CN109042651A - 苹果渣和苹果叶提取物在植物病原菌防治中的应用 - Google Patents

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路艳珍
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Abstract

本发明涉及苹果渣和苹果叶提取物在植物病原菌防治中的应用。苹果渣和苹果叶提取物含有根皮苷、槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素‑3‑D‑木糖苷、槲皮素‑3‑D‑阿拉伯糖苷的多酚，可用于防治各种粮食作物、经济作物、蔬菜、果树、瓜类等由真菌引起的病害和细菌引起的病害。提取混合物或单个物质配制成生物杀菌制剂具有对环境友好、对人畜安全，能有效防治多种植物病害。

Description

苹果渣和苹果叶提取物在植物病原菌防治中的应用
技术领域
本发明涉及苹果渣和苹果叶提取物杀菌活性提取方法及其在植物病害防治中的应用，属于植物农业保护领域。
背景技术
苹果是蔷薇科（Rosaceae）苹果属（Malus）植物的果实。苹果目前是我国第一大水果，栽培面积和产量位居首位，是我国少有的占据国际市场竞争优势的农产品。苹果主要是以鲜食的方式进行消费，其次是初加工利用，如浓缩苹果汁、苹果酒、果酱等。在这些加工过程中，会产生大量的苹果渣副产物，每年约有几百万吨，但其被有效利用的几率很低，少量会被用作提取果胶和当作饲料、肥料、燃料，其他大部分都直接被当作垃圾处理，造成资源的巨大损失和浪费，同时由于丢弃的苹果渣中含有大量的水分，如果不能及时处理，很容易滋生大量微生物，进而腐烂、变酸、变臭，对环境造成严重的污染，严重影响了苹果加工业的可持续发展。在苹果生产过程中，每年有大量的苹果叶也没有利用。目前，国内外对苹果渣的研究主要集中于生产蛋白饲料、提取果胶、制备酒精、提取苹果多酚、生产酶制剂、制备膳食纤维等。其中苹果多酚主要来自于酪氨酸和苯丙氨酸的植物次生代谢产物，与病原体侵害和植物防御紫外线辐射等功能密切相关。而且相关研究表明，苹果渣中的多酚类物质的含量远高于苹果汁、苹果酒等中的多酚类物质含量。不同的植物中有不同的特征酚，具有抗氧化、抗菌消炎、抗病毒、抗过敏、护肝、保护心血管、抗癌、抗糖尿病和神经保护效应等生物活性。但目前还没有报到利用苹果渣提取物来防治植物病害的报道。
发明内容
发明从苹果渣和苹果叶提取根皮苷、槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素-3-D-木糖苷、槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的多酚类化合物，并进行了仿生合成。通过大量室内外试验发现这些化合物对多种植物病害具有明显的预防和治疗作用。
本发明从苹果渣和苹果叶乙醇或乙酸乙酯提取中含有：根皮苷、槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素-3-D-木糖苷、槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷多酚等化合物，具有显著的抗菌活性，对真菌性和细菌性植物病害都具有很好的防治效果。
本发明得到具有显著的抗菌活的根皮苷、槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素-3-D-木糖苷、槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷多酚化合物，它们是植物的次生代谢产物，可以来自苹果植物，也可以来自其它植物和人工合成物，但本发明的内容并不局限于此。
在制造以本发明所述的多酚化合物为有效成分的抗菌药物时，可使用该技术领域中已知的农药通用的固相、液相及乳化、分散剂等各种载体和各种剂型。如可湿性粉剂、乳油、微乳剂、水剂、悬浮剂等。可以单独使用其中的一种物质，也可以多种（含两种）混用。
本发明的药物具有的优点在于，以天然多酚为有效成份的药剂是植物在生长发育过程中产生的次生代谢产物，是中医药的临床常用饮片，是一种新型的抗真菌侵染药剂，具有低毒、低残留与环境相容等特点，属于新型的生物农药。为了更好地理解本发明，下面结合本发明的实施例，进一步来说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。
具体实施方式
实施例1：苹果渣乙醇提取物对番茄灰霉病和溃疡病防治作用
以番茄灰霉病、溃疡病为对象，采用盆栽人工接种技术，评价苹果渣乙醇提取物对2种病害的防治效果。供试作物：番茄。供试的病原菌：番茄灰霉病（Botrytis cinerea），番茄溃疡病（Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis）。
实验设计：苹果渣乙醇提取物浓度为稀释200倍，防治番茄灰霉病对照药剂为50%腐霉利可湿性粉剂，防治溃疡病对照药剂为5亿芽孢/克荧光假单孢杆菌可湿性粉剂，1个清水对照（只接菌），1个空白对照。每个处理4次重复，每次重复10株苗。
试验方法：采用喷雾法施药，喷雾处理后，人工接种病原菌。接种后，前两天置于温室高湿管理，之后正常管理。
调查：待清水对照充分发病后，进行病情指数和防治效果调查。
病情指数=[（病级数值*该病级株树）]/（病级最高值*调查株数）*100
防效（%）=（对照病情指数-处理病情指数）/ 对照病情指数×100
防病效果：苹果渣乙醇提取物对番茄灰霉病和溃疡病均有很好的防治效果，其防效分别为76%和65%，而对照药剂对这两种病害的防效分别为68%和40%。
实施例2：苹果渣乙醇提取物对不同病原菌离体活性
采用含药PDA培养基抑菌圈测定法（25℃，暗培养条件），对六种植物病原真菌禾谷镰刀菌、立枯丝核菌、稻瘟菌、胶孢炭疽菌、番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌抑制作用进行测试。测试结果如下。
实施例3：本发明的单体化合物对灰霉病菌的室内抑制作用
供试菌种：灰霉病菌Botrytis cinerea
实验方法：供试菌在PDA（马铃薯葡萄糖琼胶培养基）上活化72h。将分离提取得到的多酚化合物采用2倍浓度稀释法配成62.5µg/ml～2000µg/ml浓度稀释液，然后按药液与PDA培养基1：9混合均匀（v/v）后即成6.25µg/ml～200µg/ml的含药培养基，每处理倒制成4个平板（直径9cm），待冷却后在平板中央接入6mm菌饼，置25±1℃下培养，待空白对照菌饼长到平板边缘时用游标卡尺十字交叉法测定各处理菌落直径，计算各处理抑菌率。抑菌率%=空白菌落直径-处理菌落直径/（空白菌落直径-菌饼直径）×100，并计算EC50值。实验结果如下。
实施例4：苹果渣提取物成分分析
采用高效液相色谱法分析苹果渣乙醇提取物或乙酸乙酯提取物。液相色谱分析条件为，色谱柱：Apollo C18（150×4.6 mm I.D.，5 μm）；流动相：甲醇-0.1%（v/v）甲酸水；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样体积：10 μL；检测波长：254 nm；梯度条件：0-10 min，40%-45%甲醇；10-35 min，45%-46%甲醇；35-50 min，46%-100%。谱图参见图1。
实施例5：5%可湿性粉剂
将5份提取的混合物或任一化合物与10份WPA-9503复配助剂，85份硅藻土混合，粉碎即得5%可湿性粉剂。
实施例6：5%水剂
将5份提取的混合物与25份乙醇，20份656H复配助剂，加余量水即得5%水剂。
附图说明
图1是苹果渣提取物液相色谱图。

Claims (4)

1.苹果渣和苹果叶提取物在植物病原菌防治中的应用。
2.权利1中所述的苹果渣和苹果叶提取物含有根皮苷、槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素-3-D-木糖苷、槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的多酚。
3.权利1中所述的苹果渣和苹果叶提取物，可用于防治各种粮食作物、经济作物、蔬菜、果树、瓜类等由真菌引起的病害如：单丝壳属Sphaerotheca、白粉属Erysiphe、布氏白粉属Blumeria、镰孢属Fusarium、核盘菌属Sclerotinia、梨孢属Pyricularia、丝核菌属Rhizoctonia、炭疽菌属Colletotrichum、葡萄孢属Botrytis、轮枝孢属Verticillium真菌引起的病害和棒形杆菌属Clavibacter细菌引起的病害。
4.权利1中所述的苹果渣提取物加上农业上可接受的载体、表面活性剂等助剂可制成可湿性粉剂、乳油、微乳剂、水剂、悬浮剂等剂型。
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