CN108690006A

CN108690006A - 一类化合物及其在抗aml药物中的用途

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Publication number: CN108690006A
Application number: CN201810323818.5A
Authority: CN
Inventors: 卢帅; 衡浩; 向黎; 王志杰; 蔡炅桁; 秦天人; 支燕乐; 田洁怡; 陈亚东; 陆涛
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2017-04-12
Filing date: 2018-04-03
Publication date: 2018-10-23
Anticipated expiration: 2038-04-03
Also published as: CN108690006B

Abstract

本发明涉及药物化学领域，公开了一类化合物及其在抗AML药物中的用途。具体涉及唑环取代噻吩类化合物、它们的制备方法、含有这些化合物的药用组合物以及它们的医疗用途，特别是作为FMS样酪氨酸激酶3的ITD突变型选择性抑制剂的用途。

Description

一类化合物及其在抗AML药物中的用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及唑环取代噻吩类化合物、它们的制备方法、含有这些化合物的药用组合物以及它们的医疗用途，特别是作为FMS样酪氨酸激酶3的ITD突变型选择性抑制剂的用途。

背景技术

细胞信号转导在调控细胞的生长、增殖、分化、凋亡等过程中发挥关键作用。细胞增殖和凋亡的不平衡导致癌症等重大疾病发生，细胞癌变的本质是细胞信号转导的失调。当细胞中调控细胞正常生理活动的细胞信号转导通路在致癌因子的作用下发生改变后，调控细胞生长、分裂及分化的正常生物学效应发生异常，进而引起细胞生长、分裂异常以及细胞形态的改变，导致癌症的发生。由于在细胞信号转导通路中发挥关键作用，且癌细胞中往往伴随有蛋白激酶的过度表达，以蛋白激酶为靶点开发抗肿瘤药具有广阔的前景。

白血病是造血系统的恶性肿瘤性疾病，是一种造血干/祖细胞发生恶性病变的血液系统肿瘤。按照不同自然病程和不同阶段细胞增生程度白血病可以分为两大类：即急性白血病和慢性白血病。根据增生的白血病细胞种类的不同，又可分为急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)和急性髓细胞白血病(acute myelogenousleukemia，AML)两大类。其中AML占新诊断成人急性白血病的60％-70％，并且呈现出逐年上升的趋势(Environmental Health Perspectives，2007，115(1)：138-145)。目前AML的发病机制尚不完全清楚，细胞遗传学和分子生物学研究发现，两类基因突变在AML的发病机制中起主要作用(Future Oncology， 2016，12(6)：827-838)。第一类是涉及信号转导通路中酪氨酸激酶的基因突变，使酪氨酸激酶持续激活，导致细胞信号转导的失控；第二类突变涉及造血调控相关转录因子，该突变导致促使细胞分化的基因功能缺失，使造血细胞的分化和凋亡受到抑制。鉴于蛋白激酶及其相关信号通路在AML发生过程中的关键作用，选择合适的蛋白激酶为靶点开发抑制剂，成为AML 治疗的重要策略

FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3，FLT3)是一种III型受体酪氨酸激酶，在造血细胞和淋巴细胞的增殖、分化、凋亡过程中发挥关键作用。研究表明，超过三分之一的AML患者伴随有FLT3的异常表达。因此，以FLT3作为靶标开发抑制剂成为恶性血液疾病治疗的研究热点(Blood，2002，100(5)：1532-1542)。

FLT3基因序列最早在小鼠体内被发现和表征，1993年Rosnet O等人(Blood，1993，82(4)： 1110-1119)在人CD34⁺造血祖细胞中克隆出其蛋白结构。人FLT3基因包含24个密码子，位于13号染色体(13q12)上，编码993个氨基酸，与小鼠FLT3有85％的同源性。细胞膜外N端糖基化的FLT3分子量为165kDa，主要分布在细胞膜上，而非糖基化的FLT3则不与细胞膜结合，分子量为135～140kDa。FLT3主要在骨髓细胞、脐带血细胞和造血祖细胞中表达(Blood，2002，100(5)：1532-1542)。

与其它受体酪氨酸激酶一样，FLT3受体的结构包括由5个免疫球蛋白样结构组成的细胞膜外结构域、跨膜结构域、近膜结构域和细胞膜内酪氨酸激酶结构域。Griffith等(Molecular Cell，2004，13(2)：169-178)最早解析出FLT3激酶域自抑制构象(autoinhibited form)的晶体结构，该结构域由C端和N端两部分组成，其中C端被插入结构域(kinase insert domain) 分为N-lobe和C-lobe两个部分。N-lobe与C-lobe围绕插入结构域旋转，形成激酶的催化口袋，激酶的ATP结合位点位于该口袋内。当N-lobe与C-lobe围绕插入结构域靠近时，两部分结构中的关键催化残基相互作用，使得激酶处于活化构象；反之则激酶处于非活化构象。激酶域活化环(activation loop，A-loop)位于C-lobe中，其结构为起始端残基 Asp829-Phe830-Gly831末端残基Trp854-Met855-Ala856的部分。当A-loop中关键的酪氨酸残基位未被磷酸化时，其结构折叠在催化口袋中激酶处于非活化构象，阻止底物和ATP进入催化口袋；反之则催化口袋打开，激酶处于活化构像。

近膜结构域(Juxtamembrane Domain，JM)是FLT3受体结构中的突出特点，且直接参与激酶的自抑制调控(Molecular Cell，2004，13(2)：169-178)。JM结构域可以划分为三个部分：绑定部分(JM-B)、转换部分(JM-S)和连接部分(JM-Z)。其中JM-B结构位于残基Tyr572 至Met578之间，几乎埋藏在激酶域中，连接胞内结构域的活化部分与非活化部分；JM-S结构位于激酶域C-lobe表面残基Va1579至Va1592部分，含有两个关键残基Tyr589和Tyr591，调节激酶的活化状态(The Journal of Biological Chemistry，2002，278(34)：31461-31464)；JM-Z 连接激酶域的N-lobe，位于残基Asp593至Trp603之间。JM结构域对FLT3受体的精确调控机制目前尚不完全清楚。有理论表明，JM-B与JM-S结构折叠，JM-B中的残基Tyr572与ATP 结合位点的残基Glu661形成氢键，整个JM-B结构固定在N-lobe与C-lobe之间，阻止它们之间形成催化口袋，同时JM-B结构的存在使得A-loop处于折叠构象，最终使得激酶处于非活化状态。当JM-S中的Tyr589或Tyr591被磷酸化激活后，JM-S的折叠构像被破坏使得JM-B 无法保持原来的空间位置，失去对激酶域的抑制作用；相反，当酪氨酸残基被磷酸转移酶去磷酸化后，JM-S恢复原来的构象，JM-B重新回到抑制构象从而实现对激酶的自抑制调控 (Molecular Cell，2004，13(2)：169-178)。

FLT3配体(FLT3 ligand，FL)具有多种亚型，人的FL亚型具有可溶型和细胞结合型两种配体，与干细胞生长因子(Stem Cell Factor，SCF)、巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony-stimulating factor，M-CSF)具有同源性，主要在骨髓和造血细胞中表达(Nature，1994， 368(6472)：643-648；Cell，1993，75(6)：1157-1167)。单独的FL并不能有效的诱导淋巴和骨髓干/祖细胞的增殖分化，但在其它生长因子如SCF、IL-3、IL-6等的协同作用下，其诱导作用大大增强。

研究表明，70％～100％的AML患者的白血病细胞中被发现有FLT3的表达其中超过30％伴随有FLT3的激活突变(Leukemia，1996，10(2)：261-270；Leukemia & Lymphoma，2014，55(2)： 243-255)。FLT3突变通常会导致其持续性活化，在不与配体结合的情况下，发生自身磷酸化激活下游信号通路，促使造血细胞和淋巴细胞的异常增殖，最终引发恶性血液疾病。FLT3的激活突变主要有两种类型：a)近膜结构域的内部串联重复(internaltandem duplication，ITD) 突变；b)激酶结构域(tyrosine kinase domain，TKD)中的点突变。

ITD突变是最早被发现的一类FLT3激活突变，约20％～25％的AML患者伴随有此突变类型(Leukemia，2000，14(4)：675-683；Blood，2001，98(6)：1752-1759)。ITD突变是指编码FLT3 基因的14和15位外显子插入串联重复的碱基序列，导致FLT3受体近膜结构域的氨基酸序列发生改变。突变基因的插入位置及长度均具有多态性，其长度为3～400个碱基不等，但串联复制的序列始终进行框内转录(Blood，2008，111(10)：4930-4933)。已知FLT3受体的近膜结构域在受体活性调节过程中发挥关键作用，通常情况下近膜结构域对激酶域具有自身抑制功能，能够对激酶结构域的磷酸化产生抑制作用。但是ITD突变会破坏近膜结构域的自抑制活性，致使该自抑制作用丧失，使FLT3在无配体存在的情况下也能发生二聚体化并保持持续活化的构象。同时ITD突变型FLT3受体能够与其野生型受体形成二聚体，并磷酸化其酪氨酸残基，激活下游信号通路(Oncogene，2002，21(16)：2555-2563)。ITD突变型FLT3还可以强烈活化STAT5信号途径，促进细胞的分化和增殖(Blood，2006，108(4)：1339-1345)。具有 ITD突变的AML患者，往往伴随有白细胞数目增多，原始骨髓细胞与血细胞百分比增加等临床表现(Blood，2002，100(1)：59-66)。由于ITD突变后病人AML复发率高且不良反应多，所以与普通AML患者相比，ITD突变患者的不良预后更差(Environmental HealthPerspectives， 2007，115(1)：138-145)。

FLT3的点突变主要发生在TKD的活化环(activation loop)上。FLT3基因第20位外显子发生插入或者删除，可使FLT3中TKD碳端的835位天冬氨酸残基发生突变。大约7％的AML患者中存在该突变类型(Blood，2001，97(8)：2434-2439)。最常见的突变为Asp835Tyr，同时还有其他突变如Asp835Val、Asp835Glu和Asp835Asn等。最近的研究发现，FLT3激酶域676位天冬氨酸残基也存在激活突变(Blood，2013，122(10)：1761-1769)。这些点突变能够将活化环稳定于结合ATP时的构象，从而使FLT3持续活化。将TKD突变基因导入小鼠造血干细胞可导致寡克隆淋巴紊乱(oligoclonal lymphoid disorder)，说明TKD与ITD突变对细胞信号通路的影响不同(Blood，2005，105(12)：4792-4799)。另外，TKD突变AML患者的不良预后尚不清楚(Blood，2010，115(3)：453-474)。

鉴于FLT3在恶性血液疾病，尤其在AML发病过程中起关键作用，FLT3靶向治疗已成为抗AML药物研究的重点。目前部分针对FLT3的抑制剂如Lestaurtinib(CEP-701)、Tandutinib (MLN-518)、KW2449、Sunitinib(SU11248)、Sorafenib(BAY43-9006)等已进入临床研究。 Midostaurin(PKC412)的上市进一步证实FLT3作为AML治疗药物靶标是有效的。

FLT3-ITD突变会导致AML的复发，使肿瘤细胞对抑制剂产生耐药性(Nature，2012，485(7397)：260-263)。此外，FLT3-ITD型突变与其他血液性疾病也有相关性，如急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)和急性淋巴性白血病(acute lymphoblasticleukaemia，ALL)等，其中APL 中FLT3-ITD的发生率约为20％，后两者的发生率并不高，MDS和ALL的分别为8％、3％左右。(Hematologic Malignancies，2002，9(4)：274)。因此有必要开发对FLT3-ITD有强抑制活性的抑制剂，从而克服耐药性，并治疗相关白血病。此外，有证据表明激酶抑制剂的副作用与其选择性不强有关。选择性抑制剂可以特异阻断某条信号通路，对其它正常信号通路的影响较小，引发副作用的可能性也有所降低，易于引入个性化治疗方案。而且选择性激酶抑制剂还可以和其它靶向药物联合用药，协同治疗肿瘤。然而现有的FLT3抑制剂通常对其它受体酪氨酸激酶也有抑制活性(中国新药杂志，2016，25(17)：47-53)，因此开发FLT3选择性抑制剂，尤其是FLT3-ITD选择性抑制剂，对于研究治疗AML和其他有关白血病的药物非常重要。

此前曾有专利报道与本专利申请相似的化合物作为Polo like kinase 1(PLK1)抑制剂，用于制备抗肿瘤药物(中国专利申请号：201310372834.0)，不过并未报道其化合物具有除 PLK1抑制活性之外的其它激酶的抑制活性，也并未提供其化合物对AML细胞的抑制活性数据。

PLK1属于丝/苏氨酸蛋白激酶，与FLT3的同源性较差。虽然也有文献报道PLK1与AML 有关(Therapeutic Advances in Hematology，2015，6(2)：80-87)，但PLK1抑制剂主要干扰细胞有丝分裂，如阻碍中心体成熟、纺锤体形成和胞质分裂等(Nature Reviews DrugDiscovery，2009， 8(7)：547-566)，这同FLT3抑制剂的作用机制不同。另外，目前尚无文献报道PLK1抑制剂在抑制AML细胞中的作用与FLT3或FLT3-ITD有关，也没有公开报道的PLK1抑制能够选择性地抑制FLT3或FLT3-ITD。反之，也没有文献报道FLT3或FTL3-ITD抑制剂通过干扰PLK1 的功能而产生抗AML作用。PLK1抑制剂中，临床试验进展最快的是Volasertib(BI6727)，其临床试验结果表明可对人AML产生治疗效果，但在临床研究对象的选择上并未以FLT3或 FLT-ITD的表达水平为指标(Leukemia，2015，29(1)：11-19)，这也说明其作用机制与FLT3抑制剂不同。因此，从一般药学工作者角度来看，不可能由该专利(201310372834.0)所公开的内容推断出其化合物具有FLT3-ITD抑制活性，进而说明其能选择性地抑制表达FLT3-ITD 的AML细胞生长。

发明内容

本发明发现了一类以唑环取代噻吩为母核的选择性FLT3-ITD抑制剂，可用于制备治疗 FLT3-ITD相关的疾病的药物。据下述的研究结果可知，本类化合物对表达FLT3-ITD的肿瘤细胞株表现强选择性，表明其具有作为特定AML治疗药物的用途，该AML是表达FLT3-ITD 的。

本发明的目的在于，提供一类具有FLT3-ITD抑制活性的小分子有机化合物或其药学上可接受的盐。其包括通式I化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸、杏仁酸。此外还包括无机碱的酸式盐，如：含有碱性金属阳离子、碱土金属阳离子、铵阳离子盐。

本发明的另一目的是提供上述化合物的制备方法。

本发明的又一目的是提供包含上述化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。

本发明的还一目的在于，提供上述化合物或其药学上可接受盐及其药用组合物的医疗用途，尤其是在预防、延缓或治疗FLT3-ITD单独或参与介导的疾病，特别是AML的药物中的用途。

为实现上述目的，本发明提供具有通式(I)所示结构的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，R¹、R²独立地表示氢、烷基、氰基、卤素、卤代烷基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、巯基、氨基、烷基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O) 或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、烷基、卤素、卤代烷基、氰基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基或烷基磺酰基；

其中，R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、烷基、氰基、卤素、卤代烷基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、芳烷基、二芳基烷基、芳基、Het、C_3-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、 Het磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、芳烷基、二芳基烷基、芳基、Het、C_3-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、 Het磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、烷基、卤素、卤代烷基、氰基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、Het磺酰基、C_3-C₈的脂肪族碳环、芳基或Het；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团；

烷基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基；或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；

亚烷基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基；或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基失去一个氢原子形成的基团；

烷氧基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基；或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；其中各碳原子任选被氧取代；

烷硫基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基；或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；其中各碳原子任选被硫取代；

烷氨基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基；或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；其中各碳原子任选被NH原子团取代；

烷氧基烷基为如上定义的烷氧基与烷基连接；

芳基为选自苯基、萘基、苊基或四氢萘基的碳环，其各自任选被1、2或3个取代基取代，各取代基独立地选自氢、烷基、氰基、卤素、卤代烷基、羟基、巯基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、芳烷基、二芳基烷基、芳基或Het；

芳烷基、二芳基烷基为如上定义的芳基与烷基连接；

Het为选自吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三氮唑基、1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基的单环杂环；或选自喹啉基、喹喔啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吡啶并噻吩基、喹唑啉基、嘧啶并噻吩基、2，3-二氢苯并[1，4]二氧杂环己烯基或苯并[1，3]二氧杂环戊烯基的双环杂环；或选自3-8个碳原子的单环饱和烃基、6-12个碳原子的双环饱和烃基、6-12个碳原子的苯环并饱和脂肪环的双环烃基，其中环上的碳原子独立任选地被1～4个O、S、N或NH取代；各单环或双环任选被1、2或3个取代基取代，各取代基独立选自卤素、卤代烷基、羟基、烷基或烷氧基；卤素为选自氟、氯、溴或碘的取代基；

卤代烷基为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基，或为具有3-6个碳原子的环状饱和烃基，或为连接具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基的具有3-6个碳原子的环状饱和烃基；其中一个或多个碳原子被一个或多个卤原子取代。

本发明的优选方案在于：

R¹、R²独立地表示氢、C_1-C₃烷基、氰基、卤素、卤代的C_1-C₃烷基、羟基、氨基、巯基、C_1-C₃烷基氧基、C_1-C₃烷基氨基、NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基、C_1-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)，其中羟基、巯基、氨基、C_1-C₃烷基、C_1-C₃烷氧基、 C_1-C₃烷氨基、NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基、C_1-C₃烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O) 各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、C_1-C₃烷基、卤素、卤代的C_1-C₃烷基、氰基、羟基、氨基、C_1-C₃烷氧基、C_1-C₃烷氨基、NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基或C_1-C₃烷基磺酰基；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、C_1-C₃烷基、氰基、卤素、卤代的C_1-C₃烷基、羟基、氨基、 C_1-C₃烷氧基、C_1-C₃烷氨基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、C_3-C₈的脂肪族碳环、 NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C_1-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、C_1-C₃烷氧基、C_1-C₃烷氨基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4- 基、吗啉基、四氢吡咯基、C_3-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C_1-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、 CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、C_1-C₃烷基、卤素、氰基、羟基、氨基、卤代的C_1-C₃烷基、C_1-C₃烷氧基、C_1-C₃烷氨基、C_3-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、C_1-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C_1-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶 -4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

本发明的另一优选方案在于：

R¹、R²独立地表示氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氟甲氧基、羟基、氨基、甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)，其中羟基、氨基、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、 C(O)H或NH₂C(O)各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基或甲磺酰基；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、甲基、乙基、异丙基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基、四氢吡咯基、环丙基、环戊基、环己基、 NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2- 磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲基、乙基、苯基、异丙基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、环戊基、环己基、环丙基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH2C(O)或NH2C(O)NH 各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、甲基、乙基、异丙基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、氯甲基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、环丙基、环戊基、环己基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶 -4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

本发明的另一优选方案在于：

R¹、R²独立地表示氢、甲基、氰基、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、氨基、甲氧基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)，其中羟基、氨基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、 C(O)H或NH₂C(O)各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、甲基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、甲氧基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基或甲磺酰基；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、甲基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、甲氨基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、环丙基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、甲基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基、四氢吡咯基、环丙基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、 NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、甲基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、氯甲基、三氟甲氧基、甲氨基、环丙基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

本发明的另一优选方案在于：

R¹、R²独立地表示氢、甲基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、三氟甲氧基、羟基、氨基、甲氧基、甲氨基、磺酰氨基、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、甲基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、甲基、卤素、羟基、氨基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

本发明的另一优选方案在于：

R¹、R²独立地表示氢、氟、氯、溴、氰基、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲氧基、氨基、甲氨基、羟基、氯甲基或NH₂CO；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、氟、氯、溴、氰基、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲氧基、甲氨基、羟基、氯甲基、N-甲基哌啶-4-基氨基、N-甲基哌嗪-1-基、吗啉基、四氢吡咯基、3- 吗啉基丙氧基、3-乙二氨基丙氨基、3-吗啉基丙氨基、N-甲基哌嗪基乙氨基、3-吗啉基甲酰基、N-甲基哌嗪基甲酰基、3-乙二氨基丙氨甲酰基、N-甲基哌啶基丙氨基甲酰基或3-吗啉基丙氨甲酰基；

其中，X＝N，Y＝NH，或X＝NH，Y＝N；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁或W₃独立地表示N或CH原子团。

通式I的化合物优选以下结构化合物：

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-1)

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(I-2)

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-3)

3-(4-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-4)

3-(5-甲氧基噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-5)

3-(4-甲氧基噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-6)

N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-胺(I-7)

3-(5-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-8)

3-(4-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-9)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-10)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-11)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-12)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-13)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-14)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-吗啉基苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-15)

N-(3-(5-溴噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(3-吗啉丙氧基)苯甲酰胺(I-16)

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-17)

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-18)

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-19)

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-20)

5-(5-(2-甲氧基-4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-21)

5-(5-(2-甲氧基-4-((N-甲基哌啶-4-基)氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-22)

5-(5-(2-甲氧基-4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-23)

5-(5-(2-甲氧基-4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-24)

5-(5-(4-(4-甲基哌啶-1-基羰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-25)

4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(I-26)

4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-(二乙基氨基)丙基)苯甲酰胺(I-27)

4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-吗啉基丙基)苯甲酰胺(I-28)

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-29)

5-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-30)

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-31)

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-32)

5-(5-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-33)

5-(5-(2-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-34)

5-(5-(2-甲氧基-4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-35)

5-(5-(2-甲氧基-4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-36)

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-37)

5-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨甲酰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-38)

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨甲酰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-39)

4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-吗啉丙氨基)苯酰胺(I-40)

N-(3-(4-溴噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-5-(1-甲基哌啶-4-基氨基)苯甲酰胺(I-41)

N-(3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯甲酰胺(I-42)

N-(3-(4-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(1-甲基哌啶-4-基氨基)苯甲酰胺(I-43)

N-(3-(4-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-5-(1-甲基哌啶-4-基氨基)吡啶酰胺(I-44)

5-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-45)

5-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲酰胺(I-46)

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(I-47)

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(I-48)

3-(5-氟噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-49)

N-(3-(5-氟噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(3-吗琳基丙氧基)苯甲酰胺(I-50)

3-(4-氟噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-51)

N-(3-(4-氟噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(3-吗琳基丙氧基)苯甲酰胺(I-52)

5-(5-(2-甲氧基-4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲酰胺(I-53)

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲酰胺(I-54)

3-(噻吩-2-基)-N-(4-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-55)

3-(噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-56)

4-(3-吗啉基丙氧基)-N-(3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲酰胺(1-57)

3-(5-甲氧基噻吩-2-基)-N-(4-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-58)

3-(5-甲氧基噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-59)

N-(3-(4-甲氧基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(3-吗琳基丙氧基)苯甲酰胺(I-60)

3-(5-三氟甲基噻吩-2-基)-N-(4-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-61)

3-(5-三氟甲基噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-62)

4-(3-吗啉基丙氧基)-N-(3-(4-(三氟甲基苯基)噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲酰胺(1-63)

5-(5-(2-三氟甲基-4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-64)

5-(5-(3-甲氧基-4-((N-甲基哌啶-4-基)氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-65)

5-(5-(3-三氟甲基-4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-66)

5-(5-(2-溴-4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-67)

5-(5-(3-溴-4-(4-甲基哌啶-4-基-羰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-68)

4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(1-甲基哌啶-4-基)酞酰胺(I-69)

2-氯-4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-(二乙基氨基)丙基)苯甲酰胺(I-70)

2-氟-4-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-(二乙基氨基)丙基)苯甲酰胺(I-71)

5-(5-(2-氯-4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-72)

6-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-(二乙基氨基)丙基)吡啶-3-甲酰胺(I-73)

5-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-吗啉基丙基)吡啶-2-甲酰胺(I-74)

5-(5-((6-(N-甲基哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-75)

5-((3-(5-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基)-N-(3-吗啉基丙基)吡嗪-2-甲酰胺(I-76)

5-(5-((5-(N-甲基哌啶-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-77)

N-(3-(4-三氟甲基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-4-(N-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(I-78)

N-(3-(4-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基-4-(1-甲基哌啶-4-基氨基)苯甲酰胺(I-79)

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-80)

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲酰胺(I-81)。

本发明的部分化合物制备方法如下：

方法一

Reagents and conditions：

(i)Acetic Anhydride，HClO₄，0℃；(ii)CuCN，reflux，5h；(iii)1-methylpiperazine，TEA，DMF，3.5h；(iv)H₂， Pd/C，rt，overnight；(v)CSCl₂，DCM，NaHCO₃，H₂O，0℃；(vi)NaH，THF，reflux；(vii)NH₂NH₂·H₂O，EtOH，reflux，3h；(viii)NaOH，30％H₂O₂，EtOH，DMSO，80℃，12h.

方法二

Reagents and conditions：

(i)SOCl₂，MeOH，reflux，2h；(ii)CuCN，reflux，5h；(iii)CH₃CN，NaH，THF，reflux，6h；(iv)NH₂NH₂·HCl，EtN₃， EtOH，reflux，6h；(v)1-methylpiperidin-4-amine，Pd(OAc)₂，BINAP，Cs₂CO₃，Tol，80℃，10h；(vi)Al(CH₃)₃，Tol， 80℃，10h.

本发明化合物都可以用上述或类似上述的制备方法制备得到，根据取代基的不同和取代基位置的不同选用相应的原料即可。

生物活性测试结果表明，本发明所提供通式I化合物及其药学上可接受的盐具有FLT3-ITD抑制效果，同时对白血病肿瘤细胞株的生长有一定的抑制作用。本发明化合物可用于治疗各种与FLT3-ITD有关的疾病，其中包括急性髓性白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性淋巴性白血病、骨髓增生异常综合症等。因此，本发明提出，本发明化合物及其药学上可接受的盐可用于抗肿瘤药物的制备。

部分化合物的药理学试验如下：

1.FLT3激酶抑制活性测试

I实验材料

基本反应缓冲液，20 mM Hepes(pH 7.5)，10 mM MgCl₂，1 mM EGTA，0.02％Brij35，0.02 mg/ml BSA，0.1 mM Na3VO4，2 mM DTT，1％DMSO。

II实验步骤

在新制的反应缓冲液中准备好底物，把所有要求的辅助因子加到上述的底物溶液中，再把激酶加入配制好的底物溶液中并轻轻混合。将化合物溶于100％的DMSO中，通过Acoustic 技术(Echo550；纳升范围)把溶液加入激酶反应混合物中，室温下反应20min。再加入³³P-ATP 开始反应(放射强度率10mCi/ml)，室温下反应2h。用滤波器的方法检测激酶活性，激酶活性数据用百分比表示：测试样本里的激酶活性与空白(DMSO)反应液之比。

III实验结果

表1 化合物对FLT3-ITD的抑制率(5μmol/L)

(表中化合物代号对应于前面的化合物代号)

表2 化合物I-43的激酶选择性

2.体外白血病细胞抑制活性测试

本发明化合物在体外对表达FLT3-ITD的MV4-11细胞株的抑制活性。

I实验材料

RPMI 1640培养基96孔细胞培养板，胎牛血清，EnoGeneCellTM Counting Kit-8(CCK-8) 细胞活力检测试剂盒，ChemBase CBS-CJ-1FD超净工作台，二氧化碳培养箱，Vi-Cell XR细胞计数仪，Envision2104读板仪。

II实验步骤

收集处于指数生长期的细胞并用Vi-Cell XR细胞计数仪进行活细胞计数。用各细胞相应培养基调整细胞悬液浓度。每孔加90μL细胞悬液于96孔细胞培养板，最终细胞浓度为7000 细胞/孔。以DMSO溶解各供试化合物为10mM储存液。然后分别用培养基稀释至10倍溶液，各2复孔。每株细胞每孔分别加入10μL相应的10倍溶液，最终药物浓度为1μM，DMSO 终浓度分别为0.01％。置于37℃/5％CO₂孵箱中培养72h。药物处理72h后，按照Celltiter-GloATP荧光活性检测方法(CTG法)操作说明，每孔加入50μL(1/2培养体积)预先融化并平衡到室温的CTG溶液，用微孔板震荡器混匀2min，于室温放置10min后用Envision 2104 读板仪测定荧光信号值。计算各受试化合物与阴性对照组比较的抑制率。

III实验结果

表3 化合物对MV4-11细胞株的抑制率(1μmol/L)

(表中化合物代号对应于前面的化合物代号)

表4 化合物I-9对58种NCI肿瘤细胞株的增殖抑制百分数(10μmol/L)

具体实施方式

熔点测定采用RY-1G数字显示显微熔点测定仪(天津市新天光仪器公司)，温度计未经校正；1HNMR用BRUKER AVANCE 300型核磁共振仪(瑞士布鲁克公司)，TMS为内标测定；MS用Agilent 1100 LC/MSD质谱仪(美国安捷伦公司)和Q-totmicro MS(micromass公司)。

实施例1

2-乙酰基-5-溴噻吩(M-1)

在100ml茄形瓶中加入2-溴噻吩(2.00g，12.3mmol)、乙酸酐(2.51g，24.6mmol)，冰浴条件下缓慢滴加高氯酸(3.71g，36.9mmol)，0.5h加毕撤去冰浴，常温搅拌。6h后TLC 显示原料已无剩余。加入冰水，用碳酸钠调节pH至中性，乙酸乙酯萃取(25ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥。减压蒸馏除去溶剂，粗品柱层析(PE∶EA ＝50∶1)，得淡黄色油状物2.03g，收率80.6％。

MS(m/z)：[M+H]⁺204.9，206.9.

实施例2

2-乙酰基-5-氰基噻吩(M-2)

在50ml耐压管中加入M-1(2.00g，9.75mmol)、氰化亚铜(2.62g，29.3mmol)、碘化钾(0.02g，0.1mmol)和无水DMF 6ml。氩气保护条件下升温至150℃，12h后TLC显示原料已无剩余。将反应液倾入氨水和碎冰(1∶3)的混合物中，搅拌淬灭反应，抽滤，固体干燥后乙酸乙酯提取。母液用乙酸乙酯萃取(20ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，粗产品柱层析(PE∶EA＝50∶1)，得黄色油状物0.95g，收率64.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.62(3H，s，-COCH ₃)，8.05(1H，d，J＝4.0Hz，-CH-，Thiophene)，8.08(1H，d，J＝4.0Hz，-CH-，Thiophene).

MS(m/z)：[M+H]⁺152.0.

实施例3

1-甲基-4-(4-硝基苯)哌啶(M-3)

在100ml单颈瓶中加入对氟硝基苯(2.00g，14.2mmol)、1-甲基哌嗪(1.42g，14.2mmol)、碳酸钾(1.96g，14.2mmol)和DMSO 25ml，室温反应，6h后TLC显示原料已无剩余。将反应液倾入200ml水中，析出棕色固体，抽滤，固体干燥，母液用乙酸乙酯(40ml×3)萃取，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥。减压浓缩后与干燥后的固体合并，粗品柱层析(PE∶EA＝6∶1)得黄色针状晶体2.73g，收率87.2％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：2.36(3H，s，CH ₃-N-)，2.57(4H，t，J＝5.1Hz，-N-CH ₂-×2)，3.45 (4H，t，J＝5.1Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.82-6.85(2H，m，Ar-H)，8.12-8.14(2H，m，Ar-H).

MS(m/z)：[M+H]⁺222.3.

实施例4

4-(4-甲基哌啶)苯胺(M-4)

在100ml单颈瓶中加入M-3(2.00g，9.04mmol)、氯化铵(2.42g，45.2mmol)和70％乙醇25ml，搅拌均匀后分批加入还原铁粉(1.52g，27.1mmol)，加热回流。8h后TLC显示原料已无剩余。趁热抽滤，减压蒸馏除去滤液，粗品经柱层析(PE∶EA＝1∶1)得淡黄色液体 1.38g，收率80.0％。

MS(m/z)：[M+H]⁺192.3.

实施例5

1-(4-硫氰基苯基)-4-甲基哌啶(M-5)

于100ml单颈瓶中加入碳酸氢钠(1.65g，19.6mmol)和水20ml，搅拌10min，冰浴条件下，将M-4(1.25g，6.54mmol)的10ml二氯甲烷溶液缓慢加入单颈瓶，最后将硫光气(1.13g，9.81mmol)的15ml二氯甲烷溶液缓慢滴入单颈瓶，0.5h滴毕，保持冰浴反应，6h后TLC 显示原料已无剩余。二氯甲烷萃取(20ml×6)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥。减压浓缩除去溶剂粗品柱层析(EA∶PE＝40∶1)，得白色针状晶体1.32g，收率86.8％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.20(3H，s，CH₃-N-)，2.42(4H，t，J＝5.0Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.18(4H，t，J＝5.0Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.94(2H，d，J＝9.0Hz，Ar-H)，7.28(2H，d，J＝9.0Hz， Ar-H).

MS(m/z)：[M+H]⁺234.1.

实施例6

3-(4-氰基噻吩-2-基)-N-(4-(N-甲基哌啶-4-基)苯基)-3-氧代丙硫酰胺(M-6)

冰浴条件下，在100ml双颈瓶中加入M-5(0.54g，2.63mmol)、氢化钠(0.16g，3.95mmol) 和25ml无水四氢呋喃，氩气保护，冰浴搅拌10min后，用注射器缓慢加入M-2(0.61g，2.63 mmol)的四氢呋喃溶液5ml，10min加毕移去冰浴室温反应。5h后TLC显示原料已无剩余。将反应液倾入碎冰中淬灭反应，用冰醋酸调节pH至5～6，析出固体，抽滤，干燥得橙黄色固体0.80g，收率69.4％。

实施例7

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-1)

在50ml茄形瓶中加入M-6(0.32g，0.73mmol)、水合肼(0.052g，0.88mmol)、无水乙醇10ml，加热回流。6h后TLC显示原料已无剩余，加入20ml水并用乙酸乙酯萃取(15ml ×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥，减压浓缩后柱层析(DCM∶MeOH ＝20∶1)，得白色固体53.0mg，收率17.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.8Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.00(4H，t，J＝4.8Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.28(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.84-7.11(4H，m，Ar-H)， 7.51(1H，d，J＝3.8Hz，-CH-，Thiophene)，7.92(1H，d，J＝3.8Hz，-CH-，Thiophene)，10.35(1H，s， -NH-)，12.47(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺365.3.

实施例8

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(I-2)

制备方法类似于I-1，得白色固体60.0mg，收率19.9％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.3Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.00(4H，t，J＝4.3Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.35(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.86(2H，d，J＝8.8Hz， Ar-H)，7.00(2H，d，J＝8.8Hz，Ar-H)，7.43(2H，d，J＝5.2Hz，-CH-，Thiophene)，7.64(2H，d，J＝ 5.2Hz，-CH-，Thiophene)，8.35(1H，s，-NH-)，12.69(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺365.2.

实施例9

在50ml茄形瓶中加入I-1(0.10g，0.27mmol)、30％H₂O₂(0.10ml)、6 M NaOH水溶液(0.15ml)和5ml无水乙醇，加热至50℃反应。4h后TLC显示原料已无剩余，加入20ml 水，用乙酸乙酯萃取(15ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，粗品柱层析(DCM∶MeOH＝10∶1)，得淡绿色固体35.0mg，收率34％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.91(3H，s，-N-CH₃)，2.27(4H，t，J＝4.3Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.01(4H，t，J＝4.3Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.10(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.85(2H，d，J＝8.9Hz， Ar-H)，7.11-7.15(2H，m，Ar-H)，7.36(1H，d，J＝3.8Hz，-CH-，Thiophene)，7.69(1H，d，J＝3.8Hz， -CH-，Thiophene)，7.99(1H，s，-CONH ₂)，12.26(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺383.3.

实施例10

3-(4-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-4)

制备方法类似于I-1，得样品160mg，收率28.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.42(4H，t，J＝4.6Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.21(4H，t，J＝4.6Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.04-6.37(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.84-7.68(6H，m，Ar-H，Thiophene)，8.16(1H，s，-NH-)，12.22(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺418.1，420.1.

实施例11

制备方法类似于I-1，得白色固体120mg，收率25.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.6Hz，-N-CH ₂-×2)， 2.97(4H，t，J＝4.6Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，4.11(3H，s，-O-CH₃)，5.82(1H，s，-CH-，Pyrazole)， 6.30-7.21(6H，m，Ar-H，Thiophene)，8.04(1H，s，-NH-)，12.16(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺370.2.

实施例12

制备方法类似于I-1，得白色固体150mg，收率31.8％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.46(4H，s，-N-CH ₂-×2)，2.99-3.04 (4H，m，CH₃-N-CH ₂-×2)，5.94(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.83(2H，d，J＝8.1Hz，Ar-H)，7.10(1H，s， -CH-，Thiophene)，7.25(2H，d，J＝8.1Hz，Ar-H)，7.47(1H，s，-CH-，Thiophene)，8.10(1H，s， -NH-)，11.89(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺370.2.

实施例13

N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-胺(I-7)

制备方法类似于I-1，得白色固体60.0mg，收率17.7％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.22(3H，s，-N-CH ₃)，2.46(4H，t，J＝4.6Hz，-N-CH ₂-×2)， 2.98(4H，t，J＝4.6Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，5.99(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.83(2H，d，J＝8.8Hz，Ar-H)，7.10-7.18(2H，m，Ar-H)，7.22(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.38(1H，s，-CH-，Thiophene)， 7.51(1H，s，-CH-，Thiophene)，12.33(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺340.1.

实施例14

3-(5-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-8)

制备方法类似于I-1，得白色固体70.0mg，收率21.0％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.7Hz，-N-CH ₂-×2)， 2.99(4H，t，J＝4.7Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.07(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.82-7.23(6H，m，Ar-H， Thiophene)，8.08(1H，s，-NH-)，12.19(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺374.2，376.2.

实施例15

3-(4-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-9)

制备方法类似于I-1，得白色固体120mg，收率34.0％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.7Hz，-N-CH ₂-×2)， 2.99(4H，t，J＝4.7Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.07(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.82-7.46(6H，m，Ar-H， Thiophene)，8.08(1H，s，-NH-)，12.35(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺374.2，376.2.

实施例16

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-10)

制备方法类似于I-1，得白色固体75.0mg，收率44.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.44(4H，t，J＝4.7Hz，-N-CH ₂-×2)， 2.99(4H，t，J＝4.7Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.07(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.82-7.46(6H，m，Ar-H， Thiophene)，8.08(1H，s，-NH-)，12.37(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺418.0，420.2.

实施例17

制备方法类似于I-1，得白色固体45.0mg，收率15.7％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.23(3H，s，-N-CH₃)，2.46(4H，s，-N-CH ₂-×2)，3.05(4H，s， CH₃-N-CH ₂-×2)，3.28(3H，s，-O-CH₃)，6.15(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.43-6.50(1H，m，Ar-H)， 7.02-7.32(4H，m，Ar-H，Thiophene)，10.21(1H，s，-NH-)，12.40(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺448.1，450.1.

实施例18

制备方法类似于I-1，得红棕色固体50.0mg，收率17.8％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.22(3H，s，-N-CH₃)，2.42(4H，s，-N-CH ₂-×2)，2.78(4H，s， CH₃-N-CH ₂-×2)，6.04(1H，s，-CH-，Pyrazole)，7.26-7.89(5H，m，Ar-H，Thiophene)，8.85(1H，s， -NH-)，12.67(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺486.0，488.0.

实施例19

制备方法类似于I-1，得白色固体46.0mg，收率12.0％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：2.44(3H，s，-N-CH₃)，2.71(4H，t，J＝5.1Hz，-N-CH ₂-×2)， 3.20(4H，t，J＝5.1Hz，CH₃-N-CH ₂-×2)，6.06(2H，s，-NH-，Pyrazole)，7.00-7.05(3H，m，Ar-H)， 7.11(1H，d，J＝2.5Hz，-CH-，Thiophene)，7.44(1H，d，J＝2.5Hz，-CH-，Thiophene).

MS(m/z)：[M+H]⁺486.1，488.1.

实施例20

制备方法类似于I-1，得白色固体60.0mg，收率17.9％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.55-1.57(2H，m，Piperidine)，1.95-2.01(3H，m，Piperidine)， 2.67(3H，s，-N-CH₃)，2.87-2.90(2H，m，Piperidine)，3.32-3.35(2H，m，Piperidine)，3.33-3.37(1H， s，-CH-，Piperidine)，3.79(2H，s，-O-CH₂-)，6.26(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.81-7.23(5H，m，Ar-H， Thiophene)，10.07(1H，s，-NH-)，12.36(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺486.1，488.1.

实施例21

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-吗啉基苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-15)

制备方法类似于I-1，得白色固体55mg，收率14.3％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：2.03(4H，t，J＝6.2Hz，-N-CH ₂-×2，Morpholine)，3.76(4H，t，J ＝6.2Hz，-O-CH ₂-×2，Morpholine)，6.02(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.83(2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)， 6.99-7.01(2H，m，-CH-，Thiophene)，7.05(2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)，10.35(1H，s，-NH-)，12.58(1H， s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺463.1，465.1.

实施例22

制备方法类似于I-1，得白色固体68.0mg，收率24.5％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：1.99(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.03(4H，t，J＝6.2Hz，-N-CH ₂- ×2，Morpholine)，2.59-2.63(2H，m，-N-CH ₂-CH₂-)，3.76(4H，t，J＝6.2Hz，-O-CH ₂-×2， Morpholine)，3.98-4.03(2H，m，-O-CH ₂-CH₂-)，6.02(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.83(2H，d，J＝8.9 Hz，Ar-H)，6.99-7.01(2H，m，-CH-，Thiophene)，7.05(2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)，8.45(1H，s， -NH-)，11.9(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺490.0，492.0.

实施例23

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-17)

制备方法类似于I-1，得淡黄色固体90.0mg，收率37.8％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，m，-N-CH₃)，2.43-3.31(8H，m，Piperidine)，4.05-4.10(1H，m，-CH-，Piperidine)，5.99-6.12(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.82-6.85(3H，m，Ar-H)， 7.22-7.29(3H，m，Ar-H)，8.10(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺365.1.

实施例24

制备方法类似于I-1，得固体100mg，收率33.5％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.48-1.49(2H，m，Piperidine)，1.87-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.05-2.06(2H，m，Piperidine)，2.06-2.09(3H，s，-N-CH₃)，2.72-2.73(2H，m，Piperidine)，3.35-3.37 (1H，m，-CH-，Pieridine)，3.72-3.74(1H，m，-CH-NH-)，6.27-6.29(1H，m，-CH-，Pyrazole)， 6.71-6.81(1H，m，-NH-CH-)，6.91-7.02(3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.30-7.35(3H，m，Ar-H)，8.13 (1H，s，-NH-)，12.34(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺379.1，401.3.

实施例25

制备方法类似于I-1，得样品28.0mg，收率23.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：0.93-0.98(6H，m，-CH₂-CH ₃ x 2)，1.56-1.65(2H，m， -CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.52-2.53(6H，m，-CH ₂-N-x 3)，3.04-3.12(2H，m，-CH ₂-NH-)，6.20-6.21(1H，m， -CH-，Pyrazole)，6.29-6.30(1H，m，-NH-CH₂-)，6.41-6.72(3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.51-7.55(3H， m，Ar-H)，9.21(1H，s，-NH-)，12.46(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺395.4.

实施例26

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-20)

制备方法类似于I-1，得样品61.0mg，收率33.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.66-1.73(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂)，2.30-2.35(6H，m， -CH ₂-N-x 3)，3.21-3.33(2H，m，-CH ₂-NH-)，3.74-3.78(4H，m，-CH ₂-O-CH ₂-)，6.39-6.41(1H，m， -NH-CH₂-)，6.26-6.31(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.91-7.02(3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.61-7.69(3H， m，Ar-H)，9.53(1H，s，-NH-)，12.32(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺409.2.

实施例27

制备方法类似于I-1，得样品86.0mg，收率49.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.43-3.31(8H，m，Piperidine)，3.45 (3H，s，-O-CH₃)，4.12-4.15(1H，m，-CH-，Piperidine)，5.99-6.12(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.82-6.85 (3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.22-7.28(3H，m，Ar-H)，8.03(1H，s，-NH-)，12.15(1H，s，-NH-， Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺379.5.

实施例28

制备方法类似于I-1，得样品57.0mg，收率39.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.43-3.31(8H，m，Piperidine)，4.72-4.78(1H，m，-CH-，Piperidine)，6.12-5.99(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.82-6.85(3H，m，Ar-H， Thiophene)，7.22-7.25(3H，m，Ar-H)，8.34(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺379.5

实施例29

制备方法类似于I-1，得样品39.0mg，收率28.3％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.49-1.51(2H，m，Piperidine)，1.89-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.03-2.04(2H，m，Piperidine)，2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.61-2.63(2H，m，Piperidine)，3.10-3.11(1H， m，-CH-，Piperidine)，6.79-6.81(1H，m，-NH-CO-)，6.89(1H，s，-CH-，Pyrazole)，7.04-7.08(2H，m，Ar-H)，7.33-7.36(2H，m，Ar-H)，8.05-8.07(1H，d，J＝1.4Hz，-CH-，Thiophene)，8.73-8.75(1H，d， J＝1.4Hz，-CH-，Thiophene)，10.52(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺407.1.

实施例30

制备方法类似于I-1，得样品67.0mg，收率37.1％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.49-1.51(2H，m，Piperidine)，1.89-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.03-2.04(2H，m，Piperidine)，2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.61-2.63(2H，m，Piperidine)，3.10-3.11(1H， m，-CH-，Piperidine)，6.89(1H，s，-CH-，Pyrazole)，7.04-7.08(2H，m，Ar-H)，7.33-7.36(2H，m， Ar-H)，7.88(2H，s，-NH₂)，8.05-8.07(1H，d，J＝1.3Hz，-CH-，Thiophene)，8.73-8.75(1H，d，J＝ 1.3Hz，-CH-，Thiophene)，10.52(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺397.1.

实施例31

制备方法类似于I-1，得样品89.0mg，收率28.3％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.24(3H，s，-N-CH₃)，2.46-2.51(4H，m，-CH ₂-N-CH₃ x2)， 3.01(3H，s，-O-CH₃)，3.06-3.09(4H，m，-N-CH ₂-x 2)，5.68(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.94-6.97(1H， m，Ar-H)，7.43-7.46(2H，m，Ar-H)，7.96(1H，d，J＝1.2Hz，-CH-，Thiophene)，8.15(2H，s，-NH₂)， 8.76-8.77(1H，d，J＝1.2Hz，-CH-，Thiophene)，12.15(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺413.1.

实施例32

制备方法类似于I-1，得样品71.0mg，收率77.5％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.24(3H，s，-N-CH₃)，2.46-2.51(4H，m，-CH ₂-N-CH₃ x2)， 3.06-3.09(4H，m，-N-CH ₂-x 2)，5.68(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.94-6.97(2H，m，Ar-H)，7.43-7.46 (2H，m，Ar-H)，7.96(1H，d，J＝3.2Hz，-CH-，Thiophene)，8.55(2H，s，-NH₂)，8.76-8.77(1H，d，J＝ 3.5Hz，-CH-，Thiophene)，12.15(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺426.1.

实施例33

5-(2-氰基乙酰基)噻吩-2-甲腈(M-9)

在50ml茄形瓶中加入NaH(0.12g，5.00mmol)和10ml无水THF，冰浴条件下缓慢滴加M-8(0.42g，2.50mmol)和无水乙腈(0.21g，5.00mmol)的无水THF溶液，常温条件下搅拌0.5h，回流反应6h。将反应体系倾入30ml冰水混合物中，调节pH至5，有大量褐黄色固体析出，抽滤、干燥得粗品，重结晶得淡黄色固体0.23g，收率52.3％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：3.99(2H，s，-CO-CH ₂-CN)，7.49(1H，s，-CH-，Thiophene)， 8.31(1H，s，-CH-，Thiophene).

MS(m/z)：[M+H]⁺176.1.

实施例34

5-(5-氨基-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(M-10)

在50ml茄形瓶中加入M-9(0.18g，1.00mmol)、80％水合肼(0.15g，1.50mmol)和10ml 乙醇，回流反应5h，减压蒸馏除去溶剂，加入20ml水，乙酸乙酯萃取(20ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgSO₄干燥，减压浓缩后柱层析(PE∶EA＝2∶1)，得白色固体90.0mg，收率47.3％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：11.66(1H，s，-NH-，pyrazol)，8.37(1H，s，-CH-，Thiophene)， 7.60(1H，s，-CH-，Thiophene)，5.65(1H，s，-CH-，pyrazol)，5.15(2H，s，-NH₂).

MS(m/z)：[M+H]⁺191.1.

实施例35

甲基4-(1-甲基哌啶-4-基氨基)苯甲酸甲酯(M-11)

在100ml双颈瓶中加入对溴苯甲酸甲酯(0.50g，2.00mmol)、1-甲基哌啶-4-胺(0.23g，2.00 mmol)、Pd(OAc)₂(0.22g，0.10mmol)、BINAP(0.62g，0.10mmol)、Cs₂CO₃(1.37g，2.20 mmol)、无水甲苯(15ml)。抽排通氩气保护，加热90℃反应，12h后TLC显示原料已无剩余。旋干溶剂，用乙酸乙酯萃取(40ml×3)，合并有机相，减压浓缩后柱层析。得白色固体0.28g，收率49.6％。

MS(m/z)：[M+H]⁺249.1.

实施例36

N-(3-(4-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5基)-4-(1-甲基哌啶-4-基氨基)甲酰胺(I-43)

在25ml双颈瓶中加入M-10(0.15g，0.60mmol)、M-11(0.12g，0.60mmol)和无水甲苯10ml。冰浴条件下，滴加三甲基铝(0.05g，0.66mmol)的无水甲苯溶液，加毕，撤去冰浴升温80℃反应反应，6h后TLC显示原料已无剩余，加入水(20ml)并用乙酸乙酯萃取 (15ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤两次，无水MgS0₄干燥，减压浓缩后柱层析 (DCM∶MeOH∶Et₃N＝100∶1∶1)，得黄色固体0.38g，收率42.6％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.48-1.37(2H，m，Piperidine)，1.85-1.88(2H，m，Piperidine)， 2.09-2.01(2H，m，Piperidine)，2.19(3H，s，-N-CH₃)，2.73-2.76(2H，m，Piperidine)，3.27(1H，m， -CH-，Piperidine)，5.19(2H，s，-NH₂)，6.23(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.60-6.65(2H，m，Ar-H and Thiophene)，7.75-7.78(3H，m，Ar-H)，8.47(1H，s，-CH-，Thiophene)，10.63(1H，s，-CONH-)， 12.75(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]+407.2.

实施例37

N-(3-(4-氰基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5基)-5-(1-甲基哌啶-4-基氨基)吡啶酰胺(I-44)

制备方法类似于I-43，得白色固体90.0mg，收率38.5％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.79-1.82(2H，m，Piperidine)，2.12-2.20(2H，m，Piperidine)， 2.73(3H，s，-N-CH₃)，3.07-3.10(2H，m，Piperidine)，3.37-3.41(2H，m，Piperidine)，3.64-3.70(1H， m，-CH-，Piperidine)，6.74(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.99(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.14(1H，d，J＝ 8.1Hz，Pyridine)，7.80(1H，s，Pyridine)，7.91(1H，d，J＝8.1Hz，Pyridine)，8.47(1H，s，-NH-)， 10.57(1H，s，-NH-CO-)，12.60(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺409.2.

实施例38

5-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-45)

在50mL茄形瓶中加入I-43(0.10g，0.25mmol)、氢氧化钾(0.41g，0.75mmol)和20ml叔丁醇。升温至85℃反应，10h后TLC显示原料无剩余。减压浓缩后柱层析(EA∶MeOH＝ 10∶1)，得黄色固体0.20g，收率18.8％。

¹H NMR(300 MHz，DMSO-d₆)δ：1.46-1.36(2H，m，Piperidine)，1.90-1.86(2H，m，Piperidine)， 2.02(2H，t，J＝10.7Hz，Piperidine)，2.17(3H，s，-N-CH₃)，2.75-2.71(2H，m，Piperidine)， 3.29-3.20(1H，m，-CH-，Piperidine)，4.10(1H，s，-NH-)，6.24(1H，s，Pyrazole)，6.61(2H，d，J＝8.2 Hz，Ar-H)，7.29(2H，s，-CONH₂)，7.73(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.81(2H，d，J＝8.5Hz，Ar-H)， 8.04(1H，s，Thiophene)，10.88(1H，s，-CONH-)，12.96(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺425.2.

实施例39

制备方法类似于I-1，得白色固体76.8mg，收率21.9％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.55-1.58(2H，m，Piperidine)，1.95-2.02(3H，m，Piperidine)， 2.67(3H，s，-N-CH₃)，2.87(2H，m，Piperidine)，3.32(2H，m，Piperidine)，3.36-3.38(1H，m，-CH-， Piperidine)，3.79-3.88(2H，m，-O-CH ₂-)，6.02(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.28(1H，d，J＝6.6Hz， Thiophene)，6.81-7.23(5H，m，Ar-H，Thiophene)，10.07(1H，s，-NH-)，12.36(1H，s，-NH-， Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺484.2.

实施例40

制备方法类似于I-1，得白色固体35mg，收率34.3％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：1.99(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.03(4H，t，J＝6.2Hz，-N-CH ₂- ×2，Morpholine)，2.59-2.62(2H，m，-N-CH ₂-CH₂)，3.02(3H，s，-O-CH₃)，3.76(4H，t，J＝6.2Hz， -O-CH ₂-×2，Morpholine)，3.98-4.02(2H，m，-O-CH ₂-CH₂-)，6.02(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.83 (2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)，6.99-7.02(2H，m，-CH-，Thiophene)，7.05(2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)， 10.15(1H，s，-NH-)，12.17(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺415.1.

实施例41

制备方法类似于I-1，得白色固体76.7mg，收率31.2％。

¹H-NMR(300MHz CDCl₃)δ：1.99-2.01(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.03(4H，t，J＝6.2Hz，-N-CH ₂-×2，Morpholine)，2.42-2.55(2H，m，-N-CH ₂-CH₂-)，3.88(4H，t，J＝6.2Hz，-O-CH ₂-×2， Morpholine)，3.78-3.89(2H，m，-O-CH ₂-CH₂)，6.21(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.77(2H，d，J＝8.9Hz， Ar-H)，7.01-7.03(2H，m，-CH-，Thiophene)，7.13(2H，d，J＝8.9Hz，Ar-H)，9.97(1H，s，-NH-)， 12.28(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺453.5.

实施例42

制备方法类似于I-1，得样品45.2mg，收率44.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.43-3.31(8H，m，Piperidine)，4.08-4.14(1H，m，-CH-，Piperidine)，5.99-6.12(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.82-6.85(3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.22-7.39(3H，m，Ar-H)，8.03-8.10(1H，m，-NH-)，12.15(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺432.5.

实施例43

5-(5-(3-溴4-(1-甲基哌啶-4-基-羰基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-68)

制备方法类似于I-1，得样品42.1mg，收率33.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.43-3.31(8H，m，Piperazine)，4.54-4.58(1H，m，-CH-，Piperidine)，6.12-5.99-6.13(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.82-6.85(3H，m， Ar-H，Thiophene)，7.22-7.25(2H，m，Ar-H)，8.34(1H，s，-NH-)，12.15(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺470.6，472.4.

实施例44

制备方法类似于I-1，得样品34.3mg，收率27.3％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.49-1.51(2H，m，Piperidine)，1.89-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.03-2.04(2H，m，Piperidine)，2.21(3H，s，-CH₃)，2.61-2.63(2H，m，Piperidine)，3.10-3.11(1H，m， -CH-，Piperidine)，6.79-6.81(1H，m，-NH-CH-)，6.89(1H，s，-CH-，Pyrazole)，7.04-7.08(2H，m， Ar-H)，7.25(2H，s，-CONH₂)，7.33-7.36(2H，m，Ar-H)，8.05-8.07(1H，d，J＝1.5Hz，-CH-， Thiophene)，8.73-8.75(1H，d，J＝1.5Hz，-CH-，Thiophene)，10.52(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s， -NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺450.2.

实施例45

制备方法类似于I-1，得样品33.5mg，收率28.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：0.93-1.02(6H，m，-CH₂-CH ₃ x 2)，1.56-1.77(2H，m， -CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.52-2.55(6H，m，-CH ₂-N-x 3)，3.04-3.12(2H，m，-CH ₂-NH-)，5.23-5.36(1H，m， -NH-CH₂-)，6.20-6.18(1H，m，-CH-，Pyrazole)，6.45-6.77(3H，m，Ar-H，Thiophene)，7.48-7.52(2H， m，Ar-H)，9.28(1H，s，-NH-)，12.43(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺441.2.

实施例46

制备方法类似于I-1，得样品34.2mg，收率25.2％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：0.93-0.98(6H，m，-CH₂-CH ₃ x 2)，1.56-1.65(2H，m， -CH₂-CH ₂-CH₂)，2.52-2.53(6H，m，-CH ₂-N-x 3)，3.04-3.12(2H，m，-CH ₂-NH-)，6.20(1H，s，-CH-， Pyrazole)，6.29-6.30(1H，m，-NH-CH₂-)，6.41-6.72(2H，m，Ar-H，Thiophene)，7.51-7.60(3H，m， Ar-H，Thiophene)，9.21(1H，s，-NH-)，12.44(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺429.2，431.3.

实施例47

制备方法类似于I-1，得样品51.0mg，收率45.4％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.66-1.73(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.30-2.35(6H，m，-CH ₂-N-x 3)，3.21-3.33(2H，m，-CH ₂-NH-)，3.74-3.78(4H，m，-CH ₂-O-CH ₂-)，5.39-5.41(1H，m， -NH-CH₂-)，6.26(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.91-7.02(3H，m，Pyridine，Thiophene)，7.61-27.72(2H，m，Pyridine)，9.53(1H，s，-NH-)，12.32(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺438.2.

实施例48

制备方法类似于I-1，得样品68.0mg，收率32.1％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.49-1.51(2H，m，Piperidine)，1.89-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.03-2.04(2H，m，Piperidine)，2.21(3H，s，-N-CH₃)，2.61-2.63(2H，m，Piperidine)，3.10-3.11(1H， m，-CH-，Piperidine)，6.89(1H，s，-CH-，Pyrazole)，7.04-7.08(2H，m，Pyridine)，7.33-7.36(1H，m， Pyridine)，7.58(2H，s，-NH₂)，8.05-8.07(1H，d，J＝1.5Hz，-CH-，Thiophene)，8.73-8.75(1H，d，J＝ 1.5Hz，-CH-，Thiophene)，10.52(1H，s，-NH-)，12.39(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺383.1.

实施例49

制备方法类似于I-43，得白色固体92.0mg，收率35.5％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：1.79(2H，m，Piperazidine)，2.12(2H，m，Piperazidine)，2.73 (3H，s，-N-CH₃)，3.37(2H，m，Piperazidine)，6.74(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.99(1H，s，-CH-， Thiophene)，7.08(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.14(1H，d，J＝8.1Hz，Ar-H)，7.80(1H，s，Ar-H)，7.91 (1H，d，J＝8.1Hz，Ar-H)，8.10(1H，s，Ar-H)，10.57(1H，s，-NH-CO-)，12.60(1H，s，-NH-， Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺451.2.

实施例50

制备方法类似于I-43，得白色固体95.0mg，收率48.2％。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：1.36-1.46(2H，m，Piperidine)，1.85-1.90(2H，m，Piperidine)， 2.02(2H，t，J＝10.7Hz，Piperidine)，2.17(3H，s，-N-CH₃)，2.71-2.75(2H，m，Piperidine)， 3.20-3.29(1H，m，-CH-，Piperidine)，3.58(3H，s，-O-CH₃)，4.10(1H，s，-NH-)，6.24(1H，s，-CH-， Pyrazole)，6.61-6.72(2H，m，Ar-H)，7.73(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.81-7.88(3H，m，Ar-H，)，8.04 (1H，s，-CH-，Thiophene)，10.88(1H，s，-CONH-)，12.96(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺437.2.

实施例51

5-(5-(4-(3-(二乙基氨基)丙氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲酰胺(I-80)

制备方法类似于I-43，得白色固体76.0mg，收率21.9％。

¹H-NMR(300MHz DMSO-d₆)δ：0.93-0.98(6H，m，-CH₂-CH ₃ x 2)，1.56-1.65(2H，m， -CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.52-2.53(6H，m，-CH ₂-N-x 3)，3.04-3.12(2H，m，-CH ₂-NH-)，6.01(1H，s，-CH-， Pyrazole)6.28(1H，d，J＝6.6Hz，-CH-，Thiophene)，6.81-7.23(7H，m，Ar-H，Thiophene，-CONH₂)， 10.07(1H，s，-NH-)，12.36(1H，m，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺484.2.

实施例52

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲酰胺(I-81)

制备方法类似于I-43，得白色固体55.0mg，收率28.9％。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：1.88-1.93(2H，m，-CH₂-CH ₂-CH₂-)，2.72-2.76(6H，m， -N-CH₂-x 3，Morpholine)，2.75-2.71(4H，m，-O-CH₂-x 2，Morpholine)，2.85-2.88(2H，m， -NH-CH ₂-)，4.10(1H，s，-NH-)，6.24(1H，s，-CH-，Pyrazole)，6.61-6.72(2H，m，Ar-H)，7.22(2H，s， -CONH₂)，7.73(1H，s，-CH-，Thiophene)，7.81-7.88(2H，m，Ar-H)，8.04(1H，s，-CH-，Thiophene)， 10.88(1H，s，-CONH-)，12.96(1H，s，-NH-，Pyrazole).

MS(m/z)：[M+H]⁺413.2。

Claims

1.通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，R¹、R²独立地表示氢、烷基、氰基、卤素、卤代烷基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、巯基、氨基、烷基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、烷基、卤素、卤代烷基、氰基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基或烷基磺酰基；

其中，R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、烷基、氰基、卤素、卤代烷基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、芳烷基、二芳基烷基、芳基、Het、C₃-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、Het磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、烷氧基烷基、芳烷基、二芳基烷基、芳基、Het、C₃-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、Het磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、烷基、卤素、卤代烷基、氰基、羟基、巯基、氨基、烷氧基、烷氨基、烷硫基、NH₂SO₂、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、Het磺酰氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、Het磺酰基、C₃-C₈的脂肪族碳环、芳基或Het；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

2.权利要求1的化合物，其中R¹、R²独立地表示氢、C₁-C₃烷基、氰基、卤素、卤代的C₁-C₃烷基、羟基、氨基、巯基、C₁-C₃烷基氧基、C₁-C₃烷基氨基、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基、C₁-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH2C(O)，其中羟基、巯基、氨基、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷氨基、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基、C₁-C₃烷基磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、C₁-C₃烷基、卤素、卤代的C₁-C₃烷基、氰基、羟基、氨基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷氨基、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基或C₁-C₃烷基磺酰基；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、C₁-C₃烷基、氰基、卤素、卤代的C₁-C₃烷基、羟基、氨基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷氨基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、C₃-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C₁-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷氨基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基、四氢吡咯基、C₃-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C₁-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、C₁-C₃烷基、卤素、氰基、羟基、氨基、卤代的C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷氨基、C₃-C₈的脂肪族碳环、NH₂SO₂、C₁-C₃烷基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、C₁-C₃烷基磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

3.权利要求1的化合物，其中R¹、R²独立地表示氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氟甲氧基、羟基、氨基、甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)，其中羟基、氨基、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)各自独立地可任选被一个或多个R⁶取代，R⁶可以是氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基或甲磺酰基；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、甲基、乙基、异丙基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基、四氢吡咯基、环丙基、环戊基、环己基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH₂C(O)或NH₂C(O)NH，其中羟基、氨基、甲氧基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲基、乙基、苯基、异丙基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、四氢吡咯基、环戊基、环己基、环丙基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、HC(O)NH、C(O)H、CONH、NH2C(O)或NH2C(O)NH各自独立地可任选被一个或多个R⁷取代，R⁷可以是氢、甲基、乙基、异丙基、卤素、氰基、羟基、氨基、三氟甲基、氯甲基、三氟甲氧基、异丙基氧基、甲氨基、二甲氨基、异丙氨基、环丙基、环戊基、环己基、NH₂SO₂、甲基磺酰氨基、苯基磺酰氨基、吡啶-2-磺酰氨基、甲磺酰基、苯基磺酰基、吡啶-2-磺酰基、苯基、哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌嗪-1-基、N-甲基哌啶-4-基、吗啉基或四氢吡咯基；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

4.权利要求1的化合物，其中R¹、R²独立地表示氢、甲基、氰基、卤素、三氟甲基、氯甲基、三氟甲氧基、羟基、氨基、甲氧基、甲氨基、磺酰氨基、甲基磺酰氨基、甲磺酰基、HC(O)NH、C(O)H或NH₂C(O)；

其中，X、Y独立地表示N或NH原子团；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁、W₂、W₃独立地表示N或CH原子团。

5.权利要求1的化合物，其中R¹、R²独立地表示氢、氟、氯、溴、氰基、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲氧基、氨基、甲氨基、羟基、氯甲基或NH₂CO；

R³、R⁴、R⁵独立地表示氢、氟、氯、溴、氰基、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲氧基、甲氨基、羟基、N-甲基哌啶-4-基氨基、N-甲基哌嗪-1-基、吗啉基、四氢吡咯基、3-吗啉基丙氧基、3-乙二氨基丙氨基、3-吗啉基丙氨基、N-甲基哌嗪基乙氨基、3-吗啉基甲酰基、N-甲基哌嗪基甲酰基、3-乙二氨基丙氨甲酰基、N-甲基哌啶基丙氨基甲酰基或3-吗啉基丙氨甲酰基；

其中，X＝N，Y＝NH，或X＝NH，Y＝N；

其中，L表示-NH-或-NHCO-；

其中，W₁或W₃独立地表示N或CH原子团。

6.权利要求1的化合物，其结构为：

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-1)

5-(5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-3-甲腈(I-2)

3-(4-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-4)

N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-胺(I-7)

3-(5-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-8)

3-(4-氯噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-9)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-10)

3-(5-溴噻吩-2-基)-N-(4-吗啉基苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-15)

5-(5-(4-(N-甲基哌啶-4-基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-17)

5-(5-(4-(3-吗啉基丙氨基)苯氨基)-1H-吡唑-3-基)噻吩-2-甲腈(I-20)

3-(5-氟噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-49)

3-(4-氟噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-51)

3-(噻吩-2-基)-N-(4-(3-吗啉基丙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-胺(I-56)

4-(3-吗啉基丙氧基)-N-(3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)苯甲酰胺(1-57)

7.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中药学上可接受的盐包括通式(I)化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或苯磺酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸。

8.一种药物组合物，其中含有权利要求1的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

9.权利要求1的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与FLT3-ITD相关的疾病的药物中的用途。

10.权利要求9的用途，其中与FLT3-ITD有关的疾病是急性髓性白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性淋巴性白血病、骨髓增生异常综合症。