CN108472329B - 多肽刺激免疫系统的用途 - Google Patents

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Abstract

提供使用基于肽的化合物来治疗免疫缺陷的方法。

Description

多肽刺激免疫系统的用途
发明领域
本发明涉及使用特定的基于肽的化合物在受试者中诱导或刺激免疫应答的组合物和方法。本发明对于刺激CD4 T细胞特别有效并且可以用于治疗HIV感染的患者。
发明背景
CD4 T淋巴细胞在控制免疫系统(细胞和体液应答两者)方面发挥着重要作用，并且在各种疾病状况如癌症或传染性疾病中至关重要。
在与HIV发病机制相关的免疫疾病期间，实际感染所有CD4 T细胞的少于0.5％(如外周血中测量)，但绝大多数CD4 T细胞显示出主要的调节功能失调。未感染的CD4 T淋巴细胞逐渐失去其功能，成为无反应性的(anergic)，并且它们的数量减少，从而导致CD4淋巴细胞减少。无反应性和淋巴细胞减少是表征HIV感染患者的免疫缺陷的标志。这些现象背后的机制从未被充分地阐明(1)。免疫激活和炎症也在HIV发病机制中起到关键作用(2,3)。
本发明人先前报道了自人血浆鉴定、分离和表征负责CD4 T细胞活化的这种异常状态的蛋白质，其命名为sPLA2G1B(WO2015/097140)。
本发明涉及能够抑制sPLA2G1B并刺激有此需要的受试者中的免疫系统的特定肽的用途。更具体地，本发明人选择了表现出有力的sPLA2G1B抑制效果的一组特定的基于肽的化合物。本发明人已经证明，这些化合物能够完全中和来自病毒血性HIV感染患者的血清诱导从健康供体纯化的CD4淋巴细胞中的异常和致病性应答的能力，并且从而能够恢复HIV感染受试者中的CD4 T细胞功能。
发明概述
本发明的一个目的涉及用于刺激或诱导受试者中免疫应答的方法，其包括将受试者暴露于通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
本发明的另一目的涉及治疗受试者的免疫缺陷病症的方法，其包括将受试者暴露于通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
本发明的另一个目的涉及通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物在制备用于诱导或刺激免疫应答或用于治疗受试者中的免疫缺陷病症的药物中的用途。
本发明的另一个目的涉及通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物，用于诱导或刺激免疫应答或治疗受试者中的免疫缺陷病症的方法。
本发明特别适用于治疗免疫缺陷受试者或需要刺激免疫的受试者(例如，患有传染病或癌症的受试者)。在这方面，本发明的具体目的在于治疗受试者的传染性疾病的方法，其包括向受试者施用通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
本发明的一个更具体的实施方案涉及治疗感染HIV的受试者中的AIDS的方法，该方法包括对所述受试者施用通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含(i)通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物和(ii)其他抗病毒剂或抗癌剂。
本发明可以用于任何哺乳动物，包括人和非人动物，例如但不限于驯养动物(例如牛，棉羊，猫，狗和马)，非人灵长类(例如猴)，兔和啮齿类(例如小鼠和大鼠)。它特别适用于人受试者。它可以用于增加任何哺乳动物的免疫应答，并且它特别适用于在免疫抑制型(immuno-depressed)受试者中诱导有力的CD4-T细胞活性。
附图简述
图1A：肽I抑制sPLA2G1B：首先将重组PLA2G1B(75nanoM)暴露至指定浓度的肽I 30分钟(mn)。然后将混合物应用于材料和方法中所述的生物测定(biossay)中。通过STED显微镜检查测量对IL-7诱导的磷酸STAT5核转位的％抑制。
图1B：肽I的IC50的计算：通过Prism软件分析实验数据以精确计算IC 50。
图1C：肽I恢复CD4淋巴细胞的活性：将从健康供体纯化的CD4淋巴细胞暴露于来自病毒血性HIV病毒感染患者的以1％或3％稀释的血清。这种暴露导致对IL-7诱导的pSTAT5的核移位的完全抑制。在15μM时，肽I完全逆转这种抑制，从而恢复CD4功能。测试五份血清，并且以中值+/-SD给出结果。
发明详述
本发明涉及用于调节有此需要的受试者中的免疫系统的组合物和方法。本发明更具体地提供了用于刺激免疫应答或系统的组合物和方法，特别是在免疫抑制或免疫缺陷的受试者中。
本发明公开了特定肽完全中和PLA2G1B介导的异常和致病性CD4T淋巴细胞的显著能力。值得注意的是，发现这些化合物的效果对存在于患者血浆中的PLA2GIB比对包含在无血清缓冲液中的重组酶甚至更有力。因此，此类化合物代表了用于刺激人受试者中的免疫系统，并且更具体地，用于治疗HIV感染患者的新的且有力的试剂。在感染过程期间早期施用，它们可以防止进化为免疫疾病并防止免疫缺陷的出现。后期给予，例如与高活性抗逆转录病毒疗法(Highly Active Anti-Retroviral Therapy)(HAART)一起给予，它们促进功能性免疫系统的恢复，从而导致通过免疫系统控制HIV的感染。
因此，本发明的一个目的涉及用于刺激或诱导受试者中免疫应答的方法，其包括将受试者暴露于通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
本发明的另一目的涉及治疗受试者中的免疫缺陷病症的方法，其包括将受试者暴露于通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物。
本发明的另一个目的涉及通式A的化合物或其盐，酯，水化物，外消旋体，对映体，前药或代谢物在制备用于诱导或刺激免疫应答或用于治疗受试者中的免疫缺陷病症的药物中的用途。
本发明还涉及通式A的肽在受试者中刺激或恢复CD4 T细胞中的用途。
通式A的肽
通式A的肽表示包含序列AA1-Leu-AA3-AA4-AA5或由序列AA1-Leu-AA3-AA4-AA5组成的肽，其中：
AA1表示Phe，Leu，正亮氨酸，色氨酸，2-萘基丙氨酸(2NapA)或1-萘基丙氨酸(1NapA)；
AA3表示Ser，Thr或Cys，
AA4表示Tyr，2-萘基丙氨酸(2NapA)，1-萘基丙氨酸(1NapA)，二苯基丙氨酸，7-羟基四氢异喹啉(7HTiq)或四氢异喹啉(Tiq)，和
AA5表示Lys，Arg或瓜氨酸，
通式A的肽已由Church et al.,JBC 276(35)(2001)33156描述为人IIA型分泌型磷脂酶A2(sPLA2-GIIA)的抑制剂。然而，据报道这些肽对GIIA是相当选择性的，而对例如猪sPLA2-GIB没有影响。令人惊讶的是，本发明人发现通式A的肽是sPLA2-GIB的有力抑制剂并对免疫系统，特别是CD4 T淋巴细胞显示刺激效应。更具体地，发明人已经发现这些肽能够完全中和HIV感染受试者中sPLA2GIB介导的CD4的无反应性，这完全是未知的。
用于本发明的优选肽是包含序列AA1-Leu-Ser-AA4-AA5的肽，或其药学上可接受的盐，水化物或前药，其中：
AA1表示Phe，Leu，正亮氨酸，色氨酸，2-萘基丙氨酸(2NapA)或1-萘基丙氨酸(1NapA)，更优选Phe或2-萘基丙氨酸(2NapA)。
AA4表示Tyr，2-萘基丙氨酸(2NapA)，1-萘基丙氨酸(1NapA)，二苯基丙氨酸，7-羟基四氢异喹啉(7HTiq)或Tiq，更优选Tyr或2NapA；和
AA5表示Lys，Arg或瓜氨酸，优选Lys或Arg。
在本发明的肽中，氨基酸可以是D或L构象。而且，本发明的肽含有上述一级氨基酸序列并且可以含有一个或多个另外的化学基团或取代基以进一步改善它们的活性或性质。在一个优选的实施方案中，它们的一级氨基酸主链不含超过5个残基，尽管侧链可以用化学基团或其他氨基酸衍生化。本发明的优选肽是五肽。
用于本发明的最优选的肽具有选自以下的序列：FLSYK(SEQ ID NO:1)、FLSYR(SEQID NO:2)、(2NapA)LS(2NapA)R(SEQ ID NO:3，肽I)、(2NapA)LSYR(SEQ ID NO:4)和FLS(2NapA)R(SEQ ID NO:5)。
此外，在一个优选的实施方案中，用于本发明的肽是环状的。可以使用常规技术或通过离子键合和/或氢键键合在肽合成期间获得环化。
在这方面，用于本发明的肽的具体和优选的例子是环状肽FLSYK，FLSYR和(2NapA)LS(2NapA)R(肽I)。
通式A的备选肽是长度小于10个氨基酸，优选长度小于9个氨基酸，更优选长度为7、6或5个氨基酸的肽或其药学上可接受的盐其可接受的盐，其水化物，变体或前药，所述肽包含任何以下的氨基酸序列：
GCGSY(SEQ ID NO:6)
GCGSP(SEQ ID NO:7)
THTYS(SEQ ID NO:8)
KDYYR(SEQ ID NO:9)
LEKYL(SEQ ID NO:10)
VDHYD(SEQ ID NO:11)
TQSYK(SEQ ID NO:12)
TERYS(SEQ ID NO:13)
HETAW(SEQ ID NO:14)。
此类肽的变体是指包含上述一级氨基酸序列并含有一个或多个另外的化学基团或取代基，以进一步改善它们的活性或性质的肽。在一个优选的实施方案中，它们的一级氨基酸主链不含超过5个残基，尽管侧链可以用化学基团或其他氨基酸衍生化。在本发明的肽中，氨基酸可以是D或L构象。在另一个具体的实施方案中，肽是环状的。
用于本发明的肽可以根据本领域本身已知的方法，例如通过化学肽合成来生产。例如，肽可以通过在固相合成仪上通过叔丁氧羰基(t-butyloxy carbonyl)化学法和/或使用Fmoc(N-(9-芴基)甲氧基羰基)固相化学法来制备。肽可以通过使用标准肽合成的酰胺键形成来环化。另外，所述肽可以包含一个或多个拟肽键(peptidomimetic bond)，以便例如提高它们的稳定性。此类拟肽键的实例包括例如亚甲基(-CH2-)或磷酸(-PO2-)基，仲胺(-NH-)或氧(-O-)，α-氮杂肽，α-烷基肽，N-烷基肽，膦酰胺化物(phosphonamidate)，酯肽(depsipeptide)，羟基亚甲基，羟基乙烯，二羟基乙烯，羟乙胺，逆反肽(retro-inversopeptide)，酯，次膦酸酯(phosphinates)，次膦酸类物质(phosphinics)，膦酰胺(phosphonamide)等。另外，肽可以通过添加或取代侧链残基来进一步修饰。
术语“盐”是指本发明化合物的任何药学上可接受的无机或有机酸/碱加成盐。根据本发明的药学上可接受的酸盐包括但不限于以下酸的盐：三氟乙酸，乙酸，硝酸，酒石酸，盐酸，硫酸，磷酸，甲磺酸，草酸，马来酸，琥珀酸或柠檬酸。本发明的药学上可接受的碱性盐包括但不限于钠盐，钾盐，钙盐，镁盐，铵盐或胆碱盐。
如本文所用的，术语“前药”是指结构A的化合物的任何功能性前体，其当施用于生物系统时，由于例如自发的化学，酶促，生物学和/或代谢反应而产生所述化合物。典型的前药具有结构Y-A，其中Y是保护性基团并且在体内从前物切割以释放化合物A。前药通常是无活性的或活性低于所得到的药物，并且可用于例如改善化合物的物理化学或药代动力学性质。
术语“代谢物”是指在施用给生物体后由化合物A的体内修饰或加工产生的分子。此类修饰可以通过特化酶体系来进行，导致保留化合物的生物学活性的分子。
术语“对映异构体”是指分离的光学纯对映异构体，与异构体的混合物(任何相对比例)相反。因此，用于本发明的化合物可以是光学纯的对映异构体或其任何混合物(例如外消旋体)。
根据常规技术，肽可以保存在溶液中或是冷冻或冻干的。
组合物
根据本发明使用的化合物可以与任何药学上可接受的赋形剂，媒介物或载体一起配制。它们可以是以下形式：软膏剂，凝胶，糊剂，液体溶液，混悬剂，片剂，明胶胶囊，胶囊，栓剂，粉剂，滴鼻剂或气雾剂，优选的是可注射溶液或悬浮液的形式。对于注射剂，通常以液体悬浮液的形式包装化合物，其例如可以通过注射器或灌注来注射。在这方面，通常将化合物溶于生理盐水，与药物用途相容并且对于本领域技术人员已知的生理溶液，等张溶液或缓冲溶液中。因此，组合物可含有一种或多种选自以下的试剂或赋形剂：分散剂，增溶剂，稳定剂，防腐剂等。可用于液体和/或可注射制剂中的试剂或赋形剂特别的是甲基纤维素，羟甲基纤维素，羧甲基纤维素，聚山梨酯80，甘露醇，明胶，乳糖，植物油，阿拉伯胶等。载体也可以选自例如甲基-β-环糊精，丙烯酸的聚合物(例如卡波姆)，聚乙二醇和聚丙二醇的混合物，单乙醇胺和羟甲基纤维素。
组合物通常包含有效量的通式A化合物，例如有效抑制GIBsPLA2的量。通常，根据本发明的组合物包含约0.01μg至100mg的通式A的化合物，例如0.05μg至50mg，优选0.05μg至5mg，例如1μg至1mg的通式A化合物。本领域技术人员可根据疾病和受试者调整剂量。
本发明的组合物可以进一步包含用于同时或顺序使用的一种或多种另外的活性化合物。特别地，化合物A可以与其他抗病毒剂例如抗逆转录病毒剂组合使用。
本发明还涉及药物组合物，其包含如上定义的通式A的化合物，另外的抗病毒剂和任选地药学上可接受的赋形剂。本发明的组合物可以配制到任何合适的装置或容器中，例如注射器，安瓿，烧瓶，瓶，小袋等。
本发明还涉及一种试剂盒，其包含(i)包含如前所述的通式A的化合物的容器，(ii)包含另外的抗病毒剂的容器，以及任选地(iii)使用该试剂盒的书面说明书。
疾病
本发明的化合物和组合物可用于治疗与不适当(例如，缺陷或不适当)免疫应答相关的任何疾病，特别是不适当的CD4 T细胞活性相关的任何疾病，以及其中免疫力增加可改善受试者状况的任何疾病。这些疾病有时在本申请中被称为“免疫病症(immunedisorder)”或“免疫缺陷”。这包括特别是由病毒感染或致病性感染引起的免疫缺陷的情形，或癌症。
如本文所用，术语“治疗/处理”是指例如试图改变治疗的个体的自然病程的任何临床干预，并且可以为了预防或治愈目的而进行。治疗的期望效果包括但不限于防止疾病的发生或复发，缓解症状，减少疾病的任何直接或间接病理学后果，预防转移，降低疾病进展速率，改善或缓解疾病状态，以及缓解或改善的预后。在一些实施方案中，本发明的组合物和方法用于延缓疾病或病症的发展或减缓疾病或病症的进展。
可以从此类治疗获益的疾病的实例是所有具有免疫缺陷的疾病，例如HIV介导的免疫缺陷。在这方面，在一个具体的实施方案中，本发明涉及治疗有此需要的受试者中的免疫缺陷或相关病症的方法，其包括给所述受试者施用通式A的化合物。
在另一个具体实施方案中，本发明涉及通式A化合物，其用于治疗有此需要的受试者中的免疫缺陷或相关病症。
免疫缺陷和相关病症指以受试者中免疫功能或应答降低为特征和/或由受试者中免疫功能或应答降低引起的任何病症。免疫缺陷可能由例如病毒感染(例如HIV，乙型肝炎等)，细菌感染，癌症或其他病理状况引起。因此，术语“免疫缺陷相关病症”是指由免疫缺陷引起或与免疫缺陷相关的任何疾病。本发明特别适用于治疗与CD4-T细胞有关的免疫缺陷和相关疾病。
在一个具体的实施方案中，本发明涉及通过给所述受试者施用通式A的化合物来治疗受试者中的HIV感染的方法。在一些实施方案中，所述受试者是早期HIV患者，并且所述方法导致患者是HIV控制者(controller)，即，不会发展成免疫缺陷或将具有中度或延迟的免疫缺陷的可能性增加。在一些实施方案中，受试者是在抗逆转录病毒治疗后具有低免疫重建(immune reconstitution)的患者和/或具有严重特发性CD4 T淋巴细胞减少症(ICL)的患者。本发明还涉及通过给所述受试者施用通式A的化合物来增加HIV感染受试者中CD4-T细胞活性的方法。
本发明可用于治疗感染早期阶段的受试者，以预防或减少免疫缺陷的发生，程度或持续时间。典型地，它们可以在检测到传染病后，并且在出现临床体征之前立即施用。在HIV感染很早期间施用，通式A的化合物可以将患者引向HIV控制者状态。本发明的化合物也可以在感染的受试者中在后期单独施用或与抗病毒剂组合施用。在此类方案中，它们加速CD4 T淋巴细胞的恢复和其功能的恢复。因此，在一个具体的实施方案中，本发明包括对患有病毒感染的受试者同时，分别或顺序施用(i)抗病毒剂和(ii)通式A的化合物。该方案特别适用于治疗感染HIV的受试者，其中化合物A与抗逆转录病毒疗法(例如HAART)组合使用，允许减少HAART或甚至至少暂时中断HAART治疗，所述HAART治疗在其严重有害效应方面是已知的。
本发明还提供了通过增加受试者中的免疫应答来治疗癌症的方法，其包括向所述受试者施用通式A的化合物。本发明还提供了通过给所述受试者施用通式A的化合物来治疗受试者中与癌症相关的CD4 T细胞有关的免疫缺陷的方法。
可以根据受试者和疾病调整施用本发明化合物或组合物的持续时间，剂量和频率。该治疗可以单独使用或与其他活性成分组合使用，同时或分开或顺序使用。
根据本发明的化合物或组合物可以以各种方式或途径施用，例如但不限于全身注射，肌内，静脉内，腹膜内，皮肤，皮下，真皮，透皮，鞘内，眼部(例如角膜)或直肠方式，或通过在炎症部位处表面施用，并且优选通过肌内或静脉内注射。
典型的方案包括在一天或几天，多至一年，并且包括一周至约六个月的时期内单次或重复施用有效量的通式A的化合物。应当理解的是，体内施用的本发明的药物化合物或组合物的剂量将取决于接受者(受试者)的年龄，健康，性别和体重，同时治疗的类型(如果有的话)，治疗频率，和期望的药物作用的性质。本文提供的有效剂量范围并非旨在限制并且代表优选的剂量范围。然而，如相关领域的技术人员所理解和确定的，最优选的剂量将针对个体受试者定制(参见例如Berkowet et al.编,The Merck Manual,第16版,Merck andCo.,Rahway,N.J.,1992；Goodmanetna.编,Goodman and Cilman’s The pharmacologicalBasis of Therapeutics,第10版,Pergamon Press,Inc.,Elmsford,N.Y.,(2001))。
本发明的其他方面和优点在以下实验部分中公开，其应当认为是示例性的。
实施例
患者和方法
血浆的来源
该研究中包括的病毒血性患者(VP)已经呈HIV阳性超过一年。他们没有接受任何抗逆转录病毒药物，并且血液采集时病毒载量>10,000个RNA拷贝/ml，其中CD4细胞计数大于200/ml(ANRS EP 33和EP20研究)。来自VP的所有血液样本均在
Figure GDA0003114657650000091
或CentreHospitalier de Gonesse中心抽取。
生产重组PLA2GIB酶
在大肠杆菌中产生sPLA2GIB。在尿素中溶解包涵体并随后复性。通过HPLC进一步纯化sPLA2GIB。通过质谱法(Malditoff)验证制剂的同质性。一直测量酶的比活性并与标准制剂进行比较。
生物测定
如下测量对IL-7诱导的磷酸化STAT5核移位(NTpSTAT)的抑制：在用IL-7(2nM，15分钟)刺激前，首先将VP血清(5或10％)与纯化的HD CD4 T细胞温育(20分钟)。然后将细胞涂布在聚赖氨酸包被的玻璃载玻片上，然后用PFA(1.5％)固定并用甲醇(在-20℃以90％)透化。然后将pSTAT5用兔抗STAT5染色并用山羊抗兔-Ato642标记。通过脉冲STED显微镜检查分析细胞并计数表达pSTAT5的细胞核的数量。
化合物
肽I(环状(2-萘基Ala-Leu-Ser-2-萘基Ala-Arg))是从Calbiochem获得的。使用前将化合物溶于DMSO中。
结果
如材料和方法中所述的生物测定中所测试的，我们首先研究了不同剂量的肽I对重组PLA2GIB生物活性的影响。图1(A部分)显示肽I的抑制作用在5μM时是有效的，并且在10μM时抑制作用非常强。实验重复两次。从实验数据中我们推导出了给出IC50的相应理论曲线。对于肽I，IC50为约4.9μM(图1，B部分)。
我们已经显示了病毒血性患者的血浆中所含有的PLA2 GIB诱导IL-7诱导的磷酸STAT5核移位(NT pSTAT5)的阻断。因此，从健康供体纯化并暴露于病毒血性血浆的CD4 T淋巴细胞对IL-7不响应。在这里，我们测试了肽I对来自VP的血清阻断IL-7诱导的NTpSTAT5的能力的影响。
滴定了来自各种HIV病毒血性患者(至少5个)的血浆在抑制IL-7诱导的NTpSTAT5中的效果。在实验中，我们首先使用以1％稀释的血浆，并且然后使用3％稀释的血浆，其给出30％至70％的最大抑制。在这些实验条件下，我们显示在15μM(IC50的3倍)下，肽I完全恢复了血清的活性(图1，C部分)。
因此肽I能够恢复病毒血性患者的血浆的抑制活性。值得注意的是，肽I在包含在患者血浆中时甚至比包含在无血清缓冲液中的重组纯酶更具活性。用重组酶获得的抑制达到对应于约80％的最大抑制的平台期(plateau)。相比之下，当使用血浆时，实现约100％的抑制(比较图1A部分的数据与图1的C部分的数据)。这指示肽I在血浆中具有高度活性，尽管许多蛋白质的浓度较高并且存在几种脂质部分，所述脂质部分可以干扰PLA2GIB并且隐藏高分子量的多分子复合物上构造后的催化位点的入口(access)，这因此妨碍了肽I的作用。
讨论
我们以前证明了PLA2GIB在CD4 T淋巴细胞水平上诱导各种缺陷，所述缺陷表征了来自病毒血性患者的CD4 T细胞。我们报道了无法响应IL-7，这解释了淋巴细胞减少。我们扩展了此观察结果，并证明了经PLA2GIB处理的CD4淋巴细胞不能响应IL-2或IL-4，从而解释了无反应性。
在这里，我们第一次描述了化合物，该化合物通过强烈抑制病毒血性HIV感染患者的血浆中发现的PLA2G1B的酶活性来完全恢复PLA2GIB的有害作用的化合物。重要的是，肽I能够中和来自所有测试的病毒血性患者的血清的致病活性。观察到的效果是全面的，清楚地指出了这种治疗方法的强大潜力。
参考文献
(1)Grossman Z,Meier-Schellersheim M,Sousa AE,Victorino RMM,Paul WE(2002)CD4+T-cell depletion in HIV infection:are we closer to understandingthe cause？Nat Med 8(4):319-323
(2)Catalfamo M,et al.(2008)HIV infection-associated immune activationoccurs by two distinct pathways that differentially affect CD4 and CD8 Tcells.PNAS 105(50):19851-19856.
(3)Armah KA,et al.(2012)HIV status,burden of comorbid disease andbiomarkers of inflammation,altered coagulation,and monocyte activation.ClinInfec Dis 55(1)126-36。
序列表
<110> 迪亚库雷特公司(DIACCURATE)
<120> 多肽刺激免疫系统的用途
<130> B2113PC
<160> 14
<170> PatentIn版本 3.3
<210> 1
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<400> 1
Phe Leu Ser Tyr Lys
1 5
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<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<400> 2
Phe Leu Ser Tyr Arg
1 5
<210> 3
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> X是 2-萘基丙氨酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> X是 2-萘基丙氨酸
<400> 3
Xaa Leu Ser Xaa Arg
1 5
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<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> X是2-萘基丙氨酸
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Xaa Leu Ser Tyr Arg
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<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> X 是2-萘基丙氨酸
<400> 5
Phe Leu Ser Xaa Arg
1 5
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
<400> 6
Gly Cys Gly Ser Tyr
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
<400> 7
Gly Cys Gly Ser Pro
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
<400> 8
Thr His Thr Tyr Ser
1 5
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
<400> 9
Lys Asp Tyr Tyr Arg
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
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Leu Glu Lys Tyr Leu
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
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Val Asp His Tyr Asp
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<212> PRT
<213> 人工的
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Thr Gln Ser Tyr Lys
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<212> PRT
<213> 人工的
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<223> 肽
<400> 13
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<211> 5
<212> PRT
<213> 人工的
<220>
<223> 肽
<400> 14
His Glu Thr Ala Trp
1 5

Claims (13)

1.通式(2-萘基Ala)-Leu-Ser-(2-萘基Ala)-Arg的环状肽或其盐在制备用于治疗受试者HIV感染导致的疾病的药物中的用途。
2.权利要求1的用途，用于制备用于治疗HIV感染受试者中的AIDS的药物。
3.权利要求2的用途，用于制备抑制或逆转HIV介导的免疫缺陷的药物。
4.权利要求3的用途，用于制备恢复HIV感染受试者中的CD4 T细胞功能的药物。
5.权利要求1或2的用途，其中将所述肽以0.01μg至100mg的剂量施用于所述受试者。
6.权利要求1或2的用途，其中将所述肽重复地施用于所述受试者。
7.权利要求1或2的用途，其中所述肽通过注射，或通过鼻，口腔，粘膜，或直肠施用。
8.权利要求1或2的用途，其中所述肽通过吸入来施用。
9.权利要求1或2的用途，其中将所述肽配制成包含药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。
10.权利要求1或2的用途，其中所述受试者是人受试者。
11.权利要求1或2的用途,其中所述(2-萘基Ala)-Leu-Ser-(2-萘基Ala)-Arg或其盐通过肌内、经皮、静脉内或动脉内注射施用。
12.权利要求1或2的用途,其中所述(2-萘基Ala)-Leu-Ser-(2-萘基Ala)-Arg或其盐通过皮下注射施用。
13.药物组合物，其包含
(i)通式(2-萘基Ala)-Leu-Ser-(2-萘基Ala)-Arg的环状肽或其盐，
和(ii)另外的抗病毒抗HIV剂，用于联合或分开施用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2022016225A1 (en) * 2020-07-22 2022-01-27 Filamon Pty Ltd Vimentin inhibitors

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999041278A1 (en) * 1998-02-13 1999-08-19 Garvan Institute Of Medical Research Cyclic peptide inhibitors of pla2
JP2006517193A (ja) * 2002-06-07 2006-07-20 キャラン・フランシス・スコット 前立腺ガン細胞の増殖の阻害方法
WO2015097140A1 (en) * 2013-12-23 2015-07-02 Institut Pasteur Therapeutic methods and compositions

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10894035B2 (en) 2015-08-31 2021-01-19 Diaccurate Use of indole compounds to stimulate the immune system
EP3530282A1 (en) 2018-02-27 2019-08-28 Diaccurate Therapeutic methods

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999041278A1 (en) * 1998-02-13 1999-08-19 Garvan Institute Of Medical Research Cyclic peptide inhibitors of pla2
JP2006517193A (ja) * 2002-06-07 2006-07-20 キャラン・フランシス・スコット 前立腺ガン細胞の増殖の阻害方法
WO2015097140A1 (en) * 2013-12-23 2015-07-02 Institut Pasteur Therapeutic methods and compositions

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A Novel Approach to the Design of Inhibitors of Human Secreted Phospholipase A2 Based on Native Peptide Inhibition;W. Bret Church et al.;《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》;20010626;第276卷(第35期);第33156–33164页 *
Crystal Structure of a Complex Formed between a Snake Venom Phospholipase A2 and a Potent Peptide Inhibitor Phe-Leu-Ser-Tyr-Lys at 1.8 Resolution;Vikas Chandra et al.;《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》;20020816;第277卷(第43期);第41079–41085页 *
SPECIFIC INHIBITION OF TYPE II PHOSPHOLIPASES A2 BY SYNTHETIC PEPTIDES DERIVED FROM THE PRIMARY SEQUENCE;Albert Tseng et al.;《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》;19960927;第271卷(第39期);第23992–23998页 *
人ⅡA型磷脂酶A2衍生多肽M17杀菌作用的研究;淳于柳爽 等;《中国实验方剂学杂志》;20131031;第19卷(第20期);第216-219页 *

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