CN114671930A - ZmNF-YA1蛋白及其在调控植物对盐碱的耐逆性中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了ZmNF‑YA1蛋白及其编码基因在调控植物耐盐碱中的应用。本发明提供的蛋白质，命名为ZmNF‑YA1蛋白，获自玉米，是序列表的序列1所示的蛋白质。编码ZmNF‑YA1蛋白的基因，命名为ZmNF‑YA1基因，也属于本发明的保护范围。本发明还保护ZmNF‑YA1蛋白在调控植物盐碱耐逆性中的应用。本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将ZmNF‑YA1基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物。本发明对于培育耐盐碱植物具有重大的应用价值。

Description

ZmNF-YA1蛋白及其在调控植物对盐碱的耐逆性中的应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及ZmNF-YA1蛋白及其在调控植物对盐碱的耐逆性中的应用。

背景技术

土壤盐渍化(soil salinization)是指土壤底层或地下水的盐分随毛管水上升到地表，水分蒸发后，使盐分积累在表层土壤中的过程。是指易溶性盐分在土壤表层积累的现象或过程，也称盐碱化。中国盐渍土或称盐碱土的分布范围广、面积大、类型多，总面积约1亿公顷。盐碱土的可溶性盐主要包括钠、钾、钙、镁等的硫酸盐、氯化物、碳酸盐和重碳酸盐。硫酸盐和氯化物一般为中性盐，碳酸盐和重碳酸盐为碱性盐。

盐碱胁迫对植物造成的危害在于盐碱化土壤中高浓度的Na⁺和过高的pH。随着植物细胞内盐离子的积累，将对细胞产生离子毒害效应，从而在多方面影响细胞发挥正常功能。随着分子生物学、基因组学、遗传学、生物化学以及基因编辑技术的快速发展，对植物抵抗盐碱胁迫的分子机制研究得以不断深入，许多新的基因或蛋白参与调控盐碱胁迫响应过程中。

发明内容

本发明的目的是提供ZmNF-YA1蛋白及其在调控植物对盐碱的耐逆性中的应用。

本发明提供的蛋白质，命名为ZmNF-YA1蛋白，获自玉米(Zea mays L.)，是如下(a1)或(a2)或(a3)：

(a1)序列表的序列1所示的蛋白质；

(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

(a3)将(a1)所述蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质。

编码ZmNF-YA1蛋白的基因，命名为ZmNF-YA1基因，也属于本发明的保护范围。

具体来说，ZmNF-YA1基因是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)的DNA分子：

(b1)编码区如序列表的序列2中第253-987位核苷酸所示的DNA分子；

(b2)序列表的序列2所示的DNA分子；

(b3)序列表的序列3所示的DNA分子；

(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

(b5)与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。

含有ZmNF-YA1基因的重组载体、表达盒或重组菌均属于本发明的保护范围。

可用现有的植物表达载体构建含有ZmNF-YA1基因的重组载体。

构建重组载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此外，构建重组载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物进行鉴定及筛选，可对所用重组载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以表型筛选转化植物。

所述植物表达载体具体可为pBCXUN载体。

所述重组载体具体可为将序列表的序列2中第253-987位核苷酸所示的DNA分子插入pBCXUN载体中得到的重组质粒pBCXUN-ZmNF-YA1。

本发明还保护ZmNF-YA1蛋白在调控植物盐碱耐逆性中的应用。具体来说，所述调控为正调控，即ZmNF-YA1蛋白增多，植物的盐碱耐逆性增高。所述调控植物盐碱耐逆性为提高植物盐碱耐逆性。提高植物盐碱耐逆性体现为使植物在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述植物为禾本科植物。所述植物为玉蜀黍属植物。所述植物为玉米。所述植物为玉米B73-329。

本发明还保护所述ZmNF-YA1基因或所述重组载体或所述表达盒或所述重组菌在培育盐碱耐逆性增高的转基因植物中的应用。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述植物为禾本科植物。所述植物为玉蜀黍属植物。所述植物为玉米。所述植物为玉米B73-329。

本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将ZmNF-YA1基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物。ZmNF-YA1基因具体通过所述重组载体导入受体植物。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述植物为禾本科植物。所述植物为玉蜀黍属植物。所述植物为玉米。所述植物为玉米B73-329。

本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：增加目的植物中ZmNF-YA1蛋白的含量和/或活性，从而使植物的盐碱耐逆性增高。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述植物为禾本科植物。所述植物为玉蜀黍属植物。所述植物为玉米。所述植物为玉米B73-329。

与玉米B73-329相比较，ZmNF-YA1过表达株系的植株表现出显著增高的盐碱耐逆性。因此，ZmNF-YA1蛋白参与盐碱胁迫响应过程，提高植物对高盐碱的耐逆性。本发明对于培育耐盐碱植物具有重大的应用价值。

附图说明

图1为实施例2中的植株照片。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

pBCXUN载体是将pCXUN载体(GenBank:FJ905215.1，06-JUL-2009)的HYG基因(hptII，潮霉素抗性基因)替换为Bar基因(编码膦丝菌素乙酰转移酶)(Bar基因如序列表的序列4所示)，保持pCXUN的其它核苷酸不变得到的表达载体。

玉米(Zea mays L.)B73-329记载于：王芳,崔鹏娟,黄芸,王志文,王海峰,陈益芳.玉米磷吸收和再分配的分子机制[A],2018全国植物生物学大会论文集[C],2018年。

实施例1、ZmNF-YA1基因及其编码蛋白的发现

从玉米中发现一个新蛋白，如序列表的序列1所示，命名为ZmNF-YA1蛋白。

玉米cDNA中，ZmNF-YA1基因如序列表的序列2所示，第253-987位核苷酸为开放阅读框。玉米基因组DNA中，ZmNF-YA1基因如序列表的序列3所示。

实施例2、转基因植物的获得和盐碱耐逆性鉴定

一、构建重组质粒

将序列表的序列2中第253-987位核苷酸所示的DNA分子插入pBCXUN载体中，得到重组质粒pBCXUN-ZmNF-YA1，已进行测序验证。重组质粒pBCXUN-ZmNF-YA1中，外源DNA分子的转录由Ubi启动子启动并由Nos终止子终止，从而表达ZmNF-YA1蛋白。

二、ZmNF-YA1基因过表达植物的获得

1、将重组质粒pBCXUN-ZmNF-YA1导入农杆菌EHA105，得到重组农杆菌。

2、采用步骤1制备的重组农杆菌对玉米B73-329的胚性愈伤组织进行侵染，然后依次进行共培养、抗性筛选(抗性筛选采用除草剂草丁膦)，然后依次进行预分化、分化、生根，得到T₀代再生植株。

3、T₀代再生植株进行PCR鉴定，筛选获得转基因植株；将T₀代转基因植株自交，得到的种子即为T₁代种子，T₁代种子长成的植株即为T₁代植株；将T₁代植株自交，得到的种子即为T₂代种子，T₂代种子长成的植株即为T₂代植株；将T₂代植株自交，得到的种子即为T₃代种子，T₃代种子长成的植株即为T₃代植株。

4、将T₁代植株以及抽样的T₂代植株进行PCR鉴定。对于某一T₁代植株，如果该植株以及该植株自交得到的T₂代植株均为转基因植株，该植株的自交后代为纯合的转基因株系。获得三个纯合的转基因株系，分别为ZmNF-YA1-OX1株系、ZmNF-YA1-OX2株系和ZmNF-YA1-OX3株系。

步骤3和步骤4中PCR鉴定的方法如下：提取植株叶片的基因组DNA，采用UbiP-seq(对应于Ubi启动子中)和NosR-seq(对应于Nos终止子中)组成的引物对进行PCR扩增，如果得到特异性扩增产物，该植株为转基因植株。

三、ZmNF-YA1基因过表达植物的盐碱耐逆性鉴定

供试种子：ZmNF-YA1-OX1株系的T₃代种子、ZmNF-YA1-OX2株系的T₃代种子、ZmNF-YA1-OX3株系的T₃代种子、玉米B73-329的种子。

供试种子种植于蛭石中，用1/2Hoagland’s营养液浇灌，正常培养至3叶期。然后开始用含150mM NaHCO₃的1/2Hoagland’s营养液浇灌(每7-10天浇灌一次)，正常培养28天。然后观察拍照并统计株高。

进行三次重复试验，每次重复试验的每种样本至少设置20个生物学重复。

植株照片见图1。

ZmNF-YA1基因过表达植株表现出比玉米B73-329植株更高的盐碱耐逆性，具体表现为叶片较绿，株高更高。ZmNF-YA1基因过表达植物的株高为玉米B73-329植株的2.2-2.4倍。

上述结果表明，ZmNF-YA1蛋白正调控植物的盐碱耐逆性。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

序列表

<110> 中国农业大学

<120> ZmNF-YA1蛋白及其在调控植物对盐碱的耐逆性中的应用

<130> GNCYX203344

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 244

<212> PRT

<213> Zea mays L.

<400> 1

Met Arg Gln Asn Gly Ala Val Met Ile Gln Phe Gly His Gln Met Pro

1 5 10 15

Asp Tyr Asp Ser Pro Ala Thr Gln Ser Thr Ser Glu Thr Ser His Gln

20 25 30

Glu Ala Ser Gly Met Ser Glu Gly Ser Leu Asn Glu His Asn Asn Asp

35 40 45

His Ser Gly Asn Leu Asp Gly Tyr Ser Lys Ser Asp Glu Asn Lys Met

50 55 60

Met Ser Ala Leu Ser Leu Gly Asn Pro Glu Thr Ala Tyr Ala His Asn

65 70 75 80

Pro Lys Pro Asp Arg Thr Gln Ser Phe Ala Ile Ser Tyr Pro Tyr Ala

85 90 95

Asp Pro Tyr Tyr Gly Gly Ala Val Ala Ala Ala Tyr Gly Pro His Ala

100 105 110

Ile Met His Pro Gln Leu Val Gly Met Val Pro Ser Ser Arg Val Pro

115 120 125

Leu Pro Ile Glu Pro Ala Ala Glu Glu Pro Ile Tyr Val Asn Ala Lys

130 135 140

Gln Tyr His Ala Ile Leu Arg Arg Arg Gln Leu Arg Ala Lys Leu Glu

145 150 155 160

Ala Glu Asn Lys Leu Val Lys Ser Arg Lys Pro Tyr Leu His Glu Ser

165 170 175

Arg His Leu His Ala Met Lys Arg Ala Arg Gly Thr Gly Gly Arg Phe

180 185 190

Leu Asn Thr Lys Gln Gln Pro Glu Ser Pro Gly Ser Gly Gly Ser Ser

195 200 205

Asp Ala Gln Arg Val Pro Ala Thr Ala Ser Gly Gly Leu Phe Thr Lys

210 215 220

His Glu His Ser Leu Pro Pro Gly Gly Arg His His Tyr His Ala Arg

225 230 235 240

Gly Gly Gly Glu

<210> 2

<211> 1291

<212> DNA

<213> Zea mays L.

<400> 2

aggaaagggc ccaacagctc aacagaaaag ccaagcaaag gctgctgcat actggaaggc 60

cctctgtctg tgtgcgagcg caagagaaag ggagtcagag agagagagag agggaggaga 120

ccttgcagag gagcgaagca agcaaggtgg gaaagaggca gcagcaaggg cggcgggctg 180

ccggaagggg aacatgctcc ctcctcatct cacagtacga actgaaaaac aagagtaaag 240

aatttccgtg agatgagaca gaatggcgcg gtgatgattc agtttggcca tcagatgcct 300

gattacgact ccccggctac ccagtcaacc agtgagacga gccatcaaga agcgtctgga 360

atgagcgaag ggagcctcaa cgagcataat aatgaccatt caggcaacct tgatgggtac 420

tcgaagagtg acgaaaacaa gatgatgtca gcgttatccc tgggcaatcc ggaaacagct 480

tacgcacata atccgaagcc tgaccgtact cagtccttcg ccatatcata cccatatgcc 540

gatccatact acggtggcgc ggtggcagca gcttatggcc cgcatgctat catgcaccct 600

cagctggttg gcatggttcc gtcctctcga gtgccactgc cgatcgagcc agccgctgaa 660

gagcccatct atgtcaacgc gaagcagtac cacgctattc tccggaggag acagctccgt 720

gcaaagctag aggcggaaaa caagctcgtg aaaagccgca agccgtacct ccacgagtct 780

cggcacctgc acgcgatgaa gagagctcgg ggaacaggcg ggcggttcct gaacacgaag 840

cagcagccgg agtcccccgg cagcggcggc tcctcggacg cgcaacgcgt gcccgcgacc 900

gcgagcggcg gcctgttcac gaagcatgag cacagcctgc cgcccggcgg tcgccaccac 960

tatcacgcga gagggggcgg tgagtaggga gccccgacac tggcaactca tccttggctt 1020

atcagcgatt cgactcggct ctccctcgtc tgaaactgaa ctctctgcaa ctactgtaac 1080

tgtaactaaa ctgggtgtgc ccggattggc ggtcgttctg ttctactact agtacctgct 1140

acgcgtcgtt gggttgggtc tggactagag agcgtgctgg ttctttgatg aacttggctg 1200

gacttgaggg tgttgactag cgcgaagctg agttccatgt aaaacttttg cttcaagacc 1260

gatgactggc ggcataataa gtagcagtaa t 1291

<210> 3

<211> 4469

<212> DNA

<213> Zea mays L.

<400> 3

actatgcgaa tagtgcaatc tattattttg ttacataatt ttattatatt agacttggaa 60

tggtttaatt atgtagtaat aaaactaaaa tgacttatta taatttaaga taaaggggct 120

atataccggt gtacatatac agtagtagta cgtactacat ccgtggaatg gtttaattat 180

gtaataataa aactaaaatg acttattata atttaatata aagggagtat ataccggtgt 240

aatatacagt agtagtacgt actacatccg ttcacaaata tatgacatca ttgatttttt 300

ttcttgaaat tttttactat ttgtcttaat ttttattaaa aatgtaaaat tttaagtcaa 360

gcacaaacta ctttaaatga taaaacaaat aaaaaaataa taattcatta ttttttgaat 420

gagagtttgt tttaaaagtc aatattgtta atcttcaaaa aaaaaagtca atactgttat 480

atatttatga atggagcagc tcttttacct cttttagcat gcaacaacac ggcacccatc 540

tgctttattc attattgtca ttagactaat aaagtagttg gtgagcaggc gcccgggggt 600

gaggagagat aggaaagggc ccaacagctc aacagaaaag ccaagcaaag gctgctgcat 660

actggaaggc cctctgtctg tgtgcgagcg caagagaaag ggagtcagag agagagagag 720

agggaggaga ccttgcagag gagcgaagca agcaaggtgg gaaagaggca gcagcaaggg 780

cggcgggctg ccggaagggg aacatgctcc ctcctcatct cacaggtctt ccttcctgct 840

cgctgacttg cctctctcca ccctctctga tctgagctct acggctcttc ctttccctgc 900

ggtgataccg gagctctctg ctcccacctc ccagtaccag ccgacctgtt tttttttcgt 960

ttgtttgggg gtgggtggat gtgggggagg gatcgtttct cggttcttct ggacgatttg 1020

tggtggatct ggctggttcc ttggttgctc ggctggtctt ttgagttgat acggtgctgg 1080

gatttgtagg cgcatttctg ggtggaggtg gccggtgggg taatggctcc agcatgtgat 1140

ccttgctaag gccttacagt tacagcacac tgcatgccgg atttgtgttg ctttatttat 1200

gttcctgccc gtgtaatcgt tttgaactca aggggagaac tagtgaccta ctgatgagat 1260

taagatgcag cactgttttt gctagcggga ggcctatctg cagaactaac tagtcatgtc 1320

tgaggccctc agcacatata ctctggttgc atgaaggatt cttagaattc agagggcgct 1380

accgagttga tgcatggtac tgatacagcg ctagcgctag cgctagctag cttactacta 1440

gtacctttag agcatgtgca tgcccaagtt acacatctca cctcgcgtga tcaattgagg 1500

gcctactagc ttactactgc tgccttagtt tcctttttca tgaatacagt tacggtggga 1560

aggtcaaatt ctgttgtgta ttcatgcatc agctgtgctc cttaaggctt gcagacctta 1620

atacccagta cgtgtttcga atctcgtatg tttatttctg ggaactgacc tgtgtttata 1680

tatgtttgga cagtacgaac tgaaaaacaa gagtaaagaa tttccgtgag atgagacgta 1740

cgtaaggata atccccaaga cattgctcaa tctgtttctc tctctctctc tctcttttcg 1800

gcgagcagtt tgtccttttt ctttcaattt cttttactac tacacccgtt atcgaatatt 1860

tgtcatccgc tggctcattt ataaactaaa acacgataaa taaagaagga aagaacggag 1920

agagtagtag tggtttagtt tcatgcagct agaattctaa cgccctcctg gatccttgtg 1980

cagagaatgg cgcggtgatg attcagtttg gccatcagat gcctgattac gactccccgg 2040

ctacccagtc aaccagtgag acgagccatc aagaagcgtc tggaatgagc gaagggagcc 2100

tcaacgagca taataatgac cattcaggtg atttgccccc gtatcaattc tctgctgtat 2160

tcatcatgcc gtgaaaacag aaagtgggtt aaaagaaaaa agggaaaaag agatgatagc 2220

atattgttgg tttcgaacct tgcatgtaca atcaagttaa gctacgtcgt gacactcttt 2280

tctccttgta tcattacttc tactaggcaa ccttgatggg tactcgaaga gtgacgaaaa 2340

caagatgatg tcagcgttat ccctgggcaa tccggaaaca gcttacgcac ataatccgaa 2400

gcctgaccgt actcagtcct tcgtaagttt ccaaatgcct tctgcacttg aagcctttat 2460

taagtctcta ctactgctag gtttttttct tctttcttct agttgcagct gtttacttgt 2520

tctccaatgg gggcagtcgt gtgaattacg cagtacgcac cttttcaggc catatcatac 2580

ccatatgccg atccatacta cggtggcgcg gtggcagcag cttatggccc gcatgctatc 2640

gtaagtgatc tccatgcgtc cagcctgttg tttcactact tgctgccggt gctagatgat 2700

gccctttgtc cactttgaag acactttgct aggcaatgcg gtcagtactg gtgctttctt 2760

tttgtttttc ctgtgcgtta ttgcgtttag tggtgttctt catttgctag cacagcatgc 2820

ctatcggctg agacagcacc cagcagcatt gccatcgatt taccccttca actcattcgt 2880

ctcgtcagat cttactcctg ctatgttatt gaagcatagg cgttttttac gtttcacgcc 2940

tgcatcattg ccattctcct ggtcctgggt aaagcggctt gttttttttc ttcttctgat 3000

aattacaaat taatcagagt ctcgtatttt gcctggtaaa caaatcgagc agatgcaccc 3060

tcagctggtt ggcatggttc cgtcctctcg agtgccactg ccgatcgagc cagccgctga 3120

agagcccatc tatgtcaacg cgaagcagta ccacgctatt ctccggagga gacagctccg 3180

tgcaaagcta gaggcggaaa acaagctcgt gaaaagccgc aaggtactca ctccctcgcc 3240

gcacttgata gccgtaagca cctctcacac tcggagccgt aacagtctct ccctctctgt 3300

ctgtgtgtgt gtgttgtgtg cagccgtacc tccacgagtc tcggcacctg cacgcgatga 3360

agagagctcg gggaacaggc gggcggttcc tgaacacgaa gcagcagccg gagtcccccg 3420

gcagcggcgg ctcctcggac gcgcaacgcg tgcccgcgac cgcgagcggc ggcctgttca 3480

cgaagcatga gcacagcctg ccgcccggcg gtcgccacca ctatcacgcg agagggggcg 3540

gtgagtaggg agccccgaca ctggcaactc atccttggct tatcagcgat tcgactcggc 3600

tctccctcgt ctgaaactga actctctgca actactgtaa ctgtaactaa actgggtgtg 3660

cccggattgg cggtcgttct gttctactac tagtacctgc tacgcgtcgt tgggttgggt 3720

ctggactaga gagcgtgctg gttctttgat gaacttggct ggacttgagg gtgttgacta 3780

gcgcgaagct gagttccatg taaaactttt gcttcaagac cgatgactgg cggcataata 3840

agtagcagta ataaccattc ttctgtgtct gtgatgcctt ccttgcgccg attctgcaga 3900

acctggcacc tagcagcagc ctccatcaat catcgggaac tctcactctt atgtgtgagt 3960

gcgactgagt ttacgccggc cggccacgca cacggcacgc cgcagtccca gccccacaaa 4020

ggccccattg gcccattggg aggcgcaggc cgtcccgtga ccgtgaggcc gtgatccgtc 4080

tgagcgcgcc gcgacgctca ctgatctccg attcgctttc ctgccgatct gcgccgtctc 4140

cctcacctgt cgacgtcgga tcgctgccag tcctgatcgc cgtctctctc catatgcagc 4200

aaacatcagg cttcacaaac tttttagatt tagatgcaat ttttaagatc cagaataatt 4260

ttaaataaaa aagttgtcaa ccgggaatcc agcaggcagt gggaagcttc ctccaccctc 4320

ccccgctctc cggtcgagct gactgtcgga ttggttggtg gccaaccgaa gtctcaaatc 4380

tgtgtcgttg catggaggga aaacgtgatt cggaactcgg aagaccaaga gttcctttca 4440

gccctcgact ggtttaaatg cagcaggac 4469

<210> 4

<211> 552

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

atgagcccag aacgacgccc ggccgacatc cgccgtgcca ccgaggcgga catgccggcg 60

gtctgcacca tcgtcaacca ctacatcgag acaagcacgg tcaacttccg taccgagccg 120

caggaaccgc aggagtggac ggacgacctc gtccgtctgc gggagcgcta tccctggctc 180

gtcgccgagg tggacggcga ggtcgccggc atcgcctacg cgggcccctg gaaggcacgc 240

aacgcctacg actggacggc cgagtcgacc gtgtacgtct ccccccgcca ccagcggacg 300

ggactgggct ccacgctcta cacccacctg ctgaagtccc tggaggcaca gggcttcaag 360

agcgtggtcg ctgtcatcgg gctgcccaac gacccgagcg tgcgcatgca cgaggcgctc 420

ggatatgccc cccgcggcat gctgcgggcg gccggcttca agcacgggaa ctggcatgac 480

gtgggtttct ggcagctgga cttcagcctg ccggtaccgc cccgtccggt cctgcccgtc 540

accgagattt ga 552

Claims (10)

1.一种蛋白质，是如下(a1)或(a2)或(a3)：

(a1)序列表的序列1所示的蛋白质；

(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

(a3)将(a1)所述蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白质的基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)的DNA分子：

(b1)编码区如序列表的序列2中第253-987位核苷酸所示的DNA分子；

(b2)序列表的序列2所示的DNA分子；

(b3)序列表的序列3所示的DNA分子；

(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

(b5)与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒或重组菌。

5.权利要求1所述蛋白质在调控植物的盐碱耐逆性中的应用。

6.权利要求2或3所述基因或权利要求4所述重组载体或权利要求4所述表达盒的应用，为培育盐碱耐逆性增高的转基因植物。

7.如权利要求5或6所述的应用，其特征在于：所述植物为单子叶植物。

8.一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将权利要求2或3所述基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物。

9.一种植物育种方法，包括如下步骤：增加目的植物中权利要求1所述蛋白质的含量和/或活性，从而使植物的盐碱耐逆性增高。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物。

Images