CN108795975B

CN108795975B - 野生大豆相关蛋白在提高植物抗虫性中的应用

Info

Publication number: CN108795975B
Application number: CN201810721984.0A
Authority: CN
Inventors: 沈欣杰; 王岩岩; 矫永庆; 张永兴; 周新安; 郭葳
Original assignee: Oil Crops Research Institute of Chinese Academy of Agriculture Sciences
Current assignee: Oil Crops Research Institute of Chinese Academy of Agriculture Sciences
Priority date: 2018-07-04
Filing date: 2018-07-04
Publication date: 2021-10-22
Anticipated expiration: 2038-07-04
Also published as: CN108795975A

Abstract

本发明公开了野生大豆相关蛋白在提高植物抗虫性中的应用。本发明提供了1)‑3)中任一种物质在调控植物抗虫性中的应用：1)蛋白GSMYB15；2)编码蛋白GSMYB15的DNA分子；3)含有编码蛋白GSMYB15的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；实验证明，与未转GsMYB15基因的植株相比，GsMYB15转基因植株具有显著的抗虫性，说明GsMYB15基因具有植物抗虫性。

Description

野生大豆相关蛋白在提高植物抗虫性中的应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及野生大豆相关蛋白在提高植物抗虫性中的应用。

背景技术

大豆是世界性的重要食用油和优质植物蛋白质来源。栽培大豆在整个生长发育过程中除了面对土壤肥力，光照和水分等非生物环境因素的影响外还受到多种昆虫的侵害。其中，食叶性害虫由于对大豆叶片具有啃食性可以短时间内造成大豆植株叶片的巨大损失，导致大豆失去主要的光合作用场所从而造成大豆减产，严重的甚至绝收。传统的杂交育种由于缺乏优质的抗虫亲本材料导致大豆抗食叶性害虫杂交育种一直比较滞后。野生大豆是栽培大豆的近缘种，野生大豆具有良好的抗逆性状，但是由于野生大豆种子小，且植株形态和栽培大豆相比差异较大一般不能直接用于杂交育种。同时，传统的杂交育种需要不断地利用亲本组合，从下一代中选出具有优良抗性的后代进行繁育筛选，这种方法费时费力，工作量非常大。利用现代转基因技术可以快速的将具有确定抗虫性功能的基因特定导入到栽培大豆中，即可获得具有抗虫性的优良转基因栽培大豆。这种方法简单，快速，具有明显的优势。

发明内容

本发明的一个目的是提供如下1)-3)中任一种物质的用途。

本发明提供了1)-3)中任一种物质在调控植物抗虫性中的应用：

1)蛋白GSMYB15；

2)编码蛋白GSMYB15的DNA分子；

3)含有编码蛋白GSMYB15的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；

所述蛋白GSMYB15为如下(1)或(2)：

(1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。

上述应用中，所述DNA分子是如下1)-3)中任一种的DNA分子：

1)编码区为序列表中序列2所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

上述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min；或，0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃条件下杂交并洗膜。

上述应用中，所述调控植物抗虫性为提高植物抗虫性。

上述应用中，所述植物为双子叶植物或单子叶植物；

或所述植物为双子叶植物，所述双子叶植物具体为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥；

或所述虫为棉铃虫。

上述1)-3)中任一种物质在培育抗虫植物中的应用也是本发明保护的范围；

或，上述1)-3)中任一种物质在培育高抗虫性植物中的应用也是本发明保护的范围。

上述应用中，所述植物为双子叶植物或单子叶植物；

或所述植物为双子叶植物，所述双子叶植物具体为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥。

本发明另一个目的是提供一种培育高抗虫性转基因植物的方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：提高目的植物中编码蛋白GSMYB15的DNA分子的表达量和/或活性，得到转基因植物，所述转基因植物的抗虫性高于所述目的植物；

所述蛋白GSMYB15为如下(1)或(2)：

(1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

上述方法中，

所述提高目的植物中编码蛋白GSMYB15的DNA分子的表达量和/或活性为将所述编码蛋白GSMYB15的DNA分子导入目的植物。

上述方法中，

所述植物为双子叶植物或单子叶植物；

或所述虫为棉铃虫。

上述方法中，

所述植物为双子叶植物，所述双子叶植物具体为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥。

上述中，所述表达盒(GsMYB15基因表达盒)，是指能够在宿主细胞中表达GsMYB15蛋白质的DNA，该DNA不但可包括启动GsMYB15基因转录的启动子，还可包括终止GsMYB15基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本发明的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。启动子的例子包括但不限于：花椰菜花叶病毒的组成型启动子35S：来自西红柿的创伤诱导型启动子，亮氨酸氨基肽酶("LAP",Chao等人(1999)Plant Physiol 120：979-992)；来自烟草的化学诱导型启动子，发病机理相关1(PR1)(由水杨酸和BTH(苯并噻二唑-7-硫代羟酸S-甲酯)诱导)；西红柿蛋白酶抑制剂II启动子(PIN2)或LAP启动子(均可用茉莉酮酸甲酯诱导)；热休克启动子(美国专利5，187，267)；四环素诱导型启动子(美国专利5，057,422)；种子特异性启动子，如谷子种子特异性启动子pF128(CN101063139B(中国专利200710099169.7))，种子贮存蛋白质特异的启动子(例如，菜豆球蛋白、napin,oleosin和大豆beta conglycin的启动子(Beachy等人(1985)EMBO J.4：3047-3053))。它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此处引用的所有参考文献均全文引用。合适的转录终止子包括但不限于：农杆菌胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)、花椰菜花叶病毒CaMV 35S终止子、tml终止子、豌豆rbcS E9终止子和胭脂氨酸和章鱼氨酸合酶终止子(参见，例如：Odell等人(I⁹⁸⁵)Nature 313:810；Rosenberg等人(1987)Gene,56:125；Guerineau等人(1991)Mol.Gen.Genet,262:141；Proudfoot(1991)Cell,64:671；Sanfacon等人Genes Dev.,5:141；Mogen等人(1990)PlantCell,2:1261；Munroe等人(1990)Gene,91:151；Ballad等人(1989)Nucleic Acids Res.17:7891；Joshi等人(1987)Nucleic Acid Res.,15:9627)。

可用现有的表达载体构建含有上述GsMYB15基因表达盒的重组载体。上述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。如pB2GW7.0\pAHC25、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb(CAMBIA公司)等。上述植物表达载体还可包含外源基因的3′端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。上述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3′端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂碱合成酶基因Nos)、植物基因(如大豆贮存蛋白基因)3′端转录的非翻译区均具有类似功能。使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、抗生素的标记基因(如赋予对卡那霉素和相关抗生素抗性的nptII基因，赋予对除草剂膦丝菌素抗性的bar基因，赋予对抗生素潮霉素抗性的hph基因，和赋予对氨甲喋呤抗性的dhfr基因，赋予对草甘磷抗性的EPSPS基因)或是抗化学试剂标记基因等(如抗除莠剂基因)、提供代谢甘露糖能力的甘露糖-6-磷酸异构酶基因。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

上述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。所述质粒具体可为载体pGWC或质粒pB2GW7.0。

所述重组载体具体可为GsMYB15-pGWC或GsMYB15-pB2GW7.0，所述GsMYB15-pGWC为将序列2所示的DNA片段同源重组载体pGWC中得到的重组载体，所述GsMYB15-pB2GW7.0为将序列2所示的DNA片段同源重组质粒pB2GW7.0中得到的重组载体，所述GsMYB15-pGWC能表达序列1所示的GsMYB15蛋白质。

上述应用中，所述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌。其中，细菌可为农杆菌，如农杆菌EHA105。

上述应用中，所述转基因植物细胞系、转基因植物组织和转基因植物器官均不包括繁殖材料。

本发明中，所述转基因植物理解为不仅包含将所述GsMYB15基因转化目的植物得到的第一代转基因植物，也包括其子代。对于转基因植物，可以在该物种中繁殖该基因，也可用常规育种技术将该基因转移进入相同物种的其它品种，特别包括商业品种中。所述转基因植物包括种子、愈伤组织、完整植株和细胞。

本发明的实验证明，本发明将来自野生大豆中的GsMYB15基因，转入拟南芥中得到GsMYB15转基因植株，与未转GsMYB15基因的拟南芥植株相比，GsMYB15转基因植株具有显著的抗虫性，说明GsMYB15基因具有植物抗虫性。

附图说明

图1为单拷贝插入的纯合GsMYB15转基因后代植株中GsMYB15基因的表达水平。

图2为各拟南芥抗虫性的比较；其中，Col-o为野生型拟南芥，GsMYB15-OE为单拷贝的纯合GsMYB15转基因株系；a图为拟南芥抗虫表型的比较，b图为取食不同拟南芥后棉铃虫的体重增加状况。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

下述实施例中的pGWC(Huang et al.,Cloning and Expression Analysis ofthe Soybean CO-Like Gene GmCOL9，Plant Mol Biol Rep(2011)29:352–359)，公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的相关实验所用，不可作为其它用途使用。

实施例1、蛋白GsMYB15在调控拟南芥抗虫性中的应用

大豆蛋白GsMYB15的氨基酸序列为序列表中序列1；编码GsMYB15蛋白的基因的CDS序列为序列表中序列2。将人工合成的序列2所示的DNA分子(即GsMYB15编码基因)转至拟南芥中检测GsMYB15在调控植物抗虫性中的功能，具体方法如下：

1、表达GsMYB15的重组载体

利用上游引物(F:AGGCTTTGACTTTAGGTC ATGAGAACTCCATCTTCCTCTCACAA)和下游引物(R:GTCTAGAGACTTTAGGTC TCATTGCAATAAGCCCACGTG)组成的引物对对大豆品种willam82的cDNA进行PCR扩增，得到PCR产物。

通过同源重组的方式使得到的PCR产物与中间载体pGWC发生同源重组，得到中间载体GsMYB15-pGWC，即将序列2所示的GsMYB15编码基因同源重组到载体pGWC上得到的载体。

中间载体GsMYB15-pGWC与质粒pB2GW7.0(记载在如下文献中：Fibrillin 5IsEssential for Plastoquinone-9Biosynthesis by Binding to Solanesyl DiphosphateSynthases in Arabidopsis；The Plant cell，2015-10-4)进行gateway反应，得到序列正确的重组载体，将该重组载体命名为GsMYB15-pB2GW7.0。

经过测序，重组载体GsMYB15-pB2GW7.0为将序列2所示的GsMYB15编码基因同源重组到质粒pB2GW7.0中，得到的载体，该载体表达序列1所示的GsMYB15。

2、表达GsMYB15的重组菌

将重组载体GsMYB15-pB2GW7.0导入根癌农杆菌EHA105中，得到重组菌，该重组菌命名为EHA105/GsMYB15-pB2GW7.0。

将空载体pB2GW7.0导入根癌农杆菌EHA105中，得到重组菌EHA105/GsMYB15，作为空载体对照。

3、转基因拟南芥的构建

通过农杆菌侵染法利用重组菌EHA105/GsMYB15-pB2GW7.0转化Col-0生态型拟南芥(以下也称为野生型拟南芥，Shen,X.,Zhao,K.,Liu,L.,Zhang,K.,Yuan,H.,Liao,X.,etal.,2014.A role for PacMYBA in ABA-regulated anthocyanin biosynthesis in red-colored sweet cherry cv.Hong Deng(Prunus avium L.).Plant Cell Physiol.55,862e880.)得到转基因拟南芥；具体方法如下：

1)农杆菌侵染液的准备

将重组菌加入含有利福平(50ng/L)和壮观霉素(50ng/L)的LB液体培养基，28℃，200rpm，过夜培养。期间检测菌液浓度，在OD600值达到1.2-1.5时，4000rpm，离心10min，收集菌体，重悬于拟南芥侵染缓冲液，调整OD600至0.6左右，得到1L菌体悬液(该菌体悬液包含：5g/100mL蔗糖，0.02％(体积比)silwet77，10mM MES，100μM乙酰丁香酮，菌体，余量为水，pH＝5.6)，备用。

2)拟南芥转化苗的准备

取野生型拟南芥种子，在EP管中用体积百分比为70％的乙醇水溶液消毒2-3min，10％次氯酸钠消毒10min，无菌水冲洗5-6次，平铺在1/2MS培养基上，4℃黑暗条件下春化4天，然后置于16h光照/8h黑暗光周期、2000-3000Lux、21℃、RH为60％条件下培养。一周后，选择生长健壮的幼苗移栽到培养土中。每周浇一次1/2MS培养液。当拟南芥幼苗抽苔出现花苞(尚未开花)时准备转化。转化前将已经开花授粉的花和种子去除干净。

3)拟南芥侵染过程

将准备好的用于转化的拟南芥幼苗花苞倒置于装有菌体悬液的合适大小的容器上侵染(即浸泡)5min，然后取出花苞用吸水纸尽量吸尽侵染液后置于黑暗中在21℃温度中继续培养。黑暗中培养24小时后将被侵染的拟南芥植株转移到光周期16h(白昼)/8h(黑夜)，温度21℃和湿度60％的环境中生长直到收获T₁代种子。

4)转GsMYB15基因的拟南芥阳性植株的筛选及获得

由于GsMYB15-pB2GW7.0重组载体上带有抗草胺膦抗性基因，阳性拟南芥植株会在喷洒0.1％的草胺膦后存活下来。基于此，将收获的以上已经转化过的拟南芥植株的T₁代种子干燥后于4℃春化4天后均匀播种于装有灭菌营养土的圆形营养钵中同时适量喷洒湿润土壤后用塑料薄膜盖上，置于光周期16h(白昼)/8h(黑夜)，温度21℃和湿度60％的环境中萌发，待种子萌发后揭开塑料薄膜继续培养到两片子叶打开，用浓度为0.1％的草胺膦均匀喷洒在小苗上。一周后存活下来的幼苗即为转GsMYB15基因的阳性植株。分单株移栽即为T₁代植株，在光周期16h(白昼)/8h(黑夜)，温度21℃和湿度60％的环境中培养至分单株收获T₂代种子并用同样的方法种植，在T₂代植株中用0.1％的草胺膦均匀喷洒后统计各个株系的幼苗存活率，取来源于同一T₁代植株且存活死亡比为3(活)：1(死)的株系继续培养收获T₃代种子，该T₂代植株即为GsMYB15基因单拷贝插入的阳性转基因株系。将收获的T₃代种子用以上方式继续种植，用0.1％的草胺膦均匀喷洒后若幼苗全部存活即为单拷贝的T₃代纯合GsMYB15转基因株系。

采用同样的方法将重组菌EHA105/GsMYB15转入野生型拟南芥，得到转空载体植株。

5)鉴定

利用引物上游:5’—CCCAACATAAAAAGAGGGAAC-3’；下游:5’-GGGACAAAGGGACAGAATCAG-3’，对上述4)得到的单拷贝的T₃代纯合GsMYB15转基因株系OE-1、OE-2、OE-3和OE-4进行RT-PCR扩增，检测GsMYB15基因在RNA上的表达水平。以GsMYB15-pB2GW7.0作为阳性对照(+)，无菌水替换基因组DNA作为阴性对照(-)，转空载体植株和野生型植株作为对照。

以AtActin2(NM_180280)为内参，内参的引物为上游：5’-GGATCTGTACGGTAA-3’；下游：5’-AACCACCGATCCAGACACTGT-3‘。

结果如图1所示，与野生型植株相比，单拷贝的T₃代纯合GsMYB15转基因株系OE-1、OE-2、OE-3和OE-4中的GsMYB15基因的表达量有显著的增加；为阳性株系。

4、转基因拟南芥的抗虫验证

取其中3个单拷贝的T₃代纯合GsMYB15转基因株系(OE-2、OE-3和OE-4)进行植物抗虫性分析，具体的方法是将初孵棉铃虫幼虫接种在对照和不同的转基因株系上，每棵植物接种20头初孵幼虫，每个转基因株系至少接种6棵植物，7天后收集并用分析天平称量虫重，计算出每个材料上虫子的虫重平均值，以此来代表植物的抗虫性差异，默认初孵幼虫是一样的重量(因为基本没有重量)。以转空载体植株和野生型拟南芥(Col-0)作为对照。

结果如图2所示，可以看出，

接种野生型拟南芥的棉铃虫平均重量为0.11g；

接种T₃代纯合GsMYB15转基因株系(OE-2)的棉铃虫平均重量分别为0.025g；

接种T₃代纯合GsMYB15转基因株系(OE-3)的棉铃虫平均重量分别为0.021g；

接种T₃代纯合GsMYB15转基因株系(OE-4)的棉铃虫平均重量分别为0.024g。

与野生型拟南芥(Col-0)相比，接种T₃代纯合GsMYB15转基因株系(OE-2、OE-3和OE-4)的棉铃虫平均重量显著降低，表明GsMYB15及其编码基因可以提高拟南芥植株抗虫性。

转空载体植株和野生型拟南芥(Col-0)的棉铃虫平均重量均无显著差异。

序列表

<110>中国农业科学院油料作物研究所

<120>野生大豆相关蛋白在提高植物抗虫性中的应用

<160> 2

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 313

<212> PRT

<213> 大豆（Glycine max(Linn.) Merr.）

<400> 1

Met Arg Thr Pro Ser Ser Ser His Lys Ser Gly Leu Asn Lys Gly Thr

1 5 10 15

Trp Thr Pro Glu Glu Asp Ala Lys Leu Ile Ala Tyr Ile Thr Arg Tyr

20 25 30

Gly Ser Trp Asn Trp Arg Gln Leu Pro Arg Phe Ala Gly Leu Ala Arg

35 40 45

Cys Gly Lys Ser Cys Arg Leu Arg Trp Leu Asn Tyr Leu Arg Pro Asn

50 55 60

Ile Lys Arg Gly Asn Tyr Thr Lys Glu Glu Glu Glu Ile Ile Ile Arg

65 70 75 80

Leu His Glu Lys Leu Gly Asn Lys Trp Ser Val Ile Ala Thr His Leu

85 90 95

Pro Gly Arg Thr Asp Asn Glu Ile Lys Asn His Trp His Thr Thr Leu

100 105 110

Lys Lys Arg Phe Gly Lys Asn Thr Val His Pro Asn Lys Lys Val Lys

115 120 125

Ala Thr Lys Ser Asn Ser Ser Gly Ser Lys Glu Ile Gln Lys Val Gly

130 135 140

Phe Phe His Ser Ser Ser Thr Ile Thr Thr Ser Glu Thr Ser Asp Ser

145 150 155 160

Val Pro Leu Ser Pro Arg Glu Phe Ser Ser Thr Thr Ser Asp Tyr Thr

165 170 175

Thr Val Val Thr Asn Glu Asn Phe Leu Leu Glu Asp Gly Phe Asp Phe

180 185 190

Leu Glu Ala Cys Leu Glu Asp Val Asn Glu Asn Ile Trp Thr Glu Thr

195 200 205

Asn Ala Ala Ser Ile Ser Asn Ser Lys Thr Pro Met Leu Asp Asn Gly

210 215 220

Asn Gly Ser Asn Phe His Gly Ser Asp Ala Ala Gly Pro Ile Met Glu

225 230 235 240

Tyr Asn Glu Asn Leu Val Leu Glu Asn Asp Glu Phe Ala Phe Leu Glu

245 250 255

Ala Leu Gln Pro Thr Val Thr Thr Glu Asn Phe Leu Thr Asp Met Ser

260 265 270

Leu Val Pro Asn Glu Leu Leu Ala Pro Leu Val Asn Glu Ser Glu Glu

275 280 285

Tyr Phe Ser Ser Leu Tyr Asp Val Asp Leu Trp Cys Pro Ser Asn Phe

290 295 300

His Asp Leu His Val Gly Leu Leu Gln

305 310

<210> 2

<211> 942

<212> DNA

<213> 大豆（Glycine max(Linn.) Merr.）

<400> 2

atgagaactc catcttcctc tcacaaaagt ggacttaaca aaggcacttg gactccagag 60

gaagatgcca agttaatagc ttatatcact cgttatggct cttggaattg gcgccaactc 120

ccaagatttg caggactggc aaggtgtgga aagagctgca ggcttaggtg gctaaattat 180

ctcaggccca acataaaaag agggaactat actaaagaag aagaagagat tataatcaga 240

ctgcatgaaa agctgggtaa caaatggtct gtgattgcca ctcatttacc cggaagaaca 300

gataacgaaa taaagaacca ctggcacacc actctcaaaa aacgttttgg aaagaacaca 360

gttcacccca ataaaaaagt gaaagccaca aaatcaaata gttctggatc caaggaaatt 420

cagaaagttg gtttctttca cagtagttct acaataacaa cttctgaaac ctctgattct 480

gtccctttgt ccccaagaga attctcgtcc acaacctcgg actataccac agttgtcact 540

aacgaaaatt tcttactgga agacgggttc gattttctag aagcatgctt agaggacgtg 600

aacgagaata tttggacaga gacaaatgca gctagcattt ccaattccaa gaccccaatg 660

ctagataatg gtaatggtag taattttcat ggttcagatg ctgcagggcc catcatggaa 720

tataacgaaa atttggttct ggagaatgat gaatttgcgt ttctagaagc attgcagcca 780

acagtaacaa ctgagaattt tttgacagac atgtcccttg ttccaaacga attacttgcc 840

cctttggtga acgaatctga ggaatacttt tcttccttgt acgatgtgga cctttggtgt 900

cccagtaatt tccatgattt gcacgtgggc ttattgcaat ga 942

Claims

1.如下1) -3) 中任一种物质在提高拟南芥抗棉铃虫性中的应用：

1) 蛋白GSMYB15；

2) 编码蛋白GSMYB15的DNA分子；

3) 含有编码蛋白GSMYB15的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；

所述蛋白GSMYB15为由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述DNA分子是编码区为序列表中序列2所示的DNA分子。

3.权利要求1-2任一项中的1）-3）中任一种物质在培育抗棉铃虫拟南芥中的应用。

4.一种培育抗棉铃虫性转基因拟南芥的方法，包括如下步骤：提高目的拟南芥中编码蛋白GSMYB15的DNA分子的表达量和/或活性，得到转基因拟南芥；