CN108937989A - 一种组织工程骨血管造影方法及血管插管 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种组织工程骨血管造影方法,包括:1)血管造影剂的调配;2)血管插管;3)血管造影;4)将动物尸体放入0‑4度冰箱中过夜,进行CT扫描或将组织工程骨予以取材后放入福尔马林中固定并进行MicroCT扫描与分析。本发明的有益效果是:本发明采用人体解剖领域用的血管铸型剂氧化铅与明胶溶液,将按比例调配好的溶液直接注入动物血管内,操作简便,并且不需要脱钙即可在CT三维图像上同时显示出成骨和血管化情况,有利于骨组织工程领域对于两者关系的研究;本发明采用的血管插管设有凸起结构,有效防止了血管造影过程中插管脱落,有利于造影剂的稳定注入。
Description
技术领域
本发明专利涉及一种造影方法,尤其涉及一种组织工程骨血管造影方法及血管插管。
背景技术
当前在组织工程领域动物实验中,研究血管化采用的造影剂一般是Microfil,其对分支血管造影效果较好,能在MicroCT等机器上显示血管的生长情况,有利于研究者对血管的形态、数量、体积、密集程度等进行各种定量研究。但其存在明显的缺点,首先是操作较为复杂,由于Microfil是油性溶剂,与血液不相容,在血管造影前,需要先用生理盐水将动物体内血液冲洗干净,并注入福尔马林固定血管,最后才是注入Microfil溶剂。再者是采用这种方法造影后,必须将组织工程骨脱钙才能上机检测血管化,在脱钙的过程中,势必将组织工程骨新生骨脱钙,导致CT上不显影,因此,这种方法只能单纯用于研究血管化,无法同时研究成骨。
当前市售的实验动物用血管插管,在血管造影过程中,插管容易脱落,不利于造影剂的稳定注入。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足,提供一种组织工程骨血管造影方法及血管插管。
这种组织工程骨血管造影方法,包括以下步骤:
步骤一、血管造影剂的调配:采用50-80%红色氧化铅与3-9%明胶的配比,在35-55摄氏度温水中搅拌均匀;
步骤二、血管插管:采用玻璃血管插管,该血管插管的头部为圆管状结构,头部靠前端设有凸起结构,头部后端为膨大部位,膨大部位后端为二通管结构,二通管结构上端设有可控制插管的开关,尾部为尾部接口部位,尾部接口部位与注射器头部相配合;从实验动物的股动脉或腹主动脉插入该插管,插管的头部进入血管,凸起结构使插管进入血管后不易滑出,再加以缝线固定,尾部接口部位接入注射器,灌注液从注射器进入插管,术者通过膨大部位观察管内情况;
步骤三、血管造影:实验动物注射过量麻醉剂处死,将调配好的血管造影剂用注射器抽取,并将取下针头的注射器头部与血管插管对接,用手稍加固定;同时剪开静脉放血,匀速注入血管造影剂,血管造影剂与血液混合,进入血管系统中,皮下可见一些微小血管透出造影剂的红色,剪开的静脉处可见造影剂流出,即为造影成功,用缝线将动静脉均以结扎;
步骤四、将动物尸体放入0-4度冰箱中过夜,进行CT扫描或将组织工程骨予以取材后放入福尔马林中固定并进行MicroCT扫描与分析。
这种血管插管,包括头部、凸起结构、膨大部位、二通管结构、开关和尾部接口部位;头部为细小开口的圆管状结构,头部靠前端设有凸起结构,凸起结构为球形结构,头部后端为膨大部位,膨大部位后端为二通管结构,二通管结构上端设有可控制插管的开关,尾部为尾部接口部位,尾部接口部位与注射器头部相配合;膨大部位的直径较尾部接口部位大。
作为优选:头部与膨大部位衔接处为颈状结构,从头部到膨大部位逐渐变粗。
本发明的有益效果是:本发明采用人体解剖领域用的血管铸型剂氧化铅与明胶溶液,将按比例调配好的溶液直接注入动物血管内,操作简便,并且不需要脱钙即可在CT三维图像上同时显示出成骨和血管化情况,有利于骨组织工程领域对于两者关系的研究。本发明血管插管设有凸起结构,有效防止了血管造影过程中插管脱落,有利于造影剂的稳定注入;中部的膨大部位可使灌注液顺利通过,并使术者容易观察管内情况;插管的二通管结构上端设有可控制插管的开关,操作更为方便。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图;
图2为组织工程支架的血管化(造影剂显示出血管,白色箭头所示);
图3为组织工程支架的成骨和血管化(造影剂显示出血管并且与成骨部分互不干扰,灰色箭头所示);
图4为血管插管的结构示意图。
附图标记说明:头部1、凸起结构2、膨大部位3、二通管结构4、开关5、尾部接口部位6。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步描述。下述实施例的说明只是用于帮助理解本发明。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
以植入实验动物新西兰兔体内的组织工程支架为例,该技术对组织工程支架在动物体内的血管化效果进行分析,并同时可分析成骨效果。所述的组织工程骨血管造影方法,包括以下步骤:
1.优选采用50-80%红色氧化铅与3-9%明胶的配比,在35-55摄氏度温水中搅拌均匀。
2.采用一种定制的具有凸起结构的玻璃血管插管,该血管插管头部1为圆管状结构,头部1靠前端设有凸起结构2,头部1后端为膨大部位3,膨大部位3后端为二通管结构4,二通管结构4上端设有可控制插管的开关5,尾部为尾部接口部位6,尾部接口部位6与一般注射器头部相配合。该血管插管具有较易在动物血管内插管的优点,相比于市售的实验动物用血管插管,特制的凸起结构有效防止了血管造影过程中插管脱落,有利于造影剂的稳定注入。一般多采用从实验动物的股动脉或腹主动脉插入该插管,插管的头部1进入血管,凸起结构2使插管进入血管后不易滑出,再加以缝线固定,尾部接口部位6接入注射器,灌注液从注射器进入插管,术者通过膨大部位3观察管内情况。
3.新西兰兔静脉注射肝素钠注射液后肝素化后,注射过量麻醉剂致死,腹部备皮,取腹部正中切口,依次切开皮肤、皮下组织、肌层及腹膜治疗巾将肠管压向一侧,暴露腹主动脉和下腔静脉。沿着血管床游离腹主动脉和下腔静脉约4cm后,于血管下置线备用。分别在腹主动脉和下腔静脉血管壁上剪一侧空,置入灌注用玻璃插管(远端己连接橡胶软管)并固定。结扎腹主动脉及下腔静脉的近心端,从腹主动脉插管口灌注造影剂,直至下腔静脉插管口有造影剂流出,将两处插管口的橡胶软管予以结扎封闭,关闭腹腔,将尸体置于4℃过夜,取股内侧切口切开皮肤、皮下组织,观察表浅血管中造影剂的充盈情况,轻轻打开包裹组织工程骨的筋膜,观察筋膜内的血管以及与组织工程骨连接的血管,小心取下组织工程骨,分别保留上、下端血管蒂约1cm,取下后4%多聚甲醛固定。
4.将固定后的标本用MicroCT扫描并三维重建,分析所灌注造影剂部分的体积、厚度、分离度等指标,以同样的方法分析样本中的成骨部分,可对比各组间的差异。
所述的血管插管,包括头部1、凸起结构2、膨大部位3、二通管结构4、开关5、尾部接口部位6。头部1为细小开口的圆管状结构,外径1.5mm,有利于插管进入血管。距头部1前端2mm处设有长2mm的凸起结构2,球形的凸起结构2使插管进入血管后不易滑出,再加以缝线固定,可使插管牢固固定于血管内部。距头部1前端19mm处为长30mm的膨大部位3,可使灌注液顺利通过,并使术者容易观察管内情况。膨大部位3后端为二通管结构4,二通管结构4上端设有可控制插管的开关5,开关5长25mm。尾部为尾部接口部位6,长8mm,外径7mm,内径4mm,尾部接口部位6与一般注射器头部相吻合,可直接接入注射器。膨大部位3的直径较尾部接口部位6大,头部1与膨大部位3衔接处为颈状结构,从头部1到膨大部位3逐渐变粗。
Claims (3)
1.一种组织工程骨血管造影方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、血管造影剂的调配:采用50-80%红色氧化铅与3-9%明胶的配比,在35-55摄氏度温水中搅拌均匀;
步骤二、血管插管:采用玻璃血管插管,该血管插管的头部(1)为圆管状结构,头部(1)靠前端设有凸起结构(2),头部(1)后端为膨大部位(3),膨大部位(3)后端为二通管结构(4),二通管结构(4)上端设有可控制插管的开关(5),尾部为尾部接口部位(6),尾部接口部位(6)与注射器头部相配合;从实验动物的股动脉或腹主动脉插入该插管,插管的头部(1)进入血管,凸起结构(2)使插管进入血管后不易滑出,再加以缝线固定,尾部接口部位(6)接入注射器,灌注液从注射器进入插管,术者通过膨大部位(3)观察管内情况;
步骤三、血管造影:实验动物注射过量麻醉剂处死,将调配好的血管造影剂用注射器抽取,并将取下针头的注射器头部与血管插管对接,用手稍加固定;同时剪开静脉放血,匀速注入血管造影剂,血管造影剂与血液混合,进入血管系统中,皮下可见一些微小血管透出造影剂的红色,剪开的静脉处可见造影剂流出,即为造影成功,用缝线将动静脉均以结扎;
步骤四、将动物尸体放入0-4度冰箱中过夜,进行CT扫描或将组织工程骨予以取材后放入福尔马林中固定并进行MicroCT扫描与分析。
2.一种血管插管,其特征在于,包括头部(1)、凸起结构(2)、膨大部位(3)、二通管结构(4)、开关(5)和尾部接口部位(6);头部(1)为细小开口的圆管状结构,头部(1)靠前端设有凸起结构(2),凸起结构(2)为球形结构,头部(1)后端为膨大部位(3),膨大部位(3)后端为二通管结构(4),二通管结构(4)上端设有可控制插管的开关(5),尾部为尾部接口部位(6),尾部接口部位(6)与注射器头部相配合;膨大部位(3)的直径较尾部接口部位(6)大。
3.根据权利要求2所述的血管插管,其特征在于,头部(1)与膨大部位(3)衔接处为颈状结构,从头部(1)到膨大部位(3)逐渐变粗。
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