CN108949803A - Gso1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用 - Google Patents

Gso1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用 Download PDF

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CN108949803A
CN108949803A CN201710363767.4A CN201710363767A CN108949803A CN 108949803 A CN108949803 A CN 108949803A CN 201710363767 A CN201710363767 A CN 201710363767A CN 108949803 A CN108949803 A CN 108949803A
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protein
sequence
leu
dna molecular
amino acid
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CN201710363767.4A
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杨永青
陈昶曦
郭岩
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China Agricultural University
Original Assignee
China Agricultural University
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8273Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for drought, cold, salt resistance
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants

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Abstract

本发明公开了GSO1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用。本发明提供了GSO1蛋白或其编码基因或含有其编码基因的重组载体在调控植物耐逆性中的应用。本发明的实验证明,将GSO1基因互补到gso1突变体中得到的转基因植物,该转基因植物的表型与未突变前的野生型拟南芥无显著差异,从而证明,GSO1基因可以提高植物对高盐的耐逆性。

Description

GSO1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及GSO1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用。
背景技术
土壤盐碱化趋势在世界范围内不断扩展,严重限制了农作物的生长,已经成为制约农业生产的重要因素。盐碱胁迫对植物造成的危害在于盐碱化土壤中高浓度的Na+和过高的pH。随着植物细胞内盐离子的积累,将对细胞产生离子毒害效应,从而在多方面影响细胞发挥正常功能。在碱土环境中,除碱金属元素外的大部分金属元素都会形成不溶性盐,Na+作为自然界中含量最高的碱金属元素,则会富集在碱土中造成土壤的盐化。
随着分子生物学、基因组学、正反向遗传学、生态学和生物化学等学科研究的持续深入发展,人们发现植物同动物一样,也具有视、听、触、呼吸等功能,而类受体激酶就在植物感受和转导信号的过程中起到了很重要的作用。虽然现在已发现了600多种类受体激酶,但是大多数的类受体激酶上游的信号分子和下游互作蛋白尚不明确。盐胁迫能作为渗透胁迫和离子胁迫被植物感知,而且盐胁迫下过多的钠离子和氯离子能诱导蛋白构象的改变和膜的去极化,从而导致了离子毒害的感知。然而,人们对钠离子是如何被感知的了解甚少。
发明内容
本发明一个目的是提供如下1)-3)中任一种物质的用途。
本发明提供的1)-3)中任一种物质在调控植物抗逆性中的应用:
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
本发明还提供如下1)-3)中任一种物质在培育抗逆性提高的植物中的应用:
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
上述应用中,
所述编码蛋白GSO1的DNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)序列表中序列1所示的DNA分子;
2)序列表中序列3所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所限定的DNA分子杂交且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子;
4)与1)或2)所限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子。
上述严格条件可为在6×SSC、0.5%SDS的溶液中,在65℃下杂交,然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。
上述应用中,所述调控植物抗逆性为提高植物抗逆性。
上述应用中,所述抗逆性为抗盐性。
上述应用中,所述植物为单子叶植物或双子叶植物;
所述双子叶植物具体为豆科植物或十字花科植物。
本发明另一个目的是提供一种培育抗逆性提高的转基因植物的方法。
本发明提供的方法,为将编码蛋白GSO1的DNA分子导入目的植物中,得到转基因植物;所述转基因植物抗逆性高于所述目的植物;
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
上述方法中,所述抗逆性为抗盐性;
所述编码蛋白GSO1的DNA分子通过重组载体导入所述目的植物中;
所述编码蛋白GSO1的DNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)序列表中序列1所示的DNA分子;
2)序列表中序列3所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所限定的DNA分子杂交且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子;
4)与1)或2)所限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子。
上述方法中,所述植物为单子叶植物或双子叶植物;
所述双子叶植物具体为豆科植物或十字花科植物。
本发明第三个目的是提供一种重组载体。
本发明提供的重组载体,为将编码蛋白GSO1的DNA分子插入表达载体中,得到表达蛋白GSO1的重组载体;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
上述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。
本发明的实验证明,将GSO1基因互补到gso1突变体中得到的转基因植物,该转基因植物的表型与未突变前的野生型拟南芥无显著差异,从而证明,GSO1基因可以提高植物对高盐的耐逆性。
附图说明
图1为Col-0野生型拟南芥和gso1突变体在不同盐浓度下的表型。
图2为gso1突变体和互补后的转基因植物在不同盐浓度下的表型分析。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
下述实施例中,除特殊说明外,定量试验均设5个以上的重复实验。
实施例1、GSO1基因在提高植物耐盐性中的应用
一、GSO1基因提高植物耐盐性
1、抗逆相关类受体激酶T-DNA插入突变体筛选
通过对一部分购买于ABRC(Ohio State University)的拟南芥类受体激酶T-DNA插入突变体,并对其进行筛选。
以野生型Col-0(购买于ABRC)为对照,用盐浓度为75mM NaCl的MS筛选对盐敏感的植株,获得突变体Salk_103965(购买于ABRC)Salk_103965是T-DNA插入到拟南芥At4g20140基因(GSO1基因)造成的突变,将其命名为gso1-1,该突变体与野生型Col-0相比,仅GSO1基因发生突变,其余基因不变。
从ABRC购买At4g20140的另外一个T-DNA突变体Salk_064029,命名为gso1-2,该突变体与野生型Col-0相比,仅GSO1基因发生突变,其余基因不变。
GSO1基因的核苷酸序列为序列1,其cDNA序列为序列3,其编码的蛋白的氨基酸序列为序列2。
2、GSO1基因在植物耐盐性中的应用
将生长在普通MS培养基上6天的野生型拟南芥(Col-0)和gso1突变体gso1-1分别转移到盐浓度为0mM、75mM、100mM NaCl的MS培养基上,光箱中培养10天后观察表型。
结果如图1A-图1C所示,在盐浓度为0mM的条件下,gso1突变体(gso1-1)和野生型拟南芥Col-0无显著差异,在盐浓度为75mM和100mM的条件下的MS培养基上,gso1表现出比野生型拟南芥更高的敏感性,gso1出现叶片发黄卷缩、根部偏短的表型。
上述结果表明,GSO1基因能提高植物对盐的耐逆性。
二、互补实验证明GSO1基因提高植物耐盐性
1、转GSO1互补拟南芥的获得及鉴定
人工合成序列表中序列1所示的GSO1基因,将其插入pCAMBIA1300载体(CambiaVZC0323)的KpnI和SalI酶切位点间,得到重组质粒pCAMBIA1300-GSO1。
将重组质粒pCAMBIA1300-GSO1通过农杆菌GV3101介导的gso1-1和gso1-2突变体的花,转化按照文献(Harry Klee,Robert Horsch,Stephen Rogers,张毅,农杆菌介导的植物转化及其将来在植物生物学中的应用,生物工程进展,1988年05期)中的方法,利用潮霉素筛选获得T0代转GSO1拟南芥,培养,得到T3代转GSO1互补拟南芥,记作T3代转GSO1互补拟南芥com-1和com-2。
提取野生型Col-0、gso1-1、gso1-2以及T3代转GSO1互补拟南芥com-1和com-2总RNA,分别用引物对TCCATTATGTGGTTCGAGCTC(正向引物)和CTTGTAAACCTTCCCAGAGCC(反向引物)进行半定量PCR,内参为ACTIN,ACTIN的引物为GCTGGATTTGCAGGAGATGATG和CGTAGTCAACAGCAACAAAGGAGAG。
结果如图2A所示,gso1-1和gso1-2中无GSO1基因的表达,com-1和com-2中可以检测到GSO1基因的表达(得到1195bpde PCR产物),说明gso1-1和gso1-2是GSO1基因的缺失突变体,并且互补植株中成功转入了GSO1基因。
采用同样的方法将空载体pCAMBIA1300导入gso1-1和gso1-2突变体的花中,得到T3代转pCAMBIA1300互补拟南芥com-3和com-4,经过上述RT-PCR鉴定,没有目的片段GSO1基因的表达。
2、转GSO1互补拟南芥表型
1)表型鉴定
将gso1突变体(gso1-1和gso1-2)、野生型拟南芥Col-0(Col-0)和T3代转GSO1互补拟南芥(com-1和com-2)在普通MS培养基上生长6天后分别转移到不同盐浓度(盐浓度为0mM和100mM)的MS培养基上,光箱中培养10天后观察表型。以com-3和com-4为对照。
结果如图2B所示,gso1突变体gso1-1和gso1-2均表现出对盐的敏感性,而T3代转GSO1互补拟南芥(com-1和com-2)的生长状态明显好于gso1突变体,说明GSO1基因可以提高拟南芥对盐的耐逆性。
com-3和com-4结果与gso1-1和gso1-2无显著差异。
2)鲜重及叶绿体含量检测
将gso1突变体(gso1-1和gso1-2)、野生型拟南芥Col-0(Col-0)和T3代转GSO1互补拟南芥(com-1和com-2)在普通MS培养基上生长6天后分别转移到不同盐浓度(盐浓度为0mM和100mM)的MS培养基上,光箱中培养10天后,检测gso1突变体(gso1-1、gso1-2)、野生型拟南芥Col-0(Col-0)和T3代转GSO1互补拟南芥(com-1和com-2)在不同盐浓度处理下的主根长度、鲜重和叶绿素含量。每个株系10株。
主根长度结果如图2C所示、鲜重结果如图2D所示、叶绿素含量如图2E所示,可以看出,将GSO1转回到gso1突变体得到的T3代转GSO1互补拟南芥(com-1和com-2),表型与野生型拟南芥Col-0无显著差异,结果表明转GSO1基因的植株完全能够互补gso1突变体的碱敏感的表型,GSO1基因或其编码的蛋白GSO1可以提高拟南芥对高盐的耐逆性。
序列表
<110> 中国农业大学
<120> GSO1蛋白或其编码基因在调控植物耐盐中的应用
<160>3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 3826
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223>
<400> 1
atgcaaccac tagttcttct cctcctcttc atcctctgtt tttccggttt aggtcaaccg 60
ggtatcatca acaacgatct tcagactctt ctcgaggtga agaaatcttt ggtcacgaat 120
ccacaagaag acgatcctct ccgacaatgg aactctgata acatcaacta ctgttcttgg 180
accggagtca catgcgacaa taccggttta tttcgtgtaa ttgctctaaa ccttaccggt 240
ttaggattaa ccggttcaat ttcaccttgg tttggccggt ttgacaacct aatccacctt 300
gatctatctt ccaacaatct agttggtccc atcccaactg ctctctccaa ccttacttcc 360
ttggagtctc tgtttctctt ttctaaccaa ctcaccggcg agattccgag ccagctcggc 420
tccctcgtta atatccggtc gctaaggatc ggagacaatg agcttgttgg agatatcccg 480
gagacgttag ggaacttggt gaatctccag atgcttgctc tggcttcttg tagactcacc 540
ggtcctatac cgagtcagct cggtcgtctc gtccgagttc agtcgttgat attgcaagat 600
aactatctcg aaggaccgat tccggctgag ttaggaaact gctctgatct cactgtgttc 660
actgcggcgg agaacatgct caacgggacg ataccggcgg agcttggacg ccttgaaaac 720
ctcgaaatac tcaacctggc gaacaacagt ctcaccggag agataccgag tcaattaggt 780
gaaatgagcc aactccagta tcttagcttg atggcaaatc aacttcaagg tcttatcccc 840
aagagtttgg ctgatctggg aaatcttcaa actcttgatt tatcggcgaa taatcttacc 900
ggagagatac ctgaagaatt ctggaacatg agtcagcttc ttgatttggt tctagcaaac 960
aatcatctct ctggttcatt accaaagagc atttgttcta acaacacaaa cttggagcaa 1020
ctggttttgt ctggaactca gctttctggt gaaatccctg tggaattaag caaatgtcaa 1080
tcgcttaagc agcttgattt gtcgaacaat tctctcgctg gctcgatccc tgaagcattg 1140
tttgagctag tcgaactcac agatctttat ctccacaata ataccttgga gggtacgtta 1200
tctccttcga tatcaaacct cactaatcta cagtggcttg tgttgtatca caataacttg 1260
gaaggcaagt taccgaagga gatcagcgca ctcagaaaat tagaggttct gtttctgtat 1320
gagaatcgtt tctcagggga aatcccacag gagattggaa actgcacaag cttgaagatg 1380
attgatatgt tcgggaatca tttcgaagga gagatacctc cttcaatagg aagattaaaa 1440
gagcttaact tgcttcactt gagacagaac gagcttgtgg gtggacttcc cgccagttta 1500
ggtaactgtc atcaactgaa catcttggat ttggcggata atcagctctc gggatcaatt 1560
ccttcatcct tcgggttctt aaagggcttg gaacagttga tgctttacaa caattctctt 1620
caaggaaatc ttcctgattc acttatcagt ctgaggaacc tcaccagaat caatctctct 1680
cacaacaggc tcaatggtac gattcatcca ttatgtggtt cgagctcata tctctcattc 1740
gatgtcacca acaacgggtt tgaagatgaa atccccctgg agctaggaaa ctctcaaaat 1800
cttgatcgtc tcaggttagg caagaatcaa ttgacaggaa aaatcccttg gacgttgggg 1860
aaaatccgcg agctgtcctt gttagatatg tcaagcaacg ctctcacagg aaccattccg 1920
ctacagctcg tcttgtgcaa gaaactgaca cacatcgatc tcaataacaa ttttctatca 1980
ggtcctatac ctccatggct tggaaaactt tcacagttag gagagctcaa gctttcttcg 2040
aatcagtttg ttgagtcttt acctactgaa ctgttcaact gtacaaagct gcttgtgttg 2100
tctcttgatg gaaattcgct taatgggtcg attccacaag agattggtaa cttgggagct 2160
ctcaatgtcc ttaaccttga taagaaccag ttttcaggtt cacttcctca agctatggga 2220
aagctcagca agctgtatga gcttcggtta tcaagaaaca gcttaacagg agaaatccca 2280
gttgagattg gacagcttca ggatcttcaa agtgctttag acctcagcta caataacttc 2340
actggagata taccttcgac aattgggaca ttatcaaagc tggaaacact tgatctttct 2400
cacaatcagc ttacagggga agttcctggc tcggttgggg atatgaagag tttgggatat 2460
ctcaatgttt ctttcaataa cctcggaggg aagctcaaga aacagttctc aagatggcca 2520
gctgattcct ttttaggcaa cacaggtctt tgtggaagcc cactaagtcg ctgcaacaga 2580
gttagaagta ataacaagca acaaggtctt agtgccagat cagttgtgat aatatcagca 2640
atctcagcat tgacggcgat tggcttgatg atacttgtaa tcgctctctt cttcaaacaa 2700
aggcatgatt tcttcaagaa agtgggtcat ggaagcactg cgtacacatc gtcaagctct 2760
tcttcacaag ctacacacaa gcctctcttt cgaaacggag cttcaaagtc cgatatcagg 2820
tgggaggaca tcatggaagc tacacataat ctaagcgagg agttcatgat tggatcagga 2880
ggctctggga aggtttacaa ggcggagctt gaaaatggtg agactgttgc agtgaaaaag 2940
attctctgga aggatgatct catgtcaaac aagagcttca gcagagaagt taagacgctt 3000
ggaagaatca ggcataggca tctggttaag ctaatgggtt actgcagcag caagtcagaa 3060
ggattgaatc tgttgatata tgagtacatg aagaacggaa gcatctggga ttggcttcat 3120
gaggacaaac ccgtgctcga aaaaaagaag aagcttttag actgggaagc aagattgaga 3180
atagcagtag gattggctca aggagtagag taccttcatc atgactgtgt tcctcctatc 3240
gttcaccgtg atatcaaatc cagtaatgtg ctcctcgatt caaacatgga agcgcattta 3300
ggagatttcg gtcttgccaa ggtcttaact gagaactgtg ataccaacac agattcaaat 3360
acctggtttg catgctctta tggctacatt gctccaggta ctcatcttct ctttcttagc 3420
tttcttgcat attcactgtt ttaatatcta aagatttgaa attgtgtgtc tagagtatgc 3480
ttactcgttg aaggcgactg agaagagcga cgtttacagt atggggatcg tgttgatgga 3540
gattgtgact gggaaaatgc caaccgactc agtgtttggt gcagagatgg acatggtgag 3600
atgggttgaa acacatcttg aagtagcggg ttctgcgaga gataaactca tagatccaaa 3660
gcttaagcca cttctgccat ttgaggaaga cgcagcttgt caggtgcttg agattgcact 3720
tcagtgcaca aaaacttctc cccaagagag accatcttct aggcaagctt gtgatagtct 3780
tctccatgtc tacaacaaca gaacggccgg ttataagaag ctgtaa 3826
<210> 2
<211> 1246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223>
<400> 2
Met Gln Pro Leu Val Leu Leu Leu Leu Phe Ile Leu Cys Phe Ser Gly
1 5 10 15
Leu Gly Gln Pro Gly Ile Ile Asn Asn Asp Leu Gln Thr Leu Leu Glu
20 25 30
Val Lys Lys Ser Leu Val Thr Asn Pro Gln Glu Asp Asp Pro Leu Arg
35 40 45
Gln Trp Asn Ser Asp Asn Ile Asn Tyr Cys Ser Trp Thr Gly Val Thr
50 55 60
Cys Asp Asn Thr Gly Leu Phe Arg Val Ile Ala Leu Asn Leu Thr Gly
65 70 75 80
Leu Gly Leu Thr Gly Ser Ile Ser Pro Trp Phe Gly Arg Phe Asp Asn
85 90 95
Leu Ile His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Asn Leu Val Gly Pro Ile Pro
100 105 110
Thr Ala Leu Ser Asn Leu Thr Ser Leu Glu Ser Leu Phe Leu Phe Ser
115 120 125
Asn Gln Leu Thr Gly Glu Ile Pro Ser Gln Leu Gly Ser Leu Val Asn
130 135 140
Ile Arg Ser Leu Arg Ile Gly Asp Asn Glu Leu Val Gly Asp Ile Pro
145 150 155 160
Glu Thr Leu Gly Asn Leu Val Asn Leu Gln Met Leu Ala Leu Ala Ser
165 170 175
Cys Arg Leu Thr Gly Pro Ile Pro Ser Gln Leu Gly Arg Leu Val Arg
180 185 190
Val Gln Ser Leu Ile Leu Gln Asp Asn Tyr Leu Glu Gly Pro Ile Pro
195 200 205
Ala Glu Leu Gly Asn Cys Ser Asp Leu Thr Val Phe Thr Ala Ala Glu
210 215 220
Asn Met Leu Asn Gly Thr Ile Pro Ala Glu Leu Gly Arg Leu Glu Asn
225 230 235 240
Leu Glu Ile Leu Asn Leu Ala Asn Asn Ser Leu Thr Gly Glu Ile Pro
245 250 255
Ser Gln Leu Gly Glu Met Ser Gln Leu Gln Tyr Leu Ser Leu Met Ala
260 265 270
Asn Gln Leu Gln Gly Leu Ile Pro Lys Ser Leu Ala Asp Leu Gly Asn
275 280 285
Leu Gln Thr Leu Asp Leu Ser Ala Asn Asn Leu Thr Gly Glu Ile Pro
290 295 300
Glu Glu Phe Trp Asn Met Ser Gln Leu Leu Asp Leu Val Leu Ala Asn
305 310 315 320
Asn His Leu Ser Gly Ser Leu Pro Lys Ser Ile Cys Ser Asn Asn Thr
325 330 335
Asn Leu Glu Gln Leu Val Leu Ser Gly Thr Gln Leu Ser Gly Glu Ile
340 345 350
Pro Val Glu Leu Ser Lys Cys Gln Ser Leu Lys Gln Leu Asp Leu Ser
355 360 365
Asn Asn Ser Leu Ala Gly Ser Ile Pro Glu Ala Leu Phe Glu Leu Val
370 375 380
Glu Leu Thr Asp Leu Tyr Leu His Asn Asn Thr Leu Glu Gly Thr Leu
385 390 395 400
Ser Pro Ser Ile Ser Asn Leu Thr Asn Leu Gln Trp Leu Val Leu Tyr
405 410 415
His Asn Asn Leu Glu Gly Lys Leu Pro Lys Glu Ile Ser Ala Leu Arg
420 425 430
Lys Leu Glu Val Leu Phe Leu Tyr Glu Asn Arg Phe Ser Gly Glu Ile
435 440 445
Pro Gln Glu Ile Gly Asn Cys Thr Ser Leu Lys Met Ile Asp Met Phe
450 455 460
Gly Asn His Phe Glu Gly Glu Ile Pro Pro Ser Ile Gly Arg Leu Lys
465 470 475 480
Glu Leu Asn Leu Leu His Leu Arg Gln Asn Glu Leu Val Gly Gly Leu
485 490 495
Pro Ala Ser Leu Gly Asn Cys His Gln Leu Asn Ile Leu Asp Leu Ala
500 505 510
Asp Asn Gln Leu Ser Gly Ser Ile Pro Ser Ser Phe Gly Phe Leu Lys
515 520 525
Gly Leu Glu Gln Leu Met Leu Tyr Asn Asn Ser Leu Gln Gly Asn Leu
530 535 540
Pro Asp Ser Leu Ile Ser Leu Arg Asn Leu Thr Arg Ile Asn Leu Ser
545 550 555 560
His Asn Arg Leu Asn Gly Thr Ile His Pro Leu Cys Gly Ser Ser Ser
565 570 575
Tyr Leu Ser Phe Asp Val Thr Asn Asn Gly Phe Glu Asp Glu Ile Pro
580 585 590
Leu Glu Leu Gly Asn Ser Gln Asn Leu Asp Arg Leu Arg Leu Gly Lys
595 600 605
Asn Gln Leu Thr Gly Lys Ile Pro Trp Thr Leu Gly Lys Ile Arg Glu
610 615 620
Leu Ser Leu Leu Asp Met Ser Ser Asn Ala Leu Thr Gly Thr Ile Pro
625 630 635 640
Leu Gln Leu Val Leu Cys Lys Lys Leu Thr His Ile Asp Leu Asn Asn
645 650 655
Asn Phe Leu Ser Gly Pro Ile Pro Pro Trp Leu Gly Lys Leu Ser Gln
660 665 670
Leu Gly Glu Leu Lys Leu Ser Ser Asn Gln Phe Val Glu Ser Leu Pro
675 680 685
Thr Glu Leu Phe Asn Cys Thr Lys Leu Leu Val Leu Ser Leu Asp Gly
690 695 700
Asn Ser Leu Asn Gly Ser Ile Pro Gln Glu Ile Gly Asn Leu Gly Ala
705 710 715 720
Leu Asn Val Leu Asn Leu Asp Lys Asn Gln Phe Ser Gly Ser Leu Pro
725 730 735
Gln Ala Met Gly Lys Leu Ser Lys Leu Tyr Glu Leu Arg Leu Ser Arg
740 745 750
Asn Ser Leu Thr Gly Glu Ile Pro Val Glu Ile Gly Gln Leu Gln Asp
755 760 765
Leu Gln Ser Ala Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Asn Phe Thr Gly Asp Ile
770 775 780
Pro Ser Thr Ile Gly Thr Leu Ser Lys Leu Glu Thr Leu Asp Leu Ser
785 790 795 800
His Asn Gln Leu Thr Gly Glu Val Pro Gly Ser Val Gly Asp Met Lys
805 810 815
Ser Leu Gly Tyr Leu Asn Val Ser Phe Asn Asn Leu Gly Gly Lys Leu
820 825 830
Lys Lys Gln Phe Ser Arg Trp Pro Ala Asp Ser Phe Leu Gly Asn Thr
835 840 845
Gly Leu Cys Gly Ser Pro Leu Ser Arg Cys Asn Arg Val Arg Ser Asn
850 855 860
Asn Lys Gln Gln Gly Leu Ser Ala Arg Ser Val Val Ile Ile Ser Ala
865 870 875 880
Ile Ser Ala Leu Thr Ala Ile Gly Leu Met Ile Leu Val Ile Ala Leu
885 890 895
Phe Phe Lys Gln Arg His Asp Phe Phe Lys Lys Val Gly His Gly Ser
900 905 910
Thr Ala Tyr Thr Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gln Ala Thr His Lys Pro
915 920 925
Leu Phe Arg Asn Gly Ala Ser Lys Ser Asp Ile Arg Trp Glu Asp Ile
930 935 940
Met Glu Ala Thr His Asn Leu Ser Glu Glu Phe Met Ile Gly Ser Gly
945 950 955 960
Gly Ser Gly Lys Val Tyr Lys Ala Glu Leu Glu Asn Gly Glu Thr Val
965 970 975
Ala Val Lys Lys Ile Leu Trp Lys Asp Asp Leu Met Ser Asn Lys Ser
980 985 990
Phe Ser Arg Glu Val Lys Thr Leu Gly Arg Ile Arg His Arg His Leu
995 1000 1005
Val Lys Leu Met Gly Tyr Cys Ser Ser Lys Ser Glu Gly Leu Asn
1010 1015 1020
Leu Leu Ile Tyr Glu Tyr Met Lys Asn Gly Ser Ile Trp Asp Trp
1025 1030 1035
Leu His Glu Asp Lys Pro Val Leu Glu Lys Lys Lys Lys Leu Leu
1040 1045 1050
Asp Trp Glu Ala Arg Leu Arg Ile Ala Val Gly Leu Ala Gln Gly
1055 1060 1065
Val Glu Tyr Leu His His Asp Cys Val Pro Pro Ile Val His Arg
1070 1075 1080
Asp Ile Lys Ser Ser Asn Val Leu Leu Asp Ser Asn Met Glu Ala
1085 1090 1095
His Leu Gly Asp Phe Gly Leu Ala Lys Val Leu Thr Glu Asn Cys
1100 1105 1110
Asp Thr Asn Thr Asp Ser Asn Thr Trp Phe Ala Cys Ser Tyr Gly
1115 1120 1125
Tyr Ile Ala Pro Glu Tyr Ala Tyr Ser Leu Lys Ala Thr Glu Lys
1130 1135 1140
Ser Asp Val Tyr Ser Met Gly Ile Val Leu Met Glu Ile Val Thr
1145 1150 1155
Gly Lys Met Pro Thr Asp Ser Val Phe Gly Ala Glu Met Asp Met
1160 1165 1170
Val Arg Trp Val Glu Thr His Leu Glu Val Ala Gly Ser Ala Arg
1175 1180 1185
Asp Lys Leu Ile Asp Pro Lys Leu Lys Pro Leu Leu Pro Phe Glu
1190 1195 1200
Glu Asp Ala Ala Cys Gln Val Leu Glu Ile Ala Leu Gln Cys Thr
1205 1210 1215
Lys Thr Ser Pro Gln Glu Arg Pro Ser Ser Arg Gln Ala Cys Asp
1220 1225 1230
Ser Leu Leu His Val Tyr Asn Asn Arg Thr Ala Gly Tyr Lys Lys
1235 1240 1245
Leu
<210> 3
<211> 3750
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223>
<400> 3
atgcaaccac tagttcttct cctcctcttc atcctctgtt tttccggttt aggtcaaccg 60
ggtatcatca acaacgatct tcagactctt ctcgaggtga agaaatcttt ggtcacgaat 120
ccacaagaag acgatcctct ccgacaatgg aactctgata acatcaacta ctgttcttgg 180
accggagtca catgcgacaa taccggttta tttcgtgtaa ttgctctaaa ccttaccggt 240
ttaggattaa ccggttcaat ttcaccttgg tttggccggt ttgacaacct aatccacctt 300
gatctatctt ccaacaatct agttggtccc atcccaactg ctctctccaa ccttacttcc 360
ttggagtctc tgtttctctt ttctaaccaa ctcaccggcg agattccgag ccagctcggc 420
tccctcgtta atatccggtc gctaaggatc ggagacaatg agcttgttgg agatatcccg 480
gagacgttag ggaacttggt gaatctccag atgcttgctc tggcttcttg tagactcacc 540
ggtcctatac cgagtcagct cggtcgtctc gtccgagttc agtcgttgat attgcaagat 600
aactatctcg aaggaccgat tccggctgag ttaggaaact gctctgatct cactgtgttc 660
actgcggcgg agaacatgct caacgggacg ataccggcgg agcttggacg ccttgaaaac 720
ctcgaaatac tcaacctggc gaacaacagt ctcaccggag agataccgag tcaattaggt 780
gaaatgagcc aactccagta tcttagcttg atggcaaatc aacttcaagg tcttatcccc 840
aagagtttgg ctgatctggg aaatcttcaa actcttgatt tatcggcgaa taatcttacc 900
ggagagatac ctgaagaatt ctggaacatg agtcagcttc ttgatttggt tctagcaaac 960
aatcatctct ctggttcatt accaaagagc atttgttcta acaacacaaa cttggagcaa 1020
ctggttttgt ctggaactca gctttctggt gaaatccctg tggaattaag caaatgtcaa 1080
tcgcttaagc agcttgattt gtcgaacaat tctctcgctg gctcgatccc tgaagcattg 1140
tttgagctag tcgaactcac agatctttat ctccacaata ataccttgga gggtacgtta 1200
tctccttcga tatcaaacct cactaatcta cagtggcttg tgttgtatca caataacttg 1260
gaaggcaagt taccgaagga gatcagcgca ctcagaaaat tagaggttct gtttctgtat 1320
gagaatcgtt tctcagggga aatcccacag gagattggaa actgcacaag cttgaagatg 1380
attgatatgt tcgggaatca tttcgaagga gagatacctc cttcaatagg aagattaaaa 1440
gagcttaact tgcttcactt gagacagaac gagcttgtgg gtggacttcc cgccagttta 1500
ggtaactgtc atcaactgaa catcttggat ttggcggata atcagctctc gggatcaatt 1560
ccttcatcct tcgggttctt aaagggcttg gaacagttga tgctttacaa caattctctt 1620
caaggaaatc ttcctgattc acttatcagt ctgaggaacc tcaccagaat caatctctct 1680
cacaacaggc tcaatggtac gattcatcca ttatgtggtt cgagctcata tctctcattc 1740
gatgtcacca acaacgggtt tgaagatgaa atccccctgg agctaggaaa ctctcaaaat 1800
cttgatcgtc tcaggttagg caagaatcaa ttgacaggaa aaatcccttg gacgttgggg 1860
aaaatccgcg agctgtcctt gttagatatg tcaagcaacg ctctcacagg aaccattccg 1920
ctacagctcg tcttgtgcaa gaaactgaca cacatcgatc tcaataacaa ttttctatca 1980
ggtcctatac ctccatggct tggaaaactt tcacagttag gagagctcaa gctttcttcg 2040
aatcagtttg ttgagtcttt acctactgaa ctgttcaact gtacaaagct gcttgtgttg 2100
tctcttgatg gaaattcgct taatgggtcg attccacaag agattggtaa cttgggagct 2160
ctcaatgtcc ttaaccttga taagaaccag ttttcaggtt cacttcctca agctatggga 2220
aagctcagca agctgtatga gcttcggtta tcaagaaaca gcttaacagg agaaatccca 2280
gttgagattg gacagcttca ggatcttcaa agtgctttag acctcagcta caataacttc 2340
actggagata taccttcgac aattgggaca ttatcaaagc tggaaacact tgatctttct 2400
cacaatcagc ttacagggga agttcctggc tcggttgggg atatgaagag tttgggatat 2460
ctcaatgttt ctttcaataa cctcggaggg aagctcaaga aacagttctc aagatggcca 2520
gctgattcct ttttaggcaa cacaggtctt tgtggaagcc cactaagtcg ctgcaacaga 2580
gttagaagta ataacaagca acaaggtctt agtgccagat cagttgtgat aatatcagca 2640
atctcagcat tgacggcgat tggcttgatg atacttgtaa tcgctctctt cttcaaacaa 2700
aggcatgatt tcttcaagaa agtgggtcat ggaagcactg cgtacacatc gtcaagctct 2760
tcttcacaag ctacacacaa gcctctcttt cgaaacggag cttcaaagtc cgatatcagg 2820
tgggaggaca tcatggaagc tacacataat ctaagcgagg agttcatgat tggatcagga 2880
ggctctggga aggtttacaa ggcggagctt gaaaatggtg agactgttgc agtgaaaaag 2940
attctctgga aggatgatct catgtcaaac aagagcttca gcagagaagt taagacgctt 3000
ggaagaatca ggcataggca tctggttaag ctaatgggtt actgcagcag caagtcagaa 3060
ggattgaatc tgttgatata tgagtacatg aagaacggaa gcatctggga ttggcttcat 3120
gaggacaaac ccgtgctcga aaaaaagaag aagcttttag actgggaagc aagattgaga 3180
atagcagtag gattggctca aggagtagag taccttcatc atgactgtgt tcctcctatc 3240
gttcaccgtg atatcaaatc cagtaatgtg ctcctcgatt caaacatgga agcgcattta 3300
ggagatttcg gtcttgccaa ggtcttaact gagaactgtg ataccaacac agattcaaat 3360
acctggtttg catgctctta tggctacatt gctccagagt atgcttactc gttgaaggcg 3420
actgagaaga gcgacgttta cagtatgggg atcgtgttga tggagattgt gactgggaaa 3480
atgccaaccg actcagtgtt tggtgcagag atggacatgg tgagatgggt tgaaacacat 3540
cttgaagtag cgggttctgc gagagataaa ctcatagatc caaagcttaa gccacttctg 3600
ccatttgagg aagacgcagc ttgtcaggtg cttgagattg cacttcagtg cacaaaaact 3660
tctccccaag agagaccatc ttctaggcaa gcttgtgata gtcttctcca tgtctacaac 3720
aacagaacgg ccggttataa gaagctgtaa 3750

Claims (10)

1.如下1)-3)中任一种物质在调控植物抗逆性中的应用:
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
2.如下1)-3)中任一种物质在培育抗逆性提高的植物中的应用:
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:
所述编码蛋白GSO1的DNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)序列表中序列1所示的DNA分子;
2)序列表中序列3所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所限定的DNA分子杂交且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子;
4)与1)或2)所限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于:所述调控植物抗逆性为提高植物抗逆性。
5.根据权利要求1-4中任一所述的应用,其特征在于:所述抗逆性为抗盐性。
6.根据权利要求1-5中任一所述的应用,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物;
所述双子叶植物具体为豆科植物或十字花科植物。
7.一种培育抗逆性提高的转基因植物的方法,为将编码蛋白GSO1的DNA分子导入目的植物中,得到转基因植物;所述转基因植物抗逆性高于所述目的植物;
1)蛋白GSO1;
2)编码蛋白GSO1的DNA分子;
3)含有编码蛋白GSO1的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述抗逆性为抗盐性;
所述编码蛋白GSO1的DNA分子通过重组载体导入所述目的植物中;
所述编码蛋白GSO1的DNA分子是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)序列表中序列1所示的DNA分子;
2)序列表中序列3所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所限定的DNA分子杂交且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子;
4)与1)或2)所限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物;
所述双子叶植物具体为豆科植物或十字花科植物。
10.一种重组载体,为将编码蛋白GSO1的DNA分子插入表达载体中,得到表达蛋白GSO1的重组载体;
所述蛋白GSO1为如下(1)或(2):
(1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。
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