CN108939133B - 一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医用材料领域，具体而言，涉及一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法。该抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其包括质量比为30‑50：1：1的蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。上述原料简单可靠，天然可降解，生物降解性好、生物安全性高，可安全用于各类伤口及慢性创面。同时，本发明实施例提供的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法简单，通过将纺丝原液制成三维结构，可进一步增强蚕丝蛋白膜的降解性。获得的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的生物降解性好、生物安全性高，可安全用于各类伤口及慢性创面。

Description

一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医用材料领域，具体而言，涉及一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法。
背景技术
①专利申请号(201510556711.1)公开的一种真皮替代物，该真皮替代物以蚕丝蛋白为主要基质，羧乙基壳聚糖为次要基质；将丝蛋白溶液与羧乙基壳聚糖混合后，经过成膜、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺混合水溶液浸泡、冷冻干燥等步骤，制得所述的真皮替代物。该真皮替代物具有抑制瘢痕形成和促进真皮组织再生的功能，该真皮替代物的制备方法通过水蒸气蒸发使丝蛋白分子发生物理交联；
②专利申请号(201710341640.2)公开的一种抗菌丝素蛋白材料，该抗菌丝素蛋白材料的组分包括丝素蛋白和黄连素，黄连素直接与丝素蛋白通过分子间作用力相互结合。该方法的步骤包括制备丝素蛋白溶液，制备丝素蛋白复合材料，制备经水蒸气处理的抗菌丝素蛋白材料，以及制备经过甘油修饰的丝素蛋白复合材料。该抗菌丝素蛋白材料，通过对丝素蛋白进行水蒸气处理和甘油修饰，来改变丝素蛋白二级结构，抗菌药物黄连素可均匀分散在丝素蛋白高分子可吸收材料中，随着丝素蛋白高分子可吸收材料的溶胀和降解，抗菌药物缓慢释放，因此具有长效缓释的抗菌性能。
③专利申请号(201710206342.2)公开的一种含微胶囊的蚕丝蛋白组织修复材料，为包含蚕丝蛋白的膜状物，内部平均孔密度为1-3000个/mm2，平均孔径为1-500μm，所述的膜状物包含以下重量份数的原料：蚕丝蛋白溶液110-140份、蚕丝蛋白纳米纤维溶液7-9份、布洛芬缓释微胶囊2-3份、萹蓄提取液2-3份、甲壳素1-2份。其涉及生物材料及蚕丝蛋白领域。修复损伤的大组织和复杂器官的生物材料必须具有促血管形成的能力才能使大组织和复杂器官具有生物功能。
现有技术①②③的功能单一，不具备抗菌、促愈合的综合治疗效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其具有长效抗菌、促愈合的功效和更好的生物相容性。
本发明的另一目的在于提供一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，该方法简单，获得的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料具有长效抗菌、促愈合的功效和更好的生物相容性。
本发明的实施例是这样实现的：
一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其包括蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒，蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒的质量比为30-50：1：1。
一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其包括将载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
本发明实施例的有益效果例如包括：
本发明实施例提供的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的原料简单可靠，均是蚕丝蛋白、PLGA等生物可降解类材料以及生长因子、天然抗菌剂等天然成分物质，不添加聚氨酯或硅酮等降解性差的材料，也不含化学合成抗菌剂等可能产生副作用的化学药物。同时，本发明实施例提供的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法简单，通过将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，可进一步增强蚕丝蛋白膜的降解性。获得的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的生物降解性好、生物安全性高，可安全用于各类伤口及慢性创面。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法进行具体说明。
本发明提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其组分包括：蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒，蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒的质量比为30-50：1：1。
其中，蚕丝蛋白溶液作为溶剂，用于溶解载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。
第一微粒载体包括PLA或PLGA，其中，PLA为聚乳酸，是一种新型的生物基及可再生生物降解材料。其具有良好的生物可降解性，使用后能被自然界中微生物在特定条件下完全降解，最终生成二氧化碳和水，不污染环境，有利于保护保护环境。同样的，PLGA为聚乳酸-羟基乙酸共聚物，由两种单体-乳酸和羟基乙酸随机聚合而成，也是是一种可降解的功能高分子有机化合物，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能。
载生长因子缓释微粒包括第一微粒载体以及载于第一微粒载体上的生长因子；其中，生长因子包括碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和真皮细胞生长因子(DGF)中的一种或多种组合。
优选地，在本实施例中，载生长因子缓释微粒经蚕丝蛋白进行表面修饰。使载生长因子缓释微粒更有利于细胞的贴附生长以及所担载活性成分(生长因子)的缓慢长效释放。
载抗菌剂缓释微粒包括第二微粒载体以及载于第二微粒载体上的抗菌剂。
第二微粒载体包括PLA或PLGA。PLA或PLGA具有良好的降解性能，有利于保护环境，上文已进行具体阐述，这里不再赘述。
抗菌剂包括天然抗菌剂；优选地，天然抗菌剂包括壳聚糖、芦荟、艾蒿、桧柏油、抗菌肽和黄连素中的一种或多种组合。本实施例中不含化学合成抗菌剂等可能产生副作用的化学药物，更安全，可适用于各类伤口及慢性创面。
优选地，在本实施例中，载抗菌剂缓释微粒经蚕丝蛋白进行表面修饰。使载生长因子缓释微粒更有利于细胞的贴附生长以及所担载活性成分(抗菌剂)的缓慢长效释放。
此外，本发明实施例还提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其包括将载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。其具体包括以下步骤：
S1、制备载生长因子缓释微粒。
将含有生长因子的磷酸缓冲盐溶液滴入含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液中，搅拌后离心，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液，冻干后即得；
具体地，将第一微粒载体加入二氯甲烷溶液中溶解，获得5-15mg/ml的含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液；将含有生长因子浓度为1-3mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液中，生长因子和第一微粒载体的质量比为15-25:100。同时设定桨式搅拌速度为600-1000rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液1-3h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在7000-9000rpm下高速离心8-12min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载生长因子的PLGA缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S2、对载生长因子缓释微粒进行改性。
将载生长因子缓释微粒，加去离子水，超声重分散，离心，弃上清；加入蚕丝蛋白溶液中，使用垂直旋转混合器垂直混悬30-40min，3000-5000rpm条件下离心8-12min，超声水洗2-4次，上述操作重复2-4次；配置浓度为20-40mmol/mL的硼氢化钠溶液终止交联反应20-40min，3000-5000rpm条件下离心8-12min，超声水洗2-4次，冻干后即得到蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
S3、制备载抗菌剂缓释微粒。
将含有抗菌剂的磷酸缓冲盐溶液滴入含有第二微粒载体的二氯甲烷溶液中，搅拌后离心，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液，冻干后即得；
具体地，将第二微粒载体加入二氯甲烷溶液中溶解，获得5-15mg/ml的含有第二微粒载体的二氯甲烷溶液；将含有抗菌剂浓度为1-3mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有第二微粒载体的二氯甲烷溶液中，抗菌剂和第二微粒载体的质量比为15-25:100。同时设定桨式搅拌速度为600-1000rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液1-3h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在7000-9000rpm下高速离心8-12min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载抗菌剂缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S4、对载抗菌剂缓释微粒进行改性。
将载抗菌剂缓释微粒，加去离子水，超声重分散，离心，弃上清；加入蚕丝蛋白溶液中，使用垂直旋转混合器垂直混悬30-40min，3000-5000rpm条件下离心8-12min，超声水洗2-4次，上述操作重复2-4次；配置浓度为20-40mmol/mL的硼氢化钠溶液终止交联反应20-40min，3000-5000rpm条件下离心8-12min，超声水洗2-4次，冻干后即得到蚕丝蛋白改性后的载抗菌剂缓释微粒。
S5、制备蚕丝蛋白溶液。
将蚕丝蛋白加入甲酸溶液中溶解获得。具体地，蚕丝蛋白为经加工的纯蚕丝蛋白；加工方法为现有技术，本实施例中不做具体阐述，经加工获得的纯蚕丝蛋白相比现有技术大都以蚕茧为原料，本实施例产品的原料质量参数更可控，更有利于最终成品产品的质量控制。将纯蚕丝蛋白加入甲酸溶液中，溶解条件为于25-35℃下溶解2-4h，溶解浓度为8-12％，充分溶解后制得蚕丝蛋白溶液。
S6、制备蚕丝蛋白护创材料。
将上述步骤S2获得的蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒以及步骤S4获得的蚕丝蛋白改性后的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，利用静电纺丝法、冷冻干燥法、盐析法、沥滤法、发泡法和相分离法的任一种将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。本实施例中采用静电纺丝、冷冻干燥法、湿法纺丝法等成熟工艺，可进一步增强蚕丝蛋白膜的降解性。
值得注意的是，上述步骤S2和S4为可选步骤，在本发明的其他实施例中，可以省略步骤S2和S4，因此在步骤S6制备蚕丝蛋白护创材料时，将上述步骤S1获得的载生长因子缓释微粒以及步骤S3获得的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，进行后续操作即可。
以下结合实施例对本发明的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料及其制备方法进一步进行阐述。
实施例1
本实施例提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其组分包括质量比为40：1：1的蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。其中，第一微粒载体和第二微粒载体均为PLGA。生长因子包括碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和真皮细胞生长因子；抗菌剂包括壳聚糖。
其制备方法包括：
S1、制备载生长因子缓释微粒。
将PLGA加入二氯甲烷溶液中溶解，获得10mg/ml的含有PLGA的二氯甲烷溶液；将含有生长因子浓度为1mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有PLGA的二氯甲烷溶液中，生长因子和PLGA的质量比为20:100。同时设定桨式搅拌速度为800rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液2h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在8000rpm下高速离心10min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载生长因子的PLGA缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S2、对载生长因子缓释微粒进行改性。
称取10mg载生长因子缓释微粒，加1mL去离子水，超声重分散，离心，弃上清；加入2mg/mL蚕丝蛋白溶液中，使用垂直旋转混合器垂直混悬30min，4000rpm条件下离心10min，超声水洗3次，上述操作重复3次；配置浓度为30mmol/mL的硼氢化钠溶液终止交联反应30min，4000rpm条件下离心10min，超声水洗3次，冻干后即得到蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
S3、制备载抗菌剂缓释微粒。
载抗菌剂缓释微粒的制备方法如步骤S1。
S4、对载抗菌剂缓释微粒进行改性。
利用蚕丝蛋白对载抗菌剂缓释微粒进行改性的方法如步骤S2。
S5、制备蚕丝蛋白溶液。
将纯蚕丝蛋白加入甲酸溶液中，溶解条件为于25-35℃下溶解2-4h，溶解浓度为8-12％，充分溶解后制得蚕丝蛋白溶液。
S6、制备蚕丝蛋白护创材料。
将上述步骤S2获得的蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒以及步骤S4获得的蚕丝蛋白改性后的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，利用静电纺丝法将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
实施例2
本实施例提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其组分包括质量比为30：1：1的蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。
其中，第一微粒载体和第二微粒载体均为PLA。生长因子包括碱性成纤维细胞生长因子；抗菌剂包括壳聚糖、芦荟、艾蒿、桧柏油、抗菌肽和黄连素。
其制备方法包括：
S1、制备载生长因子缓释微粒。
将PLA加入二氯甲烷溶液中溶解，获得5mg/ml的含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液；将含有生长因子浓度为2mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有PLA的二氯甲烷溶液中，生长因子和PLA的质量比为15:100。同时设定桨式搅拌速度为600rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液1h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在7000rpm下高速离心12min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载生长因子的PLGA缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S2、对载生长因子缓释微粒进行改性。
称取10mg载生长因子缓释微粒，加1mL去离子水，超声重分散，离心，弃上清；加入2mg/mL蚕丝蛋白溶液中，使用垂直旋转混合器垂直混悬35min，3000rpm条件下离心12min，超声水洗2次，上述操作重复4次；配置浓度为20mmol/mL的硼氢化钠溶液终止交联反应40min，3000rpm条件下离心12min，超声水洗2次，冻干后即得到蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
S3、制备载抗菌剂缓释微粒。
载抗菌剂缓释微粒的制备方法如步骤S1。
S4、对载抗菌剂缓释微粒进行改性。
利用蚕丝蛋白对载抗菌剂缓释微粒进行改性的方法如步骤S2。
S5、制备蚕丝蛋白溶液。
将纯蚕丝蛋白加入甲酸溶液中，溶解条件为于25℃下溶解4h，溶解浓度为8％，充分溶解后制得蚕丝蛋白溶液。
S6、制备蚕丝蛋白护创材料。
将上述步骤S2获得的蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒以及步骤S4获得的蚕丝蛋白改性后的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，利用冷冻干燥法将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
实施例3
本实施例提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其组分包括质量比为50：1：1的蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。
其中，第一微粒载体和第二微粒载体均为PLA。生长因子包括表皮生长因子和真皮细胞生长因子；抗菌剂包括艾蒿、桧柏油、抗菌肽和黄连素。
其制备方法包括：
S1、制备载生长因子缓释微粒。
将PLA加入二氯甲烷溶液中溶解，获得15mg/ml的含有PLA的二氯甲烷溶液；将含有生长因子浓度为3mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有PLA的二氯甲烷溶液中，生长因子和PLA的质量比为25:100。同时设定桨式搅拌速度为1000rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液3h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在9000rpm下高速离心8min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载生长因子的PLGA缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S2、对载生长因子缓释微粒进行改性。
称取10mg载生长因子缓释微粒，加1mL去离子水，超声重分散，离心，弃上清；加入2mg/mL蚕丝蛋白溶液中，使用垂直旋转混合器垂直混悬40min，5000rpm条件下离心8min，超声水洗4次，上述操作重复2次；配置浓度为40mmol/mL的硼氢化钠溶液终止交联反应20min，5000rpm条件下离心12min，超声水洗4次，冻干后即得到蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
S3、制备载抗菌剂缓释微粒。
载抗菌剂缓释微粒的制备方法如步骤S1。
S4、对载抗菌剂缓释微粒进行改性。
利用蚕丝蛋白对载抗菌剂缓释微粒进行改性的方法如步骤S2。
S5、制备蚕丝蛋白溶液。
将纯蚕丝蛋白加入甲酸溶液中，溶解条件为于35℃下溶解2h，溶解浓度为8％，充分溶解后制得蚕丝蛋白溶液。
S6、制备蚕丝蛋白护创材料。
将上述步骤S2获得的蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒以及步骤S4获得的蚕丝蛋白改性后的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，利用相分离法的任一种将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
实施例4
本实施例提供了一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其组分包括质量比为45：1：1的蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒。
其中，第一微粒载体和第二微粒载体均为PLA。生长因子包括真皮细胞生长因子；抗菌剂包括抗菌肽和黄连素。
其制备方法包括：
S1、制备载生长因子缓释微粒。
将PLA加入二氯甲烷溶液中溶解，获得12mg/ml的含有PLA的二氯甲烷溶液；将含有生长因子浓度为2.5mg/ml的磷酸缓冲盐溶液匀速逐滴滴入上述含有PLA的二氯甲烷溶液中，生长因子和PLA的质量比为22:100。同时设定桨式搅拌速度为900rpm，以获得乳液，匀速搅拌混合溶液2h，以挥发二氯甲烷。上述溶液在8000rpm下高速离心9min，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液(PBS)，重复此过程三次，冻干后得到载生长因子的PLGA缓释微粒，-20℃下低温避光保存备用。
S2、制备载抗菌剂缓释微粒。
载抗菌剂缓释微粒的制备方法如步骤S1。
S3、制备蚕丝蛋白溶液。
将纯蚕丝蛋白加入甲酸溶液中，溶解条件为于32℃下溶解2.5h，溶解浓度为9％，充分溶解后制得蚕丝蛋白溶液。
S4、制备蚕丝蛋白护创材料。
将上述步骤S1获得的载生长因子缓释微粒以及步骤S2获得的载抗菌剂缓释微粒加入至蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，利用盐析法、沥滤法、发泡法和相分离法的任一种将纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
综上所述，本发明实施例提供的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的原料采用经过精提的纯蚕丝蛋白，相比现有技术大都以蚕茧为原料，本发明产品的原料质量参数更可控，更有利于最终成品产品的质量控制。
原材料简单可靠，均是蚕丝蛋白、PLGA等生物可降解类材料以及生长因子、天然抗菌剂等天然成分物质，不添加聚氨酯或硅酮等降解性差的材料，也不含化学合成抗菌剂等可能产生副作用的化学药物。同时，本产品的制备采用静电纺丝、冷冻干燥法、湿法纺丝法等成熟工艺，可进一步增强蚕丝蛋白膜的降解性。综上，本产品的生物降解性好、生物安全性高，可安全用于各类伤口及慢性创面。
本发明实施例在以往蚕丝蛋白膜这类生物医用材料的基础上，添加了生长因子和天然抗菌剂，相比现有技术，其具有更有效的抗菌和促愈合综合功效，进一步扩大了蚕丝蛋白人工皮肤的应用范围。
在载生长因子/抗菌剂的PLGA微粒基础上，采用蚕丝蛋白对微粒的表面进行改性修饰，形成了机械结构稳定的蚕丝蛋白壳层，以达到生长因子/抗菌剂缓慢释放的目的。同时，由于蚕丝蛋白具有亲水性，改性修饰后的载生长因子/抗菌剂的PLGA微粒的亲水性和生物相容性也得到改善。综上，对缓释微粒的改性修饰，使抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料具备了长效抗菌、促愈合的功效和更好的生物相容性。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (15)

1.一种抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，所述抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料包括蚕丝蛋白溶液、载生长因子缓释微粒以及载抗菌剂缓释微粒，所述蚕丝蛋白溶液、所述载生长因子缓释微粒以及所述载抗菌剂缓释微粒的质量比为30-50：1：1；
所述制备方法包括将所述载生长因子缓释微粒以及所述载抗菌剂缓释微粒加入至所述蚕丝蛋白溶液中，混合均匀得纺丝原液，将所述纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料；
所述抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法还包括制备载生长因子缓释微粒：将含有生长因子的磷酸缓冲盐溶液滴入含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液中，搅拌后离心，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液，冻干后即得；在获得所述载生长因子缓释微粒后，还包括利用蚕丝蛋白对所述载生长因子缓释微粒进行改性；
所述抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法还包括制备载抗菌剂缓释微粒：将含有抗菌剂的磷酸缓冲盐溶液滴入含有第二微粒载体的二氯甲烷溶液中，搅拌后离心，弃上清，加水超声分散并洗涤磷酸缓冲盐溶液，冻干后即得；
在获得所述载抗菌剂缓释微粒后，还包括利用蚕丝蛋白对所述载抗菌剂缓释微粒进行改性；
其中，所述载生长因子缓释微粒包括第一微粒载体以及载于所述第一微粒载体上的生长因子；所述第一微粒载体包括PLA或PLGA；所述生长因子包括碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和真皮细胞生长因子中的一种或多种组合；
所述载抗菌剂缓释微粒包括第二微粒载体以及载于所述第二微粒载体上的抗菌剂；所述第二微粒载体包括PLA或PLGA；所述抗菌剂包括天然抗菌剂；所述天然抗菌剂包括壳聚糖、芦荟、艾蒿、桧柏油、抗菌肽和黄连素中的一种或多种组合。
2.根据权利要求1所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，所述含有生长因子的磷酸缓冲盐溶液中，所述生长因子浓度为1-3mg/ml。
3.根据权利要求2所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，所述含有第一微粒载体的二氯甲烷溶液中，所述第一微粒载体的浓度为5-15mg/ml。
4.根据权利要求2所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，所述生长因子和所述第一微粒载体的质量比为15-25:100。
5.根据权利要求1所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，将所述载生长因子缓释微粒加入去离子水，经超声分散和离心后，去除上清液，加入蚕丝蛋白溶液，混合离心后水洗，利用硼氢化钠溶液终止交联反应，接着离心后水洗，冻干后即得蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
6.根据权利要求5所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，所述硼氢化钠溶液的浓度为20-40mmol/mL。
7.根据权利要求1所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述含有抗菌剂的磷酸缓冲盐溶液中，所述抗菌剂浓度为1-3mg/ml。
8.根据权利要求7所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述含有第二微粒载体的二氯甲烷溶液中，所述第二微粒载体的浓度为5-15mg/ml。
9.根据权利要求7所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述抗菌剂和所述第二微粒载体的质量比为15-25:100。
10.根据权利要求7所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，将所述载抗菌剂缓释微粒加入去离子水，经超声分散和离心后，去除上清液，加入蚕丝蛋白溶液，混合离心后水洗，利用硼氢化钠溶液终止交联反应，接着离心后水洗，冻干后即得蚕丝蛋白改性后的载生长因子缓释微粒。
11.根据权利要求10所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述硼氢化钠溶液的浓度为20-40mmol/mL。
12.根据权利要求1所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法还包括制备蚕丝蛋白溶液：将蚕丝蛋白加入甲酸溶液中溶解获得。
13.根据权利要求12所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述蚕丝蛋白为经加工的纯蚕丝蛋白。
14.根据权利要求12所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料，其特征在于，所述蚕丝蛋白在所述甲酸溶液中溶解的条件为：于25-35℃下溶解2-4h，溶解浓度为8-12%。
15.根据权利要求1所述的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料的制备方法，其特征在于，利用静电纺丝法、冷冻干燥法、盐析法、沥滤法、发泡法和相分离法的任一种将所述纺丝原液制成三维结构的抗菌促愈合的蚕丝蛋白护创材料。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN111317869B (zh) * 2020-02-29 2021-12-31 福建医科大学附属第二医院 一种用于治疗支气管胸膜瘘的可注射水凝胶

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CN103830768A (zh) * 2012-11-21 2014-06-04 深圳兰度生物材料有限公司 可降解创面修复材料及其制备方法
US20140294913A1 (en) * 2013-03-28 2014-10-02 Nesrin Hasirci Biodegradable bone fillers, membranes and scaffolds containing composite particles
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