CN108931639A - 一种唾液中皮质醇检测的芯片及试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种唾液中皮质醇检测的芯片及试剂,所述芯片包括:盖板层和通道层,盖板层覆盖在通道层上;所述通道层包括芯片基体和流体通道,芯片基体一端设有唾液加样池和淋洗液加样池,另一端设有吸水材料,唾液加样池与吸水材料之间通过流体通道依次连通有滤膜、胶体金结合垫、可视化检测区、质控参照区,淋洗液加样池与可视化检测区之间通过流体通道连通有增敏试剂垫A、增敏试剂垫B;盖板层包括盖板基体,盖板基体上设有唾液加样口、淋洗液加样口和结果显示窗。本发明提供的皮质醇检测芯片及试剂,不仅可以实现在现场快速检测唾液中皮质醇,而且比传统胶体金试纸有更高的灵敏度,具有很高的实用价值。
Description
技术领域
本发明涉及皮质醇检测技术领域,特别是涉及一种唾液中皮质醇检测的芯片及试剂。
背景技术
皮质醇是人体主要的糖皮质类固醇,是肾上腺分泌的一种激素。在人体的基础情况下,肾上腺皮质每日分泌15~25mg的皮质醇,其生物合成和分泌受下丘脑-垂体-肾上腺系统(HPA 轴)的调节,有固定的昼夜变化规律,清晨达到最高(峰值),午夜最低(谷值),但当人体受到刺激时,合成与分泌可在1~2分钟之内实现,可短时期内提升人体的生理行为反应,以适应特殊的环境变化。但如果长期处在压力状况下,人体皮质醇水平会长期偏高,这时皮质醇的负面效应开始显现:如引起免疫功能缺陷、认知功能损害、内向羞怯、延迟性成熟、海马体损害以及心理功能失调等。临床上与皮质醇升高有关的疾病为皮质醇增多症、肾上腺肿瘤、垂体前叶功能亢进症等,与皮质醇下降有关的疾病主要有肾上腺皮质功能降低症、垂体前叶功能减退症等。因此,快速筛查、诊断、明确皮质醇功能异常,检测体内皮质醇分泌水平,具有重要的临床和社会意义。
皮质醇可以分别从唾液、尿液和血液中测定。相对于血浆,采用唾液测量皮质醇水平有很多优点,已经成为首选。首先,唾液样本容易取得,非侵入性的不会引起痛感的取样程序不会令被试产生压力,能够增加被试的依从性。其次,取样不需要训练有素的医务人员。第三,可以在较短的时间间隔内重复取样,为在自然状态下追踪被试HPA轴的生理活动提供了可能。最后,唾液皮质醇的浓度大约相当于血浆中的自由皮质醇,也相当于脑脊髓的皮质醇浓度,因而,相对于血浆,测定唾液能给评估大脑皮质醇水平提供一个更直接的指标。
目前,唾液皮质醇检测方法有放射免疫法、酶免疫法、化学发光免疫法、荧光光度法等,这些方法大多操作繁琐、专业性要求高,不适合现场快速检测,因此,如何提供一种可实现唾液皮质醇快速检测的产品是本领域技术人员亟需解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种唾液中皮质醇检测的芯片及试剂,它可以克服现有技术上述的不足,实现唾液中皮质醇的现场、快速、无创检测。
为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
本发明提供了一种唾液中皮质醇快速检测的芯片及试剂,其特征在于,所述芯片包括:盖板层和通道层,所述盖板层覆盖在所述通道层上;
所述通道层包括芯片基体和流体通道,所述芯片基体一端设有唾液加样池和淋洗液加样池,另一端设有吸水材料,所述唾液加样池与所述吸水材料之间通过所述流体通道依次连通有滤膜、胶体金结合垫、可视化检测区和质控参照区,所述淋洗液加样池与所述可视化检测区之间通过所述流体通道连通有增敏试剂垫A、增敏试剂垫B;
所述盖板层包括盖板基体,所述盖板基体上设有唾液加样口、淋洗液加样口和结果显示窗。
可选的,所述流体通道表面为亲水材料,实现待测液体经由所述流体通道移动到所述吸水材料处。
可选的,所述胶体金结合垫包被胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体IgG。
可选的,所述可视化检测区包被皮质醇抗原,用于结合胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体IgG。
可选的,所述质控参照区包被抗鼠IgG,所述抗鼠IgG包括但不限于羊抗鼠IgG。
可选的,所述增敏试剂垫A中含有金属离子试剂硝酸银或者氯金酸中一种,对应所述增敏试剂垫B中含有还原剂氢醌或者抗坏血酸、盐酸羟胺、硼氢化钠、枸橼酸三钠、鞣酸中一种。
本发明还提供了一种唾液中皮质醇检测的试剂,其特征在于,所述试剂为淋洗液,所述淋洗液成分为去离子水或磷酸盐缓冲液,用于溶出所述增敏试剂垫A和所述增敏试剂垫B中试剂,所述淋洗液保存方式包括:直接用试剂瓶保存在所述芯片外,或者以液囊形式设置在所述淋洗液加样池内,所述液囊表面密封,具有在外力作用下破裂的能力,所述外力作用包括:机械按压、手动按压或者利器扎刺中至少一者。
根据本发明提供的具体实施例,本发明公开了以下技术效果:
本发明提供一种唾液中皮质醇快速检测的芯片及试剂,所述芯片操作过程是,将一定量唾液加入唾液加样口,经过数分钟,待质控参照区由于金颗粒聚集显示红色条带时,在淋洗液加样口滴加适量淋洗液,或者,破裂液囊,释放淋洗液,待增敏试剂泳动到可视化检测区和质控参照区,条带变成黑灰色,显色更明显。
若待检唾液样品中不含有皮质醇,则胶体金结合垫中的胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体在泳动过程中先和可视化检测区包被的皮质醇抗原结合,形成肉眼可见的红色条带,多余胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体继续泳动和质控参照区包被的抗鼠IgG结合,也形成肉眼可见的红色条带,进行增敏后,可视化检测区和质控参照区显示两条灰黑色条带。
若待检唾液样品中含有皮质醇,则样品中的皮质醇、可视化检测区包被的皮质醇抗原竞争地和胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体结合,样品中皮质醇越多,其结合的胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体越多,则可视化检测区包被的皮质醇抗原可结合的胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体越少,此时可视化检测区不显色或显色淡,而样品中皮质醇与胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体复合物及剩余胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆继续泳动到质控参照区,与抗鼠IgG结合显色,进行增敏后,可视化检测区不显色或显淡灰色,质控参照区显示灰黑色条带。
若质控参照区不显色,则芯片报废。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例中唾液中皮质醇快速检测芯片的通道层的结构示意图;
图2为本发明实施例中的设置液囊的通道层的结构示意图;
图3为本发明实施例中的盖板层结构示意图;
其中,1-通道层,11-芯片基体,12-流体通道,13-唾液加样池,14-淋洗液加样池,15- 吸水材料,16-滤膜,17-胶体金结合垫,18-可视化检测区,19-质控参照区,110-增敏试剂垫A,111-增敏试剂垫B,112-液囊,2-盖板层,21-盖板基体,22-唾液加样口,23-淋洗液加样口,24-结果显示窗
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明的目的是提供一种唾液中皮质醇检测的芯片及试剂,它可以克服现有技术上述的不足,实现唾液中皮质醇的现场、快速、无创检测。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
本发明提供了一种唾液中皮质醇检测的芯片,如图1所示,包括通道层1,所述通道层包括芯片基体11和流体通道12,所述芯片基体11一端设有唾液加样池13和淋洗液加样池14,另一端设有吸水材料15,所述唾液加样池13与所述吸水材料15之间通过所述流体通道12依次连通有滤膜16、胶体金结合垫17、可视化检测区18和质控参照区19,所述淋洗液加样池14与所述可视化检测区18之间通过所述流体通道12连通有增敏试剂垫A 110、增敏试剂垫B 111;
另外,本发明还提供了一种唾液中皮质醇检测的芯片,如图2所示,所述淋洗液加样池 14内预先设置液囊112,所述液囊表面密封,具有在外力作用下破裂的能力,所述外力作用包括:机械按压、手动按压或者利器扎刺中至少一者。
其中,如图1所示的芯片和如图2所示的芯片,还包括盖板层2,所述盖板层2包括盖板基体21,唾液加样口22、淋洗液加样口23和结果显示窗24,如图3所示,所述盖板层2 位于所述通道层1上方,且与所述通道层1相匹配;所述盖板层2设有与所述唾液加样池13 匹配的唾液加样口22,用于加入待测唾液样品;所述盖板层2还设有与所述淋洗液加样池14 匹配的淋洗液加样口23,用于加入淋洗液。
且所述流体通道12表面为亲水材料,实现待测液体经由所述流体通道12移动到所述吸水材料15处。
所述胶体金结合垫17包被胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体IgG。
所述可视化检测区18包被皮质醇抗原,用于结合胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体 IgG。
所述质控参照区19包被抗鼠IgG,所述抗鼠IgG包括但不限于羊抗鼠IgG。
所述增敏试剂垫A 110中含有金属离子试剂硝酸银或者氯金酸中一种,对应增敏试剂垫 B 111中含有还原剂氢醌或者抗坏血酸、盐酸羟胺、硼氢化钠、枸橼酸三钠、鞣酸中一种。
本发明还提供了一种唾液中皮质醇检测的试剂,所述试剂为淋洗液,所述淋洗液成分为去离子水或磷酸盐缓冲液,用于溶出所述增敏试剂垫A110和所述增敏试剂垫B111中试剂,所述淋洗液保存方式包括:直接用试剂瓶保存在所述芯片外,或者以液囊112形式设置在所述淋洗液加样池14内。
所述芯片及试剂的操作过程包括:将一定量唾液(50-500μl)加入唾液加样口22,经过数分钟(2-10min),唾液经唾液加样池13流入流体通道12,至滤膜16,过滤掉黏蛋白等粘性物质,唾液滤后液流入胶体金结合垫17,与标记的胶体金颗粒一起流入可视化检测区18,在可视化检测区18上反应,剩余液体流至质控参照区19,待质控参照区19由于金颗粒聚集显示红色条带时,在淋洗液加样口23滴加适量淋洗液,或者,破裂液囊112,释放淋洗液,淋洗液经淋洗液加样池14流入流体通道12,至增敏试剂垫A 110和增敏试剂垫B 111,溶出增敏试剂,待增敏试剂泳动到可视化检测区18和质控参照区19,观察结果显示窗24,条带变成黑灰色,显色更明显。
若可视化检测区18不显色,质控参照区19显示灰黑色条带,则判为样品阳性。
若可视化检测区18和质控参照区19均显示灰黑色条带,则判为样品阴性。
若质控参照区19不显色,则芯片报废。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处,各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的系统而言,由于其与实施例公开的方法相对应,所以描述的比较简单,相关之处参见方法部分说明即可。
本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想;同时,对于本领域的一般技术人员,依据本发明的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上所述,本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (7)
1.一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述芯片包括:盖板层(2)和通道层(1),所述盖板层(2)覆盖在所述通道层(1)上;
所述通道层(1)包括芯片基体(11)和流体通道(12),所述芯片基体(11)一端设有唾液加样池(13)和淋洗液加样池(14),另一端设有吸水材料(15),所述唾液加样池(13)与所述吸水材料(15)之间通过所述流体通道(12)依次连通有滤膜(16)、胶体金结合垫(17)、可视化检测区(18)和质控参照区(19),所述淋洗液加样池(14)与所述可视化检测区(18)之间通过所述流体通道(12)连通有增敏试剂垫A(110)、增敏试剂垫B(111);
所述盖板层(2)包括盖板基体(21),所述盖板基体(21)上设有唾液加样口(22)、淋洗液加样口(23)和结果显示窗(24)。
2.根据权利要求1所述的一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述流体通道(12)表面为亲水材料,实现待测液体经由所述流体通道(12)移动到所述吸水材料(15)处。
3.根据权利要求1所述的一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述胶体金结合垫(17)包被胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体IgG。
4.根据权利要求1所述的一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述可视化检测区(18)包被皮质醇抗原,用于结合胶体金标记的鼠抗人皮质醇单克隆抗体IgG。
5.根据权利要求1所述的一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述质控参照区(19)包被抗鼠IgG,所述抗鼠IgG包括但不限于羊抗鼠IgG。
6.根据权利要求1所述的一种唾液中皮质醇检测的芯片,其特征在于:所述增敏试剂垫A(110)中含有金属离子试剂硝酸银或者氯金酸中一种,对应增敏试剂垫B(111)中含有还原剂氢醌或者抗坏血酸、盐酸羟胺、硼氢化钠、枸橼酸三钠、鞣酸中一种。
7.一种唾液中皮质醇检测的试剂,其特征在于:所述试剂为淋洗液,所述淋洗液成分为去离子水或磷酸盐缓冲液,用于溶出所述增敏试剂垫A(110)和所述增敏试剂垫B(111)中试剂,所述淋洗液保存方式包括:直接用试剂瓶保存在所述芯片外,或者以液囊(112)形式设置在所述淋洗液加样池(14)内,所述液囊(112)表面密封,具有在外力作用下破裂的能力,所述外力作用包括:机械按压、手动按压或者利器扎刺中至少一者。
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
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Application publication date: 20181204 |