CN108845132A - 试剂材料和有关的试验元件 - Google Patents

试剂材料和有关的试验元件 Download PDF

Info

Publication number
CN108845132A
CN108845132A CN201810736125.9A CN201810736125A CN108845132A CN 108845132 A CN108845132 A CN 108845132A CN 201810736125 A CN201810736125 A CN 201810736125A CN 108845132 A CN108845132 A CN 108845132A
Authority
CN
China
Prior art keywords
case
reagent material
indicate
dehydrogenase
enzyme
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810736125.9A
Other languages
English (en)
Inventor
C.D.威尔西
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Hoffmann La Roche Inc
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN108845132A publication Critical patent/CN108845132A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/001—Enzyme electrodes
    • C12Q1/005—Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes
    • C12Q1/006—Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes for glucose

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cell Biology (AREA)

Abstract

提供了试剂材料和有关的试验元件。在一个实施方案中，具有双功能性的试验元件包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物、第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物、以及选自硫代‑NAD、硫代‑NADP和根据式(I)的化合物的辅酶。在一个方面，所述第一种分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶，且所述第二种分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。主题申请的其它方面涉及独特的试剂材料。其它实施方案、形式、目标、特征、优点、方面和益处将从说明书和附图显而易见。

Description

试剂材料和有关的试验元件
本申请是以下申请的分案申请：申请日：2013年10月31日 ；申请号：201380057254.0(PCT/EP2013/072754)；发明名称：同上。
背景技术
一次用弃的试验元件的使用在测量选定的分析物在试验样品中的存在和/或浓度时已经变成很常见。例如，遭受糖尿病和类似医学病症的患者经常进行血糖的自我监测，其中所述患者监测其血糖水平。监测血糖水平的目的是确定浓度水平，并且如果必要的话，如果所述水平过高或过低，则采取矫正行动，以使所述水平回到可接受的范围内。不能采取矫正行动可以具有严重的医学影响。葡萄糖监测是糖尿病个体的日常生活中的一个事实，并且这样的监测的准确度可以确实地指示生存和死亡之间的差异。不能正常地维持血糖在可接受的水平可以导致严重的糖尿病相关的并发症，包括心血管疾病、肾脏疾病、神经损伤和失明。
加强性地管理他们的血糖的糖尿病患者会经历持久的益处。糖尿病控制和并发症试验(Diabetes Control and Complications Trial，DCCT)是由国家糖尿病以及消化疾病和肾疾病研究所(National Institute of Diabetes and Digestive and KidneyDiseases，NIDDK)在1983年至1993年进行的临床研究。DCCT将加强治疗与常规治疗进行了对比。用每天至少3次的胰岛素注射或胰岛素泵，并经常自我监测血糖水平，接受加强治疗的患者保持葡萄糖水平尽可能接近正常水平。加强治疗的目的是保持血红蛋白A1c(HbA1c)尽可能接近正常水平，所述血红蛋白A1c反映了在2-3个月时段内的平均血糖。常规治疗由每天1或2次胰岛素注射组成，进行每天一次的尿或血糖试验。DCCT研究的结果表明，保持血糖水平尽可能接近正常水平，会减慢由糖尿病造成的眼、肾和神经疾病的发作和进展。实际上，它证实，血糖的任何持续降低是有益的，即使该人具有较差控制史。
许多分析仪器或生物传感器（诸如葡萄糖计）是目前可得到的，其允许个体试验小血液样品中的葡萄糖水平。许多目前可得到的计量仪设计利用一次用弃的试验元件，其与所述计量仪一起电化学地或光学地测量血液样品中的葡萄糖的量。在目前的葡萄糖计中，作为成功的血糖测量的结果而显示的信息是各个血糖值，典型地以mg/dL或mmol为单位来显示，并且可能显示进行测量的时间和日期。该信息与计算计划的或已知的碳水化合物摄入或计划的或已知的活动以及其它情形或个体因素的知识一起，在大多数情况下足以允许糖尿病患者调整或得出他们的饮食摄入量和/或即时注射胰岛素的剂量以短期控制血糖水平。并且，在低葡萄糖值的情况下，糖尿病患者可以察觉到需要摄入糖来避免低血糖。
胰岛素的缺乏或不足量会阻止身体使用葡萄糖作为燃料源来产生能量。当这发生时，身体通过分解脂肪酸来产生能量，这会导致酮副产物和增加的酮水平。在糖尿病患者中增加的酮水平也可以由心脏病发作、中风、娱乐药物使用或中间发生的疾病（诸如肺炎、流感、胃肠炎或泌尿学感染）造成。糖尿病患者中过高的酮水平会导致糖尿病酮症酸中毒(DKA)的发作，所述DKA是如果不治疗的话可以导致死亡的医学紧急事件。DKA的症状尤其包括恶心、呕吐、过度口渴和尿产生、腹部疼痛、用力呼吸、疲劳和昏迷。鉴于DKA的严重性，合乎需要的是，在DKA发作的完全开始之前，施用治疗以降低酮水平。此外，由于在DKA发作已经开始或酮水平在其它方面不希望地高之前与DKA发作有关的症状可能不存在，通常优选的是，降低酮的治疗不作为对这些症状的应答而开始。
通过测量酮水平和如果在它们升高到某种浓度以上时寻求医学注意，可以实现DKA发作的预防。可以利用尿试验来确定酮水平。ADA网站推荐，当糖尿病具有疾病(诸如感冒或流感)时，或当他或她的血糖超过240 mg/dl时，应当每4-6小时检查酮水平。(参见http://www.diabetes.org/living-with-diabetes/complications/ketoacidosis- dka.html)。但是，对于每天执行多个血糖试验的糖尿病患者而言，在他们的血糖试验之外还执行单独的尿试验是耗时的和麻烦的。
通过在同一试验条上进行双重试验以测量葡萄糖和酮水平，糖尿病能够通过在早期检测出高酮水平而更好地顺从试验推荐和更安全的疗法。例如，推荐在酮和血糖较高时避免锻炼，因为升高的这些分析物的水平可以指示令人不满意的糖尿病管理。但是，大多数糖尿病患者不会容易得到酮试验进行试验，且经常不会容易得到关于如何应对这样的情形的信息。
单独尿试验用于确定酮水平的应用也需要额外的诊断供给和它们的附随成本，并使得其难以关联血糖和酮水平。也可能从血液样品确定酮水平。当使用血液样品时，通常通过测量羟基丁酸盐（其是血液中的优势酮）的浓度来确定酮水平。血液中低于0.6 mM的羟基丁酸盐浓度被视作正常，而在0.6 mM和1.5 mM之间的羟基丁酸盐浓度指示可能发生问题，且大于1.5 mM指示发展DKA的风险。血液中高于3 mM的羟基丁酸盐浓度指示DKA，并需要紧急医学治疗。
当前的用于从血液确定酮水平的技术包括单功能试验元件，其适合用于检测例如羟基丁酸盐浓度。但是，更象上面描述的尿试验，每天进行相对较高量级的血糖试验的糖尿病患者可能发现，在他们的血糖试验之外还进行单独的酮水平血液试验是耗时的和麻烦的，特别是由于当前的血酮试验比现有技术的血糖试验更慢。独立于血糖试验执行的酮水平血液试验也需要额外的诊断供应，并且必然发生与其附随的额外费用。此外，执行用于确定血糖和血酮水平的单独试验使得难以关联测量的血糖和血酮值。
用于从血液确定酮水平的其它技术包括适合用于检测血糖和血酮水平的试验元件。但是，在这些当前的试验元件中，比血酮水平更快速地测量血糖水平，使得血酮试验结果延迟并在血糖试验结果以后提供。可替换地，在后者血酮试验的完成之前，没有提供血糖和血酮试验的结果二者。在任一种情况下，对于每天执行相对较高量级的试验的糖尿病患者而言，特别是当考虑到在某些情况下血酮试验花费的时间是完成血糖试验的几乎2倍时，等候一个或两个试验的结果直到血酮试验完成，可以变得非常麻烦和耗时。此外，当在血酮试验结果之前且单独地提供血糖试验结果时，用户可能在血酮试验完成之前中断试验和/或在血糖试验结果已经提供但是在适当地考虑血酮试验结果之前将注意力转向别处。
鉴于除了血糖测量结果之外还准确地记录、报告和分析血酮测量结果的分支，需要改进用于试验血酮水平和/或血酮和血糖水平的技术、规程和设备。
发明内容
提供了试剂材料和有关的试验元件。在一个实施方案中，具有双功能性的试验元件包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物、第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物、以及选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物(在下文中定义)的辅酶。在一个方面，所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶，且所述第二分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。主题申请的其它方面涉及独特的试剂材料。
在一个实施方案中，被配置成用于确定第一分析物和第二分析物的试验元件包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物和第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物。所述试验元件还包括选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
在该实施方案的一种形式中，所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶。在该形式的一个方面，所述羟基丁酸脱氢酶是3-羟基丁酸脱氢酶。在该形式的另一个方面，所述第二种酶是选自以下的脱氢酶：葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、甘油脱氢酶、醇脱氢酶、山梨醇脱氢酶和包含L-氨基酸脱氢酶在内的氨基酸脱氢酶。在该形式的另一个方面，所述第二分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。在另一个方面，所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在另一个其它方面，所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在另一个其它方面，所述辅酶是硫代-NAD。在另一个其它方面，所述辅酶是硫代-NADP。
在该实施方案的另一种形式中，所述试验元件包括第一试剂材料，其包括第一种酶或所述第一种酶的底物；和辅酶，其选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。在该形式的一个方面，所述试验元件还包括第二试剂材料，其包括第二种酶或所述第二种酶的底物；和辅酶，其选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。在另一个方面，所述试验元件包括试验条，其被配置成承载所述第一试剂材料和第二试剂材料。在另一个其它方面，所述试验条包括与所述第一试剂材料结合的第一电极系统和与所述第二试剂材料结合的第二电极系统。在该形式的另一个方面，所述第一试剂材料进一步包括以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
在另一个实施方案中，试剂材料包括3-羟基丁酸脱氢酶和根据式(I)的辅酶化合物或其盐或任选的还原形式：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
在该实施方案的一种形式中，所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在该实施方案的另一种形式中，所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在另一种形式中，所述试剂材料进一步包括以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
在该实施方案的另一种形式中，试验元件包括承载用于确定第一分析物的试剂材料的试验条。在该形式的一个方面，所述试验条进一步承载用于确定第二分析物的第二试剂材料。在另一个方面，所述第二试剂材料包括脱氢酶，所述脱氢酶选自葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、甘油脱氢酶、醇脱氢酶、山梨醇脱氢酶和包含L-氨基酸脱氢酶在内的氨基酸脱氢酶。在另一个其它方面，所述第二试剂材料包括辅酶，所述辅酶选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
在另一个其它方面，所述试验条被配置成用于第一分析物和第二分析物的的电化学测定。
在另一个实施方案中，一种用于确定样品中的第一分析物和第二分析物的方法包括提供试验元件，其被配置成用于确定第一分析物和第二分析物，并且包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物、第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物、以及选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接；
使所述试验元件与所述样品接触；检测所述第一分析物；和检测所述第二分析物。
在该实施方案的一种形式中，所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第二分析物是葡萄糖。在该形式的一个方面，检测所述第一分析物和检测所述第二分析物的步骤同时进行。在该形式的另一个方面，检测所述第一分析物和检测所述第二分析物的步骤在使所述试验元件与所述样品接触以后5秒内完成。
在另一个实施方案中，方法包括以下步骤：提供试验元件，其被配置成用于确定样品中的葡萄糖和酮值；使所述试验元件与所述样品接触；和在使所述试验元件与所述样品接触以后7.5秒内，确定样品中的葡萄糖和酮值。在一种形式中，所述试验元件包括用于确定葡萄糖值的第一试剂材料和用于确定酮值的第二试剂材料。在该形式的一个方面，所述第二试剂材料包括羟基丁酸脱氢酶。在另一种形式中，确定样品中的葡萄糖和酮值的步骤在使所述试验元件与所述样品接触以后5秒内完成。在另一种形式中，所述葡萄糖和酮值在测定步骤过程中在彼此2秒内确定。在另一种形式中，所述样品包括血液。
在该方法的一种形式中，所述试验元件包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物和第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物。所述试验元件还包括选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
在一个方面，所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶。在另一个方面，所述羟基丁酸脱氢酶是3-羟基丁酸脱氢酶。在另一个方面，所述第二种酶是选自以下的脱氢酶：葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、甘油脱氢酶、醇脱氢酶、山梨醇脱氢酶和包含L-氨基酸脱氢酶在内的氨基酸脱氢酶。在另一个方面，所述第二分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。在另一个方面，所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在另一个其它方面，所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
在另一个其它方面，所述辅酶是硫代-NAD。在另一个其它方面，所述辅酶是硫代-NADP。
在另一个方面，所述试验元件包括第一试剂材料，其包括第一种酶或所述第一种酶的底物；和辅酶，其选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。在另一个方面，所述试验元件还包括第二试剂材料，其包括第二种酶或所述第二种酶的底物；和辅酶，其选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。在另一个方面，所述试验元件包括试验条，其被配置成承载所述第一试剂材料和第二试剂材料。在另一个其它方面，所述试验条包括与所述第一试剂材料结合的第一电极系统和与所述第二试剂材料结合的第二电极系统。在另一个方面，所述第一试剂材料进一步包括以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
本申请的另一个方面是用于测量试验样品中的多种分析物的存在和/或浓度的独特技术。其它方面包括与样品中的分析物检测有关的独特方法、系统、装置、试剂盒、组件、设备和/或仪器。
其它方面、实施方案、形式、特征、益处、目的和优点将从详细描述和与其一起提供的附图显而易见。
附图说明
图1是第一个实施方案试验元件的透视图。
图2是图1的试验元件的不同部件的剖开透视图。
图3是第二个实施方案试验元件的剖开透视图。
图4是图3的试验元件的片段剖视图。
图5是被配置成用于与图1的试验元件一起使用的分析仪器的示意图。
图6-18是用不同试剂材料确定的羟基丁酸盐应答的图示。
具体实施方式
为了促进对本发明原理的理解的目的，现在将参考附图中所示的实施方案，并且将使用专用语言对其进行描述。尽管如此，应当理解，无意由此限制本发明的范围，预见到在所示装置中这样的改变和其它修改以及在其中所示的本发明原理的这样的其它应用，正如本发明所属领域的技术人员通常预见到的。
提供了试剂材料和有关的试验元件。在一个实施方案中，双功能试验元件包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物、第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物、以及选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物的辅酶。在一个方面，所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶，且所述第二分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。在另一个实施方案中，所述试验元件是也包括计量器的系统的一部分，所述计量器被配置成与所述试验元件相互作用以评估样品中的第一分析物和第二分析物。该评估范围可以从检测所述第一分析物和第二分析物的存在到确定所述第一分析物和第二分析物的浓度。所述第一分析物和第二分析物和所述样品流体可以是所述试验系统适用的任一种，尽管在一种具体的但是非限制性形式中，所述第一分析物是羟基丁酸盐，所述第二分析物是葡萄糖，且所述样品流体是血液或间隙液。主题申请的其它方面涉及独特的试剂材料。如下关于解释的实施方案描述了本申请的其它方面和特征。
参考图1和2，现在将提供被配置成用于评估样品中的第一分析物和第二分析物的第一个实施方案试验元件10的其它细节。将试验元件10提供为电化学传感器，其包括样品流体的样品容纳腔室和第一试剂材料和第二试剂材料，所述材料用于在有所述第一分析物和第二分析物存在下产生电化学信号。以图示的形式，试验元件10在计量器插入端12和施用端14之间延伸。以一个未图示的形式，施用端14的形状可以与计量器插入端12区分，从而辅助用户适当地操作和使用试验元件10。试验元件10还可以包括一个或多个图形(未显示)以提供关于适当操作和使用的用户指导。
以一次用弃的试验条的形式提供试验元件10，所述试验条具有层状结构，其包括基础衬底16、间隔层18、主体盖20和腔室盖22。在美国专利号7,727,467（其内容通过引用整体并入本文）中提供了包括类似层状结构的试验元件的其它细节。间隔层18包括空隙部分24以提供样品容纳腔室26，所述样品容纳腔室26在基础衬底16与主体盖20和腔室盖22之间延伸。在该构型中，样品容纳腔室26穿过开口28在试验元件10的施用端14处开放，所述开口28被配置成促进样品流体进入样品容纳腔室26中。也预见到这样的形式，其中样品容纳腔室26穿过沿着试验元件10的一侧定位的开口开放。也预见到这样的形式，其中样品容纳腔室26穿过沿着施用端14的全长定位且包括侧面的一部分的开口开放。
主体盖20和腔室盖22覆盖在间隔层18上面且限定在二者之间的槽30，这会提供与样品容纳腔室26连通的排气开口，以允许随着样品流体穿过开口28进入样品容纳腔室26，空气逸出样品容纳腔室26。槽30位于样品容纳腔室26的相对位置，其在位于样品容纳腔室26中的电极系统(在下面描述)的位置的内部。进入样品容纳腔室26中的样品流体将前进远至排气开口，但是不会进一步前进。当从顶部观察时，所述槽会提供“填充线”的视觉指示以证实样品容纳腔室26中的电极系统已经被适当地润湿或覆盖以适当地起作用。额外地或可替换地，剂量足量电极也可以位于槽30附近以检测样品流体已经前进至槽30的时机，以确保已经发生测量电极的润湿。
除了电极系统和试剂材料以外，样品容纳腔室26可以是空的，或可以可替换地包括吸着材料。合适的吸着材料包括聚酯、尼龙、纤维素和纤维素衍生物诸如硝酸纤维素。当包括时，吸着材料通过辅助将流体吸进样品容纳腔室26中而帮助促进样品流体的摄取。吸着材料的应用也可以用于进一步减小容纳样品流体的样品容纳腔室26的空体积。在一种形式中，通过毛细管作用发生样品容纳腔室26的填充。还可以通过其它方式增强样品容纳腔室26的填充，诸如通过在样品流体上施加压力以将它推入样品容纳腔室26中，和/或在样品容纳腔室26上建立真空以将样品流体拉入样品容纳腔室26中。另外，样品容纳腔室26的一个或多种表面可以从亲水材料形成，具有亲水材料涂层，或经过增加亲水性的处理，以便促进试验样品对样品容纳腔室26的填充。
试验元件10被配置成通过电化学氧化和还原反应来检测第一分析物和第二分析物的存在和/或测量其浓度。这些反应被转换成电信号，所述电信号可以与分析物的量或浓度关联。如在图2中所示，在仅图示试验元件10的一些部件的情况下，衬底16承载第一电极系统32，该第一电极系统32包括多个电极34和电极迹线36，所述电极迹线36终止于接触垫38。电极34被定义为电极迹线36的位于样品容纳腔室26内的那些部分。衬底16也承载第二电极系统46，该第二电极系统46包括多个电极48和电极迹线50，所述电极迹线50终止于接触垫52。电极48被定义为电极迹线50的位于样品容纳腔室26内的那些部分。应当理解，解释的电极系统32、46的构型不是限制性的，并且预见到替代构型。
试验元件10也包括：第一试剂材料60，其覆盖在样品容纳腔室26内的第一电极系统32的电极34的至少一部分上面；和第二试剂材料62，其覆盖在样品容纳腔室26内的第二电极系统46的电极48的至少一部分上面。第一试剂材料60和第二试剂材料62适合用于在有各种第一和第二试验分析物存在下产生电化学信号，且被设置在样品容纳腔室26内在给样品容纳腔室26中的电极34、48提供电化学信号的位置。以图示的形式，空间64在第一试剂材料60和第二试剂材料62之间延伸，尽管也预见到这样的形式：其中空间64不存在且第一试剂材料和第二试剂材料在电极34、48上面形成连续层。将在下文中提供关于第一试剂材料60和第二试剂材料62的其它细节。
第一电极系统32的电极34包括一组呈工作电极40和对应电极42的形式的测量电极，所述对应电极42包括在工作电极40的对侧隔开的部分44a和44b。本文中使用的“工作电极”是这样的电极：在此处，在有或没有氧化还原介质的媒介下，分析物被电氧化或电还原，而术语“对应电极”表示这样的电极：其与工作电极配对，且通过它将在量级上相同且在符号上相反的电化学电流传递给穿过工作电极传递的电流。术语“对应电极”意在包括也作为参比电极起作用的对应电极(即，对应电极/参比电极)。第二电极系统46的电极48包括一组呈工作电极54和对应电极56的形式的测量电极，所述对应电极56包括在工作电极54的对侧隔开的部分58a和58b。在该布置中，样品容纳腔室26被配置成使得，进入样品容纳腔室26中的样品流体被置于与工作电极40和54以及对应电极42和56发生电解质接触。该布置也允许电流在测量电极之间流动，以影响第一分析物和第二分析物的电氧化或电还原。但是，应当理解，前述仅仅是测量电极的许多构型之一。
在图3和4中解释了用于评估样品中的第一分析物和第二分析物的一个替代实施方案试验元件110。利用头对头制造技术，生产试验元件110。该技术和试验元件110的其它细节通常参见国际专利公开号WO 2012/003306，其内容通过引用整体并入本文。如在图3中所示，电极图案112布置在衬底114的长形层(带)上的2列中(一组电极图案在列A中，一组在列B中)。试验元件110也包括：样品腔室电极图案116，其位于彼此附近和衬底114的中心附近；和接触垫118，其彼此隔开且位于衬底114的相对边缘附近。以图示的形式，所述电极图案都是类似的；但是，在替代形式中，至少一些电极图案可以不同于其它电极图案。第一试剂材料120被施加于列A中的样品腔室电极116上面，且第二试剂材料122被施加于列B中的样品腔室电极116上面。
间隔层124用粘合层126附接到衬底114的上面。以图示的形式，一个长形条或带形成间隔层124以覆盖两个列A和B的电极图案，尽管这样的形式也是可能的：其中间隔层124的两个单独条各自附接到列A和列B中的衬底114且沿着中线128对齐。间隔层124包括多个沿着中线128布置的挖出部分130。当将间隔层124与衬底114装配时，挖出部分130将形成样品腔室132的周边(图4)。单独的连续上衬底层134用粘合层136附接到间隔层124的上面，且包括多个排气开口142、144，以促进当用样品流体填充样品腔室132时它们的排气。尽管在前面没有讨论，应当理解，粘合层126、136包括多个挖出部分138、140，它们各自沿着中线128布置且对应于间隔层124的挖出部分130。可替换地，预见到，粘合层136可以是没有任何开口或挖出的固体层。
在衬底114后面，将试剂材料120、122、间隔层124和上衬底134组合并层压在一起，分离薄板或辊，使得在分离邻近行中的试验条(肩并肩定向的试验条)时，列A和B中的电极图案116保持彼此附接。换而言之，列A中的试验条没有与列B中的试验条完全分离，且用以头对头方式布置的每对试验条形成试验条对。可以折叠每个试验条对，以将来自列A的试验条的接触垫118置于来自列B的试验条的接触垫118附近，并且将来自列A的试验条的取样端置于来自列B的试验条的取样端附近且面向与其相同的方向。使用这类头对头试验条对，提供了双用途生物传感器，其中用户可以将体液样品同时施加于两个试验条，以便使用单个样品试验第一种和第二种不同分析物。在一个实施方案中，在将所述对折叠到一起之前，可以将血液过滤介质提供在双样品腔室132内，以便防止血液和试剂在腔室132之间混合。
应当理解，当沿着中线128弯曲试验条对时，应当暴露在每个头对头定向的试验条对中的腔室132。可以使用替代制造技术来确保两个样品腔室132被暴露。例如，在一个实施方案中，衬底层之一，例如顶层134，在制造过程中沿着中线128完全分离，而衬底114是未修改的或经过修改以围绕中线128可预测地弯曲。在一个替代实施方案中，衬底层之一经过修改，诸如穿过洞孔或部分切口，以被用户沿着中线128容易地分离，而其它衬底经过修改，诸如通过刻划、凹陷或卷边压接，以围绕直线（例如，中线128）可预测地弯曲或分离。在另一个实施方案中，顶层134和下衬底114经过修改以允许头对头试验条在任一个方向折叠，即，用户可以选择头对头的弯曲试验条对以使两个试验条的顶层134位于彼此附近或使两个试验条的衬底114位于彼此附近。
衬底16、114可以由绝缘材料形成，在所述绝缘材料上分别安置电极系统32、46和电极图案112。通常，塑料诸如乙烯基聚合物、聚酰亚胺、聚酯和苯乙烯会提供所需的电性能和结构性能。此外，因为所述试验元件可以从材料辊来大规模生产，因此合乎需要的是，所述材料性能适当地具有用于辊加工的足够柔性，同时还给最终元件赋予有用的刚度。衬底16、114的材料可以选择为柔性聚合材料诸如聚酯，包括高温聚酯材料；聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)；和聚酰亚胺，或这些中的两种或更多种的混合物。聚酰亚胺可商购获得，例如在商业名称Kapton®下得自E.I. duPont de Nemours和Company of Wilmington, Del.(duPont)。衬底16、114可用的一种具体材料是可得自duPont的MELINEX®329。
工作电极和对应电极以及电极系统32、46和电极图案112的剩余部分可以从多种材料形成。在一个方面，所述电极应当具有相对较低的电阻，且应当在试验元件的工作范围内是在电化学上惰性的。工作电极的合适导体包括金、钯、铂、碳、钛、二氧化钌和氧化铟锡和铱以及其它。对应电极可以由相同或不同的材料制成，例如银/氯化银。在一种具体的实施方案中，工作电极和对应电极都是金电极。
电极系统32、46和电极图案112分别可以以任意方式施加于衬底16、114，所述方式产生适当电导率和完整性的电极。示例性的方法包括溅射和印刷，只是提供几个非限制性的可能性。在一种具体形式中，通过涂覆衬底16、114的材料，然后除去所述涂层的选定部分来产生电极系统32、46和电极图案112，提供金电极。一种用于除去部分涂层的具体方法包括激光烧蚀，更具体地是宽域激光烧蚀，如在美国专利号7,073,246中所公开的，其内容通过引用整体并入本文。
激光烧蚀技术通常包括烧蚀单个金属层或多层组合物，所述多层组合物包含绝缘材料和传导材料，例如涂覆在或层压在绝缘材料上的金属层的金属层压体。该金属层可以含有纯金属、合金或其它材料，其是金属导体。金属或金属状导体的例子包括：铝、碳(诸如石墨)、钴、铜、镓、金、铟、镍、钯、铂、银、钛、它们的混合物和这些材料的合金或固溶体。在一个方面，将所述材料选择为与生物系统基本上不反应，其非限制性例子包括金、铂、钯、碳和氧化铱锡。该金属层可以是任何期望的厚度，其在一个具体形式中为约500 nm。
应当理解，解释的试验元件10、110的形式是非限制性的，并且也预见到主题申请的双功能试验元件的替代构型，包括为光学检测技术布置的那些。在这点上，以一种额外的且非限制性的形式，双功能试验元件可以包括夹心型构型，其中承载第一电极系统的第一衬底位于第二衬底上面，所述第二衬底承载第二电极系统。所述第一衬底和第二衬底被中间层彼此分开，所述中间层包括毛细管通道，或毛细管通道以其它方式形成在所述第一衬底和第二衬底之间。在该构型中，进入毛细管通道中的样品流体被导向第一电极系统和第二电极系统，使得发生第一电极系统和第二电极系统的同时或几乎同时的覆盖。尽管在前面没有讨论，应当进一步理解，给所述第一衬底提供适合用于确定第一分析物的第一试剂材料，且给所述第二衬底提供适合用于确定第二分析物的第二试剂材料。作为非限制性例子，一种用于生产具有该构型的试验元件的技术包括，单独地生产承载第一试剂材料和第一电极系统的第一衬底以及承载第二试剂材料和第二电极系统的第二衬底，然后将所述第一衬底和第二衬底装配到一起。
在另一种非限制性的形式中，双功能试验元件可以包括稍微不同的夹心型构型。在该构型中，承载第一电极系统的第一衬底位于第二衬底上面，所述第二衬底承载第二电极系统。但是，所述第一衬底和第二衬底通过粘合层结合，且每个包括位于它的各个电极系统上面的单独样品腔室来替代单个毛细管通道。以此形式，所述试验元件包括这样的构型：其促进各个样品腔室的同时或接近同时填充，使得也发生第一电极系统和第二电极系统的同时或接近同时覆盖。尽管在前面没有讨论，应当进一步理解，给所述第一衬底提供适合用于确定第一分析物的第一试剂材料，并给所述第二衬底提供适合用于确定第二分析物的第二试剂材料。该试验元件也可以利用上面讨论的技术结合本文描述的其它夹心型构型来生产。具有该形式的一种非限制性试验元件的其它细节提供在国际专利公开号WO 2012/003306 (在上文中并入)中。
主题申请的试验元件可以利用的非限制性布置的其它例子公开在美国专利号6,984,307和4,397,956中，其内容通过引用整体并入本文。
预见到，试验元件10、110可以用于从生物流体确定多种第一分析物和第二分析物。例如，试验元件10、110可以容易地改造成用于与具有任意合适化学性质的试剂材料60、62和120、122一起使用，所述化学性质可以用于评估所述第一分析物和第二分析物的存在和/或浓度。试剂材料60、62和120、122可操作与第一分析物和第二分析物反应，以产生代表所述第一分析物和第二分析物在样品流体中的存在和/或浓度的电化学信号。如将在下面更详细地讨论的，试剂材料60、62和120、122可以包括多种选定的活性组分，以确定各种第一分析物和第二分析物的存在和/或浓度。因此，关于要评估的第一分析物和第二分析物，选择试剂材料60、62和120、122的试验化学性质。这样的分析物可以包括，例如，葡萄糖、胆固醇、HDL胆固醇、甘油三酯、甘油、乳酸盐、乳酸脱氢酶、苹果酸盐、醇、尿酸、山梨醇、氨基酸、1,5-失水葡糖醇和代表酮体的分析物，诸如羟基丁酸盐。在一个特定实施方案中，试验元件10、110分别包括试剂材料60、62和120、122，它们经过选择以确定羟基丁酸盐和葡萄糖在血液中的存在和/或浓度。
可以评估其中的第一分析物和第二分析物的生物流体的非限制性例子包括在其中可以测量分析物的任何体液，诸如间隙液、泪液、尿和血液。在本文件的上下文中，术语“血液”包括全血和它的无细胞组分，即，血浆和血清。当所述试验元件被配置成用于试验羟基丁酸盐和葡萄糖时，所述样品流体可以具体地包括，例如，得自指尖或经认可的替代部位(例如，前臂、手掌、耳垂、上臂、小腿和大腿)的新鲜毛细管血液、新鲜静脉血或尿。另外，所述试验元件也可用于与控制流体一起使用，所述控制液体被以常规方式用于检验试验系统的完整性。
含有待评估的分析物的体液可以以任何方式获得和递送到试验元件。例如，通过切开皮肤，例如用柳叶刀，然后使试验元件与出现在皮肤表面的流体接触，可以以常规方式获得血液样品。在一个方面，当仅仅使用非常小的流体样品时，所述试验元件可操作用于评估目标分析物。类似地，在一个方面，仅仅需要微小的皮肤切口来产生试验所需的流体体积，并且疼痛和与这种方法有关的其它担忧可被最小化或消除。
试剂材料60、120包括第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物和合适的辅酶。这些组分通常溶解或悬浮在基质中。液体试验样品会水合或溶解基质，且第一分析物穿过所述基质进行扩散以与一种或多种活性组分反应。可以在试剂材料60、120中包含的合适酶是例如脱氢酶，其选自葡萄糖脱氢酶(E.C.1.1.1.47)、乳酸脱氢酶(E.C.1.1.1.27、1.1.1.28)、苹果酸脱氢酶(E.C.1.1.1.37)、甘油脱氢酶(E.C.1.1、1.6)、醇脱氢酶(E.C.1.1.1.1)、羟基丁酸脱氢酶(HBDH)（诸如3-羟基丁酸脱氢酶或β-羟基丁酸脱氢酶、α-羟基丁酸脱氢酶和γ-羟基丁酸脱氢酶）、山梨醇脱氢酶和氨基酸脱氢酶例如L-氨基酸脱氢酶(E.C.1.4.1.5)。其它合适的酶是氧化酶诸如葡萄糖氧化酶(E.C.1.1.3.4)或胆固醇氧化酶(E.C.1.1.3.6)或氨基转移酶诸如天冬氨酸盐或丙氨酸氨基转移酶、5'-核苷酸酶或肌酸激酶。取决于选择的酶，适合用在试剂材料60、120中的潜在辅酶包括FAD、NAD、NADP、硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
在一个实施方案中，W = CONH2或COCH3。
Z上的示例性取代基选自OH、F、Cl和C1-C2烷基，其为任选地氟代的或氯代的和/或OH-取代的、O—C1-C2-烷基。
在另一个实施方案中，第一种残基V是OH，且第二种残基V是磷酸酯基团。任选地，一个OH基团和一个磷酸酯基团可以与它们所结合的碳原子一起形成环。
腺嘌呤类似物的非限制性例子包括C8-取代的和N6-取代的腺嘌呤、脱氮变体诸如7-脱氮氮杂变体诸如8-氮杂或组合诸如7-脱氮或8-氮杂或碳环类似物诸如间型霉素，其中7-脱氮变体可以在7位被卤素、C1-C6-炔基、C1-C6-烯基或C1-C6-烷基取代。在另一个实施方案中，所述化合物含有腺苷类似物，其含有例如2-甲氧基脱氧核糖、2′-氟脱氧-核糖、己糖醇、阿卓糖醇或多环类似物诸如二环、LNA和三环糖来替代核糖。在一种形式中，(二)磷酸盐氧还可以被等电子地取代，例如O−被S−和/或BH3 −取代，O被NH、NCH3和/或CH2取代以及═O被═S取代。在一个实施方案中，根据式(I)的化合物的至少一个残基U不同于OH，且在其它实施方案中，至少一个残基U═BH3 −。
根据式(I)的另一种更具体的、但是非限制性的化合物，其中：
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH
是carba-NAD或cNAD。
carba-NAD具有以下结构：
。
根据式(I)的另一种更具体的、但是非限制性的化合物，其中：
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U =在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH
是carba-NADP或cNADP。
carba-NADP具有以下结构：
。
根据式(I)的其它具体的、但是非限制性的化合物包括硼代carba-NAD、环戊基NAD和carba-NAD环磷酸盐。这些化合物具有以下结构：
。
关于根据式(I)的化合物及其合成的其它细节提供在美国专利公开号2008/0231809中，其内容通过引用整体并入本文。
在一个实施方案中，试剂材料60、120可操作以促进羟基丁酸盐的存在和/或浓度的检测且包括羟基丁酸脱氢酶。羟基丁酸脱氢酶的非限制性例子包括α-羟基丁酸脱氢酶、β或3-羟基丁酸脱氢酶和γ-羟基丁酸脱氢酶。以一种特定形式，所述羟基丁酸脱氢酶是3-羟基丁酸脱氢酶。在该实施方案中，试剂材料60、120进一步包括辅酶，其选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。以一种特定形式，试剂材料60、120包括3-羟基丁酸脱氢酶以及carbaNAD和carbaNADP之一。在其中第一试剂材料包括羟基丁酸脱氢酶和选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶的形式中，已经令人惊讶地发现，羟基丁酸盐的存在和/或浓度的检测可以在试验元件已经与样品接触以后5秒内或约5秒时完成，这通常对应于需要约5秒的现有技术葡萄糖试验。结合下面的“实施例”提供了在这方面的其它细节。应当理解，需要超过5秒来完成羟基丁酸盐的存在和/或浓度的检测的试剂材料的应用也适合用在主题申请的试验元件中。
另外，尽管本文中关于具有双功能性的试验元件已经描述了包括羟基丁酸脱氢酶和选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶的试剂材料的应用，应当理解，该试剂材料与具有单功能性的试验元件一起的应用也是可能的。预见到与其一起使用该试剂材料的试验元件的其它形式的非限制性例子公开在美国专利申请公开号2005/0016844和美国专利号7,008,799中，它们的内容特此通过引用整体并入本文。还应当明白，所述试剂材料不需要任何额外的酶（诸如黄递酶）即可操作用于在这样的形式中检测羟基丁酸盐的存在和/或浓度：其包括羟基丁酸脱氢酶和选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶。但是，也预见到在第一试剂材料中包括额外的酶。
第一试剂材料还可以包括介质。可以将介质选择为这样的任何化学物质(通常电活性的)：其可以参与涉及酶、第一分析物和辅酶及其反应产物的反应方案，以产生可检测的电活性的反应产物。通常，介质在反应中的参与涉及，在与第一分析物、酶或辅酶或为这些之一的反应产物的物质(例如，反应成不同氧化态的辅酶)中的任一种相互作用以后，它的氧化态的变化(例如，还原)。多种介质表现出合适的电化学行为。介质也可以优选地在它的氧化形式是稳定的，可以任选地表现出可逆的氧化还原电化学，可以优选地表现出在水溶液中的良好溶解度，且优选地快速地反应以产生电活性的反应产物。介质的例子包括苯醌、麦尔多拉蓝、过渡金属复合物诸如铁氰化钾和锇衍生物(参见国际专利公开号WO 98/35225)、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合(参见美国专利号8,008,037)。第一试剂材料还可以包括充当介质前体的、基于亚硝基苯胺的化合物(参见例如美国专利号5,286,362)。在这点上，基于亚硝基苯胺的介质前体当接触分析物样品（诸如血液）时分解成可逆的介质组分。
介质和基于亚硝基苯胺的介质前体的其它例子包括N-(2-羟基乙基)-N′-对亚硝基苯基-哌嗪, N,N-二-(2-羟基乙基)-对亚硝基苯胺, 邻甲氧基-[N,N-二-(2-羟基乙基)]-对亚硝基苯胺, 对羟基亚硝基苯, N-甲基-N′-(4-亚硝基苯基)-哌嗪, 对醌二肟,N,N-二甲基-对亚硝基苯胺, N,N-二乙基-对亚硝基苯胺, N-(4-亚硝基苯基)-吗啉, N-苄基-N-(5′-羧基戊基)-对亚硝基苯胺, N,N-二甲基-4-亚硝基-1-萘基胺, N,N,3-三甲基-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-5-亚硝基吲哚啉, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-氯-4-亚硝基苯胺, 2,4-二甲氧基-亚硝基苯, N,N-二-(2-甲氧基乙基)-4-亚硝基苯胺, 3-甲氧基-4-亚硝基苯酚, N-(2-羟基乙基)-6-亚硝基-1,2,3,4-四氢喹啉, N,N-二甲基-3-氯-4-亚硝基苯胺, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-氟-4-亚硝基苯胺, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-甲硫基-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(2-(2-甲氧基乙氧基)-乙基)-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(3-甲氧基-2-羟基-1-丙基)-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(3-(2-羟基乙氧基)-2-羟基-1-丙基)-4-亚硝基苯胺,和N-(2-羟基乙基)-N-(2-(2-羟基乙氧基)-乙基)-4-亚硝基苯胺。
试剂材料62、122包括第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物和合适的辅酶。这些组分通常溶解或悬浮在基质中。液体试验样品会水合或溶解基质，且分析物穿过基质扩散以与一种或多种活性组分反应。可以包含在试剂材料62、122中的合适酶是例如脱氢酶，其选自葡萄糖脱氢酶(E.C.1.1.1.47)、乳酸脱氢酶(E.C.1.1.1.27、1.1.1.28)、苹果酸脱氢酶(E.C.1.1.1.37)、甘油脱氢酶(E.C.1.1、1.6)、醇脱氢酶(E.C.1.1.1.1)、羟基丁酸脱氢酶(HBDH)诸如3-羟基丁酸脱氢酶或β-羟基丁酸脱氢酶、α-羟基丁酸脱氢酶和γ-羟基丁酸脱氢酶、山梨醇脱氢酶和氨基酸脱氢酶例如L-氨基酸脱氢酶(E.C.1.4.1.5)。其它合适的酶是氧化酶诸如葡萄糖氧化酶(E.C.1.1.3.4)或胆固醇氧化酶(E.C.1.1.3.6)或氨基转移酶诸如天冬氨酸盐或丙氨酸氨基转移酶、5'-核苷酸酶或肌酸激酶。取决于选择的酶，适合用在试剂材料62、122中的潜在辅酶包括FAD、NAD、NADP、硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。
在一个其中试剂材料60、120可操作以促进羟基丁酸盐的存在和/或浓度的检测的实施方案中，试剂材料62、122可操作以促进葡萄糖的存在和/或浓度的检测且包括针对葡萄糖的酶。以一种特定形式，所述酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。在该实施方案中，试剂材料62、122进一步包括辅酶，其选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。尽管在前面没有讨论，预见到这样的形式：其中试剂材料60和62具有共同的辅酶，例如，根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式，并且合并到一起以形成单个试剂层，从而消除二者之间的空间64。还应当理解，本文描述的用于检测葡萄糖的存在和/或浓度的试剂材料不是限制性的，并且它们的其它形式是本领域已知的。可操作用于检测葡萄糖的存在和/或浓度的试剂材料的其它非限制性例子公开在美国专利号7,727,467 (在上文中并入)和美国专利号8,008,037中，其内容通过引用整体并入本文。第二试剂材料还可以包括介质。可以将介质选择为这样的任何化学物质(通常电活性的)：其可以参与涉及第二种酶、第二分析物和辅酶及其反应产物的反应方案，以产生可检测的电活性的反应产物。通常，介质在反应中的参与涉及，在与第二分析物、第二种酶或辅酶或为这些之一的反应产物的物质(例如，反应成不同氧化态的辅酶)中的任一种相互作用以后，它的氧化态的变化(例如，还原)。多种介质表现出合适的电化学行为。介质也可以优选地在它的氧化形式是稳定的，可以任选地表现出可逆的氧化还原电化学，可以优选地表现出在水溶液中的良好溶解度，且优选地快速地反应以产生电活性的反应产物。介质的例子包括苯醌、麦尔多拉蓝、过渡金属复合物诸如铁氰化钾和锇衍生物(参见国际专利公开号WO 98/35225)、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合(参见美国专利号8,008,037)。第二试剂材料还可以包括充当介质前体的、基于亚硝基苯胺的化合物(参见例如美国专利号5,286,362)。在这点上，基于亚硝基苯胺的介质前体当接触分析物样品（诸如血液）时分解成可逆的介质组分。
介质和基于亚硝基苯胺的介质前体的其它例子包括N-(2-羟基乙基)-N′-对亚硝基苯基-哌嗪, N,N-二-(2-羟基乙基)-对亚硝基苯胺, 邻甲氧基-[N,N-二-(2-羟基乙基)]-对亚硝基苯胺, 对羟基亚硝基苯, N-甲基-N′-(4-亚硝基苯基)-哌嗪, 对醌二肟,N,N-二甲基-对亚硝基苯胺, N,N-二乙基-对亚硝基苯胺, N-(4-亚硝基苯基)-吗啉, N-苄基-N-(5′-羧基戊基)-对亚硝基苯胺, N,N-二甲基-4-亚硝基-1-萘基胺, N,N,3-三甲基-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-5-亚硝基吲哚啉, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-氯-4-亚硝基苯胺, 2,4-二甲氧基-亚硝基苯, N,N-二-(2-甲氧基乙基)-4-亚硝基苯胺, 3-甲氧基-4-亚硝基苯酚, N-(2-羟基乙基)-6-亚硝基-1,2,3,4-四氢喹啉, N,N-二甲基-3-氯-4-亚硝基苯胺, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-氟-4-亚硝基苯胺, N,N-二-(2-羟基乙基)-3-甲硫基-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(2-(2-甲氧基乙氧基)-乙基)-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(3-甲氧基-2-羟基-1-丙基)-4-亚硝基苯胺, N-(2-羟基乙基)-N-(3-(2-羟基乙氧基)-2-羟基-1-丙基)-4-亚硝基苯胺,和N-(2-羟基乙基)-N-(2-(2-羟基乙氧基)-乙基)-4-亚硝基苯胺。
试剂材料还可以包括多种佐剂以增强其不同的性能或特征。参见例如在上文中提及的美国专利号7,749,437。例如，试剂材料60、62和120、122可以包含材料以促进它们放置在各个衬底16、114上和改进它们与其的粘附，或用于增加样品流体对试剂材料的水合的速率。另外，试剂材料可以包括这样的组分：其经过选择以增强得到的干燥的试剂层的物理性能，和摄取液体试验样品用于分析。要与试剂材料一起使用的辅料的例子包括增稠剂、粘度调节剂、成膜剂、稳定剂、缓冲剂、去污剂、胶凝剂、填充剂、膜开孔剂(film opener)、着色剂和赋予触变性的试剂。
可以包含在试剂材料中的增稠剂的非限制性例子包括(1)淀粉、树胶(例如，果胶、瓜尔胶、槐豆(卡罗布豆)胶、魔芋胶、黄原胶、海藻酸盐和琼脂)、酪蛋白、明胶和藻胶；(2)纤维素和半合成的纤维素衍生物(羧甲基-纤维素、甲基纤维素、羟基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基羟乙基纤维素)；(3)聚乙烯醇和羧基乙烯基化物(carboxy vinylate)；和(4)皂粘土、硅酸盐和胶态二氧化硅。增稠剂的更具体形式包括CP Kelco US, Inc.在商业名称Keltrol F下销售的黄原胶与Hercules Inc., Aqualon Division在商业名称AQUALON®CMC 7F PH下销售的羧甲基纤维素的组合。
可以包含在试剂材料中的成膜剂和触变剂包括聚合物和二氧化硅。一种更具体的触变剂包括Degussa AG在商业名称Kieselsaure Sipemate FK 320 DS下销售的二氧化硅，而更具体的成膜剂包括聚乙烯吡咯烷酮（由BASF在商标聚乙烯吡咯烷酮Kollidon 25下销售）和聚乙烯丙酸酯分散体。
用于试剂材料中的酶的稳定剂可以选自糖类和单脂肪酸盐或二脂肪酸盐。更具体的稳定剂包括海藻糖（由Sigma Chemical Co.在商业名称D-(+)-海藻糖二水合物下销售）和琥珀酸钠。
可以包含在试剂材料中的去污剂的非限制性例子包括水溶性的肥皂、以及水溶性的合成的表面活性化合物，诸如高级脂肪酸(例如油酸或硬脂酸，天然脂肪酸的混合物，所述天然脂肪酸例如来自椰子或牛脂油)的碱、碱土或任选地取代的铵盐，脂肪硫酸盐，磺酸的酯，烷基磺酸的盐，脂肪酸的牛磺酸盐，脂肪酸酰胺和酯酰胺。去污剂的更具体形式包括酯酰胺，正辛酰基-N-甲基葡糖酰胺（由Dojindo Molecular Technologies, Inc.在商业名称Mega-8下销售），和脂肪酸盐，N-甲基油烯基牛磺酸酯钠盐（由Rhodia HPCII (Home,Personal Care and Industrial Ingredients)在商业名称Geropon T77下销售）。
在一种形式中，将试剂材料配制为粘稠溶液，其包括增稠剂和触变剂以增强它的物理性能。选择所述增稠剂来提供稠的液体基质，其余组分均匀地分散在其中。所述增稠剂和触变剂也会抑制液体或半糊材料在它已经沉积之后和它干燥之前在衬底16、114的表面上流动或铺展。在沉积试剂材料以后，它们快速地干燥成容易水合的基质。
如上面指出的，已经令人惊讶地发现，在其中第一试剂材料包括羟基丁酸脱氢酶和选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶的形式中，羟基丁酸盐的存在和/或浓度的检测可以在试验元件已经与样品接触以后5秒内或约5秒时完成。当前用于葡萄糖试验的现有技术会促进葡萄糖的存在和/或浓度的检测在试验元件已经与样品接触以后5秒内或约5秒时完成。美国专利号8,008,037描述了促进在该时间范围内检测葡萄糖的存在和/或浓度的葡萄糖试验的一种非限制性形式。促进在该时间范围内检测葡萄糖的存在和/或浓度的葡萄糖试验的其它非限制性形式描述在美国专利号7,276,146和7,276,147中，二者的内容特此通过引用整体并入本文。但是，应当理解，促进在该或其它时间范围内检测葡萄糖的存在和/或浓度的其它试剂材料是已知的，且可以用在本文中公开的试验元件中。
考虑到前述内容，应当理解，当所述试验元件包括第一试剂材料和第二试剂材料并适当地配制时，羟基丁酸盐和葡萄糖的存在和/或浓度的检测可以在试验元件已经被样品接触以后5秒内完成，所述第一试剂材料具有羟基丁酸脱氢酶和选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶，所述第二试剂材料适合用于检测葡萄糖。但是，还应当理解，用这些试验元件完成羟基丁酸盐和葡萄糖的检测的时间的变化也是可能的，并且尤其依赖于例如试剂材料的具体制剂。在一种形式中，例如，在试验元件已经被样品接触以后10秒内完成羟基丁酸盐和葡萄糖的检测。在另一种形式中，在试验元件已经被样品接触以后7.5秒内完成羟基丁酸盐和葡萄糖的检测。还应当明白，完成羟基丁酸盐检测和葡萄糖检测的时间可以是不同的。例如，在一种或多种前述或其它形式中，在葡萄糖检测完成之前或之后4秒内完成羟基丁酸盐检测。在另一个变体中，在葡萄糖检测完成之前或之后2秒内完成羟基丁酸盐检测。在另一个变体中，在完成葡萄糖检测时或几乎同时地完成羟基丁酸盐检测。但是，应当理解，预见到完成羟基丁酸盐和葡萄糖检测的时间范围的其它变化。
实施例
以下实施例用于例证目的，不应解释为将在本文件中公开的发明仅限于在这些实施例中公开的实施方案。
试剂材料制剂
图6的试剂材料
如下制备储备缓冲溶液：将7.344 g MOPS钠盐、0.125 g Triton™X-100 (非离子去污剂，得自Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO)、2.400 g海藻糖和2.026 g琥珀酸钠六水合物加入400 mL双蒸馏水中，并将溶液的pH调至8.14。将该溶液加入到500 mL容量瓶中，并用双蒸馏水稀释以制备500 mL溶液。
通过将396 g最初的缓冲溶液与2 g聚氧化乙烯(300K)和2 g Natrosol®250 M(非离子的、水溶性的羟乙基纤维素聚合物，得自Ashland, Inc., Covingtion, KY)组合，完成缓冲液/Natrosol/PEO聚合物溶液的制备。将混合物在使用前混合过夜。
通过按顺次的方式将下述成分加入到含有5.0595 g缓冲液/聚合物储备溶液的20mL加速混合杯中，制备亚硝基苯胺/carba-NAD试剂材料：将a) 0.0415 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144，由Roche Diagnostics, Inc.提供)加入到容器中，并将基质在24,000rpm混合1分钟，并将pH调至7.7；将b) 0.0692 g carba-NAD游离酸加入到含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将c) 0.2134 g得自粪产碱菌（alcaligenes faecalis）的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图7的试剂材料
如下制备储备缓冲溶液：将9.086 g Tris碱、0.125 g Triton™X-100、0.625 gTergitol®15-S-9 (非离子型表面活性剂，得自The Dow Chemical Company, Midland,MI)、2.400 g海藻糖和2.026 g琥珀酸钠六水合物加入400 mL双蒸馏水中，并将溶液的pH调至7.95。将该溶液加入到500 mL容量瓶中，并用双蒸馏水稀释以制备500 mL溶液。
通过将396 g最初的缓冲溶液与2 g聚氧化乙烯(300K)和2 g Natrosol®250 M组合，完成缓冲液/Natrosol®/PEO聚合物溶液的制备。将混合物在使用前混合过夜。通过按顺次的方式将下述成分加入到含有4.048 g缓冲液/聚合物储备溶液的20 mL加速混合杯中，制备六氨合钌/carba-NAD试剂材料：将a) 0.0619 g氯化六氨合钌和b) 0.0034 g 1-(3-羧基丙氧基)-5-乙基吩嗪加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9；和将c) 0.0791 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL六氨合钌/吩嗪溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.24。然后将0.0862 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图8和9的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有4.048 g上面关于图7的试剂材料描述的Tris缓冲液/PEO/Natrosol®聚合物储备溶液，制备六氨合钌/carba-NAD试剂材料：将a) 0.062 g氯化六氨合钌和b) 0.003 g 1-(3-羧基丙氧基)-5-乙基吩嗪加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9；和将c) 0.079 gcarba-NAD游离酸加入含有3 mL六氨合钌/吩嗪溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.24。然后将0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入容器中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图10的试剂材料
如下制备储备缓冲溶液：将9.086 g Tris碱、0.125 g Triton™X-100、0.625 gTergitol®15-S-9、2.40 g海藻糖和2.026 g琥珀酸钠六水合物加入400 mL双蒸馏水中，并将溶液的pH调至7.95。将该溶液加入到500 mL容量瓶中，并用双蒸馏水稀释以制备500 mL溶液。
通过将392 g最初的缓冲溶液与8 g Kollidon®VA 64 (乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚物，得自BASF Corporation, Florham Park, NJ)组合，完成缓冲液/Kollidon®VA 64聚合物溶液的制备。将混合物在使用前混合过夜。
通过按顺次的方式将下述成分加入到含有6.071 g缓冲液/聚合物储备溶液的20mL加速混合杯中，制备亚硝基苯胺/carba-NAD试剂材料：将a) 0.0600 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation, Boston, MA)和b) 0.050 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144，由Roche Diagnostics, Inc., Indianapolis, IN提供)加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9;将c) 0.069 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图11的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有4.049 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲剂聚合物储备溶液，制备六氨合钌/carba-NAD试剂材料：将a) 0.040 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)、b) 0.062 g氯化六氨合钌和c) 0.003 g 1-(3-羧基丙氧基)-5-乙基吩嗪加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9;将d) 0.079 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL六氨合钌/吩嗪溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将e) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图12的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲液/聚合物储备溶液，制备亚硝基苯胺/carba-NAD试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)和b) 0.050 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144，由Roche Diagnostics,Inc., Indianapolis, IN提供)加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.8；将c) 0.069 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将e) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图13的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲剂聚合物储备溶液，制备六氨合钌/硫代-NAD试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)、b) 0.093 g氯化六氨合钌和c) 0.005 g 1-(3-羧基丙氧基)-5-乙基吩嗪加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9；将d) 0.079 g硫代-NAD游离酸加入含有3 mL六氨合钌/吩嗪溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将e) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图14的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲液/聚合物储备溶液，制备亚硝基苯胺/硫代-NAD试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)和b) 0.050 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144，由Roche Diagnostics,Inc., Indianapolis, IN提供)加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.8;将c) 0.079 g硫代-NAD游离酸加入含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图15的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲剂聚合物储备溶液，制备六氨合钌/carba-NADP试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)、b) 0.093 g氯化六氨合钌和c) 0.005 g 1-(3-羧基丙氧基)-5-乙基吩嗪加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.9；将c) 0.076 g carba-NADP游离酸加入含有3 mL六氨合钌/吩嗪溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图16的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲液/聚合物储备溶液，制备亚硝基苯胺/carba-NADP试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)和b) 0.050 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144，由Roche Diagnostics,Inc., Indianapolis, IN提供)加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.8；将c) 0.076 g carba-NADP游离酸加入含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图17的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有4.049 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲液/聚合物储备溶液，制备铁氰化物/carba-NAD试剂材料：将a) 0.040 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)和b) 0.026 g铁氰化钾加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.8；将c) 0.076 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL铁氰化物溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
图18的试剂材料
通过按顺次的方式将下述成分加入到20 mL加速混合杯中，所述杯含有6.074 g上面关于图10的试剂材料描述的Tris/Kollidon®缓冲液/聚合物储备溶液，制备亚硝基苯胺/carba-NAD试剂材料：将a) 0.060 g未处理的烟雾硅胶(Cabosil®, Cabot Corporation,Boston, MA)和b) 0.050 g取代的亚硝基苯胺衍生物(NA 1144 provided by RocheDiagnostics, Inc.)加入杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.8；将c)0.079 g carba-NAD游离酸加入含有3 mL亚硝基苯胺溶液的10 mL加速混合杯中，并将基质在24,000 rpm混合1分钟，并将pH调至7.2；和将d) 0.259 g得自粪产碱菌的β-羟基丁酸脱氢酶加入杯中，并在24,000 rpm加速混合2分钟。
试验条的制备
使用具有间隔件和毛细管设计的ACCU-CHECK®Aviva牌电极的卡片（Card）来生产试验条。使用PixSys™SQ系列分配系统(Cartesian Technologies Irvine California)，将1.5µL上述的试剂材料分配进每个电极毛细管通道中，并在45℃干燥1.5分钟。将经干燥的卡片在干燥气氛中储存过夜，并将亲水顶箔条手工地层压在毛细管上面的间隔层上。然后将卡片切割成各个传感器，并在干燥的小瓶中储存备用。
试验溶液的制备
通过将0.1829 g磷酸二氢钾盐、0.2007 g磷酸氢二钾和2.7956 g氯化钾加入200 mL双蒸馏水中，并将溶液的pH调至7.00，制备储备磷酸盐盐水缓冲溶液。将该溶液加入到250 mL容量瓶中，并用双蒸馏水稀释以制备250 mL溶液。
通过将1.3372 g羟基丁酸盐钠盐加入40 mL磷酸盐盐水缓冲溶液中，制备羟基丁酸盐的21倍储备溶液。将溶液加入50 mL容量瓶中，并用磷酸盐盐水缓冲溶液稀释至50 mL。将得到的储备溶液顺次地用磷酸盐盐水缓冲液稀释，以产生11种羟基丁酸盐试验储备液。
通过给1 mL磷酸盐盐水或血液掺入0.05 mL试验储备液，制备最终的试验溶液。
动力学剂量响应
利用上面制备的试验条，测量含有不同水平的羟基丁酸盐(mM)的全血或盐水样品。在接触条上的样品以后，施加所需的电势(对于六氨合钌条为222 mV，对于亚硝基苯胺条为450 mV)。总测定时间是6秒。测定的终点设定为试验条与样品接触以后0.5秒(图7)和5秒(图9和10)。
终点剂量响应
使用上面制备的试验条，测量含有不同水平的羟基丁酸盐(0-10 mM)的全血或盐水样品。测定包括：在样品接触试验条以后延迟4.5秒，随后在延迟时段以后施加450 mV（对于亚硝基苯胺条）和222 mV（对于六氨合钌条）的电势6秒。测定的终点设定为试验条与样品接触以后5秒。
尽管在前面没有讨论，应当理解，羟基丁酸盐浓度和测量的电流之间的关联会促进利用示例性的试剂材料来分析羟基丁酸盐。
尽管已经在附图和前面的描述中详细地说明和描述了本发明，但是其应当在性质上视作示例性的而不是限制性的，应当理解，仅仅显示和描述了某些实施方案，并且在本发明的精神内的所有变化和改变都期望获得保护。应当理解，尽管在上面的描述中利用的诸如优选的、优选地，优选的或更优选的等词语的使用指示如此描述的特征可能是更合乎需要的，但是可能不是必需的，并且在本发明范围内预见到缺少它们的实施方案，所述范围由后面的权利要求限定。在阅读权利要求时，当使用词语诸如“一个”、“一种”、“至少一种”或“至少一部分”时，除非在权利要求中有明确的相反指示，否则无意将权利要求限制到仅仅一个项目。当使用措辞“至少一部分”和/或“一部分”时，除非有相反的明确指示，所述项目可以包括一部分和/或整个项目。
下面显示了本发明的其它实施方案。
1. 一种被配置成用于确定第一分析物和第二分析物的试验元件，所述试验元件包含：
第一种辅酶依赖性的酶或所述第一种酶的底物;
第二种辅酶依赖性的酶或所述第二种酶的底物；和
选自硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式的辅酶：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
2. 实施方案1的试验元件，其中所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第一种酶是羟基丁酸脱氢酶。
3. 实施方案2的试验元件，其中所述羟基丁酸脱氢酶是3-羟基丁酸脱氢酶。
4. 实施方案2的试验元件，其中所述第二种酶是选自以下的脱氢酶：葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、甘油脱氢酶、醇脱氢酶、山梨醇脱氢酶和包含L-氨基酸脱氢酶在内的氨基酸脱氢酶。
5. 实施方案2的试验元件，其中所述第二分析物是葡萄糖，且所述第二种酶是葡萄糖脱氢酶或葡萄糖氧化酶。
6. 实施方案5的试验元件，其中所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
7. 实施方案5的试验元件，其中所述辅酶是根据式(I)的化合物
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
8. 实施方案5的试验元件，其中所述辅酶是硫代-NAD。
9. 实施方案5的试验元件，其中所述辅酶是硫代-NADP。
10. 实施方案1的试验元件，所述试验元件进一步包含第一试剂材料，所述第一试剂材料包括第一种酶或所述第一种酶的底物和选自以下的辅酶：硫代-NAD、硫代-NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。
11. 实施方案10的试验元件，所述试验元件进一步包含第二试剂材料，所述第二试剂材料包括第二种酶或所述第二种酶的底物和辅酶，所述辅酶选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式。
12. 实施方案11的试验元件，所述试验元件进一步包含试验条，所述试验条被配置成承载所述第一试剂材料和第二试剂材料。
13. 实施方案12的试验元件，其中所述试验条包括与所述第一试剂材料结合的第一电极系统和与所述第二试剂材料结合的第二电极系统。
14. 实施方案10的试验元件，其中所述第一试剂材料进一步包含以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
15. 一种试剂材料，其包含：
3-羟基丁酸脱氢酶；和
根据式(I)的辅酶化合物或其盐或任选的还原形式：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
16. 实施方案15的试剂材料，其中所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
17. 实施方案15的试剂材料，其中所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
18. 实施方案15的试剂材料，所述试剂材料进一步包含以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
19. 一种试验元件，其包含试验条，所述试验条承载用于确定第一分析物的根据实施方案15的第一试剂材料。
20. 实施方案19的试验元件，其中所述试验条进一步承载用于确定第二分析物的第二试剂材料。
21. 实施方案20的试验元件，其中所述第二试剂材料包括脱氢酶，所述脱氢酶选自葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、甘油脱氢酶、醇脱氢酶、山梨醇脱氢酶和包含L-氨基酸脱氢酶在内的氨基酸脱氢酶。
22. 实施方案21的试验元件，其中所述第二试剂材料进一步包括辅酶，所述辅酶选自FAD、NAD、NADP和根据式(I)的化合物或其盐或任选的还原形式：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2 = 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
23. 实施方案20的试验元件，其中所述试验条被配置成用于第一分析物和第二分析物的的电化学测定。
24. 一种用于确定样品中的第一分析物和第二分析物的方法，所述方法包括下述步骤：
提供根据实施方案1的试验元件；
使所述试验元件与所述样品接触；
检测所述第一分析物；和
检测所述第二分析物。
25. 实施方案24的方法，其中所述第一分析物是羟基丁酸盐，且所述第二分析物是葡萄糖。
26. 实施方案25的方法，其中所述检测所述第一分析物和检测所述第二分析物的步骤同时进行。
27. 实施方案25的方法，其中所述检测所述第一分析物和检测所述第二分析物的步骤在使所述试验元件与所述样品接触以后5秒内完成。
28. 一种方法，其包括：
提供试验元件，其被配置成用于确定样品中的葡萄糖和酮值；
使所述试验元件与所述样品接触；和
在使所述试验元件与所述样品接触以后7.5秒内，确定所述样品中的葡萄糖和酮值。
29. 实施方案28的方法，其中所述试验元件包括用于确定葡萄糖值的第一试剂材料和用于确定酮值的第二试剂材料。
30. 实施方案29的方法，其中所述第二试剂材料包括羟基丁酸脱氢酶。
31. 实施方案28的方法，其中所述确定样品中的葡萄糖和酮值的步骤在使所述试验元件与所述样品接触以后5秒内完成。
32. 实施方案28的方法，其中所述葡萄糖和酮值在测定步骤过程中在彼此2秒内确定。
33. 实施方案28的方法，其中所述样品包含血液。

Claims (4)

1.一种试剂材料，其包含：
3-羟基丁酸脱氢酶；和
根据式(I)的辅酶化合物或其盐或任选的还原形式：
其中
A = 腺嘌呤或其类似物，
T = 在每种情况下独立地表示O或S，
U = 在每种情况下独立地表示OH、SH、BH3 −或BCNH2 −，
V = 在每种情况下独立地表示OH或磷酸酯基团，
W = COOR、CON(R)2、COR或CSN(R)2，其中R在每种情况下独立地表示H或C1-C2-烷基，
X1、X2= 在每种情况下独立地表示O、CH2、CHCH3、C(CH3)2、NH或NCH3，
Y = NH、S、O或CH2，
Z = 包含具有5个C原子的环状基团的残基，其任选地含有选自O、S和N的杂原子和任选的一个或多个取代基，和残基CR42，其中CR42结合至环状基团且结合至X2，且
其中R4 = 在每种情况下独立地表示H、F、Cl或CH3，前提条件是，Z和吡啶残基不通过糖苷键连接。
2.根据权利要求1所述的试剂材料，其中所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在每种情况下表示OH，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
3.根据权利要求1所述的试剂材料，其中所述辅酶化合物是根据式(I)
其中
A = 腺嘌呤，
T = 在每种情况下表示O，
U = 在每种情况下表示OH，
V = 在第一种情况下表示OH，且在第二种情况下表示磷酸酯基团，
W = CON(R)2，其中R表示H，
X1 = O，
X2 = O，
Y = O，且
Z = 通式(II)的饱和碳环5-元环
其中单键存在于R5'和R5''之间，且其中
R4 = H，
R5' = CHOH，
R5''= CHOH，
R5 = CR42，
R6 = CH，且
R6' = CH。
4.根据权利要求1-3中的任一项所述的试剂材料，所述试剂材料进一步包含以下之一：亚硝基苯胺、铁氰化钾、以及吩嗪衍生物和氯化六氨合钌的组合。
CN201810736125.9A 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件 Pending CN108845132A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13/667,057 US8921061B2 (en) 2012-11-02 2012-11-02 Reagent materials and associated test elements
US13/667057 2012-11-02
CN201380057254.0A CN104736717A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380057254.0A Division CN104736717A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108845132A true CN108845132A (zh) 2018-11-20

Family

ID=49518949

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810737279.XA Pending CN108802398A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201810736123.XA Pending CN108841913A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201380057254.0A Pending CN104736717A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201810736125.9A Pending CN108845132A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201810737277.0A Pending CN108802397A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810737279.XA Pending CN108802398A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201810736123.XA Pending CN108841913A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件
CN201380057254.0A Pending CN104736717A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810737277.0A Pending CN108802397A (zh) 2012-11-02 2013-10-31 试剂材料和有关的试验元件

Country Status (18)

Country Link
US (2) US8921061B2 (zh)
EP (1) EP2914735B1 (zh)
JP (2) JP6280127B2 (zh)
KR (1) KR101730281B1 (zh)
CN (5) CN108802398A (zh)
AU (1) AU2013340841B2 (zh)
BR (1) BR112015009901A2 (zh)
CA (1) CA2886162C (zh)
ES (1) ES2707872T3 (zh)
HK (1) HK1211627A1 (zh)
IL (1) IL238077B (zh)
MX (1) MX359319B (zh)
NZ (2) NZ745469A (zh)
PL (1) PL2914735T3 (zh)
RU (1) RU2652888C2 (zh)
SG (1) SG11201503344SA (zh)
WO (1) WO2014068022A1 (zh)
ZA (1) ZA201502999B (zh)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016161430A1 (en) * 2015-04-02 2016-10-06 President And Fellows Of Harvard College Three-dimensional microfluidic devices with pop-up feature
US10690617B2 (en) 2015-05-07 2020-06-23 Polymer Technology Systems, Inc. Systems and methods for electrochemical ketone detection and measurement
CA3035874A1 (en) * 2016-10-05 2018-04-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Detection reagents and electrode arrangements for multi-analyte diagnostic test elements, as well as methods of using the same
CN107505368B8 (zh) * 2017-07-21 2019-08-23 山东朱氏药业集团有限公司 一种血糖试纸
CN111758032A (zh) * 2018-02-23 2020-10-09 希森美康株式会社 尿中酮体检测用试验片
AU2020216325B2 (en) * 2019-01-28 2022-09-08 Abbott Diabetes Care Inc. Analyte sensors and sensing methods featuring dual detection of glucose and ketones
US11633129B2 (en) 2019-04-05 2023-04-25 Cambridge Medical Technologies LLC Non-invasive transdermal sampling and analysis device incorporating redox cofactors
US11375931B2 (en) 2019-08-08 2022-07-05 Cambridge Medical Technologies LLC Non-invasive transdermal sampling and analysis device incorporating an electrochemical bioassay
US20210267501A1 (en) * 2020-02-27 2021-09-02 Cambridge Medical Technologies LLC Non-Invasive Transdermal Sampling and Analysis Device for Detection of Multiple Analytes
US11808708B2 (en) 2020-08-12 2023-11-07 F.A.T. Stats LLC Method for maintaining the health of a diabetic patient by preventing the occurrence of diabetic ketoacidosis

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102147388A (zh) * 2009-12-11 2011-08-10 生命扫描苏格兰有限公司 检测填充是否足量的方法和系统
CN102741694A (zh) * 2009-12-16 2012-10-17 霍夫曼-拉罗奇有限公司 借助于受保护的分析物的控释来检测测试元件中酶的分解

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4397956A (en) 1981-12-10 1983-08-09 Maggio Edward T Means for monitoring the status of control of ketoacidosis-prone diabetics
US5071769A (en) 1986-12-22 1991-12-10 Abbott Laboratories Method and device for ketone measurement
WO1993012254A1 (en) 1991-12-12 1993-06-24 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha Highly sensitive determination of d-3-hydroxybutyric acid or acetoacetic acid and composition therefor
US6736957B1 (en) 1997-10-16 2004-05-18 Abbott Laboratories Biosensor electrode mediators for regeneration of cofactors and process for using
CO5040209A1 (es) 1997-10-16 2001-05-29 Abbott Lab Electrodos biosensores mediadores de la regeneracion de cofactores
EP1801229B1 (en) 1997-10-16 2010-09-01 Abbott Laboratories Biosensor electrode
GB2337122B (en) 1998-05-08 2002-11-13 Medisense Inc Test strip
US5902731A (en) * 1998-09-28 1999-05-11 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
US6380380B1 (en) * 1999-01-04 2002-04-30 Specialty Assays, Inc. Use of nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) and nicotinamide adenine dinucliotide phosphate (NADP) analogs to measure enzyme activities metabolites and substrates
US6541216B1 (en) 1999-12-22 2003-04-01 Roche Diagnostics Corporation Amperometric biosensor test strip
PL357180A1 (en) 2000-03-28 2004-07-26 Lifescan, Inc. Reagent systems for detecting the presence of a reduced cofactor in a sample and methods for using the same
US7758744B2 (en) 2001-10-05 2010-07-20 Stephen Eliot Zweig Dual glucose-turbidimetric analytical sensors
US6984307B2 (en) 2001-10-05 2006-01-10 Stephen Eliot Zweig Dual glucose-hydroxybutyrate analytical sensors
US6762035B1 (en) 2002-02-04 2004-07-13 Surendra K. Gupta Method and test strips for the measurement of fat loss during weight loss programs
US7501053B2 (en) 2002-10-23 2009-03-10 Abbott Laboratories Biosensor having improved hematocrit and oxygen biases
US20040118704A1 (en) 2002-12-19 2004-06-24 Yi Wang Analyte test intrument having improved versatility
WO2004113917A2 (en) 2003-06-20 2004-12-29 Roche Diagnostics Gmbh Method and reagent for producing narrow, homogenous reagent strips
DE102005035461A1 (de) 2005-07-28 2007-02-15 Roche Diagnostics Gmbh Stabile NAD/NADH-Derivate
JP4786451B2 (ja) 2005-07-28 2011-10-05 エフ ホフマン−ラ ロッシュ アクチェン ゲゼルシャフト Ｎａｄ／ｎａｄｈの安定化
EP2093284A1 (de) * 2008-02-19 2009-08-26 F.Hoffmann-La Roche Ag Stabilisierung von Dehydrogenasen mit stabilen Coenzymen
US8008037B2 (en) 2008-03-27 2011-08-30 Roche Diagnostics Operations, Inc. Matrix composition with alkylphenazine quaternary salt and a nitrosoaniline
US8500990B2 (en) 2009-04-22 2013-08-06 Nova Biomedical Corporation Electrochemical biosensors based on NAD(P)-dependent dehydrogenase enzymes
EP2292751A1 (de) 2009-08-20 2011-03-09 Roche Diagnostics GmbH Stabilisierung von Enzymen mit stabilen Coenzymen
EP2287605A1 (de) 2009-08-20 2011-02-23 Roche Diagnostics GmbH Vereinfachte Magazinierung integrierter Systeme
US20110048972A1 (en) * 2009-08-31 2011-03-03 Lifescan Scotland Limited Multi-analyte test strip with shared counter/reference electrode and inline electrode configuration
US20110079522A1 (en) 2009-10-02 2011-04-07 Lifescan Scotland Limited Multi-analyte test strip with inline working electrodes and shared opposing counter/reference electrode
US8632664B2 (en) 2009-10-27 2014-01-21 Lifescan Scotland Limited Test meter for use with a dual chamber, multi-analyte test strip with opposing electrodes
US8323467B2 (en) 2009-10-27 2012-12-04 Lifescan Scotland Limited Dual chamber, multi-analyte test strip with opposing electrodes
EP2333544A1 (de) * 2009-12-11 2011-06-15 F. Hoffmann-La Roche AG Sterilisierbare Chemie für Testelemente
WO2012003306A1 (en) 2010-06-30 2012-01-05 Roche Diagnostics Operations, Inc. Methods for manufacturing a dual biosensor test strip

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102147388A (zh) * 2009-12-11 2011-08-10 生命扫描苏格兰有限公司 检测填充是否足量的方法和系统
CN102741694A (zh) * 2009-12-16 2012-10-17 霍夫曼-拉罗奇有限公司 借助于受保护的分析物的控释来检测测试元件中酶的分解

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JAMES T.SLAMA ET AL.: "Carbanicotinamide Adenine Dinucleotide: Synthesis and Enzymological Properties of a Carbocyclic Analogue of Oxidized Nicotinamide Adenine Dinucleotide", 《BIOCHEMISTRY》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2886162C (en) 2020-03-24
RU2015120693A (ru) 2016-12-27
CN108802397A (zh) 2018-11-13
CA2886162A1 (en) 2014-05-08
BR112015009901A2 (pt) 2017-07-11
RU2652888C2 (ru) 2018-05-03
US20140127728A1 (en) 2014-05-08
US20150140584A1 (en) 2015-05-21
AU2013340841B2 (en) 2019-01-17
US8921061B2 (en) 2014-12-30
JP6280127B2 (ja) 2018-02-14
IL238077B (en) 2018-12-31
KR20150063553A (ko) 2015-06-09
MX2015004980A (es) 2015-07-17
SG11201503344SA (en) 2015-05-28
MX359319B (es) 2018-09-25
CN108802398A (zh) 2018-11-13
NZ745469A (en) 2019-10-25
EP2914735B1 (en) 2018-10-31
ES2707872T3 (es) 2019-04-05
CN108841913A (zh) 2018-11-20
JP2017104101A (ja) 2017-06-15
JP2015536138A (ja) 2015-12-21
NZ706368A (en) 2019-01-25
EP2914735A1 (en) 2015-09-09
PL2914735T3 (pl) 2019-03-29
JP6313407B2 (ja) 2018-04-18
WO2014068022A1 (en) 2014-05-08
KR101730281B1 (ko) 2017-04-25
US9416397B2 (en) 2016-08-16
ZA201502999B (en) 2016-09-28
AU2013340841A1 (en) 2015-04-23
CN104736717A (zh) 2015-06-24
HK1211627A1 (zh) 2016-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108845132A (zh) 试剂材料和有关的试验元件
CN104737022B (zh) 用于多种分析物分析的系统和方法
JP7141433B2 (ja) 多検体診断用試験エレメントのための検出試薬および電極配置、ならびにそれらを使用する方法
JP2017104101A5 (zh)
JP2015536138A5 (zh)

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40000484

Country of ref document: HK