CN108495656B

CN108495656B - 含有脱氧己糖烷基单缩醛或单醚的抗菌组合物

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Publication number: CN108495656B
Application number: CN201680080159.6A
Authority: CN
Inventors: C.戈兹兰; D.贝尔梅西里; M-C.杜克洛斯; N.迪盖; M.勒梅尔; G.利纳; O.杜米特雷斯库; A.雷德尔
Original assignee: Claude Bernardrian First University; Treos Starch And Sweetener Belgium; Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Current assignee: Claude Bernardrian First University; Treos Starch And Sweetener Belgium; Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Priority date: 2015-12-17
Filing date: 2016-12-19
Publication date: 2021-02-02
Anticipated expiration: 2036-12-19
Also published as: EP3389731A1; KR20180091914A; BE1023858B1; CN108495656A; FR3045382B1; JP6755314B2; FR3045382A1; CA3008791A1; US20200281956A1; JP2019501158A; BE1023858A1; BR112018012076A2; EP3389731B1; WO2017103904A1

Abstract

本发明涉及一种杀菌或抑菌组合物，所述组合物包含脱氧己糖烷基缩醛或醚或者其异构体的混合物，其在治疗或预防革兰氏阳性细菌感染中的用途，其作为外用的卫生或皮肤科产品的用途以及一种消毒表面的方法。

Description

含有脱氧己糖烷基单缩醛或单醚的抗菌组合物

技术领域

本发明涉及一种杀菌或抑菌组合物，所述组合物包含脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基缩醛或烷基醚，其中所述烷基包含11至18个之间的碳原子，其药学上可接受的盐，其异构体或异构体的混合物，其在治疗或预防革兰氏阳性细菌感染中的用途，其作为外用的卫生或皮肤科产品的用途以及还涉及一种消毒表面的方法。

背景技术

将抗微生物化合物定义为能够抑制或阻止微生物生长或将其杀死的分子。在这种情况下，通常将其用于预防或治疗人和动物的感染，以及在食品加工工业中用于防止病原菌在食物中的繁殖。抗菌化合物的广泛使用促进了抗性致病因子的出现。已经获得最广泛使用的抗微生物化合物抗性机制细菌的传播是越来越令人担忧的主要公共卫生问题(J.S.Bradley等，Lancet Infect. Dis.2007；7:68–78)。

作为例证，已经分离出许多对针对葡萄球菌属致病性最强的物种(即金黄色葡萄球菌)的抗生素具有耐药性的菌株。金黄色葡萄球菌感染占严重感染的比例很高。更重要的是，据报道几乎半数的院内感染与葡萄球菌感染相关。还可以提及对常用抗生素具有耐药性的众多粪肠球菌或屎肠球菌菌株。尽管其毒力特别地低于葡萄球菌，但是已鉴定出越来越多的多重耐药性肠球菌以及最近流行的对糖肽具有耐药性的肠球菌，糖肽是针对该细菌家族的替代抗生素。

已经描述了抗生素耐药性的另一种现象，其可能不仅与抗生素的过量使用相关，还与食品保存方法相关。因此，例如，已发现单核细胞增生性李斯特氏菌在渗透胁迫、低温或酸性介质中存活后对抗生素具有更高的耐药性 (Anas A.等，(2015)FoodMicrobiology，第46卷，四月，第154-160页)。然而，人类污染来自食物。此外，尽管相对罕见，但是人类李斯特氏菌病是一种严重的感染，其死亡率估计为50％。因此，可能由现代食品保存或治疗方法引起的单核细胞增生性李斯特氏菌中抗生素耐药性的出现对公共卫生构成严重威胁。

尽管有几种机制通常同时参与抗生素耐药性，通常将其分为三类：(a)抗生素向细菌中的渗透存在缺陷，(b)通过细菌酶系统将抗生素灭活或排泄，以及(c)在细菌靶点与抗生素之间缺乏亲和性。这三类耐药性机制具有结构要素，即所使用的机制取决于所讨论分子的结构。

因此，为了获得产生耐药性的可能性更低的抗生素组合物，本发明人设想使用一种组合物，所述组合物含有具有抗生素活性但包含能够降低产生细菌耐药性可能性的微小结构差异的化合物的混合物。因而，其设想了一种组合物，所述组合物包含具有抗生素活性的化合物的异构体混合物。

发明人希望开发一种还具有低毒性和低环境影响的抗生素组合物；一种可生物降解的抗生素组合物，其可以低成本地从可再生资源中大量获得，以便完全可用于工业应用，但还与非生物基抗微生物剂一样有效。

在现有技术中没有方法能够以低毒性和低成本生产生物基化合物的异构体混合物。

然而，现有技术已经描述了生物基化合物。因此，现有技术描述了作为抗微生物剂的不同化合物，其中有脂肪酸及其相应的多羟基酯，其对革兰氏阳性细菌具有活性并具有长脂肪链。作为指示，活性最强的抗微生物剂之一是月桂酸单甘油酯，这是一种具有C12脂肪链的甘油单酯。其商品名是

将这种化合物作为食品添加剂，用于抑制细菌生长(E.Freese, C.W.Sheu,E.Galliers.Nature 1973,241,321–325；E.G.A.Verhaegh,D.L. Marshall,D.-H.Oh.Int.J.Food Microbiol.1996,29,403–410)。然而，由于单月桂酸酯的酯官能团对酯酶敏感，因此该化合物迅速降解并且具有差的半衰期。

现有技术还描述了来源于糖的抗微生物剂，由于其具有生物降解性，其毒性和对环境的影响也较低，因此认为是特别有吸引力的。

来源于糖的抗微生物剂的实例是来源于糖的酯，其也在工业上用于抗微生物应用，因为其原料和生产成本保持相对较低。例如，在国际专利申请WO 2014/025413中描述了脱水山梨醇酯，其在抗微生物制剂中与扁柏酚作为混合物。根据该申请，该制剂据称可以抑制或杀死革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、真菌和/或酵母。

现有技术还描述了二糖酯在食品工业中作为抗微生物剂的用途。十二烷基蔗糖是最常用的之一。据称后者对L.monocytogenes特别有效(M.Ferrer,J. Soliveri,F.J.Plou,N.López-Cortés,D.Reyes-Duarte,M.Christensen,J.L.

A.Ballesteros,Enz.Microb.Tech.,2005,36,391-398)。尽管如此，还将其描述为在医院应用时能够较弱抑制S.aureus生长(J.D.Monk,L.R. Beuchat,A.K.Hathcox,J.Appl.Microbial.1996,81,7-18)。因此，据报道这种蔗糖酯具有抑菌(阻止细菌生长)而非杀菌(杀伤细菌)的性质。

此外，糖酯的合成存在很多缺点。首先，尽管生产成本较低，但是合成酯(特别是二糖和三糖的酯)是有问题的，因为糖具有较高的官能性，其导致形成单酯、二酯和聚酯的混合物，以及通常需要存在极性溶剂，如二甲基甲酰胺(DMF)和吡啶，以更好地溶解高极性试剂。然而，这些溶剂被归类为具有致癌性、致突变性和生殖毒性(CMR)，必须避免使用。为解决这一问题，使用了酶促合成，但是在这些条件下需要使用非常稀的介质，这使得生产受到限制。

而且，这些化合物的酯官能团易于被细胞中存在的酯酶水解。然而，这种水解后释放的分子(即糖和脂肪酸)几乎不具有抗微生物性质(脂肪酸具有微弱活性)。这导致的不稳定性使得这些化合物的活性时间缩短。

因此，为了生产不易产生耐药性的包含有效的和稳定的抗微生物剂的抗生素组合物，发明人提出了一种脱氧己糖烷基单缩醛或单醚，其中的烷基包含11至18个之间的碳原子，优选地其是在廉价条件下获得的，同时对环境尊重以及不会对局部应用或摄入应用产生危害的区域异构体和/或非对映异构体的混合物形式。

具体实施方式

杀菌或抑菌组合物

本发明通常地涉及一种杀菌或抑菌组合物，其特征在于所述组合物包含脱氧己糖烷基醚或烷基缩醛和/或糖基化和/或氢化和/或脱水的脱氧己糖烷基醚或烷基缩醛，其中所述烷基包含11至18个之间的碳原子，其药学上可接受的盐，其异构体或混合物；优选地，所述烷基醚或烷基缩醛基团在2-O-、 3-O-或4-O-位，异构体优选地选自区域异构体和/或非对映异构体。通常，脱氧己糖选自鼠李糖或岩藻糖。有利地，脱氧己糖烷基醚或烷基缩醛是脱氧己糖烷基单缩醛或单醚。通常，所述脱氧己糖是糖基化和/或氢化和/或脱水的脱氧己糖。

本发明还涉及一种组合物，所述组合物包含脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基单缩醛或单醚或者其异构体的混合物，所述脱氧己糖衍生物是糖基化和/或氢化和/或脱水的脱氧己糖，所述异构体优选地选自区域异构体和/或非对映异构体，所述脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基单缩醛或单醚或其异构体的混合物来自包括下述步骤的过程：

a)利用含有11至18个碳原子的脂肪醛或其缩醛对脱氧己糖或脱氧己糖衍生物进行缩醛化或反式缩醛化，

b)优选地在不使用酸性催化剂的条件下任选地催化氢解a)中获得的脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基缩醛，以及

c)回收从b)中获得的脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基单醚的异构体的混合物，其中所述烷基(R)包含11至18个之间的碳原子，

或者

回收从a)中获得的脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基单缩醛的异构体的混合物，其中所述烷基(R)包含11至18个之间的碳原子。

必须将“脱氧己糖”理解为是其中的一个羟基(OH)已被氢取代的己糖。脱氧己糖可以从植物中分离；例如，鼠李糖来自鼠李(Rhamnus)或漆树，以及岩藻糖来自哺乳动物或昆虫细胞的膜多糖。适宜的脱氧己糖的实例可以是岩藻糖或鼠李糖。

如在本文中所使用的，术语“鼠李糖”指D-(–)-鼠李糖或指L-(+)-鼠李糖。鼠李糖也称为异卫矛醇或6-脱氧-L-甘露糖，鼠李糖是经验式为C₆H₁₂O₅的己糖。

如在本文中所使用的，术语“岩藻糖”指D-(–)-岩藻糖或L-(+)-岩藻糖。岩藻糖也称为6-脱氧-L-半乳糖，岩藻糖是经验式为C₆H₁₂O₅的己糖。

根据一个实施方式，脱氧己糖是糖基化和/或氢化和/或脱水的脱氧己糖。此类糖基化和/或氢化和/或脱水的脱氧己糖在本文件中称为“脱氧己糖衍生物”。例如，鼠李糖衍生物是脱水鼠李糖或鼠李糖醇。

必须将“脱水鼠李糖”理解为是通过脱水从鼠李糖中除去一个或多个水分子获得的化合物。脱水鼠李糖的实例可以是1,2-脱水鼠李糖、1,2-脱水鼠李糖、1,3-脱水鼠李糖或2,3-脱水鼠李糖。

可以通过将鼠李糖醇脱水以形成例如1,5-脱水鼠李糖醇获得脱水鼠李糖。

根据一个实施方式，所述鼠李糖衍生物是糖醇鼠李糖醇。如在本文中所使用的，术语“糖醇”，也称为“多元醇”，指氢化单糖形式，其中的羰基(醛或酮)已被还原成伯羟基或仲羟基。

类似地，当脱氧己糖是岩藻糖时，所述氢化岩藻糖衍生物是糖醇岩藻糖醇。

有利地，岩藻糖衍生物是脱水岩藻糖。必须将“脱水岩藻糖”理解为是通过脱水从岩藻糖中除去一个或多个水分子获得的岩藻糖。脱水岩藻糖的实例可以是1,2-脱水岩藻糖或1,3-脱水岩藻糖。

根据一个实施方式，根据本发明的方法可以包括将所述脱氧己糖或其衍生物脱水的步骤，以获得例如单脱水鼠李糖或单脱水岩藻糖。通常在脱水步骤之前将脱氧己糖熔化。脱水步骤可以使用催化剂(例如使用酸催化剂)进行。

根据本发明，脱水步骤在氢气氛下进行，使用优选约20至50巴的压力。

有利地，脱水步骤在120至170℃之间(优选地130至140℃之间)的温度下进行。

通过在脱水步骤之后例如通过结晶、重结晶或层析对脱氧己糖进行纯化。

根据一个实施方式，所述脱氧己糖衍生物是糖基化脱氧己糖，换句话说是烷基糖苷。

如在本文中所使用的，术语“糖基化的”或“糖基化”指在糖的异头位置(半缩醛官能团)处烷基与糖之间的反应，以产生混合的缩醛官能团(IUPAC Compendium of ChemicalTerminology Gold book Version 2.3.3 2014-02-24p. 635-636and PAC,1995,67,1307(“Glossary of class names of organic compounds and reactivity intermediatesbased on structure”IUPAC Recommendations 1995)page 1338White Book,p.136)。该糖基化反应与可以发生在烷基与糖之间的烷基化不同，其是在糖的任意氧上发生的，以形成醚官能团。

如在本文中所使用的，术语“烷基糖苷”指如现有技术中所述的其中通过糖基化将还原部分通过键与烷基连接的脱氧己糖。通常地，脱氧己糖或其衍生物可以通过氧原子(O-糖苷)、氮原子(糖胺)、硫原子(硫代糖苷)或碳原子(C-糖苷)与烷基连接。烷基可以具有不同的链长；优选地，烷基是 C1-C4烷基。进一步优选的烷基是甲基或乙基。通常地，糖基化脱氧己糖是糖基化鼠李糖、糖基化鼠李糖醇、糖基化岩藻糖或糖基化岩藻糖醇。烷基糖苷例如可以选自下组：甲基鼠李糖苷、乙基鼠李糖苷、丙基鼠李糖苷、丁基鼠李糖苷、甲基岩藻糖苷、乙基岩藻糖苷、丙基岩藻糖苷和丁基岩藻糖苷。

根据本发明，缩醛化或反式缩醛化的步骤包括：

i)预热所述脱氧己糖或其衍生物的任选步骤，优选地在70至130℃之间通常在90至110℃之间的温度下，

ii)向脱氧己糖或其衍生物中加入脂肪醛或脂肪醛衍生物的步骤，以及

iii)加入催化剂的步骤，优选酸催化剂。

通常地，脂肪醛的缩醛可以是相应醛的二烷基缩醛。二甲基缩醛和二乙基缩醛是优选的。

步骤i)是特别有利地，因为其可以在不存在溶剂的情况下进行。

优选地，在缩醛化或反式缩醛步骤化期间以及在适当时在脱水步骤期间使用的酸催化剂可以是均相或非均相酸催化剂。如在表述“均相酸催化剂”

中使用的术语“均相”指作为试剂处于同一相(固态、液态或气态)或在相同聚集状态下的催化剂。反之，如在表叔“非均相酸催化剂”中使用的术语 “非均相”指试剂处于不同相(固态、液态或气态)的催化剂。

在缩醛化或反式缩醛化步骤期间以及在适当时在脱水步骤期间使用的所述酸催化剂可以独立地选自固体或液体、有机或无机酸，优选固体酸。特别地，优选的酸催化剂选自对甲苯磺酸、甲磺酸、樟脑磺酸(CSA)和磺酸树脂。

典型地，缩醛化或反式缩醛化步骤在70至130℃之间通常是70至90℃ 之间的温度下进行。反应混合物的温度可以作为所使用的试剂和溶剂的函数而改变。反应时间由实现的转化程度决定。

根据一个实施方式，缩醛化或反式缩醛化步骤可以利用脂肪醛或其缩醛进行，通常是线形或支链脂肪醛或其缩醛。通常可以使用具有11、12、13、 14、15、16、17或18个碳原子的脂肪醛或其缩醛进行缩醛化或反式缩醛化步骤，例如选自十一烷醛、十二烷醛、十三烷醛、十四烷醛、十五烷醛、十六烷醛、十七烷醛、十八烷醛和乙缩醛。优选地，C11-C13脂肪醛或其缩醛是 C12脂肪醛或其缩醛，例如十二烷醛或其缩醛。

在本文中使用的表述“其缩醛(acetal)”或“其缩醛(acetals)”包括与 C11-C18脂肪醛对应的二烷基缩醛。更特别地，优选C11-C18脂肪醛的二甲基或二乙基缩醛。

根据一个实施方式，可以使用或不使用溶剂进行缩醛化或反式缩醛化步骤。当在存在溶剂的条件下进行反应时，优选的溶剂是极性溶剂。

通常地，溶剂可以选自二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈(CH₃CN)、四氢呋喃(THF)、2-甲基四氢呋喃 (2Me-THF)、环戊基甲基醚(CPME)、甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、丙醇(PrOH)、异丙醇(iPrOH)、丁醇(BuOH)、二丁醚(DBE)、甲基叔丁基醚(MTBE)和三甲氧基丙烷(TMP)。

深入的实验研究已经选择了能够在缩醛化或反式缩醛化步骤中观察到最佳收率和转化程度的条件。当[(C11-C18脂肪醛或其缩醛)：脱氧己糖或其衍生物]的摩尔比为5:1至1:5之间，优选地4:1至1:4之间以及有利地3:1至1:3 之间时获得最佳结果。

发明人更具体的表明在缩醛化过程中C11-C18脂肪醛：(脱氧己糖或其衍生物)的摩尔比为1:1至1:5之间，优选地1:1至1:4之间和优选地1:3至 1:2之间改善收率并提供最佳转化程度。

发明人还表明在反式缩醛化过程中C11-C18脂肪醛：(脱氧己糖或其衍生物)的摩尔比为1:1至1:5之间，优选地5:4至4:1之间，优选地3:1至4:3 之间以及甚至更优选地3:2至2:5之间改善收率并提供最佳转化程度。所使用的催化剂与缩醛化反应中的催化剂相同。

根据一个实施方式，本发明的方法适当时在缩醛化或反式缩醛化的任意一个脱水步骤之后至少还包括中和和/或过滤和/或纯化的至少一个步骤。

当提供纯化步骤时，所述纯化步骤可以是例如结晶、重结晶或层析。层析优选地使用非水极性溶剂进行。在通常情况下，当在氢解步骤前提供过滤和/或纯化步骤时，可以使用与氢解步骤中使用的相同的非水极性溶剂

有利地，氢解步骤在80℃至140℃之间的温度下和/或在15至50巴之间(优选地20至40巴之间)的氢气压力下进行。

氢解步骤有利地在非质子极性溶剂(优选地非水溶剂)中进行。这是因为非质子溶剂可以提供更好的转化。非质子溶剂的实例尤其是但不限于烷烃、 1,2,3-三甲氧基丙烷(TMP)、甲基叔丁基醚(MTBE)、四氢呋喃(THF)、2- 甲基四氢呋喃(2Me-THF)、二丁醚(DBE)和环戊基甲醚(CPME)。非质子溶剂优选CPME。烷烃是有利地，因为其能够使氢在介质中更好地溶解。然而，转化低于其他非质子溶剂如CPME。在通常情况下，在烷烃中，优选十二烷和庚烷。

氢解步骤优选地在极性非质子溶剂中，在80℃至140℃之间的温度下和 /或在15至50巴之间的氢气压力下，在存在适于氢解反应的催化剂的条件下进行。

优选地，氢解步骤在非水极性溶剂中，在100℃至130℃之间的温度下和/或25至35巴之间的压力下进行。

在通常情况下，氢解在存在适宜催化剂的条件下进行，如基于贵金属或普通金属的催化剂。更具体地，普通金属可以是黑色金属或有色金属。通常地，氢解在存在基于黑色金属的催化剂的条件下进行。

作为指示，属于黑色金属族的金属催化剂可以是镍、钴或铁。

优选地，氢解使用基于贵金属(如钯、铑、钌、铂或铱)的催化剂进行。

通常，在氢解过程中使用的催化剂可以固定在支持物(如碳、氧化铝、氧化锆或二氧化硅或者其任意混合物)上。此类支持物例如是小珠。因此，有利地可以使用固定在碳珠上的钯催化剂(Pd/C)。可以通过加入贵金属或普通金属掺杂这些催化剂。将其称为掺杂剂。通常地，掺杂剂占催化剂重量的 1-10％。

本发明还涉及一种杀菌或抑菌组合物，所述组合物包含在脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的2个不同位置上具有烷基醚或烷基缩醛基的脱氧己糖烷基单缩醛或单醚的位置异构体的混合物以及还包含其药学上可接受的盐，其中所述烷基包含11至18个之间的碳原子，优选11至13个碳原子。

术语“药学上可接受的盐”表示通过向患者施用能够(直接或间接地) 提供如目前所述的化合物的任何盐。盐可以通过本领域公知的方法制备。

“异构体”旨在表示具有相同原子组成(分子式)但不同线性式或不同立体化学式的分子实体(PAC,1994,66,1077(Glossary of terms used in physical organicchemistry(IUPAC Recommendations 1994))page 1129)。

通常地，异构体是区域异构体和/或非对映异构体。

根据本发明，术语“非对映异构体”指不是对映异构体(具有形成不可重叠镜像的立体化学式的分子实体)的立体异构体(具有相同组成但是其原子的空间排布不同的异构体)。

根据本发明，术语“区域异构体”或表述“位置异构体”指其中官能团位于碳链的不同碳上的异构体。更具体地，其旨在指脱氧己糖或脱氧己糖衍生物烷基单缩醛或单醚的异构体，其中烷基单缩醛或单醚基团位于脱氧己糖或脱氧己糖衍生物骨架上存在的不同氧上。

通常地，可以提及例如甲基2,3-O-十二烷基亚基α-l-鼠李吡喃糖苷和/或甲基2-O-十二烷基α-l-鼠李吡喃糖苷和/或甲基3-O-十二烷基α-l-鼠李吡喃糖苷。

通常地，组合物对革兰氏阳性细菌具有杀菌或抑菌作用。本发明还涉及此类组合物作为革兰氏阳性细菌的杀菌剂或抑菌剂的用途。

有利地，将杀菌或抑菌组合物或者杀菌或抑菌剂掺入食品、化妆品、药物、植物检疫、兽药或表面治疗组合物中，例如用于清洁和/或护理皮肤的化妆品和/或皮肤科组合物，特别是霜、凝胶、粉末、乳液、特别是黄油、沐浴露、肥皂、洗发水、沐浴和淋浴露、除臭剂、止汗剂、湿巾、防晒配方或彩妆化妆配方。

本发明还涉及一种组合物，其特征在于所述组合物包含脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基缩醛或烷基醚，其中所述烷基包含11至18个碳原子，其药学上可接受的盐，其异构体或异构体的混合物，所述脱氧己糖衍生物是糖基化和/或脱氢和/或脱水脱氧己糖，将其作为杀菌剂或抑菌剂的用途；优选地所述烷基醚或烷基缩醛基团在2-O-、3-O-或4-O-位，所述异构体优选地选自区域异构体和/或非对映异构体。

本发明还涉及一种组合物，其特征在于所述组合物包含脱氧己糖或脱氧己糖衍生物的烷基缩醛或烷基醚，其中所述烷基包含11至18个碳原子，其药学上可接受的盐，其异构体或异构体的混合物，所述脱氧己糖衍生物是糖基化和/或脱氢和/或脱水脱氧己糖，将其作为外用的卫生或皮肤科产品的用途。

通常地，“卫生产品”指用于清洁、消毒或卫生的任何产品，包括例如乳液、摩丝、喷雾和液体，但也包括擦拭巾或能够用根据本发明的组合物浸渍的任何其他支持物。表述“皮肤科产品”指旨在应用于皮肤或粘膜的任何产品。

用于治疗或预防革兰氏阳性细菌感染

本发明还涉及一种根据本发明的组合物用于治疗或预防由革兰氏阳性细菌引起的细菌感染的用途。

“治疗”旨在指在患者中的治愈性治疗(至少旨在减少、根除或阻止感染的发展)。“预防”旨在指在患者中的预防性治疗(旨在降低感染出现的风险)。

“患者”可以是例如受或能够受细菌感染以及特别是革兰氏阳性细菌感染影响的人或非人哺乳动物(例如啮齿动物(小鼠、大鼠)、猫、犬或灵长类)。对象优选地是人。

表述“革兰氏阳性”指与不能保留紫色染色的革兰氏阴性细菌相反，通过革兰氏染色变成深蓝色或紫色染色的细菌。该染色技术是本领域技术人员熟知的并且是基于细菌的细胞膜和细胞壁特征的。

通常地，革兰氏阳性细菌是来自厚壁菌门的细菌，通常是杆菌纲，特别是选自乳杆菌目或芽孢杆菌目的细菌。

根据本发明的一个实施方式，芽孢杆菌目的细菌选自环脂酸芽孢杆菌科、芽孢杆菌科、显核菌科、李斯特氏菌科、类芽孢杆菌科、巴氏丙菌科、动球菌科、芽孢乳杆菌科、葡萄球菌科、高温放线菌科或Turicibacteraceae。

通常地，李斯特氏菌科的细菌例如是丝环菌属或李斯特菌属并且通常可以选自L.fleischmannii、L.grayi、L.innocua、L.ivanovii、L.marthii、L. monocytogenes、L.rocourtiae、L.seeligeri、L.weihenstephanensis和L. welshimeri。

当革兰氏阳性细菌是葡萄球菌科细菌，其特别地选自葡萄球菌属、孪生球菌属、Jeotgalicoccus属、巨型球菌属、盐水球菌属和Nosocomiicoccus属的细菌。

葡萄球菌属的细菌例如选自S.arlettae、S.agnetis、S.aureus、S.auricularis、S.capitis、S.caprae、S.carnosus、S.caseolyticus、S.chromogenes、S.cohnii、S.condimenti、S.delphini、S.devriesei、S.epidermidis、S.equorum、S.felis、S.fleurettii、S.gallinarum、S.haemolyticus、S.hominis、S.hyicus、S.intermedius、S.kloosii、S.leei、S.lentus、S.lugdunensis、S.lutrae、S.massiliensis、S.microti、S.muscae、S.nepalensis、S.pasteuri、S.pettenkoferi、S.piscifermentans、S.pseudintermedius、S.pseudolugdunensis、S.pulvereri、S.rostri、S.saccharolyticus、S.saprophyticus、S.schleiferi、S.sciuri、S.simiae、S.simulans、S.stepanovicii、S.succinus、S.vitulinus、S.warneri和S.xylosus。

根据本发明的另一个实施方式，乳杆菌目的细菌选自气球菌科、肉杆菌科、肠球菌科、乳杆菌科、明串珠菌科和链球菌科。

通常地，肠球菌科的细菌选自Bavariicoccus属、Catellicoccus属、肠球菌属、蜜蜂球菌属、Pilibacter属、四联球菌属或漫游球菌属的细菌。

肠球菌属的细菌例如选自E.malodoratus、E.avium、E.durans、E.faecalis、E.faecium、E.gallinarum、E.hirae、E.solitarius，优选地E.avium、E.durans、E.faecalis和E.faecium。

葡萄球菌属细菌，特别是S.aureus引起多种皮肤或粘膜(如引导或鼻粘膜)感染。例如，诸如毛囊炎、脓肿、甲沟炎、疖子、脓疱病、趾间感染、炭疽(葡萄球菌炭疽)、蜂窝织炎、继发性伤口感染、耳炎、鼻窦炎、汗腺炎、感染性乳腺炎、创伤后皮肤感染或烧伤皮肤感染的感染。

肠球菌属细菌，特别是E.faecalis，尤其导致心内膜炎以及膀胱、前列腺或附睾的感染。

本发明还涉及一种用于治疗或预防由革兰氏阳性细菌引起的细菌感染 (优选皮肤或粘膜感染)的方法，所述方法通过向需要其的个体(优选地局部)施用治疗有效量的根据本发明的组合物。

在被革兰氏阳性细菌感染的人中，“治疗有效量”旨在指足以阻止感染恶化或者甚至足以引起感染消退的量。在未感染的人中，“治疗有效量”是足以保护可能与革兰氏阳性细菌接触的人并且避免由该革兰氏阳性细菌引起的感染发作的量。

通常地，通过向皮肤或粘膜应用根据本发明的组合物进行局部施用。

用于消毒基质或用于阻止在基质上的细菌定殖的方法

本发明涉及一种用于消毒基质或用于阻止革兰氏阳性细菌在基质上细菌定殖的方法，所述方法包括将基质与根据本发明的组合物接触。

通常地，基质是能够被革兰氏阳性细菌定殖的和能够通过接触或通过摄入将感染传播给动物的任何支持物。

例如，基质可以是植物或动物来源的食物或包含此类食物的膳食组合物，或这些食物的提取物，以及特别是谷物、水果、蔬菜、肉、鱼或内脏。

基质还可以是选自金属、塑料、玻璃、混凝土或石材中的一种或多种成分。

优选地，基质是在食品工业中(炊具、容器、冷藏系统、冰箱、冷冻室等)，在医疗行业中(例如手术器械或假体)或在公共交通工具(公共交通工具的扶手、座椅等)中使用的器具、工具或装置。

本发明还涉及一种用于消毒、处理、灭菌或净化表面的组合物。

尽管其具有不同含义，但是术语“包含”、“含有”、“包括”和“由…… 组成”在本发明的说明书中可以互换使用，并且可以彼此替换。

通过阅读仅作为实例给出的以下附图和实施例，将更好地理解本发明。

实施例

根据此前在专利号13/01375“制备基于糖的长链环烷基缩醛的方法”中描述的方法，通过缩醛化或反式缩醛化制备甲基吡喃葡糖苷缩醛。然后，使用此前在专利号14/01346中描述的不使用酸催化剂的还原条件还原甲基吡喃葡糖苷烷基缩醛。作为指示，下面详细描述了甲基吡喃葡糖苷醚和缩醛的合成。

实施例1：制备甲基吡喃葡糖苷烷基缩醛(A)的一般方法

在氩气氛下，在100ml圆底烧瓶中，在硫酸钠(1.5当量)存在下，将甲基吡喃葡糖苷(2当量)溶于无水THF(10ml)中。在1分钟内逐滴加入醛(1当量)，然后加入Amberlyst 15(相对于醛为20重量％)。将反应混合物用磁力搅拌器在回流(65℃)下搅拌3小时。降至室温后，将反应混合物过滤，使用乙酸乙酯洗涤(2×25ml)并将滤液减压浓缩。通过硅胶柱层析 (AcOEt/环己烷)纯化残留物以得到甲基吡喃葡糖苷烷基缩醛。

实施例1a：

甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-吡喃葡糖苷(1a)：按照方法(A)由甲基α-d- 吡喃葡糖苷(3.22g，16.6mmol)和十二烷醛(1.52g，8.3mmol)制备化合物1a。反应后，通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷60:40)纯化残留物，以得到白色固体形式的1a(0.77g，26％)。熔点＝69℃；¹H NMR(300MHz,CDCl₃) δ_H:0.86(3H,t,J＝7,CH₃),1.17–1.32(16H,m,8CH₂),1.33–1.47(2H,m,CH₂), 1.53–1.74(2H,m,CH₂),2.64(2H,br s,OH³+OH²),3.24(1H,t,J＝9.0,CH³),3.41 (3H,s,OCH₃),3.49–3.68(3H,m,CH⁵+CH⁶+CH²),3.84(1H,t,J＝9.0,CH⁴),4.10(1H,dd,J＝10.0和5.0,CH⁶),4.52(1H,t,J＝5.0,CH⁷),4.74(1H,d,J＝4.0, CH¹)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C:14.24(CH₃),22.80(CH₂),24.20(CH₂), 29.46(CH₂),29.58(CH₂),29.62(CH₂),29.67(CH₂),29.74(CH₂),29.76(CH₂), 32.03(CH₂),34.36(CH₂),55.57(OCH₃),62.63(CH⁵),68.57(CH₂ ⁶),71.81(CH⁴), 73.02(CH²),80.46(CH³),99.85(CH¹),102.84(CH⁷)；IRν_max:3388(OH),2921, 2852,1466,1378,1089,1063,1037,991；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₆NaO₆计算值： 383.2404[M+Na]⁺；测定值：383.2398(+1.6ppm)；Rf＝0.30(EtOAc/环己烷 60:40)。

实施例1b:

甲基4,6-O-十二烷基亚基-β-d-吡喃葡糖苷(1b)：按照方法(A)由甲基β-d- 吡喃葡糖苷(5.00g，25.7mmol)和十二烷醛(2.37g，12.8mmol)制备化合物1b。反应后，通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，从30:70至50:50)纯化残留物，以得到白色固体形式的1b(1.30g，28％)。熔点＝84℃；¹H NMR(300 MHz,CDCl₃)δ_H:0.87(3H,t,J＝6.7,CH₃),1.25(16H,app brs,8CH₂), 1.34–1.45(2H,m,CH₂),1.53–1.73(2H,m,CH₂),3.25-3.34(2H,m,CH²+CH⁵), 3.44(1H,dd,J＝9.0,7.0,CH³),3.56(4H,s,CH₂ ⁶+OCH₃),3.73(1H,m,CH⁴), 4.18(1H,dd,J＝10.4,4.4,CH₂ ⁶),4.28(1H,d,J＝7.7,CH¹),4.54(1H,t,J＝5.1, CH⁷)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C:14.13(CH₃),22.70(CH₂),24.14(CH₂), 29.35(CH₂),29.45(CH₂),29.50(CH₂),29.56(CH₂),29.63(CH₂),29.65(CH₂), 31.92(CH₂),34.23(CH₂),55.51(OCH₃),66.21(CH⁵),68.21(CH₂ ⁶),73.19(CH⁴), 74.61(CH²),80.00(CH³),102.83(CH⁷),104.07(CH¹)；IRν_max:3650(OH),2950,2824,2867,2159,2028,1112；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₆NaO₆计算值：383.2404 [M+Na]⁺；测定值：383.2395(+2.3ppm)。Rf＝0.30(EtOAc/环己烷40:60)。

实施例1c:

甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-吡喃甘露糖苷(1c)：按照方法(A)由甲基 α-d-吡喃甘露糖苷(4.00g，20.5mmol)和十二烷醛(3.45g，18.7mmol)制备化合物1c。反应后，减压浓缩反应介质并溶解在CH₂Cl₂。用水(3x 100ml)，饱和的NaCl溶液(2x 100ml)洗涤有机相，干燥(Na₂SO₄)并减压浓缩。通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，从20:80至50:50)纯化残留物，以得到白色固体形式的1c(0.73g，11％)。熔点＝104℃；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H: 0.88(3H,t,J＝6.9,CH₃),1.17–1.32(16H,m,8CH₂),1.37–1.42(2H,m,CH₂), 1.58–1.68(2H,m,CH₂),3.37(3H,s,OCH₃),3.53-3.72(3H,m,CH³+CH⁵+CH⁶), 3.98(1H,dd,J＝9.0,3.7,CH²),4.13(1H,dd,J＝3.6,1.4,CH⁴),4.58(1H,dd,J＝ 8.8,2.9,CH⁶),4.10(1H,t,J＝5.1,CH⁷),4.73(1H,d,J＝1.3,CH¹)；¹³C NMR(75 MHz,CDCl₃)δ_C:14.13(CH₃),22.69(CH₂),24.10(CH₂),29.35(CH₂),29.46 (CH₂),29.51(CH₂),29.56(CH₂),29.63(CH₂),29.65(CH₂),31.92(CH₂),34.40 (CH₂),55.05(OCH₃),63.00(CH⁵),68.38(CH₂ ⁶),68.81(CH²),70.82(CH⁴),78.23(CH³),101.15(CH¹),103.06(CH⁷)；IRν_max:3380(OH),2924,2852,1466,1156, 1029,682；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₆NaO₆计算值：383.2404[M+Na]⁺；测定值： 383.2396(+2.2ppm)。Rf＝0.2(环己烷/EtOAc，70:30)。

实施例1d：

甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-半乳吡喃糖苷(1d)：按照方法(A)由甲基 α-d-半乳吡喃糖苷(5.00g，25.7mmol)和十二烷醛(2.37g，12.9mmol)制备化合物1d。反应后，将反应介质减压浓缩，以获得白色固体形式的1d(2.30 g，45％)，无需通过层析对其进行纯化。熔点＝115℃；¹H NMR(300MHz, CDCl₃)δ_H:0.89(3H,t,J＝6.7,CH₃),1.15–1.50(18H,m,9CH₂),1.61–1.71(2H, m,CH₂),3.45(3H,s,OCH₃),3.61(1H,app.s,CH⁵),3.77–3.94(3H,m,CH⁴+CH²CH⁶),4.04(1H,d,J＝2.5,H³),4.14(1H,dd,J＝12.5,1.4,CH⁶),4.59 (1H,t,J＝5.2,CH⁷),4.91(1H,d,J＝3.2,CH¹)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C: 14.06(CH₃),22.50(CH₂),23.49(CH₂),29.27(CH₂),29.34(CH₂),29.41(CH₂), 29.48(CH₂),29.55(CH₂),29.61(CH₂),31.97(CH₂),34.47(CH₂),55.66(OCH₃), 62.45(CH⁵),68.92(CH₂ ⁶),69.82(CH²),69.92(CH⁴),75.42(CH³),100.1(CH⁷), 102.1(CH¹)；IRν_max:3414,3328(OH),2916,2850,2160,1121,1032；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₆NaO₆计算值：383.2404[M+Na]⁺；测定值：383.2389(+4.0ppm)。 Rf＝0.6(EtOAc/环己烷60:40)。

实施例1e：

甲基2,3-O-十二烷基亚基-α-l-鼠李吡喃糖苷(1e)：按照方法(A)由甲基 α-l-鼠李吡喃糖苷(1.00g，5.60mmol)和十二烷醛(0.94g，5.10mmol)制备化合物1e。反应后，减压浓缩反应介质并溶解在CH₂Cl₂。用水(3x 100ml)，饱和的NaCl溶液(2x 100ml)洗涤有机相，干燥(Na₂SO₄)并减压浓缩。通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，从0:100，然后从10:90至100:0)纯化残留物。得到米色固体形式的1e的两种非对映异构体不可分离的53:47混合物(0.85g，49％)。熔点＝46℃；非对映异构体混合物的¹H NMR(300MHz, CDCl₃)δ_H：0.88(6H,t,J＝6.7,2xCH₃),1.25–1.32(42H,m,18(CH₂)+2xCH₃), 1.57–1.63(2H,m,CH₂),1.67–1.74(2H,m,CH₂),3.34–3.42(2H,m,2x CH⁴), 3.38(3H,s,OCH₃),3.39(3H,s,OCH₃),3.65–3.67(2H,m,2x CH⁵),3.93–4.00 (2H,m,CH²+CH³),4.00–4.08(1H,m,CH²),4.18(1H,dd,J＝7.4,5.4,CH³), 4.85(1H,s,CH¹),4.88(1H,s,CH¹),4.98(1H,t,J＝5.0,CH⁶),5.24(1H,t,J＝4.8, CH⁶)；非对映异构体混合物的¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C：14.13(2x CH₃), 17.41(CH₃),17.56(CH₃),22.70(2CH₂),23.77(CH₂),24.23(CH₂),29.35(2CH₂), 29.49(CH₂),29.50(CH₂),29.53(2CH₂),29.56(2CH₂),29.62(2CH₂),29.65(2 CH₂),31.92(2CH₂),34.90(CH₂),35.41(CH₂),54.96(2OCH₃),65.24(CH⁵), 65.87(CH⁵),71.57(CH⁴),74.94(CH⁴),75.17(CH³),77.37(CH²),77.40(CH²), 78.99(CH³),97.96(CH¹),98.28(CH¹),104.2(CH⁶),104.3(CH⁶)；IRν_max:3650, 3238(OH),2921,2852,2159,2029,1136,1029；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₆NaO₅计算值：367.2455[M+Na]⁺；测定值：367.2452(+0.9ppm)。Rf＝0.5(EtOAc/环己烷50:50)。

实施例2：制备甲基吡喃葡糖苷烷基醚(B)的区域异构体混合物的一般方法

将甲基吡喃葡糖苷烷基缩醛(3mmol)溶解在含环戊基甲醚(CPME， 30ml)的100ml不锈钢高压釜中，然后加入5％-Pd/C(0.45g，5mol％钯)。将反应器密闭，用氢气吹扫三次，在30巴压力下引入氢气。将反应混合物机械搅拌并在120℃下加热15小时。冷却至室温后，释放氢气压力并将反应混合物在无水乙醇(100ml)中稀释并过滤(0.01μm MilliporeDurapore filter)。减压浓缩滤液，以获得甲基吡喃葡糖苷烷基醚的区域异构体混合物。

实施例2a：

甲基6-O-十二烷基-α-d-吡喃葡糖苷(2a)和甲基4-O-十二烷基-α-d-吡喃葡糖苷(2a')：根据一般方法(B)由甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-吡喃葡糖苷1a (5.00g，14mmol)制备化合物2a和2a'。获得白色固体形式的2a和2a’ 的73:27混合物(2.52g，51％)。为了便于对化合物进行表征，可以通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，从50:50至100:0，然后EtOH/EtOAc 10:90)分离区域异构体的混合物。2a：白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H:0.87(3H,t, J＝7,CH₃alkyl),1.09–1.44(18H,m,9(CH₂)alkyl),1.47–1.70(2H,m,CH₂)alkyl,3.41(3H,s,OCH₃),3.43–3.84(7H,m),4.21(3H,br s,OH),4.74(1H,d,J＝4,异头CH)；¹³CNMR(75MHz,CDCl₃)δ_C:14.25(CH₃),22.82(CH₂),26.17(CH₂), 29.50(CH₂),29.67(CH₂),29.73(CH₂),29.77(CH₂),29.80(2CH₂),29.83(CH₂), 32.06(CH₂),55.35(OCH₃),70.33(CH),70.51(CH₂),71.23(CH),72.10(CH), 72.30(CH₂),74.49(CH),99.57(CH)；IRν_max:3402(OH),2918,2851,1467,1370, 1057,1015,902；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₈NaO₆计算值：385.2561[M+Na]⁺；测定值： 385.2558(+0.6ppm)；Rf＝0.16(EtOAc/EtOH 10:1)。2a'：白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H:0.87(3H,t,J＝7,CH₃alkyl),1.14–1.42(18H,m,9(CH₂) alkyl),1.47–1.71(2H,m,CH₂alkyl),2.16(3H,br s,OH),3.24(1H,t,J＝10)；3.41 (3H,s,OCH₃),3.49(1H,dd,J＝＝10and 4),3.54–3.66(2H,m),3.69–3.91(4H, m),4.74(1H,d,J＝4,异头CH)；¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C:14.26(CH₃), 22.83(CH₂),26.20(CH₂),29.49(CH₂),29.64(CH₂),29.74(2CH₂),29.77(CH₂), 29.80(CH₂),30.47(CH₂),32.06(CH₂),55.46(OCH₃),62.15(CH₂),70.99(CH), 72.81(CH),73.28(CH₂),75.05(CH),77.94(CH),99.20(CH)；IRν_max:3295(OH),2913,2848,1739,1469,1370,1114,1067,1042,993；HRMS(ESI⁺) C₁₉H₃₈NaO₆计算值：385.2561[M+Na]⁺；测定值：385.2574(-3.5ppm)；Rf＝0.24 (EtOAc/EtOH 10:1)。

实施例2b：

甲基6-O-十二烷基-α-d-吡喃甘露糖苷(2b)和甲基4-O-十二烷基-α-d-吡喃甘露糖苷(2b')：根据一般方法(B)由甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-甘露吡喃糖苷1c(0.70g，1.94mmol)制备化合物2b和2b'。反应后，通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，40:60)纯化残留物。获得无色油状形式的2b和2b'不可分离的75:25混合物(0.24g，34％)。主要区域异构体2b的¹H NMR(300MHz, CDCl₃)δ_H：0.88(3H,t,J＝6.7,CH₃),1.20-1.35(18H,m,9CH₂),1.55-1.61(2H,m, CH₂),3.35(3H,s,OCH₃),3.44-3.57(2H,m,OCH₂),3.60-3.98(6H,m, CH²+CH³+CH⁴+CH⁵+CH₂ ⁶),4.73(1H,d,J＝1.5,CH¹)；主要区域异构体2b的 ¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C:14.06(CH₃),22.63(CH₂),25.95(CH₂),29.30 (CH₂),29.42(CH₂),29.44(CH₂),29.54(CH₂),29.57(CH₂),29.58(CH₂),29.61 (CH₂),31.86(CH₂),54.96(OCH₃),69.50(CH⁵),69.65(CH⁴),70.37(CH²),71.12 (CH₂ ⁶),71.67(CH₃),72.14(OCH₂),100.7(CH¹)；IRν_max:3650,3238(OH),2921, 2852,2159,2029,1976,1156；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₈NaO₆计算值：385.2561 [M+Na]⁺；测定值：385.2555(+1.5ppm)；Rf＝0.22(环己烷/EtOAc 60:40)。

实施例2c：

甲基6-O-十二烷基-α-d-半乳吡喃糖苷(2c)和甲基4-O-十二烷基-α-d-半乳吡喃糖苷(2c')：根据一般方法(B)由甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-半乳吡喃糖苷1d(0.69g,1.90mmol)制备化合物2c和2c'。反应后，通过硅胶柱层析 (EtOAc/环己烷，50:50)纯化残留物。获得白色固体形式的2c和2c'不可分离的90:10混合物(0.19g，27％)。熔点＝110℃；主要区域异构体2c的¹H NMR (300MHz,CDCl₃)δ_H：0.87(3H,t,J＝6.6,CH₃),1.24(18H,br s,9CH₂), 1.55-1.60(2H,m,CH₂),3.41(3H,s,OCH₃),3.48(2H,t,J＝6.7,OCH₂), 3.67-3.90(5H,m,3CH+CH₂),4.04-4.05(1H,m,CH),4.83(1H,d,J＝3.5,CH¹)；主要区域异构体2c’的¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)δ_C：14.24(CH₃),22.81(CH₂), 26.17(CH₂),29.47(CH₂),29.59(CH₂),29.61(CH₂),29.70(CH₂),29.74(CH₂), 29.76(2CH₂),29.78(CH₂),32.44(CH₂),55.59(OCH₃),69.68(CH),70.47(CH), 71.11(CH),71.34(CH),72.30(CH₂),99.84(CH¹)；IRν_max:3651,3250(OH), 2917,2849,2493,2430,2159,2029,1976,1042；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₈NaO₆计算值：385.2561[M+Na]⁺；测定值：385.2548(+3.2ppm)；Rf＝0.30(环己烷/EtOAc 40:60)。

实施例2d：

甲基2-O-十二烷基-α-l-鼠李吡喃糖苷(2d)和甲基3-O-十二烷基-α-l-鼠李吡喃糖苷(2d')：根据一般方法(B)由甲基2,3-O-十二烷基亚基-α-l-鼠李吡喃糖苷1e(0.70g，2.03mmol)制备化合物2d和2d'。反应后，通过硅胶柱层析(EtOAc/环己烷，40:60)纯化残留物。获得无色油状形式的2d和2d'不可分离的93:7混合物(0.19g，27％)。主要区域异构体2d的¹H NMR(300MHz, CDCl₃)δ_H：0.87(3H,t,J＝6.7,CH₃),1.18-1.35(21H,m,9(CH₂)+CH₃),1.53-1.59(2H,m,CH₂),2.35(2H,br s,OH),3.31-3.47(5H,m,CH³+CH⁶+OCH₃), 3.52(1H,dd,J＝3.9,1.3,CH²),3.54-3.62(1H,m,CH⁵),3.62-3.71(2H,m, CH⁶+CH⁴),4.71(1H,app.s,CH¹)；主要区域异构体2d'的¹³C NMR(75MHz, CDCl₃)δ_C：14.11(CH₃),17.54(CH₃),22.68(CH₂),25.99(CH₂),29.34(CH₂), 29.41(CH₂),29.56(CH₂),29.59(CH₂),29.62(CH₂),29.65(CH₂),29.80(CH₂), 31.91(CH₂),54.75(OCH₃),67.38(CH⁵),71.24(CH₂),71.51(CH⁴),74.07(CH³), 78.53(CH²),97.83(CH¹)；IRν_max:3650,3238(OH),2921,2852,2519,2029, 2029,1976,1070；HRMS(ESI⁺)C₁₉H₃₈NaO₅计算值：369.2611[M+Na]⁺；测定值：369.2605(+1.8ppm)；Rf＝0.51(环己烷/EtOAc 60:40)。

实施例3：C12单糖的缩醛和醚衍生物对革兰氏阳性细菌的抑菌性质测定

由于使用具有C12烷基的化合物观察到了最佳结果，因此使用根据实施例1和2获得的化合物在更广泛的革兰氏阳性菌株嵌板上进行测定。

3.1材料和方法

3.1.1检测的目标化合物：

甲基吡喃葡糖苷缩醛

·甲基4,6-O-十二烷基亚基-α-d-吡喃葡糖苷(1a)

·甲基4,6-O-十二烷基亚基-β-d-吡喃葡糖苷(1b)

甲基吡喃葡糖苷醚的混合物

·甲基6-O-十二烷基-α-d-吡喃葡糖苷(2a)和甲基4-O-十二烷基-α-d- 吡喃葡糖苷(2a')

·甲基6-O-十二烷基-α-d-吡喃甘露糖苷(2b)和甲基4-O-十二烷基 -α-d-吡喃甘露糖苷(2b')

·甲基6-O-十二烷基-α-d-半乳吡喃糖苷(2c)和甲基4-O-十二烷基 -α-d-半乳吡喃糖苷(2c')

·甲基2-O-十二烷基-α-l-鼠李吡喃糖苷(2d)和甲基3-O-十二烷基-α-l- 鼠李吡喃糖苷(2d')

脱水山梨糖醇醚的混合物

·3-O-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇，5-O-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇和6-O-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇

3.1.2研究的革兰氏阳性细菌

检测的菌株是参比菌株和具有多重抗生素耐药性的培养物；这些是在 “Hospicede Lyon”分离的临床菌株并且如下所示：

·-金黄色葡萄球菌：

29213^TM，ATCC 25923，

·耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株(Lac-Deleo USA 300)，(MU 3)， (HT 2004-0012)，LY 199-0053，(HT 2002-0417)，(HT 2006-1004)，

·耐达托霉素的金黄色葡萄球菌菌株(ST 2015-0188)(ST 2014 1288)， (ST2015-0989)。

·-肠球菌：E.faecalis(

29212^TM)，从尿中分离的粪肠球菌的临床菌株：菌株015206179901(下文称9901)，菌株015205261801(下文称1801)

·-肠球菌：E.faecium(CIP 103510)，屎肠球菌的临床菌株：Van A 0151850763(下文称Van A)；菌株015 205731401(下文称1401)，

·-李斯特氏菌：L.monocytogenes(CIP 103575)，从血液培养物中分离的临床菌株(015189074801，LM1)，从脑脊液中分离的菌株(015170199001， LM2)，从血液培养物中分离的临床菌株(015181840701，LM3)。

3.1.3接种物的制备：

将所研究的新分离的培养物(在血琼脂上于37℃孵育18小时后)加入无菌水(10ml)中直至获得0.5McFarland(Mc)(即，1至2×10⁸CFU(细菌) /cm³)的混悬液。然后对细菌悬液进行稀释以获得1×10⁶CFU/cm³的终浓度。

3.1.4用于观察MIC的多孔板的制备：

每孔含有最终相同量的Mueller-Hinton培养基(能够进行细菌培养的加富培养基)和0.5×10⁶CFU/cm³细菌。

以25mg/ml将待测目标化合物溶解在乙醇或DMSO中，随后采用倍比稀释法稀释成不同浓度。在多孔板上，提供包含培养基但不含待测目标化合物的第一组孔。其对应于生长对照(对照孔)。将这些对照作为用于与下述含有不同浓度待测目标化合物的孔中细菌生长情况进行比较的参比。第二组孔含有在孔中的浓度为256mg/l(7mM)的待测目标化合物的母体溶液。采用倍比稀释法对每组孔进行稀释直至最后一组孔的终浓度为0.25mg/l(0.0007 mM)。每个浓度在同一块板中设置双复孔。将板在37℃下孵育18h。孵育后观察显示对照孔中的浊度(细菌生长的标志)。在具有抗菌活性的情况下，细菌生长被抑制，其反映在没有出现混浊或细菌颗粒。

根据“临床实验室标准研究所”的建议 (Clinical-Laboratory-Standards-Institute,6th ed.Approved standard M100-S17. CLSI,Wayne,PA,2007)，在革兰氏阳性细菌上确定最小抑制性生长(MIC)。

3.1.5接种物的制备：

将所研究的新分离的培养物(在血琼脂上于37℃孵育18h后)加入无菌水(10ml)中直至获得0.5McFarland(Mc)(即，至10⁸CFU(细菌)/cm³) 的混悬液。然后对细菌悬液进行稀释以获得10⁶CFU/cm³的终浓度。

3.2结果

3.2.1葡萄球菌属菌株的结果

根据96孔微孔板的观察结果，除了半乳糖醚(C12-Eth-α-MeGalac)和葡萄糖α-缩醛(C12-Ac-α-MeGlu)(MIC>256mg/l)以外，所有单糖的缩醛或醚衍生物均对所检测的葡萄球菌菌株具有活性(8<MIC<64mg/l)。

在对结果分析过程中(表6)，应注意到的是所有这些衍生物确实包含C12 碳链。然而，其中仅有一些对所检测的葡萄球菌菌株具有活性(8<MIC<64 mg/l)。此外，当对分子1a和1b进行比较时，观察到这些分子仅在其异头状态彼此之间存在差异；并且仅其中的一个具有有效的抗菌活性。

表6.甲基和脱水山梨糖醇吡喃葡糖苷缩醛和醚衍生物对不同金黄色葡萄球菌菌株的抗微生物结果：以mg/l计的最小抑制性浓度(MIC)。

类似地，如果对分子1a和2a+2a’进行比较，其仅在醚或缩醛键上存在差异，这些分子中仅有一个具有有效的抗菌活性。最后，糖的性质也能够改变分子的抗菌活性。因此，值得注意的是与C12-Eth-α-MeGalac相比 C12-Eth-α-MeGlu、C12-Eth-α-MeRham和C12-Eth-α-MeMan具有抗菌活性。这些信息清楚地表明分子的抗菌活性取决于糖的性质的组合方式、异头碳的构型以及与烷基链键合的性质。

肠球菌属菌株的结果

表7.糖醚和糖缩醛以及脱水山梨糖醇缩醛的衍生物对不同肠球菌菌株的抗菌结果。以mg/l计的最小抑制性浓度(MIC)。

对所有肠球菌菌株均观察到了良好的抗菌活性；除了C12-Ac-α-MeGlu 和C12-Eth-α-MeGalac以外，所检测的所有分子为32<MIC<8mg/l。

李斯特氏菌属菌株的结果

表8.糖醚和糖缩醛以及脱水山梨糖醇缩醛的衍生物对不同李斯特氏菌菌株的抗菌结果，以mg/l计的最小抑制性浓度(MIC)。

除了化合物C12-Ac-α-MeGlu和C12-Eth-α-MeGalac以外，值得注意的是在所有李斯特氏菌菌株上均观察的了良好的抗菌活性；对所检测的所有分子为64<MIC<8mg/l。

Claims

1.组合物在制备用于预防和/或治疗革兰氏阳性细菌感染的药物中的用途，所述组合物包含脱氧己糖烷基醚或烷基缩醛的区域异构体的混合物，或其药学上可接受的盐，其中所述烷基包含11至18个碳原子。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述烷基醚或烷基缩醛基团在2-O-、3-O-和/或4-O-位。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述脱氧己糖是烷基化的。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述烷基包含11至13个碳原子。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述脱氧己糖是鼠李糖或岩藻糖。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述脱氧己糖是鼠李吡喃糖苷。

7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述脱氧己糖是甲基鼠李吡喃糖苷。

8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述脱氧己糖烷基醚或烷基缩醛是脱氧己糖烷基单缩醛或单醚。

9.根据权利要求8所述的用途，其中所述烷基单缩醛基团在2,3-O-或3,4-O-位，或所述烷基单醚基团在2-O-、3-O-或4-O-位。

10.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性菌是来自厚壁菌门的细菌。

11.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性细菌是选自下述科的芽孢杆菌目的细菌：环脂酸芽孢杆菌科、芽孢杆菌科、显核菌科、李斯特氏菌科、类芽孢杆菌科、巴氏丙菌科、动球菌科、芽孢乳杆菌科、葡萄球菌科、高温放线菌科和Turicibacteraceae，和/或所述革兰氏阳性细菌是选自下述科的乳杆菌目的细菌：气球菌科、肉杆菌科、肠球菌科、乳杆菌科、明串珠菌科和链球菌科。

12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性细菌是选自丝环菌属或李斯特菌属的李斯特氏菌科的细菌，其中所述李斯特菌属选自：L.fleischmannii、L.grayi、L.innocua、L.ivanovii、L.marthii、L.monocytogenes、L.rocourtiae、L.seeligeri、L.weihenstephanensis和L. welshimeri，和/或所述革兰氏阳性细菌是选自下述菌属的葡萄球菌科细菌：葡萄球菌属、孪生球菌属、Jeotgalicoccus属、巨型球菌属、盐水球菌属和Nosocomiicoccus属。

13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性细菌是选自下述的葡萄球菌属细菌：S.arlettae、S.agnetis、S.aureus、S.auricularis、S.capitis、S.caprae、S.carnosus、S.caseolyticus、S.chromogenes、S.cohnii、S.condimenti、S.delphini、S.devriesei、S.epidermidis、S.equorum、S.felis、S.fleurettii、S.gallinarum、S.haemolyticus、S.hominis、S.hyicus、S.intermedius、S.kloosii、S.leei、S.lentus、S.lugdunensis、S.lutrae、S.massiliensis、S.microti、S.muscae、S.nepalensis、S.pasteuri、S.pettenkoferi、S.piscifermentans、S.pseudintermedius、S.pseudolugdunensis、S.pulvereri、S.rostri、S.saccharolyticus、S.saprophyticus、S.schleiferi、S.sciuri、S.simiae、S.simulans、S.stepanovicii、S.succinus、S.vitulinus、S.warneri和S.xylosus。

14.根据权利要求11所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性细菌是选自下述菌属的肠球菌科细菌：Bavariicoccus属、Catellicoccus属、肠球菌属、蜜蜂球菌属、Pilibacter属、四联球菌属或漫游球菌属。

15.根据权利要求14所述的用途，其特征在于所述革兰氏阳性细菌是选自下述的肠球菌属细菌：E.malodoratus、E.avium、E.durans、E.faecalis、E.faecium、E.gallinarum、E.hirae、E.solitarius。

16.根据权利要求1至9中任意一项所述的用途，其特征在于所述组合物是掺入食品、化妆品、表面治疗组合物中的。

17.根据权利要求1所述的用途，其中所述革兰氏阳性细菌感染是选自如下的皮肤或粘膜感染：毛囊炎、脓肿、甲沟炎、疖子、脓疱病、趾间感染、炭疽、蜂窝织炎、继发性伤口感染、耳炎、鼻窦炎、汗腺炎、感染性乳腺炎、创伤后皮肤感染或烧伤皮肤感染。

18.一种用于消毒基质或用于阻止革兰氏阳性细菌在基质上细菌定殖的方法，所述方法包括将所述基质与根据权利要求1至9中任意一项所述的组合物接触，其中所述基质选自食品，食品提取物，金属，塑料，玻璃，混凝土，石头，餐具，工具，外科器械，外科假体或公共运输扶手或座位。