CN108815141A - 抗菌肽膜剂及其制备方法与应用 - Google Patents

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毛若雨
滕达
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Abstract

本发明提供一种抗菌肽膜剂及其制备方法与应用。所述膜剂由活性物质、乙二胺四乙酸、成膜材料、促渗剂、保湿剂和溶剂组成。本发明提供的抗菌肽膜剂，能够使其中主要活性成分抗菌肽NZ2114保持较高活性，使用时能快速成膜，具有透气性好、阻菌性好、组织渗透性好等特点，对患处不仅起到直接的保护作用，又可渗入伤口杀灭深层细菌以防止伤口进一步感染；该涂膜剂中含有保湿成分，其随时间推移持续下降的透气性有利于创伤初期高渗出组织液的排出，以及后期可以避免低渗出液的排出所造成的创面过度干燥，起到较好的保湿作用，对创伤、烧伤或感染创有很好的促进愈合作用。可用于外伤医疗用品。

Description

抗菌肽膜剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体地说，涉及一种抗菌肽膜剂及其制备方法与应用。
背景技术
正常完整的皮肤可以保护机体免受外源有害物质及病原菌的侵害。金黄色葡萄球菌是引起皮肤和软组织感染的主要病原菌之一，近年来，由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的案例在医院和社区内逐渐增多，且伴随着发病率、死亡率及费用的增加(Dinubile MJ,Lipsky B A.Complicated infections of skin and skin structures:when the infection is more than skin deep[J].Journal of AntimicrobialChemotherapy,2004,53Suppl 2(53Suppl 2):ii37.)。
涂膜剂系指原药物溶解或分散于含成膜材的溶剂中，涂搽患处后形成薄膜的外用液体制剂(国家药典委员会.中华人民共和国药典:2015年版.四部[M].中国医药科技出版社,2015)，起到保护创面以及逐渐释放所含药物起到治疗的作用，具有不受创面形状、大小和部位的限制、使用方便和便于携带的作用。
NZ2114是真菌防御素Plectasin的衍生物，具有更高效的杀灭革兰阳性菌的作用，尤其对MRSA的治疗效果较传统抗生素更胜一筹(Zhang Y,Teng D,Mao R,et al.Highexpression of a plectasin-derived peptide NZ2114in Pichia pastoris and itspharmacodynamics,postantibiotic and synergy against Staphylococcus aureus.[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2014,98(2):681-94.)。
目前，尚未见有关NZ2114应用于外伤医疗用品的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗菌肽膜剂及其制备方法与应用。
为了实现本发明目的，本发明提供的抗菌肽膜剂，由活性物质、乙二胺四乙酸(EDTA)、成膜材料、促渗剂、保湿剂和溶剂组成；其中，所述活性物质为抗菌肽NZ2114，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；
所述成膜材料选自聚乙烯醇缩丁醛(PVB)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇、乙酸纤维素中的至少一种；
所述促渗剂选自丙二醇、无水乙醇、月桂氮酮中的至少一种；
所述保湿剂选自聚山梨醇酯80、甘油、木糖醇、聚丙二醇中的至少一种中的至少一种；
所述溶剂为水和乙酸乙酯。
本发明的抗菌肽膜剂中活性物质的浓度为8-128μg/mL，优选64μg/mL。
优选地，所述成膜材料为聚乙烯醇缩丁醛和聚乙烯吡咯烷酮，二者质量比为1-2.5：1-50；其中所述成膜材料的质量占膜剂总质量的2.5-35％。
优选地，所述促渗剂为丙二醇和无水乙醇，所述促渗剂为丙二醇和无水乙醇，二者质量比为1-5：1-10；其中所述促渗剂的质量占膜剂总质量的3-27.5％。
优选地，所述保湿剂为聚山梨醇酯80，其中所述保湿剂的质量占膜剂总质量的0.5-2.5％。
优选地，所述乙二胺四乙酸、水和乙酸乙酯的质量分别占膜剂总质量的0.0005-0.0025％、9.96-91.49％和2.5-25％。
本发明抗菌肽膜剂中各成分含量如下：
在本发明的一个具体实施方式中，抗菌肽膜剂中各成分含量如下：
本发明的抗菌肽膜剂可按如下方法制备：
步骤一：用适量水溶解乙二胺四乙酸，得到乙二胺四乙酸溶液；将聚乙烯醇缩丁醛加入容器中，然后加入乙酸乙酯和上述配制的乙二胺四乙酸溶液溶解，得溶液I；
步骤二：向溶液I中加入无水乙醇、丙二醇和聚山梨醇酯80，混匀，得溶液II；
步骤三：向溶液II中加入适量水，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮，搅拌至透明状，得溶液III；操作时应尽量避免气泡产生；
步骤四：向溶液III中加入抗菌肽NZ2114，加水补足至总体积，混匀，即得。
上述操作均在无菌条件下进行。
本发明还提供所述抗菌肽膜剂在制备外伤医疗用品中的应用。
本发明还提供所述抗菌肽膜剂在制备促进创伤、烧伤或感染创愈合的药物中的应用。
其中，所述感染是由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)所致。
本发明提供的抗菌肽膜剂，能够使其中主要活性成分抗菌肽NZ2114保持100％活性，使用时能在5min内快速成膜，具有透气性良好、阻菌性好(阻菌性达100％)、组织渗透性好等特点，对患处不仅起到直接的保护作用，又可渗入伤口杀灭深层细菌以防止伤口进一步感染；该涂膜剂中含有保湿成分，其随时间推移持续下降的透气性有利于创伤初期高渗出组织液的排出，以及后期可以避免低渗出液的排出所造成的创面过度干燥，起到较好的保湿作用，对创伤、烧伤或感染创有很好的促进愈合作用。可用于外伤医疗用品。
此外，本发明提供的抗菌肽膜剂可以明显促进体外培养的人永生上皮细胞(Hecat)人造划痕的修复，10、20和30μg/ml细胞划痕的愈合率分别提高15.80％、27.32％及37.78％；并可促进大鼠皮肤创伤的愈合，愈合率平均提高约8％，优于市售抗菌类乳膏剂乳膏。
附图说明
图1为本发明实施例4中大鼠皮肤刺激性实验结果图。
图2为本发明实施例5中抗菌肽膜剂的细胞毒性实验结果图。
图3为本发明实施例6中抗菌肽膜剂的阻菌性结果图。
图4为实施例7中中杀菌实验结果图。
图5为本发明实施例8中细胞划痕试验结果图；其中，CK为空白对照，NZ-10：NZ2114浓度10μg/ml，以此类推；H-5为黄皮肤乳膏5μg/ml，H-10为黄皮肤乳膏10μg/ml。
图6为本发明实施例9中大鼠创口愈合率结果图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
以下实施例中涉及的培养基：
MH培养基：酪蛋白水解物17.5g/L，牛肉浸粉5g/L，淀粉1.5g/L。
MHA培养基：MH培养基中加入2％的琼脂粉。
以下实施例中涉及的菌种Staphylococcus aureus ATCC 43300购自上海研生实业有限公司。乳膏购自金象大药房。
实施例1抗菌肽膜剂的制备
称取PVB 0.015g，加入备好的容器中，加入4ml双蒸水(含2mg EDTA)以及4ml乙酸乙酯，用小匙慢慢地均匀搅拌直至全部溶解；加入4ml无水乙醇、400μl丙二醇以及200μl聚山梨醇酯80作为促渗剂和保湿剂；加入7.4ml双蒸水，轻轻搅拌1-2min；称取2.4g的PVP，缓缓加入上述容器中，小匙轻轻搅拌混匀，搅拌至透明状；若有气泡产生，可以使用超声仪除去气泡。加入抗菌肽NZ2114至浓度为64μg/ml，加双蒸水补足至20ml，即得抗菌肽膜剂。以上操作均在无菌条件下进行。
实施例2抗菌肽膜剂的制备
称取PVB 0.01g，加入备好的容器中，加入4ml双蒸水(含0.01mg EDTA)以及0.5ml乙酸乙酯，用小匙慢慢地均匀搅拌直至全部溶解；加入0.5ml无水乙醇、100μl丙二醇以及100μl聚山梨醇酯80作为促渗剂和保湿剂；加入7.4ml双蒸水，轻轻搅拌1-2min；称取0.5g的PVP，缓缓加入上述容器中，小匙轻轻搅拌混匀，搅拌至透明状；若有气泡产生，可以使用超声仪除去气泡。加入抗菌肽NZ2114至浓度为8μg/ml，加双蒸水补足至20ml，即得抗菌肽膜剂。以上操作均在无菌条件下进行。
实施例3抗菌肽膜剂的制备
称取PVB 2g，加入备好的容器中，加入4ml双蒸水(含5mg EDTA)以及5ml乙酸乙酯，用小匙慢慢地均匀搅拌直至全部溶解；加入5ml无水乙醇、500μl丙二醇以及500μl聚山梨醇酯80作为促渗剂和保湿剂；加入7.4ml双蒸水，轻轻搅拌1-2min；称取5g的PVP，缓缓加入上述容器中，小匙轻轻搅拌混匀，搅拌至透明状；若有气泡产生，可以使用超声仪除去气泡。加入抗菌肽NZ2114至浓度为128μg/ml，加双蒸水补足至20ml，即得抗菌肽膜剂。以上操作均在无菌条件下进行。
实施例4大鼠皮肤刺激性实验
取待测大鼠(SD大鼠，六周龄，每只体重160-180g)，麻醉后行硫化钠脱毛备皮，侧划分为左右相互对称的2个区域，标记；分别取两份各150μL实施例1制备的抗菌肽膜剂、PBS溶液以及30％SDS溶液，浸入1.5cm2的纱布中，以斜对角线的排列方式放置于大鼠背部对应的受试部位；用透气纱布包裹住受试区域，胶带固定，于干燥洁净的培养环境下饲养4h；摘除纱布及药品，温水小心洗去大鼠背部残留物质；于摘除实验用品后的0h、12h、24h、48h拍照记录。
由结果图1可知，随着时间的延长，仅阳性组30％的SDS对大鼠皮肤造成了损害，而膜剂对大鼠皮肤的刺激反应呈现为无刺激或极轻微刺激性，符合贴皮剂的要求。
实施例5抗菌肽膜剂的细胞毒性检测实验
参考中华人民共和国标准GB/T16886.12-2005中有关吸收剂及水胶体的浸提比例，将实施例1制备的抗菌肽膜剂1g加入10ml细胞培养液，在37℃下浸提24h，以此浸提液为原液，按照1/2，1/10，1/100，1/1000以及1/10000进行系列梯度稀释。利用MTT法测定对体外培养的HeCat细胞的细胞毒性。主要步骤如下：
将HeCat细胞培养于含有10％胎牛血清的MEM培养基中，在37℃，5％CO2及饱和湿度条件下的培养箱中培养。细胞生长到对数期，用0.25％胰酶消化单层细胞；用上述MEM培养基重悬细胞，以2.5×105个/ml密度接种于96孔板中，每孔100μl；设置3～5个副孔，放入CO2恒温培养箱中培养24h后移除培养基；用PBS清洗两遍后，每孔按上述稀释的梯度浓度加入100μl样品，无添加膜剂组作为空白对照组，梯度稀释的苯酚作为阳性对照。将细胞继续孵育24h，吸取孔内培养基，PBS洗两遍，每孔中加入20μl浓度为5mg/ml的MTT液(MTT操作需避光进行)，之后置于培养箱内继续培养4h。轻轻吸弃MTT液，加入150μL DMSO，微量振荡器振荡10min后，待孔底结晶完全溶解，酶标仪570nm波长处测各孔吸光度(OD值)[Li Z,MaoR,Teng D,et al.Antibacterial and immunomodulatory activities of insectdefensins-DLP2and DLP4against multidrug-resistant Staphylococcus aureus[J].Sci Rep,2017,7(1)]。根据下面公式计算细胞增殖抑制指数(IR)：
细胞存活率(％)＝OD加药/OD阴性×100％
由图2结果可知，当用浸提液原液时，细胞的增殖率相对空白组稍低，对细胞活力稍显抑制作用，但随着浓度的降低，对细胞的抑制生长作用迅速降低，至1/2浸提液浓度时已经达到和空白组相同的细胞增殖率。
实施例6阻菌性实验
将实施例1制备的抗菌膜剂所成膜均匀地铺于固体MHA培养基上，设置平行实验组三个；吸取半对数期ATCC43300菌液20μL，分别滴加至液体膜剂所成薄膜的正中央；阳性对照组选用经无菌处理的普通滤纸和0.22μm的微孔滤膜，按照与液体抗菌膜剂所成膜相同的方法，滴加上述菌液各20μL，设置平行对照组三个。将上述已处理的培养皿置于37℃培养16-18h；用无菌镊子轻轻将液体抗菌膜剂所成膜和阳性对照用微孔滤纸从固体培养基上移除；37℃温箱中，继续培养16-18h；拍照，记录此时细菌的生长情况；记录并分析实验结果。
由图3可知，去除膜后的24h，0.22μm微孔滤膜组和膜剂组均没有金黄色葡萄球菌的生长；而普通滤纸组却有大量的细菌生长。说明液体呈膜剂所成膜的孔径可能小于0.22μm,同时其中的活性成分NZ2114也发挥了抗菌效果，这种物理和生物功能赋予了它可以阻止细菌透过的特性。
实施例7杀菌性实验
根据抑菌圈的大小判断实施例1制备的抗菌肽膜剂的抑菌效果。将半对数期的ATCC43300菌液，以体积比(1:100)稀释到MHA固体培养基中，倒板，待凝固后在表面滴上10、15和20μl抗菌肽膜剂，37℃温箱放置16-18h，观察抑菌圈大小。同时设置含相同浓度肽的PBS溶液组以及膜剂溶剂(不含肽)对照组。
结果见图4，PBS溶液对照组所形成的抑菌圈总是比等体积的膜剂组较小，这可能是因为膜剂中含有的乙醇以及乙二醇提供的促渗透性和液面的延展性扩大了液体的分布面积导致，提示膜剂中的有机成分可能会促进药物渗入伤口，促进愈合。
实施例8细胞划痕试验
当Hecat细胞生长至单层铺满状态，用标记笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，每孔划3-5条线；接种细胞，过夜铺满，约5×105个细胞；用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜；用PBS洗细胞3次，去除划下的细胞，加入无血清培养基(实验组培养基中分别含有10、20、30μg/ml的NZ2114，阳性对照组培养基中含有5或10μg/ml乳膏，空白对照组培养基中不含药物)；放入37℃，5％CO2培养箱内培养。按0，4，8，12，16，24小时取样，拍照。统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算划痕区域面积均值并计算伤口愈合率。
愈合率＝St/S0×100％
其中，St为各时间点划痕区域的面积，S0为第0天创面面积。
由图5可知，随着时间的延长，对照组以及各NZ2114实验组的细胞划痕面积逐渐呈缩小的趋势，其中NZ实验组划痕面积缩小的速度呈现剂量依赖性；相对来说，对照组黄皮肤乳膏却没有促进愈合的作用，甚至比空白对照组较差。
实施例9大鼠皮肤创口愈合实验
将15只SD大鼠(六周龄，雌雄不拘，每只体重160-180g)随机分为3组，空白对照组，抗菌肽膜剂实验组，每组三只。将大鼠注射戊巴比妥钠麻醉后，除毛备皮，依次用碘酒、75％乙醇消毒后利用打孔器造成大小约1.5cm2的深达筋膜的全层皮肤切除创口；无菌棉擦拭止血后，实验组每个伤口涂抹实施例1制备的抗菌肽膜剂30-40μl，空白对照组涂抹0.9％NaCl溶液；每天观察恢复情况，拍照记录，利用Image J软件计算面积，对比愈合率[Ohura N,Ichioka S,Nakatsuka T,et al.Evaluating dressing materials for the preventionof shear force in the treatment of pressure ulcers.[J].Journal of Wound Care,2005,14(9):401-4]。
创面面积相对愈合率＝St/S0×100％
其中，St为各时间点创面面积，S0为第0天创面面积。
由图6可知，即使每个组的大鼠皮肤创口愈合率都有随时间增高的趋势，膜剂对照组在每个时间点的愈合率均比对照组提高约10％左右，可见抗菌肽膜剂可促进伤口的愈合。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之做一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
序列表
<110> 中国农业科学院饲料研究所
<120> 抗菌肽膜剂及其制备方法与应用
<130> KHP181110195.7
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Gly Phe Gly Cys Asn Gly Pro Trp Asn Glu Asp Asp Leu Arg Cys His
1 5 10 15
Asn His Cys Lys Ser Ile Lys Gly Tyr Lys Gly Gly Tyr Cys Ala Lys
20 25 30
Gly Gly Phe Val Cys Lys Cys Tyr
35 40

Claims (10)

1.一种抗菌肽膜剂，其特征在于，由活性物质、乙二胺四乙酸、成膜材料、促渗剂、保湿剂和溶剂组成；
所述活性物质为抗菌肽NZ2114，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；
所述成膜材料选自聚乙烯醇缩丁醛、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、乙酸纤维素中的至少一种；
所述促渗剂选自丙二醇、无水乙醇、月桂氮酮中的至少一种；
所述保湿剂选自聚山梨醇酯80、甘油、木糖醇、聚丙二醇中的至少一种；
所述溶剂为水和乙酸乙酯。
2.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，所述膜剂中活性物质的浓度为8-128μg/mL，优选64μg/mL。
3.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，所述成膜材料为聚乙烯醇缩丁醛和聚乙烯吡咯烷酮，二者质量比为1-2.5：1-50；其中所述成膜材料的质量占膜剂总质量的2.5-35％。
4.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，所述促渗剂为丙二醇和无水乙醇，二者质量比为1-5：1-10；其中所述促渗剂的质量占膜剂总质量的3-27.5％。
5.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，所述保湿剂为聚山梨醇酯80，其中所述保湿剂的质量占膜剂总质量的0.5-2.5％。
6.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，所述乙二胺四乙酸、水和乙酸乙酯的质量分别占膜剂总质量的0.0005-0.0025％、9.96-91.49％和2.5-25％。
7.根据权利要求1所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，各成分含量如下：
8.根据权利要求7所述的抗菌肽膜剂，其特征在于，各成分含量如下：
9.权利要求1-8任一项所述抗菌肽膜剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：用适量水溶解乙二胺四乙酸，得到乙二胺四乙酸溶液；将聚乙烯醇缩丁醛加入容器中，然后加入乙酸乙酯和乙二胺四乙酸溶液溶解，得溶液I；
步骤二：向溶液I中加入无水乙醇、丙二醇和聚山梨醇酯80，混匀，得溶液II；
步骤三：向溶液II中加入适量水，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮，搅拌至透明状，得溶液III；
步骤四：向溶液III中加入抗菌肽NZ2114，加水补足至总体积，混匀，即得。
10.权利要求1-8任一项所述抗菌肽膜剂的以下任一种应用：
1)在制备外伤医疗用品中的应用；
2)在制备促进创伤、烧伤或感染创愈合的药物中的应用。
其中，2)中所述感染是由金黄色葡萄球菌所致。
CN201810971804.4A 2018-08-24 2018-08-24 抗菌肽膜剂及其制备方法与应用 Pending CN108815141A (zh)

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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113398311A (zh) * 2021-05-25 2021-09-17 周建大 一种荷载纳米抗菌肽的多聚复合防护膜、制备方法及应用
CN114456239A (zh) * 2021-12-24 2022-05-10 中国农业科学院饲料研究所 生泰素以及由其制备的外用抗菌肽凝胶制剂与应用
CN116473949A (zh) * 2023-06-20 2023-07-25 山东利尔康医疗科技股份有限公司 一种含有抗菌肽的快速成膜的消毒液及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1899600A (zh) * 2005-07-22 2007-01-24 上海高科联合生物技术研发有限公司 抗菌肽喷雾成膜剂及其制备方法
WO2007073346A1 (en) * 2005-12-23 2007-06-28 Kjell Stenberg Water-soluble films comprising low-viscosity alginates
CN103045636A (zh) * 2012-12-17 2013-04-17 中国农业科学院饲料研究所 在重组毕赤酵母中高效表达抗菌肽nz2114的方法
CN104490851A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 成都山信药业有限公司 依色格南的速释膜剂

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1899600A (zh) * 2005-07-22 2007-01-24 上海高科联合生物技术研发有限公司 抗菌肽喷雾成膜剂及其制备方法
WO2007073346A1 (en) * 2005-12-23 2007-06-28 Kjell Stenberg Water-soluble films comprising low-viscosity alginates
CN103045636A (zh) * 2012-12-17 2013-04-17 中国农业科学院饲料研究所 在重组毕赤酵母中高效表达抗菌肽nz2114的方法
CN104490851A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 成都山信药业有限公司 依色格南的速释膜剂

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
尹双增 等: "《面向新世纪的海南高新技术产业 海南省首届科技论坛论文集》", 31 October 2010, 南方出版社 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113398311A (zh) * 2021-05-25 2021-09-17 周建大 一种荷载纳米抗菌肽的多聚复合防护膜、制备方法及应用
CN114456239A (zh) * 2021-12-24 2022-05-10 中国农业科学院饲料研究所 生泰素以及由其制备的外用抗菌肽凝胶制剂与应用
CN114456239B (zh) * 2021-12-24 2023-09-08 中国农业科学院饲料研究所 生泰素以及由其制备的外用抗菌肽凝胶制剂与应用
CN116473949A (zh) * 2023-06-20 2023-07-25 山东利尔康医疗科技股份有限公司 一种含有抗菌肽的快速成膜的消毒液及其制备方法

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