CN109212012A - 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用 - Google Patents

孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109212012A
CN109212012A CN201811058122.0A CN201811058122A CN109212012A CN 109212012 A CN109212012 A CN 109212012A CN 201811058122 A CN201811058122 A CN 201811058122A CN 109212012 A CN109212012 A CN 109212012A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mercury
cadmium
exposure
icp
obesity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811058122.0A
Other languages
English (en)
Inventor
夏彦恺
陈市耀
孙娴
卢婷
管权权
陈敏健
王心如
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University
Nanjing Medical University
Original Assignee
Nanjing Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Medical University filed Critical Nanjing Medical University
Priority to CN201811058122.0A priority Critical patent/CN109212012A/zh
Publication of CN109212012A publication Critical patent/CN109212012A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/62—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating the ionisation of gases, e.g. aerosols; by investigating electric discharges, e.g. emission of cathode
    • G01N27/626—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating the ionisation of gases, e.g. aerosols; by investigating electric discharges, e.g. emission of cathode using heat to ionise a gas
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明属于分析化学及临床医学领域，公开了孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用。与儿童肥胖症相关的暴露生物标志物为汞和镉的混合暴露。采用ICP‑MS检测全血中的汞和镉的浓度，可用于儿童肥胖症的辅助诊断，用血量少、操作简单、快速、准确，具有较好的临床推广价值。

Description

孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物 及其应用
发明领域
本发明属于分析化学及临床医学领域，涉及一种与儿童肥胖相关的暴露生物标志物及其检测方法和应用，该暴露生物标志物为汞、镉混合暴露，其检测方法为基于ICP-MS的检测方法。
背景技术
近些年来，儿童肥胖症的发病率在国内外均呈快速增长趋势。目前发展中国家儿童超重肥胖率均低于发达国家，但增长速度并不低于发达国家。【1】如果不采取有效的干预措施，到2030年，预期我国0～7岁儿童肥胖率将达到6.0％，肥胖儿童数将增至664万人；7岁及以上学龄儿童超重肥胖率将达到28.0％，超重肥胖的儿童数将增至4948万人；由超重及肥胖所致成人肥胖相关慢性病的直接经济花费也将增至490.5亿元/年。肥胖的后果包括发生代谢综合征，心血管疾病，2型糖尿病及其相关的视网膜和肾并发症，非酒精性脂肪肝病，阻塞性睡眠呼吸暂停，多囊卵巢综合征，不育症，哮喘，骨科并发症，精神疾病和癌症风险增加等等。【2】儿童肥胖的发生发展是遗传、环境和饮食行为等因素共同作用的结果，肥胖的流行受遗传、环境和社会文化等多种因素的影响。【3】其中母体孕期环境毒物暴露由于患者认识不足和检测技术的限制，是较容易被临床所忽略的重要病因。
基因组学进行了大量广泛的研究，相对于投入的大量资金及人员，其研究结果对健康的影响并不明显。暴露组学作为基因组学的补充是指从妊娠开始贯穿整个人生的环境暴露(包括生活方式因素).暴露源包括外源(污染、辐射、饮食等)和内源(炎症、感染、微生物等)，继全基因组关联研究(GWAS)之后发展的全暴露组关联研究(EWAS)的目的是对在未知方式下暴露的评估，EWAS方法通过比较患者和健康受试者暴露组的分析结果,确定有效的生物标志物，进而利用这些生物标志物来阐明暴露-效应关系(生化流行病学)、暴露和人体动力学来源(暴露生物学)、以及作用机制(系统生物学)。环境暴露与健康之间的关系研究可从测定病例组和对照组外环境中的空气、水、食物内的污染物入手，检验两组间是否存在差异，进而通过对主要物质的摄入量、代谢等进行考量，估计暴露剂量，这称之为自下而上的方法(bottom-up)；另一种方法是从测量病例组和对照组血液或其他体液内的物质入手，检验各类物质与疾病之间的统计学联系，最终确定导致疾病的物质及其暴露来源，称之自上而下的方法(top-town)。“自下而上”和“自上而下”的方法在识别个体暴露上都具有科学价值，“自上而下”法用于揭示人类疾病的未知暴露源，而“自下而上”法是用于分析外暴露以及建立干预与预防的方法。生物标志物不仅可以用于研究外暴露，也可以用于研究内暴露。内暴露组学采用组学的方法进行研究，如基因组学、蛋白质组学、表观基因组学、代谢组学、转录组学、加合物组学等。暴露组学涉及多学科交叉(流行病学、生物统计学、生物信息学、分析化学等)，目前研究方向如发展更先进的分析技术(提高通量、降低样本量及费用等)、高效寻找合适的暴露标志物、混合暴露与疾病的关系、在群体水平找到与疾病相关的暴露因素、暴露组关联研究，等等。
环境暴露与健康关系研究中存在一些问题，比如，针对单一环境暴露因素研究(忽略混合暴露的存在及各个暴露间的联合作用)，环境暴露因素种类局限(集中在已知的和法规重点控制的暴露)，环境暴露采样时机与疾病的自然发生进程分离(较少考虑慢性病存在潜伏期)、环境暴露采样与检测不准确，等等。对暴露内部标志物的测定要与疾病发生的“时间窗”相对应，否则，研究结果将可能因为暴露和疾病发生时间上的先后关系不清而无法得出可靠结论。
重金属汞和镉是最常见的环境毒物之一，由于环境污染问题的存在，普通人群均可能暴露于汞(Hg)和镉(Cd)。以往的研究表明母体孕期暴露于汞或镉均会增加子代患儿童肥胖的风险。有文献报道，汞和硒与胆固醇呈正相关【4】。不同化学物质间的相互作用比较复杂，根据化学物质毒性效应模式，一般有协同、相加和及拮抗效应。有文献报导，汞和镉的毒性具有协同效应【5】，汞和镉的混合暴露比汞、镉的单独暴露的危害要大【6】，但是，母体孕期单独暴露均处于安全浓度的汞、镉，是否在混合暴露时能够导致子代儿童肥胖症尚有待进一步研究。
石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)是目前全血中汞和镉常用的检测方法，可以做到较快速的准确定量分析【7】。然而这一方法标准工作曲线的线性范围窄，样品前处理较复杂，特别是其无法进行多元素同时分析，因此局限了其在混合暴露评估中的应用。其他常用方法诸如原子荧光光谱(AFS)、电化学分析法等也具有特定的不足。电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)是用于痕量及超痕量多元素分析的质谱仪，具有灵敏度高、检出限低、选择性好、分析速度快、动态范围宽等优点，由于其多元素高通量检测的特点，因而被广泛应用于混合暴露特别是多种重金属混合暴露的检测当中【8-11】。
在既往的实践中，ICP-MS最初被用于环境样本如水样、土壤的重金属污染水平分析。此后又被用于具有职业暴露风险的工人体液样本中铅、镉、汞等重金属水平检测。近年来，越来越多的研究和实践中使用ICP-MS作为人类各类疾病的早期标志物的识别和检测应用，如糖尿病，儿童神经发育障碍，心血管疾病，不良出生结局等，相关论文发表在学术期刊《Environ Health Perspect》、《Epidemiology》、《Environ Pollut》、《Occup EnvironMed》，体现出其在人类疾病诊断中的巨大潜力与价值。然而目前采用ICP-MS分析孕期女性全血中汞、镉混合暴露水平在评测子代儿童肥胖症风险中的应用还未得到相应的关注。若能发现孕期女性汞、镉混合暴露作为辅助诊断标志物与子代的明确关联，并研发相应疾病的ICP-MS检测方法，提高检测结果的准确性与灵敏度，不仅可以在该领域获得国际领先的研究成果，还能创造可观的经济价值，并且为促进和提高我国儿童健康水平做出贡献。
发明内容
本发明的目的是：
1.将汞、镉混合暴露作为儿童肥胖预测的辅助诊断标志物；
2.建立基于ICP-MS的孕妇全血中汞、镉混合暴露的检测方法；
3.开发用于儿童肥胖症风险评估的汞、镉混合暴露检测试剂盒。
本发明的目的通过下列技术措施实现的：
与儿童肥胖症相关的暴露生物标志物，该暴露生物标志物为汞和镉的混合暴露。
用于检测所述暴露生物标志物的方法，该方法为采用ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度，特别是采用内标与标准曲线混合的ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度。
所述的检测方法，该检测方法的具体步骤及参数为：
a.ICP-MS点火启动后，稳定约半小时；泵入1ppb调谐液(由仪器厂家配套提供，Ba、Bi、Ce、Co、Ln、Li、U，每种浓度1μg/L，基质为2.5％HNO3、0.5％HCl)，根据Li、In和U的灵敏度，氧化物(CeO)以及双电荷(Ba2+)的水平，对全部质量范围(4～290amu)进行调谐并达到最佳状态。调谐要求达到以下标准：标准模式灵敏度7Li≥4000cps/ppb、115In≥15000cps/ppb；238U≥20000cps/ppb；标准模式双电荷Ba2+/Ba<3.0％；标准模式氧化物156CeO/140Ce<2.0％；优化的操作参数见表1.1；
表1.1 ICP-MS优化的操作参数
b.仪器采集参数见表1.2，仪器在检测样本时在动能歧视(Kinetic EnergyDiscrimination，KED)的单一碰撞池模式下运行，采用纯氦气作为碰撞气体；使用清洗液冲洗系统。
表1.2 ICP-MS采集参数
其他步骤详见厂商说明书。
所述的暴露生物标志物在制备检测预测儿童肥胖症的辅助诊断试剂盒中的应用。
一种用于检测预测儿童肥胖症的辅助诊断试剂盒，该试剂盒含有采用ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度的试剂。
所述的辅助诊断试剂盒，该试剂盒含有下列试剂：
试剂A：稀释剂(含0.1％v/v曲拉通+1％v/v硝酸+10μg/L铑+10μg/L铋，其余为去离子水)；
试剂B：汞标准曲线：浓度分别为0、0.1、0.5、1、5、10、50μg/L；
试剂C：镉标准曲线：浓度分别为0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；
试剂D：清洗液：2％v/v硝酸。
(注：标准曲线采用稀释剂配置，标准曲线0浓度就是稀释剂。内标元素含量通过该元素的标准液稀释而来。)
本发明详细描述如下：
本发明人以标准操作程序(SOP)采集符合标准的孕妇全血样本，系统收集完整的人群基础信息和临床资料，并采用了基于ICP-MS检测方法进行分析。
具体来说研究的实验方法主要包括以下几个部分：
一、研究对象选择和分组依据
纳入病例100人，为患有儿童肥胖症儿童的孕母；根据年龄、BMI匹配对照100人，为子代不患有儿童肥胖症的孕母，测量两组孕母孕期全血中汞、镉的浓度。
A组：健康对照组(100人，子代患有儿童肥胖症)：
1.年龄在20-35岁
2.单胎
3.无高血压、糖尿病等慢性病史
4.无吸烟、饮酒史
B组：病例组(100人，子代不患有儿童肥胖症)：
1.年龄在20-35岁
2.单胎
3.无高血压、糖尿病等慢性病史
4.无吸烟、饮酒史
二、ICP-MS检测汞、镉混合暴露与儿童肥胖症风险的分析
1.样本前处理
取100μl全血，加入4.9ml试剂A(即稀释50倍)，充分混匀。
2.仪器检测
分析仪器：ICAP RQ ICP-MS(Thermo)
a.ICP-MS点火启动后，稳定约半小时；泵入1ppb调谐液(由仪器厂家配套提供，Ba、Bi、Ce、Co、Ln、Li、U，每种浓度1μg/L，基质为2.5％HNO3、0.5％HCl)，根据Li、In和U的灵敏度，氧化物(CeO)以及双电荷(Ba2+)的水平，对全部质量范围(4～290amu)进行调谐并达到最佳状态。调谐要求达到以下标准：标准模式灵敏度7Li≥4000cps/ppb、115In≥15000cps/ppb；238U≥20000cps/ppb；标准模式双电荷Ba2+/Ba<3.0％；标准模式氧化物156CeO/140Ce<2.0％；优化的操作参数见表1.1；
表1.1 ICP-MS优化的操作参数
b.仪器采集参数见表1.2，仪器在检测样本时在动能歧视(Kinetic EnergyDiscrimination，KED)的单一碰撞池模式下运行，采用纯氦气作为碰撞气体；使用清洗液冲洗系统。
表1.2 ICP-MS采集参数
其他步骤详见厂商说明书。
进样方式：自动进样，进样及稳定时间30s，清洗时间为30s。
3.数据处理：
使用Qtegra(ISDS)软件(赛默飞世尔科技，美国)在线对数据进行定量评估，以内标铑(Rh)、铋(Bi)分别用于校正镉和汞的浓度。将样品名称、待测元素名称、浓度或信号强度(Counts Per Second，CPS)值等导出至excel表格中。
4.数据分析：
暴露水平在总样本75％分位数以上时被认为是高暴露(+)，否则为低暴露(-)。健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比采用卡方检验进行比较。
5.健康对照组、病例组全血样本中汞、镉混合暴露的差异和诊断意义。
经Welch's t-test发现病例组汞和镉暴露水平均高于对照组。卡方检验发现健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比具有显著差异，病例组的高暴露人数多于对照组，汞、镉高暴露显著提高了儿童肥胖症发病风险。
三、诊断试剂盒制备方法
根据上述一系列实验结果，本发明人还制备了一种能用于儿童肥胖症的辅助诊断试剂盒，所述辅助诊断试剂盒包含一套全血汞、镉检测的试剂及耗材。
本发明的有益效果：
本发明人通过采用ICP-MS比较正常对照和儿童肥胖症病例全血中的汞、镉混合暴露水平，发现了女性全血中存在具有儿童肥胖症辅助诊断价值的标志物组合，以及该标志物检测的ICP-MS的应用，研制出可便于临床应用的和儿童肥胖症辅助诊断试剂盒。
本发明采用儿童全血中汞、镉混合暴露水平作为儿童肥胖症评价的标志物的优越性在于：
(1)汞、镉混合暴露是一组新型生物标志物，其与疾病结局关联强，不仅稳定、微创、易于检测，且定量精确，将大大提高儿童肥胖症辅助诊断的敏感性和特异性，该类生物标志物的成功开发将为儿童肥胖的防治开创全新局面，为其他疾病生物标志物的研制提供借鉴。
(2)本发明提供的汞、镉混合暴露检测可用于儿童肥胖症的辅助诊断，可在早期通过微创方式早期诊断儿童肥胖症，从而为临床医生进一步深入检查提供依据，为快速准确掌握患者的疾病状态和病情严重程度、及时采取更具个性化的防治方案提供支持，延缓和阻止疾病进展。
(3)本发明采用子代患上儿童肥胖症的人群和健康对照人群的全血样本进行验证，证明了子代患上儿童肥胖的人群具有较高的铅、镉暴露水平，可作为标志物使用。
(4)ICP-MS技术样本处理简单，仪器分析迅速准确，取样后，30分钟内可出具结果，具有较高的临床诊断实用价值。
(5)本发明样本操作步骤简单，且能防止样品污染，提高灵敏度，100ul全血样本加入配备好的稀释剂中即可上机进行分析，对环境及操作人员的要求降低。
(6)本发明采用ICP-MS技术对汞、镉联合暴露进行检测的前处理步骤进行了优化，能够更好地减少检测的成本和时间。
附图说明
图1健康对照组和病例组的汞暴露水平。
箱式图的顶部和底部分别代表第七十五和第二十五百分位，箱式图的上端到下端代表第九十和第十百分位。
图2健康对照组和病例组的镉暴露水平，图注参考图1。
图3卡方检验发现健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比具有显著差异，病例组的高暴露人数多于对照组，汞、镉高暴露显著提高了子代患儿童肥胖症的发病风险。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。
实施例1研究对象选择和分组依据
本发明人从南京医科大学附属南京妇幼保健院采集符合要求的孕妇的全血样本。进行一阶段随访之后，根据子代随访结局，将子代患有儿童肥胖的孕母纳入到病例组(100人)，按年龄、BMI匹配对照100人，共200人作为儿童肥胖汞、镉混合暴露评估的实验对象。具体的样本归类标准如下：
第一阶段关联探索阶段
纳入病例100人，为患有儿童肥胖症儿童的孕母；根据年龄、BMI匹配对照100人，为子代不患有儿童肥胖症的孕母，测量两组孕母孕期全血中汞、镉的浓度。
A组：健康对照组(100人，子代患有儿童肥胖症)：
5.年龄在20-35岁
6.单胎
7.无高血压、糖尿病等慢性病史
8.无吸烟、饮酒史
B组：病例组(100人，子代不患有儿童肥胖症)：
1.年龄在20-35岁
2.单胎
3.无高血压、糖尿病等慢性病史
4.无吸烟、饮酒史
实施例2 ICP-MS检测汞、镉混合暴露与预测子代儿童肥胖症风险的分析
1.样本前处理
取100μl全血，加入4.9ml试剂A(即稀释50倍)，充分混匀。
2.仪器检测
分析仪器：ICAP RQ ICP-MS(Thermo)
a.ICP-MS点火启动后，稳定约半小时；泵入1ppb调谐液(由仪器厂家配套提供，Ba、Bi、Ce、Co、Ln、Li、U，每种浓度1μg/L，基质为2.5％HNO3、0.5％HCl)，根据Li、In和U的灵敏度，氧化物(CeO)以及双电荷(Ba2+)的水平，对全部质量范围(4～290amu)进行调谐并达到最佳状态。调谐要求达到以下标准：标准模式灵敏度7Li≥4000cps/ppb、115In≥15000cps/ppb；238U≥20000cps/ppb；标准模式双电荷Ba2+/Ba<3.0％；标准模式氧化物156CeO/140Ce<2.0％；优化的操作参数见表1.1；
表1.1 ICP-MS优化的操作参数
b.仪器采集参数见表1.2，仪器在检测样本时在动能歧视(Kinetic EnergyDiscrimination，KED)的单一碰撞池模式下运行，采用纯氦气作为碰撞气体；使用清洗液冲洗系统。
表1.2 ICP-MS采集参数
其他步骤详见厂商说明书。
进样方式：自动进样，进样及稳定时间30s，清洗时间为30s。
3.数据处理：
使用Qtegra(ISDS)软件(赛默飞世尔科技，美国)在线对数据进行定量评估，以内标铑、铋分别用于校正镉和汞的浓度。将样品名称、待测元素名称、浓度或信号强度(CountsPer Second，CPS)值等导出至excel表格中。
4.数据分析：
暴露水平在总样本75％分位数以上时被认为是高暴露(+)，否则为低暴露(-)。健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比采用卡方检验进行比较。
5.健康对照组、病例组全血样本中汞、镉混合暴露的差异和诊断意义。
经Welch's t-test发现病例组汞和镉暴露水平均高于对照组。卡方检验发现健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比具有显著差异(结果见图1、图2、图3)，病例组高暴露人数与对照组高暴露人数具体比例为镉高暴露2.83:1，汞高暴露：1.34:1，汞、镉均高暴露6.36:1，病例组的高暴露人数多于对照组，孕期汞、镉暴露显著提高了子代儿童肥胖症发病风险。
实施例3用于检测孕期女性全血汞、镉混合暴露导致子代儿童肥胖风险增加辅助诊断的试剂盒制作
首先通过ICP-MS的方法确定病例组全血中具有较高水平的汞、镉浓度，然后通过卡方检验发现健康对照组与病例组中不同暴露水平个体的构成比具有显著差异，病例组的高暴露人数多于对照组，汞、镉高暴露显著增加了子代儿童肥胖症发病率。检测汞、镉混合暴露可以用于子代儿童肥胖症发病风险辅助诊断。此试剂盒包括一批全血中汞、镉检测用试剂和耗材，其中稀释剂用于样品稀释，其中含有稳定且可检测的内标用于实验质量控制，汞和镉标准曲线浓度梯度各一条用于绘制标准曲线进行定量分析，清洗液用于容器清洗和空白对照。此试剂盒的价值在于只需要100μl女性全血，即可同时检测全血中的汞、镉含量，再通过分析结果与参考值的比较用于子代儿童肥胖症预测的辅助诊断标志物，并易于进行动态监测和观察治疗效果。
具体试剂盒组成如下：
试剂A：稀释剂(含0.1％v/v曲拉通+1％v/v硝酸+10μg/L铑+10μg/L铋，其余为去离子水)；
试剂B：汞标准曲线：浓度分别为0、0.1、0.5、1、5、10、50μg/L；
试剂C：镉标准曲线：浓度分别为0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；
试剂D：清洗液：2％v/v硝酸。
主要参考文献
1.沈艳梅,陆大江.儿童肥胖危险因素的研究与干预对策[C]//全国体育科学大会.2007.
2.Kelsey M M,Zaepfel A,Bjornstad P,et al.Age-Related Consequences ofChildhood Obesity[J].Gerontology,2014,60(3):222.
3.Kumar S,Kelly A S.Review of Childhood Obesity:From Epidemiology,Etiology,and Comorbidities to Clinical Assessment and Treatment.[J].MayoClinic Proceedings,2017,92(2):251.
4.Fan Y,Zhang C,Jin B.Relationship between Selected Serum MetallicElements and Obesity in Children and Adolescent in the U.S.[J].Nutrients,2017,9(2):104.
5.Jacobson KB,Turner JE:The interaction of cadmium and certain othermetal ions with proteins and nucleic acids.Toxicology 1980,16(1):1-37.
6.Cook JA,Marconi EA,Di Luzio NR:Lead,cadmium,endotoxin interaction:effect on mortality and hepatic function.Toxicology and applied pharmacology1974,28(2):292-302.
7.《血中镉的石墨炉原子吸收光谱测定方法(WS/T 34-1996)》
8.Ammann AA:Speciation of heavy metals in environmental water by ionchromatography coupled to ICP-MS.Analytical and bioanalytical chemistry 2002,372(3):448-452.
9.Tellez-Plaza M,Guallar E,Howard BV,Umans JG,Francesconi KA,GoesslerW,Silbergeld EK,Devereux RB,Navas-Acien A:Cadmium exposure and incidentcardiovascular disease.Epidemiology(Cambridge,Mass)2013,24(3):421-429.
10.Vigeh M,Yokoyama K,Seyedaghamiri Z,Shinohara A,Matsukawa T,ChibaM,Yunesian M:Blood lead at currently acceptable levels may cause pretermlabour.Occupational and environmental medicine 2011,68(3):231-234.
11.Ciesielski T,Weuve J,Bellinger DC,Schwartz J,Lanphear B,Wright RO:Cadmium exposure and neurodevelopmental outcomes inU.S.children.Environmental health perspectives 2012,120(5):758-763.

Claims (7)

1.与儿童肥胖症相关的暴露生物标志物，该暴露生物标志物为汞和镉的混合暴露。
2.用于检测权利要求1所述暴露生物标志物的方法，其特征在于该方法为采用ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于该方法为采用内标与标准曲线混合的ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于该检测方法的具体步骤及参数为：
a.ICP-MS点火启动后，稳定约半小时；泵入1ppb调谐液，根据Li、In和U的灵敏度，氧化物(CeO)以及双电荷(Ba2+)的水平，对全部质量范围(4～290amu)进行调谐并达到最佳状态。调谐要求达到以下标准：标准模式灵敏度7Li≥4000cps/ppb、115In≥15000cps/ppb；238U≥20000cps/ppb；标准模式双电荷Ba2+/Ba<3.0％；标准模式氧化物156CeO/140Ce<2.0％；优化的操作参数见表1.1；
表1.1 ICP-MS优化的操作参数
b.仪器采集参数见表1.2，仪器在检测样本时在动能歧视(Kinetic EnergyDiscrimination，KED)的单一碰撞池模式下运行，采用纯氦气作为碰撞气体；使用清洗液冲洗系统。
表1.2 ICP-MS采集参数
5.权利要求1所述的暴露生物标志物在制备检测预测儿童肥胖症的辅助诊断试剂盒中的应用。
6.一种用于检测预测儿童肥胖症的辅助诊断试剂盒，其特征在于该试剂盒含有采用ICP-MS检测孕妇全血中的汞和镉的浓度的试剂。
7.根据权利要求6所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于该试剂盒含有下列试剂：
试剂A：稀释剂(含0.1％v/v曲拉通+1％v/v硝酸+10μg/L铑+10μg/L铋，其余为去离子水)；
试剂B：汞标准曲线：浓度分别为0、0.1、0.5、1、5、10、50μg/L；
试剂C：镉标准曲线：浓度分别为0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；
试剂D：清洗液：2％v/v硝酸。
CN201811058122.0A 2018-09-11 2018-09-11 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用 Pending CN109212012A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811058122.0A CN109212012A (zh) 2018-09-11 2018-09-11 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811058122.0A CN109212012A (zh) 2018-09-11 2018-09-11 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109212012A true CN109212012A (zh) 2019-01-15

Family

ID=64987082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811058122.0A Pending CN109212012A (zh) 2018-09-11 2018-09-11 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109212012A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111080066A (zh) * 2019-11-18 2020-04-28 中国辐射防护研究院 一种铀和汞混合污染土壤的环境风险评估方法及系统

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111080066A (zh) * 2019-11-18 2020-04-28 中国辐射防护研究院 一种铀和汞混合污染土壤的环境风险评估方法及系统
CN111080066B (zh) * 2019-11-18 2022-10-18 中国辐射防护研究院 一种铀和汞混合污染土壤的环境风险评估方法及系统

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Woimant et al. New tools for Wilson’s disease diagnosis: Exchangeable copper fraction
Wang et al. Data mining: Seasonal and temperature fluctuations in thyroid-stimulating hormone
CN108603859B (zh) 尿中代谢物在制备癌的评价方法所使用的试剂盒中的用途
Saidi et al. Voltammetric electronic tongue combined with chemometric techniques for direct identification of creatinine level in human urine
Langer et al. Characterization of the elemental composition of newborn blood spots using sector-field inductively coupled plasma-mass spectrometry
CN113156018B (zh) 一种肝胆疾病诊断模型的建立方法及诊断系统
Li et al. Environmental cadmium exposure induces alterations in the urinary metabolic profile of pregnant women
Yu et al. Establishing reference intervals for urine and serum iodine levels: A nationwide multicenter study of a euthyroid Chinese population
WO2020052294A1 (zh) 汞、镉混合暴露检测在非梗阻性无精子症辅助诊断中的应用
CN111279193A (zh) 利用尿代谢组分析诊断白塞氏病的方法
CN106442770B (zh) 与特发性男性不育相关的精浆代谢小分子标志物及其检测方法和应用
CN117388495B (zh) 用于诊断肺癌分期的代谢标志物的应用及试剂盒
Favresse et al. Neutralization of biotin interference: preliminary evaluation of the VeraTest Biotin™, VeraPrep Biotin™ and BioT-Filter®
CN111965240A (zh) 用于甲状腺癌相关筛查及评估的产品、应用及方法
CN109212012A (zh) 孕妇汞、镉混合暴露检测作为儿童期肥胖的辅助诊断标志物及其应用
Cereto et al. Validation of automated blood cell counters for the diagnosis of spontaneous bacterial peritonitis
CN109212013A (zh) 基于icp-ms检测孕妇铅、镉混合暴露作为早产的辅助诊断标志物及其应用
Lapić et al. Haemoglobin A1c-based screening for prediabetes and diabetes mellitus: a multi-center study in Croatian adult population
CN112684020A (zh) 一种用于评价个体锌营养状态的生物标志物及其应用
CN110704810A (zh) 基于icp-ms精液质量的检测方法和应用
CN109212011A (zh) 铅、镉混合暴露检测在无精子症辅助诊断中的应用
da Silva et al. Analytical interference of quinolone antibiotics and quinine derived drugs on urinary protein determined by reagent strips and the pyrogallol red-molybdate protein assay
CN109374722A (zh) 与性激素异常有关的铅、镉混合暴露标志物检测方法及其应用
Fucci et al. Monitoring people at risk of drinking by a rapid urinary ethyl glucuronide test
CN106198815B (zh) 尿液中与特发性男性不育相关的代谢标志物及其检测方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190115