CN108743697A

CN108743697A - 一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用

Info

Publication number: CN108743697A
Application number: CN201811034424.4A
Authority: CN
Inventors: 郭修军; 公彦才; 范学丽
Original assignee: Yinan County Friends Of Chinese Herbal Medicine Planting Cooperatives
Current assignee: Yinan County Friends Of Chinese Herbal Medicine Planting Cooperatives
Priority date: 2018-09-06
Filing date: 2018-09-06
Publication date: 2018-11-06

Abstract

本发明公开了一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，属于药物技术领域，通过试验证明了百眼藤提取物与利巴韦林作为有效活性成分在治疗急性病毒性咽炎时，具有显著的协同增效作用，并且毒副作用小，质量稳定，治疗总有效率达到98.33%。

Description

一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用

技术领域

本发明涉及医学技术领域，尤其涉及一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用。

背景技术

急性咽炎常为上呼吸道感染的一部分，是急性咽痛最常见的诊断之一。急性咽炎是咽部粘膜及粘膜下组织的急性炎症，常累及咽部淋巴组织，可单独发生，亦可继发于急性鼻炎、急性扁桃体炎。急性咽炎为临床常见病、多发病，有起病急，发展快的特点。引起急性咽痛的呼吸道病毒种类繁多，如呼吸道合胞病毒、鼻病毒和甲型流感病毒等。然而即使急性咽炎大多由病毒引起，但是临床上相当一部分的急性咽炎患者接受了抗生素治疗，存在极大的过度治疗风险。急性病毒性咽炎的抗病毒病因治疗也是另外一个重要的临床问题。一般而言，抗病毒治疗是病毒性感染疾病的最基本和最重要的环节，以流感病毒为例，目前临床用于治疗流感病毒感染的抗病毒药物包括金刚烷胺、金刚乙胺、奥司他韦和扎那米韦都存在不同程度的耐药性。而且现有的抗病毒药物较少，对于呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒等也都未有特异的抗病毒药物。在我国，由于受限于病毒学实验室诊断方法的普及度，急性病毒性咽炎的研究发展相对缓慢，为了更合理的开展病因学治疗，急需获得关键的病原学研宄依据，因此十分必要开展急性咽炎的病毒病原谱的研究。本申请人基于“中医为本，西医为用”的指导思想，以甲型流感病毒鼠小鼠模型评价其对流感病毒的体内抑制作用，从临床和动物实验两方面相互印证百眼藤提取物治疗急性咽炎致病原—流感病毒的疗效。

发明内容

本发明的目的是提供一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用。

所述的应用是将百眼藤提取物与利巴韦林作为有效活性成分加入药学上可接受的辅料制成药剂，应用到治疗急性病毒性咽炎中。

所述药剂中百眼藤提取物与利巴韦林的重量比为20:7。所述药剂中控制有效活性成分的含量在6-9%之间。

所述百眼藤提取物的制备：向干净粉碎的百眼藤中加入体积百分浓度为75％的食用酒精，所述百眼藤与食用酒精的质量比为2:11；然后置于超声提取机中提取50min，得到提取液；将得到的提取液过滤，收集滤液；将滤渣再次加入到食用酒精中，然后置于功率为5kw的超声提取机中提取70min，得到提取液；然后将得到的滤液与提取液合并得合并液；去除合并液中的酒精即得提取物；将提取物与橄榄油按质量比为1:1的比例混匀，在真空度为0.08MPa的条件下进行萃取，取油相即得百眼藤提取物。

所述百眼藤为攀援灌木，小枝顶部被短粗毛，叶对生；叶柄长4-8mm，托叶膜质，长2-3mm；叶片倒卵状椭圆形，稀椭圆形，衡椭圆状长圆形，长2-6cm，宽1-3cm，先端急尖或钝而具小凸尖，基部楔形，上面无毛，下面脉腋内有短束毛和有时沿主脉上被短粗毛，纸质。花序由2-6个小头状花序组成伞形花序式顶生，小头状花序直径5-8mm，有花4-8朵，着生于长5-10mm的总花梗上；萼简半球形，长约1mm；花冠白色或绿白色，长约5mm，裂片4，几达基部，长圆状披针形，近中部以下密被卷绒毛，顶端内弯。聚合果扁球形，直径8-10mm，熟时红色，花期夏季。性味：甘、凉。功能：清热解毒、散瘀止痛、和胃化湿。主治：感冒咳嗽；百日咳；消化不良；湿疹；跌打损伤，腰肌劳损。

所述百眼藤提取物与利巴韦林与药学上可接受的辅料，包括但不仅限于润滑剂、助流剂、填充剂、黏合剂、崩解剂等，按常规方法制成本发明的口服剂。

所述填充剂为乳糖、微晶纤维素、淀粉、甘露醇、预胶化淀粉中的一种或多种。所述润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌的一种或任意两种以上的组合。所述助流剂包括微粉硅胶、滑石粉中的一种或两种组合。所述黏合剂包括羟丙基纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、或羧甲基纤维素钠中的一种或任意两种以上的组合。所述的崩解剂为交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠中的一种或多种。

本发明的片剂还可以根据需要添加着色剂、矫味剂等辅料，以提高患者的适应性。其中，着色剂可使片剂美观且易于识别，矫味剂可改善片剂的口味，缓和或消除药物不良味道，增加适口性。

本发明有益效果：用百眼藤提取物与利巴韦林作为有效成分来治疗急性病毒性咽炎，还未见有关报道，是百眼藤提取物的一项新的用途。可最大程度的提高疗效，减少了利巴韦林的使用量，也降低了利巴韦林的毒副作用，且使用安全、方便。

本发明的口服剂体内抗甲型流感病毒活性实验

实验材料

1、病毒株甲型流感病毒株FM1，由山东中医药大学实验室提供。

2、动物 SPF级小鼠，6周龄，体重为19-21g，购自山东省实验动物中心，使用IVC笼具饲养，室温24℃，湿度为60%—70%，每日光照8小时，保持笼具，饮水、饲料及环境的清洁卫生，保持室内安静，自由饮水及取食。动物购入后进行48小时适应后，才开展实验。

3、药剂利巴韦林购自广东肇庆星湖生物科技股份有限公司，批号：20071015。按以上方式制成的本发明口服剂和本发明的百眼藤提取物。

4、试剂 4%多聚甲酸溶液、无水乙醇、95%乙醇、二甲苯、丙酮、甲醇、苏木素复染剂、伊红。

5、仪器 leica DM3000倒置显微镜、AL201电子天平、THERMO－80℃低温冷藏。

方法

1、动物分组选用雌性NIH小鼠，随机分成4组，每组20只，分别为对照组、治疗组、利巴韦林组、提取物组。

2、攻毒造模各组小鼠在乙醚轻度麻醉下，以5个LD₅₀（稀释度为1：4300)的FM1病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每只50ul，对照组滴入无菌PBS缓冲液。

3、给药方式各药物组每只小鼠灌胃给药0.3ml，每日1次，对照组灌服无菌PBS缓冲液。治疗组灌服本发明的口服剂，利巴韦林组灌服利巴韦林液，提取物组灌服提取物液，病毒感染后1小时给药，连续6天。

4、肺指数测定感染后每天称体重、观察小鼠症状，记录死亡情况，共观察6天。6天后麻醉处死小鼠，解剖观察肺部病变，并称量体重和肺重，测定肺指数（肺指数=肺脏重量(g)/体质量(g)×100%)。

5、肺组织病理检查感染后第6天，进行肺指数实验，取肺组织，在PBS中水漂洗后吸干，以4%多聚甲醛固定。常规病理组织切片处理后，HE染色镜检。

操作如下：（1）切片脱蜡和染色二甲苯Ⅰ6分钟；二甲苯Ⅱ 6分钟；二甲苯Ⅲ 6分钟；无水乙醇Ⅰ3分钟；无水乙醇Ⅱ 2分钟；95%乙醇2分钟；85%乙醇2分钟；75%乙醇2分钟；自来水洗5分钟，蒸馏水洗2分钟；苏木素浸染8分钟；自来水洗2分钟。

（2）脱水、透明、封固乙醇分钟；70%乙醇1分钟；80%乙醇1分钟；90%乙醇1分钟；无水乙Ⅰ1醇分钟；无水乙醇Ⅱ2分钟；二甲苯Ⅰ1分钟；二甲苯Ⅱ1分钟；中性树胶封片。

6、结果

对照组小鼠每日体重呈上升趋势，变化均匀，表明小鼠处于正常生长状态。利巴韦林组小鼠在攻毒后第二天体重开始下降，第5天体重能够维持。治疗组小鼠第一天体重能够维持，第二天具有上升趋势，后三天体重上升趋势变化均匀，表明小鼠恢复到正常生长状态，提取物组小鼠第二天体重开始持续下降，至实验结束。

流感病毒感染鼠肺的肉眼观察大体病变情况为：对照组与治疗组小鼠肺部为粉红色，色泽均匀，无异常；提取物组大部分小鼠肺部病变明显，体积增大，病灶呈暗红色或猪肝色，可见肺组充血，病灶范围达到2个以上肺叶，左肺和右肺病变分布不对称，无规则；利巴韦林组小鼠肺部病变程度及病灶面积较提取物组有一定程度减轻。

各组对小鼠感染流感病毒肺指数旳影响如下表。

组别	剂量（mg/kg/d)	体重（g）	肺重量（g）	肺指数	P值
						对照组	-	28.22±1.24	0.18±0.02	0.71±0.02	-
治疗组	80	27.53±1.07	0.19±0.02	0.98±0.03	0.002
						利巴韦林组	80	22.58±1.36	0.26±0.03	1.01±0.21	0.016
提取物组	80	20.85±1.11	0.34±0.04	1.42±0.23	0.024

各组小鼠肺组织病理变化为：对照组与治疗组小鼠肺脏，肺泡壁相对正常，肺泡腔完整，无炎性细胞浸润；提取物组中病毒性肺炎表现为肺间质的炎症，镜下肺泡间隔明显增宽，肺间质内血管扩张、水肿，淋巴细胞浸润，部分小鼠有纤维素渗出。利巴韦林组显示肺泡壁增厚不明显，小鼠肺间质的充血水肿症状有所减轻，炎性反应较轻，细支气管腔内无渗出物。通过以上实验结果可知，在用药量相同的情况下，单独使用利巴韦林对感染病毒的小鼠具有一定的治疗作用，但效果不理想。单独使用提取物时，几乎无治疗作用。治疗组中将百眼藤提取物与利巴韦林混用后对感染病毒的小鼠具有显著治疗作用，由此可以推断百眼藤提取物与利巴韦林按照一定比例使用时，具有协同增效作用。

本发明的口服剂治疗急性病毒性咽炎临床资料

1、一般资料山东省临沂人民医院于2010年4月至2016年8月收治的120例门诊患者，男70例，女50例，年龄19～59岁，平均42岁；在患者知情和自愿的基础上，服用市售利巴韦林片加以治疗的为对照组，服用本发明口服剂加以治疗的为治疗组，每组60例患者，统计学对比各组患者年龄、性别、病程无显著性差异（P<0.05)。

2、诊断标准符合急性咽炎的诊断标准，并排除鼻、咽、喉、食管和颈部的隐匿性病变和精神疾病等。

3、治疗方法治疗组口服按本发明的口服剂加以治疗，成人一次0.2g，一日3次；对照组患者服用市售利巴韦林片进行治疗，成人一次0.2g，一日3次，两组均一周为一个疗程。

4、疗效标准痊愈：咽痛、干燥及异物感症状完全消失，咽部粘膜恢复正常；显效：咽痛、干燥及异物感症状基本消失，咽部粘膜急性充血消退；无效：上述症状无改变，咽部仍充血。

5、治疗2个疗程后结果如下表

组别	例数	日服药量	痊愈	有效	无效	复发率	副作用	总有效率（%）
									治疗组	60	0.2g	35	24	1	0	0	98.33
对照组	60	0.2g	14	32	14	8	13例	76.66

通过以上临床资料可知，治疗组总有效率明显高于对照组，而且毒性降低，没有出现毒副作用，无复发；而对照组有13例复发。由此说明本发明的口服剂具有协同增效作用，值得临床推广应用。

具体实施方式

本发明的一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，所述的应用是将百眼藤提取物与利巴韦林作为有效活性成分，按照20:7的重量比混匀后，加入药学上可接受的辅料，控制有效活性成分的含量为7%，按照传统方法制成药剂。所述百眼藤提取物的制备是向干净粉碎的百眼藤中加入体积百分浓度为75％的食用酒精，所述百眼藤与食用酒精的质量比为2:11；然后置于超声提取机中提取50min，得到提取液；将得到的提取液过滤，收集滤液；将滤渣再次加入到食用酒精中，然后置于功率为5kw的超声提取机中提取70min，得到提取液；然后将得到的滤液与提取液合并得合并液；去除合并液中的酒精即得提取物；将提取物与橄榄油按质量比为1:1的比例混匀，在真空度为0.08MPa的条件下进行萃取，取油相即得百眼藤提取物。

Claims

1.一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，其特征在于所述的应用是将百眼藤提取物与利巴韦林作为有效活性成分应用到治疗急性病毒性咽炎中。

2.根据权利要求1所述的一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，其特征在于百眼藤提取物与利巴韦林按照20:7的重量比混匀加入药学上可接受的辅料制成本发明的药剂。

3.根据权利要求1所述的一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，其特征在于药剂中有效活性成分的含量为在6-9%之间。

4.根据权利要求1所述的一种百眼藤提取物在治疗急性病毒性咽炎中的应用，其特征在于所述百眼藤提取物的制备方法如下：向干净粉碎的百眼藤中加入体积百分浓度为75％的食用酒精，所述百眼藤与食用酒精的质量比为2:11；然后置于超声提取机中提取50min，得到提取液；将得到的提取液过滤，收集滤液；将滤渣再次加入到食用酒精中，然后置于功率为5kw的超声提取机中提取70min，得到提取液；然后将得到的滤液与提取液合并得合并液；去除合并液中的酒精即得提取物；将提取物与橄榄油按质量比为1:1的比例混匀，在真空度为0.08MPa的条件下进行萃取，取油相即得百眼藤提取物。