CN109042515A - 提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于动物繁殖技术领域,具体涉及一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向母山羊注射或者饲喂N‑乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,每只母山羊每天N‑乙酰半胱氨酸的摄入量为50~200mg,叶酸的摄入量为150~250mg,柠檬酸的摄入量50~100mg。本发明的方法通过向母山羊注射或者饲喂N‑乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物来提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数。

Description

提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法
技术领域
本发明属于动物繁殖技术领域,具体涉及一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法。
背景技术
山羊是一种重要的经济动物,生产肉、绒、奶等经济产品,特别是山羊奶具有巨大的市场潜力,山羊的大规模养殖已是迫切需要的问题。
克隆胚胎和超数排卵是改良山羊品种,提高山羊胚胎成活率和胚胎数量重要手段。其中克隆胚胎属于克隆的一种方法,最常用的就是体细胞克隆技术,其在生物、医学领域具有许多成功案例,对于研究动物胚胎发育、研究胚胎繁殖发育机理具有重要的作用。超数排卵是应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育,排出比自然条件下多几倍甚至十几倍并具有受精能力的卵子,增加受精卵的数量,该手段的目的是使优良山羊品种在有效年限内尽可能的繁殖后代,快速繁殖,提高优良品种山羊的数量。
尽管超数排卵的技术已经较为成熟,但是随着排卵数量的增加直接导致的只是受精几率和受精卵数量的增加。山羊胚胎的数量和窝产仔数量不仅与受精卵数量有关,与胚胎的发育和存活率也息息相关。通过超排卵的方式增加卵子的数量只是增加胚胎数量和窝产仔数量的必要途径,并非百分百成功途径。
中国专利CN107333704A公开了一种提高母畜体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其通过给母畜注射或者饲喂N-乙酰半胱氨酸的方法提高了母畜体内早期胚胎附植数量和窝产仔数量。该方法对ICR雌性小鼠和母猪均具有有效作用。对小鼠在其胚胎附植能力可提高19.4%,对母猪的窝产仔数量可提高6.95%。我们利用饲喂N-乙酰半胱氨酸的方式对山羊进行了实验,发现其对山羊窝产仔数量仅可提高3%左右,效果不明显。因此,有必要开发一种可提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数量的方法。
发明内容
本发明提供的一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,可提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数量。
本发明提供的一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,包括以下步骤:向母山羊注射或者饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为50~200mg,叶酸的摄入量为150~250mg,柠檬酸的摄入量50~100mg。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于5mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后皮下注射或者肌肉注射。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,在母山羊交配前7~10天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至胚胎附植或者分娩结束。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行交配。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,所述超数排卵处理方式如下:在交配前4~5天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800~900国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素500~600国际单位。
优选的,上述提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,所述交配的方式为人工授精或者自然交配。
与现有技术相比,本发明提供的一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,具有以下有益效果:
(1)本发明的方法通过向母山羊注射或者饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物来提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数。
对于自然排卵交配,通过统计母山羊同时摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸,母山羊窝产仔数量比单出基础日粮饲养的对照组高出6.7%~10.1%;对于超数排卵处理交配,通过统计母山羊同时摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸,母山羊窝产仔数量比单出基础日粮饲养的对照组高出9.9%~16.8%。
对于超数排卵处理交配,通过统计8周龄ICR小鼠胚胎附植位点数量为26.3,比对照组1提高了24.6%。
(2)我们还进行了实验组1~3与实施例3的对比实验,验证了叶酸和柠檬酸均对提高山羊窝产仔数的提高具有重要作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明,但不应理解为本发明的限制。下列实施例中未注明具体条件的试验方法,通常按照常规条件操作,所用试剂均为市售,由于不涉及发明点,故不对其步骤进行详细描述。
除非另外定义,本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外,根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载,还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
本发明提供的一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向母山羊注射或者饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。具体包括以下实施例。
实施例1
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊注射N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为50mg,叶酸的摄入量为150mg,柠檬酸的摄入量50mg。
采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于5mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后皮下注射。
在母山羊自然交配前7天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至胚胎附植。
取10只母山羊统计平均值,实验组3统计的母山羊窝产仔数量9.5只,比对照组3高出6.7%。
实施例2
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊注射N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为180mg,叶酸的摄入量为200mg,柠檬酸的摄入量60mg。
采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于5mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后肌肉注射。
在母山羊自然交配前10天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至分娩结束。
取10只母山羊统计平均值,实施例2统计的母山羊窝产仔数量9.8只,比对照组3高出10.1%。
实施例3
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为100mg,叶酸的摄入量为175mg,柠檬酸的摄入量80mg。
采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于5mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后皮下注射。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素600国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实验组3统计的母山羊窝产仔数量11.8只,比对照组2高出16.8%。取2只统计子宫内胚胎附植位点数量为14.1,比对照组2高出15.6%。
实施例4
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为200mg,叶酸的摄入量为250mg,柠檬酸的摄入量100mg。
采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行人工授精。
超数排卵处理方式如下:在交配前5天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素900国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素500国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实施例4统计的母山羊窝产仔数量11.3只,比对照组高出11.9%。
实施例5
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊注射N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为200mg,叶酸的摄入量为200mg,柠檬酸的摄入量50mg。
采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实施例4统计的母山羊窝产仔数量11.1只,比对照组高出9.9%。
实验组1
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊饲喂N-乙酰半胱氨酸和叶酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为100mg,叶酸的摄入量为175mg。
采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸和叶酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸和叶酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素600国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实验组1统计的母山羊窝产仔数量10.8只比对照组高出6.9%。
实验组2
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊饲喂N-乙酰半胱氨酸和柠檬酸的混合物。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为100mg,柠檬酸的摄入量为80mg。
采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、柠檬酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸和柠檬酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素600国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实验组2统计的母山羊窝产仔数量10.7只,比对照组高出5.9%。
实验组3
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊饲喂N-乙酰半胱氨酸。每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为100mg。
采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
在母山羊交配前8天起摄入N-乙酰半胱氨酸和叶酸的混合物,直至分娩结束。在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素600国际单位。
取10只母山羊统计平均值,实验组3统计的母山羊窝产仔数量10.4只,比对照组高出3.0%。取2只统计子宫内胚胎附植位点数量为13.1,比对照组2高出7.3%。
实验组4
一种提高8周龄ICR小鼠体(广东省医学实验动物中心)内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向雌鼠注射N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。每只雌鼠每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为12.5mg,叶酸的摄入量为23mg,柠檬酸的摄入量10mg。
采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于2mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后腹腔注射。连续注射14天;并在第6天注射孕马血清促性腺激素5国际单位;第7天注射绒毛促性腺激素5国际单位;第8天时将雌性小鼠与雄性小鼠同笼交配,第15天时静脉注射质量分数1%的芝加哥蓝,脱颈处死小鼠,剥离子宫,统计子宫内胚胎附植位点。取10只雌鼠统计平均值,统计结果显示,胚胎附植位点数量为26.3。
对照组1
将注射的“N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于2mL的质量分数8.5%的生理盐水”改为直接注射“2mL的质量分数8.5%的生理盐水”,其余操作同实验组4。统计结果显示,胚胎附植位点数量仅为21.1。
对照组2
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊只饲喂基础日粮。
在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行自然交配。
超数排卵处理方式如下:在交配前4天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素600国际单位。
取10只母山羊统计平均值,对照组2统计的母山羊窝产仔数量10.1只。取2只统计子宫内胚胎附植位点数量为12.2。
对照组3
一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,向山羊只饲喂基础日粮。进行自然交配。
取10只母山羊统计平均值,对照组2统计的母山羊窝产仔数量8.9只。取2只统计子宫内胚胎附植位点数量为10.1。
需要说明的是,上述实施例1~5中,N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的摄入量对体重在35~45kg体重的母山羊适用,如果母山羊体重小于35kg,则摄入量减少至0.8倍,如果母山羊体重大于45kg,则摄入量提高至1.5倍。上述实施例中采用的N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸均为市售。孕马血清促性腺激素和绒毛促性腺激素均购买自郑州市惠济区联想兽药经营部。
需要说明的是,当本发明给出数值范围时,应理解,除非本发明另有说明,每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。尽管已描述了本发明的优选实施例,但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以,所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (8)

1.一种提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,向母山羊注射或者饲喂N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物。
2.根据权利要求1所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,每只母山羊每天N-乙酰半胱氨酸的摄入量为50~200mg,叶酸的摄入量为150~250mg,柠檬酸的摄入量50~100mg。
3.根据权利要求2所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,采用注射方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于5mL的质量分数8.5%的生理盐水中,然后皮下注射或者肌肉注射。
4.根据权利要求2所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,采用饲喂方式时,将N-乙酰半胱氨酸、叶酸、柠檬酸混合后溶于500mL水中,得到的混合液拌入基础日粮中。
5.根据权利要求1或2所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,在母山羊交配前7~10天起摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物,直至胚胎附植或者分娩结束。
6.根据权利要求5所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,在母山羊摄入N-乙酰半胱氨酸、叶酸和柠檬酸的混合物期间先皮下注射促性腺激素进行超数排卵处理,然后再进行交配。
7.根据权利要求6所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,所述超数排卵处理方式如下:在交配前4~5天至交配日前一天,每天给母山羊皮下注射孕马血清促性腺激素800~900国际单位;交配日当天给母山羊皮下注射日绒毛促性腺激素500~600国际单位。
8.根据权利要求7所述的提高山羊体内早期胚胎附植数量和窝产仔数的方法,其特征在于,所述交配的方式为人工授精或者自然交配。
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