由1-4个R3a基团取代。
在一些实施方式中，每个R3a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基，或-SO2-C6-12芳基。在一些实施方式中，每个R3a可独立地为卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C5-12杂芳基、或-SO2-C6-12芳基。在一些实施方式中，每个R3a可独立地为卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C5-6杂芳基、或-SO2-C6-12芳基，其中所述杂芳基具有1、2、或3个N原子。在一些实施方式中，每个R3a可独立地为溴、氯、-CF3、-OCH3、吡啶、嘧啶、吡唑、或-SO2-苯基。
在一些实施方式中，式I的R4可以是氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a或-C(O)NR4aR4b。在一些实施方式中，每个R4a和R4b可独立地为氢或C1-6烷基。每个R4a和R4b的烷基可独立地为任何合适的烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、和己基等。在一些实施方式中，R4是-C(O)NH2。
在一些实施方式中，式I的R7可以是氢或C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代。在一些实施方式中，每个R7a可独立地为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基或C1-6卤代烷氧基。在一些实施方式中，R7是氢。
在一些实施方式中，式I的X1可以是C1-6亚烷基。X1的亚烷基可以是任何合适的亚烷基基团，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、和亚己基等。在一些实施方式中，X1可以是亚甲基、亚乙基、或亚丙基。在一些实施方式中，式I的X2可以为无。在一些实施方式中，X2可以是C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。在一些实施方式中，X2可以是亚甲基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-或-C(O)CH(NH2)CH(OH)-。
在一些实施方式中，式I的下标s、n和m可独立地为0-3的整数。在一些实施方式中，下标n可以是0、1、2或3。在一些实施方式中，下标n可以是0或1。在一些实施方式中，下标n是0。在一些实施方式中，下标n是1。在一些实施方式中，下标m可以是0、1、2或3。在一些实施方式中，下标m可以是0或1。在一些实施方式中，下标m是0。在一些实施方式中，下标m是1。在一些实施方式中，下标q可以是0-4的整数。在一些实施方式中，下标q可以是0、1、2、3或4。在一些实施方式中，下标q可以是0、1、2或3。在一些实施方式中，下标q可以是0或1。在一些实施方式中，下标q是0。在一些实施方式中，下标q是1。
在一些实施方式中，式I化合物可以具有以下结构：
其中R1、R2a、R2b、R3、R4、R5、R6、X1、X2、m、n和q如上所定义。
在一些实施方式中，式I化合物可以具有以下结构：
其中R1、R2a、R2b、R3、X1、和X22如上所定义。
在一些实施方式中，式I化合物可以是：
LLS1.
LLS2.
LLS3.
LLS4.
LLS5.
LLS6.
LLS7.
LLS8.
LLS9.
LLS10.
LLS11.
LLS12.
LLS13.
LLS14.
LLS15.
LLS16.
LLS17.
LLS18.
LLS19.
LLS20.
LLS21.
LLS22.
LLS23.
LLS24.
LLS25.
LLS26.
LLS27.
LLS28.
LLS29.
LLS30.
LLS31.
LLS32.
LLS33
LLS34
LLS35.
LLS36.
LLS37.
LLS38.
LLS39.
LLS40.
LLS41.
LLS42.
LLS43.
LLS43Ac.
LLS44.
LLS45.
LLS45Ac.
LLS46.
LLS51.
LLS52.
LLS52Ac.
LLS53.
LLS53Ac
LLS54.
LLS55.
LLS56.
LLS56Ac.
LLS58.
LLS58Ac.
LLS59.
LLS63.
LLS64.
LLS65.
LLS66.
LLS67.
LLS69Ac.
LLS71.
LLS73.
LLS76.
LLS77.
LLS78.
LLS80.
LLS82.
在一些实施方式中，式I化合物可以是：
LLS30.在一些实施方式中，式I化合物可以是：
LLS80.在一些实施方式中，所述化合物可以是：
在一些实施方式中，所述化合物可以是：
在一些实施方式中，所述化合物可以是：
本发明化合物也可以是其盐和异构体。在一些实施方式中，本发明化合物包括其盐形式。可用的盐形式的例子包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、酒石酸盐(例如(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或其混合物，包括外消旋混合物)、琥珀酸盐、苯甲酸盐以及与氨基酸(例如谷氨酸)形成的盐。这些盐可以通过本领域技术人员已知的方法制备。当本发明化合物含有相对碱性的官能团时，酸加成盐可以通过使这些化合物的中性形式与足量的所需酸(无溶剂的或在合适的惰性溶剂中)接触而获得。可接受的酸加成盐的实例包括衍生自无机酸的那些，如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸或亚磷酸等，以及来自有机酸的盐，如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等。还包括氨基酸盐，例如精氨酸盐等，以及有机酸盐，如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等(见，例如,Berge等,“药学上的盐”(“Pharmaceutical Salts”),Journal of Pharmaceutical Science,1977,66,1-19)。本发明的某些特定化合物含有碱性酸性官能团，其允许化合物转化为碱加成盐。关于合适的药学上可接受的盐的其他信息可在雷明顿制药学(Remington's PharmaceuticalSciences)，第17版，马克出版公司(Mack Publishing Company)，伊斯顿，宾夕法尼亚州，1985中找到，其通过引用并入本文。
优选通过将盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物来再生化合物的中性形式。该化合物的母体形式在某些物理性质上不同于各种盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度。
本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。通常，溶剂化形式等同于未溶剂化形式，并且包含在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。一般而言，所有物理形式对于本发明所涉及的用途是等同的，并且应在本发明的范围内。
本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；对映异构体、外消旋体、非对映异构体、互变异构体、几何异构体、立体异构形式，就绝对立体化学而言，对于氨基酸可定义为(R)-或(S)-或(D)-或(L)-，且本发明范围包括单个异构体。本发明化合物不包括本领域已知的那些合成或分离太不稳定的化合物。本发明旨在包含外消旋和光学纯形式的化合物。光学活性(R)-和(S)-，或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术解决。
异构体包括具有相同数量和种类原子的化合物，因此具有相同的分子量，但在原子的结构排列或构型方面不同。
对于本领域技术人员显而易见的是，本发明的某些化合物可以以互变异构的形式存在，化合物的所有这些互变异构形式都在本发明的范围内。互变异构体是指两个或更多个结构异构体中的一个，其存在于平衡状态并且易于从一种异构形式转化为另一种异构形式。
除非另行说明，否则本文描述的结构也意味着包括结构的所有立体化学形式；即，每个不对称中心的R和S构型。因此，单一立体化学异构体以及本发明化合物对映异构和非对映异构体的混合物都在本发明的范围内。
除非另行说明，否则本发明化合物还可以在构成这些化合物的一个或多个原子上含有非天然比例的原子同位素。例如，本发明化合物可以放射性标记放射性同位素，例如氘(2H)、氚(3H)、碘-125(125I)，碳-13(13C)或碳-14(14C)。本发明化合物的所有同位素变体，无论是放射性的还是非放射性的，均包含在本发明的范围内。
除盐形式外，本发明提供了前药形式的化合物。本文所述化合物的前药是那些在生理条件下容易发生化学变化以提供本发明化合物的化合物。另外，前药可以通过化学或生物化学方法在离体环境中转化为本发明化合物。例如，当用合适的酶或化学试剂置于透皮贴剂储库中时，前药可以缓慢转化为本发明化合物。
本发明化合物可以通过本领域技术人员已知的各种方法合成(参见有机转换大全(Comprehensive Organic Transformations)Richard C.Larock，1989)或通过公知的合成方法进行适当组合。用于合成本发明化合物的技术对于相关领域的技术人员而言是显而易见且易于获得的。提供以下讨论以说明可用于组装本发明化合物的某些不同方法。然而，该讨论并非用于限定可用于制备本发明化合物的反应或反应顺序的范围。本领域技术人员将理解，制备该化合物的其他方法可用于本发明。尽管所描述的一些化合物可能表示相对立体化学，但化合物可以作为外消旋混合物或作为对映体存在。
IV.药物组合物
在一些实施方式中，本发明提供了药物组合物，包括药学上可接受的赋形剂和本发明化合物。在一些实施方式中，所述组合物还包括额外的化学治疗剂。
化学治疗剂
适用于本发明的化学治疗剂包括可用于治疗或改善癌症的药剂的那些，包括(但不限于)：阿地白介素、艾乐替尼、间变性淋巴瘤激酶、卡博替尼、埃洛妥珠单抗、氟甲睾酮、碘苄胍、咪喹莫特、干扰素、伊莎佐米(ixazomib)、兰瑞肽、香菇多糖、米托坦、白蛋白结合性紫杉醇(nab-paclitaxel)、耐昔妥珠单抗(necitumumab)、奥曲肽、生长抑素、高三尖杉酯碱(omacetaxine)、西普鲁塞(sipuleucel-T)、替加氟/吉美嘧啶/奥替拉西和替加氟/尿嘧啶。
适用于本发明的额外的化学治疗剂包括(但不限于)：阿扎胞苷、卡培他滨、卡莫氟、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、地西他滨、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁、替加氟、硫鸟嘌呤、三氟尿苷/提普拉西(tipiracil)、甲氨蝶呤、培美曲塞、普拉曲沙、雷替曲塞、羟基脲、伊立替康、托泊替康、柔红霉素、阿霉素、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、戊柔比星、依托泊苷、替尼泊苷、卡巴他赛、多西紫杉醇、紫杉醇、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春氟宁、长春瑞滨、苯达莫司汀、白消安、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、盐酸氮芥、环磷酰胺、达卡巴嗪、福莫司汀、异环磷酰胺、洛莫司汀、美法仑、链脲霉素、替莫唑胺、曲贝替定、卡铂、顺铂、奈达铂、奥沙利铂、六甲蜜胺、博来霉素、硼替佐米、卡非佐米、放线菌素、艾日布林、雌莫司汀、伊沙匹隆、丝裂霉素、丙卡巴肼、阿巴瑞克、阿比特龙、阿那曲唑、比卡鲁胺、环丙孕酮、地加瑞克、恩扎鲁胺、依西美坦、氟他胺、氟维司群、戈舍瑞林、组氨瑞林、来曲唑、亮丙瑞林、米非司酮、尼鲁米特、他莫昔芬、托瑞米芬、曲普瑞林、替伊莫单抗、镭Ra 223二氯化物、锶-89、钐(153Sm)来昔决南(lexidronam)、托西莫单抗、曲妥珠单抗-美坦新偶联物(ado-trastuzumab emtansine)、阿仑单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗(blinatumomab)、本妥昔单抗(brentuximab vedotin)、西妥昔单抗、达雷木单抗(daratumumab)、狄诺塞麦、地努图希单抗(dinutuximab)、吉妥珠单抗奥佐米星、替伊莫单抗(Ibritumomab Tiuxetan)、伊匹单抗、纳武单抗、奥比妥珠单抗(obinutuzumab)、奥法木单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、利妥昔单抗、托西莫单抗、曲妥珠单抗、阿法替尼、阿柏西普、阿西替尼、博舒替尼、考比替尼(cobimetinib)、克里唑替尼、达沙替尼、埃罗替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、尼罗替尼、奥希替尼、帕唑帕尼、普纳替尼、瑞戈非尼、鲁索利替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲美替尼、凡德他尼、依维莫司、替西罗莫司、阿利维甲酸、贝沙罗汀、异维甲酸、他米巴罗汀、维甲酸、来那度胺、泊马度胺、沙利度胺、贝利司他、帕比司他、罗米地辛、丙戊酸盐、伏立诺他、阿那格雷、三氧化二砷、天冬酰胺酶、芽孢杆菌C-G疫苗(Bacillus Calmete-Guérin vaccine)、色瑞替尼、达拉非尼、地尼白介素(denileukin diftitox)、艾德拉尼(idelalisib)、依鲁替尼、奥拉帕尼、帕布昔利布、索尼德吉(sonidegib)、塔利莫吉拉赫派雷维克(talimogene laherparepvec)、维莫非尼(vemurafenib)、和维司莫德吉(vismodegib)。
本发明的化学治疗剂还包括盐、水合物、溶剂化物和前药形式。本发明化合物还包括上述那些的异构体和代谢物。
盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、膦酸、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐(glucaronate)、糖酸盐、甲酸盐、苯酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、和双羟萘酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸))。其他盐包括(但不限于)：，与无机碱形成的盐，包括碱金属盐，例如钠盐和钾盐；碱土金属盐，如钙盐和镁盐；铝盐；和铵盐。与有机碱形成的其他盐包括与二乙基胺、二乙醇胺、葡甲胺和N,N'-二苄基亚乙基二胺的盐。
中性形式的化学治疗剂可以通过将盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体抗炎糖皮质激素而再生。抗炎糖皮质激素的母体形式在某些物理性质上不同于各种盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但是就本发明而言，盐与化合物的母体形式相同。
本发明的某些化学治疗剂可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并且包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。一般而言，所有物理形式对于本发明所涉及的用途是等同的，并且应在本发明的范围内。
本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；对映异构体、外消旋体、非对映异构体、互变异构体、几何异构体、立体异构形式，就绝对立体化学而言，对于氨基酸可定义为(R)-或(S)-或(D)-或(L)-，且本发明范围包括单个异构体。本发明化合物不包括本领域已知的那些合成或分离太不稳定的化合物。本发明旨在包含外消旋和光学纯形式的化合物。光学活性(R)-和(S)-，或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术解决。
本发明还提供了前药形式的化学治疗剂。本文所述化合物的前药是那些在生理条件下容易发生化学变化以提供本发明化合物的化合物。另外，前药可以通过化学或生物化学方法在离体环境中转化为本发明化合物。例如，当用合适的酶或化学试剂置于透皮贴储剂中时，前药可以缓慢转化为本发明化合物。
V.制剂
本发明的组合物可以制成多种口服、肠胃外和局部剂型。口服制剂包括片剂、丸剂、粉剂、糖衣丸、胶囊、液体、锭剂、扁囊剂、凝胶、糖浆、浆液、悬浮液等，适合于患者摄取。本发明组合物也可以通过注射给药，即静脉内、肌肉内、皮内、皮下、十二指肠内或腹膜内给药。此外，本文所述的组合物可以通过吸入，例如鼻内给药。另外，本发明组合物可以透皮给药。本发明的组合物还可以通过眼内、阴道内和直肠内途径给药，包括栓剂、吹入剂、粉剂和气溶胶制剂(例如甾体类吸入剂，见Rohatagi,J.Clin.Pharmacol.35:1187-1193,1995；Tjwa,Ann.Allergy Asthma Immunol.75:107-111,1995)。因此，本发明还提供了包含药学上可接受的载体或赋形剂和本发明化合物的药物组合物。
为了制备本发明化合物的药物组合物，药学上可接受的载体可以是固体或液体。固体形式制剂包括粉末、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒。固体载体可以是一种或多种物质，其也可以用作稀释剂、调味剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封材料。关于制剂和给药技术的细节在科学和专利文献中有详细描述，参见例如最新版的雷明顿制药学(Remington's Pharmaceutical Sciences)，马克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚(“雷明顿”)。
在粉末中，载体是细碎的固体，其与细碎的活性组分混合。在片剂中，活性组分与具有必要粘合性能的载体以合适的比例混合，并以所需的形状和尺寸压实。所述粉末和片剂优选含有5％或10％-70％的本发明化合物。
合适的固体赋形剂包括(但不限于)：碳酸镁；硬脂酸镁；滑石；果胶；糊精；淀粉；黄芪胶；低熔点蜡；可可脂；碳水化合物；糖包括(但不限于)：乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇，来自玉米、小麦、水稻、马铃薯或其他植物的淀粉；纤维素例如甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、或羧甲基纤维素钠；和树胶包括阿拉伯胶和黄芪胶；以及蛋白质包括(但不限于)：明胶和胶原蛋白。如果需要，可以加入崩解剂或增溶剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。
糖衣丸芯具有合适的包衣，例如浓糖溶液，其也可含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙烯二醇，和/或二氧化钛、漆溶液，和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以将染料或颜料加入片剂或糖衣丸包衣中以进行产品鉴定或表征活性化合物的量(即剂量)。本发明的药物制剂也可以使用例如由明胶制成的推入式胶囊以及由明胶和涂层(例如甘油或山梨糖醇)制成的软密封胶囊来口服使用。推入式胶囊可含有本发明化合物，其与填充剂或粘合剂(例如乳糖或淀粉)、润滑剂(例如滑石或硬脂酸镁)和任选的稳定剂混合。在软胶囊中，本发明化合物可以溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙烯二醇，含有或不含有稳定剂。
为了制备栓剂，首先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物)熔化，并且通过搅拌将本发明化合物均匀地分散在其中。然后将熔化的均匀混合物倒入方便大小的模具中，使其冷却，从而固化。
液体形式制剂包括溶液、悬浮液和乳液，例如水或水/丙二醇溶液。对于肠胃外注射，液体制剂可以在聚乙烯乙二醇水溶液中配制成溶液。
适合口服使用的水溶液可以通过将本发明化合物溶解在水中并根据需要加入合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。适合口服使用的水性悬浮液可以通过将细碎的活性组分用粘性材料(例如天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯树胶)和分散剂或润湿剂分散在水中制备，所述分散剂或润湿剂例如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)、烯基氧化物与脂肪酸的缩合产物(例如，聚氧乙烯基硬脂酸酯)、乙烯基氧化物与长链脂族醇的的缩合产物(例如，十七烷乙烯基氧基辛醇)、乙烯基氧化物与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(例如，聚氧乙烯基山梨糖醇单油酸酯)，或乙烯基氧化物与衍生自脂肪酸的偏酯和己糖醇酐的缩合产物(例如，聚氧乙烯基脱水山梨糖醇单油酸酯)。含水悬浮液还可含有一种或多种防腐剂(例如乙基或n-丙基p-羟基苯甲酸盐)，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂(例如蔗糖，阿斯巴甜或糖精)。配方可为渗透压进行调整。
还包括固体形式的制剂，其可在使用前不久转化为用于口服给药的液体形式制剂。这种液体形式包括溶液、悬浮液和乳液。除活性组分外，这些制剂还可含有着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
油悬浮液可以通过将本发明化合物悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)或其混合物中来配制。油悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂以提供适口的口服制剂，例如甘油、山梨糖醇或蔗糖。这些制剂可以通过添加抗氧化剂如抗坏血酸来保存。作为可注射油媒介物的实例，参见Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.281:93-102,1997。本发明的药物制剂也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是如上所述的植物油或矿物油，或它们的混合物。合适的乳化剂包括天然存在的树胶(例如阿拉伯树胶和黄芪胶)、天然存在的磷脂(例如大豆卵磷脂)、酯或衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯(例如脱水山梨糖醇单油酸酯)，以及这些偏酯与乙烯基氧化物的缩合产物，例如聚氧乙烯基脱水山梨糖醇单油酸酯。乳液还可以含有甜味剂和调味剂，如糖浆和酏剂的配方中那样。此类制剂还可含有缓和剂、防腐剂或着色剂。
本发明的组合物也可以微球递送从而在体内缓慢释放。例如，微球可配制用于通过皮内注射的含药物的微球给药，其缓慢地皮下释放(参见Rao，J.Biomater Sci.Polym.第七版：623-645,1995)；作为可生物降解的和可注射的凝胶制剂(参见例如，GaoPharm.Res.12:857-863,1995)；或者，作为用于口服给药的微球(参见例如，Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49:669-674,1997)。透皮和皮内路径可以持续数周或数月给药。
在另一实施方式中，本发明的组合物可配制用于肠胃外给药，例如静脉内(IV)给药或给入体腔或器官管腔。用于给药的制剂通常包含溶于药学上可接受载体中的本发明组合物的溶液。可以使用的可接受的载体和溶剂是水和林格氏溶液、等渗氯化钠。另外，无菌固定油通常可用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)同样可用于制备注射剂。这些溶液是无菌的并且通常没有不需要的物质。这些制剂可以通过所熟知的常规灭菌技术进行灭菌。所述制剂可含有接近生理条件所需的药学上可接受的辅助物质，例如pH调节剂和缓冲剂、毒性调节剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。本发明组合物在这些制剂中的浓度可以广泛变化，并且将根据所选择的特定给药方式和患者的需要并主要基于流体体积、粘度、体重等来进行选择。对于IV给药，制剂可以是无菌注射制剂，例如无菌注射水性或油性悬浮液。所述悬浮液可以根据已知技术使用那些合适的分散剂或润湿剂以及悬浮剂配制。所述无菌注射制剂还可以是无菌注射溶液或在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的悬浮液，例如1,3-丁二醇的溶液。
在另一实施方式中，本发明组合物制剂可以通过使用脂质体来递送，所述脂质体与细胞膜融合或被内吞，即通过使用与脂质体相连的配体，或直接附着于寡核苷酸，与细胞表面膜蛋白受体结合，引起细胞内吞作用。通过使用脂质体，特别是在脂质体表面携带对靶细胞具有特异性的配体或者其它优先针对特定器官的情况下，可以集中将本发明的组合物递送到体内靶细胞中。(参见，例如Al-Muhammed,J.Microencapsul.13:293-306,1996；Chonn,Curr.Opin.Biotechnol.6:698-708,1995；Ostro,Am.J.Hosp.Pharm.46:1576-1587,1989)
基于脂质的药物递送系统包括脂质溶液、脂质乳液、脂质分散体、自乳化药物递送系统(SEDDS)和自微乳化药物递送系统(SMEDDS)。具体地，SEDDS和SMEDDS是脂质、表面活性剂和助表面活性剂的各向同性混合物，其可以在水性介质中自发分散并形成精细乳液(SEDDS)或微乳液(SMEDDS)。可用于本发明制剂的脂质包括任何天然或合成脂质，包括(但不限于)：芝麻籽油、橄榄油、蓖麻油、花生油、脂肪酸酯、甘油酯、 和
VI.给药
本发明的化合物和组合物可以通过任何合适的方式递送，包括口服、肠胃外和局部方法。透皮给药方法，通过局部途径，可以配制成涂药棒、溶液、悬浮液、乳液、凝胶、乳膏、软膏、糊剂、凝胶、涂剂、粉末和气溶胶。
药物制剂优选为单位剂型。在这种形式中，制剂细分为含有合适量的本发明化合物和组合物的单位剂量。单位剂型可以是包装的制剂，该包装含有单独量的制剂，例如包装的片剂、胶囊、和小瓶或安瓿中的粉末。此外，单位剂型可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它可以是适当数量的任何这些的包装形式。
本发明的化合物和组合物可以与其他药剂共同给药。共同给药包括在给予另一种药剂的0.5、1、2、4、6、8、10、12、16、20或24小时内给予本发明的化合物或组合物。共同施用还包括同时、基本同时(例如，在各自给药的约1、5、10、15、20或30分钟内)或以任何顺序依次施用。此外，本发明的化合物和组合物可以每天给药一次，或每天给药两次、三次或更多次，以便提供每天优选的剂量水平。
在一些实施方式中，共同施用可以通过共同配制来完成，即，制备包含本发明化合物和组合物以及任何其他药剂的单一药物组合物。或者，各种组分可以单独配制。
本发明的化合物和组合物，以及任何其他药剂，可以以任何合适的量存在，并且可以取决于各种因素，包括(但不限于)：受试者的体重和年龄、疾病状态等。合适的剂量范围包括约0.1mg至约10,000mg，或约1mg至约1000mg，或约10mg至约750mg，或约25mg至约500mg，或约50mg至约250mg。合适的剂量还包括约1mg、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900或1000mg。
该组合物还可含有其他相容的治疗剂。本文所述的化合物可以彼此组合使用，与可用于调节糖皮质激素受体的已知其它活性剂一起使用，或者与可能与单用无效的辅助剂但可能有助于活性剂的功效一起使用。
VII.治疗疾病的方法
在一些实施方式中，本发明提供了一种治疗疾病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的受试者治疗有效量的本发明化合物，从而治疗该疾病。
在一些实施方式中，本发明的化合物是半乳糖凝集素-1(gal-1)抑制剂，其是化学治疗剂。如本文所用，化学治疗剂是指可用于治疗或改善癌症的任何化合物或药物组合物。所述治疗剂可以用于治疗目的，旨在延长生命，或者用于减轻症状。
在一些实施方式中，用有效量的本发明的gal-1抑制剂治疗可使突变的原癌基因H-Ras(G12V)错误定位于细胞内区室而不是质膜。在一些实施方式中，用有效量的本发明的gal-1抑制剂进行治疗可以下调H-Ras的表达。在一些实施方式中，用有效量的本发明的gal-1抑制剂治疗可使突变的原癌基因K-Ras(G12V)错误定位于细胞内区室而不是质膜。在一些实施方式中，用有效量的本发明的gal-1抑制剂进行治疗可以下调K-Ras的表达。在一些实施方式中，用有效量的本发明的gal-1抑制剂治疗可以下调磷酸化的细胞外信号传导调节的激酶(ERK)或磷酸化的MEK激酶的表达。
适用于本发明疾病或病症的例子包括(但不限于)：急性淋巴细胞白血病、急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨肿瘤、脑干胶质瘤、脑癌、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、视觉通路和下丘脑胶质瘤、乳腺癌、支气管腺瘤、伯基特淋巴瘤、中枢神经系统淋巴瘤、小脑星形细胞瘤、宫颈癌、软骨肉瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性骨髓增生性疾病、结肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、结缔组织增生性小圆细胞瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、上皮血管内皮瘤(EHE)、食管癌、尤文氏肉瘤、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、眼癌、眼内黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、胃类癌、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、下丘脑和视觉通路胶质瘤、幼儿眼内黑色素瘤、胰岛细胞癌、卡波西肉瘤、肾癌、喉癌、白血病、唇和口腔癌、脂肪肉瘤、肝癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴瘤、巨球蛋白血症、男性乳腺癌、骨恶性纤维组织细胞瘤、成神经管细胞瘤、黑色素瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、转移性颈部鳞癌、口腔癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、粒细胞性白血病、髓性白血病、成人急性骨髓增生性疾病、慢性粘液瘤鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、少突神经胶质瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低恶性潜能肿瘤、胰腺癌、副鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体星形细胞瘤、松果体生殖细胞瘤、松果体母细胞瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、垂体腺瘤、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、尤文肉瘤、卡波西肉瘤、软组织肉瘤、子宫肉瘤、赛塞里(Sézary)综合征、非黑色素瘤皮肤癌、黑色素瘤梅克尔细胞皮肤癌、小肠癌、鳞状细胞癌、鳞状颈癌、胃癌、皮肤T细胞淋巴瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、滋养细胞肿瘤、妊娠期尿道癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症和威尔姆斯肿瘤。
可以通过各种测定测试本发明的gal-1抑制剂诱导癌细胞死亡的能力。例如，在一些实施方式中，本发明的苯并咪唑化合物在同样显示细胞粘附配体的珠子上合成。在珠子捕获细胞的条件下将活细胞与珠子一起孵育，并将捕获细胞的细胞膜暴露于半乳糖凝集素-1抑制剂。采用比色测定法检测固定细胞中裂解的半胱天冬酶-3并鉴定诱导细胞凋亡的化合物。在一些实施方式中，碘化丙啶用于晚期凋亡细胞的染色。
可以通过各种测定测试本发明的Gal-1抑制剂抑制体内肿瘤生长的能力。例如，在一些实施方式中，将癌细胞皮下注射到先天性无胸腺小鼠中。可以在小鼠的背侧进行注射。使肿瘤生长至预定大小。所述预定大小大约可以是100mm3。然后给予一定剂量的本发明化合物治疗小鼠，测量肿瘤大小和体重。gal-1抑制剂的剂量还可以具有一种或多种其他化学治疗剂从而研究协同效应。在一些实施方式中，所述剂量为每天施用。在一些实施方式中，连续5天给予所述剂量。
VIII.实施例
图1显示了可用于制备本发明化合物的一般合成方法。原料可以从商业来源获得并通过使用已知的合成方法获得。芴甲氧羰基(Fmoc)保护的Rink-酰胺树脂(以0.5mmol/g上样量)在二甲基甲酰胺(DMF)中溶胀2小时。然后用20％的4-甲基哌啶/DMF孵育5分钟除去Fmoc，然后孵育15分钟。过滤后，将珠子用DMF洗涤三次，用甲醇(MeOH)洗涤三次，再次用DMF洗涤三次。将3当量的Alloc-骨架加入到6-氯-1-羟基苯并三唑(6-Cl-HOBt)和1,3-二异丙基碳二亚胺(DIC)各3当量的溶液中，混合5分钟，加入珠子并转动约2小时，直至Kaiser试验为阴性。用DMF洗涤珠子五次。将3当量的R1NH2和6当量的N,N-二异丙基乙胺(DIEA)的DMF溶液加入到珠子中并转动过夜。用2M SnCl2·2H2O的DMF溶液对NO2进行还原过夜，重复2至3次。将4当量的醛R2CHO的DMF溶液加入到珠子中并旋转过夜。将骨架上的Alloc基团用Pd(PPh3)4/PhSiH3溶液在二氯甲烷(DCM)中脱保护30分钟，两次。使用以下方法之一将珠子与R3偶联：
方法A：在HOBt/DIC的存在下，将4当量的Boc-氨基酸加入到珠子中并旋转2-4小时。除去侧链保护基团，用95％三氟乙酸(TFA)、2.5％三异丙基硅烷(TIS)和2.5％水的混合物裂解产物。
方法B：在10当量的DIEA的DMF存在下，将5当量的异氰酸酯加入到珠子中并旋转2-4小时。用95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合物裂解化合物。
方法C：将五当量的醛的DMF溶液或含有2％乙酸的四氢呋喃(THF)和MeOH的7：3混合物加入到珠子中。然后将氰基硼氢化钠的THF/MeOH(含有2％乙酸)溶液加入到珠子中。将混合物在室温下旋转2-12小时。用95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合物裂解化合物。
方法D：将一个半当量的烷基卤化物和三当量的DIEA的DMF加入到珠子中。将混合物在室温下旋转1-2天。用95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合物裂解化合物。
在没有偶联R3的情况下合成化合物LLS22和LLS76，并在Alloc-脱保护后通过95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合物裂解下珠子。
收集裂解液。蒸发TFA和溶剂后，浓缩的裂解产物用冷的叔丁基甲醚沉淀，并通过半制备的反相高效液相色谱法纯化。对于那些在R2a和R2b的一个或两个位置上具有羟乙基的化合物，在裂解之前乙酰基用肼和DMF的1:7混合物除去12-16小时，或在TFA裂解和产物沉淀后，用氢氧化钾水溶液去除5-12小时。
下面的实施例结构根据标准IUPAC命名法并使用CambridgeSoft ChemDraw命名包命名。
实施例1.LLS1.(2R)-N-(1-(2-(3-((1H-咪唑-1-基)甲基)苯基)-1-(2-(吡啶-2- 基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氨基-3-氧代丙基)-2-氨基-3-(4-甲氧苯基)丙酰胺
(2R)-N-(1-(2-(3-((1H-咪唑-1-基)甲基)苯基)-1-(2-(吡啶-2-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氨基-3-氧代丙基)-2-氨基-3-(4-甲氧苯基)丙酰胺采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝643.35。
实施例2.LLS2.((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3- 氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二 醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝809.28.1H NMR(DMSO-d6,600MHz)δ9.23(br.s,1H),8.28(br.s,1H),8.18(br.s,1H),7.77(s,1H),7.67(s,1H),7.63(d,1H),7.61(d,1H),7.58(d,1H),7.56(d,1H),7.31(d,2H),7.29(2,1H),7.25(两个信号,d,1H每个),7.03(d,2H),6.91(br.s,1H),6.85(br.s,1H),5.69(d,2H),5.38(app.quin,1H),4.20(app.q,4H),4.07(m,1H),3.72(app q,4H),3.16(dd,1H,3JHH＝14.2Hz,2JHH＝6.6Hz),3.02(dd,1H,3JHH＝14.2Hz,2JHH＝6.6Hz),2.61–2.67(m,1H),2.54(m,1H),1.98(s,6H).13C(DMSO-d6,150MHz)δ171.0,170.2,166.5,158.2,152.3,150.4,150.2,149.8,148.7,148.1,135.8,131.7,131.4,130.8,130.6,130.2,129.9,123.7,123.4,118.1,118.0,115.9,111.9,60.9,53.1,50.2,49.0,41.7,36.1,20.7。
实施例3.LLS3.((4-(5-(3-氨基-1-((2S,3S)-2-氨基-3-羟基丁胺基)-3-氧代丙 基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((2S,3S)-2-氨基-3-羟基丁胺基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝695.32。
实施例4.LLS4.(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-3-氧代-1-(1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-2- (噻唑-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙基)己酰胺
(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-3-氧代-1-(1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-2-(噻唑-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙基)己酰胺采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝512.39。
实施例5.LLS5.2-((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)- 3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝767.35。
实施例6.LLS6.((4-(1-(((1s,3R)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((S)-2-氨 基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷- 2,1-二基)二醋酸盐
((4-(1-(((1s,3R)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝831.38。
实施例7.LLS7.3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(6-(羟基甲基)吡啶- 2-基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(6-(羟基甲基)吡啶-2-基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝694.29。
实施例8.LLS8.((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3,4-二 氟苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋 酸盐
((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3,4-二氟苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝742.43。
实施例9.LLS9.((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙胺基)-3- 氧代丙基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二 基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝825.39。
实施例10.LLS10.((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)- 3-氧代丙基)-1-(2,5-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1-(2,5-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝809.30。
实施例11.LLS11.((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙胺基)- 3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((S)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙胺基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝776.78。
实施例12.LLS12.(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)- 1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氯苯基)丙酰胺
(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氯苯基)丙酰胺采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝725.29。
实施例13.LLS13.(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)- 1-(2,5-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氯苯基)丙酰胺
(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(2,5-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氯苯基)丙酰胺采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝725.35。
实施例14.LLS14.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯 并[d]咪唑-5-基)-3-((2,6-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((2,6-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝668.20。
实施例15.LLS15.((4-(5-(3-氨基-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)脲基)-3-氧 代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋 酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)脲基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法B详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝815.32。
实施例16.LLS16.((4-(5-(3-氨基-1-(3-(3,4-二氯苯基)脲基)-3-氧代丙基)-1- (3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-(3-(3,4-二氯苯基)脲基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法B详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝781.29。
实施例17.LLS17.((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝7752.31。
实施例18.LLS18.(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)- 1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氟苯基)丙酰胺
(2S)-2-氨基-N-(3-氨基-1-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-氧代丙基)-3-(3,4-二氟苯基)丙酰胺采用上述方法A详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝693.36。
实施例19.LLS19.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯 并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝668.27。
实施例20.LLS20.((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝784.22。
实施例21.LLS21.((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝768.30。
实施例22.LLS22.((4-(5-(1,3-二氨基-3-氧代丙基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(1,3-二氨基-3-氧代丙基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用以上详述的步骤，其不含偶联的R3，并用95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合液将珠子解离下。MALDI-TOF MS:m+H＝644.37。
实施例23.LLS23.((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝800.37。
实施例24.LLS24.3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟 甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝698.29。
实施例25.LLS25.((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-(二(3, 4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-(二(3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法D详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝932.37。
实施例26.LLS26.((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3,4- 二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二 醋酸盐
((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝774.43。
实施例27.LLS27.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝718.32。
实施例28.LLS28.3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝690.40。
实 施例29.LLS29.3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(二(3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(二(3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用以上详述的方法D制备。MALDI-TOFMS:m+H＝849.71。
实施例30.LLS30.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯 并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝700.25。
实施例31.LLS31.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H- 苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝684.27。
实施例32.LLS32.2-((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3, 4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(1-(((1s,3s)-金刚烷-1-基)甲基)-5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝732.44。
实施例33.LLS33.2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝742.23。
实施例34.LLS34.2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝726.33。
实施例35.LLS35.2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(3-氨基-1-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝758.30。
实施例36.LLS36.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝716.32。
实施例37.LLS37.((4-(5-(3-氨基-1-((4-(二(2-乙酰氧乙基)氨基)苄基)氨基)- 3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((4-(二(2-乙酰氧乙基)氨基)苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝903.44。
实施例38.LLS38.3-((4-(二(2-羟乙基)氨基)苄基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙 基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((4-(二(2-羟乙基)氨基)苄基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝735.34。
实施例39.LLS39.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯 并[d]咪唑-5-基)-3-(2-((3,4-二氯苄基)氨基)乙酰胺基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(2-((3,4-二氯苄基)氨基)乙酰胺基)丙酰胺采用以上详述的步骤进行制备，但在Alloc-脱保护后将Fmoc-甘氨酸与氨基基团偶联，然后使用方法C进行Fmoc-脱保护和醛偶联。MALDI-TOF MS:m+H＝757.23。
实施例40.LLS40.((4-(5-(3-氨基-1-((4-(4-(叔丁基)噻唑-2-基)苄基)氨基)- 3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((4-(4-(叔-丁基)噻唑-2-基)苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(3,4-二氯苄基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝771.38。
实施例41.LLS41.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H- 苯并[d]咪唑-5-基)-3-(异丙基氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(异丙基氨基)丙酰胺采用以上详述的方法D制备。MALDI-TOF MS:m+H＝568.40。
实施例42.LLS42.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝654.18。
实施例43.LLS43.2-((4-(5-(3-氨基-1-((3-溴-4,5-二甲氧基苄基)氨基)-3-氧 代丙基)-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(3-氨基-1-((3-溴-4,5-二甲氧基苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝696.18,698.18。
实施例44.LLS43Ac.((4-(5-(3-氨基-1-((3-溴-4,5-二甲氧基苄基)氨基)-3-氧 代丙基)-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((3-溴-4,5-二甲氧基苄基)氨基)-3-氧代丙基)-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝738.15,740.15.
实施例45.LLS44.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)- 1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3-(三氟甲基)苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3-(三氟甲基)苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝667.57。
实施例46.LLS45.3-(1-(2-氨基乙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并 [d]咪唑-5-基)-3-(((5-溴噻吩-2-基)甲基)氨基)丙酰胺
3-(1-(2-氨基乙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(((5-溴噻吩-2-基)甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝623.18,625,18(M+Na)。
实施例47.LLS45Ac.((4-(5-(3-氨基-1-(((5-溴噻吩-2-基)甲基)氨基)-3-氧代 丙基)-1-(2-氨基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-(((5-溴噻吩-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(2-氨基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝685.23,687.23。
实施例48.LLS46.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)- 1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((3,4-二氯苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝667.42。
实施例49.LLS51.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((4-(嘧啶-5-基)苄基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((4-(嘧啶-5-基)苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝726.41。
实施例50.LLS52.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)- 1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(((1-(苯磺酰基)-1H-吡咯-2-基)甲基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(((1-(苯磺酰基)-1H-吡咯-2-基)甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝728.42。
实施例51.LLS52Ac.((4-(5-(3-氨基-3-氧代-1-(((1-(苯磺酰基)-1H-吡咯-2- 基)甲基)氨基)丙基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙 烷-2,1-二基)二醋酸盐
LLS52Ac.((4-(5-(3-氨基-3-氧代-1-(((1-(苯磺酰基)-1H-吡咯-2-基)甲基)氨基)丙基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝812.25。
实施例52.LLS53.3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝648.32。
实施例53.LLS53Ac.((4-(5-(1-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙 基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸 盐
LLS53Ac.((4-(5-(1-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝732.39。
实施例54.LLS54.3-(1-(3-氨基丙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并 [d]咪唑-5-基)-3-(((5-(4,5-二氢-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)丙酰胺
3-(1-(3-氨基丙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-(((5-(4,5-二氢-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝625.27。
实施例55.LLS55.3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝688.23。
实施例56.LLS56.(Z)-6-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-甲氧基苯乙 基)-1H-咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)己-5-烯酰胺
(Z)-6-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)己-5-烯酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝614.41。
实施例57.LLS56Ac.((4-(5-(3-氨基-1-((环己基甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1- (4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(3-氨基-1-((环己基甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝698.50。
实施例58.LLS58.3-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙酰胺
3-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝659.47。
实施例59.LLS58Ac.((4-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-5-(3-氨基-3-氧代-1- ((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基) 二醋酸盐
LLS58Ac.((4-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-5-(3-氨基-3-氧代-1-((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝743.54。
实施例60.LLS59.3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1-(3-甲氧基苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(3-甲氧基苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝634.49。
实施例61.LLS63.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄 基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((萘-1-基甲基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((萘-1-基甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝698.32。
实施例62.LLS64.3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)- 1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝695.81。
实施例63.LLS65.3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(3-(哌啶- 1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((3,4-二氯苄基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝649.35。
实施例64.LLS66.2-((4-(5-(1-(((5-(1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)-3- 氨基-3-氧代丙基)-1-(3-(二甲基氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨 基)乙酸乙酯
2-((4-(5-(1-(((5-(1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙基)-1-(3-(二甲基氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝673.41。
实施例65.LLS67.2-((4-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-5-(3-氨基-3-氧代-1- ((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙 酯
2-((4-(1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-5-(3-氨基-3-氧代-1-((4-(吡啶-4基)苄基)氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)(2-羟乙基)氨基)乙酸乙酯采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝701.48。
实施例66.LLS69Ac.((4-(5-(1-(((1H-吲哚-5-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙 基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸 盐
((4-(5-(1-(((1H-吲哚-5-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝731.25。
实施例67.LLS71.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)- 1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((环己基甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝638.17。
实施例68.LLS73.3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)- 1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((萘-1-基甲基)氨基)丙酰胺
3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-((萘-1-基甲基)氨基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOFMS:m+H＝682.67。
实施例69.LLS76.((4-(5-(1,3-二氨基-3-氧代丙基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H- 苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(1,3-二氨基-3-氧代丙基)-1-(4-甲氧基苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用以上详述的方法制备，其合成不经R3偶联，并在Alloc-脱保护后通过95％TFA、2.5％TIS和2.5％水的混合物裂解珠子。MALDI-TOFMS:m+H＝624.33。
实施例70.LLS77.3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨 基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-(((1H-吲唑-5-基)甲基)氨基)-3-(2-(4-(二(2-羟乙基)氨基)苯基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝672.34。
实施例71.LLS78.((4-(5-(1-(((5-(1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)-3-氨 基-3-氧代丙基)-1-(3-(二甲基氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷- 2,1-二基)二醋酸盐
((4-(5-(1-(((5-(1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)甲基)氨基)-3-氨基-3-氧代丙基)-1-(3-(二甲基氨基)丙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)氮烷)二(乙烷-2,1-二基)二醋酸盐采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝715.44。
实施例72.LLS80.3-((环己基甲基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟甲 氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((环己基甲基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝636.35。
实施例73.LLS82.3-((环己基甲基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟甲 氧基)苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺
3-((环己基甲基)氨基)-3-(2-(4-吗啉代苯基)-1-(4-(三氟甲氧基)苯乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙酰胺采用上述方法C详述的步骤进行制备。MALDI-TOF MS:m+H＝650.36。
实施例错误！找不到参考源-100.化合物LLS82A-LLS109
实施例101.使用免疫细胞化学对化合物进行高通量筛选
创建珠子库，其中每个珠子在其表面上展示细胞捕获分子LXY30和苯并咪唑化合物。LXY30分子是α-3-β-1整合素结合配体。采用抗切割的半胱天冬酶3抗体对结合在库珠子上的细胞进行免疫细胞化学染色。图2中显示了阳性结果的实例。通过手持微量移液管物理分离阳性珠子，并通过用自动Edman微测序法对珠子相关肽标签进行化学解码来确定它们的化学特性。通过用碘化丙锭染色晚期凋亡细胞来验证细胞死亡，如图3所示。
实施例102.确认LLS2诱导的细胞死亡
在溶液中合成生物素化的LLS2并将其加载到链霉亲和素包被的平板上。固定在平板上的生物素化LLS2在100μM载量下杀死了约21％的SKOV3卵巢癌细胞，在50μM时杀死16％，在25μM时杀死14％(图4)。在溶液中还测试了LLS2化合物的杀灭效果。发现LLS2杀死了SKOV3细胞，IC50值为15.7μM(图5)。此外，LLS2可以杀死胰腺癌细胞系XPA3，前列腺癌细胞系PC3，结肠癌细胞系HT29，乳腺癌细胞系MCF7和肺癌细胞系A549(图4)。
实施例103.紫杉醇对癌细胞的抗肿瘤活性的增强作用
体外测定了LLS2与当前化学治疗药物(包括多西紫杉醇、紫杉醇、5-Fu、奥沙利铂、卡铂、多柔比星和吉西他滨)的协同作用。在这些化学品中，紫杉醇特别令人感兴趣，因为它与LLS2在许多癌细胞系上具有协同作用。观察到紫杉醇对前列腺癌PC3癌细胞表现出中等细胞毒性，但在特定浓度下对SKOV3细胞几乎没有影响。在与LLS2联合治疗后，实现了更强的抗增殖作用(图6a)。通过测定组合指数(CI)证实了这种协同效应(图6b)，并且在SKOV3中对各种浓度的LLS2和紫杉醇进行了进一步测定(图6c)。在LLS2/紫杉醇联合处理24小时后观察到细胞凋亡增加(图6d)。
实施例104.LLS2单独或与紫杉醇组合的体内抗肿瘤活性
将SKOV3卵巢癌细胞皮下注射到小鼠的背侧。LLS2处理的结果显示经LLS2处理的小鼠肿瘤大小更小(图7a和图7b)重量更低(图7c)。值得注意的是，与用单独的LLS2或单独的紫杉醇治疗的组相比，在用LLS2/紫杉醇组合治疗的组中观察到显著的肿瘤生长抑制(图7a-图7c)。此外，增加体重表明LLS2/紫杉醇组合方案是可耐受的并且没有显著的副作用(图7d)。这些结果揭示了紫杉醇的一种新的有效组合方案，紫杉醇是目前在临床上广泛使用的非常重要的抗癌药物。
实施例105.鉴定半乳糖凝集素-1为LLS2的靶蛋白
将LLS2生物素化，与细胞膜蛋白制剂一起温育，并用固定的链霉亲和素蛋白树脂拉下结合的蛋白质。洗脱结合的蛋白质并通过LC MS/MS进行鉴定。MS结果鉴定出半乳糖凝集素-1为LLS2的推定靶蛋白(图8a)。通过对从(i)空白链霉亲和素蛋白-珠、(ii)生物素-LLS2/链霉亲和素蛋白珠和(iii)生物素化无关小分子/链霉亲和素蛋白珠(使用抗半乳糖凝集素-1抗体作为蛋白质印迹探针(图8b))洗脱的蛋白免疫印迹分析证实，半乳糖凝集素-1确认为LLS2的靶蛋白。如图8b所示，在且仅在泳道2中鉴定出对应于半乳糖凝集素-1的14kd蛋白质，其中LLS2用作亲和配体，表明LLS2的靶蛋白确实是半乳糖凝集素-1。然后将固定且渗透的SKOV3细胞(i)先用生物素-LLS2，随后用链霉抗生物素蛋白–荧光团和(ii)用抗-半乳糖凝集素-1抗体进行染色，并且证明是由LLS2和半乳糖凝集素-1共定位引发的荧光信号(图8c)。
通过计算机建模预测的LLS2与二聚体半乳糖凝集素-1的推定结合位点如图8d所示。进行多次计算对接模拟以理解LLS2与半乳糖凝集素-1单体和二聚体结构的结合。首先进行盲法对接研究以快速扫描蛋白质表面并鉴定推定的结合表面。这些初步研究之后，是在先前确定的结合界面上更准确和细粒度的对接模拟。这些LLS2与半乳糖凝集素-1二聚体的对接研究表明稳定结合的相互作用跨越了同型二聚体复合物的两种组分(图8d)。LLS2与二聚体结合口袋显示出良好的形状互补性。LLS2的“R2”基团与半乳糖凝集素-1二聚体形成氢键网络，而LLS2的芳族基团与结合口袋的疏水核心很好地聚集在一起。
实施例106.LLS2对H-RAS(G12V)和K-RAS(G12V)定位和MAPK/ERK表达的影响
已知半乳糖凝集素-1在H-Ras信号传导和细胞转化中起到作用，如图9a所示。实时共聚焦图像显示，在用LLS2(25μM)处理30分钟后，EGF刺激的GFP-H-Ras(12V)错误定位于细胞内区室(图9b)。与未处理的MDCK细胞中的表达相比，膜结合的H-Ras的定量显示LLS2处理的MDCK细胞中H-Ras的显著下调表达(图9c)。LLS2处理也使EGF刺激的K-Ras(G12V)错误定位，而EGF刺激的N-Ras(Q61D)的定位没有改变(图9d)。Ras活性测定显示LLS2处理降低了EGF刺激的K-Ras-GTP水平(图9d，图9e)。图9f显示磷酸-MEK和磷酸-ERK的表达水平在用LLS2处理2小时后也下调。不受任何特定理论的束缚，这暗示了LLS2通过抑制RAS-ERK途径而诱导细胞死亡。
实施例107.通过LLS2处理抑制血管生成
我们用于在Matrigel包被的平板上进行小管形成测定的人脐带血管内皮细胞(HUVEC)如图10所示。使用ELISA测定法测定6种不同癌细胞系中分泌的gal-1的表达水平。结果显示(i)PC3雄激素非依赖性前列腺癌细胞向培养基中分泌了最高水平的gal-1，其次是SKOV3细胞，(ii)PC3条件培养基刺激了所培养HUVEC的小管形成，和(iii)PC3条件培养基的小管形成活性被加入的LLS2(10μM)中和。加入gal-1的血管生成作用也被LLS2抑制。总之，该数据表明gal-1可以刺激管形成，并且管形成可以被LLS2抑制。
实施例108.LLS30和PTX的协同抗肿瘤活性
发现LLS30在体外细胞增殖测定中的效力比LLS2高约2倍，对PC3和SKOV3细胞的IC50分别为9.2μM和10.2μM。体内效力研究(i.v.q3d×4)显示10mg/kg剂量的LLS30显著抑制了PC3肿瘤的生长，LLS30与PTX的组合导致了肿瘤的消退(图11)。此外，经过4个疗程的治疗，CBC、血小板、肝功能检查和肾功能结果均保持在正常范围内。切除肿瘤的组织学分析显示，在用LLS30处理动物后存在许多坏死细胞。此外，用LLS30处理的肿瘤观察到Ki-67下调和更多切割的半胱天冬酶-3阳性细胞。
实施例109.LLS30对神经纤维瘤病细胞的治疗效果
评估LLS30对sNF96.2和sNF2.2恶性外周神经鞘瘤(MPNST)细胞的生物化学和生物学作用。用25μMLLS30处理24小时后，ERK的磷酸化被完全抑制(图12a)。LLS30对sNF96.2和sNF2.2MPNST细胞具有细胞毒性，IC50值分别为16μM和26.4μM(图12b)。组合研究表明LLS30与PTX显示出强烈的协同效应，特别是对于sNF2.2MPNST细胞，C.I.为0.1。
实施例110.LLS1-LLS41的抗癌活性
化合物LLS1-LLS41对卵巢癌细胞SKOV3的抗癌活性如下表1所示：
表1.LLS1-LLS41的抗癌活性
实施例111.LLS化合物治疗对前列腺癌细胞活力的影响
化合物LLS42-LLS80在治疗72小时后对PC3前列腺癌细胞存活率的影响如下表2所示：
表2.处理72小时后前列腺癌PC3细胞的细胞存活率％
在72小时治疗后化合物对22RV1前列腺癌细胞存活率的影响如下表3所示：
表3.处理72小时后前列腺癌22RV1细胞的细胞存活率％
实施例112.基于苯并咪唑的单珠双化合物(OB2C)小分子库的设计和合成
如图14所示，在拓扑学上分离的三功能双层珠子上合成珠子结合的库，。在库中，随机小分子与在珠子表面上的生物素共同展示(每个具有10％的单珠总加载量)，且由42个可测序的α-氨基酸组成的三肽编码标签(总加载量的80％)(如图15所示)位于珠子内部。显示在珠子表面上的生物素分子用于通过(配体-生物素)-交联蛋白-(生物素-珠)连接与细胞捕获配体LXY30相连。使用具有Edman微测序的自动蛋白质微量测序仪可以容易地实现化学编码标签解码(Liu，Lam，2001，Anal.Biochem，2001,295：9-16)。该库具有来自42种伯胺(图14的R1NH2)，42种醛(图14中的R2CHO)和42种氨基酸(图14中的X3)的三种多样性，其分别含有L-和D-氨基酸，天然和非天然氨基酸。然后，OB2C库的排列为42x42x42＝74,088。
使用图14的合成方法，使用TentaGel S NH2树脂(Rapp Polymere公司，图宾根，德国)作为用于合成库的固体支持物。使用双相溶剂方法制备三功能双层珠2(Liu，Marik，Lam，J Am Chem Soc，2002,124:7678-7680)。衍生剂是Fmoc-OSu和Alloc-OSu的混合物(1：1，总体为珠载量的20％)。将TentaGel S-NH2树脂珠(6.0g，1.44mmol，载量0.24mmol/g)在水中溶胀24小时。过滤除去水，将Fmoc-OSu(48.6mg，0.144mmol)和Alloc-OSu(28.7mg，0.144mmol)在DCM/乙醚(300ml，55/45)混合物中的溶液加入到湿的珠中。然后加入DIEA(201μL，1.152mmol)。将混合物在室温下剧烈震荡45分钟。通过过滤除去液体后，用DMF(5×300mL)洗涤珠子以从珠子内部除去水，然后用MeOH(3×300mL)和DMF(3×300mL)洗涤。将(Boc)2O(1.006g，4.61mmol)和DIEA(1.606mL，9.22mmol)的DCM(45mL)溶液加入到珠子中。将浆料珠在室温下震荡1小时。除去Fmoc，然后洗涤，再向珠子中加入D-生物素(175.9mg，0.72mmol)、HBTU(273mg，0.72mmol)和DIEA(251μL，1.44mmol)的NMP(45mL)混合物。旋转柱子直到Kaiser试验为阴性。洗涤树脂珠3并用含Pd(PPh3)4(66.5mg，0.0576mmol)和PhSiH3(355μL，2.88mmol)的DCM(45mL)进行Alloc脱保护45分钟，进行两次。脱保护后，依次用DCM(6×45mL)、DMF(3×45mL)、0.5％DIEA的DMF(3×45mL)、0.5％二乙基二硫代氨基甲酸钠的DMF(3×45mL)、50％DCM的DMF(3x45mL)、MeOH(3×45mL)和DMF(3×45mL)洗涤珠粒。将支架(224.8mg，0.72mmol)，6-Cl-HOBt(122mg，0.72mmol)和DIC(111.5μL，072mmol)的DMF(35mL)溶液加入到珠子中。在室温下进行偶联2小时以产生珠4。然后将珠用50％TFA的DCM(12mL)处理30分钟以除去珠内的Boc。用2％DIEA的DMF(2×12mL)中和珠子，并用DMF(3×12mL)、MeOH(3×12mL)和DMF(3×12mL)洗涤，然后分开-混合偶联42个氨基酸。在聚乙烯玻璃容器(5mL)的42个一次性聚丙烯柱中将珠子分成42等份。
将图15中所示的42种不同Fmoc-氨基酸(4当量至珠子完全取代)分别溶解在6-Cl-HOBt(4eq.)和DIC(4eq.)的DMF(2mL)溶液中，并加入到42个柱子中，每个柱子接收一个氨基酸。在室温下进行偶联，直到Kaiser试验为阴性，得到珠子5。在8当量DIEA的存在下，将42种伯胺(图16，珠加载量的4当量)加入到珠子中(每个柱子接受一种胺)，旋转过夜，得到珠子6。将珠子合并到柱子中，排干，洗涤，用2M SnCl2.2H2O将NO2还原3天，得到珠子7。洗涤后，将珠子分成42列并用42种醛偶联(图17)，每个柱接受一个醛并旋转过夜，得到珠子8。随后，将Fmoc在每个单独的柱中脱保护，并将珠子与如上所述的42种Fmoc-氨基酸中的一个偶联，得到珠子9。将所有珠子合并在一个柱子中并洗涤。如上所述，按顺序脱保护Fmoc和Alloc。将珠子再次分至42个柱子，并将珠子每部分与42种Fmoc-氨基酸中的一个偶联。在最后一次偶联循环后，将珠子合并，并将Fmoc脱保护。将珠子分别用DMF(3×12mL)、MeOH(3×12mL)和DCM(3×12mL)洗涤三次。然后将珠子在真空下干燥。使用TFA混合物(82.5％TFA：5％苯酚：5％茴香硫醚：5％水：2.5％TIS的混合物，v/v)进行侧链脱保护4小时。用5％DIEA/DMF(2×12mL)中和后，依次分别用DMF(3×12mL)、MeOH(3×12mL)、DCM(3×12mL)、DMF(3×12mL)、50％DMF/水(3×12mL)、水(3×12mL)和70％乙醇/水(3×12mL)洗涤珠子。将珠子库储存在70％乙醇/水中并准备筛选。
为了清楚理解的目的，尽管已经通过说明和实施例的方式更详细地描述了前述发明，但是本领域技术人员应理解，可以在所附权利要求的范围内进行某些改变和修饰。另外，本文提供的每个参考文献通过引用整体并入，其程度如同每个参考文献通过引用单独并入。如果本申请与本文提供的参考文献之间存在冲突，则以本申请为准。

Claims (34)

1.一种化合物，其具有以下结构式：
其中
Ar选自C6-12芳基和C5-12杂芳基，其中Ar被0-4个R5基团取代；
R1选自C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、和C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代；
R1a和R1b各自独立地选自氢和C1-6烷基；
R2选自OR2a、-NR2aR2b、C5-12杂芳基和C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代；
R2a和R2b各自独立地选自C1-6烷基、C1-6羟烷基、C1-6烷基-OC(O)CH3和C1-6烷基-NR2dR2e，或与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子选自N、O、和S，其中所述C3-8杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代；
每个R1c和R2c独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、和C6-12芳基；
R2d和R2e各自独立地选自氢和C1-6烷基，或与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子选自N、O、和S；
R3选自氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、和C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代；
每个R3a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基和-SO2-C6-12芳基；
R4选自氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a和-C(O)NR4aR4b；
每个R4a和R4b独立地选自氢和C1-6烷基；
每个R5和R6独立地选自氢和C1-6烷基；
R7选自氢和C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代，每个R7a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、和C1-6卤代烷氧基；
X1为C1-6亚烷基；
X2为无或选自C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-和-C(O)CH(NH2)CH(OH)-；和
下标n和m各自独立地为0-3的整数；
或其药学上可接受的盐和异构体。
2.如权利要求1所述的化合物，其中，Ar选自苯基和吡啶基。
3.如权利要求1具有下式的化合物：
其中
R1选自C1-6烷基、-NR1aR1b、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基,和C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代；
R1a和R1b各自独立地选自氢和C1-6烷基；
R2独立地选自NR2aR2b、C5-12杂芳基和C1-6烷基-C5-12杂芳基，其中所述杂芳基任选地由C1-6羟烷基取代；
R2a和R2b各自独立选自C1-6烷基、C1-6羟烷基、和C1-6烷基-OC(O)CH3，或与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子选自N、O、和S，其中所述C3-8杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代；
每个R1c和R2c各自选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、和C6-12芳基；
R3选自氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、和C5-12杂芳基，其中所述杂环烷基、芳基和杂芳基任选地被0-4个R3a基团取代；
每个R3a各自独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基、C5-12杂芳基和-SO2-C6-12芳基；
R4选自氢、C1-6烷基、-C(O)R4a、-C(O)OR4a和-C(O)NR4aR4b；
每个R4a和R4b独立地选自氢和C1-6烷基；
每个R5和R6独立地选自氢和C1-6烷基；
R7选自氢和C1-6烷基-C6-12芳基，任选地被1-4个R7a基团取代，每个R7a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基,和C1-6卤代烷氧基；
X1为C1-6亚烷基；
X2为无或选自C1-6亚烷基、-C(O)NH-、-C(O)CH(NH2)CH2-和-C(O)CH(NH2)CH(OH)-；
下标n和m各自独立地为0-3的整数；和
下标q是0-4的整数；
或其药学上可接受的盐和异构体。
4.如权利要求1所述的化合物，其中
R1选自C1-6烷基、-NH2、C3-10环烷基、C3-8杂环烷基、C6-12芳基和C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代；和
每个R1c独立地选自卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、和C1-6卤代烷氧基。
5.如权利要求1所述的化合物，其中
R1选自C1-6烷基、-NH2、金刚烷基、哌啶基、苯基、吡啶基、和咪唑基，其中所述苯基任选地由1-4个R1c基团取代；和
每个R1c独立地选自氟、氯、-CF3、-OCH3、和-OCF3。
6.如权利要求1-5所述的化合物，其中R2a和R2b各自独立地选自-CH2CH2OH和–CH2CH2OC(O)CH3。
7.如权利要求1-5任一项所述的化合物，其中
R2a和R2b与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子选自N、O、和S，其中所述杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代；和
每个R2c独立地为C1-6烷基。
8.如权利要求1-5、7任一所述的化合物，其中R2a和R2b与它们所连接的氮结合形成4-吗啉代或4-甲基哌嗪-1基。
9.如权利要求1-8任一所述的化合物，其中
R3选自氢、C3-8环烷基、C6-12芳基、和C5-12杂芳基，其中所述芳基和杂芳基任选地被1-4个R3a基团取代；和
每个R3a独立地选自卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C5-12杂芳基和-SO2-C6-12芳基。
10.如权利要求1-9任一所述的化合物，其中
R3选自氢、环己基、苯基、萘基、吡咯基、吲唑基、吲哚基和硫代苯基，其中所述的苯基、吡咯基和硫代苯基任选地由1-4个R3a基团取代；和
每个R3独立地选自溴、氯、-CF3、-OCH3、吡啶、嘧啶、吡唑和-SO2-苯基。
11.如权利要求1-10任一所述的化合物，其中R4是–C(O)NH2。
12.如权利要求2-11任一所述的化合物，其中下标m和q为0。
13.如权利要求1-11任一所述的化合物，其中R7为H。
14.如权利要求1-13任一所述的化合物，其中下标n为1。
15.如权利要求1所述的化合物，具有下式：
16.如权利要求1所述的化合物，具有下式：
17.如权利要求1所述的化合物，其中
R1选自C1-6烷基、-NH2、C3-8杂环烷基、C6-12芳基和C5-12杂芳基，其中所述芳基任选地由1-4个R1c基团取代；
每个R1c独立地选自卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基和C1-6卤代烷氧基。
18.如权利要求1所述的化合物，其中
R2a和R2b各自独立地选自-CH2CH2OH和–CH2CH2OC(O)CH3，或与它们所连接的氮结合形成具有0-2个另外的杂原子的C3-8杂环烷基，所述杂原子选自N、O、和S，其中所述杂环烷基任选地由1-4个R2c基团取代；
每个R2c独立地为C1-6烷基；
R3选自氢、C3-8环烷基、C6-12芳基和C5-12杂芳基，其中所述芳基和杂芳基任选地由1-4个R3a基团取代；
每个R3a各自独立地选自卤素、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C5-12杂芳基、和–SO2-C6-12芳基；
X1是C1-6亚烷基；和
X2为无或选自C1-6亚烷基和-C(O)CH(NH2)CH2-；
或药学上可接受的盐和异构体。
19.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自下组：
或其药学上可接受的盐和异构体。
20.如权利要求1所述的化合物，选自下组：
21.如权利要求1所述的化合物，具有下式：
22.如权利要求1所述的化合物，具有下式：
23.如权利要求1所述的化合物，选自下组：
24.如权利要求1所述的化合物，选自下组：
25.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有下式：
26.一种药物组合物，其含有权利要求1-25任一所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
27.如权利要求26所述的药物组合物，还含有额外的化学治疗剂。
28.如权利要求27所述的药物组合物，其中所述额外的化学治疗剂是紫杉醇。
29.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有需要的对象施用治疗有效量的权利要求1-25任一所述的化合物。
30.如权利要求29所述的方法，其中所述的疾病为选自下组的癌症：卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌、结肠癌和非小细胞肺癌。
31.如权利要求30所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌。
32.如权利要求30所述的方法，其中所述癌症是前列腺癌。
33.如权利要求29-32任一所述的方法，其中所述方法还包括向所述对象进一步施用额外的化学治疗剂。
34.如权利要求33所述的方法，其中所述额外的化学治疗剂是紫杉醇。
CN201780022401.9A 2016-04-04 2017-04-04 治疗癌症的lls化合物 Pending CN109312157A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662318085P 2016-04-04 2016-04-04
US62/318,085 2016-04-04
US201662359604P 2016-07-07 2016-07-07
US62/359,604 2016-07-07
PCT/US2017/025959 WO2017176767A1 (en) 2016-04-04 2017-04-04 Lls compounds for treatment of cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109312157A true CN109312157A (zh) 2019-02-05

Family

ID=60001437

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780022401.9A Pending CN109312157A (zh) 2016-04-04 2017-04-04 治疗癌症的lls化合物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US10844052B2 (zh)
EP (1) EP3440134A4 (zh)
JP (1) JP2019510780A (zh)
CN (1) CN109312157A (zh)
WO (1) WO2017176767A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11649460B2 (en) 2020-03-20 2023-05-16 Joao Francisco Peinado Pereira DNA aptamers, method for inhibiting human galectin-1 and method of treating a mammal in need thereof

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060281784A1 (en) * 2003-11-28 2006-12-14 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques Novel benzimidazole and imidazopyridine derivatives and use thereof as a medicament
CN101300251A (zh) * 2005-09-06 2008-11-05 史密丝克莱恩比彻姆公司 作为plk抑制剂的苯并咪唑噻吩化合物
CN101415422A (zh) * 2006-02-09 2009-04-22 第一三共株式会社 抗癌药用组合物
WO2010039668A2 (en) * 2008-10-01 2010-04-08 The Regents Of The University Of California Inhibitors of cyclin kinase inhibitor p21
CN102417483A (zh) * 2010-09-27 2012-04-18 中国药科大学 作为parp抑制剂的2-苯基-1h-苯并咪唑-4-甲酸酯衍生物
CN103214456A (zh) * 2013-04-20 2013-07-24 郎恒元 具有抗肿瘤活性的苯并咪唑类化合物、制备方法及其应用
CN104003979A (zh) * 2013-02-21 2014-08-27 上海汇伦生命科技有限公司 苯并咪唑-2-哌嗪类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途
US20140243324A1 (en) * 2010-11-18 2014-08-28 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Use of hematopoietic growth factor mimetics
CN104230897A (zh) * 2013-06-17 2014-12-24 上海汇伦生命科技有限公司 苯并咪唑-2-哌嗪杂环类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060281784A1 (en) * 2003-11-28 2006-12-14 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques Novel benzimidazole and imidazopyridine derivatives and use thereof as a medicament
CN101300251A (zh) * 2005-09-06 2008-11-05 史密丝克莱恩比彻姆公司 作为plk抑制剂的苯并咪唑噻吩化合物
CN101415422A (zh) * 2006-02-09 2009-04-22 第一三共株式会社 抗癌药用组合物
WO2010039668A2 (en) * 2008-10-01 2010-04-08 The Regents Of The University Of California Inhibitors of cyclin kinase inhibitor p21
CN102417483A (zh) * 2010-09-27 2012-04-18 中国药科大学 作为parp抑制剂的2-苯基-1h-苯并咪唑-4-甲酸酯衍生物
US20140243324A1 (en) * 2010-11-18 2014-08-28 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Use of hematopoietic growth factor mimetics
CN104003979A (zh) * 2013-02-21 2014-08-27 上海汇伦生命科技有限公司 苯并咪唑-2-哌嗪类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途
CN103214456A (zh) * 2013-04-20 2013-07-24 郎恒元 具有抗肿瘤活性的苯并咪唑类化合物、制备方法及其应用
CN104230897A (zh) * 2013-06-17 2014-12-24 上海汇伦生命科技有限公司 苯并咪唑-2-哌嗪杂环类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TAKEUCHI, K等: "1,2-disubstituted indole, azaindole and benzimidazole derivatives possessing amine moiety: A novel series of thrombin inhibitors", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017176767A1 (en) 2017-10-12
US10844052B2 (en) 2020-11-24
EP3440134A4 (en) 2019-11-27
EP3440134A1 (en) 2019-02-13
US20190256503A1 (en) 2019-08-22
JP2019510780A (ja) 2019-04-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104411701B (zh) 作为Bub1抑制剂的用于治疗癌症的取代的环烯并吡唑
CN105916845B (zh) 用于抑制shp2活性的n-氮杂螺环烷取代的n-杂芳基化合物和组合物
CN104119350B (zh) 氨基喹唑啉类衍生物及其盐和使用方法
CN104507950B (zh) 噻吩并嘧啶
CN103958502B (zh) 作为丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂的喹唑啉化合物
CN103269704B (zh) 杂环化合物和其用途
CN109071447A (zh) 四环吡啶酮化合物作为抗病毒剂
CN109641838A (zh) Cxcr4抑制剂及其用途
CN109415360A (zh) 用于抑制shp2活性的化合物和组合物
CN109789143A (zh) 基于嘧啶的抗增殖剂
CN109219604A (zh) 四氢异喹啉雌激素受体调节剂及其用途
CN104066735B (zh) 作为akt激酶抑制剂的取代的咪唑并吡嗪
CN107787323A (zh) 用于抑制shp2活性的化合物和组合物
CN103596957B (zh) 作为akt激酶抑制剂的咪唑并哒嗪
CN107889488A (zh) 咪唑酮基喹啉和其作为atm激酶抑制剂的用途
CN107108611A (zh) 四氢‑吡啶并[3,4‑b]吲哚雌激素受体调节剂及其用途
CN109640988A (zh) Cxcr4抑制剂及其用途
CN109311843A (zh) 作为PI3Kβ抑制剂的氮杂苯并咪唑衍生物
CN105452237A (zh) 杂芳基取代的吡唑
CN105764893A (zh) 杂芳基取代的吡唑
CN107148420A (zh) 苄基取代的吲唑类化合物
CN107108527A (zh) 共济失调性毛细血管扩张和Rad3相关的(ATR)蛋白激酶抑制剂
CN110461853A (zh) 苯并噻吩雌激素受体调节剂
CN106279160B (zh) N‑苯基‑2‑氨基嘧啶类化合物制备方法和用途
CN106132950A (zh) 化合物和使用方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20190205

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication