CN108912141A - 革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用 - Google Patents

革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用。所述革兰氏阴性杆菌抑制剂含有式1所示化合物及其药学上可接受的盐，

Description

革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用
技术领域
本发明涉及革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用。
背景技术
近年来，革兰氏阴性杆菌(GNB)感染率逐年增高，成为临床细菌感染的主要病原菌。革兰氏阴性杆菌容易在抗生素选择性压力下获得或者上调耐药基因的表达，使得其耐药问题更为引人关注。而临床上可用药物极少，目前已获批的药物品种主要是多粘菌素E、替加环素和米诺环素等。因此，开发新型抗菌药物，以应对耐药菌的出现，受到越来越多地关注。
蛋白质相互作用在细胞中广泛存在，并且正常相互作用的进行对于细胞正常完成其生理活动具有重要的意义，因此蛋白相互作用是生命活动中广泛而重要的相互作用，是药物靶标研究的另一重要方向。蛋白与蛋白(多肽)之间相互作用研究中常用的技术就是酵母双杂交技术。典型的真核生长转录因子，如GAL4和GCN4等，都含有二个不同的结构域:DNA结合结构域和转录激活结构域。酵母双杂交系统中主要含有两类载体，分别含有真核转录因子的DNA结合域和转录激活结构域，可以与待检测的蛋白融合表达，如果蛋白具有相互作用，两个结构域在空间上接近，从而激活宿主菌报告基因的表达。近几年除了在验证蛋白相互作用方面的应用,酵母双杂交在药物筛选方面也有所应用。
在微生物核糖体组成蛋白中，众多蛋白作为组成型或功能型亚基协同发挥作用。L12是核糖体组成蛋白中唯一的多拷贝蛋白，其编码基因为rplL(393bp)，其中，L12是正常体，L7是N末端丝氨酸氨酰化的蛋白，二者以4:1比例的二聚体形式存在。在核糖体中，L12对于转录的有效性和精确性是重要的，并能够激发转录因子的GTP激酶活性。在L12的N末端有两个与L10结合的部位，L12功能的发挥依赖L10(编码基因为rplJ)将其锚定于大亚基。L12与L10相互作用的正常进行是菌正常生长所必须的；L12和L10编码基因在细菌内具有保守性，而其与人类基因具有很低的同源性，因此具备作为抗菌药物靶标的基本条件。
脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)是一种糖脂复合物，只存在于革兰氏阴性菌的外膜(OM)中，是革兰氏阴性菌有别于革兰氏阳性菌的特征外膜结构成分；LPS层能够保护菌体免受外来物质侵害，同时也是革兰氏阴性菌抵制抗生素的重要保护层，是导致革兰氏阴性菌对抗生素普遍不敏感、固有耐药的机制之一(Nikaido,H，Microbiol.Mol.Biol，2003)。脂多糖的合成在胞内完成，需要转运到外膜部位，来形成外膜脂多糖层。目前已经发现，参与LPS转运的蛋白(Lpt蛋白)主要有七种：嵌在内膜上的复合物LptBFG蛋白、LptC蛋白和LptA蛋白，嵌在外膜上的LptD蛋白以及LptE蛋白(Chng,S.S,Gronenberg,Biochemistry，2010)。目前LPS的转运过程尚不十分清楚，但是普遍认为其可能的作用机制是依靠LptBFG蛋白复合体提供的能量通过内膜，并经由LptC和LptA蛋白形成的桥链传递给外膜的LptD/LptE复合体，进而在外膜组装。Lpt蛋白的缺失会导致LPS在内膜的聚集，LPS层无法正常形成以及菌体的异常，从而导致菌体死亡。因此，脂多糖的转运成为新型抗革兰氏阴性杆菌药物研发的重要靶标。
发明内容
为了解决现有技术中革兰氏阴性杆菌抗菌药物少，以及革兰氏阴性杆菌耐药性等问题，本发明提供革兰氏阴性杆菌抑制剂及其制备和应用。
作为本发明的一个方面，涉及式1所示化合物及其药学上可接受的盐：
其中，
R0独立为甲基，甲氧基，卤素，氢原子，羟基；
R1独立为氢原子，卤素，羟基，氰基，C0-4烷基，C1-4烷氧基；
R2为COOR3，COR3，C0-4烷基，C1-4烷氧基，羟基，芳基，杂芳基，其中任意一芳环或芳杂环被1-2个独立的卤素，C0-4烷基，C1-4烷氧基，氰基，羟基，三氟甲基取代；
X为氮原子或碳原子；
Y为C0-18烷基；
R3为氢，COOC1-4烷基，C1-4烷氧基，芳基，杂芳基，C0-4烷基环烷基。
作为本发明的另一个方面，涉及一种革兰氏阴性杆菌抑制剂，所述抑制剂含有上述化合物及其药学上可接受的盐。
在具体实施例中，所述抑制剂比如可以含有如下化合物中的一种或多种及其药学上可接受的盐：
6-氯-3-(苯丙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-苯基丁基-2-基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氯苄基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(3-溴苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氯苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4,4-二甲氧基丁基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉和6-氟-3-(吡啶-4-基-甲基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉。
在具体实施例中，所述革兰氏阴性杆菌为大肠杆菌。
在具体实施例中，所述抑制剂还含有药学上可接受的药剂辅料。
作为本发明的又一方面，涉及上述革兰氏阴性杆菌抑制剂的方法：所述抑制剂为所述化合物及其药学上可接受的盐与药学上可接受的药剂辅料混合制得。
作为本发明的再一方面，涉及一种药物，含有上述革兰氏阴性杆菌抑制剂。在一具体实施例中，所述抑制剂可以是压片、分散片、粉剂或针剂。可按常规方式配制，使用一种或多种生理学上可接受的载体、赋形剂和助剂，有利于将活性化合物加工成可药用制剂。适当的制剂取决于所选择的给药途径，可以按照本领域熟知的方法进行制备。
作为本发明的又一方面，涉及上述革兰氏阴性杆菌抑制剂在制备预防或治疗革兰氏阴性杆菌相关疾病中的应用。
在具体实施例中，所述革兰氏阴性杆菌相关疾病是指消化道和呼吸道等传染性疾病……
本发明还涉及上述革兰氏阴性杆菌抑制剂在预防或治疗革兰氏阴性杆菌相关疾病中的应用。
本发明提供的革兰氏阴性杆菌抑制剂及其应用，至少可以有效抑制革兰氏阴性杆菌的生长繁殖，进而为预防和治疗革兰氏阴性杆菌相关疾病提供了条件。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。由本申请的申请人所制备的菌株，在以实施本申请的技术方案为目的时，可以由本申请的申请人处获取。
本申请所称革兰氏阴性杆菌相关疾病是指，一切由革兰氏阴性杆菌直接或间接引起或与革兰氏阴性杆菌的生产和繁殖有关的疾病，包括革兰氏阴性杆菌导致的感染，以及基于该感染所引发的各种并发症。
本发明人经过创造性的劳动和大量的试验，惊奇地发现，LptC和LptA蛋白在酵母细胞中能够相互作用，使得酵母双杂交系统载体中的真核转录因子的DNA结合结构域和转录激活结构域在空间上也相互接近，形成完整的转录因子，从而激活宿主菌报告基因的表达。本发明人基于此建立了LptC和LptA蛋白的相互作用阻断剂的体外高通量筛选模型，并利用此模型对4000个化合物进行筛选，成功发现了具有体外抗大肠杆菌活性的阳性候选化合物，并在此化合物基础上进行了系列衍生物的合成及活性评价。
同时本发明人也参考结核杆菌L12/L10相互作用的酵母双杂交模型的构建方法构建了大肠杆菌L12/L10相互作用模型，对上述合成化合物在此模型上进行了评价。
发明人构建了大肠杆菌LptA/LptC相互作用的酵母双杂交模型以及L1O/L12相互作用的酵母双杂交模型。
在此发明中,涉及的酵母细胞为AH109，所用的转录因子为GAL4。具体构建方法参考文献Identi□cation of antituberculosis agents that target ribosomal proteininteractions using a yeast two-hybrid system(PNAS，2012，Oct 07)，本发明改变的是在酵母细胞中共表达的基因，文献中的结核杆菌的L12与L10基因改变成大肠杆菌的L12与L0基因或者LptA与LptC基因。
(一)大肠杆菌LptA/LptC酵母双杂交模型的构建
酵母双杂交系统购买自clontech公司。该系统包含有两个表达载体pGBKT7和pGADT7，其中pGBKT7带有转录因子GAL4的转录激活结构域(AD)，pGADT7带有转录因子GAL4的DNA结合结构域(BD)。在构建的酵母模型中，LptA的编码基因与AD位于载体pGBKT7(命名为AD-LptA)，LptC的编码基因与BD位于载体pGADT7(命名为BD-LptC)。LptC蛋白的编码基因的核苷酸序列GeneID:947722，LptA蛋白的编码基因的核苷酸序列GeneID:947920。二者共转入宿主菌AH109细胞中,构建酵母双杂交模型AH109(AD-LptA+BD-LptC)，共表达两个蛋白。
同时系统中自带已经构建好的载体pGBKT7(AD/T)、pGADT7(BD/p53)和pGADT7(BD/Lam)，分别带有T抗原、p53蛋白和Lam蛋白的编码基因。其中T抗原和p53蛋白之间具有相互作用，其共表达菌可作为阳性对照；T抗原和Lam两个蛋白之间无相互作用，可用于阴性对照。
具体制备方法如下：
将重组质粒AD-LptA和BD-LptC通过LiAc方法共转化入感受态酵母菌AH109中，在缺陷性培养基SD/-Trp-Leu上培养。挑取阳性克隆进行LptC和LptA相互作用的验证：将阳性克隆转接到缺陷性培养基SD/-Trp-Leu-His-Ade上，能够正常生长。通过β-半乳糖苷酶活性检测，进一步验证了LptC和LptA的相互作用，将此阳性克隆命名为AH109(AD-LptA+BD-LptC)。同样方法共转入pGBKT7(AD/T)与pGADT7(BD/p53)，得到阳性克隆AH109(AD-T+BD-p53)，作为制备过程的阳性对照已经后续筛选中的对照菌；共转入pGBKT7(AD/T)和pGADT7(BD/Lam)，得到阳性克隆AH109(AD-T+BD-Lam)，作为制备过程中的阴性对照。
(二)大肠杆菌L12/L10酵母双杂交模型的构建。
本发明还涉及另一种酵母双杂交模型细胞AH109(AD-L12+BD-L10)，该细胞共表达大肠杆菌L12和L10蛋白，并且能检测这两个蛋白相互作用。该重组酵母菌的构建参照上述AH109(AD-LptA+BD-LptC)的实施方案。其中L12的编码因子与转录因子GAL4的AD结构域位于表达载体pGBKT7(命名为AD-L12)，L10的编码基与GAL4的BD结构域位于表达载体pGADT7(命名为BD-L10)。L12蛋白的氨基酸序列为GenBank:BAE77334.1，L10蛋白的氨基酸序列为Gene ID:948489，L2蛋白的编码基因的核苷酸序列为GenBank:BAE77335.1，L10蛋白的编码基因的核苷酸序列为Gene ID:948490。同样做阴性对照和阳性对照。
实施例1：LptA和LptC酵母双杂交系统的构建
1.LptA和LptC基因的制备
以大肠杆菌标准株25922总cDNA(本室保存；也可商购菌株然后用本领域人员熟知的方法例如cDNA提取试剂盒制备得到大肠杆菌25922总cDNA)为模板，设计引物1和2，引物3和4，使用TaKaRa公司的高保真PrimeSTAR HS DNA聚合酶，通过PCR方法得到LptA和LptC的编码基因。具体克隆方法及引物如下：
1)扩增LptA的编码基因的引物：
引物1:5’-TCCATATGGCAAAGCTCTCCACCGACG-3’(SEQ ID No.1)
(下划线部分为NdeI酶切位点)
引物2:5’-GCGGATCCACACGCTGGGCAGAGCTAC-3’(SEQ ID No.2)
(下划线部分为BamH I酶切位点)
2)扩增LptC的编码基因的引物：
引物3:5’-TCCATATGGCCAGGGCTGACAAG-3’(SEQ ID No.3)
(下划线部分为Nde I酶切位点)
引物4:5’-GCGGATCCTGGGTGACTACTCGG-3’(SEQ ID No.4)
(下划线部分为BamH I酶切位点)
PCR方法按照TaKaRa公司的高保真PrimeSTAR HS DNA聚合酶的说明书推荐的步骤进行。PCR产物回收后，与pEASY-Blunt simple载体连接。
2.重组表达载体的构建
上述各片段经酶切后，回收酶切产物。pGBKT7和pGADT7载体经Nde I，BamH I双酶切后，回收线性载体，并分别与LptA和LptC的编码基因各片段连接，成功构建表达载体AD-LptA和BD-LptC。其中：
酶切体系如下：
连接体系如下：
3.酵母感受态细胞的制备及转化
1)将6ml酵母培养液在室温下5,000g离心5min。弃上清，用1.5ml超纯水重悬洗涤，室温6,000g离心5min。弃上清，沉淀重悬于20μl 10×TE、20μl 1×LiAc、160μl超纯水，即为酵母感受态细胞(1h内用完)。
2)在EP管中加入下列组分：
然后加入酵母感受态细胞，均匀混合后加入0.6mL的无菌PEG/LiAc solution，30℃，220rpm培养30min。
3)加入70μL的DMSO，轻柔混匀，42℃水浴热激15min，冰水浴1-2min，室温离心5min，1,000×g离心，弃上清，将细胞重悬于1mL的1×TE溶液。
4.阳性克隆的获得
将转化后的酵母细胞涂布在二缺培养基SD/–Leu/–Trp plate上，将平板置于30℃，培养48h。挑取二缺培养板上的单克隆涂布在四缺平板SD/–Ade/–His/–Leu/–Trp plate上，挑取平板上的单克隆，30℃，培养48h，保种待用。
5.β-半乳糖苷酶的活性测定
1)将上述阳性克隆酵母菌培养在液体SD/–Ade/–His/–Leu/–Trp培养基中，30℃，培养48h，测定菌培养液的OD660值并记录。
2)β-半乳糖苷酶微孔板测定在冰上解冻，2×β-D-galactosidase测定Buffer，混合同体积的测定Buffer和Y-PER制备成工作液。每孔加入70μL的菌培养液和70μL的工作液。将四缺培养基加入到孔中作为空白对照。
3)用计时器控制反应时间，当加入70μL工作液到孔中开始计时,当出现黄颜色时，加入56μL的β-D-galactosidase测定终止液，15s后停止计时，记录反应时间测定A420。应用方程计算活性值：
t＝time(in minutes)of incubation
V＝volume of cell(mL)used in assay
本申请的筛选过程用到的细胞模型包括：模型菌AH109(AD-LptA+BD-LptC)，用于筛选LptA和LptC相互作用的阻断剂，同时以AH109(AD-T+BD-p53)做对照菌；模型菌AH109(AD-L12+BD-L10)，用于筛选L10与L12相互作用的阻断剂，同时以AH109(AD-T+BD-p53)作为对照菌。
筛选过程包括下述步骤：
1分别向上述细胞模型培养物中加入待测化合物，使化合物的终浓度为10μg/ml，继续进行培养12－36小时；观察细胞的生长情况，对模型菌具有抑制作用，而对对照菌无抑制活性判断为初筛阳性，通过此方法得到初筛阳性的化合物或组合物。
2.将初筛阳性的化合物进行β-半乳糖苷酶活性抑制检测。
将模型菌AH109(AD-LptA+BD-LptC)、对照菌AH109(AD-T+BD-53)在缺陷性培养基SD/-Trp-Leu-His-Ade中30℃过夜培养至对数生长期。之后，将50μl过夜培养细胞以1:100比例转接至5ml缺陷性培养基SD/-Leu/-Trp中，同时，加入20μg/ml的化合物，继续培养。以加等量DMSO的培养物作为空白对照。24h后收集细胞，按照模型构建中提及的方法做β-半乳糖苷酶活性定量检测。以无药对照菌的酶活性作为100％，100％减去加药组的酶活性相对空白对照酶活性的比值作为抑制率。
对L12/L10相互作用阻断剂的筛选参照上述LptA/LptC相互作用阻断剂的筛选方法。
通过对超过4000个化合物的筛选，得到对LptC和LptA蛋白相互作用阻断活性的阳性化合物6-氯-3-(苯丙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉以及对L12和L10相互作用阻断活性的化合物6-氟-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉和6-氟-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉。
发明人在筛选得到的阳性化物基础上合成系列衍生物，并经过再次筛选，得到有活性的多个衍生物，概括得到以下通式化合物：
其中
R0独立为甲基，甲氧基，卤素，氢原子，羟基；
R1独立为氢原子，卤素，羟基，氰基，C0-4烷基，C1-4烷氧基；
R2为COOR3，COR3，C0-4烷基，C1-4烷氧基，羟基，芳基，杂芳基，其中任意一芳环或芳杂环被1-2个独立的卤素，C0-4烷基，C1-4烷氧基，氰基，羟基，三氟甲基取代；
X为氮原子或碳原子；
Y为C0-18烷基；
R3为氢，COOC1-4烷基，C1-4烷氧基，芳基，杂芳基，C0-4烷基环烷基；
部分示例化合物见下表：
对这些化合物的活性进行进一步的评价，按照筛选中所示方法，对合成的21个阳性化合物在AH109(AD-LptA+BD-LptC)、AH109(AD-L12+BD-L10)和AH109(AD-T+BD-53)模型上进行最小抑制浓度(MIC)的检测，受试化合物浓度自50μg/ml起两倍稀释，以评价化合物对LptA/LptC或L12/L10相互作用的特异性阻断的强弱。同时对21个化合物按照上述β-半乳糖苷酶活性抑制检测方法在模型上进行进一步评价，化合物作用浓度为20μg/ml。对21个化合物进行抗大肠杆菌ATCC25922最小抑制活性测定(MIC)。
化合物对大肠杆菌标准株ATCC25922具有一定的生长抑制活性，其最小抑制活性(MIC)自1.56μg/ml到12.5μg/ml不等，化合物8和化合物11均高于25μg/ml，抗菌活性较弱。其中化合物1、3、4、10、15和19作用下均对AH109(AD-LptA+BD-LptC)表现出特异性的抑制活性(表1)，这些化合物在20μg/ml时，AH109(AD-LptA+BD-LptC)细胞内的β-半乳糖苷酶活性明显低于AH109(AD-T+BD-p53),表现出较强的特异性抑制活性(表2)。化合物8，10，12，15，17和18均对AH109(AD-L12+BD-L10)表现出一定的抑制活性(表3)，这些化合物在20μg/ml时，AH109(AD-L12+BD-L10)细胞内的β-半乳糖苷酶活性明显低于AH109(AD-T+BD-p53)，表现出较强的特异性抑制活性(表4)。
表1：化合物对酵母模型及大肠杆菌标准株的最小抑制活性(MIC)
表2：化合物作用下AH109(AD-LptA+BD-LptC)和AH109(AD-T+BD-p53)的β-半乳糖苷酶相对活性(％)
表3：化合物对酵母模型及大肠杆菌标准株的最小抑制活性(MIC)
表4：化合物对AH109(AD-L12+BD-L10)和AH109(AD-T+BD-p53)的β-半乳糖苷酶抑制活性(MIC)
实施例化合物的制备
实施例1：6-氯-3-(苯丙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
取多聚甲醛752mg，苯丙胺液体474.7μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL干燥的1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉300mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体334mg，收率：59.2％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.99(dd,J＝1.52,J＝4.16,1H)；8.54(dd,J＝1.52,J＝8.52,1H)；7.55(dd,J＝4.16；J＝8.52,1H)；7.21-7.34(m,6H)；5.20(s,2H)；4.17(s,2H)；2.90(t,J＝7.36,2H)；2.72(t,J＝7.56,2H)；1.97(m,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+339.12。
实施例2：6-氯-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，3-溴代苯乙胺液体237.7μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体201mg，收率：60.2％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.99(d,J＝4.16,1H)；8.53(d,J＝8.52,1H)；7.56(dd,J＝4.16；J＝8.52,1H)；7.39(s,1H)；7.35(m,1H)；7.30(s,1H)；7.16(m,2H)；5.21(s,2H)；4.19(s,2H)；3.13(t,J＝7.04,2H)；2.92(t,J＝7.96,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+403.08。
实施例3：6-氯-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛150mg，4-羟基苯乙胺115mg，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体211mg，收率：74.0％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.97(dd,J＝1.4,J＝4.16,1H)；8.52(dd,J＝1.4,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.16；J＝8.52,1H)；7.30(s,1H)；7.05(d,J＝8.36,2H)；6.78(d,J＝8.36,2H)；5.18(s,2H)；4.19(s,2H)；3.08(t,J＝7.2,2H)；2.85(t,J＝8.24,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+341.81。
实施例4：6-氯-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，4-甲基苯乙胺液体242.8μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体198mg，收率：69.9％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.98(d,J＝4.16,1H)；8.53(d,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.16；J＝8.52,1H)；7.30(s,1H)；7.12(m,4H)；5.22(s,2H)；4.19(s,2H)；3.13(t,J＝7.04,2H)；2.92(t,J＝7.96,2H)；2.33(s,3H).MS(ESI)m/z[M+H]+339.79。
实施例5：6-氯-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛150mg，3,4-二甲氧基苯乙胺液体140μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体163mg，收率：50.7％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.95(d,J＝4.04,1H)；8.49(d,J＝8.48,1H)；7.51(dd,J＝4.04；J＝8.48,1H)；7.24(m,1H)；6.88(m,1H)；6.75(m,2H)；5.19(s,2H)；4.16(s,2H)；3.84(s,6H)；3.10(t,J＝7.12,2H)；2.88(t,J＝8.12,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+385.82。
实施例6：6-氯-3-(4-苯基丁基-2-基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛150mg，1-甲氧-3苯基丙胺液体135.5μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氯-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体225mg，收率：76％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.97(d,J＝4.08,1H)；8.52(d,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.08；J＝8.52,1H)；7.20-7.33(m,3H)；6.94(t,J＝7.32,1H)；6.88(d,J＝8.04,2H)；5.26(s,2H)；4.18(s,2H)；3.84(s,6H)；3.12(m,2H)；2.72(m,4H)；1.18(d,J＝6.56,3H).MS(ESI)m/z[M+H]+353.82。
实施例7：6-溴-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛150mg，4-氟苯乙胺液体135.5μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体210mg，收率：81.0％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.94(dd,J＝1.36,J＝4.08,1H)；8.47(dd,J＝1.36,J＝8.52,1H)；7.53(dd,J＝4.08；J＝8.52,1H)；7.45(s,1H)；7.17(m,2H)；6.97(m,2H)；5.20(s,2H)；4.17(s,2H)；3.10(t,J＝7.08,2H)；2.91(t,J＝7.96,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+388.25。
实施例8：6-溴-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛150mg，苯乙胺液体151μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体163mg，收率：65.9％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.96(dd,J＝1.60,J＝4.20,1H)；8.50(dd,J＝1.60,J＝8.52,1H)；7.55(dd,J＝4.20；J＝8.52,1H)；7.23(m,3H)；6.88(m,2H)；5.22(s,2H)；4.20(s,2H)；3.14(t,J＝6.92,2H)；2.95(t,J＝8.16,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+370.26。
实施例9：6-溴-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，4-甲基苯乙胺液体242.8μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体210mg，收率：82.0％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.96(dd,J＝1.60,J＝4.20,1H)；8.49(dd,J＝1.60,J＝8.56,1H)；7.54(dd,J＝4.20；J＝8.56,1H)；7.27(m,2H)；6.88(m,2H)；5.22(s,2H)；4.20(s,2H)；3.12(t,J＝7.04,2H)；2.90(t,J＝8.16,2H)；2.34(s,3H).MS(ESI)m/z[M+H]+384.30。
实施例10：6-溴-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，3，4-二甲氧基苯乙胺液体282μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体206mg，收率：71.5％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.91(dd,J＝1.60,J＝4.20,1H)；8.44(dd,J＝1.60,J＝8.56,1H)；7.50(dd,J＝4.20；J＝8.56,1H)；7.42(s,1H)；6.75(m,3H)；5.19(s,2H)；4.16(s,2H)；3.85(s,6H)；3.09(t,J＝7.16,2H)；2.91(t,J＝8.16,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+430.32。
实施例11：6-溴-3-(4-氯苄基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，4-氯苯乙胺液体203.2μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体220mg，收率：82.3％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.93(dd,J＝1.60,J＝4.16,1H)；8.43(dd,J＝1.60,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.16；J＝8.52,1H)；7.36(s,1H)；7.22(m,4H)；5.16(s,2H)；4.05(s,2H)；3.58(s,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+390.70。
实施例12：6-溴-3-(3-溴苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，3-溴苯乙胺液体260μL，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体189mg，收率：63％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.95(dd,J＝1.60,J＝4.20,1H)；8.48(dd,J＝1.60,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.20；J＝8.52,1H)；7.46(s,1H)；7.36(m,2H)；7.16(m,2H)；5.20(s,2H)；4.18(s,2H)；3.12(t,J＝7.08,2H)；2.91(t,J＝7.88,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+449.17。
实施例13-：6-溴-3-(4-氯苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，4-氯苯乙胺233.7mg，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体187mg，收率：69.5％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.95(dd,J＝1.64,J＝4.20,1H)；8.48(dd,J＝1.64,J＝8.52,1H)；7.54(dd,J＝4.20；J＝8.52,1H)；7.46(s,1H)；7.29(m,2H)；7.17(m,2H)；5.20(s,2H)；4.18(s,2H)；3.12(t,J＝6.96,2H)；2.91(t,J＝8.00,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+404.71。
实施例14：6-溴-3-(4,4-二甲氧基丁基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛376mg，4-氨基丁醛缩二乙醇288.6mg，加入到50ml三颈瓶中，加入15mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-溴-8-羟基喹啉150mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体196mg，收率：76.8％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.91(dd,J＝1.56,J＝4.20,1H)；8.44(dd,J＝1.56,J＝8.52,1H)；7.50(dd,J＝4.20；J＝8.52,1H)；7.43(s,1H)；5.15(s,2H)；4.49(m,1H)；4.13(s,2H)；3.65(m,2H)；3.49(m,2H)；2.65(t,J＝67.28,2H)；1.20(m,6H).MS(ESI)m/z[M+H]+382.28。
实施例15：6-氟-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，4-氟苯乙胺液体80.4μL，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体178mg，收率：81.6％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.94(dd,J＝1.68,J＝4.20,1H)；8.35(dd,J＝1.68,J＝8.44,1H)；7.46(dd,J＝4.20；J＝8.44,1H)；7.17-7.13(m,2H)；6.97-6.92(m,2H)；6.84(d,J＝9.56,1H)；5.14(s,2H)；4.14(s,2H)；3.07(t,J＝8.04,2H)；2.89(t,J＝8.04,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+327.36。
实施例16：6-氟-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，苯乙胺液体77.2μL，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体99mg，收率：52.6％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.97(dd,J＝1.72,J＝4.24,1H)；8.39(dd,J＝1.68,J＝8.44,1H)；7.50(dd,J＝4.24；J＝8.44,1H)；7.32(m,2H)；7.30(m,3H)；6.88(d,J＝9.56,1H)；5.20(s,2H)；4.19(s,2H)；3.16(t,J＝6.96,2H)；2.97(t,J＝8.20,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+309.29。
实施例17：6-氟-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，4-甲基苯乙胺液体89μL，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体124mg，收率：62.9％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.94(dd,J＝1.68,J＝4.20,1H)；8.35(dd,J＝1.68,J＝8.44,1H)；7.45(dd,J＝4.20；J＝8.44,1H)；7.08(m,4H)；6.83(d,J＝9.56,1H)；5.15(s,2H)；4.14(s,2H)；3.09(t,J＝8.12,2H)；2.88(t,J＝8.12,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+323.37。
实施例18：6-氟-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，3-溴苯乙胺液体87μL，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体163mg，收率：68.7％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.94(dd,J＝1.68,J＝4.24,1H)；8.35(dd,J＝1.68,J＝8.44,1H)；7.46(dd,J＝4.24；J＝8.44,1H)；7.35-7.31(m,2H)7.13-712(m,2H)；6.84(d,J＝9.52,1H)；5.14(s,2H)；4.14(s,2H)；3.10(t,J＝8.08,2H)；2.88(t,J＝8.08,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+388.26。
实施例19：6-氟-3-(4-甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，4-甲氧基苯乙胺液体90μL，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体140mg，收率：67.6％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.98(dd,J＝1.72,J＝4.24,1H)；8.39(dd,J＝1.72,J＝8.44,1H)；7.49(dd,J＝4.24；J＝8.44,1H)；7.16(m,2H)；6.84(m,3H)；5.19(s,2H)；4.18(s,2H)；3.11(t,J＝7.12,2H)；2.90(t,J＝8.08,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+339.40。
实施例20：6-氟-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，4-羟基苯乙胺84mg，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体68mg，收率：34.3％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.97(dd,J＝1.64,J＝4.20,1H)；8.40(dd,J＝1.64,J＝8.44,1H)；7.50(dd,J＝4.20；J＝8.44,1H)；7.06(m,2H)；6.89(d,J＝9.56,1H)；6.79(m,2H)；5.15(s,2H)；4.18(s,2H)；3.08(t,J＝7.28,2H)；2.86(t,J＝8.28,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+325.35。
实施例21：6-氟-3-(吡啶-4-基-甲基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉的合成
合成过程类似于实施例1，取多聚甲醛100mg，4-吡啶甲胺56.5mg，加入到10ml三颈瓶中，加入5mL 1，4-二氧六环搅拌溶解，加热至75℃反应30min，然后将5-氟-8-羟基喹啉100mg加入到反应瓶中，保持75℃搅拌过夜。TLC检测反应完全后，直接硅胶拌样，柱色谱分离，二氯甲烷：甲醇(30：1，v/v)为流动相洗脱，得到标题化合物，为浅黄色固体63mg，收率：35.0％.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.98(dd,J＝1.64,J＝4.20,1H)；8.59(d,J＝6.0,2H)；8.51(dd,J＝1.64,J＝8.56,1H)；7.54(dd,J＝4.20；J＝8.56,1H)；7.32(d,J＝6.0,2H)；7.20(s,1H)；5.19(s,2H)；4.08(s,2H)；4.03(s,2H).MS(ESI)m/z[M+H]+296.31。
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (10)

1.式1所示化合物及其药学上可接受的盐：
其中，
R0独立为甲基，甲氧基，卤素，氢原子，羟基；
R1独立为氢原子，卤素，羟基，氰基，C0-4烷基，C1-4烷氧基；
R2为COOR3，COR3，C0-4烷基，C1-4烷氧基，羟基，芳基，杂芳基，其中任意一芳环或芳杂环被1-2个独立的卤素，C0-4烷基，C1-4烷氧基，氰基，羟基，三氟甲基取代；
X为氮原子或碳原子；
Y为C0-18烷基；
R3为氢，COOC1-4烷基，C1-4烷氧基，芳基，杂芳基，C0-4烷基环烷基。
2.革兰氏阴性杆菌抑制剂，其特征在于，所述抑制剂含有权利要求1所述式1所示化合物及其药学上可接受的盐。
3.权利要求2所述革兰氏阴性杆菌抑制剂，其特征在于，所述抑制剂含有如下化合物中的一种或多种及其药学上可接受的盐：
6-氯-3-(苯丙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氯-3-(4-苯基丁基-2-基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(3,4-二甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氯苄基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(3-溴苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4-氯苯基乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-溴-3-(4,4-二甲氧基丁基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-氟苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-甲基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(3-溴苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-甲氧基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉、6-氟-3-(4-羟基苯乙基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉和6-氟-3-(吡啶-4-基-甲基)-3,4-双氢-2H-[1,3]噁嗪[5,6-h]喹啉。
4.权利要求2或3任一项所述革兰氏阴性杆菌抑制剂，其特征在于，所述革兰氏阴性杆菌为大肠杆菌。
5.权利要求2或3任一项所述革兰氏阴性杆菌抑制剂，其特征在于，所述抑制剂还含有药学上可接受的药剂辅料。
6.制备权利要求2或3任一项所述革兰氏阴性杆菌抑制剂的方法，其特征在于，所述抑制剂为所述化合物及其药学上可接受的盐与药学上可接受的药剂辅料混合制得。
7.一种药物，其特征在于，含有权利要求2-6任一项所述的革兰氏阴性杆菌抑制剂。
8.权利要求7所述药物，其特征在于，所述药物制剂为压片、分散片、粉剂或针剂。
9.权利要求2或3任一项所述革兰氏阴性杆菌抑制剂在制备预防或治疗革兰氏阴性杆菌相关疾病中的应用。
10.权利要求9所述应用，其特征在于，所述革兰氏阴性杆菌相关疾病是指消化道和呼吸道等感染性疾病。
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