CN108699161B - 多发性骨髓瘤中m-蛋白应答的临床评估 - Google Patents

Abstract

申请人公开了一种MOR202的抗独特型抗体，当其与人白蛋白融合时，在IFE中使抗体移位从而减轻MOR202对M‑蛋白临床评估的任何潜在干扰。

Description

多发性骨髓瘤中M-蛋白应答的临床评估

技术领域

多发性骨髓瘤(MM)是一种血液癌症，涉及恶性浆细胞的克隆扩增。MM是美国最常见的恶性浆细胞瘤和第二常见的恶性血液病。美国年龄调整发病率为每100,000人5.5例，英国的年发病率达到每100,000人中约6至7例。

背景技术

浆细胞产生免疫球蛋白(也称为γ-球蛋白)，其由连接在一起的重链(IgG、IgA、IgM、IgD或IgE)和轻链(κ或λ)组成。一种浆细胞产生一种类型的免疫球蛋白(例如，IgA κ或IgGκ)。通常，机体含有多种不同的浆细胞(“多克隆”)，因此血清中的免疫球蛋白也代表了广谱的不同形式和特异性(多克隆)。在多发性骨髓瘤的情况下，恶性细胞仅是一种或仅是少数不同的浆细胞的拷贝，并且由这种或这些细胞分泌的免疫球蛋白认为是单克隆的。

该单克隆免疫球蛋白称为M-蛋白或副蛋白，并且还可以由重链(最常见的是IgG或IgA，但也包括IgM、IgD或IgE)和轻链(κ或λ)或这些免疫球蛋白的截短形式组成。血清中M蛋白的增加用于鉴定B-细胞恶性肿瘤，例如MM。

目前多种分期系统用于诊断和监测多发性骨髓瘤的应答：a)Durie和Salmon分期系统，b)国际分期系统(ISS)和国际骨髓瘤工作组(IMWG)。Durie和Salmon分期系统涉及评估肿瘤细胞质量、升高的血清免疫球蛋白(Ig)G水平、终末器官损伤和溶骨性骨病变的特征。ISS更加强调基于β2-微球蛋白水平和血清白蛋白水平的疾病负担。IMWG考虑了分子和细胞遗传学异常，具体而言，M-蛋白随时间的减少是最重要的因素之一，并用于评估疾病的进展和治疗成功。

多发性骨髓瘤的蛋白质表现特征包括单克隆(M)-蛋白浓度(IgG、IgA、IgA、IgD)、轻链浓度(包括κ和λ)、异常的β2-微球蛋白、血清白蛋白、肌酐和血红蛋白水平的增加，以及骨髓浆细胞的发现(大于或等于5％)。可以通过多种方法实现对患者产生的蛋白质表现(例如M蛋白)的测量。测量M-蛋白的测试是24小时尿收集测试、尿蛋白电泳(UPEP)、血清蛋白电泳(SPEP)、免疫固定电泳(IFE)和无血清轻链(sFLC)测定。

CD38是在恶性浆细胞和其它淋巴细胞上表达的抗原的实例，因此，代表治疗多发性骨髓瘤和其它丙种球蛋白病的治疗靶标。归因于CD38的功能包括粘附和信号传导事件中的受体介导以及(外-)酶活性。作为一种胞外酶，CD38使用NAD+作为底物形成环状ADP-核糖(cADPR)和ADPR，而且也形成烟酰胺和烟酸-腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)。cADPR和NAADP已证明可作为Ca2+动员的第二信使。通过将NAD+转化为cADPR，CD38调节细胞外NAD+浓度并因此通过调节NAD-诱导的细胞死亡(NCID)来调节细胞存活。除了通过Ca2+的信号传导之外，CD38信号传导通过与T细胞和B细胞上的抗原-受体复合物或其它类型的受体复合物(例如，MHC分子)的交互调节(cross-talk)发生，并且以这种方式参与几种细胞应答，而且还参与IgG的转换和分泌。

正在开发CD38特异性抗体以用于治疗多发性骨髓瘤。CD38特异性抗体描述于WO1999/62526(Mayo Foundation)；WO200206347(Crucell Holland)；US2002164788(Jonathan Ellis)，并入其全部内容以供参考；WO2005/103083(MorphoSys AG)，美国序列号10/588,568，并入其全部内容以供参考，WO2006/125640(MorphoSys AG)，美国序列号11/920,830，并入其全部内容以供参考，和WO2007/042309(MorphoSys AG)，美国序列号12/089,806，并入其全部内容以供参考；WO2006099875(Genmab)，美国序列号11/886,932，并入其全部内容以供参考；WO2011154453A1(Genmab)，美国序列号13/702,857，并入其全部内容以供参考；WO08/047242(Sanofi-Aventis)，美国序列号12/441,466，并入其全部内容以供参考；WO2015066450(Sanofi)，美国序列号14/529,719，并入其全部内容以供参考；WO2012092616A1和WO2012092612A1(Takeda)，美国序列号13/341,860和13/977,207，两者的全部内容均并入以供参考，以及WO2014178820A1(Teva)。

MM患者中的抗-CD38抗体治疗可导致多发性骨髓瘤细胞产生的M-蛋白的部分或完全清除。血清蛋白电泳(SPEP)和免疫固定电泳(IFE)都是用于在多发性骨髓瘤患者中鉴定单克隆蛋白和对其进行免疫分型的必需测定。最近的研究表明，用于治疗多发性骨髓瘤的开发中的某些治疗性抗体在血清IFE中很容易检测到，并且该抗体可以干扰M蛋白水平的检测和监测(McCudden等,Clinical Chemistry,56:12；1897-1904(2010),还参见Genzen等,British Journal of Haematology(2011)155(1)123-125)。McCudden等观察到借助西妥昔单抗(Siltuximab)(抗IL-6抗体)与抗药物抗体的孵育，改变了药物电泳模式，使得治疗性抗体西妥昔单抗可以与内源性M-蛋白区分开。Janssen最近还发表了一项临床试验的进展，旨在使用类似的方法减轻IFE中达雷木单抗(Daratumumab)对M蛋白的干扰，该方法使用理想地标记有生物素或Alexa-fluor标签的小鼠抗-达雷木单抗抗体以在IFE上使复合物移位。Axel等在美国癌症研究协会(AACR)第105届年会(2014年4月5日至9日，美国加利福尼亚州圣地亚哥)上壁报发表Development of a Clinical Assay to Mitigate Daratumumab,an IgGlk Monoclonal Antibody,Interference with Serum Immunofixation andClinical Assessement of M-protein Response in Multiple Myeloma；还参见van deDonk等，Monoclonal antibodies targeting CD38in hematological malignancies andbeyond,Immunological Reviews,270:95-112(2016)。

然而，这些方法对于每种治疗性抗体都是不够的。需要针对每种治疗性抗体特异性的新型减轻策略，以避免这种对SPEP和IFE的潜在干扰，以确保符合国际骨髓瘤工作组(IMWG)标准的有效临床应答说明。

发明内容

本文中申请人公开一种针对MOR202的抗独特型抗体，当其与人白蛋白融合后，在IFE中使抗体移位，从而减轻MOR202对基于M-蛋白临床评估的任何潜在干扰。

将抗独特型抗体、白蛋白融合物整合到MOR202的临床开发设计中，以增强对M-蛋白应答的临床评估。

一方面是针对MOR202的抗独特型抗体。一方面是将抗独特型抗体与人白蛋白融合。在实施方式中，抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，该可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO:18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO:19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO:20)的HCDR3，

该可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO:21)的LCDR1、氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO:22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO:23)的LCDR3。

在一个实施方式中，抗独特型抗体是人抗体。

在实施方式中，抗独特型抗体融合物包含以下氨基酸序列的重链：

在实施方式中，抗独特型抗体融合物包含以下氨基酸序列的轻链：

一方面是一种评估从经历用于多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病治疗的患者获得的血液样品的方法，包括：

a)从患者获得血液样品，

b)将血液样品与抗独特型抗体一起孵育，

c)进行免疫固定电泳(IFE)，以及

d)报告IFE的结果。

在实施方式中，患者正经历用MOR202的治疗。

在实施方式中，对样品进行总M-蛋白水平的评估。

一方面，是一种编码示例性抗独特型抗体或示例性抗独特型抗体

白

蛋白融合物的核酸。

附图说明

图1示出MOR202的氨基酸序列。

图2A-B示出MOR09292(针对MOR202的抗独特型抗体)人白蛋白融合蛋白的氨基酸序列。

图3示出通过血清蛋白电泳测定的蛋白质分布的典型正常模式。

图4示出对于称为单克隆丙种球蛋白病的病症而言常见的在γ-球蛋白区域的聚焦区中具有均匀的尖峰状峰的蛋白质的血清蛋白电泳分布。该峰代表产生均一M蛋白的浆细胞的单个克隆。

图5示出健康供体的血清免疫固定电泳后凝胶的实例。泳道ELP＝总蛋白染色；泳道G＝抗-IgG染色；泳道A＝抗-IgA染色；泳道M＝抗-IgM染色；泳道K＝抗-κ染色；泳道L＝抗-λ染色。

图6示出来自未用药健康供体(A和B)和未用药MM患者(C和D)的样品的血清免疫固定电泳。对未添加(splike)或添加不同浓度的MOR202的样品进行测试。(泳道1＝未添加MOR202；泳道2＝以200μg/mL添加MOR202；泳道3＝以400μg/mL添加MOR202；泳道4＝以800μg/mL添加MOR202；泳道5＝以1200μg/mL添加MOR202)。用虚线包围的条带变得仅在MOR202峰之后可见并且代表相应的分子。标有箭头的条带代表内源性M蛋白。

图7示出MOR202+/-盐水中MOR0929IgG1和MOR09292IgM的预孵育的血清免疫固定电泳。将盐水中恒定浓度为1200μg/mL(A和B)或560μg/mL(C)的MOR202与其不同形式的独特型抗体MOR09292预温育，通过IFE分析制备的样品。A)+B)：MOR202和MOR09292IgG1(使用抗-IgG染色(A)和抗-λ染色(B)(泳道1＝MOR202；泳道2＝MOR09292IgG1 2400μg/mL；泳道3＝MOR202+600μg/mL的MOR09292IgG1；泳道4＝MOR202+1200μg/mL的MOR09292IgG1；泳道5＝MOR202+2400μg/mL的MOR09292IgG1)。C)：MOR202和MOR09292IgM，使用抗-IgG染色(泳道2-4)，抗-λ染色(泳道5-7)和抗-IgM染色(泳道8-10)(泳道2/5/8＝MOR202；泳道3/6/9＝MOR09292IgM 560μg/mL；泳道4/7/10＝MOR202+560μg/mL的MOR09292IgM；泳道1＝用于总蛋白染色以评估血清样品中的一般背景信号的来自健康供体的人血清)。

图8显示MOR202+/-盐水和人血清中MOR09292-人白蛋白融合物(MOR09292-hAlb)的预孵育的血清免疫固定电泳。将盐水(泳道2-3)或血清(泳道4-13)中恒定浓度为1200μg/mL的MOR202与或不与其独特型抗体MOR09292-hAlb以不同比例预孵育，并通过IFE使用抗-IgG染色(泳道2-8)或抗-λ染色(泳道9-13)分析制备的样品。(泳道2＝MOR202；泳道3＝MOR202+2400μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道4＝MOR202；泳道5＝MOR202+1200μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道6＝MOR202+1800μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道7＝MOR202+2400μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道8＝MOR202+3600μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道9＝MOR202；泳道10＝MOR202+1200μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道11＝MOR202+1800μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道12＝MOR202+2400μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道13＝MOR202+3600μg/mL的MOR09292-hAlb；泳道1＝用于总蛋白染色以评估血清样品中的一般背景信号的来自健康供体的人血清)。

具体实施方式

定义

术语“抗独特型”描述了结合抗体可变区的蛋白质或肽。抗独特型蛋白质可以是抗体。例如，抗体MOR09292结合MOR202的可变区。

术语“抗体”包括抗体片段。抗体包括任何同种型的单克隆抗体，例如IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。IgG抗体由通过二硫键连接的两条相同重链和两条相同轻链组成。抗体的重链和轻链含有恒定区和可变区。每个可变区含有称为“互补决定区”(“CDR”)或“高变区”的三个区段，其主要负责结合抗原的表位。它们称为CDR1、CDR2和CDR3，从N末端顺序编号。CDR之外的可变区的更高度保守的部分称为“框架区”。“抗体片段”是指Fv，scFv，dsFv，Fab，Fab'F(ab')2片段或其它片段，其含有至少一个可变重链或可变轻链，每个含有CDR和框架区。

本文中的“CDR”由Chothia等人，Kabat等人，或通过内部编号惯例定义。参见Chothia C,Lesk AM.(1987)Canonical structures for the hypervariable regions ofimmunoglobulins.J Mol Biol.,196(4):901-17，并入其全部内容以供参考。参见KabatE.A,Wu T.T.,Perry H.M.,Gottesman K.S.和Foeller C.(1991).Sequences of Proteinsof Immunological Interest.第五版，NIH出版号91-3242，美国卫生与人类服务部，华盛顿特区，并入其全部内容以供参考。

“VH”是指抗体或抗体片段的免疫球蛋白重链的可变区。“VL”指抗体或抗体片段的免疫球蛋白轻链的可变区。

“Fc区”是指抗体的恒定区，其在人中可以是IgG1、2、3、4亚类或其它。人Fc区的序列可在IMGT，Human IGH C-REGIONs，http://www.imgt.org/ligmdb/(2016年2月22日检索)获得。

如本文所用，“人抗体”或“人抗体片段”包括具有框架区和CDR区均源自人源序列的可变区的抗体和抗体片段。此外，如果抗体含有恒定区，则恒定区也来自这些序列。

“特异性”描述了识别抗原并能够区分这种抗原和一种或多种参照抗原的蛋白质。可以通过标准ELISA测定法鉴定该能力。通常，通过使用不是单一的参考抗原，而是使用一组约三至五种不相关的抗原，例如奶粉、BSA、转铁蛋白等来进行特异性的测定。

“评估血液样品”意指评估与该方法最相关的血液或部分血液样品。目前，对血液的血清成分进行免疫固定电泳。然而，如果将来评估不同的血液成分，则本发明涉及评估血液成分的方法。血液成分包括例如血浆，血清，细胞(例如红细胞和白细胞)，和血小板。血浆包括蛋白质(如球蛋白)和凝血因子，以及盐、糖、脂肪、激素和维生素。

丙种球蛋白病是血清免疫球蛋白水平大大增加的病症。它们可以分为多克隆(所有主要免疫球蛋白类别均增加)或单克隆(单一同种免疫球蛋白增加)。

多克隆丙种球蛋白病由免疫系统的慢性刺激引起。因此它们可能是由以下引起：脓皮症(Pyoderma)；慢性病毒、细菌或真菌感染；肉芽肿性细菌性疾病；脓肿；慢性寄生虫感染；慢性立克次体病，如热带犬全血细胞减少症；慢性免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和肌炎；或者通过一些肿瘤。在许多情况下，没有明显的诱发因素。在一些动物中，由于单一免疫球蛋白类(通常是IgG)占优势，因此丙种球蛋白病最初可能是单克隆的。

单克隆丙种球蛋白病的特征在于产生大量单一免疫球蛋白。单克隆丙种球蛋白病是良性的(即，与潜在的疾病无关)，或更常见地，与分泌免疫球蛋白的肿瘤有关。分泌单克隆抗体的肿瘤来源于浆细胞(骨髓瘤)。骨髓瘤可以分泌任何免疫球蛋白类的完整蛋白质或者免疫球蛋白亚基或片段(轻链或重链)。单克隆丙种球蛋白病的实例包括：霍奇金病；多发性骨髓瘤的变体，例如骨的孤立性浆细胞瘤，髓外浆细胞瘤，浆细胞白血病和非分泌性骨髓瘤，淋巴组织增生性疾病如瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症和淋巴瘤；重链疾病(γ，α，μ)；和淀粉样变性。

术语“CD38”是指称为CD38的蛋白质，具有以下同义词：ADP-核糖基环化酶1，cADPr水解酶1，环状ADP-核糖水解酶1，T10。

人CD38具有以下氨基酸序列：

“MOR202”，一种抗CD38抗体，其氨基酸序列在图1中提供。“MOR202”和“MOR03087”作为同义词用于描述图1中所示的抗体。

编码MOR202可变重结构域的DNA序列为：

编码MOR202可变轻结构域的DNA序列为：

MOR202公开在WO2007/042309、美国序列号12/089,806中，并入其全部内容以供参考。在美国序列号12/089,806中，MOR202是包含对应于SEQ ID NO:21的可变重链和对应于SEQ ID NO:51的可变轻链的抗体，并且编码MOR202的核酸是可变重链SEQ ID NO:6和可变轻链SEQ ID NO:36。

MOR202目前正处于在患有复发性/难治性骨髓瘤的患者中进行的1/2a试验阶段。该研究正在评估MOR202作为单一疗法的安全性和初步疗效，以及与泊马度胺和来那度胺加上地塞米松组合的安全性和初步疗效。

抗体MOR09292是针对MOR202的抗独特型抗体，由以下核酸序列编码：

VH：

VL：

编码MOR09292-VH-CH1_HSA_6His的DNA(无前导序列)(MOR09292-hAlb重链)：

编码MOR09292-VL-λ的DNA(无前导序列)(MOR09292-hAlb轻链)：

人白蛋白具有以下氨基酸序列(包括信号序列)：

多发性骨髓瘤的国际骨髓瘤工作组(IMWG)统一疗效(Response)标准如下：

电泳是一种基于蛋白质的生化特性分离蛋白质的方法。将血清置于特定介质上，并施加电荷。净电荷(阳性或阴性)以及蛋白质的大小和形状通常用于区分各种血清蛋白。

有几组血清蛋白电泳可供使用。这些组的名称基于用于分离和区分各种血清组分的方法。在区域电泳中，例如，不同的蛋白质亚型，其位于由琼脂、纤维素或其它植物材料制成的凝胶上的不同物理位置。对蛋白质进行染色，并以电子方式计算它们的密度，以提供各种蛋白质的绝对和相对量的图形数据。通过用免疫活性剂染色实现蛋白质亚型的进一步分离，这导致免疫固定和/或免疫荧光。

血清蛋白电泳结果的模式取决于两种主要类型蛋白质的分数：白蛋白和球蛋白。白蛋白是血清的主要蛋白质成分，由肝脏在正常生理条件下产生。球蛋白占血清总蛋白含量的较小部分。这些蛋白质的亚类及其相对数量大多是血清蛋白电泳解释的主要焦点。

白蛋白是血清蛋白电泳中观察到的最大峰，位置最接近正电极。接下来的五个成分(球蛋白)标记为αl、α2、βl、β2和γ。这些组分的峰似乎朝向负电极，其中γ峰最接近该电极。

图3示出通过血清蛋白电泳测定的蛋白质分布的典型正常模式。

白蛋白条带代表人血清中最大的蛋白质组分。在肝脏产生较少蛋白质或其中蛋白质的损失或降解增加的情况下，白蛋白水平降低。营养不良、显著的肝脏疾病、肾损失(例如肾病综合征)、激素治疗和妊娠可能导致白蛋白水平低。烧伤也可能导致白蛋白水平低。例如，在血清水相对减少(例如，脱水)的患者中，白蛋白的水平增加。

向凝胶的阴性部分(即阴极)移动，接着的峰包括α1和α2组分。α1-蛋白质级分由α1-抗胰蛋白酶、甲状腺结合球蛋白和皮质激素传递蛋白组成。恶性和急性炎症(由急性期反应物引起)可以增加α1-蛋白质条带。因为肝脏疾病导致的α1-抗胰蛋白酶缺乏或球蛋白产生减少，可能发生α1-蛋白质条带降低。血浆铜蓝蛋白、α2-巨球蛋白和结合珠蛋白有助于α2-蛋白质条带。α2组分作为急性期反应物增加。

β部分具有两个标记为β1和β2的峰。βl主要由转铁蛋白组成，β2含有β-脂蛋白。IgA、IgM，有时和IgG，以及补体蛋白也可以在β级分中得到鉴定。

临床兴趣多集中在血清蛋白谱的γ区域，因为免疫球蛋白迁移到该区域。应该注意，免疫球蛋白通常可以在整个电泳光谱中找到。C-反应蛋白(CRP)位于β和γ组分之间的区域。

尽管许多条件可导致γ区域的增加，但是几种疾病状态引起γ-球蛋白区域的聚焦区中均匀的尖峰状峰(图4)。这些所谓的“单克隆丙种球蛋白病”构成一组病症，其特征在于浆细胞的单个或极少数克隆的增殖，每个浆细胞产生同种M蛋白，例如MM。

免疫固定电泳(IFE)是一种允许蛋白质在电泳后通过与添加的单克隆或多克隆检测抗体试剂形成不溶性复合物而锚定的技术。它按以下四个步骤执行：

1)通过电泳分离蛋白质。

2)所电泳蛋白质的免疫固定(免疫沉淀)-合适的电泳迁移轨迹用单独的抗血清覆盖。抗血清扩散到凝胶中并沉淀相应的抗原(当存在时)。参考轨迹中的蛋白质用固定剂固定。

3)通过印迹法和洗涤从凝胶中除去未沉淀的可溶性蛋白质。抗原-抗体复合物的沉淀被捕获在凝胶基质内。

4)通过染色(例如酸性紫染色)观察沉淀的蛋白质。

为了检测和鉴定可疑的单克隆组分，样品同时在几个轨迹中平行电泳(见图)。电泳后，ELP轨迹作为参考(含有总蛋白质固定物)，提供血清样品蛋白质的完整电泳图案。剩余的轨迹允许单克隆组分的表征，该表征来自单克隆组分与通常针对人IgG、IgA和IgM重链以及针对游离和结合的κ和λ轻链的抗血清的反应(或者没有该反应)。其它抗血清(例如抗-IgD等)也是可能的。然后将免疫固定条带与参考图案中的可疑条带进行比较-相应的条带应具有相同的迁移位置。

图5示出血清免疫固定电泳后凝胶的实例。来自健康供体的血清样品通过凝胶电泳平行分离6次，而每个泳道用不同的试剂染色。染色后，通过印迹法和洗涤除去未复合的蛋白质。泳道ELP＝总蛋白染色；泳道G＝抗-IgG染色；泳道A＝抗-IgA染色；泳道M＝抗-IgM染色；泳道K＝抗-κ染色；泳道L＝抗-λ染色。

工作实施例

IFE材料和方法

使用Sebia的半自动琼脂糖凝胶电泳系统Hydrasys和Hydrasys2并使用Sebia的Maxikit Hydragel 9IF进行免疫固定。该试剂盒设计用于通过免疫固定电泳检测人血清中的免疫球蛋白，并含有所有需要的试剂和材料，即琼脂糖凝胶、缓冲带、稀释剂、酸性紫染剂、抗血清(如IgG、IgA、IgM、κ和λ)、固定液和涂抹器。

为了评估MOR202对M蛋白分析的影响，将不同浓度的MOR202添加到来自健康供体和MM患者的血清样品，并在室温(RT)下孵育至少15分钟。然后使用IFE分析添加或未添加MOR202的样品，并用抗-IgG或抗-λ抗血清使凝胶染色(两种染色试剂都能够结合MOR202)。在两种染色中，MOR202已经在200μg/mL测试的最低浓度(concertation)处检测到，表明IFE干扰处于或甚至低于该药物血清水平(图6)。

为了区分IFE中的MOR202相关测定信号与内源性M蛋白峰，方法是测试将含有MOR202的样品与MOR202特异性抗独特型抗体(MOR09292)预孵育。该方法的目的是将具有或不具有MOR09292预孵育的样品进行比较，证明MOR202相关的IFE测定信号可以迁移，因此清楚地鉴定MOR202相关测定信号。为了评估迁移距离是否大到足以检测，在盐水中制备含有MOR202的样品并与或不与MOR09292一起预孵育。产生抗独特型抗体并以IgG1以及IgM抗体形式进行测试。以恒定浓度1200μg/mL的MOR202制备测试样品，并不与或与各种浓度的两种MOR09292变体预孵育60分钟。然后，分析样品并用抗-IgG或抗-λ抗血清对IFE凝胶染色。结果是当测试样品与各种形式的MOR09292预孵育时，没有观察到适合于临床样品评估的MOR202药物峰的可接受的迁移距离(图7)。令人惊讶的发现表明，即使将药物/抗体复合物的大小增加至与单独的药物抗体相比大约3倍(MOR09292-IgG)或7倍(MOR09292-IgM)，复合物的分子量变化也不会导致测定信号的相关移位(即改变的迁移模式)。

基于这些结果，产生了独特型抗体的另一种变体，其将MOR09292-Fab片段基因地融合至人白蛋白(MOR09292-hAlb)。与单独的药物抗体相比，新变体使药物-抗体复合物的大小增加至2.6倍。更重要的是，人血清白蛋白的加入降低了复合物的总净电荷。如上所述进行样品制备和测试。结果，与单独的MOR202的测定信号相比，可以观察到MOR202/MOR09292-huAlb复合物的明显移位，参见图8。

使用MOR09292-hAlb进行样品预处理的改良IFE测定法被纳入MOR202的临床开发。因此，该测定在负责M蛋白分析的中心实验室中得到验证，并作为“免疫固定(IFE)反射(Reflex)测定”引入测试策略。为了区分MOR202和M蛋白相关信号，除了常规血清IFE和血清蛋白电泳(SPE)之外，还进行了IFE反射测定，例如当满足以下2个条件时：

a)与M蛋白浓度预处理相比，血清M蛋白水平降低至少≥40％，和

b)留下的M-蛋白峰的至少一个与药物抗体MOR202的特征相同(即IFE中的IgG/λ阳性染色)。

对临床研究MOR202C101中IFE反射测定的使用和结果的案例研究

在第一个用MOR202(MOR202C101)治疗多发性骨髓瘤患者的临床研究中，在观察到血清M蛋白水平降低≥86％后，对患者19007应用IFE反射测定。对于该患者，鉴定的M蛋白峰由IFE描述为IgG/λ阳性描述，与已知的MOR202分子特性相同。实施SPE，在2016年1月12日和2016年2月19日检测到潜在M蛋白的剩余浓度为1或2g/L。IFE反射测定可以证明该测定信号仅由MOR202干扰引起，因此不是M-蛋白相关的(参见总结的实验室结果表1)。结果表明新建立的IFE反射测定如何能够清楚地区分M蛋白，从而区分疾病相关的测定信号与MOR202治疗相关的测定信号。

表1IFE反射测定结果阴性

表1：采用MOR09292-hAlb样品预处理步骤的改良IFE测定的临床应用案例研究-总结的实验室报告患者19007

在开始用MOR202治疗之前，对患者19007检测血清M蛋白阳性(2016年7月27日收到的样品为16g/L-对IFE中IgG/λ阳性染色)。在观察到血清M蛋白水平降低≥86％(2015年12月14日)后，除了IFE和SPE之外还进行IFE反射测定。2016年1月12日和2016年2月19日，显示剩余的M蛋白浓度分别为1或2g/L，仅由MOR202测定干扰引起(即M蛋白的免疫固定反射测定结果“阴性”)。

实施方式

一方面是与白蛋白融合的抗独特型抗体。在一个实施方式中，白蛋白是具有SEQID NO:6的氨基酸序列的人白蛋白。在一个实施方式中，人白蛋白是人白蛋白的片段或人白蛋白的部分序列。

在一个实施方式中，白蛋白是白蛋白的功能性片段。在另一个实施方式中，人白蛋白是人白蛋白的功能性片段。在该上下文中，术语白蛋白或人白蛋白的“功能片段”是指作为天然白蛋白或人白蛋白的片段或变体，但在某种意义上其仍然具有功能活性，仍然能够满足白蛋白的生理作用的白蛋白。

一个实施方式是抗独特型抗体，其对具有包含可变重结构域和可变轻链结构域的抗体具有特异性，该可变重结构域包含氨基酸序列

该可变轻链结构域包含氨基酸序列

一方面，是抗独特型抗体，其对具有可变重结构域和可变轻链结构域的抗体具有特异性，该可变重结构域包含氨基酸序列

该可变轻链结构域包含氨基酸序列

在一个实施方式中，抗独特型抗体与白蛋白融合。在一个实施方式中，白蛋白是具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的人白蛋白。在一个实施方式中，人白蛋白是人白蛋白的片段或人白蛋白的部分序列。在一个实施方式中，人白蛋白是人白蛋白的功能性片段或人白蛋白的部分序列。

在实施方式中，抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，该可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO:18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO:19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO:20)的HCDR3，

该可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO:21)的LCDR1、

氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO:22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO:23)的LCDR3。

在一个实施方式中，抗独特型抗体是人抗体。

在实施方式中，抗独特型抗体包含以下氨基酸序列的可变重链：

和

以下氨基酸序列的可变轻链：

在实施方式中，抗独特型抗体白蛋白融合物包括以下氨基酸序列的重链：

在实施方式中，抗独特型抗体白蛋白融合物包括以下氨基酸序列的轻链：

一方面是一种评估从正经历多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病治疗的患者获得的血液样品的方法，包括：

e)从患者获得血液样品，

f)用抗独特型抗体孵育血液样品，

g)进行免疫固定电泳(IFE)，和

h)报告IFE的结果。

在该方法的实施方式中，患者正经历用具有可变重结构域和可变轻链结构域的抗体进行治疗，该可变重结构域包含氨基酸序列

该可变轻链结构域包含氨基酸序列

在该方法的一个实施方式中，抗独特型抗体与白蛋白融合。在该方法的一个实施方式中，白蛋白是具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的人白蛋白。在该方法的一个实施方式中，人白蛋白是人白蛋白的片段或人白蛋白的部分序列。

示例性的抗独特型抗体MOR09292对MOR202是特异性的。当与人白蛋白融合时，MOR202的抗独特型抗体在IFE中使抗体移位，从而减轻MOR202对基于M-蛋白的临床评估的任何潜在干扰。预计我们的对用于治疗多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病的其它抗体特异性的其它抗独特型抗体的融合物，将具有类似的结果。这意味着其它抗独特型抗体白蛋白融合物可用于在IFE中使抗体移位，从而减轻该抗体对基于M蛋白的临床评估的任何潜在干扰。

在该方法的实施方式中，抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，该可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO:18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO:19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO:20)的HCDR3，

该可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO:21)的LCDR1、氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO:22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO:23)的LCDR3。

在该方法的实施方式中，抗独特型抗体是人抗体。

在该方法的实施方式中，抗独特型抗体包含以下氨基酸序列的可变重链：

和

以下氨基酸序列的可变轻链：

在该方法的实施方式中，抗独特型抗体白蛋白融合物包含以下重链氨基酸序列：

在该方法的实施方式中，抗独特型抗体白蛋白融合物包含以下轻链氨基酸序列：

在该方法的实施方式中，样品获自正经历对多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病治疗的患者。在进一步的实施方式中，丙种球蛋白病是单克隆丙种球蛋白病。在进一步的实施方式中，单克隆丙种球蛋白病包括：霍奇金病；多发性骨髓瘤的变体，例如，骨的孤立性浆细胞瘤，髓外浆细胞瘤，浆细胞白血病和非分泌性骨髓瘤，淋巴组织增生性疾病，例如，瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症和淋巴瘤；重链疾病(γ，α，μ)；和淀粉样变性。

在该方法的实施方式中，评估样品的总M蛋白水平。

一方面，是一种编码示例性抗独特型抗体或抗独特型抗体白蛋白融合物的核酸。在一个实施方式中，抗独特型抗体是MOR09292。在一个实施方式中，抗独特型抗体由编码图2A-B中所示氨基酸序列的核酸序列编码。

在一个实施方式中，抗独特型抗体由核酸序列SEQ ID NO:26(VH)和SEQ ID NO:27(VL)编码。

序列表

<110> 莫佛塞斯公司

<120> 多发性骨髓瘤中M-蛋白应答的临床评估

<130> MS241/PCT

<140> EP 16158714.2

<141> 2016-03-04

<160> 28

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 300

<212> PRT

<213> 智人

<400> 1

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Ser Arg Arg Phe Ala Glu Ala Ala Cys Asp Val Val His Val Met Leu

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<211> 360

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

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<400> 2

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<212> DNA

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<220>

<221> 来源

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<400> 3

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<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成多核苷酸"

<400> 5

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<212> PRT

<213> 智人

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165 170 175

Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys

180 185 190

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Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser

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<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成多肽"

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<213> 人工序列

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Gly Ile Ser Gly Asp Pro Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

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Gly

<210> 12

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<213> 人工序列

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Asp Leu Pro Leu Val Tyr Thr Gly Phe Ala Tyr

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<213> 人工序列

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<213> 人工序列

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Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

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<212> PRT

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<212> PRT

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

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Ser Arg Gly Ala Gly Met Asp Tyr

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

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<212> PRT

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<220>

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

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<400> 24

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Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg Tyr Lys Ala

370 375 380

Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala Cys Leu Leu

385 390 395 400

Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser Ser Ala Lys

405 410 415

Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu Arg Ala Phe

420 425 430

Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro Lys Ala Glu

435 440 445

Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys Val His Thr

450 455 460

Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp Arg Ala Asp

465 470 475 480

Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser Ser Lys Leu

485 490 495

Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His Cys Ile Ala

500 505 510

Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser Leu Ala Ala

515 520 525

Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala Glu Ala Lys

530 535 540

Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg Arg His Pro

545 550 555 560

Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr Tyr Glu Thr

565 570 575

Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu Cys Tyr Ala

580 585 590

Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro Gln Asn Leu

595 600 605

Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu Tyr Lys Phe

610 615 620

Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro Gln Val Ser

625 630 635 640

Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys Val Gly Ser

645 650 655

Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys Ala Glu Asp

660 665 670

Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His Glu Lys Thr

675 680 685

Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser Leu Val Asn

690 695 700

Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr Tyr Val Pro

705 710 715 720

Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp Ile Cys Thr

725 730 735

Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala Leu Val Glu

740 745 750

Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu Lys Ala Val

755 760 765

Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys Ala Asp Asp

770 775 780

Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val Ala Ala Ser

785 790 795 800

Gln Ala Ala Leu Gly Leu Val Asn Ser Arg His His His His His His

805 810 815

<210> 25

<211> 217

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成多肽"

<400> 25

Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Ala Asp Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Asp Glu Ser

85 90 95

Ser Asn Ser Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu

115 120 125

Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe

130 135 140

Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val

145 150 155 160

Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys

165 170 175

Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser

180 185 190

His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu

195 200 205

Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<210> 26

<211> 2448

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成多核苷酸"

<400> 26

caggtgcaat tggttcagag cggcgcggaa gtgaaaaaac cgggcgaaag cctgaaaatt 60

agctgcaaag gttccggata ttccttttct aattattgga tttcttgggt gcgccagatg 120

cctgggaagg gtctcgagtg gatgggcatt atcgatccgg cttctagcaa gacccgttat 180

tctccgagct ttcagggcca ggtgaccatt agcgcggata aaagcattag caccgcgtat 240

cttcaatgga gcagcctgaa agcgagcgat acggccatgt attattgcgc gcgttctcgt 300

ggtgctggta tggattattg gggccaaggc accctggtga cggttagctc agcctccacc 360

aagggtccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttgagcc caaatctgat 660

atcgacgccc acaagagcga ggtggcccac cggtttaagg acctgggcga ggaaaacttc 720

aaggccctgg tgctgatcgc cttcgcccag tacctgcagc agtgcccctt cgaggaccac 780

gtgaagctcg tgaacgaagt gaccgagttc gccaagacct gcgtggccga tgagagcgcc 840

gagaactgcg acaagagcct gcacaccctg ttcggcgaca agctgtgtac cgtggccacc 900

ctgagagaaa cctacggcga gatggccgac tgctgcgcca agcaggaacc cgagaggaac 960

gagtgcttcc tgcagcacaa ggacgacaac cccaacctgc ccagactcgt gcggcccgaa 1020

gtggacgtga tgtgcaccgc cttccacgac aacgaggaaa ccttcctgaa gaagtacctg 1080

tacgagatcg ccagacggca cccctacttc tacgcccccg agctgctgtt cttcgccaag 1140

cggtacaagg ccgccttcac cgagtgttgc caggccgccg ataaggccgc ttgcctgctg 1200

cctaagctgg acgagctgag ggatgagggc aaggccagct ctgccaagca gagactgaag 1260

tgcgccagcc tgcagaagtt cggcgagcgg gcctttaaag cctgggccgt ggctagactg 1320

agccagagat tccccaaggc cgagtttgcc gaggtgtcca agctcgtgac cgacctgacc 1380

aaggtgcaca ccgagtgctg tcacggcgac ctgctggaat gcgccgacga cagagccgat 1440

ctggccaagt acatctgcga gaaccaggac agcatcagca gcaagctgaa agagtgctgc 1500

gagaagcctc tgctggaaaa gagccactgt atcgccgagg tggaaaacga cgagatgccc 1560

gccgatctgc cttctctggc cgccgacttc gtggaaagca aggacgtgtg caagaactac 1620

gccgaggcca aggatgtgtt cctgggcatg tttctgtatg agtacgcccg cagacacccc 1680

gactacagcg tggtgctgct gctgagactg gccaaaacct acgagacaac cctggaaaag 1740

tgctgtgccg ccgctgaccc ccacgagtgt tacgccaagg tgttcgacga gttcaagcca 1800

ctggtggaag aaccccagaa cctgatcaag cagaattgcg agctgttcga gcagctgggc 1860

gagtacaagt tccagaacgc cctgctcgtg cggtacacca agaaagtgcc ccaggtgtcc 1920

acccccaccc tggtggaagt gtcccggaac ctgggcaaag tgggcagcaa gtgctgcaag 1980

caccctgagg ccaagagaat gccctgcgcc gaggactacc tgtctgtggt gctgaaccag 2040

ctgtgcgtgc tgcacgagaa aacccccgtg tccgacagag tgaccaagtg ctgtaccgag 2100

agcctcgtga acagacggcc ctgcttcagc gccctggaag tggatgagac atacgtgccc 2160

aaagagttca acgccgagac attcaccttc cacgccgaca tctgcaccct gtccgagaaa 2220

gagcggcaga tcaagaaaca gaccgctctg gtggaactcg tgaagcacaa gcccaaggcc 2280

accaaagaac agctgaaggc cgtgatggac gacttcgccg cctttgtgga aaaatgctgc 2340

aaggccgatg acaaagagac atgcttcgcc gaagagggca agaaactggt ggccgcctct 2400

caggctgctc tgggactggt taactctaga caccatcacc atcaccat 2448

<210> 27

<211> 651

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成多核苷酸"

<400> 27

gatatcgtgc tgacccagcc gccttcagtg agtggcgcac caggtcagcg tgtgaccatc 60

tcgtgtacgg gcagcagcag caacattggt gctggttatg atgtgcattg gtaccagcag 120

ttgcccggga cggcgccgaa acttctgatt tatgctgata ataatcgtcc ctcaggcgtg 180

ccggatcgtt ttagcggatc caaaagcggc accagcgcga gccttgcgat tacgggcctg 240

caaagcgaag acgaagcgga ttattattgc ggttcttatg atgagtcttc taattctatg 300

gtgtttggcg gcggcacgaa gttaaccgtc ctaggtcagc ccaaggctgc cccctcggtc 360

actctgttcc cgccctcctc tgaggagctt caagccaaca aggccacact ggtgtgtctc 420

ataagtgact tctacccggg agccgtgaca gtggcctgga aggcagatag cagccccgtc 480

aaggcgggag tggagaccac cacaccctcc aaacaaagca acaacaagta cgcggccagc 540

agctatctga gcctgacgcc tgagcagtgg aagtcccaca gaagctacag ctgccaggtc 600

acgcatgaag ggagcaccgt ggagaagaca gtggccccta cagaatgttc a 651

<210> 28

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /备注="人工序列的说明:合成6xHis标签"

<400> 28

His His His His His His

1 5

Claims (10)

1.一种与白蛋白或白蛋白的功能性片段融合的抗独特型抗体，其中所述与白蛋白或白蛋白的功能性片段融合的抗独特型抗体对具有可变重链结构域和可变轻链结构域的抗-CD38抗体具有特异性，

所述可变重链结构域包含氨基酸序列

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)，

所述可变轻链结构域包含氨基酸序列

DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGI PERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ(SEQ ID NO：8)，

其中所述抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，

所述可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO：18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO：19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO：20)的HCDR3，

所述可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO：21)的LCDR1、

氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO：22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO：23)的LCDR3。

2.根据权利要求1所述的抗独特型抗体，其中所述抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，

所述可变重链的氨基酸序列为

QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFSNYWISWVRQMPGKGLEWMGIIDPASSKTRYSPSFQGQVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARSRGAGMDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：16)，

所述可变轻链的氨基酸序列为

DIVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYADNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQSEDEADYYCGSYDESSNSMVFGGGTKLTVLGQ(SEQ ID NO：17)。

3.根据权利要求2所述的抗独特型抗体，其中所述重链包含氨基酸序列

QVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFSNYWISWVRQMPGKGLEVVMGIIDPASSKTRYSPSFQGQVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARSRGAGMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSDIDAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSWLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGLVNSRHHHHHH (SEQ ID NO：24)，且

所述轻链包含氨基酸序列

DIVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYADNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQSEDEADYYCGSYDESSNSMVFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(SEQ IDNO：25)。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗独特型抗体，其用于评估血液样品。

5.一种编码根据权利要求1-3中任一项所述的抗独特型抗体的核酸。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的抗独特型抗体在制备用于评估从经历对多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病的治疗的患者中获得的血液样品的制剂中的用途，其包括：

a)从所述患者获得血液样品，

b)将所述血液样品与根据权利要求1-3中任一项所述的抗独特型抗体一起孵育，

c)进行免疫固定电泳(IFE)，以及

d)报告所述IFE的结果。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述患者正经历用具有可变重链结构域和可变轻链结构域的抗体的治疗，

所述可变重链结构域包含氨基酸序列

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)，

所述可变轻链结构域包含氨基酸序列

DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ(SEQ ID NO：8)。

8.根据权利要求6所述的用途，其中评估所述样品的总M-蛋白水平。

9.一种抗独特型抗体，其对具有可变重链结构域和可变轻链结构域的抗-CD38抗体具有特异性，

所述可变重链结构域包含氨基酸序列

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)，

所述可变轻链结构域包含氨基酸序列

DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ(SEQ ID NO：8)，

其中所述抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，

所述可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO：18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO：19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO：20)的HCDR3，

所述可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO：21)的LCDR1、

氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO：22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO：23)的LCDR3。

10.抗独特型抗体在制备用于评估从经历对多发性骨髓瘤或其它丙种球蛋白病的治疗的患者中获得的血液样品的制剂中的用途，其包括：

a)从所述患者获得血液样品，

b)将所述血液样品与抗独特型抗体一起孵育，

c)进行免疫固定电泳(IFE)，以及

d)报告所述IFE的结果，

其中所述患者正经历用具有可变重链结构域和可变轻链结构域的抗-CD38抗体的治疗，

所述可变重链结构域包含氨基酸序列

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：7)，

所述可变轻链结构域包含氨基酸序列

DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ(SEQ ID NO：8)，并且

其中所述抗独特型抗体包含可变重链和可变轻链，

所述可变重链包含

氨基酸序列YSFSNYWIS(SEQ ID NO：18)的HCDR1、

氨基酸序列WMGIIDPASSKTRYSPSFQG(SEQ ID NO：19)的HCDR2、

氨基酸序列SRGAGMDY(SEQ ID NO：20)的HCDR3，

所述可变轻链包含

氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH(SEQ ID NO：21)的LCDR1、

氨基酸序列LLIYADNNRPS(SEQ ID NO：22)的LCDR2、

氨基酸序列GSYDESSNSM(SEQ ID NO：23)的LCDR3。

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