CN108522372A - 一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及鱼卵的收集保存方法，公开了一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法。该方法包含以下步骤：1）集卵；2）清洗；3）预检；4）浸泡；5）包装；6）休眠卵保存。本发明通过制备专用产卵基质，设计了相应的过滤筛网，解决了传统繁殖方式中挑卵工作带来的巨大工作量，节省人工90%以上，同时利用载卵材料解决了传统繁殖方式中泥炭土保存带来的不利影响，为规模化繁育该观赏鱼提供了技术保障。

Description

一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法

技术领域

本发明涉及鱼卵的收集保存方法，尤其涉及一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法。

背景技术

黑珍珠鳉鱼属于南美一年生的卵生鳉鱼，有着极为迷人的体色，可以说是淡水观赏鱼中极少数可以和海水生珊瑚礁鱼相媲美的鱼种之一，加上她们那小巧的体型，活泼好动的性格，放在水草缸中实在是天生的绝配。另外，大多数卵生鳉鱼对水质适应性广，容易饲养，这些特点使它们在国外成为极受欢迎的热带观赏鱼种之一。

黑珍珠鳉鱼在繁殖时，通常是将性成熟的雌雄亲鱼选出，单独饲养于繁殖缸中，此缸中放置一个装有泥炭土的小花盆，让亲鱼在土中产卵，采集鱼卵往往是隔一周采一次，把小花盆取出，在网袋中将泥炭土沥干，再用报纸将水进一步吸干。然后是休眠卵的保存过程，因泥炭土成份复杂，所含颗粒大小长短不一，难以通过筛选等方式将卵与土分离出来，一种方法是人工将卵挑出后单独保存；另一种方法较常用，是把卵混在泥炭土中一起保存。

申请号为200910047280.0的中国专利公开了一种青鳉鱼受精卵收集及分离方法，用一次性接种环和大口吸管收集分离受精卵，避免刺破卵膜，。青鳉鱼和黑珍珠鳉鱼分类上为不同科属的两类鱼，，前者卵产出后通过粘丝挂于母体泄殖孔外，后者产将卵产在松软的水下土层之中，方法不能通用，且该方法十分费时费力，且不可能挑选彻底，不适宜商业化操作。

后一种方式由于卵混在土里，不便检查发育状况，下水孵化时间难以精确，造成孵化率不高，并需要多次将未孵化的卵回收、干燥，密封保存、再次下水孵化等重复操作。工作繁琐、人工成本高，孵化率低，难以满足商业化生产需要。且卵与泥炭土混合在一起，难以消毒，造成后期仔鱼成长过程中卵甲藻等病害发生，另外卵和土混合着下水孵化，造成少部分已脱膜的仔鱼在泥炭土层中无法游离，而死在其中，和未孵化的卵一起回收再次休眠保存时，腐烂发霉而影响其它未孵化的卵。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，采用易过滤的产卵基质和半刚性筛网分离休眠卵，并预检消毒后无土保存，显著减少人工成本，提高了孵化率，适于商业化应用。

本发明的具体技术方案为：该方法包含以下步骤：

1)集卵：把事先铺设于产卵缸底部20目半刚性筛网提起，在缸水中摇动筛洗，将产卵基质过滤走，将休眠卵集于筛网中；

2)清洗：将筛网中的卵带水用容器抄起后静置，待卵沉于水底，用与缸水温度相同的清水将上层浑水兑去；

3)预检：第3-7天每天观察一次，把白卵、长毛的卵吸走；

4)浸泡：将余下好的休眠卵浸入80-120ppm的戊二醛中4-6min；

5)包装：将受精卵平铺在保鲜膜上，将载卵材料置于受精卵和保鲜膜上部，然后将保鲜膜包裹载卵材料，并将有卵一面翻转朝上，放入袋中密封；

6)休眠卵保存：将密封袋置于恒温箱中，24-26℃下休眠保存。

本发明根据休眠卵的大小和产卵基质的粒径，选用20目的筛网，能够有效分离产卵基质与休眠卵，便于采收休眠卵；休眠卵预检可以防止坏卵对好的休眠卵的影响；浸泡戊二醛溶液不仅具有抑菌效果，避免了后续过程中仔鱼感染卵甲藻等病害的问题，还能够刺激休眠卵，帮助其在后续孵化过程中脱膜，提高孵化率；利用载卵材料保存休眠卵，便于休眠卵后期的发育检查、便于找准下水孵化的时间节点，从而提高了孵化率，减少因下水孵化过早导致的趴底苗。

作为优选，所述步骤1)中半刚性筛网包括两片金属筛网(1)，合页(2)，铰链(3)和把手(4)，所述合页(2)位于两片筛网(1)中间连接筛网(1)，所述铰链(3)位于两片筛网(1)下方，把手(4)位于两片筛网(1)两端上方。

若采用普通尼龙筛网，则产卵基质容易结块包裹在网内，需要用手揉搓才能过滤干净，容易划破卵膜，伤害休眠卵，若采用刚性金属筛网，则过滤效率低；本发明采用半刚性筛网，两片金属筛网通过合页连接，能够转动，能够令摇晃震动幅度增大，提高过滤效率，加快过滤时间，通过铰链限制了筛网的转动角度，防止过滤过程中筛网损伤到休眠卵，添加了把手方便操作，与本发明的产卵基质配合使用，便于卵的筛选分离，显著减少人工成本，效果最佳。

作为优选，所述步骤1)中产卵基质为65-75wt％处理过的塘泥和余量的ADA泥粉混合物。

采用有别于传统鳉鱼繁殖所用的泥炭土基质，而采用自制的基质(塘泥+ADA泥粉)不含浮萍等多纤维漂浮物，基质颗粒均匀粒径小，不易黏连，便于后续卵的筛选分离，显著减少人工成本；去除了螺类、摇蚊幼虫等底栖生物，鱼卵不易产生病害问题，提高孵化率和成活率。

作为优选，所述处理过的塘泥的制备方法为：采挖塘泥、加自来水、搅拌、沉淀、去除浮萍等漂浮物，用100目尼龙筛绢包裹后挤压过筛、去除螺类、摇蚊幼虫等底栖生物及杂质，摊成15mm厚度，在烘箱中120℃下烘干30min。

作为优选，所述ADA泥粉的制备方法为：购买市售ADA泥，在搅拌机中粉碎，经40目尼龙筛绢过滤，未能滤过的再次粉碎。

作为优选，所述步骤5)中载卵材料为8-12mm厚的黑色致密型生化棉。

作为优选，所述步骤5)中载卵材料需要浸泡抑菌液。

作为优选，所述抑菌液的制备方法为：将亚甲基蓝溶于泥炭土浸出液中，亚甲基蓝浓度为4-6ppm。

作为优选，所述泥炭土浸出液的制备方法为按质量比1∶2将泥炭土浸泡于水中，浸泡时间20天以上。

作为优选，所述步骤5)中密封袋上还需贴上标签，注明鱼种、收集日期、卵粒数。

与现有技术对比，本发明的有益效果是：本发明通过制备专用产卵基质，设计了相应的过滤筛网，解决了传统繁殖方式中挑卵工作带来的巨大工作量，节省人工90％以上，同时利用载卵材料解决了传统繁殖方式中泥炭土保存带来的不利影响，为规模化繁育该观赏鱼提供了技术保障。

附图说明

图1为本发明实施例1的一种半刚性筛网的一种侧视图；

图2为本发明实施例1的一种半刚性筛网的一种侧视图。

图3为本发明实施例1的一种半刚性筛网的俯视图；

附图标记为：金属筛网1，合页2，铰链3，把手4。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的描述。

实施例1

产卵基质制备：采挖塘泥、加自来水、搅拌、沉淀、去除浮萍等漂浮物，用100目尼龙筛绢包裹后挤压过筛、去除螺类、摇蚊幼虫等底栖生物及杂质，摊成15mm厚度，在烘箱中120℃下烘干30min。购买市售ADA泥，在搅拌机中粉碎，经40目尼龙筛绢过滤，未能滤过的再次粉碎。将70wt％处理过的塘泥和余量的ADA泥粉混合即得。

抑菌液的制备：将亚甲基蓝溶于泥炭土浸出液中，亚甲基蓝浓度为5ppm。泥炭土浸出液的制备方法为按质量比1∶2将泥炭土浸泡于水中，浸泡时间1个月。

休眠卵收集、保存、孵化：把事先铺设于产卵缸底部20目半刚性筛网提起，在缸水中摇动筛洗，将产卵基质过滤走，将休眠卵集于筛网中；用500ml烧杯将网袋中的卵带水抄起，卵静止后沉于杯底，用温度相近的清水将上层浑水慢慢兑去；将烧杯中的卵倒在大培养皿中，皿下垫黑纸，第3-7天每天观察一次，把白卵、长毛的卵吸走；将余下好的休眠卵浸入100ppm的戊二醛中5min；将10mm厚的黑色致密型生化棉裁成10cm×15cm的长方形作为载卵材料，在15cm×20cm的长方形塑料盆中，垫上一片25cm×35cm的食品保鲜膜，将抑菌后圆形金属筛网倒置在膜的上方，拍击金属筛网底部，使卵震落在膜上，用干净的毛笔将卵扫拨于膜的中间位置，并使其平铺，计数；将浸泡了抑菌液的载卵材料置于受精卵和保鲜膜上部，然后将保鲜膜包裹载卵材料，并将有卵一面翻转朝上，放入袋中密封；密封袋上还需贴上标签，注明鱼种、收集日期、卵粒数；将密封袋置于恒温箱中，25℃下休眠保存。

如图1-3所示，半刚性筛网包括两片金属筛网(1)，合页(2)，铰链(3)和把手(4)，所述合页(2)位于两片筛网(1)中间连接筛网(1)，所述铰链(3)位于两片筛网(1)下方，把手(4)位于两片筛网(1)两端上方。

实施例2

产卵基质制备：采挖塘泥、加自来水、搅拌、沉淀、去除浮萍等漂浮物，用100目尼龙筛绢包裹后挤压过筛、去除螺类、摇蚊幼虫等底栖生物及杂质，摊成15mm厚度，在烘箱中120℃下烘干30min。购买市售ADA泥，在搅拌机中粉碎，经40目尼龙筛绢过滤，未能滤过的再次粉碎。将65wt％处理过的塘泥和余量的ADA泥粉混合即得。

抑菌液的制备：将亚甲基蓝溶于泥炭土浸出液中，亚甲基蓝浓度为6ppm。泥炭土浸出液的制备方法为按质量比1∶2将泥炭土浸泡于水中，浸泡时间40天。

休眠卵收集、保存、孵化：把事先铺设于产卵缸底部20目半刚性筛网提起，在缸水中摇动筛洗，将产卵基质过滤走，将休眠卵集于筛网中；用500ml烧杯将网袋中的卵带水抄起，卵静止后沉于杯底，用温度相近的清水将上层浑水慢慢兑去；将烧杯中的卵倒在大培养皿中，皿下垫黑纸，第3-7天每天观察一次，把白卵、长毛的卵吸走；将余下好的休眠卵浸入120ppm的戊二醛中4min；将8mm厚的黑色致密型生化棉裁成10cm×15cm的长方形作为载卵材料，在15cm×20cm的长方形塑料盆中，垫上一片25cm×35cm的食品保鲜膜，将抑菌后圆形金属筛网倒置在膜的上方，拍击金属筛网底部，使卵震落在膜上，用干净的毛笔将卵扫拨于膜的中间位置，并使其平铺，计数；然后将保鲜膜包裹载卵材料，并将有卵一面翻转朝上，放入袋中密封；密封袋上还需贴上标签，注明鱼种、收集日期、卵粒数；将密封袋置于恒温箱中，24℃下休眠保存。

半刚性筛网与实施例1相同。

实施例3

产卵基质制备：采挖塘泥、加自来水、搅拌、沉淀、去除浮萍等漂浮物，用100目尼龙筛绢包裹后挤压过筛、去除螺类、摇蚊幼虫等底栖生物及杂质，摊成15mm厚度，在烘箱中120℃下烘干30min。购买市售ADA泥，在搅拌机中粉碎，经40目尼龙筛绢过滤，未能滤过的再次粉碎。将75wt％处理过的塘泥和余量的ADA泥粉混合即得。

抑菌液的制备：将亚甲基蓝溶于泥炭土浸出液中，亚甲基蓝浓度为6ppm。泥炭土浸出液的制备方法为按质量比1∶2将泥炭土浸泡于水中，浸泡时间20天。

休眠卵收集、保存、孵化：把事先铺设于产卵缸底部20目半刚性筛网提起，在缸水中摇动筛洗，将产卵基质过滤走，将休眠卵集于筛网中；用500ml烧杯将网袋中的卵带水抄起，卵静止后沉于杯底，用温度相近的清水将上层浑水慢慢兑去；将烧杯中的卵倒在大培养皿中，皿下垫黑纸，第3-7天每天观察一次，把白卵、长毛的卵吸走；将余下好的休眠卵浸入80ppm的戊二醛中6min；将12mm厚的黑色致密型生化棉裁成10cm×15cm的长方形作为载卵材料，在15cm×20cm的长方形塑料盆中，垫上一片25cm×35cm的食品保鲜膜，将抑菌后圆形金属筛网倒置在膜的上方，拍击金属筛网底部，使卵震落在膜上，用干净的毛笔将卵扫拨于膜的中间位置，并使其平铺，计数；然后将保鲜膜包裹载卵材料，并将有卵一面翻转朝上，放入袋中密封；密封袋上还需贴上标签，注明鱼种、收集日期、卵粒数；将密封袋置于恒温箱中，26℃下休眠保存。

半刚性筛网与实施例1相同。

对比例1

除收集方式为不过滤产卵基质，休眠卵连土一起收集，并连土放入密封袋中保存外，其余保存、孵化方式与实施例1完全一致。

对比例2

除采用手工挑卵的方式收集休眠卵外，其余保存、孵化方式与实施例1完全一致。

将同一产卵缸中所含的24个产卵室随机分成4组，每组6个产卵室。将其中的卵采用不同的方式进行收集与保存，并统计其孵出仔鱼数量。详见下表1：

表1：黑珍珠鳉鱼卵几种收集、保存方式及对孵化结果的影响比较试验

从上表可以看出：采用对比例1的传统的黑珍珠鳉鱼卵收集与保存方式，平均每个产卵室获得23.0尾仔鱼；采用对比例2的手工收集休眠卵结合本发明的保存方式进行保存，平均每个产卵室获得35.3尾仔鱼，但平均每百尾仔鱼仅收集鱼卵环节要耗费119min；采用实施例1的本发明的方式收集与保存，平均每个产卵室获得36.1尾仔鱼，且平均每百尾仔鱼在鱼卵收集环节仅耗费4.6min，显著节省人工并提高了繁殖效率。

本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (10)

1.一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于：该方法包含以下步骤：

1）集卵：把事先铺设于产卵缸底部20目半刚性筛网提起，在缸水中摇动筛洗，将产卵基质过滤走，将休眠卵集于筛网中；

2）清洗：将筛网中的卵带水用容器抄起后静置，待卵沉于水底，用与缸水温度相同的清水将上层浑水兑去；

3）预检：第3-7天每天观察一次，把白卵、长毛的卵吸走；

4）浸泡：将余下好的休眠卵浸入80-120ppm的戊二醛中4-6min；

5）包装：将受精卵平铺在保鲜膜上，将载卵材料置于受精卵和保鲜膜上部，然后将保鲜膜包裹载卵材料，并将有卵一面翻转朝上，放入袋中密封；

6）休眠卵保存：将密封袋置于恒温箱中，24-26℃下休眠保存。

2.如权利要求1所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述步骤1）中半刚性筛网包括两片金属筛网（1），合页（2），铰链（3）和把手（4），所述合页（2）位于两片筛网（1）中间连接筛网（1），所述铰链（3）位于两片筛网（1）下方，把手（4）位于两片筛网（1）两端上方。

3.如权利要求1或2所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述步骤1）中产卵基质为65-75wt%处理过的塘泥和余量的ADA泥粉混合物。

4.如权利要求3所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述处理过的塘泥的制备方法为：采挖塘泥、加自来水、搅拌、沉淀、去除浮萍等漂浮物，用100目尼龙筛绢包裹后挤压过筛、去除螺类、摇蚊幼虫等底栖生物及杂质，摊成15mm厚度，在烘箱中120 ℃下烘干30min。

5.如权利要求3所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述ADA泥粉的制备方法为：购买市售ADA泥，在搅拌机中粉碎，经40目尼龙筛绢过滤，未能滤过的再次粉碎。

6.如权利要求1所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述步骤5）中载卵材料为8-12mm厚的黑色致密型生化棉。

7.如权利要求1或6所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述步骤5）中载卵材料需要浸泡抑菌液。

8.如权利要求7所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述抑菌液的制备方法为：将亚甲基蓝溶于泥炭土浸出液中，亚甲基蓝浓度为4-6ppm。

9.如权利要求8所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述泥炭土浸出液的制备方法为按质量比1:2将泥炭土浸泡于水中，浸泡时间20天以上。

10.如权利要求1所述的黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法，其特征在于，所述步骤5）中密封袋上还需贴上标签，注明鱼种、收集日期、卵粒数。