CN108670969A - 一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 - Google Patents
一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108670969A CN108670969A CN201810411330.8A CN201810411330A CN108670969A CN 108670969 A CN108670969 A CN 108670969A CN 201810411330 A CN201810411330 A CN 201810411330A CN 108670969 A CN108670969 A CN 108670969A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sphk2
- drug
- application
- stem cell
- abc294640
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 28
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 title description 3
- 230000002607 hemopoietic effect Effects 0.000 title description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 37
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 34
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 claims abstract description 7
- CAOTVXGYTWCKQE-UHFFFAOYSA-N 3-(4-chlorophenyl)-N-(pyridin-4-ylmethyl)-1-adamantanecarboxamide Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C1(C2)CC(C3)(C(=O)NCC=4C=CN=CC=4)CC2CC3C1 CAOTVXGYTWCKQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 21
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 17
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 17
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 11
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 10
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 claims description 8
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 8
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 claims description 7
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000001551 hemic and immune system Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 2
- 230000003694 hair properties Effects 0.000 claims 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract description 18
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 abstract description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 5
- 230000003915 cell function Effects 0.000 abstract description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 1
- 101710156532 Sphingosine kinase 2 Proteins 0.000 description 53
- 102100027662 Sphingosine kinase 2 Human genes 0.000 description 46
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 33
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 24
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 24
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 20
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 12
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 11
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 6
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 6
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- DUYSYHSSBDVJSM-KRWOKUGFSA-N sphingosine 1-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O DUYSYHSSBDVJSM-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 3
- 101000633780 Homo sapiens Signaling lymphocytic activation molecule Proteins 0.000 description 2
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 2
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 2
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 2
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019155 Radiation injury Diseases 0.000 description 2
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 2
- 102100036008 CD48 antigen Human genes 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 101000716130 Homo sapiens CD48 antigen Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000005096 hematological system Anatomy 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012155 injection solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000009291 secondary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002660 stem cell treatment Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4409—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof only substituted in position 4, e.g. isoniazid, iproniazid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了SphK2抑制剂ABC294640提高造血干细胞功能、治疗造血功能障碍的用途。ABC294640可以用于治疗原发性造血功能障碍、或辐射、化学药物刺激所导致的造血功能障碍症状，并且可以通过提高造血干细胞功能增强病人在多次化疗后的造血功能的恢复和生存率的延长。本发明为治疗原发或诱导型的造血功能障碍性疾病提供了新的药物来源。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及ABC294640治疗原发性和化学药物、放射线所造成的造血功能障碍疾病中的应用。
背景技术
造血干细胞是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，其主要作用是分化产生红细胞、血小板以及白细胞等各类血液免疫细胞，支持机体造血和免疫系统的更新。造血干细胞对于机体正常造血功能的维持和损伤修复有重要意义。原发性病变、环境中的射线、临床治疗中的化学药物和射线辐射均会对造血干细胞有严重的损伤，导致病人造血功能障碍、血象降低和白细胞下降免疫功能紊乱甚至生存率降低。因此，提高造血干细胞的造血功能对治疗造血功能障碍及其相关疾病至关重要，但是目前尚无有效针对造血干细胞功能增强的治疗干预手段。
ABC294640，结构如式1所示，是鞘氨醇激酶2(SphK2)的抑制剂，可以抑制SphK2 的功能减少鞘氨醇-1-磷酸(S1P)的产生。S1P是真核生物体的第二信使可以发挥多种重要生理功能，可促进癌组织生长和病理性炎症的发生。现在研究发现ABC294640对多种实体瘤包括胰腺肿瘤、肝癌、胆管癌和多发性骨肉瘤，有抑制肿瘤生长、减少免疫炎症反应的治疗作用，相关实验已经在美国开展临床二期实验，以色列生物制药公司 RedHill报导药物YelivaTM(ABC294640)在一期临床实验中，证实该药物具有良好的安全性和耐受性，主要副作用是1-2级的疲惫感和恶心感。然而ABC294640对造血干细胞的作用还未见报道。
发明内容
本申请是基于发明人对以下问题和事实的发现而提出的：
通常认为，SphK2基因(小鼠NCBI登录号:NP_001166032，人Genbank Gene ID:56848)缺失会导致多种肿瘤细胞的生长缓慢、凋亡发生和成瘤能力减弱。发明人运用SphK2基因敲除小鼠模型首次发现，SphK2基因敲除使造血干细胞自我更新能力加强数量增加，表现为小鼠的造血干细胞数量增加。本发明还发现了SphK2基因敲除的小鼠放射和化疗药物刺激后，造血干细胞损伤修复速度明显加快，并且小鼠在多次化疗刺激下生存期显著延长。这说明SphK2基因是靶向造血干细胞治疗造血功能障碍性疾病的有效治疗靶点。
本发明还首次证明了SphK2抑制剂ABC294640在造血功能障碍性疾病治疗中的应用。发明人发现，小鼠腹腔注射ABC294640后可以使造血干细胞数量显著增加对原发性造血功能障碍有治疗作用；同时ABC294640可以有效促进化疗药物5-氟尿嘧啶刺激和放射线辐射损伤下，小鼠血小板和白血细胞的恢复速度，对损伤刺激后的血象恢复有显著治疗作用；并且接受ABC294640注射的小鼠在多次大剂量化疗刺激下，生存期显著延长，表明ABC294640对血液系统严重损伤所导致的生存率降低有治疗作用。
本发明将现有的SphK2抑制剂ABC294640这个小分子化合物发掘出新的药用价值，将其应用于原发性造血功能障碍和化学药物或射线、辐射损伤所造成的造血功能障碍均有治疗意义。
因此，本发明提供了
SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，所述的药物是治疗造血干细胞损伤的药物。
SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，所述的药物是治疗血液和免疫系统损伤的药物。
SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，所述的药物是治疗造血功能障碍、血象降低的药物。
其中，所述的造血干细胞损伤、造血功能障碍、血象降低是原发性的或由放射线照射、药物损伤引发的。所述药物抑制SphK2基因的表达或者SphK2蛋白的功能。
并且提供了
SphK2抑制剂在制备治疗造血功能障碍、造血干细胞损伤、血象降低或免疫细胞减少的疾病的药物中的应用，所述的疾病是原发性的，或者是由放射线辐射或药物损伤引发的。
以及
SphK2抑制剂在制备提高造血干细胞自我更新和造血功能的药物中的应用，其中，SphK2抑制剂抑制SphK2基因的表达或者抑制SphK2蛋白的功能，优选地，其是 ABC294640。
附图说明
图1.SphK2基因敲除导致造血干细胞数量增加。
左图方框中标示的是野生型小鼠与SphK2基因敲除小鼠骨髓细胞中造血干细胞的分析，显示SphK2基因敲除后造血干细胞比例增加；右图是统计野生型小鼠与SphK2基因敲除小鼠骨髓细胞中造血干细胞的数目。结果表明SphK2基因敲除小鼠中造血干细胞数量显著增加。
图2.SphK2基因敲除使造血干细胞损伤修复速度加快
左图方框中标示的是在化疗药物5-氟尿嘧啶处理后，野生型小鼠与SphK2基因敲除小鼠，骨髓中造血干细胞的比例增加；右图是统计野生型小鼠与SphK2基因小鼠在5-氟尿嘧啶化疗损伤后骨髓细胞中造血干细胞的数目，显示化疗损伤后SphK2基因敲除小鼠的造血干细胞数量显著多于对照组。
图3.SphK2基因敲除小鼠在大剂量化疗刺激后生存能力显著延长。连续5-氟尿嘧啶处理导致正常小鼠迅速死亡，但是SpkhK2敲除的小鼠生存率显著延长。
图4.抑制剂ABC294640注射使得造血干细胞数量显著增加。
左图方框中标示的是溶剂对照组与ABC294640治疗组小鼠在化疗药物5-氟尿嘧啶处理后骨髓细胞中造血干细胞的比例，显示ABC294640治疗组的小鼠较溶剂对照组小鼠，其造血干细胞数量显著增加；右图是统计溶剂对照组与ABC294640治疗组小鼠在化疗药物5-氟尿嘧啶处理后骨髓细胞中造血干细胞的数目，结果显示治疗组造血干细胞数量明显增加，说明ABC294640明显促进造血干细胞的损伤修复。
图5.抑制剂ABC294640注射显著增加化疗药物5-氟尿嘧啶刺激后白细胞的恢复速度。
图6.抑制剂ABC294640注射显著增加化疗药物5-氟尿嘧啶刺激后血小板的恢复速度。
图7.抑制剂ABC294640注射显著增加放射线辐照刺激后白细胞的恢复速度。
图8.抑制剂ABC294640注射显著增加放射线辐照刺激后血小板的恢复速度。
图9.抑制剂ABC294640注射小鼠在多次5-氟尿嘧啶刺激下生存能力显著增加。
具体实施方式
结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明。
实施例1
利用SphK2敲除小鼠模型，说明SphK2敲除后能够提高正常生理状态下小鼠骨髓中造血干细胞的数目。
SphK2基因敲除小鼠由美国国立健康院(NIH)处引进，其系背景为C57BL/6J，在无特定病原体的洁净(SPF)环境中饲养。首先我们选用基因型为野生型小鼠与SphK2 基因敲除小鼠，6-8周大，数目各6只，将其脱颈处死，取其股骨与胫骨，用1毫升注射器冲出骨髓腔中骨髓，吹散为单细胞悬液，红细胞裂解液裂解2分钟去除红细胞，70um 滤网过滤，得到骨髓单细胞悬液。为计算小鼠中造血干细胞的数量，通过造血干细胞研究领域公认的分子标记物系统Lin-Sca-1+c-Kit+CD150+CD48-，结合流式细胞仪对造血干细胞数量进行统计定量。具体方法为取出200万骨髓细胞，加入2ul Lin、Sca-1、c-Kit、 CD150、CD48抗体组合，冰上孵育1h。随后加入1毫升PBS清洗细胞，500g离心5min，弃掉上清，加入300ulPBS，进行流式细胞仪计数分析，得到小鼠骨髓中造血干细胞数目。我们应用Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，在正常的生理状态下，SphK2基因敲除组小鼠骨髓细胞中造血干细胞的数目明显多于对照组(图1)。***P＜0.001.
实施例2
利用化疗药物5-氟尿嘧啶诱导小鼠骨髓造血系统损伤，发现SphK2敲除小鼠的造血干细胞损伤修复能力显著加强。
分别选择实施例1中饲养环境的野生型小鼠与SphK2基因敲除小鼠，6-8周大，数目各6只，对于进行5-氟尿嘧啶腹腔注射，注射剂量为150mg/kg，12天后将其脱颈处死，取其股骨与胫骨，其他取材分析过程同实施例1。我们应用Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，5-氟尿嘧啶刺激12天状态下，SphK2基因敲除组小鼠骨髓细胞中造血干细胞的数目明显多于野生型小鼠组(图2)，说明SphK2基因敲除确实能够提高骨髓造血系统损伤状态下造血干细胞的损伤修复速度，抵抗化疗损伤。**P＜0.01.
实施例3
SphK2基因敲除小鼠较野生型小鼠组，其小鼠的生存周期明显延长
分别选择实施例1中饲养环境的野生型小鼠与SphK2基因敲除小鼠，8周大，数目各10只，对于进行5-氟尿嘧啶腹腔注射，注射剂量为150mg/kg，每7天打一次，连续打3周，观察小鼠的生存周期(图3)。我们应用Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜ 0.05标示差异的显著性。
结果显示，SphK2基因敲除小鼠组在多次5-氟尿嘧啶刺激下生存周期较野生型小鼠组明显延长，说明SphK2基因敲除小鼠更能够抵抗5-氟尿嘧啶所诱导的化疗损伤，***P＜0.001。
实施例4
SphK2抑制剂ABC294640可有效的增加造血干细胞的在化学药物刺激后的损伤修复能力。
实验用小鼠选用20只8周大C57小鼠(中山大学实验动物中心购买)，分别给予 5-氟尿嘧啶腹腔注射，剂量：150mg/kg，同时每两天进行一次ABC294640的腹腔注射溶剂，对照组注射溶剂对照(1：1生理盐水：PEG400)溶液。用药方案是第一天注射 5-氟尿嘧啶溶液，第二天开始注射抑制剂与溶剂对照，随后每两天进行一次给药注射，共注射5次。第12天提取对照组与ABC294640处理组小鼠骨髓细胞，分析造血干细胞数量，方法与分析同实施例1。
SphK2抑制剂ABC294640购置于Selleck公司，溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，最终用聚乙二醇400(PEG400)与生理盐水的混合液(1：1)稀释为终浓度10mg/kg。我们应用Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，在化疗药物5-氟尿嘧啶刺激下ABC294640治疗组中造血干细胞数量显著增加，说明ABC294640可有效增强造血干细胞的自我更新能力和损伤修复速度，帮助化疗药物损伤后造血功能障碍的治疗(图4)。**P＜0.01。
实施例5
SphK2抑制剂ABC294640注射显著增加化疗药物刺激后白细胞的恢复速度
SphK2抑制剂的配制与实施例4一致，选用中山大学动物中心购买的12只8周大C57小鼠，分为两组，每组各6只，对其进行5-氟尿嘧啶腹腔注射，剂量为150mg/kg，注射1次，抑制剂ABC294640与溶剂对照的注射与实施例4类似，也是5-氟尿嘧啶注射后第二天开始注射，随后每两天注射一次，剂量为10mg/kg，一直注射到该实验结束。分别在第0天，第1天，第5天和第11天小鼠尾静脉取血于抗凝管中，采用血常规检测外周血白细胞数目。我们应用Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，ABC294640治疗组较溶剂对照组，外周血中白细胞数量显著增加，说明其可以有效治疗化疗药物所诱发的造血功能障碍和免疫细胞降低等症状(图5)。**P ＜0.01，***P＜0.001。
实施例6
SphK2抑制剂ABC294640注射显著增加化疗药物刺激后血小板的恢复速度
实验实施方法与实施例5一致，将抑制剂组与溶剂对照组小鼠第0天，第1天，第5天和第11天尾静脉采血后，进行血常规检测外周血血小板数目。我们应用Graphpad6.0进行 t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，ABC294640治疗组较溶剂对照组，外周血中血小板数量显著增加，说明其可以有效促进化学药刺激下的血小板恢复(图6)。*P＜0.05，***P＜0.001。
实施例7
SphK2抑制剂ABC294640注射显著增加射线辐照刺激后白细胞的恢复速度
SphK2抑制剂的配制与实施例4一致，选用中山大学动物中心购买的12只8周大C57小鼠，分为两组，每组各6只，对其进行X射线辐射损伤，剂量为450cGy。抑制剂与溶剂对照的注射与实施例4类似，X射线辐射后第二天开始腹腔注射，随后每两天注射一次，剂量为10mg/kg，一直注射到该实验结束。分别在第0天，第1天，第7天和第14天小鼠尾静脉取血于抗凝管中，进行血常规检测外周血白细胞数目。我们应用 Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，ABC294640治疗组较溶剂对照组，外周血中白细胞数量显著增加，证明ABC294640可有效增强外周血中白细胞恢复速度，说明其可以有效促进辐射损伤所造成的造血功能障碍(图7)。*P＜0.5，***P＜0.001。
实施例8
SphK2抑制剂ABC294640注射显著增加辐射刺激后血小板的恢复速度
实验实施方法与实施例7一致，将抑制剂组与溶剂对照组小鼠第0天，第1天，第7天和第14天尾静脉采血后，进行血常规检测外周血血小板数目。我们应用Graphpad6.0进行 t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，ABC294640治疗组较溶剂对照组，外周血中血小板数量显著增加，说明其可以有效治疗射线辐射损伤所导致的血小板降低的造血功能障碍(图8)。**P＜ 0.01。
实施例9
SphK2抑制剂ABC294640可靶向造血干细胞有效增加小鼠在多次大剂量化疗反复刺激下的生存率。
SphK2抑制剂的配制与实施例4一致，选用中山大学动物中心购买的12只8周大C57小鼠，分为两组，每组各6只，对其进行5-氟尿嘧啶腹腔注射，剂量为150mg/kg，每7天注射一次，共注射两次，抑制剂ABC294640与溶剂对照的注射与实施例4类似，抑制剂ABC294640也是5-氟尿嘧啶注射后第二天开始注射，随后每两天注射一次，剂量为10mg/kg，一直注射到该实验结束。记录小鼠死亡情况，结果见图9。我们应用 Graphpad6.0进行t检验分析，用P＜0.05标示差异的显著性。
结果显示，ABC294640处理组小鼠较对照组小鼠，在大剂量化疗药物反复刺激下，小鼠生存周期明显延长，说明ABC294640能够有效抵抗化疗药物的损伤，***P＜0.001.
以上为本发明的其中具体实现方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些显而易见的替换形式均属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，其特征在于所述的药物是治疗造血干细胞损伤的药物。
2.如权利要求1所述的SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，其特征在于所述的药物是治疗血液和免疫系统损伤的药物。
3.如权利要求1所述的SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，所述的药物是治疗造血功能障碍、血象降低的药物。
4.如权利要求1-3中任一项所述的SphK2基因或蛋白作为药物筛选靶点的应用，其特征在于所述的造血干细胞损伤、造血功能障碍、血象降低是原发性的或由放射线照射、药物损伤引发的。
5.如权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于所述药物抑制SphK2基因的表达或者SphK2蛋白的功能。
6.SphK2抑制剂在制备治疗造血功能障碍、造血干细胞损伤、血象降低或免疫细胞减少的疾病的药物中的应用。
7.如权利要求6所述的SphK2抑制剂在制备药物中的应用，其特征在于所述的疾病是原发性的，或者是由放射线辐射或药物损伤引发的。
8.SphK2抑制剂在制备提高造血干细胞自我更新和造血功能的药物中的应用。
9.权利要求6-8中任一项所述的应用，其中的SphK2抑制剂抑制SphK2基因的表达或者抑制SphK2蛋白的功能。
10.如权利要求9所述的应用，其中的SphK2抑制剂是ABC294640。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810411330.8A CN108670969B (zh) | 2018-05-02 | 2018-05-02 | 一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 |
| AU2019262283A AU2019262283A1 (en) | 2018-05-02 | 2019-04-30 | Use of SPHK2 inhibitor as drug for repairing bone marrow hematopoietic system injury or treating bone marrow hematopoietic dysfunction |
| AU2019101780A AU2019101780A4 (en) | 2018-05-02 | 2019-04-30 | Use of SPHK2 inhibitor as drug for repairing bone marrow hematopoietic system injury or treating bone marrow hematopoietic dysfunction |
| PCT/CN2019/085350 WO2019210866A1 (zh) | 2018-05-02 | 2019-04-30 | SphK2抑制剂作为骨髓造血系统损伤后修复或治疗骨髓造血功能障碍的药物的用途 |
| US16/606,495 US11826356B2 (en) | 2018-05-02 | 2019-10-18 | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810411330.8A CN108670969B (zh) | 2018-05-02 | 2018-05-02 | 一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108670969A true CN108670969A (zh) | 2018-10-19 |
| CN108670969B CN108670969B (zh) | 2020-07-10 |
Family
ID=63802031
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810411330.8A Active CN108670969B (zh) | 2018-05-02 | 2018-05-02 | 一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108670969B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109172574A (zh) * | 2018-10-21 | 2019-01-11 | 中山大学 | 一种治疗骨髓造血系统损伤后修复的药物 |
| CN110051839A (zh) * | 2019-04-16 | 2019-07-26 | 诺航生物技术(徐州)有限公司 | 一种促进脐带血干细胞体外扩增和增强脐带血干细胞移植后造血重建功能的药物 |
| WO2021073610A1 (en) * | 2019-10-18 | 2021-04-22 | Sun Yat-Sen University | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
| US11826356B2 (en) | 2018-05-02 | 2023-11-28 | Sun Yat-Sen University | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
-
2018
- 2018-05-02 CN CN201810411330.8A patent/CN108670969B/zh active Active
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| JAGADISH KUMMETHA VENKATA ET AL: "Inhibition of sphingosine kinase 2 downregulates the expression of c-Myc", 《BLOOD》 * |
| MATEUSZ ADAMIAK ET AL.: "Mobilization studies in mice deficient in sphingosine kinase 2 support a crucial role of the plasma level of sphingosine-1-phosphate in the egress of hematopoietic stem progenitor cells", 《ONCOTARGET》 * |
| ZHIQIANG QIN ET AL: "Targeting Sphingosine Kinase Induces Apoptosis and Tumor Regression for KSHV-Associated Primary Effusion Lymphoma", 《MOLECULAR CANCER THERAPEUTICS》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11826356B2 (en) | 2018-05-02 | 2023-11-28 | Sun Yat-Sen University | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
| CN109172574A (zh) * | 2018-10-21 | 2019-01-11 | 中山大学 | 一种治疗骨髓造血系统损伤后修复的药物 |
| CN110051839A (zh) * | 2019-04-16 | 2019-07-26 | 诺航生物技术(徐州)有限公司 | 一种促进脐带血干细胞体外扩增和增强脐带血干细胞移植后造血重建功能的药物 |
| WO2021073610A1 (en) * | 2019-10-18 | 2021-04-22 | Sun Yat-Sen University | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
| WO2021072780A1 (en) * | 2019-10-18 | 2021-04-22 | Sun Yat-Sen University | Methods and compositions for improving bone marrow hematopoietic functions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108670969B (zh) | 2020-07-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108670969A (zh) | 一种治疗骨髓造血功能障碍的药物 | |
| Burmester et al. | Tocilizumab in early progressive rheumatoid arthritis: FUNCTION, a randomised controlled trial | |
| Atkins et al. | Hematopoietic stem cell therapy for multiple sclerosis: top 10 lessons learned | |
| Longo et al. | Sympathetic fiber sprouting in inflamed joints and adjacent skin contributes to pain-related behavior in arthritis | |
| Voloshin et al. | G-CSF supplementation with chemotherapy can promote revascularization and subsequent tumor regrowth: prevention by a CXCR4 antagonist | |
| Jarand et al. | Neurological complications of infliximab. | |
| Tweehuysen et al. | FRI0200 Higher acceptance and persistence rates after biosimilar transitioning in patients with a rheumatic disease after employing an enhanced communication strategy | |
| RU2697480C2 (ru) | Применение режима краткосрочного голодания в сочетании с ингибиторами киназ для усовершенствования традиционной химио-лекарственной эффективности и пригодности и обращения вспять побочных эффектов от киназ в нормальных клетках и тканях | |
| Tsai et al. | S onic H edgehog inhibition as a strategy to augment radiosensitivity of hepatocellular carcinoma | |
| Marmouset et al. | The lenalidomide/bortezomib/dexamethasone regimen for the treatment of blastic plasmacytoid dendritic cell neoplasm | |
| Abbaszade Dibavar et al. | The effect of simultaneous administration of arsenic trioxide and microvesicles derived from human bone marrow mesenchymal stem cells on cell proliferation and apoptosis of acute myeloid leukemia cell line | |
| Huang et al. | LITAF enhances radiosensitivity of human glioma cells via the FoxO1 pathway | |
| Zhou et al. | Insulin-like growth factor 1 mitigates hematopoietic toxicity after lethal total body irradiation | |
| Mao et al. | Evaluation of polysaccharopeptide effects against C6 glioma in combination with radiation | |
| CN109172574A (zh) | 一种治疗骨髓造血系统损伤后修复的药物 | |
| CN104622864B (zh) | 绿原酸在制备预防和治疗原发性皮肤t细胞淋巴癌的药物中的用途 | |
| CN110051839A (zh) | 一种促进脐带血干细胞体外扩增和增强脐带血干细胞移植后造血重建功能的药物 | |
| Zhang et al. | Efficacy and safety of tripterygium wilfordii Hook F plus TNF inhibitor for active rheumatoid arthritis: A multicentre, randomized, double-blind, triple-dummy controlled trial | |
| Thronicke et al. | Nivolumab-induced toxicity profile in patients with advanced or metastasized lung cancer treated with Viscum album L. extracts | |
| CN104001156B (zh) | 真核肽链释放因子3b片段（eRF3b-36）在治疗肝损伤中的应用 | |
| Sonoda et al. | Asialoerythropoietin ameliorates bleomycin‑induced acute lung injury in rabbits by reducing inflammation | |
| Suh et al. | Low‐dose lenograstim to enhance engraftment after autologous stem cell transplantation: a prospective randomized evaluation of two different fixed doses | |
| CN108815155A (zh) | 鱼藤酮在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用 | |
| Bağlan et al. | Retrospective Evaluation of Patients with Systemic Juvenile Idiopathic Arthritis: A Single-centre Experience | |
| AU2019101780A4 (en) | Use of SPHK2 inhibitor as drug for repairing bone marrow hematopoietic system injury or treating bone marrow hematopoietic dysfunction |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |