CN109258366A - 一种泰山四叶参大田一步成苗的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种泰山四叶参大田一步成苗的方法，以接种成功的泰山四叶参组培苗为试材，简化生根和移栽程序，共分6个步骤，将生根瓶苗直接在大田移栽成活，只需一步移栽，即获得环境适应力强、可当年自然越冬的大田组培苗；实现从瓶苗到大田苗的跨越，形成一套从瓶苗到移栽种苗的完整繁育体系，是一种新型高效的种苗繁殖方式。本发明既填补了泰山四叶参组培苗自然越冬苗技术空白，也填补了同类型组培苗在北方自然越冬的研究空白。

Description

一种泰山四叶参大田一步成苗的方法

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，具体为一种泰山四叶参大田一步成苗的方法。

背景技术

泰山四叶参（Codonopsis lanceolata (Sieb. et Zucc.) Trautv.）为桔梗科（Campanulaceae）党参属（Codonopsis）多年生草本蔓生植物，又叫羊乳、羊奶参，轮叶党参、泰山参等；多生于山地灌木林下、沟边阴湿地及阔叶林内。泰山四叶参主要以根入药，味甘、辛、平。归肺肝脾大肠经。具有补虚通乳，排脓解毒的功效。用于病后体虚，乳汁不足，乳腺炎，肺脓疡，痈疖疮疡喉蛾等症。

作为泰山特色中草药、“泰山四大名药”之一，泰山四叶参的经济价值也日益成为发展泰山特色经济、改善经济结构、促进供给侧经济结构调整和扩大特色种质资源利用的新焦点，受到当地政府高度重视。而泰山四叶参人工种植规模较小，野生资源因人为滥采滥挖，濒临枯竭，依靠自然资源供给难以满足市场需求。因此，以上因素都形成了对泰山四叶参种质资源保护、繁殖和发展的迫切需要，探索研究泰山四叶参人工繁殖技术成为当前紧迫任务。

泰山四叶参常规生产主要以播种或根茎移栽方式繁殖；这两种繁殖方式均存在明显弊端，如种苗质量受繁殖材料影响，出现品质退化、病虫害积累等问题。当前较突出的是常规种苗繁殖受季节影响较大、优良遗传性状难以稳定保持、良种推广种植受限等问题。利用组织培养技术，可快速、大量培养具优良遗传性状的泰山四叶参种苗，但常规组培苗炼苗移栽过程对技术设施要求较高，往往在炼苗移栽阶段出现大量死苗，导致移栽失败，影响快繁效果。

对泰山四叶参组培苗炼苗移栽技术的研究李铁军等已作过尝试，他们探索了泰山四叶参组培苗两种不同炼苗方式，并发现不同炼苗方式之间显著差异，未经驯化适应的小苗成活率很低，大部分在移栽3 d后死亡，对泰山四叶参组培繁殖方式的研究有很好的促进作用。但其研究内容也还存在一定局限性，如组培苗生根培养只采用激素诱导生根，未探索其他生根方式；在炼苗移栽阶段，采用的2种炼苗移栽方式成活率差异显著，并且未经驯化直接移栽的小苗3 d后的移栽成活率为零，未获成活苗；李铁军等的研究结果局限于常规炼苗移栽试验，没有做大田直接移栽成活的试验，其常规炼苗移栽试验次数较少，样本也较小，故缺乏足够的实验重复及更详尽的试验因素的排查，因此，在泰山四叶参炼苗移栽技术上还存在很大的改进空间。

目前，已报道的泰山四叶参组培苗炼苗移栽均采用先驯化后移栽的常规方法，而关于泰山四叶参组培苗未经驯化而直接大田移栽并一步成苗的技术方法，未见公开报道。

发明内容

本发明针对以上不足之处，提供了一种泰山四叶参大田一步成苗的方法, 本发明采用简化生根方式获得生根苗；采用简化移栽程序，将生根苗不经驯化直接在试验大田移栽，获得大田成活组培苗，且当年成活组培苗可直接在试验地自然越冬，实现从瓶苗到大田苗的跨越，大大缩减泰山四叶参组培苗繁育时间，简化繁育流程。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种泰山四叶参大田一步成苗的方法，具体步骤如下：

（1）材料选取 在接种成功的组培苗中选择生长健壮、符合一定标准的无菌瓶苗为试验材料，具体选取标准：至少具1个节、茎秆粗壮，茎段基部直径0.2 cm以上，高度1 cm以上，且颜色绿中稍带紫色，具完整叶片的单株；

（2）不定根的诱导 从上步选出的泰山四叶参无菌单株上切取1-1.5 cm的具节间和叶片的茎段，基部向下，按瓶内株距0.5-1 cm扦插在不定根诱导培养基，进行不定根诱导，得到生根苗；

（3）试验地整理 选择土壤性质为富含腐殖质的砂质壤土地块为移栽试验地，移栽前，先对试验地进行整理，整平、清除杂草、深翻30 cm以上，并喷0.5%高锰酸钾和浓度500-1000倍多菌灵对土壤消毒，然后做成宽50 cm，长200 cm，两边建陇，地垄高10-15 cm，宽20-25cm的苗床，并喷0.5%高锰酸钾和浓度500-1000倍多菌灵对苗床土壤消毒，喷洒至苗床土壤湿润深度2 cm左右即可；

（4）移栽前准备 移栽前，先对生根苗进行预处理，将生根苗迅速从培养瓶拔出，浸泡在清水中，洗净不定根上残留的培养基，将洗净培养基的小苗浸泡在浓度500-1000倍的多菌灵溶液中3-10min；

（5）大田移栽 从多菌灵溶液中取出小苗，直接移栽至整理好的苗床，移栽采用开沟移栽方式，沟深0.5-2cm，按株距10-15 cm，行距15-20 cm，将小苗移栽到开好的沟中。

（6）栽后管理 栽好的小苗，迅速喷洒一遍浓度500-1000倍多菌灵溶液，以小苗茎叶滴水且移栽苗茎基部与苗床土壤紧密结合为准，并浇透移栽苗床；然后，在苗床上覆盖直插式塑料小拱棚，并压紧棚脚，再用遮阴网覆盖移栽苗床上方，避免阳光直射，培养20 d后调查生长情况，小苗存活率90%以上，90 d后，完全撤掉塑料拱棚和遮阴网，成活组培苗转入正常大田苗培养模式。

进一步的，所述不定根诱导培养基为无激素不定根诱导培养基或有激素不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS + 0-3%蔗糖，有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.4 -0.9 mg/L。

本发明以在接种成功的泰山四叶参组培苗为试验材料，简化生根和移栽程序，共经6个步骤，具体为：材料选取、不定根诱导、试验地整理、移栽前准备、大田移栽、栽后管理，将生根瓶苗直接在大田移栽成活，只需一步移栽，即获得环境适应力强、可当年自然越冬的大田组培苗。

本发明采用简化生根方式获得生根苗；采用简化移栽程序，将生根苗不经驯化直接在试验大田移栽，获得大田成活组培苗，且当年成活组培苗可直接在试验地自然越冬，实现从瓶苗到大田苗的跨越，大大缩减泰山四叶参组培苗繁育时间，简化繁育流程。

当年成活组培苗在试验地自然越冬既填补了泰山四叶参组培苗自然越冬苗技术空白，也填补了同类型当年生组培苗在北方自然越冬的研究空白。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细描述：

实施例1：

从接种成功的泰山四叶参组培苗中，选择生长健壮、至少具1个节、茎秆粗壮，茎段基部直径0.2 cm以上，高度1 cm以上，且颜色绿中稍带紫色，具完整叶片的单株为试验材料。切成1-1.5 cm的具节间和叶片的茎段，按瓶内株距0.5-1 cm接种在不添加任何激素的不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS + 0-3%蔗糖，进行不定根诱导。培养10-15 d后，茎段基部长出白色不定根。当不定根数量3-8条，根长0.5-2 cm，茎基根粗直径0.1 cm左右时，可用于大田移栽。

选择土壤性质为富含腐殖质的砂质壤土地块为移栽试验地。移栽前对移栽试验地进行整理。先整平、清除杂草，深翻30 cm以上，然后，修剪移栽苗床，苗床规格为：宽50 cm，长200 cm，两边建陇，垄高10 cm，宽20 cm，并喷0.5%高锰酸钾和500-1000倍多菌灵对土壤消毒。

将生根瓶苗搬运至移栽试验地，打开瓶口，将生根苗迅速从培养瓶拔出，浸泡在清水中，洗净不定根上残留的培养基；将洗净培养基的小苗浸泡在多菌灵溶液3-10 min后捞出，按株距10 cm，行距15 cm，深度0.5 cm，直接移栽至整理好的苗床。栽好的小苗，迅速喷洒一遍浓度500-1000倍多菌灵溶液，并浇透移栽苗床；然后，覆盖直插式塑料小拱棚，并压紧棚脚。再用遮阴网覆盖移栽苗苗床上方，避免阳光直射。培养20 d后调查生长情况，小苗存活率90%以上。90 d后，完全撤掉塑料拱棚和遮阳网，成活组培苗转入正常大田苗培养模式。

实施例2：

从接种成功的泰山四叶参组培苗中，选择生长健壮、至少具1个节、茎秆粗壮，茎段基部直径0.2 cm以上，高度1 cm以上，且颜色绿中稍带紫色，具完整叶片的单株为试验材料。切成1-1.5 cm的具节间和叶片的茎段，按瓶内株距0.5-1 cm接种在添加生长素的不定根诱导培养基，有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.4-0.9 mg/L进行不定根诱导。培养7-15 d后，茎段基部长出不定根，数量1-10条，白色，较细、长度0.5-3 cm，茎基根粗直径0.1cm左右时，可用于大田移栽。

选择土壤性质为富含腐殖质的砂质壤土地块为移栽试验地。移栽前对移栽试验地进行整理。先整平、清除杂草，深翻50 cm以上，然后，修剪移栽苗床，苗床规格为：宽50 cm，长200 cm，两边建陇，垄高15 cm，宽25 cm，并喷0.5%高锰酸钾和500-1000倍多菌灵对土壤消毒。

将生根瓶苗搬运至移栽试验地，打开瓶口，将生根苗迅速从培养瓶拔出，浸泡在清水中，洗净不定根上残留的培养基；将洗净培养基的小苗浸泡在多菌灵溶液3-10 min后捞出，按株距15 cm，行距20 cm，深度2 cm，直接移栽至整理好的苗床。栽好的小苗，迅速喷洒一遍浓度500-1000倍多菌灵溶液，并浇透移栽苗床；然后，覆盖直插式塑料小拱棚，并压紧棚脚。再用遮阴网覆盖移栽苗苗床上方，避免阳光直射。培养20 d后调查生长情况，小苗存活率90%以上。90 d后，完全撤掉塑料拱棚和遮阳网，成活组培苗转入正常大田苗培养模式。

实施例3

如实施例1所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距0.5 cm接种在不添加任何激素的不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和500倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度500倍多菌灵溶液。

实施例4

如实施例1所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距1 cm接种在不添加任何激素的不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS+ 3%蔗糖，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和1000倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度1000倍多菌灵溶液。

实施例5

如实施例1所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距0.8 cm接种在不添加任何激素的不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS+ 2%蔗糖，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和800倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度800倍多菌灵溶液。

实施例6

如实施例2所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距0.8 cm接种在添加生长素的不定根诱导培养基，所述有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.6 mg/L，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和800倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度800倍多菌灵溶液。

实施例7

如实施例2所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距1 cm接种在添加生长素的不定根诱导培养基，所述有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.9 mg/L，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和1000倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度1000倍多菌灵溶液。

实施例8

如实施例2所述，不同之处在于：

第一段中按瓶内株距0.5 cm接种在添加生长素的不定根诱导培养基，所述有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.4 mg/L，

第二段中并喷0.5%高锰酸钾和500倍多菌灵对土壤消毒。

第三段中迅速喷洒一遍浓度500倍多菌灵溶液。

当然，上述说明并非是对本发明的限制，本发明也并不仅限于上述举例，本技术领域的技术人员在本发明的实质范围内所做出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种泰山四叶参大田一步成苗的方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）材料选取 在接种成功的组培苗中，选择生长健壮、符合一定标准的无菌瓶苗为试验材料，具体选取标准：至少具1个节、茎秆粗壮，茎段基部直径0.2 cm以上，高度1 cm以上，且颜色绿中稍带紫色，具完整叶片的单株；

（2）不定根的诱导 从上步选出的泰山四叶参无菌单株上切取1-1.5 cm的具节间和叶片的茎段，基部向下，按瓶内株距0.5-1 cm扦插在不定根诱导培养基上，进行不定根诱导，得到生根苗；

（3）试验地整理 选择土壤性质为富含腐殖质的砂质壤土地块为移栽试验地，移栽前，先对试验地进行整理，整平、清除杂草、深翻30 cm以上，然后做成宽50 cm，长200 cm，两边建陇，地垄高10-15 cm，宽20-25 cm的苗床，并喷0.5%高锰酸钾和浓度500-1000倍多菌灵对苗床土壤消毒，喷洒至苗床土壤湿润深度2 cm即可；

（4）移栽前准备 移栽前，先对生根苗进行预处理，将生根苗迅速从培养瓶中拔出，浸泡在清水中，洗净不定根上残留的培养基，将洗净培养基的小苗浸泡在浓度500-1000倍的多菌灵溶液中3-10 min；

（5）大田移栽 从多菌灵溶液中取出小苗，直接移栽至整理好的苗床，移栽采用开沟移栽方式，沟深0.5-2 cm，按株距10-15 cm，行距15-20 cm，将小苗移栽到开好的沟中；

（6）栽后管理 栽好的小苗，迅速喷洒一遍浓度500-1000倍多菌灵溶液，以小苗茎叶滴水且移栽苗茎基部与苗床土壤紧密结合为准，并浇透移栽苗床；然后，在苗床上覆盖直插式塑料小拱棚，并压紧棚脚，再用遮阴网覆盖移栽苗床上方，避免阳光直射，培养20 d后调查生长情况，小苗存活率90%以上，90 d后，完全撤掉塑料拱棚和遮阴网，成活组培苗转入正常大田苗培养模式。

2.根据权利要求1所述的一种泰山四叶参大田一步成苗的方法，其特征在于，所述不定根诱导培养基为无激素不定根诱导培养基或有激素不定根诱导培养基，所述无激素不定根诱导培养基的成分是MS + 0-3%蔗糖，有激素不定根诱导培养基的成分是1/2MS+NAA0.4 -0.9 mg/L。