CN108931412B - 组织切片抗原修复装置和方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种组织切片抗原修复装置，其包括用于固定组织切片的第一玻片；朝向组织切片并且和第一玻片间隔设置的第二玻片；以及环绕组织切片设在第一玻片和第二玻片之间的间隔层，所述第一玻片、第二玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间。本发明还提供一种组织切片抗原修复方法，本发明的组织切片抗原修复装置和方法可以减少组织切片在抗原修复过程中受到的损伤。
Description
技术领域
本发明涉及一种组织切片抗原修复装置和组织切片抗原修复方法，尤其是用于免疫组化抗体染色中所使用的组织切片抗原修复装置和组织切片抗原修复方法。
背景技术
目前，免疫组化方法是临床病理检查及实验病理中已常规应用的手段。用于免疫组化的抗体种类和数量较多，不同抗体对病理切片的抗原修复要求也不尽相同。只有让组织切片的抗原彻底暴露后，多数抗体才能有效与抗原结合，发生特异性免疫染色，如ER、PCNA 等。目前组织抗原修复 (antigen retrieval；AR) 的方法主要采用热修复，包括：微波加热抗原修复法、高压水浴抗原修复法和专用蒸锅抗原修复法。微波加热抗原修复法和专用蒸锅抗原修复法染色效果不如高压水浴抗原修复法，但高压蒸锅抗原修复法对组织切片损伤较大，不宜多次脱染-复染。因此，有必要提供一种即能使得组织切片获得稳定的多次抗原修复效果，又能减少组织切片在多次修复时受到损伤的组织切片抗原热修复装置和方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种即能获得较佳及稳定的多次抗原修复效果并减少组织切片受到损伤的组织切片抗原修复装置和组织切片抗原修复方法。
一种组织切片抗原修复装置，其包括：
用于固定组织切片的第一玻片；
朝向组织切片并且和第一玻片间隔设置的第二玻片；以及
环绕组织切片设在第一玻片和第二玻片之间的间隔层，所述第一玻片、第二玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间。
作为改进，所述间隔层为单层或多层滤纸。
作为改进，所述间隔层为多个与第二玻片一体成型的间隔柱或凸起。
作为改进，所述间隔层为垂直第二玻片设置的侧壁结构，所述侧壁结构包括可以渗水的多个通孔。
作为改进，所述的组织切片抗原修复装置进一步包括用于夹持固定所述第一玻片、第二玻片和间隔层的弹力夹具, 所述间隔层设有夹持部，所述夹持部用于支撑弹力夹具的夹持力。
一种组织切片抗原修复方法，包括：
封装第一玻片上的组织切片，所述封装定义具有渗水结构的收容空间；
将封装后的第一玻片放入具有预设温度的抗原修复液中，然后对组织切片进行预定时间的水浴加热；以及
冷却组织切片。
作为改进，在对组织切片进行水浴加热前，将封装后的第一玻片放入室温抗原修复液中，使抗原修复液渗透至收容空间中对组织切片进行预处理。
作为改进，所述预设温度为95-100°C，所述预定时间为15-30分钟。
作为改进，在冷却组织切片后进一步包括去除对第一玻片上的组织切片的封装
作为改进，所述抗原修复液包括柠康酸酐。
作为改进，所述封装的结构包括：
用于固定组织切片的第一玻片；
朝向组织切片并且和第一玻片间隔设置的第二玻片；以及
环绕组织切片设在第一玻片和第二玻片之间的间隔层，所述第一玻片、第二玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间。
作为改进，所述间隔层为单层或多层滤纸。
作为改进，所述间隔层的厚度为10-30微米。
作为改进，所述间隔层设有夹持部，所述夹持部用于支撑弹力夹具的夹持力。
相对于现有技术，本发明采用组织切片抗原修复装置对需要进行抗原修复的组织切片进行预先封装，然后放入95-100°C的抗原修复液中进行水浴加热，然后冷却，以完成组织切片的抗原修复。由于封装后形成的组织切片抗原修复装置具有较小的收容空间且可以渗水，因此可以有效平衡收容空间内的抗原修复液和收容空间外水浴容器盛装的抗原修复液的温度、成分和pH值，进而既可以保证组织切片在在抗原修复过程中浸泡在具有预设温度的抗原修复液中进行水浴加热，又可以降低处于沸点的抗原修复液在组织切片表面形成的湍流冲击，减少组织切片受到的损伤。因此，相对于现有技术，本发明可以获得多重抗原修复的最佳染色效果，同时减少抗原修复液的使用体积和缩短抗原修复所需的时间。另外，本发明组织切片抗原修复装置不仅适用于石蜡包埋组织切片，而且对新鲜冰冻组织切片和组织芯片的效果也同样明显。
附图说明
图1是本发明第一实施例组织切片抗原修复装置的爆炸结构示意图。
图2是图1所示抗原修复装置的组装结构示意图。
图3是图2沿A-A线的剖面示意图。
图4为替代实施例中间隔层的立体结构示意图。
图5为另一替代实施例中间隔层的结构示意图。
图6为图5实施例中间隔层的剖面结构示意图。
图7为本发明第二实施例提供一种组织切片抗原修复方法的流程示意图。
图8为本发明一替代实施例提供一种组织切片抗原修复方法的操作示意图。
图9为本发明又一替代实施例提供一种组织切片抗原修复方法的流程示意图。
图10为本发明再一替代实施例提供一种组织切片抗原修复方法的操作示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。
请参阅图1-图3，本发明第一实施例提出一种组织切片抗原修复装置100。所述组织切片抗原修复装置100包括用于固定组织切片112的第一玻片110；朝向组织切片112和第一玻片110间隔设置的第二玻片120；以及环绕组织切片112设在第一玻片110和第二玻片120之间的间隔层130，所述间隔层130和组织切片112间隔一定距离。所述第一玻片110、第二玻片120和间隔层130共同定义具有渗水结构的收容空间。较佳实施方式中，所述组织切片112为脱蜡处理后的石蜡包埋组织切片，所述间隔层130的厚度大于所述组织切片的厚度，本实施例中所述间隔层可以为单层或多层滤纸，例如2-3层滤纸层叠。参阅图6，本实施例中所述组织切片的厚度h1为3-8微米，所述间隔层130的厚度h2为10-30微米。
本实施例中，采用弹力夹具140夹持固定所述第一玻片110、第二玻片120和间隔层130。较佳实施例中，所述间隔层130设有夹持部135，所述夹持部135的宽度比其他部分的宽度更大，用于支撑弹力夹具140的夹持力，以防止第二玻片120受力翘曲。较佳实施例中，所述夹持部135的宽度W1大致为10毫米，间隔层非夹持部的宽度W2可以为2毫米左右。本实施例中，所述夹持部135设置在组织芯片或玻片设有标签或标记的一侧,所述弹力夹具140可以为金属或塑料曲别针或长尾票夹，例如1/2”或15mm的长尾票夹。较佳实施例中，弹力夹具140为长尾票夹时，长尾141翻向玻片中央，对第一玻片110、第二玻片120和间隔层130实施辅助夹持。
相对于现有技术，本发明的组织切片抗原修复装置对需要进行抗原修复的组织切片进行封装，封装后的组织切片放入抗原修复液中进行水浴加热，然后冷却，以完成对组织切片的抗原修复。由于本发明的组织切片抗原修复装置具有可以渗水的收容空间，因此既可以保证组织切片在抗原修复过程中浸泡在具有预设温度的抗原修复液中进行水浴加热，又可以降低被加热的抗原修复液在组织切片表面的流动性，减少组织切片受到的损伤。另外，由于本发明的组织切片抗原修复装置定义的收容空间对组织切片有保护作用，因此即使对抗原修复液进行直接高温加热也不影响对组织切片的抗原修复效果，而且可以缩短修复所需的时间。相对于现有技术，本发明的组织切片抗原修复装置不仅可以减少抗原修复液的大量损耗，可以不需要设定预热时间，还可以保持多次脱染后复染的最佳效果，尤其是可以减少组织样本在多重抗原修复过程中的组织切片从第一张玻片的剥脱及擦伤，以及高压锅处理的不安全性。
参阅图4，替代实施例中，所述间隔层130还可以为多个与第二玻片120固定连接的多个间隔柱或间隔凸起131，较佳地，所述多个间隔柱或间隔凸起131与第二玻片120为一体成型结构。
参阅图5-图6，替代实施例中，所述间隔层130为垂直第二玻片120设置的环状侧壁结构，所述侧壁结构包括多个的间隔设置的可以渗水的微通孔133，所述微通孔133延伸的方向平行第二玻片且朝向第二玻片120的中心。
参阅图7,本发明第二实施例提供一种组织切片抗原修复方法，所述方法包括：
步骤S71，封装第一玻片上的组织切片，所述封装定义具有渗水结构的收容空间；
步骤S72,将封装后的第一玻片放入具有预设温度的抗原修复液中以对组织切片进行预定时间的水浴加热；以及
步骤S73，冷却组织切片。
替代实施例中，在冷却组织切片后进一步包括去除对第一玻片上的组织切片的封装的步骤，以方便进行后续实验操作，例如染色。
相对于现有技术，本发明组织切片抗原修复方法对需要抗原修复的组织切片进行预先封装，然后放入抗原修复液中进行水浴加热，然后冷却，以完成组织切片的抗原修复。由于封装后形成的组织切片抗原修复装置具有可以渗水的收容空间，因此既可以保证组织切片在在抗原修复过程中浸泡在具有预设温度的抗原修复液中进行水浴加热，又可以降低被加热的抗原修复液在组织切片表面的流动性，减少组织切片受到的损伤。另外，由于本发明的组织切片抗原修复方法采用具有收容空间的封装对组织切片有保护作用，因此即使对抗原修复液进行直接高温加热也不影响对组织切片的抗原修复效果，因此可以缩短修复所需的时间。另外，由于本发明的组织切片抗原修复方法定义的收容空间对组织切片有保护作用，因此即使对抗原修复液进行直接高温加热也不影响对组织切片的抗原修复效果，而且可以缩短修复所需的时间。本发明的组织切片抗原修复方法不仅可以保持多次染色的最佳效果，还可减少抗原修复液的大量损耗，尤其可以避免组织样本在多重抗原修复过程中受到的损伤，尤其是可以减少组织样本在多重抗原修复过程中的组织切片从第一张玻片的剥脱及撕伤，以及高压锅处理的不安全性。
较佳实施例中，所述预设温度为95-100°C，所述预定时间为15-30分钟，所述抗原修复液包括柠康酸酐。
参考图8，一实施例中，使用第一容器1001装入抗原修复液，将装入抗原修复液的第一容器1001放入蒸锅1002中，使用蒸锅1002或加热炉将抗原修复液预热至60°C，然后再将封装后的第一玻片移入抗原修复液中，将第一容器1001放在蒸锅1002中持续加热至95-100°C，15-30分钟后自然冷却至室温。替代实施例中，使用烧杯装入抗原修复液，然后将封装后的第一玻片放入抗原修复液中，使用加热炉进行持续加热至沸点，15-30分钟后自然冷却至室温。
参考图9，本发明替代实施例提供又一种组织切片抗原修复方法，其进一步包括步骤S74，用于在对组织切片进行水浴加热前，将封装后的第一玻片放入低于预设温度的抗原修复液中，例如放入同室温的抗原修复液中，使抗原修复液渗透至收容空间中对组织切片进行预处理。一具体实施例中，使用第一容器1001装入抗原修复液，将封装后的第一玻片放入第一容器1001内的抗原修复液中进行预处理，然后将第一容器1001放入蒸锅1002中持续加热至95-100°C持续15-30分钟后自然冷却至室温。替代实施例中，使用第一容器1001装入室温抗原修复液，将封装后的第一玻片放入抗原修复液中，直接将第一容器1001放在蒸锅中加热升温，在95-100°C 持续15-30分钟，最后自然冷却至室温。另一具体实施例中，使用烧杯装入室温抗原修复液后, 将封装后的第一玻片放入烧杯内的抗原修复液中淹没进行预处理，然后将烧杯在加热器上直接进行95-100°C的水浴加热15-30分钟，然后自然冷却。
请再次参阅图1-图7，本发明第二实施例组织切片抗原修复方法封装第一玻片后形成的结构包括：用于固定组织切片112的第一玻片110；朝向组织切片112和第一玻片110间隔设置的第二玻片120；以及环绕组织切片112设在第一玻片110和第二玻片120之间的间隔层130，所述间隔层130和组织切片112间隔一定距离，所述第一玻片110、第二玻片120和间隔层130共同定义具有渗水结构的收容空间。较佳实施方式中，所述间隔层130的厚度大于所述组织切片112的厚度，本实施例中所述间隔层可以为单层或多层滤纸。
本实施例中，采用弹力夹具140夹持固定所述第一玻片110、第二玻片120和间隔层130。以防止第二玻片120受力翘曲。较佳实施例中，所述夹持部135的宽度W1大致为10毫米，间隔层非夹持部的宽度W2可以为2毫米左右。本实施例中，所述夹持部135设置在组织芯片或玻片设有标签或标记的一侧,所述弹力夹具140可以为金属或塑料曲别针或长尾票夹，例如1/2”或15mm的长尾票夹。较佳实施例中，弹力夹具140为长尾票夹时，长尾141翻向玻片中央，对第一玻片110、第二玻片120和间隔层130实施辅助夹持。
替代实施例中，所述间隔层130还可以为多个与第二玻片固定连接的多个间隔柱131或凸起131，较佳地，所述多个间隔柱131或凸起131与第二玻片120为一体成型结构。
替代实施例中，所述间隔层130为垂直第二玻片设置的环状侧壁结构，所述侧壁结构包括多个的间隔设置的可以渗水的微通孔133，所述微通孔133延伸的方向平行第二玻片120且朝向第二玻片120的中心。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种组织切片抗原修复装置，其包括：
用于固定组织切片的第一玻片；
朝向组织切片并且和第一玻片间隔设置的第二玻片；以及
环绕组织切片设在第一玻片和第二玻片之间的间隔层，所述第一玻片、第二玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间；
其中，所述间隔层为单层或多层滤纸；
或者，所述间隔层为多个与第二玻片一体成型的间隔柱或凸起；
或者，所述间隔层为垂直第二玻片设置的侧壁结构，所述侧壁结构包括可以渗水的多个通孔。
2.根据权利要求1所述的组织切片抗原修复装置，其特征在于，进一步包括用于夹持固定所述第一玻片、第二玻片和间隔层的弹力夹具，所述间隔层设有夹持部，所述夹持部用于支撑弹力夹具的夹持力。
3.一种组织切片抗原修复方法，其特征在于包括：
封装第一玻片上的组织切片，所述封装定义具有渗水结构的收容空间；
将封装后的第一玻片在具有预设温度的抗原修复液中以对组织切片进行预定时间的水浴加热；以及
冷却组织切片；
所述封装的结构包括：
用于固定组织切片的第一玻片；
朝向组织切片并且和第一玻片间隔设置的第二玻片；以及
环绕组织切片设在第一玻片和第二玻片之间的间隔层，所述第一玻片、第二玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间；
其中，所述间隔层为单层或多层滤纸。
4.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，在对组织切片进行水浴加热前，将封装后的第一玻片放入室温抗原修复液中，使抗原修复液渗透至收容空间中对组织切片进行预处理。
5.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，所述预设温度为95-100℃，所述预定时间为15-30分钟。
6.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，在冷却组织切片后进一步包括去除对第一玻片上的组织切片的封装。
7.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，所述抗原修复液包括柠康酸酐。
8.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，所述间隔层的厚度为10-30微米。
9.根据权利要求3所述的组织切片抗原修复方法，其特征在于，所述间隔层设有夹持部，所述夹持部用于支撑弹力夹具的夹持力。
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